Производные 1н-пиразоло[4,3-c]изохинолинов, способ их получения и применение в терапии

Производные 1н-пиразоло[4,3-c]изохинолинов, способ их получения и применение в терапии

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Настоящее изобретение относится к производным 1Н-пиразоло[4,3-c]изохинолинов и применению их в терапии, в частности, в качестве противораковых агентов. Изобретение относится также к способу получения соединений согласно изобретению, а также к некоторым промежуточным реакционным продуктам, используемым в упомянутом способе.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Используемые обозначения

В рамках настоящего изобретения подразумевают под обозначением:

- атом галогена (Hal): атом фтора, хлора, брома или йода;

- алкильная группа: алифатическая насыщенная углеводородная группа, содержащая 1-6 атомов углерода (предпочтительно 1-4 атома углерода), линейная или разветвленная, образующаяся при удалении атома водорода из алкана. В качестве примера можно назвать группы: метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил или трет-бутил;

- алкоксигруппа: -О-алкильная группа, в которой алкильная группа такая, как описано выше;

- фторалкильная группа: алкильная группа, содержащая один или несколько атомов фтора вместо одного или нескольких атомов водорода;

- циклоалкильная группа: циклическая алкильная группа, содержащая 3-7 атомов углерода, при этом все атомы углерода включены в циклическую структуру. В качестве примеров можно назвать группы: циклопропил, циклобутил, циклопентил или циклогексил;

- защитная группа: группа, предназначенная для защиты химической функциональной группы от нежелательных химических реакций, которую вводят на стадии защиты и высвобождают на последующей стадии. Примеры защитных групп можно найти в документе T.W. Greene с сотр. «Protective Groups in Organic Chemistry», 3-е издание, 1999, Wiley-Interscience или в документе J.F.M. McOmie «Protective Groups in Organic Chemistry» Plenum Press, 1973. В качестве примеров защитных групп можно назвать трет-бутилкарбаматную (ВОС) или [2-(триметилсилил)этокси]метильную (SEM) группу.

В соответствии с 1-м аспектом, настоящее изобретение относится к соединению формулы (I)

в которой:

R₁ означает фенильную группу, необязательно замещенную одним или несколькими атомами галогена. Более конкретно, речь идет о 2,6-дифторфенильной группе.

R₂ означает:

- атом водорода или галогена или цианогруппу;

- группу -C(=O)Y, в которой Y означает атом водорода или группу -NH₂ или -OR_a;

- группу -C(=S)NH₂;

- группу -C(=NH)NH-OH;

- группу -CH₂OH или -CH₂F;

- группу -CH=N-OH;

- группу -CH=CH₂ или -C≡C-R_a;

- группу (4-пиразолил) или (3-триазол);

R_a означает атом водорода или (С₁-С₄)алкильную группу. Более конкретно, R_a означает атом водорода. R₂ может быть выбран, более конкретно, из групп R₂ согласно примерам, указанным в таблице I.

R₃ означает атом водорода или (С₁-С₄)алкильную группу. Более конкретно, R₃ означает атом водорода.

R₄ означает -NH₂, (С₁-С₄)алкильную, (С₁-С₄)фторалкильную или (С₃-С₇)циклоалкильную группу. Более конкретно, R₄ может быть выбран из групп R₄ согласно примерам, указанным в таблице I.

Среди соединений формулы (I) выделяют подгруппу соединений формулы (II)

в которой R₂ и R₄ такие, как определено выше.

Среди соединений согласно изобретению можно назвать более конкретно соединения таблицы I.

Соединения согласно изобретению могут находиться в форме оснований или кислотно-аддитивных солей. Предпочтительно, эти соли получают с фармацевтически приемлемыми кислотами, но соли с другими кислотами, полезными для очистки или выделения соединений, также составляют часть изобретения. Соединения, также необязательно, могут содержать один или несколько асимметричных атомов углерода. Следовательно, они могут существовать в форме энантиомеров или диастереоизомеров. Эти энантиомеры и диастереоизомеры, а также их смеси составляют часть изобретения.

В соответствии со 2-м аспектом, изобретение относится к способу получения соединений согласно изобретению, а также к некоторым промежуточным реакционным продуктам, участвующим в упомянутом способе.

Получение соединений формулы (I)

Соединения формулы (I) получают в несколько стадий исходя из Р₁ и Р₂, следуя схеме 1:

Схема 1

На стадии (I) осуществляют реакцию сочетания Бухвальда-Хартвига между Р₁ и Р₂ с получением Р₃. PG обозначает защитную группу NH-функциональной группы пиразольного цикла и Х означает одну из следующих групп: -CN, -CHO, -CH=CH₂, -H, -F, -C≡C-SiMe₃, -COOR_a или .

Этот метод сочетания осуществляют в присутствии комплекса палладия (в степени окисления (0) или (II), необязательно получаемого in situ). Можно использовать, например, Pd(PPh₃)₄, PdCl₂(PPh₃)₂, Pd(OAc)₂ или PdCl₂(dppf), Pd₂(dba)₃, или смесь Pd(OAc)₂ и 9,9-диметил-4,5-бис(дифенилфосфино)ксантена. Наиболее часто используемыми комплексами являются комплексы палладия (0). Сочетание протекает более благоприятно в присутствии основания, которым может быть, например, K₂CO₃, NaHCO₃, Et₃N, K₂PO₄, Ba(OH)₂, NaOH, KF, CsF, Cs₂CO_3. Сочетание можно проводить в полярном растворителе, таком как, например, 1,4-диоксан. Примеры каталитических систем на основе палладия можно найти в документах: Guram A.; Rennels R.; Buchwald S. ACIEE 1995, 34, 1348; Louie J.; Hatwig J. Tel. Lett. 1995, 3609; Wolfe J.; Wagaw S.; Buchwald S.J. Am. Chem. Soc. 1996, 118, 7215; Driver M.; Hartwig J.J. Am. Chem. Soc. 1996, 118, 7217; Hamann B.; Hartwig J.J. Am. Chem. Soc. 1998, 120, 7369; Kawatsura M.; Hartwig J.J. Am. Chem. Soc. 1999, 121, 1473.

В случае, когда заместитель Х означает один из заместителей R₂, определенных выше, соединение формулы (I) получают после снятия защитной группы PG на стадии (ii) пути 1. Условия для снятия защиты зависят от природы PG и являются известными для специалиста (смотрите, например, T.W. Greene с сотр. «Protective Groups in Organic Chemiistry», 3-е издание, 1999). Например, в случае группы SEM (β-(триметилсилил)этоксиметил), снятие защитной группы происходит в присутствии кислоты, такой как трифторуксусная кислота (ТФА) или хлористоводородная кислота.

В случае, когда заместитель Х не означает один из заместителей R₂, то осуществляют одну или несколько химических реакций, известных специалисту, для превращения заместителя Х в заместитель R₂. Согласно пути 2, Р₃ превращают в Р₃* на стадии (ii'), затем соединение формулы (I) получают после снятия защитной группы PG на стадии (iii'). Согласно альтернативному пути 3, превращение осуществляют непосредственно на самом соединении формулы (I).

Ниже находятся примеры превращений Х→R₂:

- X=-CN→R₂=-C(=O)NH₂ (стадия 2 примера 4 и примера 14) или -С(=О)ОН: гидролиз нитрильной группы, например, с помощью гидроксида натрия;

- X=-CN→R₂=-C(=S)NH₂ (пример 9): эту реакцию можно осуществлять с помощью сульфида аммония в метаноле при микроволновом облучении (смотрите Synlett 2004, 14, 2615-2617);

- X=-CN→R₂=-C(=O)H: эту реакцию можно осуществлять в присутствии диизобутилалюминийгидрида (стадия 1 примера 23);

- X=-C(=О)Н→R₂=-CH=N-OH: превращение альдегидной группы в оксимную группу в присутствии NH₂OH (пример 20);

- X=-C(=О)Н→R₂=-CH₂OH (пример 3): восстановление альдегидной группы с помощью восстановителя альдегидной группы, например, с помощью NaBH₄;

- X=-C≡С-SiMe₃→R₂=-C≡CH (стадия 4 примера 7): реакцию можно осуществлять в присутствии тетрабутиламмонийфторида;

- Х=-С(=О)Н→-СН₂ОН→R₂=-CH₂F (стадия 1 примера 17): фторирование осуществляют с помощью трифторида диэтиламиносульфида (DAST) (смотрите А.Н. Fauq, “N,N-Diethylaminosulfur Trifluoride” в Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, изд.: L.Paquette 2004, J.Wiley & Sons, Нью-Йорк);

- Х=-C≡С-SiMe₃→-C≡CH→R₂=: реакция циклоприсоединения по Хьюзгену между алкиновой группой и триметилсилилазидом N₃SiMe₃ позволяет получить 1,2,3-триазольный цикл.

Получение соединений Р ₁

Соединения Р₁, у которых Х означает -Н, -Hal, -СООН или -CN, получают, следуя схеме 2, путем бромирования в основной среде соединения Р₄ с последующей защитой защитной группой PG. Бромирование осуществляют, например, с помощью брома в присутствии КОН в полярном растворителе, таком как ДМФА. Примерами используемых защитных групп являются группа SEM, вводимая посредством SEM-Cl в присутствии основания, такого как, например, диизопропилэтиламин (DIPEA), или группа SO₂NMe₂ (смотрите пример 1), вводимая посредством Cl-SO₂NMe₂.

Схема 2

Соединения Р₁, у которых Х означает -СНО, -СН=СН₂, -С≡С-SiMe₃, , получают на одной или нескольких стадиях из вышеупомянутого соединения Р₅ или Р₁, у которых Х означает -I, и А означает атом водорода (Р₅) или PG (Р₁) (схема 3):

Схема 3

Конкретными реакциями, используемыми на схеме 3, являются:

- в случае Х=-СН=СН₂: реакция Стилле с использованием -CH=CH-SnBu₃ и комплекса палладия(0);

- в случае Х=-СНО: реакция окисления с использованием, например, тетраоксида осьмия;

- в случае Х=-С≡С-SiMe₃: реакция Соногашира в присутствии НС≡С-SiMe₃ и комплекса палладия(0) или (II) и соли меди (более подробно об этой реакции смотрите Chem. Rev. 2007, 107(3), 874-922; смотрите также стадию 2 примера 7);

- в случае Х=: сочетание по Сузуки с использованием 4-пиразолбороновой кислоты в присутствии комплекса палладия(0) или (II) и основания (возможно использование соответствующего пинаколинового эфира);

Соединения Р₁, у которых Х означает -СОО(С₁-С₄)алкил, получают этерификацией соответствующих соединений Р₁, у которых Х=-СООН.

Получение соединений Р ₄

Соединения Р₄, у которых Х означает -Н или -Hal, получают из соединения Р₆ (схема 4), которое либо является рыночным продуктом (например, Х=I, CAS № 31827-94-8), либо его получают путем бромирования в кислотной среде соответствующего ацетофенона (смотрите стадию 1 примера 1):

Схема 4

стадия (i): реакция между Р₆ и фталимидом калия, которая приводит к Р₇. Реакция может быть проведена в полярном растворителе, таком как ДМФА (смотрите стадию 2 примера 1 или стадию 1 примера 6);

стадия (ii): реакция Р₇ с N,N-диметилформамиддиэтилацеталем, которая приводит к Р₆. Реакция может быть проведена непосредственно с N,N-диметилформамиддиэтилацеталем при кипячении с обратным холодильником (смотрите стадию 1 примера 3);

стадия (iii): реакция Р₈ с гидразингидратом, которая приводит к Р₉. Реакция может быть проведена в полярном растворителе, таком как этанол (смотрите стадию 4 примера 1 или стадию 3 примера 6);

стадия (iv): реакция ацилирования Р₉ с хлорангидридом кислоты R₁COCl, которая приводит к Р₁₀. Реакция может быть проведена в хлорированном растворителе, таком как ДХМ, в присутствии нуклеофильного катализатора, такого как пиридин;

стадия (v): реакция циклизации Р₁₀ по Бишлеру-Наперальскому, которая приводит к Р₄. Реакцию можно проводить в присутствии Р₂О₅ и дихлорида фенилфосфиновой кислоты при температуре >100°С (стадию 6 примера 1 или стадию 5 примера 6). Можно также использовать POCl₃.

Соединения Р₄, у которых Х означает -CN, получают циклизацией соответствующих защищенных соединений Р₄, у которых Х означает -I. Используют, например, Zn(CN)₂ и комплекс палладия(0) (реакция Розенмунда-Брауна: смотрите Chem. Rev. 1951, 49, 392).

Получение Р ₂

Р₂ можно получить, следуя схеме 5 (смотрите также WO 2003082871 стадии 1-4 примера 4, с.34-36), из аминопиперидина, защищенного по аминогруппе:

Схема 5

PG' означает защитную группу для аминофункции. Преимущественно, это может быть группа ВОС (трет-бутоксикарбонил).

Таким образом, изобретение относится также к способу получения соединения формулы

в которой R₁, R₃ и R₄ такие, как определено выше, и Х означает атом водорода или фтора, цианогруппу, -С(=О)Н, -СН=СН₂, -С≡С-SiMe₃, -COOR_a, где R_a означает атом водорода или (С₁-С₄)алкильную группу или группу , состоящему в том, что:

(i) осуществляют реакцию сочетания соединений Р₁ и Р₂, описанных на схеме 1, в присутствии комплекса палладия и, необязательно, основания,

(ii) снимают защиту с продукта, полученного на предыдущей стадии (i).

Изобретение относится также к способу получения соединения формулы:

в которой R₁, R₃ и R₄ такие, как определено выше, и R₂ означает одну из следующих групп: -C(=O)NH₂, -C(=S)NH₂, -C(=O)H, -CH=N-OH, -CH₂OH, -CH₂F, -C≡CH или ,

из соединения формулы: , в которой Х означает группу -CN, -CHO, -CH₂OH, -C≡CH, -C≡C-SiMe₃ и А означает атом водорода или защитную группу PG,

состоящему в том, что:

(i)

- гидролизуют группу Х=-CN до группы R₂=-C(=O)NH₂ или -С(=О)ОН;

- превращают группу Х=-CN в группу R₂=-C(=S)NH₂ в присутствии сульфида аммония при микроволновом облучении;

- восстанавливают группу Х=-CN до группы R₂=-С(=О)Н;

- превращают группу Х=-С(=О)Н в группу R₂=-СН=N-ОН в присутствии NH₂OH;

- восстанавливают группу Х=-С(=О)Н до группы R₂=-CH₂OH;

- превращают группу Х=-С≡С-SiMe₃ в группу R₂=-С≡СН;

- фторируют группу Х=-СН₂ОН до группы R₂=-CH₂F;

- превращают группу Х=-С≡СН в группу R₂= реакцией циклоприсоединения в присутствии триметилсилилазида N₃SiMe₃.

(ii) при желании удаляют защитную группу продукта, полученного на предыдущей стадии (i).

Соединения формулы (I) могут быть также получены из соединений Р₁ и Р'₂, следуя схеме 6:

Схема 6

Стадию (i) осуществляют путем сочетания по Бухвальду-Хартвигу между Р₁ и Р'₂, что приводит к P'₃. PG означает защитную группу для NH-функциональной группы пиразольного цикла, PG' означает защитную группу для аминофункции и Х означает одну из следующих групп: -CN, -CHO, -CH=CH₂, -H, -F, -C≡C-SiMe₃, -COOR_a или .

На стадии (ii) снимают защитную группу с аминофункции, чтобы получить соединение Р′₄, которое затем взаимодействует на стадии (iii) с соединением R₄SO₂Cl с получением P′₅. Затем снимают защитную группу с NH-функциональной группы пиразольного цикла и получают соединение формулы (I).

Таким образом, изобретение относится также к способу получения соединения формулы

в которой R₁, R₃ и R₄ такие, как определено выше, и X означает атом водорода или фтора, или цианогруппу, -C(=O)H,

CH=CH₂, -C≡C-SiMe₃, -COOR_a или группу , где R_a означает

атом водорода или (C₁-C₄) алкильную группу

состоящему в том, что:

(i′) соединение Р′₄ формулы

подвергают взаимодействию с соединением R₄SO₂Cl, (ii′) удаляют защитную группу продукта, полученного на предыдущей стадии (i).

Изобретение относится также к соединениям формулы

(схема 1) или формулы (схема 6), в которых:

- R₁, R₂, R₃ и R₄ такие, как определено выше;

- Х означает атом водорода или фтора, цианогруппу, -С(=О)Н, -СН=СН₂, -С≡С-SiMe₃, -С≡СН, -COOR_a, где R_a означает атом водорода или (С₁-С₄)алкильную группу или группу ;

- PG означает защитную группу для NH-функциональной группы пиразольной группы;

- В означает атом водорода или защитную группу PG' для аминофункции.

Более конкретно, PG означает SEM или SO₂NMe₂ и PG' означает BOC.

В соответствии с 3-м аспектом, изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение такое, как описано выше, в комбинации с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом. Вспомогательное вещество выбирают, в зависимости от лекарственной формы и желаемого способа введения, из обычных вспомогательных веществ, которые известны специалисту.

В соответствии с 4-м аспектом, изобретение относится к лекарственному средству, содержащему соединение такое, как описано выше, а также к применению соединения такого, как описано выше, для получения лекарственного средства. Соединение может быть введено в сочетании с одним (или несколькими) другим противораковым агентом. Такой способ лечения может быть осуществлен при одновременном, раздельном или последовательном введении соединений. Способ лечения выбирается врачом в зависимости от заболевания и типа опухоли, на которую направлено лечение.

В соответствии с 5-м аспектом, изобретение относится также к способу лечения патологий, указанных выше, который включает введение пациенту эффективной дозы соединения согласно изобретению или одной из его фармацевтически приемлемых солей, или одного из его гидратов или сольватов.

ПРИМЕРЫ

Следующие примеры иллюстрируют получение некоторых соединений согласно изобретению.

Анализы LC-MS-DAD-ELSD

Колонка: Atlantis T3; 3,0Ч50 мм; размер гранул 3 мкм; по каталогу номер Waters 186003721; расход элюента=0,8 мл/мин; блок нагревания: LC=35°C; DAD: длина волны 200-400 нм; градиент за 7 мин с использованием смеси А (вода/муравьиная кислота 0,1%) и ацетонитрила В: 0 мин (95% А; 5% В); 5 мин (5% А; 95% В); 5,5 мин (5% А; 95% В); 6,5 мин (95% А; 5% В); 7 мин (95% А; 5% В).

Анализ ¹ Н-ЯМР

Спектры ¹Н-ЯМР записывали на приборе Brьker 400 МГц в ДМСО-d₆. Химические смещения приведены в м.д.

Получение соединений, указанных в таблице I

Пример 1: 5-(2,6-дифторфенил)-3-{[1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил]амино}-1H-пиразоло[4,3-c]изохинолин-7-карбоксамид

Стадия 1: В трехгорлую колбу емкостью 1 л вводят 50 г 4-йодацетофенона в 500 мл ледяной уксусной кислоты. Затем приливают по каплям при комнатной температуре (КТ) 10,4 мл брома. Реакционную среду перемешивают в течение 2 часов при комнатной температуре, затем выпаривают при пониженном давлении (ПД). Неочищенный продукт обрабатывают толуолом 3 раза примерно по 200 мл, затем один раз 200 мл метиленхлорида (ДХМ) и каждый раз концентрируют при пониженном давлении (ПД) для удаления всех следов уксусной кислоты и брома. Полученный твердый продукт оранжевого цвета сушат в вакууме в эксикаторе при комнатной температуре. Таким путем получают 66 г 2-бром-1-(4-йодфенил)этанона в виде твердого вещества оранжевого цвета, используемого на следующей стадии без дополнительной очистки.

Масс-спектр (MS) (E/I): m/z=404 (M+).

¹Н-ЯМР: 4,90 (с, 2Н), 7,74 (д, J=8,5 Гц, 2Н), 7,96 (д, J=8,5 Гц, 2Н).

Стадия 2: В колбу емкостью 500 мл вводят 66 г 2-бром-1-(4-йодфенил)этанона в 140 мл ДМФА и 38 г фталимида калия. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 часов и образовавшийся осадок отфильтровывают через фриттированное стекло, промывают 3 раза по 50 мл изопропиловым эфиром. Таким путем, после сушки при пониженном давлении получают 80 г 2-[2-(4-йодфенил)-2-оксоэтил]изоиндол-1,3-диона в виде твердого вещества белого цвета, используемого на следующей стадии без дополнительной очистки.

SM (E/I): m/z=391 (M+).

¹Н-ЯМР: 5,21 (с, 2Н), 7,84 (д, J=8,5 Гц, 2Н), 7,88-7,98 (м, 4Н), 8,00 (д, J=8,5 Гц, 2Н).

Тпл. (по Кофлеру): 230°C.

Стадия 3: В колбу емкостью 500 мл вводят 81,6 г 2-[2-(4-йодфенил)-2-оксоэтил]изоиндол-1,3-диона в 134 мл N,N-диметилформамиддиэтилацеталя. Реакционную среду нагревают с обратным холодильником в течение 5 часов, затем охлаждают на ледяной бане примерно до 0°С. Образовавшийся осадок центрифугируют на фриттированном стекле, промывают изопропиловым эфиром два раза по 50 мл, затем осуществляют 2 промывки с осветлением (промывка лепешки без перемешивания) с помощью 50 мл изопропилового эфира. После сушки при пониженном давлении, получают 79 г смеси изомеров Е и Z 2-[2-диметиламино-1-(4-йодбензоил)винил]изоиндол-1,3-диона в виде твердого вещества желто-оранжевого цвета.

SM (E/I): m/z=446 (M+).

¹Н-ЯМР: 2,92 (м шир., 6Н), 7,22 (д, J=8,5 Гц, 2Н), 7,49 (с шир., 1Н), 7,80 (д, J=8,5 Гц, 2Н), 7,92 (м, 4Н).

Т.пл. (по Кофлеру): 226°C.

Стадии 4: В колбу емкостью 1 л вводят при комнатной температуре 78,3 г смеси изомеров E и Z 2-[2-диметиламино-1-(4-йодбензоил)винил]изоиндол-1,3-диона в 535 мл этанола. Получают суспензию коричневого цвета, к которой добавляют 21 мл гидразингидрата. Суспензию нагревают с обратным холодильником. Через 30 минут нагревания наблюдается загустевание смеси, которая приобретает желто-лимонный цвет. Эту суспензию перемешивают при кипячении с обратным холодильником в течение 4 часов 30 минут, затем смесь доводят до комнатной температуры. Суспензию центрифугируют на фриттированном стекле и осадок промывают этанолом 2 раза по 100 мл. Получают фильтрат, который после выпаривания образует 46 г твердого вещества 1 желтого цвета и остаток 2 первоначального осадка, который сушат при пониженном давлении при 40°С и получают таким путем 39 г порошка кремового цвета. Твердое вещество 1 перемешивают в течение 15 минут в 300 мл EtOAc. Отфильтровывают и повторяют эту операцию 13 раз, используя каждый раз 150 мл EtOAc. Различные фильтраты объединяют и концентрируют при пониженном давлении. Таким путем получают 24,3 г твердого вещества золотисто-желтого цвета. Осадок 2 обрабатывают 300 мл EtOAc. Отфильтровывают и повторяют эту операцию 7 раз, используя каждый раз 150 мл EtOAc. Различные фильтраты объединяют и концентрируют при пониженном давлении. Получают 7,3 г твердого вещества желто-лимонного цвета. Обе партии объединяют, получая 31,6 г 3-(4-йодфенил)-1Н-пиразол-4-иламина (твердое вещество оранжевого цвета).

SM (E/I): m/z=285 (M+).

¹Н-ЯМР: 4,04 (с шир., 2Н), 7,15 (с, 1Н), 7,57 (д шир., J=8,5 Гц, 2Н), 7,72 (д, J=8,5 Гц, 2Н), 12,35 (м уш., 1Н).

Стадия 5: В колбу емкостью 2 л вводят 31,5 г 3-(4-йодфенил)-1Н-пиразол-4-иламина в 425 мл ДХМ и 278 мг пиридина. Смесь охлаждают до 0°С на ледяной бане и добавляют 13,9 мл хлорангидрида 2,6-дифторбензойной кислоты. Температуре в течение 3 часов дают постепенно подняться до комнатной температуры. После выпаривания растворителя при пониженном давлении в неочищенную реакционную среду добавляют воду, затем водный слой экстрагируют с помощью EtOAc. Органические экстракты объединяют, промывают насыщенным раствором NaCl, сушат над MgSO₄. Затем выпаривают EtOAc в вакууме и получают таким путем 49,2 г смеси 2,6-дифтор-N-[5-(4-йодфенил)-1Н-пиразол-4-ил]бензамида и N-[1-(2,6-дифторбензоил)-5-(4-йодфенил)-1H-пиразол-4-ил]-2,6-дифторбензамида в виде воздушной массы оранжевого оттенка, которую используют далее без дополнительной очистки. Неочищенную реакционную среду обрабатывают таким образом, чтобы получить только целевой продукт: в 3-литровой колбе при комнатной температуре в атмосфере аргона растворяют 49,2 г смеси 2,6-дифтор-N-[5-(4-йодфенил)-1Н-пиразол-4-ил]бензамида и N-[1-(2,6-дифторбензоил)-5-(4-йодфенил)-1H-пиразол-4-ил]-2,6-дифторбензамида в 950 мл этанола и 470 мл ТГФ, затем добавляют 385 мл 5 н. водного раствора едкого натра. Через 1 час перемешивания при комнатной температуре выливают смесь в 1025 мл 2 н. хлористоводородной кислоты. Экстрагируют с помощью EtOAc, промывают органические слои насыщенным раствором NaCl, сушат над MgSO₄, затем концентрируют при пониженном давлении. Получают неочищенный продукт, который суспендируют в 570 мл ДХМ и перемешивают при кипячении с обратным холодильником в ДХМ в течение 15 минут. После охлаждения с помощью ледяной бани, осадок центрифугируют промывают 2 раза с помощью 30 мл ледяного ДХМ. Получают 25,8 г 2,6-дифтор-N-[5-(4-йодфенил)-1Н-пиразол-4-ил]бензамида (твердое вещество кремового цвета).

SM (E/I): m/z=425 (M+).

¹Н-ЯМР: 7,15-7,25 (м, 2Н), 7,51 (д, J=8,5 Гц, 2Н), 7,57 (м, 1Н), 7,79 (д, J=8,5 Гц, 2Н), 7,93 (м уш., 1Н), 10,2 (с, 1Н), 13,3 (м уш., 1Н).

Тпл. (по Кофлеру): 204°С.

Стадия 6: В колбу емкостью 500 мл, снабженную магнитной мешалкой и приспособлением для ввода аргона, вводят 9,2 г 2,6-дифтор-N-[5-(4-йодфенил)-1Н-пиразол-4-ил]бензамида, 168 мл дихлорида фенилфосфиновой кислоты и 46,3 г пентоксида фосфора. После выдерживания в течение 23 часов при 165°С смесь охлаждают до комнатной температуры, затем выливают в смесь 260 мл воды и 400 г льда. Температура повышается до 40°С. Нейтрализуют путем медленного добавления 930 мл 3 М раствора карбоната натрия, затем 110 мл 28%-ного водного раствора гидроксида аммония. Экстрагируют 1 раз 1150 мл и 2 раза по 550 мл EtOAc. Органические экстракты объединяют, промывают насыщенным раствором NaCl и сушат над MgSO₄, затем концентрируют при пониженном давлении. Полученное твердое вещество перемешивают в течение 15 минут при кипячении с обратным холодильником в 220 мл ДХМ, охлаждают на ледяной бане, затем фильтруют и промывают 2 раза по 28 мл ледяным ДХМ. После сушки в вакууме при 40°С получают 7,4 г 5-(2,6-дифторфенил)-7-йод-1Н-пиразоло[4,3-c]изохинолина (твердое вещество кремового цвета).

SM (E/I): m/z=407 (M+).

¹Н-ЯМР: 7,39 (т, J=8,0 Гц, 2Н), 7,71 (м, 1Н), 7,99 (с шир., 1Н), 8,33 (м, 2Н), 8,45 (с шир., 1Н), 14,35 (с шир., 1Н).

Тпл. (по Кофлеру): 260°С.

Стадия 7: В колбу емкостью 1000 мл в атмосфере аргона вводят 7,4 г 5-(2,6-дифторфенил)-7-йод-1Н-пиразоло[4,3-c]изохинолина в 190 мл тетрагидрофурана и 20 мл диметилформамида (ДМФА), после охлаждения до 0°С на ледяной бане добавляют 1 г NaH (50%-ная суспензия в вазелиновом масле) и перемешивают в течение 30 минут при 0°С, затем добавляют при этой же температуре 2,7 мл диметилсульфамоилхлорида. После выдерживания в течение 1 часа при комнатной температуре неочищенную среду выливают в насыщенный раствор NH₄Cl. Водный слой экстрагируют 3 раза по 300 мл EtOAc. Органические экстракты объединяют, сушат над MgSO₄, концентрируют при пониженном давлении. После очистки флеш-хроматографией на силикагеле (40-63 мкм) с элюированием смесью ДХМ/метанол (98/02 об.) получают 9 г смеси региоизомеров положения: диметиламида 5-(2,6-дифторфенил)-7-йодпиразоло[4,3-c]изохинолин-1-сульфоновой кислоты и диметиламида 5-(2,6-дифторфенил)-7-йодпиразоло[4,3-c]изохинолин-2-сульфоновой кислоты, в виде твердого вещества.

SM (E/I): m/z=514 (M+).

¹Н-ЯМР: 3,02 (с, 6Н), 7,40 (т, J=8,0 Гц, 2Н), 7,74 (м, 1Н), 7,92 (с шир., 1Н), 8,32 (дд, J=1,5 и 8,5 Гц, 1Н), 8,39 (д, J=8,5 Гц, 1Н), 9,31 (с, 1Н).

Т.пл.: 224°С.

Стадия 8: В колбу емкостью 500 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником с вводом для аргона, помещают 5,4 г твердого вещества, полученного на стадии 7, в 100 мл ДМФА. После барботирования аргона в течение 10 минут к реакционной среде добавляют 1,6 г цианида цинка, 0,28 г Pd(PPh₃)₄ и нагревают смесь при 130°С при перемешивании в течение 1 часа 30 минут. Неочищенную реакционную смесь вливают в 100 объемов воды, водный слой экстрагируют 3 раза по 400 мл EtOAc, затем органические экстракты объединяют, сушат над MgSO₄ и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток загущают в диизопропилоксиде, фильтруют и сушат в эксикаторе при 35°С. Таким путем получают 3,3 г смеси региоизомеров диметиламида 7-циано-5-(2,6-дифторфенил)пиразоло[4,3-c]изохинолин-1-сульфоновой кислоты (твердое вещество кремового цвета).

SM (E/I): m/z=413 (M+).

¹Н-ЯМР: 3,03 (с, 6Н), 7,39 (т, J=8,0 Гц, 2Н), 7,75 (м, 1Н), 8,24 (с шир., 1Н), 8,38 (дд, J=1,5 и 8,5 Гц, 1Н), 8,76 (д, J=8,5 Гц, 1Н), 9,41 (с, 1Н).

Тпл.: 231°С (по Кофлеру).

Стадия 9: В колбу емкостью 250 мл вводят 4 г смеси региоизомеров диметиламида 7-циано-5-(2,6-дифторфенил)пиразоло[4,3-c]изохинолин-1-сульфоновой кислоты в 160 мл ДХМ. После охлаждения до 0°С на ледяной бане добавляют 108 мл ТФА и перемешивают при комнатной температуре в течение 6 часов. Смесь концентрируют при пониженном давлении, полученное твердое вещество обрабатывают 600 мл воды и добавляют 50 мл 0,75 М раствора гидроксида аммония. Водный слой экстрагируют 3 раза по 150 мл EtOAc. Органические экстракты объединяют, промывают насыщенным раствором NaCl, затем сушат над MgSO₄. После концентрирования EtOAc при пониженном давлении получают 2,6 г 5-(2,6-дифторфенил)-1Н-пиразоло[4,3-c]изохинолин-7-карбонитрила (твердое вещество бежевого цвета).

SM (E/I): m/z=306 (M+).

¹Н-ЯМР: 7,38 (т, J=8,0 Гц, 2Н), 7,72 (м, 1Н), 8,24 (с шир., 1Н), 8,34 (дд, J=1,5 и 8,5 Гц, 1Н), 8,59 (с, 1Н), 8,70 (д, J=8,5 Гц, 1Н), 14,5 (м очень уш., 1Н).

Стадия 10: В колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и приспособлением для ввода аргона, помещают 2,6 г 5-(2,6-дифторфенил)-1Н-пиразоло[4,3-c]изохинолин-7-карбонитрила в 85 мл ДМФА, 0,87 мл брома и 1,5 г КОН. После перемешивания в течение 1 часа при комнатной температуре смесь выливают в ледяную воду. Водный слой экстрагируют 3 раза по 150 мл EtOAc. Органические экстракты объединяют, промывают насыщенным раствором NaCl, затем сушат над MgSO₄ и выпаривают при пониженном давлении. Таким путем получают 3,3 г 3-бром-5-(2,6-дифторфенил)-1Н-пиразоло[4,3-c]изохинолин-7-карбонитрила, используемого на следующей стадии без дополнительной очистки (твердое вещество светло-желтого цвета).

SM (E/I): m/z=385 (M+).

¹Н-ЯМР: 7,39 (т, J=8,0 Гц, 2Н), 7,75 (м, 1Н), 8,34 (с шир., 1Н), 8,41 (дд, J=1,5 и 8,5 Гц, 1Н), 8,68 (д, J=8,5 Гц, 1Н), 14,5 (м уш., 1Н).

Стадия 11: В колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и приспособлением для ввода аргона, помещают 3,3 г 3-бром-5-(2,6-дифторфенил)-1Н-пиразоло[4,3-c]изохинолин-7-карбонитрила в 85 мл ДМФА, 10,6 мл N,N-диизопропилэтиламина и 3,2 мл 2-(триметилсилил)этоксиметилхлорида. После выдерживания в течение 5 часов при комнатной температуре смесь выливают в 8 объемов ледяной воды. Водный слой экстрагируют 3 раза по 200 мл EtOAc, органические экстракты объединяют, промывают насыщенным раствором NaCl, затем сушат над MgSO₄ и концентрируют при пониженном давлении. Очищают флеш-хроматографией на силикагеле (40-63 мкм), элюируя смесью ДХМ и метанола (99,5/0,5 об.), и получают, с одной стороны, 2,1 г 3-бром-5-(2,6-дифтофенил)-1-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-1Н-пиразоло[4,3-c]изохинолин-7-карбонитрила в виде твердого вещества белого цвета.

SM (E/I): m/z=515 (M+).

¹Н-ЯМР: -0,12 (с, 9Н), 0,87 (т, J=8,0 Гц, 2Н), 3,65 (т, J=8,0 Гц, 2Н), 6,17 (с, 2Н), 7,40 (т, J=8,0 Гц, 2Н), 7,77 (м, 1Н), 8,41 (с шир., 1Н), 8,47 (дд, J=1,5 и 8,5 Гц, 1Н), 8,77 (д, J=8,5 Гц, 1Н).

И, с другой стороны, 1,2 г 3-бром-5-(2,6-дифтофенил)-2-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-2Н-пиразоло[4,3-c]изохинолин-7-карбонитрила (твердое вещество белого цвета).

SM (E/I): m/z=515 (M+).

¹Н-ЯМР: -0,05 (с, 9Н), 0,90 (т, J=8,0 Гц, 2Н), 3,73 (т, J=8,0 Гц, 2Н), 5,92 (с, 2Н), 7,38 (т, J=8,0 Гц, 2Н), 7,76 (м, 1Н), 8,24 (с шир., 1Н), 8,34 (дд, J=1,5 и 8,5 Гц, 1Н), 8,69 (д, J=8,5 Гц, 1Н).

Стадия 12: В колбу емкостью 150 мл, снабженную магнитной мешалкой и приспособлением для ввода аргона, помещают 1 г 3-бром-5-(2,6-дифтофенил)-1-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-1Н-пиразоло[4,3-c]изохинолин-7-карбонитрила в 27 мл 1,4-диоксана. После барботирования аргона через реакционную среду в течение 10 минут добавляют 692 мг 1-метансульфонилпиперидин-4-иламина, 4 г карбоната цезия, 135 мг 9,9-диметил-4,5-бис(дифенилфосфино)ксантена и 43 мг ацетата палладия(II). Реакционную смесь нагревают с обратным холодильником в течение 4 часов. После охлаждения смесь выливают в воду, экстрагируют EtOAc, промывают насыщенным раствором NaCl, сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Очищают флеш-хроматографией на силикагеле (40-63 мкм), элюируя смесью ДХМ и EtOAc (85/15 об.), и получают таким путем 1 г 5-(2,6-дифтофенил)-3-{[1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил]амино}-1-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-1Н-пиразоло[4,3-c]изохинолин-7-карбонитрила (твердое вещество желтого цвета).

SM (E/I): m/z=596 (M+).

¹Н-ЯМР: -0,05 (с, 9Н), 0,89 (т, J=8,0 Гц, 2Н), 1,61 (м, 2Н), 2,11 (м, 2Н), 2,74 (м, 2Н), 2,85 (с, 3Н), 3,59 (м, 2Н), 3,68 (т, J=8,0 Гц, 2Н), 4,46 (м, 1Н), 5,69 (с, 2Н), 6,70 (д, J=8,0 Гц, 1Н), 7,34 (т, J=8,0 Гц, 2Н), 7,68 (м, 1Н), 7,97 (с шир., 1Н), 8,14 (дд, J=1,5 и 8,5 Гц, 1Н), 8,48 (д, J=8,5 Гц, 1Н).

Стадия 13: В колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и приспособлением для ввода аргона, помещают 1 г 5-(2,6-дифтофенил)-3-{[1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил]амино}-1-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-1Н-пиразоло[4,3-c]изохинолин-7-карбонитрила в 96 мл ДХМ. После охлаждения до 0°С на ледяной бане добавляют 10,7 мл ТФА и перемешивают при комнатной температуре в течение 20 часов. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и полученное твердое вещество обрабатывают 100 мл воды и экстрагируют три раза по 100 мл EtOAc, сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Таким путем получают 992 мг трифторацетата 5-(2,6-дифторфенил)-3-{[1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил]амино}-1Н-пиразоло[4,3-c]изохинолин-7-карбонитрила, используемого на следующей стадии без дополнительной очистки.

SM (E/I): m/z=482 (M+).

Стадия 14: В колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и приспособлением для ввода аргона, помещают 992 мг трифторацетата 5-(2,6-дифторфенил)-3-{[1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил]амино}-1Н-пиразоло[4,3-c]изохинолин-7-карбонитрила, 63 мл этанола, 30 мл ТГФ и 10 мл 9,3 н. гидроксида натрия. После кипячения с обратным холодильником в течение 3 часов смесь охлаждают и выливают в 250 мл 1 М водного раствора дигидрофосфата калия. Экстрагируют с помощью EtOAc, промывают насыщенным водным раствором NaCl, сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют досуха при пониженном давлении. Неочищенный твердый продукт растворяют в 20 мл ДМФА, затем добавляют 1 г гексафторфосфата бензотриазол-1-илокситрис(диметиламино)фосфония (ВОР), 323 мг 1-гидроксибензотриазола (НОВТ), 170 мг хлорида аммония и 1 мл N,N-диизопропилэтиламина (DIPEA). Через 2 часа перемешивания при комнатной температуре реакционную смесь выливают в воду, экстрагируют с помощью EtOAc, промывают 1 М водным раствором дигидрофосфата калия, затем насыщенным водным раствором NaCl. После сушки над MgSO₄ фильтрации и концентрирования при пониженном давлении, очищают флеш-хроматографией на силикагеле (40-63 мкм), элюируя смесью ДХМ, метанола и 4 н. метанольного раствора аммиака (90/10/1 об.), получают 321 мг 5-(2,6-дифторфенил)-3-{[1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил]амино}-1Н-пиразоло[4,3-c]изохинолин-7-карбоксамида (твердое вещество желто-лимонного цвета).

SM (E/I): m/z=500 (M+).

¹Н-ЯМР: 1,68 (м, 2Н), 2,11 (м, 2Н), 2,88 (с, 3Н), 2,90 (м, 2Н), 3,56 (м, 2Н), 3,80 (м, 1Н), 6,09 (д, J=8,0 Гц, 1Н), 7,33 (т, J=8,0 Гц, 2Н), 7,57 (с шир., 1Н), 7,69 (м, 1Н), 8,17 (с шир., 1Н), 8,23 (с шир., 1Н), 8,36 (д шир., J=8,5 Гц, 1Н), 8,45 (д, J=8,5 Гц, 1Н), 12,85 (с, 1Н).

Пример 2: 5-(2,6-дифторфенил)-3-{[1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил]амино}-1Н-пиразоло[4,3-c]изохинолин-7-карбальдегидоксим

Стадия 1: В колбу емкостью 250 мл, снабженную приспособлением для ввода аргона, помещают 2,4 г 5-(2,6-дифторфенил)-7-йод-1Н-пиразоло[4,3-c]изохинолина, полученного на стадии 6 примера 1, в 80 мл ДМФА, 0,80 мл брома и 1,4 г KOH. Через 1 час выдерживания при комнатной температуре смесь выливают в ледяную воду. Органический слой экстрагируют 3 раза по 150 мл EtOAc. Органические слои объединяют, промывают насыщенным раствором NaCl, сушат над MgSO₄ и выпаривают при пониженном давлении. Получают 2,23 г 3-бром-5-(2,6-дифторфенил)-7-йод-1Н-пиразоло[4,3-c]изохинолина (твердое вещество кремового цвета), используемого на следующей стадии без дополнительной очистки.

SM (E/I): m/z=486 (M+).

Стадия 2: В колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и приспособлением для ввода аргона, загружают 2,22 г 3-бром-5-(2,6-дифторфенил)-7-йод-1Н-пиразоло[4,3-c]изохинолина в 11 мл ДМФА. После барботирования аргона через среду в течение 10 минут добавляют 1,47 мл трибутилвинилстаннана и 481 мг дихлорида бис(трифенилфосфин)палладия(II). Нагревают смесь в течение 1 часа при 100°С, затем после охлаждения выпаривают досуха в вакууме. Получают масло, которое обрабатывают 350 мл EtOAc и 300 мл 20% водного раствора KF. Перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут, затем фильтруют суспензию на фриттированном стекле, покрытом слоем Clarcel Flo. Органический слой экстрагируют при помощи EtOAc, затем промывают насыщенным водным раствором NaCl, сушат над MgSO₄ и выпаривают досуха при пониженном давлении. Получают 3,1 г неочищенного вещества, которое очищают хроматографией на силикагеле (20-45 мкм), элюируя смесью ДХМ и метанола (95/5 об.), и получают 1,44 г 3-бром-5-(2,6-дифторфенил)-7-винил-1Н-пиразоло[4,3-c]изохинолина (твердое вещество светло-желтого цвета).

SM (E/I): m/z=386 (M+).

¹Н-ЯМР: 5,43 (д, J=11,2 Гц, 1Н), 6,00 (д, J=17,6 Гц, 1Н), 6,92 (дд, J=17,6; 11,2 Гц, 1Н), 7,37 (