Плтнккш- , tlxjifi^eci^as бйблйете^га
Патент 252266
Классы МПК
Плтнккш- , tlxjifi^eci^as бйблйете^га
Иллюстрации
Реферат
О П И С А Н И Е 252266
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Свае Соеетеннз
Социалистических
Республик
Зависимое от авт. свидетельства М—
Заявлено 17.VI I.1968 (№ 1258424/28-13) с присоединением заявки М—
Приоритет
Опубликовано 22.|Х.1969. Бюллетень ¹ 29
Дата опубликования описания 17.11.1970
Кл. 6а, 22/04
МПК С 12d
УДК 577.15.07(088.8) Комитет по делам изобретений н открытий при Совете Министров
СССР
АДСОРБЕНТ ДЛЯ ОЧИСТКИ ФЕРМЕНТЙЪ|Х ПРЕПАРАТОВ
Предмет изобретения
Изобретение относигся к области ферментной промышленности.
Для очистки ферментов широко попользуются различные адсорбенты, например, ионообменные смолы, гель фосфата кальция, гель гидрата окиси алюминия и др. Однако все эти адсорбенты не обладают специфичностью, так как во взаимодействии с ними не участвует активный центр фермента.
Цель изобретения — расширить ассортимент специфичных адсорбентов. Это достигается тем, что в качестве адсорбента для очистки ферментных препаратов применяются нерастворимые ингибиторы белковой природы, полученные путем химического взаимодействия белко вого ингибитора естественного происхождения, например из бобов сои с полимерным носителем, например целлюлозой.
Пример 1. Фермент-трипсин подвергают автолизу так, что его остаточная активность составляет в одном случае 44,2% и в другом
21,3 активности исходного препарата. Полученные автолизаты смешивают с нерастворимым ингибитором из бобов сои, затем ингибитор с адсорбироваиным ферментом отделяют центрифугированием, промывают и проводят диссоциацию соединения ингибитора с трипсином обработкой разоавленной НС1 рН 2,3.
Удельная активность трипсина после его элюпии с адсорбента, независимо от глубины первоначального автолиза, составляет 100 †10
5 от активности исходного неавтолизованного трипсина.
Пример 2. Препарат частично очищенный протеиназы микроорганизма Actinom ces fradial, имеющей важное, промышленное значе10 ние, растворяют в фосфатном буфере рН 7,8 и смешивают с препаратом нерастворимого ингибитора из .клубней картофеля. После центр 1фугирования и промывки с целью диссоииации соединения ингибитора с ферменгом про15 водят обработку 5М раствором мочевпны в фосфатном буфере рН 7,8.
При подобной обработке активность фермента, очищенного путем адсорбции и последующей элюции с нерасгворимого ингибитора, 20 в два раза выше активности исходного препарата.
25 Применение нерастворимого ингпбитора белковой природы в качестве адсорбента для очистки ферментных препаратов.