Способ снижения жесткости мембраны эритроцитов у больных раком шейки матки

Способ снижения жесткости мембраны эритроцитов у больных раком шейки матки

Реферат

Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии.

Известен метод увеличения доли фетального гемоглобина в крови (см. патент US №2011/0251149, опубл. 08.12.2010 г.), включающий введение указанному субъекту: a) 2,2-dimethylbutyrate в виде свободной кислоты, ее фармацевтически приемлемой соли или эфира; б) одного или нескольких агентов, которые выбираются из группы, состоящей из гидроксимочевины, децитабина и ингибитора HDAC, после введения которых доля фетального гемоглобина в крови субъекта увеличивается.

К причинам, препятствующим достижению указанного ниже технического результата при использовании известного способа, относится то, что способ не снижает жесткости мембраны эритроцитов у больных раком шейки матки (РШМ).

Известен способ лечения онкологических больных (см. патент РФ №2317832, кл. A61N 5/067, опубл. 27.02.2008 г.), включающий воздействие источником низкоинтенсивного лазерного излучения, определение индивидуальных параметров кровотока, времени воздействия лазера за сеанс. Кроме того, до начала каждого лазерного воздействия измеряют показатель микроциркуляции крови в тканях и число эритроцитов в капиллярной крови, при этом время воздействия лазера за сеанс определяют по формуле, включающий внутривенное низкоинтенсивное лазерное облучение крови.

К причинам, препятствующим достижению указанного ниже технического результата при использовании известного способа, относится то, что способ не снижает жесткость мембраны эритроцитов у онкологических больных.

Известен способ коррекции нарушенной функциональной активности гликопротеидных рецепторов эритроцитов (см. патент РФ №2394611, кл. A61N 5/02, опубл. 20.07.2010 г.), включающий облучение электромагнитными волнами терагерцового диапазона на частоте молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176-150,664 ГГц с плотностью мощности 0,2 мВт/см в течение 30 минут.

К причинам, препятствующим достижению указанного ниже технического результата при использовании известного способа, относится то, что способ не снижает жесткость эритроцитарной мембраны больных раком шейки матки (РШМ).

Жесткость мембраны эритроцитов определяет его структурно-функциональную организацию (Clan M.R. et al. The Red Cell Prodaction. Metabolism. Destruction //Blood. 1982. V.610. P.899-910).

В норме эритроциты легко деформируются, и эта способность позволяет им проникать в капилляры, диаметр которых значительно меньше диаметра самой клетки. Плотный контакт между стенкой капилляра и мембраной эритроцита облегчает обмен кислорода и CO₂, что способствует полноценному обеспечению организма кислородом.

Использование предлагаемого изобретения обеспечивает следующий технический результат: снижение жесткости мембраны эритроцитов у больных раком шейки матки.

Указанный технический результат при осуществлении изобретения достигается тем, что эритроциты пациентки с местно-распространенным раком шейки матки (Ib-IIa) по FIGO подвергают однократному фемтосекундному импульсному лазерному облучению с длиной волны 1,55 мкм в дозе 0,10 Дж/см² in vitro (в пробирке высотой 10 мм).

Проведенный заявителем анализ уровня техники, включающий поиск по патентам и научно-техническим источникам информации и выявление источников, содержащих сведения об аналогах заявленного изобретения, позволил установить, что заявитель не обнаружил аналог, характеризующийся признаками, тождественными всем существенным признакам заявленного изобретения. Определение из перечня выявленных аналогов прототипа, как наиболее близкого по совокупности существенных признаков аналога, позволило выявить совокупность существенных по отношению к усматриваемому заявителем техническому результату отличительных признаков в заявленном способе, изложенных в формуле изобретения.

Следовательно, заявленное изобретение соответствует условию «новизна».

Жесткость мембраны эритроцитов оценивали методом сканирующей зондовой микроскопии (СЗМ). Использовались фирменные кремниевые зонды с жесткостью 0,2 N/m, радиус закругления примерно 50 нм. Эритроциты сканировались в полуконтактном режиме со стекла. Ригидность мембран оценивалась по модулю Юнга (см. Henderson R.M. Pushing, pulling, dragging, and vibrating renal epithelia by using atomic force microscopy / R.M Henderson, H. Oberleithner // Am J. Physiol Renal Physiol. - 2000. May; 278(5). - P.689 - 701). При этом жесткость эритроцитов доноров составила 360,8±14,13 Па. Жесткость эритроцитов больных с местно-распространенным РШМ составила 433,0±7,67 Па. Под влиянием фемтосекундного лазерного излучения (ФСЛИ) жесткость эритроцитарной мембраны изменяется дозозависимо. Снижение жесткости эритроцитов больных РШМ и без явлений оксидативного стресса имело место при дозе ФСЛИ 0,10 Дж/см².

Методом СЗМ была изучена жесткость мембран эритроцитов 19 первичных больных с местноограниченным РШМ, находящихся на обследовании в гинекологическом отделении Ульяновского областного клинического онкологического диспансера. Эритроциты доноров и эритроциты больных РШМ были подвергнуты однократному ФСЛИ в возрастающей дозе. Одновременно в облученных эритроцитах оценивали морфологию и параметры оксидативного стресса. Результаты оценки жесткости эритроцитарной мембраны представлены в табл.1.

Возникновение оксидативного стресса в эритроцитах оценивали по уровню продукта перекисного окисления липидов - малонового диальдегида (МДА) (Андреева Л.И., Кожемякин Л.А., Кишкун А.А. Модификация метода определения перекисей липидов в тесте с тиобарбитуровой кислотой // Лаб. дело. - 1988. №11. С.41-43) и активности ферментативного звена антиоксидантной системы (АОС) (Карпищенко А.И. Медицинские лабораторные технологии (справочник). - СПб.: «Интермедика»; 1999. - 656 с.). О наличии оксидативного стресса судили по возрастанию уровня МДА (см. табл.2) при одновременном снижении или сохранении неизменным уровня активности компонентов АОС (Лю Б.Н. Старение, возрастные патологии и канцерогенез (кислородно-перекисная концепция). - Алматы: КазНТУ, 2003. - 706 с.).

Как следует из приведенных данных, жесткость эритроцитов больных была снижена при дозах лазерного излучения от 0,10 Дж/см² до 2,7 Дж/см². Однако при дозе 0,10 Дж/см² имеет место максимальное снижение жесткости мембраны эритроцитов и нет явлений оксидативного стресса, приводящего к разрушению эритроцитов и в разной степени выраженного при остальных использованных дозах лазерного излучения.

Таблица 1
Жесткость эритроцитов при действии различных доз ФСЛИ
Фригидность, Па	Контроль	0,27 Дж/см2	0,10 Дж/см2	0,81 Дж/см2	1,35 Дж/см2	0,29 Дж/см2	2,7 Дж/см2	0,48 Дж/см2	0,96 Дж/см2
Контроль	360,8	561,7	515,9	569,6	550,1	481,6	496,3	382,0	937,4
±	±	±	±	±	±	±	±	±
14,13	22,88*	14,96*	22,62*	29,95*	19,32*	26,43*	17,72	33,09*
Ib-IIа РШМ	433,0	523,8	315,2	348,7	378,4	366,7	459,2	360,7	341,3
±	±	±	±	±	±	±	±	±
7,67	30,43*	16,51*	12,14	16,14	27,33	26,74	19,82*	11,15*
Примечание: * - данные статистически значимо отличные от таковых в контрольной группе.

Таблица 2
Уровень МДА и ферментов АОС эритроцитов больных местноограниченным РШМ после ФСЛИ in vitro
Параметры	Контроль	0,27 Дж/см2	0,10 Дж/см2	0,81 Дж/см2	1,35 Дж/см2	0,29 Дж/см2	2,7 Дж/см2	0,48 Дж/см2	0,96 Дж/см2
МДА,мкмоль/л	Доноры	446,6±28,76	490,6±36,78	509,04±24,27*	469,7±28,66	510,3±38,81*	503,9±21,45*	450,6±44,09	429,1±23,03	486,1±18,45
РШМ Ib-IIa	485,6±47,31	933,5±47,25*	580,5±31,05*	784,13±37,8*	866,21±80,26*	580,45±60,8*	513,9±55,2	655,31±44,91*	868,5±59,38*
СОД, у.е.	Доноры	0,83±0,121	2,14±0,223*	2,21±0,140*	1,43±0,200*	2,03±0,216*	1,34±0,206*	1,93±0,143*	1,69±0,194*	1,91±0,239*
РШМ Ib-IIa	0,77±0,096	1,35±0,084*	1,48±0,103*	0,86±0,094	1,56±0,072*	1,25±0,046*	1,55±0,107*	1,62±0,089*	1,85±0,136*
ГТ, ммоль/мин/л	Доноры	0,131±0,015	0,126±0,026	0,140±0,032	0,136±0,021	0,126±0,017	0,121±0,025	0,136±0,018	0,140±0,025	0,126±0,017
РШМ Ib-IIa	0,162±0,018	0,155±0,020	0,149±0,020*	0,157±0,017	0,147±0,018*	0,145±0,019*	0,149±0,015*	0,147±0,017*	0,152±0,019
Каталаза, ммоль/мин/л	Доноры	0,116±0,026	0,092±0,010*	0,122±0,031	0,101±0,009	0,094±0,011*	0,087±0,017*	0,082±0,015*	0,090±0,015*	0,075±0,013*
РШМ Ib-IIa	0,084±0,007	0,130±0,035*	0,112±0,022	0,060±0,009	0,077±0,013	0,132±0,035*	0,092±0,021	0,073±0,013	0,105±0,013
Примечание:* - данные статистически значимо отличные от аналогичных в контрольной группе.

Способ снижения жесткости мембраны эритроцитов у больных раком шейки матки (РШМ), заключающийся в том, что эритроциты пациентки с местно-распространенным раком шейки матки (Ib-IIa) по FIGO подвергают однократному фемтосекундному импульсному лазерному излучению с длиной волны 1,55 мкм в дозе 0,10 Дж/см² in vitro в пробирке.