Способ раннего прогнозирования реализации гестационных осложнений

Способ раннего прогнозирования реализации гестационных осложнений

Реферат

Область применения: предлагаемое изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике.

Уровень техники

Основой формирования различных гестационных осложнений является влияние неблагоприятных факторов, среди которых наибольшее значение имеют стресс, преморбидный фон, факторы инфекционной природы, гормональные нарушения, генетическая составляющая и т.п. Однако при наличии одних и тех же факторов риска развитие патологических состояний реализуется не во всех случаях. С другой стороны, патологические состояния при беременности развиваются не только у женщин группы высокого риска (при наличии отягощенного соматического и/или акушерско-гинекологического анамнеза), но и у практически здоровых женщин, поскольку беременность в ряде случаев является триггером патологических процессов.

На современном этапе развития фундаментальной и клинической медицины научный поиск ранних молекулярных маркеров гестационных осложнений ограничивается дифференцированным подходом к прогнозированию той или иной патологии: ряд исследований посвящен прогнозированию прерывания беременности в основном в ранние сроки беременности (по типу неразвивающейся или самопроизвольного выкидыша), другая часть работ - доклинической диагностике более поздних осложнений, манифестация которых имеет место во второй половине гестации (плацентарной недостаточности, синдрома задержки роста плода, преэклампсии, преждевременных родов и др.). Недостатком такого узкого подхода является недооценка риска формирования патологических состояний вне зависимости от срока беременности, что диктует необходимость разработки и внедрения в клиническую практику алгоритма раннего прогнозирования гестационных осложнений, позволяющего ответить на вопрос, будет ли беременность протекать физиологически.

Изучение роли иммунологических факторов в этиологии и патогенезе гестационных осложнений не теряет своей актуальности. Реализация патологических состояний при беременности является результатом действия множества причин, в совокупности определяющих тип нарушений иммунологической регуляции. При значительных нарушениях механизмов иммунологической регуляции несостоятельность процессов плацентации, связанная с недостаточной дифференцировкой трофобласта, обусловливает прерывание беременности. Если же нарушение иммунологической регуляции сопровождается активацией компенсаторных механизмов, направленных на ограничение неблагоприятных, в том числе и эмбриотоксических эффектов, то имеет место некритическое нарушение инвазии трофобласта и частичная конверсия сосудов фетоплацентарного комплекса, что способствует сохранению и прогрессированию беременности. При этом, как правило, обедненный плацентарный кровоток не позволяет в полной мере обеспечивать потребности плода необходимыми ресурсами, что приводит к манифестации различных патологических состояний [1, 2]. Таким образом, в ряде случаев неадекватный ответ материнской иммунной системы на факторы плодово-плацентарного происхождения приводит к необратимым событиям (прерыванию беременности по типу неразвивающейся или самопроизвольного выкидыша), опосредованным вовлечением в патологический процесс сосудистого компонента; при компенсации нарушений формируется особый тип регуляции, способствующий сохранению беременности, однако недостаточный для полноценного развития плода [2].

Поскольку оценка тех или иных параметров по отдельности обладает низкой информативностью, перспективы научных исследований в этом направлении связаны с выделением из всей совокупности факторов риска наиболее значимых предикторов, определение которых на доклиническом этапе различных гестационных осложнений может служить ранним индикатором неблагополучия в системе мать-плацента-плод и отражением нарушения материнско-плодовых взаимодействий.

Существующие способы прогнозирования гестационных осложнений обладают рядом недостатков. Использование ряда способов прогнозирования исходов беременности предполагается только во второй половине гестации (при полностью сформировавшейся плаценте, визуализации плодово-плацентарного кровообращения, угрозе позднего выкидыша или преждевременных родов), что не всегда позволяет осуществлять превентивные меры по предотвращению формирования патологических состояний [3, 4, 5, 6, 7]. Ряд способов прогнозирования исхода беременности связан с их использованием в отношении определенного контингента женщин, что существенно сужает круг обследуемых и снижает ценность разработанных технологий. Так, известны способы прогнозирования исхода беременности у женщин с привычным невынашиванием и высоким перинатальным риском [8, 9], способы прогноза ранних репродуктивных потерь при наличии угрозы прерывания беременности [10, 11], инфекционного фактора [12, 13], гиперандрогении [14], гормональных нарушений фетоплацентарного комплекса [15], имеющегося прерывания беременности в анамнезе [12, 16], способы прогнозирования осложнений беременности и развития перинатальной патологии у пациенток с тромбофилией [17], ВИЧ-инфицированных женщин [18], а также при беременности, индуцированной вспомогательными репродуктивными технологиями в связи с лечением бесплодия [19], что уже само по себе чаще всего является условием для отнесения пациенток в группу риска по неблагоприятным исходам беременности. Вышеперечисленные факторы как изолированно, так и в сочетании друг с другом могут обусловливать нарушения процессов имплантации и плацентации, а также гемодинамические сдвиги, опосредующие в итоге нарушения в системе «мать-плацента-плод». Узконаправленный подход к прогнозированию исходов беременности, ограниченный либо конкретным патологическим состоянием, либо применением способа прогноза у определенного контингента женщин, не дает возможности оценить риск реализации гестационных осложнений в целом, что является наиболее востребованным как у пациенток с отягощенным акушерским анамнезом, так и у первобеременных женщин. В связи с этим наиболее ценными являются безопасные (неинвазивные или малоинвазивные) способы прогнозирования исходов беременности вне зависимости от вида патологии и сроков гестации, позвляющие в силу своего неспецифического в отношении этих факторов характера с ранних сроков дифференцировать физиологическое и осложненное течение беременности.

Аналогами данного изобретения являются вышеуказанные способы прогнозирования исходов беременности. Наряду с перечисленными недостатками этих способов (использование у определенного контингента женщин, определение показателей во второй половине гестации, прогнозирование одного конкретного патологического состояния), несовершенство имеющихся способов связано с: трудоемкостью, обусловленной использованием специальных программ (например, «Spectr») для регистрации кардиоритма, а также большого количества дополнительных расчетов, основанных на показателях кардиоинтервалографии и кардиотокографии с расчетом частотных диапазонов, спектральных вариантов вариабельности ритма сердца и др. [5, 20], многоэтапностью исследований, базирующихся на определении показателей до и после проведения функциональных проб, нагрузочных тестов или курсов терапии [5, 6, 11], сложностью интерпретации результатов для врачей, не имеющих соответствующей специализации, использованием небезопасных химических реактивов (в том числе трихлоруксусной и соляной кислот) и необходимостью обеспечения специальных условий для работы с такого рода реагентами (оснащения вытяжным боксом и т.п.) [21], применением достаточно громоздких алгоритмов обследования, включающих сбор анамнестических данных не только матери, но и отца, определение вирусной нагрузки и спектра вирусных антигенов при наличии инфекционного фактора, оценку результатов ультразвуковых и допплерометрических исследований с итоговым подсчетом прогностического индекса [16, 18].

Прототипом предложенного изобретения является способ прогнозирования исходов беременности, заключающийся в определении стороны преимущественного расположения плаценты методом двумерного ультразвукового сканирования и подсчете относительного содержания лимфоцитов в капиллярной крови женщины [4]. Несмотря на очевидные достоинства способа-прототипа (доступность определения укзанных показателей для любого лечебно-практического учреждения соответствующего профиля, оснащенного стандартным оборудованием, а также высокая точность прогноза), к недостаткам данного метода относится невозможность прогнозирования неблагоприятных исходов беременности с ранних сроков, поскольку визуализация локализации плаценты возможна только со второго триместра беременности. Кроме того, авторы прогнозируют осложненное течение беременности при содержании лимфоцитов периферической крови 20% и менее, однако развитие патологических состояний при беременности далеко не всегда сопровождается снижением количества лимфоцитов, в связи с чем чувствительность и специфичность способа прогноза, основанного на определении двух вышеуказанных параметров, в ряде случаев невысока.

В результате обобщения опыта работы и многолетних исследований, проводимых в ФГБУ «Уральский научно-исследовательский институт охраны материнства и младенчества» Министерства здравоохранения Российской Федерации, выявлены предикторы высокого риска реализации гестационных осложнений, представляющие собой типовые маркеры различных патологических состояний, вне зависимости от нозологической единицы (прерывания беременности по типу неразвивающейся или самопроизвольного выкидыша, плацентарной недостаточности, задержки роста плода и другой перинатальной патологии).

Сущность изобретения

Целью изобретения является разработка способа раннего прогнозирования реализации гестационных осложнений, заключающегося в определении наличия угрозы прерывания настоящей беременности и носительства полиморфизмов генов фолатного обмена, а также оценке относительного содержания CD54⁺-лимфоцитов периферической крови, уровня лактоферрина и β-субъединицы хорионического гонадотропина (β-ХГЧ) в сыворотке крови в период с момента наступления беременности до конца первого триместра с последующим вычислением прогностического индекса (PI).

Способ осуществляют следующим образом. Забор периферической венозной крови для исследования проводят натощак, в утренние часы, в две пробирки: в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА) в количестве 0,5 мл и в сухую чистую пробирку в количестве 3 мл. Пробирку с ЭДТА используют для определения относительного содержания CD54⁺-лимфоцитов методом проточной цитофлюориметрии. Вторую пробирку используют для получения путем центрифугирования сыворотки крови, в которой проводят определение содержания уровня лактоферрина и β-субъединицы хорионического гонадотропина (β-ХГЧ) методом иммуноферментного анализа в соответствии с инструкциями фирм-производителей. Измерение оптической плотности образцов выполняют на иммуноферментном анализаторе «SUNRISE» фирмы «TECAN» (Австрия).

Полученные значения с учетом данных анамнеза женщины (наличия угрозы прерывания настоящей беременности и носительства гомо- или гетерозиготных мутаций генов фолатного обмена) используют для вычисления прогностического индекса (PI) по формуле, разработанной с использованием метода дискриминантного анализа:

PI=0,7199X₁+1,2552X₂-0,00653X₃-0,0009X₄+0,0722X₅+1,1277, где

X₁ - наличие/отсутствие угрозы прерывания настоящей беременности (1/0);

X₂ - наличие/отсутствие полиморфизмов генов фолатного обмена (1/0);

X₃ - относительное содержание CD54⁺-лимфоцитов крови, %;

X⁴ - уровень лактоферрина, нг/мл;

X⁵ - концентрация свободной β-субъединицы хорионического гонадотропина (β-ХГЧ), нг/мл.

При РI<0 прогнозируют реализацию гестационных осложнений, а при РI>0 делают заключение о низком риске развития патологических состояний при беременности.

Чувствительность предлагаемого способа составляет 81,2%, специфичность - 85,1%. Эффективность способа - 83,2%.

Пример 1. Фесун З.М. (история болезни №8096). Обследовалась амбулаторно в научной поликлинике ФГБУ «НИИ ОММ» Минздрава России 17.09.2010 г. Повторнобеременная, первородящая. Диагноз: одноплодная беременность 4-5 недель, привычное невынашивание, гиперпролактинемия, микроаденома гипофиза, носитель вируса простого герпеса, цитомегаловируса. Признаки угрозы прерывания беременности отсутствуют, женщина является носителем мутаций генов фолатного обмена: MTRR A66G - G/G (гомозигота), MTHFR А1298С - А/С (гетерозигота), MTR A2756G - A/G (гетерозигота). При лабораторном исследовании крови получены следующие показатели: относительное содержание CD54⁺-лимфоцитов - 23%, уровень лактоферрина -2115 нг/мл, концентрация β-ХГЧ - 10,2 нг/мл. Прогностический индекс, рассчитанный по формуле, равен -0,286, отрицательное значение индекса свидетельствует о высоком риске реализации гестационных осложнений, в связи с чем пациентка отнесена в группу риска развития патологических состояний при беременности. Пациентка наблюдалась в соответствии со стандартом оказания медицинской помощи беременным женщинам, в сроке 6-7 недель по результатам ультразвукового исследования выявлена регрессирующая беременность, по поводу чего пациентка была госпитализирована в гинекологическое отделение института, где 30.09.2010 проведено клинико-диагностическое выскабливание полости матки. При оценке кариотипа абортивного материала хромосомных аномалий не выявлено, что исключает возможность прерывания в ранние сроки в связи с генетической патологией.

Пример 2. Володькова Т.Н. (история родов №3854). Обследовалась амбулаторно в научной поликлинике ФГБУ «НИИ ОММ» Минздрава России 01.02.2011. Повторнобеременная, повторнородящая. Диагноз: одноплодная беременность 7-8 недель, отягощенный акушерский анамнез (самопроизвольный выкидыш в 2009 г.), хронический холецистит в стадии ремиссии, нефроптоз справа I-II ст., миопия I ст., эрозия шейки матки (криодеструкция в 2004 г.). На момент обследования имеются признаки угрозы прерывания беременности (жалобы на тянущие боли внизу живота и сукровичные выделения из половых путей), женщина является носителем мутации гена фолатного обмена: MTHFR А1298С - А/С (гетерозигота). При лабораторном исследовании крови получены следующие показатели: относительное содержание CD54⁺-лимфоцитов - 25%, уровень лактоферрина - 2482 нг/мл, концентрация β-ХГЧ - 8,9 нг/мл. Прогностический индекс, рассчитанный по формуле, равен -0,121, отрицательное значение индекса свидетельствует о высоком риске реализации гестационных осложнений, в связи с чем пациентка отнесена в группу риска развития патологических состояний при беременности. В сроке 19 недель беременности по данным ультразвукового и допплерометрического исследований выявлено нарушение маточно-плацентарного кровообращения IА ст. Женщина была госпитализирована в стационар, наблюдалась и получала терапию в соответствии со стандартом оказания медицинской помощи. В сроке 29-30 недель беременности женщина была повторно госпитализирована в стационар по поводу субкомпенсированной хронической плацентарной недостаточности (преждевременного созревания плаценты) и угрозы прерывания, наблюдалась и получала терапию в соответствии со стандартом оказания медицинской помощи. Беременность завершилась самостоятельными срочными родами в сроке 40-41 нед. и рождением живой доношенной девочки с массой тела 2450 г, ростом 46 см. Диагноз ребенка при рождении: синдром задержки роста плода I ст., гипопластический вариант.

Пример 3. Макарова О.В. (история родов №2356). Обследовалась амбулаторно в научной поликлинике ФГБУ «НИИ ОММ» Минздрава России 22.04.2010. Повторнобеременная, первородящая. Диагноз: одноплодная беременность 8-9 недель, отягощенный акушерский анамнез (медицинский аборт), ожирение II ст., артериальная гипертензия I ст., миопия II ст., носитель вируса простого герпеса, цитомегаловируса, синдром дисплазии соединительной ткани, эрозия шейки матки. Признаки угрозы прерывания беременности отсутствуют, женщина не является носителем мутаций генов фолатного обмена. При лабораторном исследовании крови получены следующие показатели: относительное содержание СD54⁺-лимфоцитов - 54%, уровень лактоферрина - 2847 нг/мл, концентрация β-ХГЧ - 14,38 нг/мл. Прогностический индекс, рассчитанный по формуле, равен -3,923, отрицательное значение индекса свидетельствует о высоком риске реализации гестационных осложнений, в связи с чем пациентка отнесена в группу риска развития патологических состояний при беременности. В сроке 25-26 недель беременности по данным ультразвукового и допплерометрического исследований выявлено нарушение маточно-плацентарного кровообращения I А ст., преждевременное созревание плаценты, маловодие. Женщина была госпитализирована в стационар, наблюдалась и получала терапию в соответствии со стандартом оказания медицинской помощи. Беременность завершилась оперативными родами в связи со слабостью родовой деятельности в 41-42 нед. и рождением живого переношенного мальчика с массой тела 3160 г, ростом 51 см. Диагноз ребенка при рождении: асфиксия, переношенность.

Пример 4. Никитина А.С. (история родов №1417). Обследовалась амбулаторно в научной поликлинике ФГБУ «НИИ ОММ» Минздрава России 09.12.2010. Повторнобеременная, повторнородящая. Диагноз: беременность 7-8 недель, отягощенный акушерский анамнез (регрессирующая беременность в малом сроке, 1 медицинский аборт), миопия I ст., носитель ЦМВ, субклинический гипотиреоз в стадии компенсации, гиперандрогения, избыточная масса тела, хронический холецистит в стадии ремиссии, хронический панкреатит в стадии ремиссии. Признаки угрозы прерывания беременности отсутствуют, женщина является носителем мутаций генов фолатного обмена: MTRR A66G - A/G (гетерозигота), MTHFR С677Т - С/Т (гетерозигота), MTHFR А1298С - А/С (гетерозигота). При лабораторном исследовании крови получены следующие показатели: относительное содержание CD54⁺-лимфоцитов - 21%, уровень лактоферрина - 1050 нг/мл, концентрация (β-ХГЧ - 28,68 нг/мл. Прогностический индекс, рассчитанный по формуле, равен 2,137, положительное значение индекса свидетельствует о низком риске реализации гестационных осложнений. При дальнейшем наблюдении, по данным ультразвуковых и допплерометрических исследований в течение беременности состояние плаценты и плода оценивалось как нормальное, соответствующее сроку гестации, беременность завершилась самостоятельными срочными родами в сроке 40-41 нед. и рождением живого доношенного мальчика с массой тела 3710 г, ростом 54 см. Диагноз ребенка при рождении: здоров.

Пример 5. Хрипушина О.А. (история родов №1347). Обследовалась амбулаторно в научной поликлинике ФГБУ «НИИ ОММ» Минздрава России 27.12.2010. Первобеременная, первородящая. Диагноз: беременность 12-13 недель, субклинический гипотиреоз в стадии компенсации, вегетососудистая дистония по гипотоническому типу, миопия III ст., хронический пиелонефрит в стадии ремиссии, хронический цистит в стадии ремиссии. Признаки угрозы прерывания беременности отсутствуют, женщина является носителем мутации гена фолатного обмена: MTRR A66G - G/G (гомозигота). При лабораторном исследовании крови получены следующие показатели: относительное содержание CD54⁺-лимфоцитов - 19%, уровень лактоферрина - 1899,5 нг/мл, концентрация β-ХГЧ - 24,13 нг/мл. Прогностический индекс, рассчитанный по формуле, равен 1,175, положительное значение индекса свидетельствует о низком риске реализации гестационных осложнений. При дальнейшем наблюдении, по данным ультразвуковых и допплерометрических исследований в течение беременности состояние плаценты и плода оценивалось как нормальное, соответствующее сроку гестации, беременность завершилась самостоятельными срочными родами в сроке 39-40 нед. и рождением живого доношенного мальчика с массой тела 3700 г, ростом 53 см. Диагноз ребенка при рождении: здоров.

Приведенные клинические примеры показывают, что нарушение клеточно-опосредованных и гуморальных механизмов иммунологической регуляции в ранние сроки беременности, сопровождающееся изменением продукции основного гормона, отражающего пролиферацию цитотрофобласта (β-ХГЧ), наряду с данными анамнеза женщины, являющимися факторами риска развития патологических состояний (наличием/отсутствием угрозы прерывания настоящей беременности и носительства полиморфизмов генов фолатного обмена) является патогенетической основой реализации в дальнейшем гестационных осложнений. Вышеизложенное подтверждает прогностическую ценность заявляемого способа.

Таким образом, заявляемый способ раннего прогнозирования реализации гестационных осложнений в сравнении с известными имеет следующие преимущества.

1. Способ является малоинвазивным, поскольку прогнозирование осуществляется по результатам исследования периферической крови и данным анамнеза/обследования.

2. Способ позволяет прогнозировать риск реализации гестационных осложнений с использованием комплекса предикторов, отражающих эффективность регуляторных механизмов, направленных на сохранение и успешное прогрессирование беременности и вовлеченных в патогенез различных патологических состояний, вне зависимости от срока беременности и нозологической единицы (прерывания беременности по типу неразвивающейся или самопроизвольного выкидыша, плацентарной недостаточности, задержки роста плода и другой перинатальной патологии).

3. Предлагаемый способ позволяет с ранних сроков гестации (с момента наступления беременности) выявить группу риска по реализации гестационных осложнений, что дает возможность осуществления превентивных мероприятий, направленных на профилактику патологического течения беременности.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1. Сухих Г.Т. Иммунные факторы в этиологии и патогенезе осложнений беременности / Г.Т.Сухих, Л.В.Ванько // Акушерство и гинекология. - 2012. - №1. - С.128-136.

2. Кудряшова А.В. Роль иммунной системы в формировании задержки внутриутробного развития плода / А.В.Кудряшова, Н.Ю.Сотникова, Л.В.Посисеева, И.А.Панова, М.В.Веденеева // Иваново, 2009. - 240 с.

3. Панова И.А. Способ прогнозирования исхода беременности при угрозе невынашивания поздних сроков / И.А.Панова, Н.Ю.Сотникова, Н.В.Крошкина, А.В.Павлов // Патент RU №2475752 от 20.02.2013.

4. Орлов А.В. Способ прогнозирования исходов беременности / А.В.Орлов, Т.Л.Боташева, Е.В.Железнякова, Т.Б.Имиева, О.Т.Мелконян // Патент RU №2268466 от 20.01.2006.

5. Рец Ю.В. Способ прогнозирования течения беременности / Ю.В.Рец, Г.А.Ушакова, Д.П.Петров // Патент RU №2290861 от 10.01.2007.

6. Клещеногов С.А. Способ раннего прогнозирования акушерского риска / С.А. Клещеногов // Патент RU №2401069 от 10.10.2010.

7. Чистякова Г.Н. Способ прогнозирования развития фетоплацентарной недостаточности в течение беременности / Г.Н.Чистякова, Г.А.Черданцева // Патент RU №2300770 от 10.06.2007.

8. Титов Л.П. Способ прогнозирования исхода беременности у женщин с привычным невынашиванием / Л.П.Титов, Ю.В.Милько-Черноморец, А.Н.Шилко / Патент RU №2033608 от 20.04.1995.

9. Игитова М.Б. Прогнозирование, диагностика и лечение осложнений гестации у женщин с высоким перинатальным риском: автореф. дисс.… д.м.н. - Москва, 2010 г. - 42 с.

10. Посисеева Л.В. Способ прогнозирования исхода беременности у женщин с угрожающим выкидышем ранних сроков / Л.В. Посисеева, Е.Л. Бойко // Патент RU№2103686 от 27.01.1998.

11. Барсегян O.K. Способ прогнозирования исхода беременности у женщин с угрожающим выкидышем / O.K.Барсегян, Н.Ю.Сотникова, А.В.Кудряшова // Патент RU №2033607 от 20.04.1995.

12. Тирская Ю.И. Неразвивающаяся беременность на фоне герпетической инфекции: вопросы патогенеза, диагностики, профилактики: автореф. дисс.… к.м.н. - Омск, 2008 г. - 22 с.

13. Дубровина С.О. Способ прогнозирования невынашивания беременности ранних сроков инфекционного генеза / С.О.Дубровина, A.M.Маклюк // Патент RU №2444734 от 10.03.2012.

14. Саидова Р.А. Информативность гормональных показателей ранних сроков беременности для диагностики неразвивающейся беременности у пациенток с гиперандрогенией / Р.А.Саидова, З.С.Гусейнова, С.П.Олимпиева, В.В.Киликовский // Российский вестник акушера-гинеколога. - 2011. - №4. -С.4-7.

15. Левкович М.А. Роль иммуно-гормональных взаимодействий в генезе угрозы прерывания беременности ранних сроков / М.А.Левкович, В.А.Линде, В.О.Андреева, Т.Г.Плахотя, Д.Д.Нефедова // Акушерство и гинекология. - 2012. - Спецвыпуск. - С.3-7.

16. Макаров О.В. Способ прогнозирования высокой степени риска рецидива неразвивающейся беременности у супружеской пары / О.В.Макаров, Д.А.Ходжаева, Н.Н.Луценко, А.В.Рубанович, Л.Е.Сальникова // Патент RU №2454669 от 27.06.2012.

17. Путилова Н.В. Способ прогноза осложнений беременности у пациенток с тромбофилией / Н.В.Путилова, Н.В.Башмакова, А.Д.Мазуров // Патент RU №2429478 от 20.09.2011.

18. Рымашевский А.Н. Способ прогнозирования задержки внутриутробного развития плода во 2-м триместре у ВИЧ-инфицированных / А.Н.Рымашевский, А.В.Опруженков // Патент RU №2435515 от 10.12.2011.

19. Башмакова Н.В. Способ прогнозирования задержки внутриутробного развития плода при беременности после вспомогательных репродуктивных технологий / Н.В.Башмакова, Ю.М.Трапезникова, Н.Р.Шабунина-Басок, К.А.Изместьева, А.Д.Мазуров // Патент RU №2444995 от 20.03.2012.

20. Клещеногов С.А. Способ прогнозирования патологических исходов беременности / С.А.Клещеногов, А.Н.Флейшман // Патент RU №2240722 от 27.11.2004.

21. Крукиер И.И. Способ диагностики задержки роста плода / И.И.Крукиер, Т.Н.Погорелова, В.В.Авруцкая, Е.В.Нарежная, А.А.Никашина, Н.А.Друккер, А.Т.Лигидова // Патент RU №2425379 от 27.07.2011.

Способ раннего прогнозирования реализации гестационных осложнений, отличающийся тем, что с ранних сроков беременности определяют наличие угрозы прерывания настоящей беременности и мутаций генов фолатного обмена, оценивают относительное содержание CD54⁺-лимфоцитов, уровень лактоферрина и β-субъединицы хорионического гонадотропина (β-ХГЧ) в венозной крови женщины, вычисляют прогностический индекс (PI) по формуле:PI=0,7199X₁+1,2552X₂-0,00653X₃-0,0009X₄+0,0722X₅+1,1277, гдеX₁ - наличие/отсутствие угрозы прерывания настоящей беременности (1/0);X₂ - наличие/отсутствие полиморфизмов генов фолатного обмена (1/0);X₃ - относительное содержание CD54⁺-лимфоцитов крови, %;X₄ - уровень лактоферрина, нг/мл;X₅ - концентрация свободной β-субъединицы хорионического гонадотропина (β-ХГЧ), нг/мл,и при PI менее 0 прогнозируют реализацию гестационных осложнений, а при PI более 0 делают заключение о низком риске развития патологических состояний при беременности.