Лекарственный препарат комплексного действия и способ его производства

Лекарственный препарат комплексного действия и способ его производства

Реферат

Настоящая группа изобретений относится к медицине, к фармакотерапевтической группе - МИБП-цитокин, конкретно к лекарственному комбинированному иммуномодулирующему, иммуностимулирующему, противовирусному, антибактериальному и противовоспалительному препарату Кипферон Форте, содержащему в качестве активных веществ человеческий интерферон рекомбинантный альфа-2, иммуноглобулиновый комплексный препарат (КИП), цинка глюконат моногидрат, алоэ экстракт сухой и предлагаемому к использованию в форме вагинальных и ректальных суппозиториев (дозированная лекарственная форма, твердая в обычных условиях и легко расплавляющаяся при температуре тела).

Область применения заявляемой группы изобретений определяется преимущественно проблемами терапии наиболее распространенных и социально значимых инфекций вирусной и бактериальной этиологии (ОРВИ, грипп, хронический бронхит, пневмония, ОКИ, урогенитальные инфекции, в том числе хламидиоз, инфекции вирусов герпеса, гепатита), крайне актуальна в настоящий момент, поскольку эти инфекции относятся к самым распространенным вирусным инфекциям среди населения. Сложности при идентификации возбудителя, изменчивость возбудителей и их устойчивость к химиопрепаратам требуют применения для терапии вышеуказанных заболеваний универсальных противовирусных и антибактериальных средств, обладающих активностью по отношению к широкому спектру возбудителей инфекций.

Таким образом, разработка нового комбинированного лекарственного препарата в виде суппозиториев, включающего указанные выше активные фармацевтические субстанции, является перспективной задачей. Актуальным при этом является выбор вспомогательных веществ, входящих в состав лекарственной формы.

В данной области медицины известна биологически активная добавка к пище, включающая иммунобиологический препарат, причем в качестве иммунобиологического препарата она содержит человеческий рекомбинантный интерферон α2 из расчета 10³-10⁹ ME на 1 г приемлемого пищевого продукта. Она дополнительно содержит иммуноглобулины человека, при массовом соотношении иммуноглобулины человека:пищевой продукт, равном 100:1- 1:100 (RU №2125389).

Известна также композиция, обладающая противовирусным и антимикробным действием, для перорального применения, содержащая рекомбинантный человеческий интерферон-α, консорциум иммуноглобулинов и целевые добавки, которая представляет собой смесь, состоящую из порошка, включающего рекомбинантный человеческий интерферона, целевые добавки, способные образовывать стабильную структуру, и порошка, включающего субстанцию, содержащую консорциум иммуноглобулинов IgA, IgG и IgM, и выполнена в форме твердой капсулы при следующем содержании компонентов:

Рекомбинантный человеческий интерферон-α	10000-3000000 ME
Консорциум иммуноглобулинов IgA, IgG и IgM	0,05-0,95 г
Целевые добавки	остальное

При этом капсула покрыта слоем кишечно-растворимого вещества, выбранного из ряда: шеллак, олеиновая кислота, гидроксипропилцеллюлоза, ацетатфталатцеллюлоза, воск пчелиный, твин-20, твин-80, касторовое масло, полиэтиленоксид или их смесь. (RU №2457856).

В России зарегистрированы четыре лекарственных препарата интерферона альфа-2 в форме суппозиториев - виферон, гиаферон, генферон и кипферон.

Лекарственное средство Виферон (ООО «Ферон») - препарат человеческого рекомбинантного интерферона альфа-2b. Вспомогательные вещества: кислота аскорбиновая 0,022 г, альфа-токоферола ацетат 0,055 г, масло какао или твердый жир.

Выпускают суппозитории ректальные в дозировках по 150000, 500000. 1000000, 3000000 ME. Эффект препарата обусловлен способностью Виферона модулировать взаимодействия иммунокомпетентных клеток. Противовирусный эффект заключается в подавлении синтеза белков вирусной оболочкой и подавлении синтеза матричной вирусной РНК. Интерферон, связываясь с клеточными рецепторами, вызывает активацию ферментов протеинкиназы и аденилатсиптетазы. Изменение мембраны препятствует прикреплению и внедрению вирусов. Таким образом, интерферон обладает ингибиторным эффектом в отношении репликации вирусов. [http://www.viferon.su].

Гиаферон (ЗАО «Фирма «Витафарма»). В состав препарата входит человеческий рекомбинантный ИФН-а2b в дозировке 500000 ME, гиалуропат натрия. Вспомогательные вещества: жир кондитерский, парафин и эмульгатор Т-2 в качестве наполнителя, гиалуронат натрия - 0,012 г.

Применение средства позволяет сохранить аутогенную ткань, являющуюся мишенью аутореактивных Т-лимфоцитов. Кроме того, наблюдается уменьшение воспаления, отека, освобождения цитокинов, обусловленного активацией Т-лимфоцитов. При использовании средства в качестве ранозаживляющего средства показано, что препарат обладает биостимулирующим эффектом, ускоряя регенеративные процессы при длительно незаживающих трофических язвах, пролежнях, ранах. Выраженное противомикробное действие достигалось при использовании сшитых гелей и коллагена с гидрофильными полимерами, отличающимися повышенной скоростью (http://www.vitafarma.ru/gf.html).

Генферон (ООО "Биокад") содержит: интерферон человеческий рскомбинантный альфа-2а - 250000 ME, 500000 ME или 1000000 ME, а также таурин 0,01 г и анестезин 0,055 г; вспомогательные вещества: твердый жир, декстран 60000, полиэтиленоксид 1500 (макрогол 1500), полисорбат (твин) 80, эмульгатор 12, натрия цитрат, кислота лимонная, вода очищенная. Интерферон альфа-2 оказывает противовирусное, антибактериальное и иммуномодулирующее действие. Под воздействием интерферона альфа-2 в организме усиливается активность естественных киллеров, Т-хелперов, фагоцитов, а также интенсивность дифференцировки В-лимфоцитов. Активизация лейкоцитов, содержащихся во всех слоях слизистой оболочки, обеспечивает их активное участие в ликвидации первичных патологических очагов и обеспечивает восстановление продукции секреторного иммуноглобулина. Таурин, входящий в состав препарата, обладает регенерирующими, репаративными, мембранно- и гепатопротективными, антиоксидантными, противовоспалительными свойствами. Анестезин является местным анестетиком. Уменьшает проницаемость клеточной мембраны для ионов натрия, вытесняет ионы кальция из рецепторов, расположенных на внутренней поверхности мембраны, блокирует проведение нервных им пульсов. Препятствует возникновению болевых импульсов в окончаниях чувствиительных нервов и их проведению по нервным волокнам. (http://www.piluli.ru/product/Genferon).

Кипферон (ООО «Алфарм»). Представляет собой консорциум (комбинацию) иммуноглобулинового комплексного препарата (КИП), содержащего иммуноглобулины трех основных классов: G, А и М, и рекомбинантного человеческого интерферона альфа-2. Вспомогательные вещества: «жир кондитерский СолПро», парафин, эмульгатор Т-2.

Рекомбинантный альфа-2 интерферон ингибирует внутриклеточные стадии развития вирусов, хламидий, риккетсий, действует на бактерии, обладает иммунокоррегирующим и противоопухолевым свойствами, стимулирует антибактериальный и антивирусный иммунитет.

Эффект Кипферона проявляется как во внутриклеточной, так и внеклеточной среде организма за счет прямого действия на возбудителей заболевания и стимуляции механизмов местного и общего иммунитета. Суппозитории Кипферон активно используются при комплексном общепринятом лечении вирусных (ротавирусных), бактериальных и кишечных инфекций (сальмонеллез, дизентерия, коли-инфекция); часто и длительно рецидивирующих заболеваниях респираторного тракта, таких как хронический бронхит и пневмонии. (http://www.dialog.ru/75/108/328/_7089.html).

Известен лекарственный препарат противовирусного действия, включающий человеческий интерферон и синергист, в качестве последнего он содержит иммуноглобулины человека при массовом соотношении человеческий интерферон: синергист 1:600-300000. В качестве человеческого интерферона он содержит рекомбинантный альфа-, или бета-, или гамма-интерферон человека, в качестве иммуноглобулинов человека он содержит смесь IgA, IgM и IgG. Препарат дополнительно содержит фармацевтически приемлемые целевые добавки. (RU №2073522, прототип лекарственного средства).

Известен также способ получения мягких лекарственных форм, обладающих противовирусным действием, включающий смешение иммуноглобулинов, интерферона и наполнителя, причем при смешении к жидкой субстанции иммуноглобулинов добавляют жидкую субстанцию рекомбинантного альфа-2-интерфсрона из расчета 10⁵-10⁶ ME на 1,0 г препарата. К жидкой субстанции иммуноглобулинов добавляют лиофилизированный рекомбинантный альфа-2-интерферон. В качестве вспомогательных веществ используются ланолин, вазелин, парафин (RU №2116083, прототип способа).

Существенным недостатком вышеперечисленных лекарственных препаратов и известных способов является ограниченная эффективность использования входящих в их состав активных веществ, что приводит к необходимости достаточно длительного их применения.

Технической задачей группы изобретений, связанных единым изобретательским замыслом, является создание более эффективного лекарственного препарата, обладающего иммуномодулирующим, иммуностимулирующим, противовирусным, и антибактериальным и противовоспалительным действием и более широкой областью его медицинского применения по сравнению с существующими лекарственными препаратами в суппозиторной форме.

Технический результат, обеспечивающий решение поставленной задачи, состоит в повышении фармакологической активности препарата за счет добавления в его состав дополнительных активных веществ, увеличения скорости и полноты высвобождения активных веществ из суппозиторной основы за счет применения современных вспомогательных веществ и расширения спектра действия лекарственного препарата заявляемого состава, получаемого заявляемым способом.

Сущность изобретения в части лекарственного средства заключается в том, что лекарственный препарат комплексного действия содержит в качестве активных компонентов комплекс иммуноглобулинов классов G, М, А, интерферон альфа-2b человеческий рекомбинантный, цинка глюконат, а также вспомогательные компоненты: Тизоль, буферный раствор, пчелиный воск, полисорбат и твердый жир в виде гомогенизированной суппозиторной массы, при следующем содержании компонентов на один суппозиторий:

Комплекс иммуноглобулинов классов G, М, А	-0,14-0,60 г
Интерферон альфа-2b человеческий
рекомбинантный	-150000-3000000 ME
Цинка глюконат моногидрат	-0,04-0,17 г
Тизоль	-0,03-0,14 г
Натрия гидрофосфата додекагидрат	-0,03-0,16 мг
Натрия дигидрофосфата дигидрат	-0,01 0,05 мг
Натрия хлорид	-0,07-0,30 мг
Вода очищенная	-0,01-0,04 г
Пчелиный воск	-0,03-0,14 г
Полисорбат	-0.02-0.09 г
Твердый жир	до массы суппозитория от 1.0 до 4,0 г

Предпочтительно, препарат содержит алоэ экстракт сухой с размером частиц менее 250 мкм в количестве от 0,04 г до 0,17 г на один суппозиторий.

Препарат может содержать иммуноглобулиновый комплексный препарат, включающий иммуноглобулины классов G, М, А, выделенные из плазмы или сыворотки крови человека, проверенной на отсутствие антител к вирусу иммунодефицита человека (ВИЧ) 1 и 2 типов, вирусу гепатита С и поверхностного антигена вируса гепатита В. При этом комплекс иммуноглобулинов содержит IgG -50-70%, IgM - 15-25%, IgA - 15-25%.

Предпочтительно препарат содержит интерферон альфа-2b человеческий рекомбинантный в количестве от 150000 ME до 3000000 ME в одном суппозитории, представляющий собой белок, синтезированный штаммом Escherichia coli SX50, в генетический аппарат которого встроен ген человеческого лейкоцитарного альфа-2 интерферона.

Предпочтительно препарат содержит Тизоль, представляющий собой аквакомплекс титана глицеросольвата, в состав которого входят полипептиды и полисахариды, имеющий рН в пределах 4,0-5,5 и относительную вязкоеть 1,95-2,10, а также содержит полисорбат, представляющий собой неионное поверхностно-активное вещество, а также содержит твердый жир, имеющий число омыления 210-260 мг КОН/г, гидроксильное число не более 55 мг КОН/г, йодное число не более 3, кислотное число не больше 0,5, пероксидное число не более 3, а также содержит буферный водный раствор натрия хлорида, натрия гидрофосфата додекагидрата и натрия дигидрофосфата дигидрата, и имеющий рН в пределах 5,0 7,0 с микробиологической чистотой, Ед/мл, не более 100.

При этом суппозитории выполнены конусообразной или цилиндрической формы с заостренным концом.

Сущность изобретения в части способа производства заключается в том, что способ производства лекарственного препарата комплексного действия предусматривает, что готовят жировую основу в виде смеси, в которую входят пчелиный воск в виде твердого вещества от белого до желто-бурого цвета, полисорбат в виде маслянистой жидкости лимонного цвета и твердый жир в виде белой или почти белой восковой хрупкой массы с температурой плавления от 30°С до 45°С, для чего помещают эти компоненты в бак из нержавеющей стали для автоклавирования и стерилизации в течение 15 мин при температуре 121±1^оС, после чего при включенной мешалке вводят в расплавленную основу цинка глюконат и перемешивают жировую основу до образования однородной системы, а также готовят смесь рабочих растворов активных субстанций, для чего смешивают между собой предварительно подготовленный буферный раствор с комплексом иммуноглобулинов классов G, М, А и интерфероном, добавляют к ним гелеобразную массу Тизоля и перемешивают до образования однородного раствора смеси активных субстанций, а затем вводят последний в жировую основу, доведенную до температуры 38°С, и тщательно перемешивают до образования гомогенной суппозиторной массы.

Предпочтительно, непосредственно после введения цинка глюконата в расплавленную основу вводят и перемешивают алоэ экстракт сухой с размером частиц менее 250 мкм, жировую основу после стерилизации перемещают в термостат и хранят при температуре 57±2°С в течение суток, а после получения гомогенной суппозиторной массы ведут процесс дозированного розлива суппозиториев в индивидуальные упаковки при непрерывном перемешивании суппозиторной массы, постепенно снижая скорость вращения мешалки со 180 об/мин до 120 об/мин в начале розлива, затем 130-120 об/мин в середине процесса и 130-100 об/мин к концу розлива, при этом температуру разливаемой суппозиторной массы поддерживают на уровне 38±1°С, а полученные суппозитории в течение 15-25 минут охлаждают при температуре (10-20)±2°С.

В процессе дозирования получают суппозитории массой от 1,0 г до 4,0 г при следующем содержании компонентов на один суппозиторий

Комплекс иммуноглобулинов классов G, М, А	0,14-0,60 г
Интерферон альфа-2b человеческий
рекомбинантный	150000-3000000 МЕ
Цинка глюконат моногидрат	0,04-0,17 г

Тизоль	0,03-0,14 г.
Натрия гидрофосфата додекагидрат	0,03-0,16 мг
Натрия дигидрофосфата дигидрат	0,01-0,05 мг
Натрия хлорид	0,07-0,30 мг
Вода очищенная	0,01-0,04 г
Пчелиный воск	0,03-0,14 г
Полисорбат	0,02-0,09 1
Твердый жир	до массы суппозитория от 1,0 до 4.0 г

Предпочтительно, получают суппозитории с содержанием алоэ экстракта сухого в количестве от 0,04 г до 0,17 г на один суппозиторий.

Высокий терапевтический эффект в заявляемом лекарственном препарате при его вагинальном и ректальном применении обеспечивают входящие в его состав четыре активные фармацевтические субстанции - комплекс иммуноглобулинов (КИП) классов А, М и G (IgA, IgM и IgG), выделенных из плазмы или сыворотки крови человека, проверенных на отсутствие антител к вирусу иммунодефицита человека (ВИЧ) 1 и 2 типов, вирусу гепатита С и поверхностного антигена вируса гепатита В; интерферон человеческий рекомбинантный альфа-2; цинка глюконат и алоэ.

Комплекс иммуноглобулинов (КИП) представляет собой иммунологически активную белковую фракцию, выделенную при фракционировании сывороток донорской крови.

IgG является основным иммуноглобулином сыворотки здорового человека, составляет 70-75% всей фракции иммуноглобулинов, он наиболее активен во вторичном иммунном ответе и антитоксическом иммунитете. IgM появляется при первичном иммунном ответе В-лимфоцитами на неизвестный антиген, составляет до 10% фракции иммуноглобулинов. IgA является секреторным и представлен в димерной форме в комплексе с секреторным компонентом, содержится в серозно-слизистых секретах (например, в слюне, слезах, молозиве, молоке, отделяемом слизистой оболочки мочеполовой и респираторной системы). Перспективной лекарственной формой с КИП являются суппозитории, обеспечивающие высокий терапевтический эффект субстанции как при вагинальном, так и при ректальном способе введения. Входящие в состав КИП иммуноглобулины трех классов IgA, IgM и IgG ответственны за фармакологическую активность препарата. Так, IgM оказывает бактерицидный эффект на патогенные микроорганизмы; IgA затрудняет их прикрепление к эпителию слизистой оболочки, размножение и обеспечивает быстрое удаление из кишечника; IgG нейтрализует микробные токсины и вирусы, опосредует "прилипание" бактерий к макрофагам с последующим их фагоцитозом. Помимо выведения из организма патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, КИП способствует росту нормальной микрофлоры кишечника (бифидобактерий, лактобактерий, энтерококков и непатогенных кишечных палочек), повышает выработку секреторного IgA и нормализует измененные показатели системного иммунитета

Интерферон альфа-2b человеческий рекомбинантный представляет собой белок, синтезированный штаммом Escherichia coli SX50, в генетический аппарат которого встроен ген человеческого лейкоцитарного альфа-2 интерферона. Интерферон человеческий рекомбинантный альфа-2 является аналогом нативного интерферона-α человека, относящегося к интерферонам первого типа, обладает противовирусными, иммуномодулирующими и антипролиферативными свойствами и антимикробной активностью за счет способности стимулировать систему фагоцитов. Интерферон является универсальным противовирусным средством и высокоэффективен в отношении широкого спектра вирусов.

Цинк играет важную роль в функционировании иммунной системы. Он служит фактором иммунной защиты, необходим для созревания специфических иммунных клеток, выработки цитокинов, резистентности организма. Цинк необходим для пролиферации, трансформации, функционирования поверхностных рецепторов лимфоцитов. Накапливаясь в лимфатических узлах при элиминации белковых молекул, цинк может активно влиять на формирование образующихся здесь лимфоцитов. Участвует в активизации более 60 ферментов в человеческом организме, регулирует их структуру. Цинк участвует в синтезе белков, ДНК и РНК; в процессе деления клеток, их роста и регенерации. Оказывает прямое воздействие на образование коллагеновых волокон, отвечающих за эластичность кожи; на формирование соединительной ткани, суставных поверхностей. Цинк является сильным антиоксидантом. Стимулирует рост и входит в состав фактора роста нервов.

Участвует в восстановлении структуры нервов при их повреждении. Уравновешивает сахар крови и помогает поджелудочной железе вырабатывать инсулин. Защищает печень и почки от химических токсинов. Цинк способствует образованию объемных гидратных или сольватных оболочек вокруг молекул иммуноглобулина, способствует наиболее стабильной конформации белковых глобул. Гидратные оболочки играют решающую роль в образовании третичной и четвертичной структуры молекулы иммуноглобулина и в ее стабильности. Цинка глюконат является незаменимым микроэлементом, стимулирует выработку антител, участвует в формировании Т-клеточного иммунитета, стабилизирует мембраны клеток, являяется кофактором, стабилизирующим в активной конформации многие регуляторные пептиды. Обладает бактериостатическими свойствами, участвует в нормализации перекисного окисления. В результате, наличие цинка в заявляемом средстве обеспечивает наиболее высокую активность и эффективность воздействия в комплексе иммуноглобулинов и интерферона и пролонгированное действие средства в целом.

В предпочтительных случаях реализации композиции комплексный препарат Кипферон Форте содержит алоэ экстракт сухой.

Алоэ воздействует на систему иммунитета, активируя макрофаги, вызывает высвобождение интерферонов и интерлейкинов. Полипептиды и полисахариды, в составе сока алоэ, (например, Acemannan) воздействующие на систему иммунитета, играют ключевую роль в активизации макрофагов. Химический состав алоэ включает оксипроизводные антрахинона; карбоновые кислоты; микроэлементы: Si, Al, Са, Fe, Mg, Ni, Ti, V, Mo, Cu, Ag, P, Ba, Mg, Na, Zn, Pb, Rb. Cr, La; 15 свободных аминокислот; витамины: B1, B2, B6. С, Р; углеводы: галактоза, фруктоза, сахароза и другие вещества: пектины, флавоноиды, дубильные вещества. Алоэ являемся биогенным стимулятором, противовоспалительным и антибактериальным средством, стимулятором регенерации тканей, иммуностимулятором и обладает антимутагенной активностью.

Вспомогательными веществами в композиции комплексною препарата Кипферон Форте являются Тизоль, полисорбат (Твин-80), пчелиный воск, буферный раствор и твердый жир.

Тизоль - химическое название аквакомплекс титана глицеросольвата, общая химическая формула ТiO₄(С₃Н₇О₂)₄(С₃Н₈О₃)₁₀(Н₂О)₄₀. Является органическим титансодержащим соединением. Атом титана, химически связанный с молекулами глицерина, является комплексообразующим центром для составляющих молекулу препарата фрагментов: глицерина и воды. Этим взаимодействием определяется гелевая структура Тизоля и его фармакологические свойства. По физико-химическим свойствам глицеросольват титана представляет густую, не текучую, не прозрачную массу белого цвета с сероватым оттенком и слабым специфическим запахом, который практически не уловим и никак не повлияет на будущую лекарственную форму. Используется в качестве вспомогательного вещества, обеспечивающего проводимость активных субстанций через ткани человеческого организма, увеличивает скорость высвобождения активного вещества по сравнению с чисто жировыми основами на 30% (для мягких лекарственных форм). Тизоль при смешивании с активными веществами лекарственного средства образует с ними устойчивые гели, способствует повышению их активности за счет транскутанных свойств и транспортировки к патологическому очагу, обеспечивает общую токсикологическую приемлемость для организма активных веществ заявляемого препарата. Кроме того, Тизоль обладает противовоспалительным, противоотечным, противозудным, антисептическим действием, стимулирует регенерацию тканей, локальный кровоток. Наряду с этими свойствами Тизоль обладает уникальной способностью транскутанного глубокого до 8 см проведения через кожу и слизистые, превышающую проводимость Диметилсульфоксида (ДМСО) и не имеет его недостатков. Тизоль хорошо сочетается с активными веществами настоящею препарата, не разрушает их, позволяет повысить их активность и токсикологическую приемлемость для организма. Облегчает их высвобождение из суппозиторной основы и транспортировку к патологическому очагу, вследствие чего позволяет добиться сокращения времени на получение лечебного эффекта, усиления совместного действия активных субстанций и сокращение курса приема комплексного препарата Кипферон Форте.

Твин 80 (синонимы: полисорбат, полиэтилен гликоль сорбит моноолеат) (ФС 42-2540-88) служит в качестве стабилизатора консистенции суппозиторной массы. Представляет собой неионное поверхностно-активное вещество, обладающее свойством сохранения поверхности в смоченном состоянии. Твин 80 относится к неионогенным поверхностно-активным веществам - это группа соединений, используемая в фармацевтической практике для улучшения технологических или терапевтических свойств различных лекарств. Применение поверхностно-активных веществ в производстве лекарств и медицине непрерывно возрастает, что связано с рядом весьма ценных их свойств - стабилизирующей и эмульгирующей способностью, значительным влиянием на мембранную проницаемость кожных покровов и слизистых оболочек и т.д. Твин 80 разрешен Государственной Фармакопеей РФ (XI, XII изд.) к применению в различных лекарственных формах в качестве эмульгатора, стабилизатора и сорастворителя.

Пчелиный воск - жироподобное зернистое вещество (ГОСТ 21179-2000). Он необходим для создания необходимой консистенции при формовании свечей (суппозиториев). Состоит из смеси сложных эфиров (до 75%), свободных карбоновых кислот и предельных углеводородов, богат витамином А (в 100 г сотового пчелиного воска содержится 4096 ME витамина А). Удельная масса 0,956-0,969. Плавится при температуре 62-72°С. Нерастворим в воде; легко растворяется в эфире, хлороформе, бензоле, бензине, скипидарном масле.

В качестве жировой липофильной основы для изготовления заявляемого препарата в форме суппозиториев в качестве базовой основы используется твердый жир марки "Hard fat" (ТУ 9369-001-28910991-10). Эта марка твердого жира имеет достаточно большой разброс по температуре плавления (34 37.5°С), что дает преимущества в технологическом аспекте. Кроме того, он разрешен к применению в сфере здравоохранения при производстве суппозиториев.

Для обеспечения стабильности субстанции Интерферон человеческий рекомбинантный альфа-2 в пределах срока годности лекарственного препарата необходимо использование буферного раствора, содержащего натрия гидрофосфат додекагидрат (натрия фосфорно-кислый двузамещенный 12-водный) (ГОСТ 41 72-76)., натрия дигидрофосфат дигидрат (натрия фосфорнокислый однозамещенный 2-водный) (ГОСТ 245-76), натрия хлорид (натрий хлористый) (ГОСТ 4233-77) и воду очищенную (ФС 42-2619-97).

Влияя на фармакологическую активность лекарственного препарата, указанные вспомогательные вещества в совокупности способны усиливать активность лекарственного средства, обеспечивать местное или общее воздействие на организм, изменять скорость наступления эффекта (ускорять или пролонгировать действие), обеспечивать направленный транспорт или регулируемое высвобождение лекарственных веществ.

Эти вещества влияют не только на терапевтическую эффективность лекарственного вещества, но и на стабильность лекарственных форм в процессе их изготовления и хранения, что имеет не только медицинское, но и экономическое значение, позволяя не только сократить курс приема лекарственного препарата, но и увеличить срок его годности. Вследствие указанных причин заявляемому новому комбинированному препарату присвоен статус «Форте».

Суппозитории Кипферон Форте проверены на противовирусную активность в сравнении с суппозиториями Кипферон, содержащими в качестве активных субстанций только КИП и человеческий рекомбинантный интерферон альфа-2b. Методы контроля определены нормативными документами [1,2].

Результаты определения противовирусной активности приведены в таблице 1.

Таблица 1
Состав	Противовирусная активность в одном суппозитории (ME)
1. КИП, интерферон альфа-2b, вода, буферный раствор, парафин, эмульгатор Т-2, жир кондитерский «СолПро» до массы суппозитория 1,5 г, произведенный согласно RU №2116083 (Кипферон)	606000
2. КИП, интерферон альфа-2b, вода, буферный раствор, цинка глюконат, Тизоль, пчелиный воск, твин-80, твердый жир «Hard Fat» до массы суппозитория 1,5 г(Кипферон Форте)	800456
3. КИП, интерферон альфа-2b, вода, буферный раствор, цинка глюконат, алоэ экстракт сухой, Тизоль, пчелиный воск, твин-80, твердый жир «Hard Fat» до массы суппозитория 1,5 г(Кипферон Форте)	829333

Противовирусная активность образца препарата почти на 40% превышает противовирусную активность прототипа, содержащего только КИП и интерферон альфа-2b, а также иной состав вспомогательных компонентов. ME (международная единица) в фармакологии - это единица измерения количества вещества, основанная на биологической активности.

Способ производства заявляемого комплексного лекарственного препарата Кипферон Форте реализуется следующим образом.

Производство заявляемого лекарственного препарата Кипферон Форте происходит в несколько этапов:

подготовительные этапы - подготовка воздуха, подготовка дезинфицирующих растворов, подготовка технологического оборудования, подготовка технологической одежды, микробиологический мониторинг производственной среды, подготовка питательных сред осуществляются стандартными методами.

Кроме того, способ получения суппозиториев Кипферон Форте предусматривает следующие этапы:

Приготовление буферного раствора

Для приготовления стабилизирующего (буферного) раствора используют:

- Натрия хлорид (натрий хлористый) по ГОСТ 4233-77, квалификации «хч» с массовой долей основного вещества не менее 99,9%, прошедший входной контроль и соответствующий требованиям нормативной документации;

- Натрия гидрофосфата додекагидрат (натрий фосфорно-кислый двузамещенный 12-водный по ГОСТ 4172-76, квалификации «хч» с массовой долей основного вещества 99-101%, прошедший входной контроль и соответствующий требованиям нормативной документации;

- Натрия дигидрофосфата дигидрат (натрий фосфорно-кислый однозамещенный 2-водный) по ГОСТ 245-76, квалификации «чда», с массовой долей основного вещества не менее 99,9%, прошедший входной контроль и соответствующий требованиям нормативной документации.

Приготовленный раствор в количестве 350-400 мл разливают во флаконы для крови и кровезаменителей вместимостью 500 мл, закрывают резиновыми пробками, накрывают алюминиевыми колпачками, закатывают и стерилизуют в автоклаве при температуре (120±1)°С в течение 15 мин. Стабилизирующий раствор хранят при комнатной температуре в течение 30 дней.

Измельчение ингредиентов.

Измельчения требуют цинка глюконат и алоэ экстракт сухой, вводимые при производстве в суппозиторную основу в виде порошков. Указанные субстанции измельчаются на мельнице, затем передаются на следующую стадию.

Просеивание ингредиентов.

Просеивания требуют цинка глюконат и алоэ экстракт сухой. Данные субстанции вводятся в сухом виде в основу, а значит на качество суппозиториев повлияет размер частиц. Просеивание осуществляется на вибросите с диаметром отверстий 250 мкм.

Отвешивание ингредиентов.

Количество отвешиваемых компонентов, необходимое для получения серии препарата с регламентируемой средней массой суппозитория 1,4 г,рассматривают исходя из утвержденного состава, расходного коэффициента (процента потерь) и вместимости бункера дозирующей машины.

На весоизмерительном приборе последовательно проводится отвешивание измельченных и просеянных цинка глюконата и алоэ экстракта сухого, а также Тизоля. твердого жира, Твин-80 и пчелиного воска.

Подготовка рабочего раствора интерферона.

Субстанцию интерферона размораживают при комнатной температуре в течение 1-3 часов.

В простерилизованный флакон вносят расчетное количество стерилизованного стабилизирующего раствора и расчетное количество субстанции интерферона.

Флаконы закрывают простерилизованными резиновыми пробками, герметично укупоривают с помощью парафина.

Допускается хранение рабочего раствора интерферона в холодильнике при температуре от +2 до +8°С не более 7 суток.

Подготовка рабочего раствора КИП

Для приготовления рабочего раствора КИП используют иммуноглобулиновый комплексный препарат (КИП) для энтерального применения (сухой), или лиофилизат для приготовления раствора, или субстанцию иммуноглобулинового комплексного препарата (КИП) с содержанием сухого остатка 26-35%.

Количество иммуноглобулинового комплексного препарата (КИП), необходимого для получения серии препарата с регламентируемой средней массой суппозитория 1,4 г, рассчитывают исходя из утвержденного состава ФСП, сухого остатка иммуноглобулинового комплексного препарата (КИП), расходного коэффициента и вместимости бункера дозирующей машины.

Емкости с иммуноглобулиновым комплексным препаратом (КИП) перемещают в бокс подготовки активных субстанций.

На весах в емкость для смеси активных субстанций отвешивают рассчитанную навеску КИП. Стерилизованным мерным цилиндром отмеряют расчетное количество растворителя (стерилизованная вода очищенная - для КИП сухого и лиофилизата или стабилизирующий раствор - для субстанции КИП) и выливают в емкость с навеской субстанции КИП.

Перемешивают смесь до однородного состояния вручную при помощи лопатки из нержавеющей стали.

Приготовленную таким образом субстанцию КИП хранят в холодильнике при температуре +2-(+8)°С не более суток.

Подготовка жировой основы

Количество компонентов жировой основы, необходимых для получения серии препарата, с регламентируемой средней массой суппозитория 1,4 г рассчитывают исходя из утвержденного состава, расходного коэффициента и вместимости бункера дозирующей машины.

Компоненты жировой основы - твердый жир, воск пчелиный, прошедшие входной контроль и соответствующие требованиям нормативной документации, освобождают от упаковки и помещают в емкости из нержавеющей стали для измельчения компонентов, предварительно обработанные 70% paствором спирта этилового.

Измельчение осуществляют вручную при помощи инструментов из нержавеющей стали, откалывая куски размером 5-15 см. На весах делают навески измельченных компонентов жировой основы в соответствии с произведенными расчетами и помещают их в бак из нержавеющей стали для последующего их расплавления и стерилизации методом автоклавирования. Добавляют навеску полисорбата (Твин 80).

Стерилизацию проводят в автоклаве при температуре 121±1°С в течение 15 мин.

Бак с расплавленной и простерилизованной жировой основой аккуратно вынимают из автоклава, проверяют тест-индикаторы контроля режима стерилизации. Бак перемещают в термостат и хранят при температуре 57±2°С в течение суток.

Допускается использование жировой основы непосредственно после автоклавирования.

Получение суппозиторной массы.

Приготовленная расплавленная и стерилизованная жировая основа загружается в бункер гомогенизатора. Устанавливают соответствующие параметры работы гомогенизатора, включают его и перемешивают жировую основу на скорости 40 об/мин.

Отвешенный цинка глюконат и алоэ экстракт сухой последовательно вводят в расплавленную основу при включенном гомогенизаторе и перемешивают массу до образования однородной системы.

Затем производят введение жидкой фазы активных веществ в основу. Подготовленные, как описано выше, активные субстанции (рабочий раствор КИП и рабочий раствор интерферона) извлекают из холодильника. Выливают рабочий раствор интерферона в емкость с рабочим раствором КИП, добавляют туда гелеобразную массу Тизоля и перемешивают.

Полученную рабочую смесь интерферона, КИП и Тизоля добавляют в бункер гомогенизатора.

Гомогенизирование суппозиторной массы.

Полученную суппозиторную массу в бункере гомогенизатора доводят до температуры +38°С, тщательно перемешивают, после чего включают гомогенизатор до образования гомогенной массы.

Изготовление суппозиториев.

После получения гомогенной суппозиторной массы ее перемещают из гомогенизатора в бункер суппозиторной машины и приступают к операции розлива (дозированию) в индивидуальные упаковки (ячейки). Процесс дозирования ведут при непрерывном перемешивании, постепенно снижая скорость вращения мешалки со 180 об/мин до 120 об/мин в начале розлива, затем 130-120 об/мин в середине процесса и 130-100 об/мин к концу розлива. Температуру суппозиторной массы поддерживают на уровне 38+1°С.

После полного заполнения всех контейнеров (ячеек) их помещают для охлаждения в холодильный модуль на 15-25 минут (до полного застывания суппозиторной массы). Температуру в холодильном модуле устанавливают (10-20)±2°С.

После застывания суппозиторной массы осуществляется высокотемпературная запайка, маркировка и нарезка ленты с ячейками на блистеры.

Получаемый преп