Способ качественной экспресс-диагностики злокачественных новобразований костей верхней и нижней челюстей по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента

Способ качественной экспресс-диагностики злокачественных новобразований костей верхней и нижней челюстей по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента

Реферат

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу качественной экспресс-диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента, и может быть использовано в качественной экспресс-диагностике злокачественных новообразований органов полости рта в условиях стоматологических, онкологических и хирургических лечебных заведений.

Известен способ диагностики злокачественного новообразования органов полости рта по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента, включающий исследования плазмы венозной крови и ротовой жидкости пациента, при этом выполнение забора ротовой жидкости у пациента в утренние часы до или не ранее чем через 2 часа после приема пищи пациентом и после полоскания полости рта пациента кипяченой водой комнатной температуры, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторное центрифугирование при 1500 об/мин в течение 5 минут, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение стандартного иммуноэлектрохемилюминисцентного анализа на основе моноклональных антител, выполнение забора венозной крови пациента, получение плазмы крови в виде надосадочной жидкости после центрифугирования венозной крови пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут, выполнение стандартного иммуноэлектрохемилюминисцентного анализа плазмы крови, с последующим анализом результатов исследований (см. Кочурова Е.В. Значение онкомаркеров слюнной жидкости при плоскоклеточном раке органов полости рта. Автореферат диссертации к.м.н., Москва, 2008 г., с.28).

Однако известный способ при своем использовании имеет следующие недостатки:

- обладает недостаточной точностью дифференциальной диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей пациента в день обращения,

- обладает недостаточной чувствительностью дифференциальной диагностики,

- недостаточность вероятности выявления процесса злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей пациента, как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних,

- сложность подготовки пациента в определенных временных рамках для забора диагностического материала.

Задачей изобретения является создание способа качественной экспресс-диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента.

Техническим результатом является достижение значительного повышения точности дифференциальной диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей пациента в день обращения, достижение высокой чувствительности дифференциальной диагностики, достижение высокой вероятности выявления процесса злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей пациента, как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних, а также значительное упрощение подготовки пациента в определенных временных рамках для забора диагностического материала.

Технический результат достигается тем, что предложен способ качественной экспресс-диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента, включающий исследования плазмы венозной крови и ротовой жидкости пациента, при этом выполнение забора ротовой жидкости у пациента в утренние часы до или не ранее чем через 2 часа после приема пищи пациентом и после полоскания полости рта пациента кипяченой водой комнатной температуры, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторное центрифугирование при 1500 об/мин в течение 5 минут, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение стандартного иммуноэлектрохемилюминисцентного анализа на основе моноклональных антител, выполнение забора венозной крови пациента, получение плазмы крови в виде надосадочной жидкости после центрифугирования венозной крови пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут, выполнение стандартного иммуноэлектрохемилюминисцентного анализа плазмы крови, с последующим анализом результатов исследований, при этом венозную кровь и ротовую жидкость в любой последовательности забирают у пациента для исследований злокачественного новообразования, в качестве биомаркера в ротовой жидкости выбирают раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА), а в качестве биомаркера в плазме крови пациента выбирают нейронспецифическую енолазу / neuron-specific enolase, при содержании в ротовой жидкости пациента РЭА/СЕА в количестве 196,8-318,4 нг/мл и содержании в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 26,3-34,2 ед/мл, диагностируют саркому челюсти пациента, при содержании в ротовой жидкости пациента РЭА/СЕА в количестве 1228,2-1762 нг/мл и содержании в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 38,67-57,67 ед/мл, диагностируют плоскоклеточный рак челюсти пациента, затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента. При этом при необходимости кратковременного хранения венозной крови пациента перед выполнением анализа ее в количестве 5 мл добавляют в пробирку с 1 мл 0,14 М цитрата натрия, центрифугируют при 1500 об/мин в течение 5 минут, забирают плазму крови в виде над осадочной жидкости, размещают в пробирке «эпиндорф» и сразу замораживают в жидком азоте при температуре минус 190°C.

Способ осуществляют следующим образом. Ротовую жидкость и венозную кровь в любой последовательности забирают у пациента для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования. Выполняют забор ротовой жидкости пациента в утренние часы до или не ранее чем через 2 часа после приема им пищи и после полоскания полости рта пациентом кипяченой водой комнатной температуры. Ротовую жидкость пациента центрифугируют при 1500 об/мин в течение 5 минут, разбавляют ротовую жидкость физиологическим раствором в соотношении 1:10 и выполняют повторное центрифугирование при 1500 об/мин в течение 5 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациента размещают в кювету и выполняют стандартный иммуноэлектрохемилюминисцентный анализ на аппарате Elecsys 2010 фирмы «Рош-Москва» (Швейцария) на основе моноклональных антител.

Выполняют забор венозной крови пациента, получают плазму крови в виде надосадочной жидкости после центрифугирования венозной крови пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут. При этом при необходимости кратковременного хранения венозной крови пациента перед выполнением анализа ее в количестве 5 мл добавляют в пробирку с 1 мл 0,14 М цитрата натрия, центрифугируют при 1500 об/мин в течение 5 минут, забирают плазму крови в виде над осадочной жидкости, размещают в пробирке «эпиндорф» и сразу замораживают в жидком азоте при температуре минус 190°C.

Выполняют стандартный иммуноэлектрохемилюминисцентный анализ плазмы крови.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента. При этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости раково-эмбрионального антигена/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) группы клинического контроля принимают уровень 77,6-142,8 нг/мл.

Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента раково-эмбрионального антигена/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) в количестве 196,8-318,4 нг/мл, то диагностируют саркому челюсти пациента.

Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента раково-эмбрионального антигена/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) в количестве 1228,2-1762 нг/мл, то диагностируют плоскоклеточный рак челюсти пациента.

В качестве биомаркера при качественной экспресс-диагностики злокачественных новообразований верхней и нижней челюстей по количеству содержания биомаркеров в плазме крови выбирают нейронспецифическую енолазу / neuron-specific enolase и определяют ее количественное содержание в плазме крови пациента. При этом за количественное содержание биомаркера в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase группы клинического контроля принимают уровень 4,6-9,0 нг/мл.

Если определяют содержание в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 34,67-57.67 нг/мл, то диагностируют плоскоклеточный рак челюсти пациента.

Если определяют содержание в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 26,3-34,2 нг/мл, то диагностируют саркому челюсти пациента.

Затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента.

При этом в процессе выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным комбинированным, в том числе химиолучевым лечением пациента дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.

Среди существенных признаков, характеризующих предложенный способ качественной экспресс-диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента, отличительными являются:

- выполнение забора венозной крови и ротовой жидкости в любой последовательности у пациента для качественных экспресс- исследований злокачественных новообразований,

- выбор в качестве биомаркера в ротовой жидкости раково-эмбрионального антигена/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА), а в качестве биомаркера в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase,

- диагностирование при содержании в ротовой жидкости пациента РЭА/СЕА в количестве 196,8-318,4 нг/мл и содержании в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 26,3-34,2 ед/мл саркомы челюсти пациента,

- диагностирование при содержании в ротовой жидкости пациента РЭА/СЕА в количестве 1228,2-1762 нг/мл и содержании в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 38,67-57,67 ед/мл плоскоклеточного рака челюсти пациента,

- прогнозирование по полученным результатам определения содержания биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента тактику лечения пациента,

- при необходимости кратковременного хранения венозной крови пациента перед выполнением анализа ее в количестве 5 мл добавление в пробирку с 1 мл 0,14 М цитрата натрия, центрифугирование при 1500 об/мин в течение 5 минут, забор плазму крови в виде над осадочной жидкости, размещение в пробирке «эпиндорф» и сразу замораживание в жидком азоте при температуре минус 190°C.

Экспериментальные исследования предложенного способа качественной экспресс-диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента в клинических условиях показали его высокую эффективность. Способ качественной экспресс-диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента при своем использовании обеспечивает достижение значительного повышения точности дифференциальной диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей пациента в день обращения, обеспечивает достижение высокой чувствительности дифференциальной диагностики, обеспечивает достижение высокой вероятности выявления процесса злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей пациента, как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних, а также обеспечивает значительное упрощение подготовки пациента в определенных временных рамках для забора диагностического материала.

Реализация предложенного способа качественной экспресс-диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента иллюстрируется следующими клиническими примерами.

Пример 1. Пациент В., 55 лет, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «злокачественное новообразование верхней челюсти справа».

Ротовую жидкость и венозную кровь в любой последовательности забрали у пациента для качественных экспресс-исследований злокачественного новообразования. Выполнили забор ротовой жидкости пациента в утренние часы до приема им пищи и после полоскания полости рта пациентом кипяченой водой комнатной температуры. Ротовую жидкость пациента центрифугировали при 1500 об/мин в течение 5 минут, разбавили физиологическим раствором в соотношении 1:10 и выполнили повторное центрифугирование при 1500 об/мин в течение 5 минут. Выполнили забор венозной крови пациента и получили плазму крови в виде надосадочной жидкости после центрифугирования венозной крови пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости и плазмы крови пациента размещали в отдельные кюветы и выполнили стандартный иммуноэлектрохемилюминисцентный анализ на аппарате Elecsys 2010 фирмы «Рош-Москва» (Швейцария) на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования верхней челюсти справа по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбрали раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) и определили его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования верхней челюсти справа по количеству содержания биомаркеров в плазме крови выбрали нейронспецифическую енолазу / neuron-specific enolase и определили ее количественное содержание в плазме крови пациента.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) в количестве 1762 нг/мл, а также установили содержание в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 57,67 нг/мл. На основе полученных результатов диагностировали плоскоклеточный рак верхней челюсти справа. Клинический диагноз также подтвердили морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено комбинированное лечение: предоперационная лучевая терапия на первичный очаг и пути регионарного метастазирования, а затем хирургическое иссечение опухоли с последующей пластикой дефекта.

Пример 2. Пациент У., 72 лет, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «злокачественное новообразование нижней челюсти справа».

Ротовую жидкость и венозную кровь в любой последовательности забрали у пациента для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования. Выполнили забор ротовой жидкости пациента в утренние часы до приема им пищи и после полоскания полости рта пациентом кипяченой водой комнатной температуры. Ротовую жидкость пациента центрифугировали при 1500 об/мин в течение 5 минут, разбавили физиологическим раствором в соотношении 1:10 и выполнили повторное центрифугирование при 1500 об/мин в течение 5 минут. Выполнили забор венозной крови пациента и получили плазму крови в виде надосадочной жидкости после центрифугирования венозной крови пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости и плазмы крови пациента размещали в отдельные кюветы и выполнили стандартный иммуноэлектрохемилюминисцентный анализ на аппарате Elecsys 2010 фирмы «Рош-Москва» (Швейцария) на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования нижней челюсти справа по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбрали раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) и определили его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования нижней челюсти справа по количеству содержания биомаркеров в плазме крови выбрали нейронспецифическую енолазу / neuron-specific enolase и определили ее количественное содержание в плазме крови пациента.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) в количестве 1582,2 нг/мл, а также установили содержание в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 38,67 нг/мл. На основе полученных результатов диагностировали плоскоклеточный рак верхней челюсти справа. Клинический диагноз также подтвердили морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено комбинированное лечение: предоперационная лучевая терапия на первичный очаг и пути регионарного метастазирования, а затем хирургическое иссечение опухоли с последующей пластикой дефекта.

Пример 3. Пациент З., 44 года, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «злокачественное новообразование нижней челюсти слева».

Ротовую жидкость и венозную кровь в любой последовательности забрали у пациента для качественных экспресс-диагностики злокачественного новообразования. Выполнили забор ротовой жидкости пациента в утренние часы до приема им пищи и после полоскания полости рта пациентом кипяченой водой комнатной температуры. Ротовую жидкость пациента центрифугировали при 1500 об/мин в течение 5 минут, разбавили физиологическим раствором в соотношении 1:10 и выполнили повторное центрифугирование при 1500 об/мин в течение 5 минут. Выполнили забор венозной крови пациента и получили плазму крови в виде надосадочной жидкости после центрифугирования венозной крови пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут. При этом в связи с преклонным возрастом пациента возникла необходимость кратковременного хранения его венозной крови, поэтому перед выполнением анализа ее в количестве 5 мл добавили в пробирку с 1 мл 0,14 М цитрата натрия, центрифугировали при 1500 об/мин в течение 5 минут, забрали плазму крови в виде надосадочной жидкости, разместили в пробирке «эпиндорф» и сразу заморозили в жидком азоте при температуре минус 190°C. Впоследствии готовый для исследования материал ротовой жидкости и плазмы крови пациента размещали в отдельные кюветы и выполнили стандартный иммуноэлектрохемилюминисцентный анализ на аппарате Elecsys 2010 фирмы «Рош-Москва» (Швейцария) на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования нижней челюсти слева по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбрали раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) и определили его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования нижней челюсти слева по количеству содержания биомаркеров в плазме крови выбрали нейронспецифическую енолазу / neuron-specific enolase и определили ее количественное содержание в плазме крови пациента.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) в количестве 1228,2 нг/мл, а также установили содержание в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 46,9 нг/мл при 99,9% диагностической чувствительности. На основе полученных результатов диагностировали плоскоклеточный рак нижней челюсти слева. Клинический диагноз также подтвердили морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено комбинированное лечение: предоперационная лучевая терапия на первичный очаг и пути регионарного метастазирования, а затем хирургическое иссечение опухоли с последующей пластикой дефекта.

Пример 4. Пациентка Е., 28 лет, поступила в отделение с предположительным диагнозом: «злокачественное новообразование верхней челюсти справа».

Ротовую жидкость и венозную кровь в любой последовательности забрали у пациентки для качественных экспресс-исследований злокачественного новообразования. Выполнили забор ротовой жидкости пациентки в утренние часы не ранее чем через 2 часа после приема ею пищи и после полоскания полости рта пациенткой кипяченой водой комнатной температуры. Ротовую жидкость пациентки центрифугировали при 1500 об/мин в течение 5 минут, разбавили физиологическим раствором в соотношении 1:10 и выполнили повторное центрифугирование при 1500 об/мин в течение 5 минут. Выполнили забор венозной крови пациента и получили плазму крови в виде надосадочной жидкости после центрифугирования венозной крови пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости и плазмы крови пациентки размещали в отдельные кюветы и выполнили стандартный иммуноэлектрохемилюминисцентный анализ на аппарате Elecsys 2010 фирмы «Рош-Москва» (Швейцария) на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования верхней челюсти справа по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбрали раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) и определили его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования верхней челюсти справа по количеству содержания биомаркеров в плазме крови выбрали нейронспецифическую енолазу / neuron-specific enolase и определили ее количественное содержание в плазме крови пациентки.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки ракового раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) в количестве 302,7 нг/мл, а также установили содержание в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 34,2 нг/мл. На основе полученных результатов диагностировали саркому верхней челюсти справа. Клинический диагноз также подтвердили морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено хирургическое иссечение опухоли с последующей химиотераптей.

Пример 5. Пациентка Л., 52 года, поступила в отделение с предположительным диагнозом: «злокачественное новообразование верхней челюсти слева».

Ротовую жидкость и венозную кровь в любой последовательности забрали у пациентки для качественных экспресс-исследований злокачественного новообразования. Выполнили забор ротовой жидкости пациентки в утренние часы не ранее чем через 2 часа после приема ею пищи и после полоскания полости рта пациенткой кипяченой водой комнатной температуры. Ротовую жидкость пациентки центрифугировали при 1500 об/мин в течение 5 минут, разбавили физиологическим раствором в соотношении 1:10 и выполнили повторное центрифугирование при 1500 об/мин в течение 5 минут. Выполнили забор венозной крови пациента и получили плазму крови в виде надосадочной жидкости после центрифугирования венозной крови пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости и плазмы крови пациентки размещали в отдельные кюветы и выполнили стандартный иммуноэлектрохемилюминисцентный анализ на аппарате Elecsys 2010 фирмы «Рош-Москва» (Швейцария) на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования верхней челюсти слева по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбрали раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) и определили его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования верхней челюсти слева по количеству содержания биомаркеров в плазме крови выбрали нейронспецифическую енолазу / neuron-specific enolase и определили ее количественное содержание в плазме крови пациентки.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) в количестве 318,4 нг/мл, а также установили содержание в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase 26,3 нг/мл. На основе полученных результатов диагностировали саркому верхней челюсти справа. Клинический диагноз также подтвердили морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено хирургическое иссечение опухоли с последующей химиотераптей.

Пример 6. Пациент И., 48 лет, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «злокачественное новообразование нижней челюсти справа».

Ротовую жидкость и венозную кровь в любой последовательности забрали у пациента для качественных экспресс-исследований злокачественного новообразования. Выполнили забор ротовой жидкости пациента в утренние часы до приема им пищи и после полоскания полости рта пациентом кипяченой водой комнатной температуры. Ротовую жидкость пациента центрифугировали при 1500 об/мин в течение 5 минут, разбавили физиологическим раствором в соотношении 1:10 и выполнили повторное центрифугирование при 1500 об/мин в течение 5 минут. Выполнили забор венозной крови пациента и получили плазму крови в виде надосадочной жидкости после центрифугирования венозной крови пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости и плазмы крови пациента размещали в отдельные кюветы и выполнили стандартный иммуноэлектрохемилюминисцентный анализ на аппарате Elecsys 2010 фирмы «Рош-Москва» (Швейцария) на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования нижней челюсти справа по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбрали раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) и определили его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования нижней челюсти справа по количеству содержания биомаркеров в плазме крови выбрали нейронспецифическую енолазу / neuron-specific enolase и определили ее количественное содержание в плазме крови пациента.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки раково-эмбриональный антигена/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) в количестве 196,8 нг/мл, а также установили содержание в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 30,4 нг/мл при 99,9% диагностической чувствительности. На основе полученных результатов диагностировали саркому верхней челюсти справа. Клинический диагноз также подтвердили морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено хирургическое иссечение опухоли с последующей химиотераптей.

Установленный клинический диагноз впоследствии подтвердился результатами выполненной морфологической верификации предварительно взятого у пациента биопсийного материала из очага поражения.

Установленный клинический диагноз впоследствии подтвердился результатами выполненной морфологической верификации предварительной взятого у пациента биопсийного материала из очага поражения.

При этом при использовании предложенного способа качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования челюсти по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента в процессе выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным комбинированным, в том числе химиолучевым, лечением пациентов дополнительно осуществлялись контрольные определения содержания биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациентов, по результатам которых судили об эффективности выбранного лечения пациентов.

1. Способ качественной экспресс-диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента, включающий исследования плазмы венозной крови и ротовой жидкости пациента, при этом выполнение неинвазивного забора ротовой жидкости у пациента в утренние часы до или не ранее чем через 2 часа после приема пищи пациентом и после полоскания полости рта пациента кипяченой водой комнатной температуры, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторное центрифугирование при 1500 об/мин в течение 5 минут, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение стандартного иммуноэлектрохемилюминисцентного анализа на основе моноклональных антител, выполнение забора плазмы крови пациента в качестве надосадочной жидкости после центрифугирования венозной крови пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут и выполнение стандартного иммуноэлектрохемилюминисцентного анализа плазмы крови с последующим анализом результатов исследований, отличающийся тем, что венозную кровь и ротовую жидкость в любой последовательности забирают у пациента для исследований злокачественного новообразования, в качестве биомаркера в ротовой жидкости выбирают раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА), а в качестве биомаркера в плазме крови пациента выбирают нейронспецифическую енолазу/neuron-specific enolase, при содержании в ротовой жидкости пациента РЭА/СЕА в количестве 196,8-318,4 нг/мл и содержании в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы/neuron-specific enolase в количестве 26,3-34,2 ед/мл, диагностируют саркому челюсти пациента, при содержании в ротовой жидкости пациента РЭА/СЕА в количестве 1228,2-1762 нг/мл и содержании в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы/neuron-specific enolase в количестве 38,67-57,67 ед/мл, диагностируют плоскоклеточный рак челюсти пациента, затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что при необходимости кратковременного хранения венозной крови пациента перед выполнением анализа ее в количестве 5 мл добавляют в пробирку с 1 мл 0,14М цитрата натрия, центрифугируют при 1500 об/мин в течение 5 минут, забирают плазму крови в виде надосадочной жидкости, размещают в пробирке «эпиндорф» и сразу замораживают в жидком азоте при температуре минус 190°C.