Конъюгаты антагониста пептида аналога бомбезина

Конъюгаты антагониста пептида аналога бомбезина

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Введение

Изобретение относится к терапевтическим или диагностическим/визуализирующим радиофармацевтическим средствам, препарату и их применению, где терапевтические или диагностические радиофармацевтические средства определяются как связывающие фрагменты, имеющие сродство к и способные связываться с рецепторами бомбезина и более предпочтительно с рецептором гастрин-высвобождающему пептида (GRP). Связывающие фрагменты метят с помощью металл-комплексообразующей группы для альфа-, бета-, гамма- и позитрон-испускающих изотопов. Применение охватывает обработку субъекта, имеющего новообразование, что включает стадию введения субъекту эффективного количества терапевтического радиофармацевтического средства, имеющего металл, хелатированный с хелатообразующей группой, присоединенной к фрагменту, способному связываться с рецепторами бомбезина и, более предпочтительно, с рецептором гастрин-высвобождающего пептида (GRP), который сверхэкспрессируется на опухолевых клетках. Применение включает диагностирование или визуализацию субъекта, имеющего новообразование, используя диагностическое/визуализирующее радиофармацевтическое средство, имеющее металл, хелатированный с хелатообразующей группой, присоединенной к фрагменту, способному связываться с рецепторами бомбезина и, более предпочтительно, с рецептором гастрин-высвобождающего пептида (GRP), который сверхэкспрессируется на опухолевых клетках. Способ включает создание терапевтического или диагностического соединения из соединения-предшественника, включающего металл-хелатообразующую группу, ковалентно связанную с фрагментом, способным связываться с рецепторами бомбезина и, более предпочтительно, с рецептором гастрин-высвобождающего пептида (GRP).

Предпосылки создания изобретения

При создании эффективного радиофармацевтического индикатора для применения в качестве диагностического средства, является чрезвычайно важным, чтобы лекарственные средства имели подходящие нацеливающие и фармакокинетические свойства в условиях in vivo. Fritzberg и др. (1992, J. Nucl. Med., 33:394) дополнительно указывают на то, что радионуклидная химия и ассоциированные связывания нуждаются в оптимизации присоединения и мечения химических модификаций носителя биологической молекулы. Следовательно, тип радионуклида, тип биомолекулы и способ, используемый для их связывания друг с другом, могут оказывать очень важное влияние на свойства радиоактивного индикатора.

Пептиды являются биомолекулами, которые принимают чрезвычайно важное участие во многих физиологических процессах, включая действия в качестве нейромедиаторов, гормонов и антибиотиков. В исследованиях было показана их значимость в таких областях, как нейробиология, иммунология, фармакология и клеточная биология. Некоторые пептиды могут действовать в качестве химического мессенджера. Они связываются с рецептором на поверхности клетки-мишени и биологическое действие лиганда передается в целевую ткань. Следовательно, свойство связывания лиганда со специфическим рецептором может использоваться путем мечения лиганда с помощью радионуклида. Теоретически, высокая аффинность лиганда к рецептору облегчает удерживание радиоактивно меченного лиганда в тканях, экспрессирующих рецептор. Тем не менее, в настоящее время все еще проводятся исследования относительно того, какие пептиды могут быть эффективно мечены и в каких условиях следует вводить метку. Хорошо известно, что специфичность рецептора к пептиду лиганда может изменяться при осуществлении химической реакции. Поэтому необходимо определить оптимальную пептидную конструкцию.

Опухоли сверхэкспрессируют рецепторы различных типов, с которыми специфически связываются пептиды. В следующих публикациях Boerman и др., Seminar in Nuclear Medicine, 2000, 30 (3), 195); Reubi и др. J. Nucl. Med., 2005, 46, (доп.1) 67S; Reubi, J.C., Endocrine Reviews, 2003, 24 (4), 389 приведен неполный перечень пептидов, которые специфически связываются с рецепторами поверхности клеток в новообразованиях, то есть, соматостатин, вазоактивный пептид кишечника (VIP), бомбезин, связывающийся с рецептором гастрин-высвобождающего пептида (GRP), гастрин, холецистокинин (ССК) и кальцитонин.

Потенциальная полезность специфичных к рецепторам пептидов, меченных металлом, для сцинтиграфической визуализации и лучевой терапии поясняется на примерах аналогов соматостатина, например, ¹¹¹In-DTPA конъюгированный Октреотид, разрешенное FDA диагностические визуализирующее средство, Octreoscan®, которое выпускается Covidien в США (Lowbertz и др., Seminars in Oncology, 1994, 1) и Reubi и др., J. Nucl. Med., 2005, 46, 67S-75S и ссылки, приведенных в этих источниках, соответственно. Октреотид и его аналоги ковалентно связаны с визуализирующими изотопами некоторых металлов (^99mTc, ¹¹¹In, ⁶⁸Ga) и с терапевтическими изотопами металлов (¹⁰⁵Rh, ^186/188Re, ¹⁵³Sm, ⁹⁰Y, ¹⁶⁶Но, ¹⁷⁷Lu). Конъюгаты, меченные металлами, специфически связываются с рецептором, и при связывании с рецептором, конструкция интернализируется рецептором и меченные металлом специфические для рецептора пептиды или их метаболиты захватываются клетками-мишенями.

Вышеуказанный принцип в дальнейшем распространяется на пептиды, авидные к рецептору GRP (пептиды, которые обладают высокой аффинностью к рецептору), в которых для сцинтиграфической визуализации и лучевой терапии используются агонисты бомбезина, конъюгированные с металлами. (Smith и др., Anticancer Res,, 23 (2003), 63-70; Baidoo и др., Bioconjug. Chem., 9 (1998), 218-225; Gali и др., Bioconjug. Chem., 12 (2001), 354-363; Smith и др., Bioconjug. Chem., 14 (2003), 93-102, Cancer Res., 63 (2003), 4082-4088; Rogers и др., In M.Nicolini и U.Mazzi, Editors, Technetium, rhenium and other metals in chemistry and nuclear medicine, SGE Editoriali, Italy (1999), 519-525; Zhang и др., Cancer Res., 64 (2004), 6707-6715; Lantry и др., EANM, Helsinki (Finland) (2004); Under и др., J. Nucl. Med., 45, (2004) (5), 169P [реферат 482]. Chen и др., J. Nucl. Med., 45 (2004), 1390-1397; Johnson и др., Cancer Biother Radiopharm. 2006, 21(2), 155-66, Smith и др., Nucl. Med. Biol., 2005, 32 733-40).

В Chen и др. (Appl. Radial, hot., 2007, (In Press)), Waser и др. (Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. 2007 34, 95-100) и Lantry и др. (J. Nucl. Med., 2006, 47, 1144-52) описали визуализацию и радиотерапию с помощью агониста бомбезина, ¹⁷⁷Lu-DOTA, связанного с -NH-CH₂-CO-[4-аминобензоил]-QWAVGHLM-NH₂))(¹⁷⁷Lu-AMBA).

Некоторые патенты и патентные заявки относятся к агонистам бомбезина, меченным металлами. Volkert и др. (US 2007/0065362 А) заявляют агонисты бомбезина, меченные металлами общей структуры

Фрагмент, меченный металлом-Спейсерная группа-агонист бомбезина для визуализации и терапевтического применения. Другие патенты и патентные заявки этих же изобретателей включают: US 6,921,526 В (2005), US 7,060,247 В, US 7,147,838 В (2006) и WO 2002/087631 A1.

Уровень техники

Принцип, лежащий в основе выбора агонистов в качестве радиофармацевтического средства во всех вышеуказанных публикациях, состоит в том, что они продуцируют или проявляют ответ с помощью GRP рецепторов при взаимодействии, где радиофармацевтическое средство после этого интернализируется внутрь клетки с помощью эндоцитоза. GRP антагонисты противодействуют эффекту агониста и не интернализируются в клетки и, следовательно, полагают, что антагонисты не являются пригодными для радиосцинтиграфической визуализации и радиотерапевтических целей. Вплоть до настоящего времени общепринятое мнение состояло в разработке соединений со свойствами хорошей интернализации радиоактивного лиганда, что приводило к высокому накоплению в условиях in vivo радиоактивных лигандов в опухолях, что, как полагали, было необходимым для оптимальной визуализации и радионуклидной терапии в условиях in vivo. Из молекулярно-фармакологических исследований хорошо известно, что эффективная интернализация обычно обеспечивается агонистами (Bodei и др., J. Nucl. Med., 2006;47, 375-377; Koenig и др.. Trends Pharmacol. Sci., 1997; 18, 276-287, Cescato и др., J. Nucl. Med., 2006, 47, 502-511. Ginj и др., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2006; 103, 16436-16441) и недавно, было показано, что для рецепторов соматостатина, высокоаффинные антагонисты рецепторов соматостатина, меченные металлами, плохо интернализируются в опухолевые клетки и обеспечивают эквивалентное или даже лучшее в условиях in vivo поглощение в опухоль на моделях опухолей у животных по сравнению с соответствующими агонистами, которые великолепно интернализуются. GRP рецепторы сверхэкспрессируются в некоторых новообразованиях (Cornelio и др., Ann. Onco., 2007, 18, 1457-1466 и ссылки, приведенные в этом источнике), таких как рак и метастазы предстательной железы, рак и метастазы молочной железы, желудочно-кишечные стромальные опухоли, мелкоклеточный рак легкого, почечноклеточный рак, нейроэндокринные опухоли желудочно-кишечного тракта и поджелудочной железы, плоскоклеточный рак головы и шеи, нейробластомы и плоскоклеточный рак пищевода. GRP рецепторы также свырхэкспрессируются в связанных с опухолями кровеносных сосудах рака яичников, эндометрия и поджелудочной железы человека. (Fleischmann и др., Cell One., 2007, 29, 421-33). Следовательно, чрезвычайно важным является создание потенциальных радиофармацевтических средств с антагонистическими свойствами для визуализации и радиотерапии.

Jensen и др. (Pharma. Reviews, 2008 (в печати)) недавно описали фармакологию рецепторов трех различных подтипов рецептора бомбезина, где GRP рецептор относится к подтипу 2.

В недавней публикации Cescato и др. (J. Nucl. Med., 2008, 49, 318-26) показали, что ^99mTc-N₄-меченный антагонист бомбезина может быть предпочтительным по сравнению с агонистами для нацеливания на опухоли.

Более ранние изобретения в области соединений, нацеленных на GRP-рецептор, описаны в WO 2007/109475 А2, WO 2007/095443 А2, US 2008/0008649 A1 и US 7,226,577 B2 с хелатообразующим металлом-линкером-бомбезином с общей схемой, представленной ниже.

Метал-Хелатор-Линкер-Аналог бомбезина

В соответствии с WO 2007/095443 А2, L70 образец с предпочтительной последовательностью ¹⁷⁷Lu-DOTA-Gly-аминобензоил-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH₂ проявляет себя как агонист, где измеряют поглощение через 1 и 24 часа. Поглощение не является оптимальным для терапевтических целей и нуждается в улучшении.

Кроме этих патентов и заявок, были опубликованы доклинические и клинические исследования (Waser и др., Eur. J. Nucl. Medicine, 2007, 34, 95-100; J. Nucl. Med., 2006, 47, 1144-52).

В соответствии с выбором антагониста, который нацелен на GPR рецептор в различном сайте с высоким сродством, в настоящем изобретении было показано, что комбинация стратегии спейсера приводит к неожиданно высокому и персистирующему поглощению опухолями, в сочетании с низким поглощением и быстрым клиренсом в органах, не являющихся мишенями. В сравнительном исследовании, наблюдали значительно более высокое поглощение (>2X) в опухоли при использовании сходного линкера. Исходя из исследований в условиях in vitro, подтверждающих достоверность антагонистических свойств аналогов бомбезина, было обнаружено, что даже после добавления N-концевого спейсера, хелатора и металла, эти антагонистические действия сохраняются и передаются с очень хорошими характеристиками в условиях in vivo, что касается соотношений опухоль-фон.

Таким образом, задачей настоящего изобретения является обеспечение новых конъюгатов антагониста пептида бомбезина, которые проявляют высокое поглощение и высокую стабильность в условиях in vivo (сыворотка и ткани человека).

Сущность

Описание изобретения

В первом аспекте, изобретение относится к конъюгатам антагониста пептида аналога бомбезина, которые селективно связываются с рецепторами бомбезина и более предпочтительно с рецептором GRP без запуска интернализации в клетку и без передачи сигналов путем мобилизации кальция, при этом противодействуя эффектам, индуцированным агонистом в этих двух системах, где конъюгат антагониста пептида аналога бомбезина имеет общую формулу (I):

где

x представляет собой целое число от 1 до 3,

n представляет собой целое число от 1 до 6,

А представляет собой хелатор металла, содержащий по меньшей мере один радионуклидный металл, предпочтительно пригодный для диагностического или терапевтического применения, более предпочтительно для визуализации или лучевой терапии,

В представляет собой спейсер, связанный с N-концом С или ковалентную связь,

С представляет собой антагонист пептида аналога бомбезина с последовательностью С-1-С-4, где

С-1: Xaa₁ ⁶-Gln⁷-Trp⁸-Ala⁹-Val¹⁰-Xaa₂ ¹¹-His^l2-Xaa₃ ¹³-Xaa₄ ¹⁴-ZH,

где

Xaa₁ представляет собой D-Phe, D-Cpa, D-Tyr, D-Trp или остаток, имеющий любую из формул, представленных ниже:

К представляет собой F, Cl, I, или NO₂,

Xaa₂ представляет собой Gly или β-Ala,

Хаа₃ представляет собой статин, аналоги и изомеры статина, 4-Am, 5-МеНрА, 4-Am, 5-МеНхА или α-замещенные аминокислоты,

Хаа₄ представляет собой Leu, Cpa, Cba, CpnA, Cha, t-buGly, tBuAla, Met, Nle, или изо-Bu-Cly, и

Z представляет собой NH или О;

С-2: Xaa₁ ⁶-Gln⁷-Trp⁸-Ala⁹-Val^l0-Xaa₂ ¹¹-His^l2-Leuψ(CHOH-CH₂)-(CH₂)₂-CH₃,

где

Leuψ(СНОН-СН₂)-(СН₂)₂-СН₃ представляет собой

Xaa₁ представляет собой D-Phe, D-Cpa, D-Tyr, D-Trp или остаток, имеющий любую из формул, представленных ниже:

и

К представляет собой F, Cl, I, или NO₂,

Xaa₂ представляет собой Gly или β-Ala;

С-3: Xaal⁶-Gln⁷-Trp⁸-Ala⁹-Val^l0-Xaa₂ ¹¹-His¹²-Xaas¹³-Хаа₆ ¹⁴-ZH,

где

Xaa₁ представляет собой D-Phe, D-Cpa, D-Tyr, D-Trp или остаток, имеющий любую из формул, представленных ниже:

K представляет собой F, Cl, I, или NO₂,

Хаа₂ представляет собой Gly или β-Ala,

Хаа₅ представляет собой Leuψ-CH₂NH-,

Хаа₆ представляет собой Cys, Phe, Trp, Tpi или Тас,

где Tpi и Тас имеют следующие значения:

и Z представляет собой NH, или О;

С-4: Xaa₁ ⁶-Gln⁷-Trp⁸-Ala⁹-Val^l0-Xaa₂ ^1l-His¹²-Xaa₇,

где

Xaa₁ представляет собой D-Phe, D-Cpa, D-Tyr, D-Trp или остаток, имеющий любую из формул, представленных ниже:

K представляет собой F, Cl, I, или NO₂,

Xaa₂ представляет собой Gly или β-Ala,

Xaa₇ представляет собой Leu-O-Алкил, или Leu-NH-алкил.

Изобретение также относится к их фармацевтически приемлемым солям этих конъюгатов антагониста пептида аналога бомбезина неорганических или органических кислот, а также к гидратам, комплексам, сложным эфирам, амидам, сольватам и пролекарствам этих соединений, имеющих общую химическую формулу (I).

Описание А (хелатор металла):

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения, хелатор металла (А) представляет собой хелатор металла для трехвалентных металлов или для пятивалентных металлов и их близкие аналоги.

Предпочтительно, хелатор металла (А) для трехвалентных металлов выбирают из группы, включающей:

Хелаторы на основе DOTA, NODASA, NODAGA, NOTA, DTPA, EDTA, ТЕТА и TRITA и их близкие аналоги,

где

DOTA представляет собой 1,4,7,10-тетразациклододекан-N, N',N",N'" тетрауксусную кислоту,

DTPA представляет собой диэтилентриаминпентауксусную кислоту,

EDTA представляет собой этилендиамин-N,N'-тетрауксусную кислоту,

ТЕТА представляет собой 1,4,8,11-тетраазациклодо декан-1,4,8,11-тетрауксусную кислоту,

и

NOTA представляет собой 1,4,7-триазациклононанацетилацетоуксусную кислоту.

Более предпочтительно, хелатор металла (А) для трехвалентных металлов выбирают из группы, включающей:

хелаторы на основе DOTA, NOTA, DTPA и ТЕТАи их близкие аналоги.

Структуры этих хелатообразующих лигандов в их полностью депротонированной форме представлены ниже.

Еще более предпочтительно, хелатор металла (А) для трехвалентных металлов выбирают из группы, включающей DTPA (диэтилентриаминпентауксусная кислота) и полиаза-поликарбоксилат макроциклы, такие как DOTA (1,4,7,10-тетразациклододекан-N N',N",N" тетрауксусная кислота) и их близкие аналоги.

Предпочтительно, хелатор металла (А) для пятивалентных металлов выбирают из группы, включающей

2-гидразино никотинамид (HYNIC), N₄-xenaTOpbi, N₄-X (N₄ может быть линейным или макроциклическим и Х может представлять собой азид амин, ОН, галоген, о-, м-, n-амино бензил метапаракарбоксибензил, и карбокси (Nock, В. и др. (2003 [^99mTc]Demobesin 1, a novel bombesin analogue for GRP receptor-targeted tumour imaging. Eur. I. Nucl. Mol. Imaging, 30, 247-258)), Десферриоксамин (DFO), и N_rS_(4-r) хелаторы.

и

где

R₁-R₁₅ независимо друг от друга представляют собой атомы водорода или (C₁-C₄) алкильные группы,

где, в фрагменте вышеприведенной формулы, t представляет собой 1 или 2 или 3 и по меньшей мере один из атомов углерода в указанном фрагменте замещен с помощью Y или незамещен с помощью Y,

R₁₆ представляет собой атом водорода или CO₂ (C₁-С₄)алкильную группу;

R₁₇ и R₁₈ независимо друг от друга представляют собой (C₁-C₄) алкильные группы или фенильные группы;

R₁₉ представляет собой СН₂-СООН или его функциональное производное;

Е представляет собой (C₁-С₄)алкилен, или фенилен;

необязательно (C₁-С₄)алкилен, замещенный с помощью СО₂-алкила, СН₂-СОалкила, CONH₂, или CONHCH₂-CO₂-алкила;

необязательно фенилен, замещенный с помощью СО₂-алкила, где алкильные группы имеют от 1 до 4 атомов углерода;

G представляет собой NH или S;

Y представляет собой функциональную группу, способную связываться со свободной аминогруппой пептида (М-конца) или со спейсером; и Z' представляет собой S или О.

N₄-хелаторы предпочтительно представляют собой,

где m представляет собой целое число от 1 до 4.

N_rS_(4-r) хелаторы определяются, где r представляет собой целое число от 1 до 4.

Указанная функциональная группа Y предпочтительно включает изоцианато, азотиоцианато, формил, галонитрофенил, диазоний, эпокси, трихлор-s-триазинил, этиленимино, хлорсульфонил, алкоксикарб-имидоил, (замещенный или незамещенный) алкилкарбонилоксикарбонил, алкилкарбонилимидазолил, сукцинимидо-оксикарбонил; где указанная группа присоединена к (C₁-C₁₀) углеводородному бирадикалу. Подходящими примерами углеводородных бирадикалов являются бирадикалы, производные бензола, (C₁-С₆) алканов, (С₂-С₆) алкенов и (С₁-С₄)-алкилбензолов, и их близкие аналоги.

Предпочтительно N_t(4-t) хелаторы выбирают из группы, включающей хелаторы на основе бисамино бистиола (ВАТ) для радионуклидного металла технеция, меркапто-ацетил-глицил-глицил-глицин (MAG3) для радионуклидного металла технеция и их близкие аналоги.

Более предпочтительно, хелатор металла (А) для пятивалентных металлов выбирают из группы, включающей

и их близкие аналоги,

где R₁-R₁₉, Z', Y, G и t имеют значения, указанные выше.

Предпочтительно, r представляет собой целое число от 2 до 4 и более предпочтительно r представляет собой 2 или 3.

Предпочтительно, m представляет собой целое число от 1 до 2, более предпочтительно m представляет собой 1.

Хорошо известные хелаторы металлов, такие как линейные, макроциклические, тетрапиридиновые и N₃S, N₂S₂ или N₄ хелаторы описаны в US 5,367,080 A, US 5,364,613 А, US 5,021,556 A, US 5,075,099 A, US 5,886,142 А, раскрытие которых полностью включено в настоящую заявку в качестве ссылки.

Хорошо известные хелаторы металлов, такие как хелаторы на основе HYNIC, DTPA, EDTA, DOTA, ТЕТА, бисамино бистиола (ВАТ), описаны в US 5,720,934 А, раскрытие которого полностью включено в настоящую заявку в качестве ссылки.

Хорошо известные хелаторы металлов, такие как Десферриоксамин (DFO), описаны Doulias и др. (2003) Endosomal and lysosomal effects of desferrioxoxamine: protection of HeLa cells from hydrogen peroxide-induced DNA damage and induction of cell-cycle arrest. Free Radic. Biol. Med., том 35, выпуск 7:719-28.

Доступны различные хелатообразующие средства и они описаны Banerjee и др., (Nucl. Med. and Biology, 2005, 32, 1-20 и ссылки, приведенные в это источнике), которые включены в настоящую заявку путем ссылки.

2-гидразино никотинамид (HYNIC) представляет собой другой класс хелатообразующей группы (А), в присутствии солиганда, который широко используется для инкорпорации ^99mTc и ^{186, 188}Re (Schwartz м др. Bioconj. Chem., 1991. 2, 333-6; Babich u др., J Nucl. Med., 1993, 34, 1964-70; Nucl. Med. Biol., 1995, 22, 25-30; Nucl. Med. Biol., 1995, 22, сс.32, сс.1-10)

DTPA используется в Octreoscan® (выпускаемый на рынок Covidian) для комплексообразования ¹¹¹In и некоторые модификации описаны в литературе (Brechbiel и др., Biocon. Chem., 1991, 2, 187-194; Li и др., Nucl. Med. Biol., 2001, 28, 145-154).

Хелаты DOTA типа для применения при лучевой терапии описаны Tweedle и др., Патент US 48885363. Другие полиаза макроциклы для хелатообразования с изотопами трехвалентных металлов описаны Maecke и др. в Bioconj. Chem., 2002, 13, 530 и включены в настоящую заявку путем ссылки.

N₄-хелаторы, ^99mTc-N₄-хелатор используется для мечения пептидов в случае минигастрина для нацеливания на ССК-2 рецепторы (Nock и др., J. Nucl. Med., 2005, 46, 1727-36).

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения, радионуклидный металл пригоден для комплексообразования с хелатором металла и приводит к получению радиоактивного хелатора металла для визуализации. Предпочтительно, радионуклидный металл выбирают из группы, включающей ^133mIn, ^99mTc, ⁶⁷Ga, ⁵²Fe, ⁶⁸Ga, ⁷²As, ¹¹¹In, ⁹⁷Ru, ²⁰³Pb, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁵¹Cr, ^52mMn, ¹⁵⁷Gd, ¹²³I, ¹²⁴I, ¹³¹I, ⁷⁵Br, ⁷⁶Br, ⁷⁷Br, ⁶⁴Cu и ⁸²Br. Более предпочтительно, радионуклидный металл выбирают из группы, включающей ^99mTc, ⁶⁷Ga,⁶⁸Ga, ¹¹¹In, и ¹²³I. Еще более предпочтительно радионуклидный металл представляет собой ⁶⁸Ga. Еще более предпочтительно радионуклидный металл представляет собой ^99mTc.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения, радионуклидный металл пригоден для комплексообразования с хелатором металла и приводит к получению радиоактивного хелатора металла для лучевой терапии. Предпочтительно, радионуклидный металл выбирают из группы, включающей ¹⁸⁶Re, ⁹⁰Y, ⁶⁷Cu, ⁶⁸Ga, ⁶⁹Er, ¹²¹Sn, ¹²⁷Те, ¹⁴²Pr, ¹⁴³Pr, ¹⁹⁸Au, ¹⁹⁹Au, ¹⁶¹Tb, ¹⁰⁹Pd, ¹⁸⁸Rd, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ⁷⁷As, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁴⁹Pm, ¹⁵¹Pm, ¹⁵³Sm, ¹⁵⁹Gd, ¹⁷²Tm, ⁹⁰Y, ¹¹¹In, ¹⁶⁹Yb, ¹⁷⁵Yb, ¹⁷⁷Lu, ¹⁰⁵Rh, ¹¹¹Ag,, ¹²⁵I, ¹²³I, ²¹³Bi, ²²⁵Ac, ¹²⁹I, ⁶⁴Cu и ^177mSn. Более предпочтительно, радионуклидный металл выбирают из группы, включающей ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ⁹⁰Y, ¹⁵³Sm,⁶⁸Ga, и ¹⁷⁷Lu.

В дальнейшей альтернативе первого аспекта радионуклидный металл представляет собой радиоактивный галоген (изотопы йода и брома), радиоактивный галоген связывается непосредственно с пептидом, например, путем химической реакции с Tyr или Trp фрагментом в пептиде, или необязательно А может представлять собой Tyr или Trp.

Предпочтительные радиодиагностические средства (⁶⁷Ga, ¹¹¹In) и радиотерапевтические средства (⁹⁰Y, ¹⁵³Sm, ¹⁷⁷Lu) необязательно содержат хелатированный +3 ион металла из класса элементов, известных как лантаноиды. Типичные радиоактивные металлы в этом классе включают изотопы ⁹⁰Иттрий, ¹¹¹Индий, ¹⁴⁹Прометий, ¹⁵³Самарий, ¹⁶⁶Диспрозий, ¹⁶⁶Гольмий, ¹⁷⁵Иттербий и ¹⁷⁷Лютеций. Все эти металлы (и другие в классе лантаноидов) имеют очень сходные химические свойства, в том смысле, что они остаются в +3 окисленном состоянии и предпочтительно хелатируют лиганды, которые несут тяжелые (кислород/азот) донорные атомы.

Описание В (спейсер):

В представляет собой спейсер, связанный с N-концом С, или ковалентную связь.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения В представляет собой соединение, имеющее формулу (II)

где

B₁ представляет собой ковалентную связь, встречающуюся в природе аминокислоту, невстречающуюся в природе аминокислоту, линейный диамин или циклический диамин,

B₂ представляет собой ковалентную связь, встречающуюся в природе аминокислоту, невстречающуюся в природе аминокислоту, линейную карбоновую кислоту или циклическую карбоновую кислоту,

при условии, что оба B₁ и B₂ не могут одновременно представлять собой ковалентные связи и что, когда b) представляет собой диамин, то B₂ представляет собой карбоновую кислоту (то есть. В₂ не может представлять собой связь или встречающуюся в природе или невстречающуюся в природе аминокислоту в этом случае).

Предпочтительно невстречающаяся в природе аминокислота представляет собой соединение, имеющее любую из формул (III), (IV), (V) или (VI)

где

где

а представляет собой целое число от 0 до 3,

b представляет собой целое число от 0 до 3,

и относительные схемы замещения или необязательно 1,2-, 1,3- или 1,4-

Предпочтительно,

а представляет собой 0 или 1,

b представляет собой 0 или 1,

где

с представляет собой целое число от 1 до 24,

d представляет собой целое число от 1 до 6.

Предпочтительно,

с представляет собой целое число от 1 до 15, более предпочтительно с равен от 1 до 8,

d представляет собой целое число от 1 до 3, более предпочтительно d равен 1.

где

Е' представляет собой NH, или СН₂,

f представляет собой целое число от 0 до 6,

g представляет собой целое число от 0 до 6;

когда Е' представляет собой CH₂, то 6-членное кольцо необязательно замещено в любом положении углерода 6-членного кольца на том же самом углероде кольца или на различных углеродах,

когда Е' представляет собой NH, то 6-членное кольцо необязательно замещено в любом положении углерода 6-членного кольца на том же самом атоме углерода кольца или на различных атомах углерода и/или на атоме азота при условии, что f или g представляет собой целое число, равное или больше 1.

Предпочтительно,

Е' представляет собой NH,

f представляет собой целое число от 0 до 3,

g представляет собой целое число от 0 до 3;

где

i представляет собой целое число от 1 до 6,

j представляет собой целое число от 1 до 6,

P представляет собой О или H₂.

Предпочтительно,

i представляет собой целое число от 1 до 3,

j представляет собой целое число от 1 до 3,

P представляет собой О.

Более предпочтительно спейсер выбирают из группы, включающей 4-амино-1-карбоксиметилпиперидин, (R,S)-диаминоуксусную кислоту, PEG_1-24, Sar_5-10, 8-аминооктановую кислоту, 6-аминокапроновую кислоту, 4-(2аминоэтил)-1-карбоксиметил пиперазин, диаминомасляную кислоту, гиппуровую кислоту, 4-амино-1-Вос-пиперидин-4-карбоновую кислоту, Gly-аминобензойную кислоту, 5-амино-3-окса-пентил-полуамид янтарной кислоты, Peg_1-24-4-амино-1-карбоксиметил пиперидин, Dab(шикимовую кислоту), (D-Gln)x, (D-Asn)x.

Описание С (последовательность антагониста пептида аналога бомбезина)

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения, последовательность антагониста пептида аналога бомбезина выбирают из группы, включающей С-1-С-3, предпочтительно С-1-С-2.

Предпочтительно, последовательность антагониста пептида аналога бомбезина выбирают из группы, включающей:

Посл. соединения 1: D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Sta-Leu-NH₂;

Посл. соединения 9: D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leuψ(CHOH-CH₂)-(CH₂)₂-CH₃;

Посл. соединения 12: D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leuψ(CH₂NH)-Phe-NH₂;

Посл. соединения 13: Dphe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leuψ(CH₂NH)-Cys-NH₂.

Предпочтительно, конъюгат антагониста пептида аналога бомбезина, имеющий формулу (I), содержащий по меньшей мере один радионуклидный металл, выбирают из группы, включающей:

Соединение 1: DOTA-Gly-аминобензоил-D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Sta-Leu-NH₂;

Соединение 2: DOTA-4-амино-1-карбоксиметил-пиперидин-D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Sta-Leu-NH₂;

Соединение 3: DOTA-4-амино-1-пиперидин-4-карбоновая кислота-D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Sta-Leu-NH₂;

Соединение 4: DOTA-15-амино-4,7,10,13-тетраоксапентадекановая кислота-D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Sta-Leu-NH₂;

Соединение 5: DOTA-(15-амино-4,7,10,13-тетраоксапентадекановая кислота)-(4-амино-1-карбоксиметил-пиперидин)-D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Sta-Leu-NH₂;

Соединение 6: DOTA-диаминомасляная кислота-D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Sta-Leu-NH₂;

Соединение 7: ООТА-4-(2-аминоэтил)-1-карбоксиметил-пиперазин-D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Sta-Leu-NH₂;

Соединение 8: DOTA-(5-амино-3-окса-пентил)-полуамид янтарной кислоты-D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Sta-Leu-NH2;

Соединение 9: DOTA-4-амино-1-карбоксиметил-пиперидин-D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leuψ(CHOH-CH₂)-(CH₂)₂-CH₃;

Соединение 10: DOTA-(15-амино-4,7,10,13-тетраоксапентадекановая кислота-4-амино-1-карбоксиметил-пиперидин-D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Cly-His-Leuψ(СНОН-СН₂)-(СН2)₂-СН₃;

Соединение 11: DOTA-15-амино-4,7,10,13-тетраоксапентадекановая кислота -D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leuψ(CHOH-CH₂)-(CH₂)₂-CH₃;

Соединение 12: DOTA-4-амино-1-карбоксиметил-пиперидин-O-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leuψ(CH₂NH)-Phe-NH₂;

Соединение 13: DOTA-4-амино-1-карбоксиметил-пиперидин-O-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leuψ(CH₂NH)-Cys-NH₂;

Соединение 14: N₄-триазолы-dPEG₁-D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Sta-Leu-NH₂.

Другие предпочтительные варианты осуществления

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения, для соединения, имеющего формулу (I), х представляет собой целое число от 1 до 2, предпочтительно х представляет собой 1.

Если х равен или больше 2, то (В)_n представляет собой линейный спейсер или разветвленный, связанный с N-концом антагониста пептида аналога бомбезина (С).

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения, для соединения, имеющего формулу (I), n представляет собой целое число от 1 до 4, предпочтительно n представляет собой 1 или 3, более предпочтительно 1.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения, для соединения, имеющего формулу (I), А дополнительно представляет собой хелатор металла, содержащий по меньшей мере один атом холодного металла, соответствующий или эквивалентный перечисленному выше радионуклидному металлу. Такие соединения пригодны для исследований связывания в условиях in-vitro in-vivo и в качестве сравнительных соединений. Перечисленные выше предпочтительные варианты осуществления изобретения применяются в настоящей заявке.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения, для соединения, имеющего формулу (I), К дополнительно представляет собой Н или предпочтительно Н. Во втором аспекте, изобретение относится к предшественникам конъюгата антагониста пептида аналога бомбезина, которые селективно связываются с рецепторами бомбезина и которые более предпочтительно связываются с GRP рецептором без запуска интернализации в клетку и без передачи сигналов путем мобилизации кальция, при этом противодействуя эффектам, индуцированным агонистом в этих двух системах, где конъюгат антагониста пептида аналога бомбезина имеет общую формулу (I')

где

х представляет собой целое число от 1 до 3,

n представляет собой целое число от 1 до 6

А' представляет собой хелатор металла,

В представляет собой спейсер, связанный с N-концом С, или ковалентную связь,

С представляет собой антагонист пептида аналога бомбезина с последовательностью С-1-С-4.

Хелатор металла А' представляет собой хелатор металла без радионуклидного металла,

как определено в первом аспекте для А.

Спейсер В и антагонист пептида аналога бомбезина С имеют значения, указанные выше в первом аспекте.

Изобретение также относится к их фармацевтически приемлемым солям конъюгатов антагониста пептида аналога бомбезина неорганических или органических кислот, и к гидратам, комплексам, сложным эфирам, амидам, сольватам и пролекарствам этих соединений, имеющих общую химическую формулу (I').

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения, х представляет собой целое число от 1 до 2, предпочтительно х представляет собой 1. Если х равен или больше 2, то (В)_n представляет собой линейный спейсер или разветвленный спейсер, связанный с N-концом антагониста пептида аналога бомбезина (С).

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения, в формуле (I'), n представляет собой целое число от 1 до 4, предпочтительно n представляет собой 1 или 3, более предпочтительно 1.

В третьем аспекте, изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей конъюгаты антагониста пептида аналога бомбезина, которые имеют формулу (I) или (I'), и фармацевтически приемлемый носитель.

В четвертом аспекте, изобретение относится к применению конъюгатов антагониста пептида аналога бомбезина, которые имеют формулу (I) или (U'), для связывания с рецепторами бомбезина и более предпочтительно рецептора гастрин-высвобождающего пептида (GRP) и/или для ингибирования рецепторов бомбезина и более предпочтительно рецептора гастрин-высвобождающего пептида (GRP).

В пятом аспекте, изобретение относится к способу приготовления конъюгата антагониста пептида аналога бомбезина, который имеет общую формулу (I)

где n, х, А, В и С имеют значения, указанные выше,

который включает стадию

- Радиоактивное хелатирование конъюгата антагониста пептида аналога бомбезина, который имеет общую формулу (I'), как определено выше, с подходящим радионуклидным металлом или атомом металла, соответствующим радионуклидному металлу, перечисленному выше.

Предпочтительно, способ приготовления конъюгата антагониста пептида аналога бомбезина, который имеет общую формулу (I), включает стадию радиоактивного хелатирования с подходящим радионуклидным металлом.

В дальнейшем варианте осуществления, способ приготовления конъюгата антагониста пептида аналога бомбезина, который имеет общую формулу (I)

где n, х, А, А', В и С имеют значения, указанные выше,

включает дополнительно стадии:

а) Сочетание сп