Трехфункциональные блоксополимеры этиленоксида и пропиленоксида для доставки активных веществ в живые клетки

Трехфункциональные блоксополимеры этиленоксида и пропиленоксида для доставки активных веществ в живые клетки

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Изобретение относится к области химии высокомолекулярных соединений, а именно к трехфункциональным блоксополимерам этиленоксида и пропиленоксида и их производным. Трехфункциональные блоксополимеры этиленоксида и пропиленоксида заявлены в качестве носителей для доставки биологически активных веществ в живые клетки. Заявляемые носители на основе трехфункциональных блоксополимеров этиленоксида и пропиленоксида могут быть использованы для создания широкого спектра лекарственных средств, обладающих высокой биологической активностью и свойствами направленной доставки к органам, тканям и клеткам. Изобретение может применяться в области биологии, фармакологии, фармацевтики, медицины, сельского хозяйства и экологии.

Одной из главных задач фармакологии является доставка биологически активных веществ (далее по тексту - БАВ) через естественные биологические барьеры, к которым относятся кожные покровы, оболочки органов и мембраны клеток. Многие БАВ плохо проникают в клетки через липидные мембраны, например, вследствие их (БАВ) гидрофильности. Накоплению БАВ в клетках-мишенях до достижения терапевтической концентрации также препятствуют мембранные транспортные гликопротеины (далее по тексту - мембранные транспортеры), осуществляющие выброс БАВ из цитоплазмы [Varma, M.V.S. Р-glycoprotein inhibitors and their screening: a perspective from bioavailability enhancement [Текст] / M.V.S. Varma, Y.Ashokraj, C.S. Dey, R. Panchagnula // Pharmacological Research. - 2003. - V.48. - P.347-359]. Высоким содержанием мембранных транспортеров характеризуются, например, клетки различных опухолей, что является одним из ключевых механизмов развития устойчивости опухолевых клеток к химиотерапии.

Традиционным подходом к достижению терапевтической концентрации БАВ в клетках является увеличение дозы назначаемого активного вещества, что приводит к побочным эффектам. Рациональным подходом в решении этой проблемы является применение полимерных систем доставки БАВ, которые позволяют уменьшить эффективную концентрацию активного вещества для клеток-мишеней и, как следствие, уменьшить его (активного вещества) побочные эффекты на окружающие клетки организма.

Перспективными носителями БАВ являются неионогенные полимеры. Известно применение полиэтиленгликоля для улучшения фармакокинетики и снижения иммуногенности белковых веществ и пептидов, например, инсулина [United States Patent 4179337. Non-immunogenic polypeptides [Текст] / F.F. Davis, Т. Van Es, N.C. Palczuk. - Опубл. - 18.12.1979]. В молекуле полиэтиленгликоля отсутствует гидрофобный блок, необходимый для взаимодействия неионогенного полимера с липидными мембранами клеток, а также мембранными транспортерами, например, Р-гликопротеином, ингибирование которых позволяет преодолевать лекарственную устойчивость клеток (например, клеток опухолей, гематоэнцефалического барьера, печени и кишечника) [Schinkel, A.H. The physiological function of drug-transporting P-glycoproteins [Текст] / A.H. Schinkel. // Seminary in Cancer Biology. - 1997. - V.8. - P.161-170].

Известны амфифильные поверхностно-активные вещества, которые представляют собой блоксополимеры этиленоксида и пропиленоксида со следующей общей формулой, где x и y - количество мономерных единиц этиленоксида и пропиленоксида соответственно (1).

Торговое название блоксополимеров этиленоксида и пропиленоксида фирмы BASF - Плуроники ["BASF - Product information the chemicals catalog - Pluronics". BASF Corporation Website. - Retrieved 2008.12.09]. Благодаря наличию гидрофильного полиэтиленоксидного блока и гидрофобного полипропиленоксидного блока Плуроники обладают амфифильными свойствами, которые определяют различные биологические эффекты Плуроников.

По достигаемому техническому результату наиболее близким к заявленному изобретению прототипом является применение Плуроников в качестве переносчиков БАВ в клетки, описанное в патенте [Pat. RU 2166934. Композиции, включающие биологический агент [Текст] / СУПРАТЕК ФАРМА, ИНК, А. Кабанов - Опубл. - 20.05.2001, далее по тексту - Прототип]. Применение лекарственных композиций на основе Плуроников позволяет уменьшить терапевтическую дозу цитотоксических антибиотиков, ингибирующих рост устойчивых опухолевых клеток, а также патогенных микроорганизмов. Основной механизм увеличения внутриклеточной концентрации БАВ в присутствии Плуроников заключается в ингибировании Плурониками мембранных транспортеров, в частности, Р-гликопротеина [Kabanov, A.V. Polymer genomics: An insight into pharmacology and toxicology of nanomedicines [Текст] / A.V. Kabanov. // Adv. Drug Delivery Rev. - 2006. - V.58. - P.1597-1621]. Недостатками Прототипа являются:

- высокая цитотоксичность (по-видимому, вследствие неизбирательной диффузии в клетки живого организма);

- низкая эффективность внутриклеточной доставки БАВ.

Недостатки Прототипа обусловлены тем, что двухфункциональные Плуроники обладают низкой эффективностью внутриклеточного транспорта активных веществ вследствие низкого химического сродства Плуроников к мембранным транспортерам клеток, например, P-гликопротеинам.

В заявленном изобретении в качестве более безопасных и эффективных, по сравнению с Прототипом полимерных носителей БАВ, предложено использовать трехфункциональные блоксополимеры этиленоксида и пропиленоксида, производимые, например, ОАО «Нижнекамскнефтехим» под торговой маркой Лапролы (далее по тексту - Лапролы), а также их производные. Производные Лапролов (моноэфиры янтарной кислоты) представляют собой аддукты Лапролов с янтарным ангидридом. Ниже представлены структурные формулы трехфункционального Лапрола (формула А) и его производного (формула Б) (2), где x, y - число мономерных единиц этиленоксида и пропиленоксида.

В заявленном изобретении трехфункциональные Лапролы применяют в композиции с БАВ, например, с известными лекарственными средствами, что позволяет уменьшить цитотоксичность композиции полимерный носитель-БАВ за счет меньшей цитотоксичности Лапролов и их производных, а также за счет их более высокого химического сродства к мембранным транспортерам по сравнению с Прототипом. В результате, применение Лапролов и их производных позволяет усилить внутриклеточное накопление БАВ, понизить его (БАВ) эффективную концентрацию и, тем самым, уменьшить побочные эффекты композиции БАВ с полимерным носителем.

Таким образом, целью заявленного технического решения являются:

- уменьшение цитотоксичности композиций полимерных носителей с БАВ за счет использования трехфункциональных блоксополимеров этиленоксида и пропиленоксида;

- повышение эффективности доставки БАВ в клетки за счет более высокого химического сродства трехфункциональных блоксополимеров этиленоксида и пропиленоксида к мембранным транспортерам;

- повышение терапевтической эффективности лекарственных средств в композиции с трехфункциональными блоксополимерами этиленоксида и пропиленоксида.

Сущность заявленного технического решения заключается в том, что для повышения накопления БАВ в живых клетках применяют трехфункциональные блоксополимеры этиленоксида и пропиленоксида состава x=1÷10; y=1÷30 (где x, y - число мономерных единиц этиленоксида и пропиленоксида) или их аддукты с янтарным ангидридом. Трехфункциональные блоксополимеры этиленоксида и пропиленоксида или их аддукты с янтарным ангидридом могут быть использованы в составе лекарственных композиций с антрациклиновыми антибиотиками и/или субстратами мембранных Р-гликопротеинов.

Реализация заявленного технического решения приведена на примере коммерческих трехфункциональных блоксополимеров (получаемых путем последовательного синтеза сначала гидрофобного блока из пропиленоксида, а затем гидрофильного блока из этиленоксида): Лапрола 6003-2Б-18 (x=8, y=28; далее по тексту - Лапрол 6003), Лапрола 5003-2Б-10 (x=4, y=25; далее по тексту - Лапрол 5003), а также трехфункционального статистического сополимера (получаемого путем сополимеризации смесью этиленоксида и пропиленоксида) Лапрола 3603-2-12 (x=3, y=18; далее по тексту - Лапрол 3603) и производных Лапрола 6003 - аддуктов Лапрола с янтарным ангидридом. Заявляемое изобретение не ограничено приведенными торговыми марками Лапролов и может быть реализовано с применением других трехфункциональных блоксополимеров этиленоксида и пропиленоксида, в том числе аналогами Лапролов, например, аналогами, производимыми компаниями Dow Chemical Corporate (www.dow.com) и BASF Corporation (www.basf.com) под торговой маркой Воранол (Voranol).

Заявленное техническое решение поясняется следующими материалами:

На чертеже приведены данные по распределению внутриклеточной интенсивности флуоресценции родамина 123 после обработки клеток композициями родамина 123 с Лапролами и Прототипом.

В табл.1 представлены данные по влиянию Лапролов и Прототипа на жизнеспособность животных клеток.

В табл.2 представлены данные по влиянию композиций противоопухолевого антибиотика доксорубицина с Лапролами, Прототипом и верапамилом (стандартным конкурентным ингибитором Р-гликопротеина [Varma, M.V.S. Р-glycoprotein inhibitors and their screening: a perspective from bioavailability enhancement [Текст] / M.V.S. Varma, Y.Ashokraj, C.S.Dey, R.Panchagnula // Pharmacological Research. - 2003. - V.48. - P.347-359.]).

В примерах №1-4 приведены соответственно:

Пример 1. Методика получения аддукта Лапрола с янтарным ангидридом.

Пример 2. Данные по цитотоксичности Лапролов по сравнению с Прототипом.

Пример 3. Данные по цитотоксичности композиций противоопухолевого антибиотика доксорубицина с Лапролами по сравнению с Прототипом.

Пример 4. Данные по влиянию Лапролов и Прототипа на внутриклеточную доставку модельного БАВ - родамина 123 [Varma, M.V.S. P-glycoprotein inhibitors and their screening: a perspective from bioavailability enhancement [Текст] / M.V.S. Varma, Y. Ashokraj, C.S. Dey, R. Panchagnula // Pharmacological Research. - 2003. - V.48. - P.347-359].

Примеры выполнения заявленного технического решения

Пример 1. Методика получения аддукта Лапрола с янтарным ангидридом

К 20.0 г (3.3 ммоль) Лапрола 6003, растворенного в 62 мл толуола, добавляли 1.1 г (11 ммоль) янтарного ангидрида. Реакцию проводили в течение 2 ч при 90°C и далее - 2 ч при 100°C. Растворитель выпаривали на роторном испарителе, продукт растворяли в воде и добавляли карбонат натрия до значения pH>9. Далее добавляли разбавленную серную кислоту до pH<2 и экстрагировали бутанолом. Экстракт высушивали над безводным сульфатом натрия. Растворитель выпаривали на роторном испарителе, экстрагировали хлороформом, растворитель удаляли, остаток сушили в вакууме водоструйного насоса.

Выход 18.5 г (87.5%). Продукт - желтое маслообразное вещество. Наличие карбоксильной группы в аддукте Лапрола 6003 с янтарным ангидридом определяли известными методами кислотно-основного титрования (ГОСТ 25210-82) и ИК-Фурье спектроскопии в пленке. ИК-спектры регистрировали на спектрометре Bruker «Vector-22» в диапазоне 400-4000 см^-1 (разрешение 1 см^-1, число сканов 64). В спектре аддукта Лапрола 6003 с янтарным ангидридом имеется полоса поглощения в области 1570 см^-1, характерная для карбоксильной группы.

Пример 2. Данные по цитотоксичности Лапролов по сравнению с Прототипом

Проведено сравнительное исследование цитотоксичности Лапролов на примере Лапрола 6003, Лапрола 5003, Лапрола 3603 и аддукта Лапрола 6003 с янтарным ангидридом (далее по тексту - Лапрол 6003-С(О)ОН) в сопоставлении с Плуроником L61 по Прототипу [Pat. RU 2166934. Композиции, включающие биологический агент [Текст] / СУПРАТЕК ФАРМА, ИНК, А. Кабанов - Опубл. - 20.05.2001]. Выбор Плуроника L61 для сравнительного исследования обусловлен тем, что лекарственная композиция на основе Плуроника L61 находится на 2 стадии клинических испытаний [Valle, J.W. A phase 2 study of SP1049C, doxorubicin in P-glycoprotein-targeting pluronics, in patients with advanced adenocarcinoma of the esophagus and gastroesophageal junction [Текст] / J.W. Valle, A. Armstrong, C. Newman, V. Alakhov, G. Pietrzynski, J. Brewer, S. Campbell, P. Come, E.K. Rowinsky, M. Ranson // Investigational New Drugs. - 2011. - V.29, N. 5. - P.1029-1037].

Цитотоксичность Лапролов и Прототипа исследовали методом MTS-теста с помощью коммерческого набора «CellTiter 96 AQueous One Solution Cell Proliferation Assay» (Promega) [www.promega.com] на первичной культуре фибробластов кожи человека и опухолевых клетках линии А549. MTS-тест основан на колориметрическом определении количества жизнеспособных клеток, способных восстанавливать соль тетразолия (MTS) с образованием окрашенного продукта. Клетки культивировали в ячейках 96-ти луночного планшета в присутствии растворов Лапролов и Прототипа в фосфатно-солевом буфере при pH 7.4 (далее по тексту - ФСБ) в концентрации от 1 мкг/мл до 10 мг/мл в течение 72 ч в стандартных условиях (питательная среда DMEM, 10% эмбриональной сыворотки телят, +37°C, 5% CO₂). После культивирования к клеткам в планшете добавляли свежеприготовленный раствор MTS (0.05 мг/мл), который выдерживали с клетками 1.5 ч. Далее регистрировали оптическое поглощение растворов в лунках планшета с помощью микропланшетного фотометра StatFax 2100 (Awareness Technology) при λ=490 нм. Жизнеспособность клеток, пропорциональную оптическому поглощению раствора, выражали в процентах относительно контроля, принимаемого за 100%. Контролем служили клетки, к которым добавляли ФСБ в отсутствие Лапролов и Прототипа.

В таблице 1 приведены данные по значениям концентраций Лапролов и Прототипа, при которой наблюдается гибель 50% клеток (клетки А549 и фибробласты кожи). Результаты показывают, что все Лапролы обладают значительно меньшей цитотоксичностью по сравнению с Прототипом (Плуроником L61). Например, для клеток А549 и фибробластов Лапрол 6003 почти в 556 и 31 раз, соответственно, является менее токсичным по сравнению с Плуроником L61. Для фибробластов Лапрол 6003-С(0)ОН является в 64 раза менее токсичным по сравнению с Плуроником L61, а для клеток А549 Лапрол 6003-С(0)ОН не проявляет цитотоксичности вплоть до концентраций более 10 мг/мл. По мнению авторов, более низкая цитотоксичность Лапролов на фоне Прототипа обусловлена тем, что структурные аналоги глицерофосфатов мембран клеток -трехфункциональные Лапролы на основе глицерина - обладают более высокой совместимостью с компонентами клеток.

Пример 3. Данные по цитотоксичности композиций противоопухолевого антибиотика доксорубицина с Лапролами по сравнению с Прототипом

На примере Лапрола 6003, Лапрола 5003 и Лапрола 6003-C(O)OH исследована способность трехфункциональных блоксополимеров усиливать цитотоксичное действие противоопухолевого вещества доксорубицина, относящегося к группе антрациклиновых антибиотиков, в сопоставлении с Плуроником L61. Лекарственные композиции готовили путем смешивания Лапролов и Прототипа с доксорубицином гидрохлоридом (ЗАО «Брынцалов А») в ФСБ с pH=7.4 при комнатной температуре до конечных концентраций полимерных носителей и доксорубицина 200 и 100 мкМ соответственно. В качестве контроля использовали композицию 100 мкМ доксорубицина со 100 мкМ верапамилом гидрохлоридом (препарат «Изоптин», Эбботт ГмбХ и Ко. КГ, Германия) -конкурентным ингибитором мембранного транспортера Р-гликопротеина [Varma, M.V.S. P-glycoprotein inhibitors and their screening: a perspective from bioavailability enhancement [Текст] / M.V.S. Varma, Y. Ashokraj, C.S. Dey, R. Panchagnula // Pharmacological Research. - 2003. - V.48. - P.347-359].

Клетки А549 культивировали в стандартных условиях, как описано в примере 2. К клеткам А549 в культуральной среде DMEM добавляли аликвоту композиции (соотношение композиции и культуральной среды - 1:10 по объему) и инкубировали в течение 6 ч. Цитотоксичность доксорубицина в составе композиции оценивали с помощью MTS-теста, как описано в примере 2. В таблице 2 приведены данные по жизнеспособности клеток А549, обработанных композициями Лапролов с БАВ.

В условиях опыта (см. табл. 2) доксорубицин снижает жизнеспособность клеток А549 на 25.5%, а в присутствии верапамила - почти на 35%. Композиция Плуроника L61 с доксорубицином уменьшает жизнеспособность клеток почти на 54%. Композиции Лапрола 6003, Лапрола 5003 и Лапрола 6003-C(O)OH с доксорубицином вызывают уменьшение жизнеспособности клеток почти на 65, 68 и 63% соответственно, что достоверно превышает эффект композиции Прототипа с доксорубицином.

Анализ полученных данных позволяет сделать следующие выводы:

- Лапролы и аддукт Лапрола 6003 с янтарным ангидридом проявляют способность усиливать цитотоксичность доксорубицина в отношении опухолевых клеток, предположительно, вследствие ингибирования обратных транспортеров (P-гликопротеинов), осуществляющих выброс БАВ из цитоплазмы [Batrakova, E.V. Mechanism of sensitization of MDR cancer cells by Pluronic block copolymers: Selective energy depletion [Текст] / E.V.Batrakova, S.Li., W.F. Elmquist, D.W. Miller, V.Y. Alakhov, A.V. Kabanov // Br. J. Cancer. - 2001. - V.85. - P.1987-1997.].

- Лапролы и аддукт Лапрола с янтарным ангидридом в большей степени усиливают цитотоксическое действие доксорубицина, чем Плуроник L61, предположительно вследствие большей ингибирующей активности по отношению к мембранным транспортерам.

Таким образом, меньшая цитотоксичность Лапролов и аддукта Лапрола 6003 с янтарным ангидридом (Табл. 1), наряду с их большей способностью усиливать действие противоопухолевого антибиотика доксорубицина по сравнению с Прототипом (Табл. 2), убедительно демонстрирует возможность достижения заявленных технических результатов при использовании композиций БАВ с трехфункциональными полимерными носителями.

Пример 4. Влияние Лапролов и Прототипа на внутриклеточную доставку родамина 123

Методом проточной цитометрии проведен количественный анализ накопления в клетках флуоресцентного красителя родамина 123 - модельного субстрата мембранного транспортера P-гликопротеина [Varma, M.V.S. Р-glycoprotein inhibitors and their screening: a perspective from bioavailability enhancement [Текст] / M.V.S. Varma, Y. Ashokraj, C.S. Dey, R. Panchagnula // Pharmacological Research. - 2003. - V.48. - P.347-359] в присутствии Лапролов и Плуроника L61.

Суспензию опухолевых клеток А549, характеризующихся повышенным содержанием мембранных P-гликопротеинов, в концентрации 1×10⁶ клеток/мл инкубировали в присутствии композиции Лапролов и Прототипа (200 мкг/мл) с родамином 123 (2.5 мкМ). После инкубации клетки осаждали центрифугированием, суспендировали в ФСБ и регистрировали флуоресценцию родамина 123 в клетках на анализаторе BD FACSCalibur (BD Biosciences). Результаты исследования приведены на фиг.

Результаты показывают, что в присутствии Лапрола 6003 и Лапрола 6003-C(O)OH наблюдается более высокая флуоресценция клеток и, следовательно, имеет место более высокое внутриклеточное накопление родамина 123 по сравнению с Прототипом. Это подтверждает, что трехфункциональные полимерные носители обладают большей ингибирующей активностью в отношении мембранных транспортеров, чем двухфункциональные Прототипы. По мнению авторов, это обусловлено тем, что Лапролы и их аддукты с янтарным ангидридом обладают более высокой аффинностью к мембранным гликопротеинам.

Приведенные поясняющие материалы доказывают достижение заявленного технического решения, выражающегося в преодолении недостатков прототипа, а именно его высокой цитотоксичности и низкой эффективности ингибирования обратных транспортеров БАВ. Приведенные поясняющие материалы доказывают, что трехфункциональные полимерные носители являются менее цитотоксичными и, одновременно, более эффективными системами внутриклеточной доставки БАВ, чем используемые в Прототипе двухфункциональные полимерные носители.

Заявленное техническое решение позволяет достигнуть следующие технические результаты:

- снижение цитотоксичности полимерных носителей БАВ за счет применения более безопасных, в сравнении с прототипом, трехфункциональных блоксополимеров этиленоксида и пропиленоксида;

- повышение эффективности внутриклеточного транспорта БАВ за счет более эффективного ингибирования мембранных транспортеров трехфункциональными блоксополимерами этиленоксида и пропиленоксида;

- увеличение токсичности противоопухолевых антибиотиков, например, доксорубицина, в отношении резистентных опухолевых клеток, реализуемое за счет более эффективного ингибирования мембранных транспортеров.

Заявленные трехфункциональные блоксополимеры этиленоксида и пропиленоксида могут быть использованы для внутриклеточной доставки широкого спектра БАВ - субстратов мембранных транспортеров, к которым относятся многие органические вещества, обладающие противоопухолевой, нейротропной и другими видами активностей, а также флуоресцентные красители [Varma, M.V.S. P-glycoprotein inhibitors and their screening: a perspective from bioavailability enhancement [Текст] / M.V.S. Varma, Y. Ashokraj, C.S. Dey, R. Panchagnula // Pharmacological Research. - 2003. - V.48. - P.347-359; Cordon-Cardo, C. Expression of the Multidrug Resistance Gene Product (P-.Glycoprotein) in Human Normal and Tumor Tissues [Текст] / С. Cordon-Cardo, J.P. O'brien, J. Boccia, D. Casala, J.R. Bertino, M.R. Melamed // The Journal of Histochemistry and Cytochemistry. - 1990. - V.38. - P.1277-1287; Schinkel, A.H. P-Glycoprotein, a gatekeeper in the blood-brain barrier [Текст] / A.H. Schinkel. // Advanced drug delivery reviews. - 1999. - V.36. - P.179-194.; Weinstein, R.S. Relationship of the Expression of the Multidrug Resistance Gene Product (P-Glycoprotein) in Human Colon Carcinoma to Local Tumor Aggressiveness and Lymph Node Metastasis [Текст] / R.S. Weinstein, S.M. Jakate, J.M. Dominguez, et al. // Cancer Res. - 1991. - V.51. - P.2720-2726].

Заявленное техническое решение соответствует критерию «новизна», предъявляемому к изобретениям, т.к. из исследованного уровня техники не выявлены технические решения, характеризующиеся указанными признаками, приводящими к реализации заявленных технических результатов заявленного технического решения.

Заявленное техническое решение соответствует критерию «изобретательский уровень», предъявляемому к изобретениям, т.к. не является очевидным для специалистов в данной области техники, вследствие того, что заявленное техническое решение обеспечивает реализацию объективно существующих на практике противоречий, не разрешимых посредством обычного проектирования, а именно, из исследованного уровня техники не известно использование трехфункциональных блоксополимеров этиленоксида и пропиленоксида или их аддуктов с янтарным ангидридом для создания носителей, повышающих накопление биологически активных веществ в живых клетках.

Промышленная применимость заявленного технического результата достигается за счет применения в качестве носителей БАВ трехфункциональных блоксополимеров этиленоксида и пропиленоксида (Лапролов) - продуктов крупнотоннажного производства ОАО «Нижнекамскнефтехим» (г.Нижнекамкск, www.nknh.ru/). Предложенная методика получения аддуктов Лапролов с янтарным ангидридом применима в промышленном масштабе.

Таблица 1
Трехфункциональные блоксополимеры этиленоксида и пропиленоксида для доставки активных веществ в живые клетки (Концентрации Лапролов и Плуроника L61 в мкг/мл, вызывающие гибель 50% клеток)
Блоксополимер	Клетки А549	Фибробласты кожи человека
Плуроник L61	11.9	38.8
Лапрол 6003	6620	1192
Лапрол 5003	3400	760
Лапрол 3603	1690	410
Лапрол 6003-C(O)OH	Не выявлена	2498

Таблица 2
Трехфункциональные блоксополимеры этиленоксида и пропиленоксида для доставки активных веществ в живые клетки (Данные по жизнеспособности клеток А549 после обработки композициями, содержащими 100 мкМ доксорубицина, 200 мкМ полимерного носителя и 100 мкМ верапамила)
Композиция	Жизнеспособность, % от контроля
Доксорубицин	75.5±1.2
Доксорубицин + Верапамил	64.8±7.8
Доксорубицин + Плуроник L61	45.8±2.2
Доксорубицин + Лапрол 6003	34.7±7.6
Доксорубицин + Лапрол 5003	32.0±4.6
Доксорубицин + Лапрол 6003-C(O)OH	37.5±11.7

1. Полимерный носитель для повышения накопления биологически активных веществ в живых клетках, отличающийся тем, что он представляет собой соединение формулы А или Б с числом мономерных единиц этиленоксида х=1÷10 и пропиленоксида у=1÷30.

2. Лекарственная композиция, включающая антрациклиновый антибиотик и полимерный носитель по п.1.

3. Лекарственная композиция, включающая субстрат мембранных Р-гликопротеинов и полимерный носитель по п.1.