Противопаразитарное средство для сельскохозяйственных животных

Противопаразитарное средство для сельскохозяйственных животных

Реферат

Изобретение относится к ветеринарной паразитологии и может быть использовано для профилактики и лечения паразитарных заболеваний сельскохозяйственных животных.

Известно большое количество препаратов для профилактики и лечения паразитарных заболеваний, содержащих соединения различных химических классов и групп в качестве активных компонентов. Наибольшее распространение получили препараты группы макроциклических лактонов, включающие в своем составе соединения биологического происхождения, относящиеся к классу авермектинов. В химическом отношении авермектины - макроциклические лактоны (сложные эфиры гидроксиловой кислоты), выделенные из почвенных микроорганизмов Streptomyces avermitilis. В основе их структуры лежит 16-элементное лактоновое кольцо, соединенное в позиции 13 с элементами углеводов-альфа- а- олеандросил-альфа а-олеандросил (Ivermectin and Abamectin. Ed. William С. Campbell, Springerverlag, New York, Berlin, Heidelberg, London, Paris, Tokyo, 1989, 363 p.).

Препараты этого класса антибиотиков обладают широким спектром инсектицидного, акарицидного и антигельминтного действия и используются в качестве антипаразитарных и антигельминтных средств (Putter I., MacConnel J.D., Preiser F.A. et al. Avermectins: novel insecticides, acaricides and nematocides from a soil microorganism // Experientia, 1981; v.37, p.963-964). В ветеринарной практике применяют препараты как на основе авермектинового комплекса в целом (аверсектин), так и препаративные формы, содержащие индивидуальные авермектины (абамектин, ивермектин и др.).

Одним из наиболее активных соединений авермектинового ряда является ивермектин (22,23-дигидроавермектин B1), состоящий из основного компонента - 22, 23 - дигидроавермектина B_1a и минорного компонента - 22, 23 - дигидроавермектина B_1b, содержащегося в смеси в количестве не более 20%. В качестве действующего вещества ивермектин входит в состав ветеринарных препаратов «Ивомек», «Баймек», «Новомек», «Иверсект», «Ивертин», «Ивермек», «Ганамектин», «Ивермаг» и др. (Справочник Видаль «Ветеринар», Москва, 2011).

Однако, несмотря на высокую антипаразитарную активность, большинство известных препаратов на основе ивермектина отличаются токсичностью и способностью аккумулироваться в молоке, органах и тканях животных. Это создает угрозу попадания ивермектинов в пищу человека и ограничивает их использование на лактирующих животных и для получения мясной продукции. Убой на мясо разрешается не ранее, чем через 21-28 дней после последнего введения ивермектинсодержащих препаратов.

Первым коммерческим препаратом, разработанным на основе ивермектина, является препарат Ивомек (Merck, Sharp & Doum (США)). Препарат Ивомек представляет собой 1%-ный стерильный раствор ивермектина для инъекций в бинарной смеси растворителя, состоящей из 40% глицеролформаля и 60% пропиленгликоля (Campbell W.C., Benz G.W. Ivermectin: a review of efficacy and safety// J. Vet. Pharm. Therap., 1984, 7, p.1-16).

Недостатком препарата Ивомек является его высокая вязкость, достигающая 25-30 сП, что затрудняет использование препарата в практике при пониженных температурах воздуха. Инъекции препарата вызывают у животных (особенно у овец) болезненные ощущения из-за высокого содержания пропиленгликоля, выражающиеся в несвойственных для этих видов животных движениях (прыжки, скачки) и нарушениях координации движения. Еще одним недостатком препарата Ивомек является необходимость стадии стерилизующей фильтрации в технологическом процессе получения готовой стерильной лекарственной формы. Кроме того, препарат не может быть использован для обработки лактирующих животных, т.к. он в течение 2-х недель выделяется с молоком и длительно, в течение 21 дня задерживается в организме, ограничивая этим периодом возможное использование мясной продукции. Убой животных на мясо, обработанных препаратом Ивомек, разрешается не ранее, чем через 21 день.

Известно средство для профилактики и лечения паразитарных заболеваний животных, которое представляет собой раствор ивермектина в смеси полиэтиленгликоля-400, 80% этилового спирта и бензилового спирта при следующем соотношении компонентов: ивермектин 0,8-1,2 г/100 мл, полиэтиленгликоль 45-60 об.%, 80%-ный этиловый спирт 35-45 об.%, бензиловый спирт 2-10 об.%. Противопаразитарное средство имеет название Иверсект (патент RU 2140737, A01N 27/00, опубл. 10.11.1999).

Недостатком известного средства является токсичность и длительное выделение из организма обработанных животных (более 21 дня), что приводит к невозможности применения препарата на лактирующих животных.

Известен также препарат для профилактики и лечения гиподерматоза крупного рогатого скота, содержащий ивермектин в количестве 0,005-0,05 мас.%, изопрапонол - 10,0-50,0 мас.% и растворитель - триэтиленгликоль (до 100,0 мас.%). Содержание активного компонента - ивермектина в составе препарата на несколько порядков меньше, чем в традиционно используемых средствах. При подкожном введении препарат не выделяется с молоком и быстро выводится из организма (патент RU 2121831, A61K 31/00, опубл. 20.11.1998).

Недостатком известного препарата является ограниченный спектр противопаразитарного действия, т.к. он предназначен для профилактики и лечения только гиподерматоза крупного рогатого скота.

Известен противопаразитарный препарат для безыгольного введения при лечении сельскохозяйственных животных, представляющий собой раствор авермектинов или их производных в органических растворителях или их смесях в концентрации 2-35 г/100 мл, при этом в качестве органических растворителей препарат содержит бензиловый спирт, этиловый спирт, триэтиленгликоль, диметилсульфоксид или их смеси (патент RU 2251421, A61K 31/70, опубл. 10.05.2005).

Недостатком данного препарата является применение его в высокой концентрации (20%) и дозе 0,4 мг на животное (80 мг действующего вещества), что делает обработку нерентабельной. Этот препарат рекомендован для применения на лактирующих животных, однако его остаточные количества обнаруживаются в молоке в течение 21 дня в количествах от 0,12 до 0,60 нг/см). Кроме того, большое количество компонентов, входящих в его состав, могут оказывать и негативное воздействие на организм крупного рогатого скота. Так, по медицинским данным, бензиловый спирт, входящий в состав лекарственных препаратов для человека, оказывает токсическое действие на новорожденных и детей до 3-х лет. Диметилсульфоксид, используемый в медицине, также имеет массу противопоказаний: не рекомендуется применять при нарушении функции печени и почек, стенокарадии, инфаркте миокарда, выраженном атеросклерозе, глаукоме, катаракте, коме, беременности, лактации (справочник лекарственных средств 2011).

Наиболее близким аналогом является водно-дисперсная лекарственная форма ивермектина для лечения экто- и эндопаразитозов, включающая в качестве растворителя воду, диметиламид или пропиленгликоль, или глицероформаль как сорастворитель, поверхностно-активные вещества, такие как твин 80, солютол, кремофор или другие полиоксиэтилированные производные природных масел в качестве мицеллообразующего агента, бензиловый спирт или парабены как консерванты, фосфатно-цитратный буфер и дополнительно витамин E (токоферол) при следующем содержании компонентов (мас.%): активнодействующее вещество (ивермектин) - 0,1-7,5; сорастворитель - 10-60; мицеллообразующий агент (ПАВ) - 4-20; консервант - 0,5-2,0; фосфатно-цитратный буфер pH 6-7 - до 0,9, витамин E - 0,7-7,0, вода дистиллированная - остальное (патент RU 2162699, A61K 35/70, опубл. 10.02.2001).

Недостатком ближайшего аналога является токсичность и длительное выделение из организма обработанных животных, что неприемлемо для применения на дойном рогатом скоте. Кроме того, повышенное содержание витамина Е и композиционный состав вспомогательных компонентов препарата приводит к супрессии иммунной системы, увеличивая тем самым риск возможных нежелательных последствий. Необходимость использования высоких доз препарата для лечения (1,5 мл на 50 кг веса тела) также делает применение данного препарата не рентабельным, а использование внутримышечного и подкожного способов введения - высоко затратным как по времени, так и по стоимости.

Задачей изобретения является разработка эффективного и малотоксичного препарата для профилактики и лечения паразитарных болезней животных, обладающего широким спектром действия, с возможностью применения на лактирующих животных и использованием мяса без ограничений.

Техническим результатом заявленного изобретения является повышение эффективности профилактики и лечения паразитарных болезней сельскохозяйственных животных за счет снижения токсического действия, устранения иммуносупрессии и нежелательных побочных последствий при повышении противопаразитарной активности препарата с возможностью применения на лактирующих животных и использованием мяса без ограничений.

Технический результат изобретения достигается за счет качественного и количественного состава компонентов, представляющих собой композицию взаимодополняющих по направленности действия, существенно усиливающих антипаразитарные свойства и снижающих токсичность действия ивермектина.

Сущность изобретения заключается в следующем: противопаразитарное средство для сельскохозяйственных животных, содержащее ивермектин, витамин Е и органические растворители, отличается тем, что в качестве органических растворителей содержит триэтиленгликоль и изопропиловый спирт при следующем соотношении компонентов (в масс./объем. %):

Ивермектин - 1,00-1,05

Витамин E - 0,01-0,02

99,8%-ный изопропиловый спирт - 7,90-15,80

98%-ный триэтиленгликоль - до 100.

Заявителем неожиданно было обнаружено, что противопаразитарное средство, в сочетании и в соотношении компонентов согласно настоящему изобретению, при подкожном или внутрикожном введении благодаря его свойствам в отношении растворения в физиологической области рН подкожной ткани, осаждается в виде стабильного комплекса и обеспечивает возможность создания ″кожного депо″, из которого действующее вещество - ивермектин в виде ″болюсов″ поступает к органам мишеням и насыщает их быстро и эффективно, минуя незаинтересованные органы. Более крупные молекулы попадают в лимфатическую систему, поскольку не могут пройти сквозь поры капиллярной стенки. В итоге ивермектин наполняет всю лимфатическую систему и попадает в общую систему кровообращения. Вспомогательные вещества противопаразитарного средства - витамин E, 98%-ный триэтиленгликоль и 99,8%-ный изопропиловый спирт обеспечивают формирование стабильного комплекса ивермектина с пролонгированным сроком действия и дополнительно к этому способствуют повышению резистентности организма хозяина, предотвращению местной реакции и дезинтоксикации.

Заявленный состав противопаразитарного средства позволяет снизить токсичность, обеспечить эффективную дозу при более низких концентрациях действующего вещества и однократной инъекции, а также предотвратить накопление ивермектина в молоке и мясе животных.

Противопаразитарное средство используют для лечения и профилактики паразитарных болезней животных с применением внутрикожного введения крупному рогатому скоту в дозе 0,4 мл на одно животное, предпочтительно однократно. При тяжелых инвазиях допустимо введение препарата двукратно.

Для крупного рогатого скота препарат по изобретению применяют против нематодозов (телязиоза, диктиокаулеза, трихоцефалеза, стронгилоидоза, гемонхоза, остертагиоза, нематодироза, эзофагостомоза) и эктопаразитов (псороптоза, саркоптоза, хориоптоза, сифункулятозов) и при гиподерматозе в дозе 0,4 мл/голову внутрикожно, 1 мл/50 кг м.т. подкожно, 0,5 мл на животное подкожно.

Для свиней применяют при нематодозах (метастронгилезе, аскаридозе, эзофагостомозе, стронгилоидозе) и против эктопаразитов (саркоптозе, гематопинозе) в дозе 1 мл/50 кг м.т., 1,5 мл/50 кг м.т. подкожно и 0,002 мл/кг м.т. внутрикожно.

Для овец применяют при нематодозах, псороптозе в дозе 1 мл/50 кг м.т. подкожно.

Использование противопаразитарного средства согласно изобретения позволяет получить высокий терапевтический эффект против эндопаразитов и эктопаразитов и сохраняет концентрацию активного соединения в молоке лактирующих животных ниже безопасного для потребления человека уровня, способствует ускорению регенерации поврежденных тканей, оказывает общеукрепляющее действие на животных, обеспечивает безопасность молока и мяса при использовании в пишу людям, сокращение финансовых и людских затрат на проведение обработок животных.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Приготовление противопаразитарного средства.

К отмеренному объему изопропилового спирта добавляют навески ивермектина и витамина E. Перемешивают смесь до полного растворения ингредиентов (при необходимости смесь нагревают до 35°C). Далее к полученному раствору добавляют при перемешивании отмеренный объем триэтиленгликоля. Смесь непрерывно перемешивают до достижения полной однородности во всем объеме при комнатной температуре (20°C). Время перемешивания зависит от объема смеси, типа мешалки и скорости ее вращения. Гомогенность раствора контролируют путем периодического отбора проб из верхнего, среднего и нижнего слоев жидкости в смесительной емкости с последующим определением плотности проб и концентрации в них действующих веществ.

Композиции противопаразитарного средства с использованием разных количеств компонентов приведены в таблице 1.

Табл. 1
Композиционный состав противопаразитарного средства
Ингредиент	Навеска/объем	Содержание в композиции (% масс/масс)
Состав А.
Ивермектин 99%	1,030 кг	0,941
Витамин E (масл. форма 98%)	15,0 г	0,014
Изопропиловый спирт (99,8%, плотн. 0,79 т/см3)	8,69 кг	7,942
Триэтиленгликоль (98%, плотн. 1,12,г/см3)	99,68 кг	91,103
Состав Б

Ивермектин 99%	1,050 кг	0,986
Витамин E (масл. форма 98%)	15 г	0,014
Изопропиловый спирт (99,8%, плотн. 0,79,г/см3)	15,80 кг	14,841
Триэтиленгликоль,98%, плотн. 1,12 г/см3)	89,6 кг	84,159
Состав В
Ивермектин 99%	1,060 кг	0,983
Витамин E (масл. форма 98%)	15 г	0,014
Изопропиловый спирт (99,8%, плотн. 0,79 г/см3)	12,64 кг	11,726
Триэтиленгликоль (98%, плотн. 1,12 г/см3)	94,08 кг	87,277

Пример 2. Производственное испытание экспериментальных серий противопаразитарного средства против стронгилоидоза и диктиокаулеза крупного рогатого скота.

Испытание эффективности противопаразитарного средства проводили в опытах на спонтанно инвазированных телках случного возраста.

Были сформированы 4 опытные группы из телок случного возраста по 30 голов в каждой, отобранных по результатам копрологических исследований, и одна контрольная группа. Копрологические исследования на диктиокаулез и стронгилоидоз проводили по методу Бермана в модификации В.И. Шилова. Исходная зараженность стронгилятами составила от 50% до 96,66%. Была установлена инвазированность животных диктиокаулами с клиническими признаками: кашель, вялость, снижение аппетита, незначительные слизистые истечения из носовой полости были у 30% животных.

Животным 1 и 2 групп вводили противопаразитарное средство по изобретению подкожно однократно в дозе 1 мл/50 кг м.т., 2 группы - 0,5 мл/50 кг м.т., 3 группы - внутрикожно однократно в дозе 0,2 мл/голову, 4 группы - внутрикожно однократно в дозе 0,4 мл/голову.

За животными всех групп вели клиническое наблюдение в течение двух недель. У животных с клиническими признаками диктиокаулеза истечения, угнетение и кашель практически прекратились на 4-5 день после применения противопаразитарного средства в указанных выше дозировках. Копрологическими исследованиями проб фекалий от животных спустя 2 недели после обработки, личинок диктиокаул не было обнаружено. В контрольной группе они были обнаружены в 18 пробах из 20 исследованных. Результаты эксперимента представлены в таблице 2.

Табл. 2
Результаты исследований проб кала крупного рогатого скота на стронгилоидоз и диктиокаулез до и после применения противопаразитарного средства по изобретению
№ группы	Исследовано проб	Выявлено положи-тельных проб	%	Доза и способ введения	Обрабо-тано голов	Иссле-довано проб	Выявлено положи-тельных проб	%
1.	30	29	96,66	подкожно 1,0 мл/50 кг	30	30	0	100
2.	30	15	50	подкожно 0,5 мл/50 кг	30	30	1	96,67
3.	30	10	33,33	внутрикожно 0,2 мл на голову	30	30	1	96,67
4.	30	25	83,33	внутрикожно 0,4 мл на голову	30	30	0	100
5.	20	18	90	не обработаны	0	20	18

Испытание заявленного противопаразитарного средства против стронгилоидоза и диктиокаулеза крупного рогатого скота показало его 100% эффективность при однократном введении подкожно в дозе 1 мл/50 кг м.т. и внутрикожно в дозе 0,4 мл/голову с помощью безыгольного инъектора.

Пример 3. Эффективность заявленного противопаразитарного средства при нематодозах крупного рогатого скота учитывали в летне-осенний период области на 38 телках при диктиокаулезе, 36 телках - при стронгилоидозе, 44 головах крупного рогатого скота - при нематодирозе, 52 головах молодняка - при других стронгилятозах пищеварительного тракта и 18 головах - при трихоцефалезе. Инвазированных животных в опыт подбирали после предварительных исследований проб фекалий методом флотации с использованием насыщенного раствора сернокислого цинка и счетной камеры для учета количества яиц нематод в 1 г фекалий.

Заявленное противопаразитарное средство вводили крупному рогатому скоту подопытных групп однократно при диктиокаулезе в дозе 10 мкг/кг подкожно и 8 мкг/кг внутрикожно, а при остальных нематодозах в дозе 0,2 мг/кг, т.е. 1 мл на 50 кг массы тела. Животные контрольной группы препарат не получали.

Эффективность препарата учитывали по результатам копроово- и ларвоскопических исследований вышеуказанными методами до и через 18-20 суток после дегельминтизации. Расчет эффективности препарата проводили по типу «контрольный тест» согласно Руководству, одобренному Всемирной ассоциацией за прогресс ветеринарной паразитологии (1995).

Полученные результаты испытания противопаразитарного средства при основных нематодозах крупного рогатого скота представлены в таблице 3 и свидетельствуют о высокой эффективности препарата против разных видов нематод.

По результатам копрологических исследований получено 100%-ное снижение количества личинок диктиокаул в фекалиях молодняка крупного рогатого скота при подкожном введении в дозе 10 мкг/кг и внутрикожном применении в дозе 8 мкг/кг (0,4 мл/голову). При этом у животных после применения препарата прекратился кашель, улучшилось состояние здоровья. Зараженность телок контрольной группы в период опыта существенно не изменялась и составила до опыта 35,8±3,7 экз. яиц в 1 г фекалий, а в конце опыта 38,2±4,1 экз.

Эффективность препарата в дозе 10 мкг/кг при подкожном введении и 8 мкг/кг (0,4 мл/голову) внутрикожно при стронгилоидозе молодняка крупного рогатого скота составила 100%.

Эффективность препарата в дозе 200 мкг/кг при нематодирозе составила 99,2%, при стронгилятозах пищеварительного тракта - 99,5%, при трихоцефалезе - 98,0%.

Зараженность крупного рогатого скота контрольной группы в период опыта существенно не изменялась и составила до начала и в конце опыта: при стронгилоидозе 70,4±6,4 и 72,6±6,3 экз. яиц, при нематодирозе - 139,8±8,5 и 143,5±8,4 экз. яиц, при других стронгилятозах - 170,2±9,0 и 174,0±9,6 экз. и трихоцефалезе - 57,2±5,0 и 59,6±5,3 экз. в 1 г фекалий.

Таким образом, заявленное противопаразитарное средство в дозе 10 мкг/кг при однократном подкожном введении и в дозе 8 мкг/кг (0,4 мл/голову) при внутрикожном введении крупному рогатому скоту показал 100%-ную эффективность при диктиокаулезе и стронгилоидозе, и в дозе 200 мкг/кг подкожно 99,2%-ную - при нематодирозе, 99,5% - при других стронгилятозах пищеварительного тракта и 98,0%-ную эффективность при трихоцефалезе. Препарат хорошо переносился животными и не вызывал побочного действия или проявления местной реакции.

Табл. 3
Эффективность заявленного противопаразитарного средства при основных нематодозах крупного рогатого скота после однократного введения
Гельминтоз	Группа животных	Доза, мкг/кг	Способ введения	Кол-во голов	Обнаружено яиц/личинок нематод в 1 г фекалий, экз.	Эффектив-ность %
до лечения	после лечения
Диктиокаулез	Подопытная	8	в/к	24	36,5±3,8	0	100
Подопытная	10	п/к	24	37,3±4,0	0	100
Контрольная	0	-	14	35,8±3,7	38,2±4,1	-
Стронгилоидоз	Подопытная	8	в/к	18	69,0±6,0	0	100
Подопытная	10	п/к	18	68,7±5,9	0	100
Контрольная	0	-	18	70,4±6,4	72,6±6,3	-
Нематодироз	Подопытная	200	п/к	30	142,4±8,6	1,2±0,2	99,2
Контрольная	0	-	2	139,8±8,5	143,5±8,4	-
Другие стронгилятозы пище варительного тракта	Подопытная	200	п/к	39	169,6±9,3	1,0±0,1	99,5
Контрольная	0	-	13	170,2±9,0	174,0±9,6
Трихоцефалез	Подопытная	200	п/к	12	54,5±5,2	1,2±0,2	99,5
Контрольная	0	-	7	57,2±5,0	59,6±5,3	-

Пример 4. Производственное испытание экспериментальных серий заявленного противопаразитарного средства против подкожного овода крупного рогатого скота.

Результаты комиссионного испытания заявленного противопаразитарного средства при гиподерматозе крупного рогатого скота (весенняя химиотерапия) представлены в таблице 4.

Табл. 4
Результаты комиссионного испытания заявленного противопаразитарного средства при весенней химиотерапии гиподерматоза крупного рогатого скота
Группа животных	Кол-во голов	Доза, мкг/кг	Обнаружены личинки гиподерм в конце опыта	ЭЭ, %	ИЭ, %
кол-во животных	кол-во личинок, экз./голову
Введение подкожное
Подопытная	140	10	0	0	100	100
Контрольная	20	-	20	11,3±0,8
Введение внутрикожное
Подопытная	100	8	0	0	100	100
Контрольная	20	0	20	11,0±0,8

Полученные результаты свидетельствуют о высокой эффективности заявленного противопаразитарного средства при гиподерматозе крупного рогатого скота при весенней химиотерапии. Получена 100%-ная эффективность препарата в дозе 10 мкг/кг при подкожном введении и 100%-ная интенсэффективность при внутрикожном введении в дозе 8 мкг/кг (0,4 мл/голову).

Препарат хорошо переносился животными и не вызывал проявления местной реакции. На месте внутрикожного введения препарата образовывался небольшой пузырек. Через некоторое время (6-10 часов) пузырек рассасывался. Животные во время обработки находились на привязи и не проявляли беспокойства.

Результаты комиссионных испытаний заявленного противопаразитарного средства для ранней химиотерапии гиподерматоза крупного рогатого скота представлены в таблице 5.

Табл. 5
Результаты комиссионного испытания заявленного противопаразитарного средства для ранней химиотерапии гиподерматоза крупного рогатого скота
Группа животных	Кол-во голов	Доза, мкг/кг	Обнаружены личинки гиподерм в конце опыта	ЭЭ, %	ИЭ, %
кол-во животных	кол-во личинок, экз./голову
Подопытная	260	10,0	0	0	100	100
Контрольная	20	-	9	11,5±0,9

Как следует из полученных результатов, препарат проявил 100%-ную эффективность при ранней химиотерапии гиподерматоза крупного рогатого скота. Проведенные испытания показали возможность применения заявленного противопаразитарного средства для ранней и поздней химиотерапии гиподерматоза крупного рогатого скота, как при подкожном, так и при внутрикожном способе введения.

На основании полученных результатов, нами проведено установление терапевтической дозы заявленного средства при ранней химиотерапии гиподерматоза крупного рогатого скота. Для этого препарат применяли подкожно и внутрикожно в разных дозах. Максимальная эффективность препарата достигалась при подкожном и внутрикожном введении в дозах 12 и 10 мкг/кг. Так, получена 100%-ная эффективность в дозе 12 мкг/кг при подкожном введении и в дозе 10 мкг/кг при внутрикожном введении с помощью безыгольного инъектора. Высокой также оказалась эффективность препарата в дозе 10 мкг/кг при подкожном введении и 100%-ная - в дозе 8 мкг/кг при внутрикожном введении. Несколько ниже была эффективность препарата в дозе 8 мкг/кг при подкожном введении и 6 мкг/кг при внутрикожном введении (ИЭ% соответственно 97,48 и 96,93%, при 94,03 и 94,55%-ной ЭЭ).

Таким образом, доза 10 мкг/кг - при подкожном введении и доза 8 мкг/кг - при внутрикожном введении рекомендованы нами, как терапевтические, при ранней химиотерапии гиподерматоза крупного рогатого скота.

Пример 5. Испытание эффективности противопаразитарного средства проводят в опытах на телках случного возраста и телятах в хозяйствах, неблагополучных по гиподерматозу. На первой ферме заявленное противопаразитарное средство в дозах 0,3 мл и 0,5 мл на животное вводили, соответственно, 50 и 50 телкам подкожно в область нижней трети шеи, однократно. Учет эффективности обработки проводили через полгода после обработки. Эффективность обработки составила 88% и 100% соответственно. На второй ферме заявленное противопаразитарное средство вводили подкожно в дозе 0,5 мл на животное (5.0 - 10.0 - 20.0 мкг/кг) в область нижней трети шеи 110 коровам, 20 нетелям, 20 телкам случного возраста и 50 телятам. Эффективность обработки составляет во всех случаях 100%. На третьей ферме сформировали 2 опытных группы и 1- контрольную. Противопаразитарное средство вводили внутрикожно в область шеи 60 коровам первой опытной группы в дозе 0,2 мл (3,3-4 мкг/кг массы тела) и 70 коровам второй опытной группы - в дозе 0,4 мл (6,6 - 8 мкг/кг массы тела) на животное (две инъекции по 0,2 мл) из безыгольного инъектора. На месте введения препарата образовывался небольшой пузырек. Его образование контролировали визуально или пальцем руки. Через некоторое время пузырек рассасывался. Животные во время обработки находились на привязи, не проявляя беспокойства. Учет результатов проводили через один и два месяца после обработки. У двух животных 1-й опытной группы было обнаружено по одной личинке подкожного овода (ЭЭ-97% и ИЭ-99%). У одного животного второй опытной группы было обнаружено 2 личинки (ЭЭ-99% и ИЭ-100%). У 20-ти контрольных животных было обнаружено 113 личинок подкожного овода. На четвертой ферме внутрикожно вводили противопаразитарное средство с помощью безыгольного инъектора больным гиподерматозом коровам.

Заявленное средство вводили: 250 коровам в дозе 0,4 мл на животное, из которых 45 были поражены личинками 2 и 3 стадии, всего 98 личинок; 100 коровам в дозе 0,2 мл, из которых у 19 были обнаружены 47 личинок.

Второе обследование проводили через 20 дней после обработки. Все обнаруженные личинки после введения заявленного противопаразитарного средства погибли. Не было отмечено подхода новых личинок и образования новых желваков после применения препарата.

Проведенные исследования показали возможность применения противопаразитарного средства по изобретению для профилактики и лечения гиподерматоза крупного рогатого скота при внутрикожном способе введения с помощью безыгольного инъектора в дозах 0,2 - 0,4 мл на животное (3,3 - 8,0 мкг/кг массы тела) с эффективностью около 100%.

Пример 6.

В хозяйстве были проведены испытания заявленного противопаразитарного средства при телязиозе крупного рогатого скота. Его применяли наряду с применением препарата гиподектин инъекционный для борьбы с гиподерматозом, телязиозом и диктиокаулезом крупного рогатого скота.

Опыт проводили на телятах в возрасте до 1 года (4 группы по 20 голов), у которых был поставлен диагноз телязиоз на основании клинических признаков и положительного лабораторного исследования.

Для лечения телятам вводили заявленное противопаразитарное средство однократно в следующих дозах:

1 группа - 20 голов - 0,5 мл на животное подкожно; 2-я группа - 20 голов - 0,4 мл на голову внутрикожно (по 0,2 мл в две точки); 3-я группа - 20 голов - глаза животным промывали 3% эмульсией ихтиола ежедневно в течение 10 дней. 4-я группа - 20 голов - глаза животным промывали 3% раствором борной кислоты, ежедневно в течение 10 дней. Эффективность обработок оценивали по результатам клинического осмотра и лабораторного исследования смывов конъюнктивальных полостей через 10 дней после начала лечения. Установлено, что в группах 1 и 2 через 10 дней после его применения паразиты обнаружены не были. Клинические признаки заболевания отсутствовали. Побочных эффектов или осложнений не было отмечено. В 3-й группе клинические признаки заболевания у животных исчезли, однако у 3-х животных в смывах из конъюнктивальной полости были обнаружены единичные паразиты. Побочных эффектов или осложнений при применении 3% эмульсии ихтиола не отмечено. В 4-й группе клинические признаки заболевания у животных исчезли, однако у 4-х животных в смывах из конъюнктивальной полости были обнаружены единичные паразиты. Эффективность после применения заявленного противопаразитарного средства составила 100%. Эффективность применения 3% эмульсии ихтиола составила 87%. Эффективность применения 3% раствора борной кислоты составила 89%.

Пример 7. Испытание экспериментальных серий противопаразитарного средства против вшей на свиньях проводили в январе месяце на 18 свиноматках, пораженных вшами Haematopinus suis. Перед применением препарата всех животных тщательно обследовали с учетом количества обнаруженных вшей. На коже в области шеи, спины, отмечали расчесы, царапины. Свиней разделили на 2 группы: подопытную (12 голов) и контрольную (6 голов). Препарат вводили свиньям подкожно в дозе 0,2 мг/кг. Эффективность препарата учитывали через 7 суток после обработки путем учета количества вшей у животных обеих групп.

Аналогичные испытания препарата проводили в хозяйстве на 16 головах крупного рогатого скота, пораженного Н. bovis. Препарат вводили подкожно, однократно в дозе 0,2 мг/кг. Животные контрольной группы препарат не получали.

В опыте было 40 поросят в возрасте 3-4 месяцев весом 40-50 кг, пораженных в сильной степени вшами Haematopinus suis и аскаридами. Клинические признаки: сильный зуд, расчесы кожи, беспокойство, наличие вшей на животных. В контрольной группе было 10 поросят. До применения препарата животные двух опытных и контрольной групп были обследованы, и было подсчитано количество вшей на участках размером 10×10 см в области шеи.

Заявленный препарат при испытании в дозе 0,2 мг/кг на свиньях оказал 100%-ный эффект против Haematopinus suis, Н. bovis (табл.6).

Табл. 6
Эффективность заявленного противопаразитарного средства в дозе 0,2 мг/кг при гематопинозе свиней и сифункулятозе крупного рогатого скота
Группа животных	Кол-во голов	Кратность обработки	Среднее кол-во вшей на 1 животном, экз.	Эффективность, %
до лечения	после лечения
Свиньи
Подопытная	12	1	326,0±13,4	0	100
Контрольная	6	-	320,4±12,7	327,2±11,6
Крупный рогатый скот
Подопытная	11	1	143,4±9,6	0	100
Контрольная	5	-	147,2±9,2	151,5±9,5

Зараженность животных контрольных групп до начала и в конце опыта существенно не отличалась и превышала 320,4 экз./голову у свиней и 143,4 экз./голову у крупного рогатого скота.

Результаты испытания препарата в дозе 0,2 мг/кг при сифункулятозе (гематопинозе) крупного рогатого скота свидетельствуют также о 100%-ной эффективности препарата.

Пример 8. Испытание экспериментальных серий противопаразитарного средства против вшей на крупном рогатом скоте.

В опыте было 10 телят весом 190-200 кг, пораженных в сильной степени вшами Haematopinus bovis. Клинические признаки: сильный зуд, расчесы кожи, беспокойство, наличие вшей на животных. В контрольной группе было 5 телят. До применения препарата животные опытной и контрольной групп были обследованы, и было подсчитано количество вшей на участках размером 10×10 см в области шеи. После этого животным опытной группы был введен препарат внутрикожно в дозе 0,4 мл/голову с помощью безыгольного инъектора. Через 7 дней после введения препараты животные были обследованы на наличие вшей. Ни у одного теленка не было обнаружено вшей. Клинические признаки заболевания исчезли полностью. Животные прибавили в весе, появился аппетит. Результаты представлены в таблице 7.

Табл.7
Эффективность препарата против вшей
Группа животных	№ животного	Количество вшей на учетном участке кожи теленка (10×10 см)	Эффективность, %
До введения	Через 7 дней после введения
опытная
	1	45	0	100
	2	67	0	100
	3	29	0	100
	4	38	0	100
	5	18	0	100
	6	48	0	100
	7	9	0	100
	8	53	0	100
	9	44	0	100
	10	31	0	100
контрольная
	1	59	67
	2	61	71
	3	17	28
	4	43	46
	5	22	33

Полученные результаты показали 100% эффективность препарата при внутрикожном введении в дозе 0,4 мл/голову против вшей на крупном рогатом скоте.

Пример 9. Испытание экспериментальных серий противопаразитарного средства при гематопинозе и аскаридозе свиней.

В опыте использовали 30 поросят в возрасте 3-4 месяцев весом 40-45 кг, спонтанно зараженных аскаридами и вшами. Были сформированы 3 группы животных по 10 голов в каждой (две опытные группы и одна контрольная). Животным первой группы вводили противопаразитарное средство по изобретению внутрикожно инжекторным методом с помощью безыгольного инъектора однократно в дозе 0,02 мг/кг 0,002 мл/кг м.т. (0,02 мг/кг м.т. по ДВ). Животным второй группы вводили противопаразитарное средство по изобретению подкожно в дозе 1 мл/50 кг м.т. (0,2 мг/кг м.т. по ДВ) однократно. Поросята третьей группы не обрабатывались. Эффективность препаратов определяли по результатам клинического осмотра и обнаружения вшей и гнид на теле и волосяном покрове поросят. Нематоцидную эффективность оценивали по результатам гельминтоовоскопии проб фекалий животных от опытных и контрольных групп до лечения и через 14 дней после лечения. Инвазированность поросят аскаридами в опытных и контрольной группе была в пределах от 14 до 17 экземпляров/голову. Эффективность препаратов против вшей и аскарид составила 100%.

Пример 10. Испытание заявленного противопаразитарного средства при саркоптозе свиней.

Испытание проводили на свиноферме на 66 свиньях, спонтанно зараженных Sarcoptes suis. Свиней 1, 2 и 3-й подопытных групп по 14 голов в каждой обработали заявленным препаратом, путем подкожного введения препарата у основания уха в дозе соответственно: 0,2; 0,3 и 0,4 мг/кг (1; 1,5 и 2,0 мл на 50 кг массы) двукратно с интервалом 10 суток. Эффективность препарата определяли путем учета количества обнаруженных клещей на поверхности тела площадью 20×20 см до и через 10 суток по