Составы, содержащие триазиноны и железо

Составы, содержащие триазиноны и железо

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Изобретение касается составов, содержащих триазиноны и соединения железа (соли и комплексные соединения железа), пригодных для борьбы одновременно с кокцидиозами и железодифицитными состояниями у животных.

Экономически успешные предприятия мясного скотоводства в настоящее время отличаются высокоинтенсивными способами работы, т.е. содержанием большого количества животных, отобранных специально для оптимального разведения с конкретными целями. Отличительные признаки - это, например, обширное применение техники, введение кормовых добавок в питание животных и по возможности минимальные затраты на персонал. В случае разведения поросят это означает, что большое количество свиноматок, прошедших селекцию на большое количество поросят в помете, содержат в загонах, имеющих соответствующие большие размеры. Оптимизация корма и соответствующая селекция при разведении обеспечивают быстрый рост поросят.

Такой способ содержания животных часто обусловливает повышенную частоту проявлений определенных заболеваний и недомоганий животных. Помимо стресса, которому при интенсивном разведении особенно подвержены свиньи, к таким состояниям у молодых свиней относят в т.ч. инфекции простейших (кокцидиозы) и состояния, обусловленные дефицитом железа, которые часто приходится подавлять, применяя медикаменты уже в профилактических целях.

Кокцидиозы у животных - это часто встречающиеся паразитарные инфекционные заболевания. Так, простейшие родов Eimeria, Isospora, Neospora, Sarkosporidia и Toxoplasma вызывают кокцидиозы, распространенные по всему миру. Экономическое значение имеет, например, заражение свиней кокцидиями рода Isospora или крупного рогатого скота - кокцидиями рода Eimeria. Лишь в последние годы было обнаружено, что заражение Isospora suis является причиной поноса у поросят, и [возбудитель] подвергли интенсивным исследованиям. Как правило, инфекция попадает в организм поросенка из окружающей среды или передается от поросенка к поросенку через ооцисты, в которых находятся по две спороцисты, имеющие по два спорозоита на каждую. Размножение паразитарных стадий происходит в эпителиальных клетках ворсинок тонкого кишечника. К клиническим проявлениям заболевания относится воспалительно-некротическое разрушение эпителиальных клеток кишечника с атрофией ворсин и обусловленные этим нарушения пищеварения и всасывания. Признак острого заболевания - это водянистый понос цветом от беловатого до желтого, проявляющийся преимущественно на 2-3 неделе жизни. Зараженные поросята хуже набирают вес. Удовлетворительных решений по лечению этого заболевания на настоящий момент нет. Антибиотики неэффективны, и для лечения кокцидиозов одобрено применение сульфонамидов. Действие этих последних, однако, сомнительно, а многократное их введение в любом случае неприемлемо в практике. Относительно других возможностей лечения имеются противоречивые сведения: например, введение моненсина, ампролиума или фуразолидона инфицированным в эксперименте поросятам не препятствовало развитию заболевания. Новейшие исследования показали, что, несмотря на хорошие гигиенические условия, в отдельных сельскохозяйственных предприятиях доля пометов, в которых обнаруживают Isospora suis, достигает 92%. Распространение этого заболевания не ограничивается свиньями, оно проявляется и у многих других видов животных, например, в птицеводстве, у телят, ягнят или у мелких животных (кроликов).

Пример дефицитарного состояния - это дефицит железа у новорожденных поросят. Ввиду быстрого роста в первые дни после рождения собственные запасы железа в организме быстро истощаются, что следует возмещать из внешних источников. Большое количество молочных поросят не позволяет в достаточной мере обеспечить это возмещение потреблением молока свиноматки. Если при этом животных содержат на бетонных или пластиковых полах, поросята также не могут принимать соединения железа, роясь в почве. У поросят развивается анемия. Клинически значимая анемия имеет место, если содержание гемоглобина в крови падает ниже 80 г/л. В рекомендациях Национального научно-исследовательского совета (NRC) в качестве минимальной концентрации гемоглобина, при которой поросята вырастают здоровыми и не демонстрируют признаков анемии, приведена величина 90 г/л (National Research Council, Nutrient Requirements of Domestic Animals, No. 2, Nutrient Requirements of Swine, National Academy of Sciences, Washington DC, 1973). Такие заметные симптомы, как потеря веса или недостаточный рост проявляются, однако, большей частью лишь тогда, когда содержание гемоглобина в крови падает до величин ниже 80 г/л. Прочие критерии снабжения железом - это показатель гематокрита и количество красных кровяных телец на единицу объема. Тяжелая железодефицитная анемия также ведет к гибели молодняка свиней.

Для борьбы с указанными заболеваниями и дефицитарными состояниями уже имеются лекарства.

Кокцидиоз можно успешно лечить введением действующих веществ из группы триазинонов. Среди них различают триазиндионы - их представителями являются, например, действующие вещества клазурил, диклазурил, летразурил - и триазинтрионы. Последние - это действующие вещества толтразурил, толтразурил-сульфоксид и поназурил. Триазины, в особенности, толтразурил, понзазурил или диклазурил, а также их действие на кокцидий известны из ряда публикаций - см. в т.ч. германские публикации DE-OS 2718799 и DE-OS 2413722. Из международной заявки WO 99/62519 известны полутвердые (пастообразные) водные составы толтразурил-сульфона (поназурила). Также известно, что, в частности, толтразурил применим для лечения кокцидиоза (например, Isospora suis) у свиней. В качестве примера можно указать на следующие публикации: Don't forget coccidiosis, update on Isosporosis in piglets. Part I, Pig Progress volume 17, No2, 12-14; Mundt, H.-C., A.Daugschies, V.Letkova (2001): be aware of piglet coccidiosis diagnostics. Part II, Pig Progress volume 17, No 4, 18-20; Mundt, H.-C., G.-PI Martineau, K. Larsen (2001): control of coccidiosis Part III, Pig Progress volume 17, No 6, 18-19.

Кокцидиозы, вызываемые у крупного рогатого скота различными патогенными Eimeria spp.(например, Е. bovis и Е. zurnii), проявляются в виде поноса различной степени тяжести, вплоть до кровавого поноса со случаями падежа. В международной заявке WO 96/38140, патентах Германии DE 10049468, DE 19958388, международных заявках WO 00/19964, WO 99/62519 или WO 00/37063, а также в патенте Германии DE 102006038292.7 описаны средства для лечения кокцидиоза у животных. Помимо прочих способов применения, там также в общей форме упомянуто пероральное введение. Патент Германии DE 19603984 включает в себя грануляты для перорального введения. В патенте Германии DE 19824483 описаны полутвердые водные составы (пасты) для лечения животных. Европейский патент ЕР 0116175 описывает растворы для введения внутрь.

В области птицеводства часто применяют растворимые в питьевой воде препараты или растворы для питья, в то время как на больших фермах действующие вещества чаще добавляют в корм или вводят перорально с помощью дозатора (Drench). Для рынка здесь значимы, например диклазурил (2,6-дихлоро-а-(4-хлорофенил)-4-(4,5-дигидро-3,5-диоксо-1,2,4-триазин-2(3Н)-ил)бензенацетонитрил; № по CAS 101831-37-2) (CLINACOX™ 0,5%, Janssen Animal Health; VECOXAN™, Biokema SA) для подмешивания к корму и толтразурил (1-метил-3-[3-метил-4-[4-[(трифторметил)тио]фенокси]фенил]-1,3,5-триазин-2,4,6(1Н,3Н,5Н)-трион; № по CAS 69004-03-1). Например, толтразурил представлен на рынке в виде составов питьевой воды для птиц и в виде составов суспензии для перорального введения, в т.ч., для лечения поросят. Рекомендуется вводить поросенку на третий-пятый день жизни дозу 20 мг/кг массы тела.

Недостатком являются относительно высокие трудозатраты при пероральном введении этих антикокцидиальных препаратов (иногда также не вполне точно именуемых кокцидиостатиками): поросят для этого приходится отлавливать, они получают продукт с помощью аппликатора или дозирующего пистолета в зев. Кроме того, этот способ вызывает у поросят заметный стресс.

Для профилактики железодефицитной анемии имеется ряд весьма различных препаратов железа, которые различаются как по типу соединений, так и по способу введения и по биодоступности. Различают: (I) простые неорганические соли Fe(2+), (IIa) комплексные соединения Fe(2+) с органическими лигандами, например, с молочной кислотой, либо же (IIb) комплексные соединения Fe(3+), например, с лимонной кислотой, и (III) имеющие полимерный характер комплексные соединения Fe(3+)-оксо-гидроксо-комплекса β-FeO(OH) типа акаганеита с углеводами и полисахаридами, в особенности, с олигомерными или полимерными углеводными соединениями, как, например, с декстраном или декстрином и полимальтозой. Ниже под полимерными углеводами (углеводными соединениями) и полисахаридами подразумевают как олигомерные, так и полимерные соединения.

Обычны и давно известны препараты для перорального введения типа (I), как, например, применение солей железа в качестве кормовых добавок. В этих соединениях железо представлено в форме ионов железа (2+), например, в виде сульфата железа FeSO₄. Эти продукты можно как добавлять в корм свиноматки, так и непосредственно вводить поросятам перорально. Поросятам в период роста в первые дни жизни, как правило, вводят несколько отдельных доз, чтобы компенсировать относительно низкую биодоступность. Альтернативный путь, направленный на избежание многократного введения, состоит в более поздней даче кормовой добавки, содержащей железо (кормов "престартера" и "стартера"). В то время как высвобождение ионов железа из солей железа (2+) путем диссоциации происходит быстро, из комплексных соединений железа (2+) это высвобождение несколько замедленно. Всасывание свободных ионов Fe(2+) из солей железа происходит в верхнем отделе тонкой кишки. В физиологических условиях верхнего отдела тонкой кишки растворимость Fe(2+) на много порядков выше, чем таковая ионов Fe(3+) (Forth, W., в: Dünndarm, Handbuch der inneren Medizin, Bd. 3 Verd.Org. Teil 3(A); W.F. Caspary, Hrsg.; Springer 1983). Кроме того, в среде содержимого кишки происходит восстановление ионов железа (3+) цистеином, глутатионом, аскорбиновой кислотой и другими веществами до Fe(2+), и уже в таком виде их всасывают эпителиальные клетки слизистой оболочки кишки. Однако вопрос, является ли это восстановление необходимой предпосылкой для поглощения клетками слизистой, остается спорным. Возможно, что причиной более высокой биодоступности Fe(2+) является градиент концентрации, обусловленный его большей растворимостью. По нынешним представлениям, сначала происходит связывание ионов Fe(2+) белком мобилферрином, на котором они снова окисляются до Fe(3+) и связываются с ферритином - белком слизистой оболочки, обеспечивающим их хранение.

Когда организм испытывает потребность в железе, эти ионы Fe(3+) выходят в плазму крови, где ферриоксидаза в свою очередь восстанавливает их до Fe(2+), и где происходит связывание их с белком апотрансферрином, транспортным белком организма, связывающим железо. Предметом споров является, находятся ли трансферрины уже в самих клетках слизистой оболочки, и связываются ли там с железом, по меньшей мере, частично. С учетом значения log К ок. 30-31 константа комплексообразования трансферрина так высока, что наличие свободного железа в организме невозможно, пока не будет превзойдена способность трансферрина связывать железо. В этом причина токсических эффектов, которые могут развиться при внезапном избытке солей железа, что представляет собой неблагоприятный аспект их применения. Затем железо с кровью и по лимфатическим сосудам поступает в места синтеза гемоглобина в костном мозге (ср. E. Kolb, U.Hofmann „Anwendungen von Eisenverbindungen beim Schwein" Tierärtzl. Umschau 60, (2005) 365-371 и Forth, W. „Eisen und Eisenversorgung des Warmblüterorganismus", Naturwissenschaften 74, (1987) 175-180 а также John, A.; „Neue Möglichkeiten der Eisenversorgung neugeborener Ferkel unter Beachtung biochemischer Aspekte" в: Trächtigkeit und Geburt beim Schwein, 8.Bemburger Biotechnik-Workshop 2002, 89-94). Железо, необходимость в котором отсутствует, хранится в клетках слизистой оболочки, но после их отмирания оно более недоступно. Таким образом, понятно, что биодоступность соединений железа для перорального приема сильно зависит от прочих факторов, как то: реальной потребности в железе, ситуации с кормлением (молозиво) и состояния здоровья (при диарее имеет место преждевременная утрата клеток верхнего слоя слизистой оболочки). Понимание этого механизма важно для оценки преимуществ и недостатков определенных препаратов железа.

Кроме того, применяют соединения из второй группы (II) хелатных комплексных соединений Fe(2+) и Fe(3+). Они образуют относительно стабильные комплексные соединения железа, которые лишь частично распадаются на ионы под воздействием желудочного сока. В дальнейшем их биодоступность определяется тем, что происходит частичный обмен лигандов железа на клетках слизистой оболочки или внутри этих клеток, что зависит от констант связывания комплексов. Не разрушенные мембранные комплексы способны, ввиду своей высокой липофильности, проникать через системы мембран эпителия и должны подвергаться метаболизму. Это объясняет, почему биодоступность низкомолекулярных органических комплексов отличается задержкой, но зато они демонстрируют более продолжительное действие (Н.Dietzfelbinger; „Bioavailabitity of Bi- and Trivalent Oral Iron Preparations"; Arzneim.-Forsch. / Drug. Res 37(1), Nr. 1a, (1987) 107-112 и E.B. Kegley et al., „Iron Methionin as a Source of Iron for the Neonatal Pig", Nutrition Research 22 (2002) 1209-1217).

Третья группа соединений, которые применяют в основном парентерально, а перорально - лишь в незначительной мере, состоит из весьма устойчивых соединений типа поли-β-FeO(ОН), соединенных комплексной связью с полимерными углеводами. Коммерческое значение здесь приобрели в основном, но не исключительно, железо (III)-декстран (№ по CAS 9004-66-4), железа (III)-гидроксид-полимальтоза (железа (III)-гидроксид-декстрин; № по CAS 53858-86-9) железа (III)-сахароза ("сахар"-железо-(III), № по CAS 8047-67-4) и комплекс натрия и железа (III)-глюконата в растворе сахарозы (№ по CAS 34089-81-1). В литературе эти соединения называют по-разному. Под такими соединениями, как железа (III)-декстран, железа (III)-полимальтоза, железа (III)-декстрин, железа (III)-сахароза, железа (III)-глюконат, железа (III)-сахар в настоящем тексте подразумевают комплексы иона железа (3+) с гидроксид-ионами, (ОН^-), группами воды (Н₂О) и кислородом (О), имеющие форму олигомера или полимера и ассоциированные в координационной сфере комплексным образом с одним или несколькими из указанных олигомерных и полимерных углеводных соединений. По этой причине эти соединения также называют железа (III)-гидроксид-полисахаридами или железа (III)-окси-гидрокси-полисахаридами, причем "полисахарид" означает вышеуказанные олигомерные или полимерные углеводные соединения или их производные, либо же, вообще, соединения из группы олигомерных или полимерных углеводов. Подобные многоядерные комплексы железа (III) описаны, например, в следующих публикациях: (D.S. Kudasheva et al. „Structure of Carbohydrate-bound Polynuclear Oxyhydroxide Nanoparticles in Parenteral Formulation", J. Inorg. Biochem. 98 (2004) 1757-1769; I. Erni et al „Chemical Characterization of Iron(III)-Hydroxide-Dextrin Complexes" Arzneim.-Forsch. /Drug Res. 34 (II) (1984) 1555-1559; F. Funk et al. „Physical and Chemical Characterization of Therapeutic Iron Containing Materials", Hyperfine Interactions 136 (2001) 73-95; E.London "The Molecular Formula and Proposed Structure of the Iron-Dextran Complex, IMFERON", J. Pharm. Sci. 93 (2004) 1838-1846; A.John „Neue Möglichkeiten der Eisenversorgung neugeborener Ferkel unter Beachtung biochemischer Aspekte", Trächtigkeit und Geburt beim Schwein: 8.Bernburger Biotechnik-Workshop, Bernburg (2002) 89-94.). Поскольку состав этих соединений во многих случаях не описан количественно, а также может варьировать в пределах соединения в зависимости от вида синтеза, под этими многоядерными соединениями типа "железо (III)-полисахарид" следует понимать все известные специалисту комплексы описанного класса соединений.

Эти соединения железа применяют почти исключительно при изготовлении медицинских и ветеринарных препаратов для инъекций. В ветеринарии, однако, применяют также некоторое количество препаратов для перорального приема. В общем случае эти комплексы отличаются высокой стабильностью и различаются в основном молярной массой, которая может варьироваться от 30 кДа вплоть до 400 кДа, а также прочностью комплексной связи. В водном растворе они имеют вид коллоидной дисперсии с размером частиц 7-35 нм. В случае перорального применения решающее значение для биодоступности имеет, во-первых, уровень преципитации и гидролиза железного ядра под воздействием желудочного сока, а во-вторых, стабильность комплекса в условиях кислого восстанавливающего окружения. Механизмы поступления в организм и преобразования в биологические соединения железа до конца пока не ясны, и дискуссия в литературе отчасти продолжается. Однако, можно сделать ряд общих утверждений о механизме их действия. Чем стабильнее комплекс, тем выше доля соединения, без изменений проходящая через желудок, и тем ниже доля свободных ионов железа. В свою очередь, стабильность комплексов зависит от способа их синтеза. Высокомолекулярные железо (III)-полимальтоза и железо (III)-декстран оказались весьма стабильны. Это входит в противоречие с необходимостью отдавать железо транспортным белкам. Естественно, что уровень такой передачи тем ниже, чем более стабильны комплексы. Эта взаимосвязь доказана различными экспериментами с кислотами, восстанавливающими агентами и комплексообразователями. (R Lawrence „Development and Comparison of Iron Dextran Products"; PDA J Pharm. Sci. Techn. 52(5) (1998) 190-197; F. Funk et at „Physical and Chemical Characterization of Therapeutic Iron Containing Materials"; Hyperfine Interactions 136 (2001) 73-95; I.Erni et al "Chemical Characterization of lron(III)-Hydroxide-Dextrin Complexes" Arzneim.-Forsch. /Drug Res. 34(II) 11 (1984) 1555-1559).

Эти соображения привели к формированию мнения, что соединения железа Fe(3+) вообще, а в особенности - многоядерные соединения, как то: железо (III)-декстран, пригодны только для перорального применения (H.Dietzfelbinger „Bioavailability of Bi- and Trivalent Oral Iron Preparations" Arzneim.-Forsch. / Drug Res. 37(1), Nr 1(a) (1987) 107-112.).

Еще одна причина скептического отношения к пероральному приему многоядерных комплексов Fe(3+), в особенности железо (III)-декстрана, - это особый путь поглощения комплексов β-FeO(OH) в желудочно-кишечном тракте. Эти соединения поступают в эпителиальные клетки слизистой оболочки кишки путем пиноцитоза, дальнейшее их продвижение в организм идет по лимфатическим путям, затем они накапливаются в лимфатических узлах, а дальнейший транспорт идет по кровеносному руслу (ср. также уже упомянутые статьи Kolb, Hofmann; Forth; John). Поскольку, как показано, они весьма стабильны, дальнейшая биодоступность зависит от метаболизма и от расщепления комплексов лизосомальными ферментами. Из опытов с поливинилпирролидоном, декстраном и несущим цветную метку железо (III)-декстраном, в каждом случае с различной молекулярной массой, известно, что поглощение этих полимерных комплексов в первые дни жизни у молочных поросят может происходить посредством пиноцитоза эпителиальных клеток двенадцатиперстной кишки и верхних отделов тонкой кишки (R.M. Clarke, R.N.Hardy „Histological Changes in the Small Intestine of the Young Pig and Their Relation to Macromolecular Uptake"; J. Anat. 108(1), (1971) 63-7; K.Thoren-Tolling, L.Jonsson „Cellular Distribution of Orally and Intramuscularly Administered Iron Dextran in Newborn Piglets", Can. J. Comp. Med. 41 (1977) 318-325; К.Marfinsson, L.Jonsson „On the Mechanism of Intestinal Absorption of Macromolecules in Piglets Studied with Dextran Blue", Zbl. Vet. Med. A 22 (1975) 276-282). Однако также известно, что такой беспрепятственный переход высокомолекулярных соединений из клеток слизистой оболочки в лимфатическое и кровеносное русла поросят возможен только непосредственно после рождения. Этот механизм гарантирует возможность снабжения поросят иммуноглобулинами и антителами посредством всасывания молозива свиноматки непосредственно после рождения. Когда это снабжение обеспечено, действие указанного транспортного механизма прекращается. Смысл такой блокады слизистой оболочки („Intestinal Closure") в процессе дальнейшего роста состоит в том, чтобы создать барьер для бактериальных инфекций и ядов (К.Martinsson, L.Jonsson „The Uptake of Macromotecules in the lleum of Piglets after Intestinal Closure", Zbl. Vet. Med. A 23 (1976) 277-282). Поэтому временной промежуток от рождения до блокады слизистой оболочки сильно зависит от упитанности поросенка. Если поросята голодны, этот трансфер может продолжаться вплоть до четырех дней после рождения (J.G. Lecce, D.O.Morgan „Effect of Dietary Regimen on Cessation of Intestinal Absorption of Large Molecules (Closure) in the Neonatal Pig and Lamb", J.Nutrition 78 (1962) 263-268). Поскольку общие условия содержания на свиноводческих предприятиях, естественно, позволяют поросятам сосать, в настоящее время с медицинской точки общепризнанно и общеизвестно, что, если желательно избежать многократного введения, то полноценное снабжение поросят высокомолекулярными комплексами железа пероральным путем имеет смысл лишь в первые часы после рождения. Те немногие авторы, которые проводили систематические исследования эффективности железо (III)-декстранов в зависимости от времени перорального введения, сообщают о существенном снижении эффективности, при введении железо (III)-декстранов через 24-72 ч после рождения (L.Blomgren, N.Lanneck „Prevention of Anaemia in Piglets by a Single Oral Dose of Iron Dextran", Nord. Vet. - Med. 23 (1971) 529-536). При определенных условиях содержания и кормления, однако, введение на второй день жизни еще может дать удовлетворительные результаты (S.Kadis, „Relationship of Iron Administration to Susceptibility of Newborn Pigs to Enterotoxic Colibacillosis"; Am. J. Vet. Res. 45(2), (1984) 255-259). Напротив, при введении декстран-железного комплекса через 72-96 часов после рождения эффективность уже оказывается резко снижена (Ueda Н. „Prevention of Piglet Anemia by Oral Administration of Iron Dextran", Nicchiku Kaiho 56(11), 1985, 872-877). Поэтому на рынке утвердились лишь немногие заместительные препараты железа перорального введения с многоядерными комплексами железа (Ursoferran 150 р.о.; фирма Serumwerke Bernburg - железо(III)-декстран; Ferrum Hausmann Syrup® Hausmann Laboratories Inc., Санкт-Галлен; - железо(III)-гидроксид-полимальтоза. В современных железо-декстрановых препаратах, предназначенных для перорального введения находящимся на откорме поросятам, железо-декстрановый комплекс связан с эмульгаторами с образованием капель микроэмульсии размером 1-2 мкм, что улучшает биодоступность (Bioveyxin FeVit™, фирма Veyx-Pharma GmbH, Шварценборн; SintaFer™, Fa. Sinta GmbH, Шварценборн). Это тонкодисперсное состояние и связывание с лиофильным носителем должны способствовать поглощению препарата эпителиальными клетками и его переносу в организм. Однако, даже для этих препаратов изготовитель, в целях оптимизации эффективности, рекомендует применение в период максимум 8-10 часов после рождения. Это, в свою очередь, требует постоянного наблюдения за свиноматками, что означает существенную потребность в персонале.

В общем случае для обеспечения достаточного эффекта препараты железа перорального введения рекомендуется вводить в дозировке 100-200 мг активного железа на одного поросенка и на единицу дозирования: На практике, однако, лишь более высокая дозировка дает возможность обойтись однократным введением.

Во избежание описанной неопределенности при пероральном введении в свиноводстве более распространено введение многоядерных комплексов железа (III) путем внутримышечной инъекции. Обычно это делают, вводя на третий день после рождения инъекционным путем 100-200 мг активного железа. От места инъекции транспортировка происходит по лимфатической системе и посредством клеток ретикулогистиоцитарной системы. Депонирование комплексов происходит в печени и селезенке, а по потребности они высвобождаются, и идет их ферментативная метаболизация. В конце концов, свободный Fe(3+) снова связывается с трансферрином и поступает к местам использования в костном мозге.

Но и эта парентеральная форма введения обладает рядом недостатков. К существенным недостаткам в/м (внутримышечного) введения молодняку свиней относится тот факт, что чаще проявляются неблагоприятные эффекты. В местах введения часто случаются мышечные кровотечения, изменения в мышечных волокнах, воспаления и отеки. Это местные повреждения. Наблюдают, однако, также и нарушения в работе сердечной мышцы, в особенности, при одновременно имеющемся недостатке витамина Е. В этих случаях в плазме крови можно обнаружить сильное повышение содержания калия, что весьма вредит сердечной мышце и может привести к гибели поросят. По нынешним представлениям, малейшие количества свободных ионов Fe(2+) вызывают формирование радикальных соединений с органическими молекулами, например, перекисное окисление липидов, что сочетается с высоким содержанием калия в крови. Витамин Е играет роль уловителя радикалов и может в определенной степени амортизировать эти неблагоприятные реакции, но при этом, однако, собственные запасы его в организме часто оказываются истощены (По этой причине к уже упомянутым препаратам для перорального введения, в которых железо (III)-декстран связан с капельками микроэмульсии, добавляют еще и витамин Е). Внутримышечное введение обладает, однако, недостатком еще с одной точки зрения: после введения железо (III)-декстранового комплекса следует ожидать определенного снижения эффективности иммунной системы, поскольку макрофаги в крови оказываются загружены многоядерными комплексами железа. Способность противостоять бактериальным инфекциям снижается. Обзор замеченных недостатков внутримышечного пути введения имеется в литературе (E. Kolb, U.Hofmann „Zur Frage der zweckmäβigen Form der Anwendung von Fe-Dextran, seiner Verwertung sowie des Mechanismus einer möglichen Schädigung der Ferkel"; Mh. Vet. - Med. 44 (1989) 497-501).

Следовательно, можно заключить, что методики профилактики анемии у молочных поросят, представленные в настоящее время на рынке, в каждом случае имеют ряд недостатков:

1. При пероральном введении соединений железа Fe(II) типа (I) и (II), согласно литературе, наблюдается значительно сниженная биодоступность. Рекомендовано многократное введение этих препаратов, что при интенсивном животноводстве требует затрат на персонал и невыгодно с экономической точки зрения.

2. Пероральное введение многоядерных соединений железа Fe(III) типа (III), в особенности, железо (III)-декстранов с одной стороны дает более благоприятные результаты. Как правило, однократное введение дозы около 200 мг активного железа оказывается достаточным для обеспечения поросят железом. Значительный недостаток этого способа, однако, заключается в том, что достаточной эффективности, согласно господствующему ныне мнению, можно добиться только тогда, когда железо (III)-декстран вводят поросятам в течение первых 8-10 часов жизни. На свинофермах это можно обеспечить только при непрерывном наблюдении за опоросом, которое часто невозможно ввиду значительной потребности в персонале. Если этот момент упустить, то следствием этого часто оказывается высокая смертность поросят.

3. Препараты железа внутримышечного введения нередко удобнее в применении, поскольку очень хорошие результаты дает введение в период 1-го-3-го дня после рождения. Недостаток, однако, состоит в их потенциальной вредности для поросят, обусловленной токсическими побочными эффектами и кратковременным ослаблением иммунной системы. Препараты перорального введения этим недостатком не обладают.

4. Если при этом принять во внимание еще и нередко необходимое лечение кокцидиоза, например, толтразурилом или похожими соединениями, то становится ясно, что для успешного выращивания поросят очень часто могут понадобиться две процедуры: (1) отлов поросят в 1-й день жизни и введение, например, железо (III)-декстрана, еще один отлов поросят в день 3 и пероральное введение обычной коммерческой составы суспензии толтразурила; либо же (2) отлов поросят в день 3 и раздельное введение коммерческой суспензии толтразурила для перорального применения, а также инъекционной составы железо (III)-декстрана (с описанными недостатками).

Таким образом, было бы весьма выгодно, если бы существовали препараты, которые позволяли бы объединить обе процедуры без описанных недостатков, т.е. без вредных побочных эффектов, при гарантированной высокой эффективности. Подходящий для этого препарат мог бы представлять собой, например, состав действующего вещества толтразурила и железо (III)-декстрана для перорального введения поросятам в период 1-3 дней после рождения. Препараты, призванные объединять обе процедуры, должны, однако, удовлетворять ряду условий:

- Достаточное количество действующего вещества: в одной единице дозирования должно содержаться количество антикокцидиального средства, достаточное для фармакологической эффективности, обычно 20-70 мг, например, 30 мг, 44 мг или 50 мг толтразурила, и, по меньшей мере 100 мг, более целесообразно, однако, по меньшей мере 150 мг, предпочтительно - 200-250 мг активного железа (что соответствует, например, 400-600 мг многоядерного комплекса железа (III)) для профилактики анемии - в соответствии с рекомендациями по дозировке, составляющими 20 мг толтразурила / кг массы тела и 200 мг активного железа на поросенка. Это соответствует концентрации состава в 2-7% м/об. антикокцидиального средства и 10-25% м/об. активного железа (причем под "% м/об." подразумевают массу соответствующего компонента в г на 100 мл).

- Достаточный объем дозы для перорального применения: для молочных поросят, например, оптимален объем дозы в 1 мл, поскольку при более значительных объемах нельзя гарантировать полный прием дозы поросенком. Более значительные количества жидкости нередко вытекают из пасти, либо поросенок извергает их с рвотой.

- Надлежащая консистенция: вязкость должна находиться в пределах, позволяющих вводить дозу с помощью пистолета-дозатора или шприца, например, между 10 и 2500 мПа*с. Если препарат обладает слишком жидкой консистенцией, то он может вытечь из пасти животного после введения, если консистенция слишком плотная, то для лица, осуществляющего введение, затруднительно широкомасштабное применение с помощью шприцов или пистолетов-дозаторов, а животные, в особенности поросята, испытывают трудности при глотании.

- Качество составов: необходимо обеспечить физическую и химическую устойчивость и фармакологическую эффективность. Так, например, необходимо обеспечить, чтобы ионы железа не оказывали неблагоприятного влияния на химическую стабильность антикокцидиального средства. Кроме того, необходимо, чтобы в случае составов в форме суспензии сохранялось максимально тонкодисперсное распределение действующего вещества; коагуляция или комкование диспергированных частиц действующего вещества являются недостатком. Это может, например, отрицательно повлиять на фармакологическую эффективность, поскольку скорость растворения и, следовательно, высвобождения действующего вещества из частиц в кишку оказывается снижена из-за уменьшения площади поверхности.

- Эффективность при введении на протяжении более длительного интервала после рождения: желательна, в особенности при однократном применении, достаточная эффективность противодействия кокцидиозу и анемии при введении в период между 1-ми 3-м днем после рождения.

- Достаточная степень профилактики анемии при однократном применении: количество железа, подлежащее введению в указанном малом объеме дозы комбинированного препарата должно быть достаточно, чтобы после однократного введения в необходимой степени покрыть потребность поросенка в железе при нормальных условиях содержания.

Сочетание триазинонов и препаратов железа в подходящем составе до сих пор описано не было.

Предметом изобретения являются:

1. Средство, содержащее триазиноны формул (I) или (II)

,

или

где

R¹ означает R³-SO₂- или R³-S-,

R² означает алкил, алкоксигруппу, галоген или SO₂N(СН₃)₂, а

R³ означает галогеналкил

R⁴ и R⁵ независимо друг от друга означают водород или Cl (хлор), а

R⁶ означает фтор или хлор,

либо их соли, приемлемые с физиологической точки зрения,

и

соединения железа (2+) или железа (3+), выбранные из группы,

которую образуют:

(a) Соли железа (II) и карбоновых кислот, комплексные соединения железа (II) и карбоновых кислот и хелатные комплексы железа (II) с аминокислотами

(b) Соли железа (III) и карбоновых кислот, комплексные соединения железа (III) и карбоновых кислот и хелатные комплексы железа (III) с аминокислотами и

(c) Многоядерные комплексные соединения железа (III) и полисахаридов.

Отдельные заместители в формулах (I) и (II) имеют следующие предпочтительные и особо предпочтительные значения:

R² предпочтительно означает алкил или алкоксигруппу, в каждом случае с 1-4 атомами углерода, либо же фтор, хлор, бром или SO₂N(СН₃)₂; особо предпочтительно R² означает алкил с 1-4 атомами углерода.

R³ предпочтительно означает фторалкил с 1-4 атомами углерода, особо предпочтительно - трифторметил.

Триазиноны, как таковые, хорошо известны как действующие вещества для борьбы с кокцидиальными инфекциями; следует упомянуть триазинтрионы, например, толтразурил и поназурил, а также триазиндионы, как, например, клазурил, диклазурил и летразурил.

В формуле (II) триазиндионы представлены следующим образом:

клазурил (R⁴=Cl, R⁵=Н, R⁶=Cl в формуле (II))

летразурил (R⁴=Cl, R⁵=Cl, R⁶=F в формуле (II)), а

диклазурил (R⁴=Cl, R⁵=Cl, R⁶=Cl в формуле (II)).

Из этих 1,2,4-триазиндионов наиболее предпочтителен диклазурил.

Согласно изобретению в качестве действующих веществ особо предпочтительны триазинтрионы формулы (I), где R² и R³ имеют следующие предпочтительные и особо предпочтительные значения:

R² предпочтительно означает алкил или алкоксигруппу, в каждом случае, имеющие до 4 атомов углерода, особо предпочтительно - метил, этил, н-пропил, изопропил.

R³ предпочтительно означает перфторалкил с 1-3 атомами углерода, особо предпочтительно - трифторметил или пентафторэтил.

В формуле (I) предпочтительные триазинтрионы представлены следующим образом:

толтразурил (R¹=R³-S-, R²=СН₃, R³=CF₃)

поназурил (R¹=R³-SO₂-, R²=СН₃, R³=CF₃)

Дозировка триазинона может варьировать в зависимости от вида животных, как это указано выше. Обычные дозировки составляют от 1 до 60 мг действующего вещества на кг массы тела (мг/кг) получающего препарат животного в сутки, предпочтительно - от 5 до 40 мг/кг, а особо предпочтительно 10-30 мг/кг.

При пероральном применении толтразурил обычно вводят в следующих дозах:

свиньям:	20 мг/кг массы тела
Крупному рогатому скоту:	15 мг/кг массы тела
овцам:	20 мг/кг массы тела
птице:	15 мг/кг массы тела

За исключением введения птицам, толтразурил вводят лишь один раз за цикл лечения, так что, например, при введении свиньям, крупному рогатому скоту и овцам указанные дозировки касаются как суточного объема, так и общего объема при лечении.

Надлежащие соединения железа (2+) или железа (3+) - это:

(a) Соли железа (2+) и карбоновых кислот, комплексные соединения железа (2+) и карбоновых кислот и хелатные комплексы железа (2+) с аминокислотами

(b) Соли железа (3+) и карбоновых кислот, комплексные соединения железа (3+) и карбоновых кислот и хелатные комплексы железа (3+) с аминокислотами

(c) Многоядерные комплексные соединения железа (3+) и полисахаридов.

В качестве примеров соединения железа типа (а) следует назвать: железа (II)-лактат (FeC₆H₁₀O₆), железа (II)-глюконат (FeC₁₂H₂₂O₁₄), железа (II)-фумарат (FeC₄H₂O₄) и хелатные комплексы железа с аминокислотами, как то, например, железа (IU)-бис-глицинат (Fe(C₂H₄NO₂)₂), железа (II)-метионат (Fe(C₅H₁₀NO₂S)₂) и их гидратные соединения.

В качестве примеров соединения железа типа (b) следует назвать: железа (III)-цитрат (FeC₆H₅O₇), аммониевый железа (III)-цитрат и при необходимости их гидратные соединения.

Под соединениями железа группы с) в настоящем тексте подразумевают комплексы иона железа (3+) с гидроксид-ионами, (ОН"), группами воды (H₂O) и кислородом (О), имеющие форму олигомера или полимера и ассоциированные в координационной сфере комплексным образом с одним или несколькими из указанных олигомерных и полимерных углеводных соединений. По этой причине эти соединения также называют железа (III)-гидроксид-полисахаридами или железа (III)-окси-гидрокси-полисахаридами, причем "полисахарид" означает соответствующие олигомерные или полимерные углеводные соединения или их производные. Подобные многоядерные комплексы железа (III) описаны, например, в следующих публикациях: (D.S.Kudasheva et al. „Structure of Carbohydrate-bound Polynuclear Oxyhydroxide Nanoparticles in Parenteral Formulation", J. Inorg. Biochem. 98 (2004) 1757-1769; I. Erni et al „Chemical Characterization of lron(lll)-Hydroxide-Dextrin Complexes" Arzneim. - Forsch. /Drug Res. 34 (II) (1984) 1555-1559; F. Funk et al. „Physical and Chemical Characterization of Therapeutic Iron Containing Materials", Hyperfine Interactions 136 (2001) 73-95; E. London "The Molecular Formula and Proposed Structure of the Iron-Dextran Complex, IMFERON", J. Pharm. Sci. 93 (2004) 1838-1846; A.John „Neue Möglichkeiten der Eisenversorgung neugeborener Ferkel unter Beachtung biochemischer Aspekte", Trächtigkeif und Ge