Модуляция экспрессии фактора 11

Модуляция экспрессии фактора 11

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Перекрестная ссылка на родственные заявки

В соответствии со статьей 35 Кодекса законов США, в настоящей заявке испрашивается приоритет предварительной заявки № 61/105772, поданной 15 октября 2008, и предварительной заявки № 61/174461, поданной 30 апреля 2009. Каждая из вышеуказанных заявок во всей своей полноте вводится в настоящее описание посредством ссылки.

Список последовательностей

Настоящая заявка подана вместе со списком последовательностей в электронном формате. Список последовательностей представлен в виде файла, озаглавленного 20091015_BIOL0107WOSEQ.txt, который был создан 15 октября 2009 и имеет размер 92 Kb. Информация о списке последовательностей в электронном формате во всей своей полноте вводится в настоящее описание посредством ссылки.

Область техники, к которой относится изобретение

В некоторых своих вариантах, настоящее изобретение относится к способам, соединениям и композициям, применяемым для снижения уровня экспрессии мРНК и белка фактора 11 у животного. Такие способы, соединения и композиции могут быть применены для лечения, предупреждения или ослабления тромбоэмболических осложнений.

Предшествующий уровень техники

Для функционирования системы кровообращения необходимы механизмы, которые предупреждают потерю крови, а также механизмы, которые предотвращают нежелательную закупорку кровеносных сосудов. Вообще говоря, свертывание крови включает каскад реакций и, в конечном счете, приводит к превращению растворимого фибриногена в нерастворимый фибриновый гель. Стадии этого каскада реакций включают превращение неактивного зимогена в активированный фермент. Затем, активный фермент катализирует следующую стадию этого каскада реакций.

Каскад реакций свертывания крови

Каскад реакций свертывания крови может быть инициирован двумя путями, такими как путь тканевого фактора (также называемого «внешним путем»), который представляет собой первичный путь, и путь контактной активации (также называемый «внутренним путем»).

Путь тканевого фактора инициируется тканевым фактором, который представляет собой рецептор клеточной поверхности (TF, также называемый фактором III), и который конститутивно экспрессируется экстраваскулярными клетками (перицитами, кардимиоцитами, клетками гладких мышц и кератиноцитами), а также васкулярными моноцитами и эндотелиальными клетками после их индуцирования воспалительными цитокинами или эндотоксином. (Drake et al., Am J Pathol. 1989, 134:1087-1097). TF представляет собой высокоаффинный клеточный рецептор для фактора свертывания крови VIIa, то есть сериновая протеаза. В отсутствие TF фактор VIIa обладает очень низкой каталитической активностью, и связывание с TF необходимо для сообщения фактору VIIa функциональных свойств благодаря аллостерическому механизму. (Drake et al., Am. J. Pathol. 1989, 134:1087-1097). Комплекс TF-VIIa активирует превращение фактора X в фактор Xa. Xa, в свою очередь, ассоциируется с его кофактором, фактором Va, и образует протромбиназный комплекс, который, в свою очередь, активирует превращение протромбина (также называемого фактором II или фактором 2а) в тромбин (также называемый фактором IIa или фактором 2а). Тромбин активирует тромбоциты, превращает фибриноген в фибрин и стимулирует перекрестное связывание фибрина благодаря активации фактора XIII, что приводит к образованию устойчивого сгустка на тех участках экстраваскулярных клеток, на которых присутствует TF. Кроме того, тромбин усиливает ответ в виде каскада реакций свертывания крови благодаря активации факторов V и VIII.

Путь контактной активации запускается в результате активации фактора XII в XIIa. Фактор XIIa превращает XI в XIa, а XIa превращает IX в IXa. IXa ассоциируется с его кофактором VIIIa с последующим превращением X в Xa. Два пути сходятся в этой точке, поскольку фактор Xa ассоциируется с фактором Va, что приводит к активации протромбина (фактора II) в тромбин (фактор IIa).

Ингибирование свертывания крови

Контроль за прохождением каскада реакций свертывания крови осуществляется по меньшей мере по трем механизмам, а именно, под действием активированного белка C, антитромбина и ингибитора пути тканевого фактора. Активированный белок C представляет собой сериновую протеазу, которая разлагает кофакторы Va и VIIIa. Белок C активируется тромбином посредством тромбомодулина, а для его функционирования необходим кофермент белок S. Антитромбин представляет собой ингибитор сериновой протеазы (серпин), который ингибирует сериновые протеазы: тромбин, Xa, XIIa, XIa и IXa. Ингибитор пути тканевого фактора ингибирует действие Xa и комплекса TF-VIIa. (Schwartz A.L. et al., Trends Cardiovasc Med. 1997; 7:234-239.)

Заболевание

Тромбоз представляет собой патологическое образование сгустков крови, а эмболия возникает в том случае, когда сгустки крови мигрируют в другую часть организма и препятствуют нормальному функционированию органов. Тромбоэмболия может вызывать такие состояния, как тромбоз глубокой вены, эмболия легких, инфаркт миокарда и инсульт. В основном тромбоэмболия является главной причиной возникновения тяжелых заболеваний, и в Америке каждый год регистрируется 2 миллиона новых случаев развития такого заболевания (Adcock et al. American Journal of Clinical Pathology. 1997; 108:434-49). Хотя в большинстве случаев тромбоз вызывается приобретенными неприродными факторами, такими как хирургическая операция, рак и неподвижный образ жизни, однако, в некоторых случаях, тромбоз ассоциируется с генетической предрасположенностью, например, он может вызываться антифосфолипидным синдромом и аутосомно-доминантным состоянием, ассоциированным с присутствием фактора V Лейдена. (Bertina R.M. et al. Nature 1994; 369:64-67).

Лечение

Все наиболее часто используемые средства, такие как антикоагулянты, варфарин, гепарин и низкомолекулярный гепарин (НМГ) имеют множество недостатков.

Варфарин обычно используется для лечения пациентов, страдающих трепетанием предсердий. Такое лекарственное средство взаимодействует с активируемыми витамином К факторами свертывания крови, которыми являются факторы II, VII, IX и X. Белки-антикоагулянты С и S также ингибируются варфарином. Терапия лекарственными средствами, проводимая с использованием варфарина, также сталкивается с определенными проблемами, заключающимися в том, что варфарин взаимодействует с другими лекарственными средствами, включая лекарственные средства, используемые для лечения трепетания предсердий, такие как амиодарон. Поскольку исход терапии с использованием варфарина трудно предсказать, то для детектирования каких-либо признаков аномального кровотечения, пациент должен пройти тщательное обследование.

Гепарин действует путем активации антитромбина, который ингибирует тромбин и фактор X. (Bjork I, Lindahl U. Mol. Cell Biochem. 1982 48:161-182). Лечение гепарином может приводить к иммунным реакциям, стимулирующим агрегацию тромбоцитов в кровеносных сосудах, что может вызывать тромбоз. Такими известными побочными эффектами являются индуцированная гепарином тромбоцитопения (ГИТ), а поэтому необходимо проводить обследование пациента. Продолжительное лечение гепарином может также приводить к остеопорозу. НМГ может также ингибировать фактор 2, но в меньшей степени, чем нефрагментированный гепарин (НФГ). НМГ участвует в развитии тромбоцитопении (ГИТ).

Таким образом, при применении современных антикоагулянтов невозможно предсказать исход и специфичность лечения, а поэтому, для предупреждения побочных эффектов, таких как аномальное кровотечение, необходимо тщательное обследование пациента. В настоящее время не существует антикоагулянтов, механизм действия которых относился бы только к «внешнему пути» или к «внутреннему пути».

Описание сущности изобретения

Настоящее изобретение относится к способам, соединениям и к композициям для модуляции экспрессии мРНК и белка фактора 11. В некоторых вариантах изобретения, специфические ингибиторы фактора 11 модулируют экспрессию мРНК и белка фактора 11. В некоторых вариантах изобретения, специфические ингибиторы фактора 11 представляют собой нуклеиновые кислоты, белки или небольшие молекулы.

В некоторых вариантах изобретения, модуляция может происходить в клетках или тканях. В некоторых вариантах изобретения, такими клетками или тканями являются клетки или ткани животного. В некоторых вариантах изобретения, указанным животным является человек. В некоторых вариантах изобретения, уровни мРНК фактора 11 являются пониженными. В некоторых вариантах изобретения, уровни белка фактора 11 являются пониженными. Такое снижение может зависеть от времени или от дозы.

Настоящее изобретение также относится к способам, соединениям и композициям, которые могут быть применены для предупреждения, лечения и ослабления симптомов заболеваний, расстройств и состояний. В некоторых вариантах изобретения, такие заболевания, расстройства и состояния представляют собой тромбоэмболические осложнения. Указанные тромбоэмболические осложнения включают тромбоз, эмболию и тромбоэмболию различных категорий. В некоторых вариантах изобретения, такими тромбоэмболическими осложнениями являются тромбоз глубокой вены, эмболия легких, инфаркт миокарда и инсульт.

Указанные заболевания, расстройства и состояния могут быть ассоциированы с одним или несколькими факторами риска и являются этиологическим фактором или наиболее частой причиной исхода заболевания. Некоторыми факторами риска и причиной развития тромбоэмболических осложнений являются неподвижный образ жизни, хирургическая операция (в частности, ортопедическая хирургическая операция), злокачественная опухоль, беременность, возрастные изменения, применение пероральных контрацептивов, трепетание предсердий, предшествующие тромбоэмболические осложнения, хроническое воспалительное заболевание и наследуемые или приобретенные расстройства, ассоциированные с образованием протромботических сгустков. Исходом некоторых заболеваний, ассоциированных с развитием тромбоэмболических осложнений, являются снижение потока крови через пораженные сосуды, гибель ткани и летальный исход.

В некоторых вариантах изобретения, способы лечения включают введение индивидууму, нуждающемуся в этом, специфического ингибитора фактора 11.

Подробное описание изобретения

Следует отметить, что представленное выше общее описание и нижеследующее подробное описание приводятся лишь в целях иллюстрации и лучшего понимания настоящего изобретения и не должны рассматриваться как ограничение заявленного изобретения. В настоящем описании, при употреблении слов в единственном числе подразумевается, что они могут быть использованы и во множественном числе, если это не оговорено особо. Используемый здесь союз «или» означает «и/или», если это не указано конкретно. Кроме того, используемый здесь термин «включая», а также другие его грамматические формы, такие как «включает» или «включенный», не имеют ограничивающего смысла. Кроме того, такие термины, как «элемент» или «компонент» охватывают как элементы, так и компоненты, включающие один объект, и элементы и компоненты, которые включают более чем один субэлемент или субкомпонент, если это не указано конкретно.

Заголовки разделов настоящего описания приводятся лишь в организационных целях и не должны рассматриваться как ограничение предмета изобретения. Все документы или их части, цитируемые в настоящей заявке, включая, но не ограничиваясь ими, патенты, патентные заявки, статьи, монографии и договора, вводятся в настоящее описание частично, а также во всей своей полноте посредством ссылки.

Определения

Если это не указано конкретно в разделе «Определения», номенклатура, используемая в соответствии с настоящим изобретением, а также процедуры и методы, применяемые в аналитической химии, химии органического синтеза, а также в медицинской и фармацевтической химии, и описанные в настоящей заявке, хорошо известны и широко применяются специалистами в данной области. Химический синтез и химический анализ могут быть осуществлены с применением стандартных методов. Все патенты, патентные заявки, опубликованные заявки и другие публикации, а также регистрационные номера GENBANK и представленная информация о последовательностях, полученная из баз данных, таких как базы данных Национального центра биотехнологической информации (NCBI), и другая информация, если она приводится в описании настоящей заявки, вводятся в описание обсуждаемого документа частично, а также во всей своей полноте посредством ссылки.

Представленные ниже термины, если это не оговорено особо, имеют следующие значения:

Термин «2′-O-метоксиэтил» (также обозначаемый 2′-MOE и 2′-O(CH₂)₂-OCH₃) означает O-метоксиэтильную модификацию во 2′-положении фурозильного кольца. Модифицированным сахаром является сахар, модифицированный 2′-O-метоксиэтилом.

Термин «2′-O-метоксиэтил-нуклеотид» означает нуклеотид, включающий сахарную группу, модифицированную 2′-O-метоксиэтилом.

Термин «5-метилцитозин» означает цитозин, модифицированный метильной группой, присоединенной в 5′-положении. 5-метилцитозин представляет собой модифицированное нуклеотидное основание.

Термин «активное фармацевтическое средство» означает вещество или вещества, присутствующие в фармацевтической композиции, которая при ее введении индивидууму дает терапевтический эффект. Так, например, в некоторых вариантах изобретения активным фармацевтическим средством является антисмысловой олигонуклеотид, нацеленный на фактор 11.

Термины «активная область-мишень» или «область-мишень» означают область, на которую нацелены одно или несколько активных антисмысловых соединений. Термин «активные антисмысловые соединения» означает антисмысловые соединения, снижающие уровни нуклеиновой кислоты-мишени или белка-мишени.

Термин «сопутствующее введение» означает совместное введение двух средств любым способом, позволяющим продуцировать у пациента фармакологические эффекты в ответ на одновременное введение этих двух средств. Сопутствующее введение не означает, что оба средства должны быть обязательно введены в виде одной фармацевтической композиции или в виде одной лекарственной формы или одним и тем же способом введения. Эффекты от введения этих двух средств необязательно должны наблюдаться в одно и то же время. Такие эффекты должны лишь совпадать по времени и необязательно должны быть коэкстенсивными.

Термин «введение» означает доставку фармацевтического средства индивидууму, и этот термин включает, но не ограничивается ими, введение этого средства специалистом-медиком и самостоятельное введение.

Термин «улучшение» означает ослабление по меньшей мере одного показателя, признака или симптома, ассоциированного с указанным заболеванием, расстройством или состоянием. Тяжесть заболеваний может быть определена по субъективным или объективным критериям, известным специалистам.

Термин «животное» относится к человеку или к животному, не являющемуся человеком, включая, но не ограничиваясь ими, мышей, крыс, кроликов, собак, кошек, свиней и приматов, не являющихся человеком, включая, но не ограничиваясь ими, обезьян и шимпанзе.

Термин «соединение-антидот» означает соединение, обладающее способностью снижать интенсивность или продолжительность какой-либо активности, опосредуемой антисмысловой молекулой.

Термин «олигонуклеотид-антидот» означает соединение-антидот, включающее олигонуклеотид, который является комплементарным антисмысловому соединению и обладает способностью гибридизоваться с указанным соединением.

Термин «белок-антидот» означает соединение-антидот, содержащее пептид.

Термин «антитело» означает молекулу, характеризующуюся способностью специфически взаимодействовать с антигеном по соответствующему механизму, где определения каждого из терминов «антитело» и «антиген» взаимосвязаны друг с другом. Термин «антитело» может означать полноразмерную молекулу антитела или любой его фрагмент, или любую его область, такую как тяжелая цепь, легкая цепь, Fab-область и Fc-область.

Термин «антисмысловая активность» означает любую детектируемую или измеримую активность, направленную на гибридизацию антисмыслового соединения с его нуклеиновой кислотой-мишенью. В некоторых вариантах изобретения, антисмысловая активность означает снижение количества или уровня экспрессии нуклеиновой кислоты-мишени или белка-мишени, кодируемого такой нуклеиновой кислотой-мишенью.

Термин «антисмысловое соединение» означает олигомерное соединение, обладающее способностью гибридизоваться с нуклеиновой кислотой-мишенью посредством водородной связи.

Термин «ингибирование антисмысловым соединением» означает снижение уровней нуклеиновой кислоты-мишени или уровней белка-мишени в присутствии антисмысловоого соединения, комплементарного нуклеиновой кислоте-мишени, по сравнению с уровнями нуклеиновой кислоты-мишени или уровнями белка-мишени в отсутствии такого антисмыслового соединения.

Термин «антисмысловой олигонуклеотид» означает одноцепочечный олигонуклеотид, имеющий нуклеотидную последовательность, которая способна гибридизироваться с соответствующей областью или с соответствующим сегментом нуклеиновой кислоты-мишени.

Термин «бициклический сахар» означает фурозильное кольцо, модифицированное мостиковой связью между двумя атомами неконденсированного кольца. Бициклический сахар представляет собой модифицированный сахар.

Термин «бициклическая нуклеиновая кислота» или «БНК» означают нуклеозид или нуклеотид, где фуранозная часть нуклеозида или нуклеотида включает мостик, соединяющий два атома углерода на фуранозном кольце, образуя, тем самым, бициклическую систему.

Термины «кэп-структура» или «концевая кэп-молекула» означают химические модификации, которые были введены у любого конца антисмыслового соединения.

Термин «химически отличающаяся область» означает область антисмыслового соединения, которая по своим химическим свойствам в определенной степени отличается от другой области того же самого антисмыслового соединения. Так, например, область, имеющая 2′-O-метоксиэтил-нуклеотиды, по своим химическим свойствам отличается от области, имеющей нуклеотиды, не содержащие 2′-O-метоксиэтиловых модификаций.

Термин «химерное антисмысловое соединение» означает антисмысловое соединение, имеющее по меньшей мере две химически отличающихся области.

Термин «совместное введение» означает введение индивидууму двух или более фармацевтических средств. Два или более фармацевтических средства могут присутствовать в одной фармацевтической композиции, либо не могут присутствовать в отдельных фармацевтических композициях. Каждое из двух или более фармацевтических средств может быть введено одним и тем же или различными способами введения. Термин «совместное введение» охватывает одновременное или последовательное введение.

Термин «фактор свертывания крови» означает любой из факторов I, II, III, IV, V, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII или TAFI в каскаде реакций свертывания крови. Термин «нуклеиновая кислота фактора свертывания крови» означает любую нуклеиновую кислоту, кодирующую фактор свертывания крови. Так, например, в некоторых вариантах изобретения, нуклеиновой кислотой, кодирующей фактор свертывания крови, являются, но не ограничиваются ими, последовательность ДНК, кодирующая фактор свертывания крови (включая геномную ДНК, содержащую интроны и экзоны), последовательность РНК, транскрибируемая из ДНК, кодирующей фактор свертывания крови, и последовательность мРНК, кодирующая фактор свертывания крови. Термин «мРНК фактора свертывания крови» означает мРНК, кодирующая белок фактора свертывания крови.

Термин «комплементарность» означает способность образовывать пары между нуклеотидными основаниями первой нуклеиновой кислоты и второй нуклеиновой кислоты.

Термин «смежные нуклеотидные основания» означает нуклеотидные основания, расположенные непосредственно друг за другом.

Термин «разбавитель» означает ингредиент композиции, который не обладает фармакологической активностью, но обладает необходимыми или желательными фармацевтическими свойствами. Так, например, разбавитель в композиции, вводимой путем инъекции, может представлять собой жидкость, например физиологический раствор.

Термин «доза» означает определенное количество фармацевтического средства, доставляемого путем однократного введения или введения в течение определенного периода времени. В некоторых вариантах изобретения, доза может быть введена в виде одной, двух или более болюсов, таблеток или инъекций. Так, например, в некоторых вариантах изобретения, где желательно подкожное введение, для доставки нужной дозы требуется объем, который невозможно ввести одной инъекцией, а поэтому для доставки необходимой дозы могут потребоваться две или более инъекции. В некоторых вариантах изобретения, фармацевтическое средство вводят путем вливания в течение длительного периода времени или непрерывно. Дозы могут быть определены как количество фармацевтического средства в час, в день, в неделю или в месяц.

Термин «эффективное количество» означает количество активного фармацевтического средства, достаточное для достижения желаемого физиологического эффекта у индивидуума, нуждающегося в введении такого средства. Эффективное количество может варьироваться у различных индивидуумов в зависимости от состояния здоровья и физического состояния индивидуума, подвергаемого лечению, таксономической группы индивидуумов, подвергаемых лечению, способа приготовления композиции, тяжести патологического состояния у индивидуума и других релевантных факторов.

Термин «нуклеиновая кислота фактора 11» или «нуклеиновая кислота фактора XI» или «нуклеиновая кислота F 11» или «нуклеиновая кислота F XI» означает любую нуклеиновую кислоту, кодирующую фактор 11. Так, например, в некоторых вариантах изобретения, нуклеиновая кислота фактора 11 включает последовательность ДНК, кодирующую фактор 11, последовательность РНК, транскрибируемую из ДНК, кодирующей фактор 11 (включая геномную ДНК, содержащую интроны и экзоны), и последовательность мРНК, кодирующую фактор 11. Термин «мРНК фактора 11» означает мРНК, кодирующую белок фактора 11.

Термин «специфический ингибитор фактора 11» означает любой агент, обладающий способностью специфически ингибировать экспрессию мРНК фактора 11 и/или белка фактора 11 на молекулярном уровне. Так, например, специфическими ингибиторами фактора 11 являются нуклеиновые кислоты (включая антисмысловые соединения), пептиды, антитела, небольшие молекулы и другие агенты, обладающие способностью ингибировать экспрессию мРНК фактора 11 и/или белка фактора 11. В некоторых вариантах изобретения, специфические ингибиторы фактора 11, благодаря их способности специфически модулировать экспрессию мРНК фактора 11 и/или экспрессию белка фактора 11, могут оказывать влияние на другие компоненты каскада реакций свертывания крови, включая компоненты, участвующие в последующем пути этих реакций. Аналогичным образом, в некоторых вариантах изобретения, специфические ингибиторы фактора 11 могут влиять и на другие молекулярные процессы у животного.

Термин «специфический антидот ингибитора фактора 11» означает соединение, обладающее способностью ослаблять действие специфического ингибитора фактора 11. В некоторых вариантах изобретения, антидот специфического ингибитора фактора 11 выбран из пептида фактора 11; олигонуклеотида-антидота фактора 11, включая соединение-антидот фактора 11, комплементарное антисмысловому соединению фактора 11, и любого соединения или белка, влияющего на внутренний или внешний путь каскада реакций свертывания крови.

Термин «полностью комплементарный» или «комплементарный на 100%» означает, что каждое нуклеотидное основание первой нуклеиновой кислоты комплементарно нуклеотидному основанию второй нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах изобретения, первой нуклеиновой кислотой является антисмысловое соединение, а нуклеиновой кислотой-мишенью является вторая нуклеиновая кислота.

Термин «гэпмер» означает химерное антисмысловое соединение, в котором внутренняя область, имеющая множество нуклеозидов, обеспечивающих расщепление РНКазой H, расположена между внешними областями, имеющими один или более нуклеозидов, где указанные нуклеозиды, составляющие внутреннюю область, по своим химическим свойствам отличаются от нуклеозида или нуклеозидов, составляющих внешние области. Внутренняя область может называться «гэп-сегментом», а внешние области могут называться «сегментами-крыльями».

Термин «уширенный гэп» означает химерное антисмысловое соединение, имеющее гэп-сегмент длиной в 12 или более смежных 2′-дезоксирибонуклеозидов, расположенных между 5′- и 3′-сегментами-крыльями, имеющими от одного до шести нуклеозидов, и непосредственно смежных с этими сегментами.

Термин «гибридизация» означает отжиг комплементарных молекул нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах изобретения, комплементарными молекулами нуклеиновой кислоты являются антисмысловое соединение и нуклеиновая кислота-мишень.

Термин «идентификация животного с риском развития тромбоэмболических осложнений» означает идентификацию животного, у которого было диагностировано тромбоэмболическое осложнение, или идентификацию животного с предрасположенностью к развитию тромбоэмболического осложнения. Индивидуумами с предрасположенностью к развитию тромбоэмболического осложнения являются индивидуумы с одним или более факторами риска развития тромбоэмболических осложнений, включая неподвижный образ жизни, хирургическую операцию (а в частности, ортопедическую хирургическую операцию), злокачественную опухоль, беременность, возрастные изменения, применение пероральных контрацептивов, и наследуемые или приобретенные расстройства, ассоциированные с образованием протромботических сгустков. Такая идентификация может быть осуществлена любым методом, включая ознакомление с историей болезни пациента и стандартные клинические испытания или анализы.

Термин «непосредственно смежный» означает, что между непосредственно смежными элементами отсутствуют какие-либо встроенные элементы.

Термин «индивидуум» относится к человеку или к животному, не являющемуся человеком, которые были отобраны для лечения или терапии.

Термин «межнуклеозидная связь» означает химическую связь между нуклеозидами.

Термин «связанные нуклеозиды» означает смежные нуклеозиды, связанные друг с другом.

Термин «несоответствующее» или «некомплементарное нуклеотидное основание» означает нуклеотидное основание первой нуклеиновой кислоты, не обладающее способностью спариваться с соответствующим нуклеотидным основанием второй нуклеиновой кислоты или нуклеиновой кислоты-мишени.

Термин «модифицированная межнуклеозидная связь» означает замену или любую модификацию природной межнуклеозидной связи (то есть, фосфодиэфирной межнуклеозидной связи).

Термин «модифицированное нуклеотидное основание» означает любое нуклеотидное основание, за исключением аденина, цитозина, гуанина, тимидина или урацила. Термин «немодифицированное нуклеотидное основание» означает пуриновые основания, такие как аденин (А) и гуанин (G), и пиримидиновые основания, такие как тимин (T), цитозин (C) и урацил (U).

Термин «модифицированный нуклеотид» означает нуклеотид, имеющий, независимо, модифицированную сахарную группу, модифицированную межнуклеозидную связь или модифицированное нуклеотидное основание. Термин «модифицированный нуклеозид» означает нуклеозид, имеющий, независимо, модифицированную сахарную группу или модифицированное нуклеотидное основание.

Термин «модифицированный олигонуклеотид» означает олигонуклеотид, включающий модифицированную межнуклеозидную связь, модифицированный сахар или модифицированное нуклеотидное основание.

Термин «модифицированный сахар» означает природный сахар с замещением или модификацией.

Термин «мотив» означает набор химических отличающихся областей, присутствующих в антисмысловом соединении.

Термин «природная межнуклеозидная связь» означает фосфодиэфирную 3′- 5′-связь.

Термин «природная сахарная группа» означает сахар, присутствующий в ДНК (2′-H) или РНК (2′-OH).

Термин «нуклеиновая кислота» означает молекулы, состоящие из мономерных нуклеотидов. Нуклеиновыми кислотами являются рибонуклеиновые кислоты (РНК), дезоксирибонуклеиновые кислоты (ДНК), одноцепочечные нуклеиновые кислоты, двухцепочечные нуклеиновые кислоты, короткие интерферирующие рибонуклеиновые кислоты (киРНК) и микроРНК (миРНК).

Термин «нуклеотидное основание» означает гетероциклическую молекулу, способную спариваться с основанием другой нуклеиновой кислоты.

Термин «последовательность нуклеотидных оснований» означает порядок расположения смежных нуклеотидных оснований независимо от каких-либо модификаций сахаров, связей или нуклеотидных оснований.

Термин «нуклеозид» означает нуклеотидное основание, связанное с сахаром.

Термин «нуклеозидный миметик» включает структуры, используемые для замены сахара или сахара и основания и, необязательно, связи в одном или нескольких положениях олигомерного соединения, например, такие структуры, как нуклеозидные миметики, имеющие морфолино, циклогексенил, циклогексил, тетрагидропиранил; и бициклические или трициклические сахарные миметики, например не фуранозные сахарные звенья. Нуклеотидными миметиками являются структуры, используемые для замены нуклеозида и связи в одном или нескольких положениях олигомерного соединения, например, такие как связанные с пептидом нуклеиновые кислоты или морфолино-связи (морфолино-группы, связанные -N(H)-C(=O)-O-связью или другой нефосфодиэфирной связью). Термин «сахарный суррогат» перекрывается с несколько более широким термином «нуклеозидный миметик», но указывает только на замену сахарного звена (фуранозного кольца). Используемые здесь тетрагидропиранильные кольца приводятся в иллюстративных целях, лишь в качестве примера сахарного суррогата, где фуранозная сахарная группа была заменена тетрагидропиранильной циклической системой.

Термин «нуклеотид» означает нуклеозид, имеющий фосфатную группу, ковалентно связанную с сахарной частью нуклеозида.

Термин «олигомерное соединение» или «олигомер» означает полимер, состоящий из мономерных связанных субъединиц, способных гибридизироваться по меньшей мере с одной областью молекулы нуклеиновой кислоты.

Термин «олигонуклеотид» означает полимер из связанных нуклеозидов, каждый из которых, независимо друг от друга, может быть модифицированным или немодифицированным.

Термин «парентеральное введение» означает введение путем инъекции или вливания. Парентеральным введением является подкожное введение, внутривенное введение, внутримышечное введение, внутриартериальное введение, внутрибрюшинное введение или внутричерепное введение, например интратекальное введение или интрацеребровентрикулярное введение.

Термин «пептид» означает молекулу, образованную посредством связывания по меньшей мере двух аминокислот амидными связями. Термин «пептид» относится к полипептидам и белкам.

Термин «фармацевтическая композиция» означает смесь веществ, подходящих для введения индивидууму. Так, например, фармацевтическая композиция может содержать одно или несколько активных фармацевтических средств и стерильный водный раствор.

Термин «фармацевтически приемлемые соли» означает физиологически и фармацевтически приемлемые соли антисмысловых соединений, то есть, соли, которые сохраняют нужную биологическую активность родительского олигонуклеотида и не дают каких-либо нежелательных токсических эффектов.

Термин «фосфортиоатная связь» означает связь между нуклеозидами, где указанную фосфодиэфирную связь модифицируют путем замещения одного немостикового атома кислорода атомом серы. Фосфортиоатная связь (P=S) представляет собой модифицированную межнуклеозидную связь.

Термин «часть» означает определенное число смежных (то есть, связанных) нуклеотидных оснований нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах изобретения, термин «часть» означает определенное число смежных нуклеотидных оснований нуклеиновой кислоты-мишени. В некоторых вариантах изобретения, термин «часть» означает определенное число смежных нуклеотидных оснований антисмыслового соединения.

Термин «предупреждение» означает замедление или предотвращение начала или развития заболевания, расстройства или состояния на период времени от нескольких минут и до конца жизни. Термин «предупреждение» также означает снижение риска развития заболевания, расстройства или состояния.

Термин «пролекарство» означает терапевтическое средство, полученное в неактивной форме, которая затем превращается в активную форму в организме или в клетках под действием эндогенных ферментов или других химических соединений или в других условиях.

Термин «побочные эффекты» означает физиологические ответы, вырабатывающиеся в процессе лечения и являющиеся нежелательными эффектами. В некоторых вариантах изобретения, побочными эффектами являются реакции, возникающие в области инъекции; нарушения функции печени, выявленные в результате обследования; нарушения функции почек; гепатотоксичность; токсическое действие на почки; нарушения функции центральной нервной системы; миопатии; и недомогания. Так, например, на гепатотоксичность или нарушение функции печени могут указывать повышенные уровни аминотрансферазы в сыворотке. Так, например, на гепатотоксичность и нарушения функции печени могут указывать повышенные уровни билирубина.

Термин «одноцепочечный олигонуклеотид» означает олигонуклеотид, который не гибридизуется с комплементарной цепью.

Термин «специфически гибридизующийся» относится к антисмысловому соединению, в котором степень комплементарности между антисмысловым олигонуклеотидом и нуклеиновой кислотой-мишенью является достаточной для достижения желаемого эффекта, но при этом оказывает минимальное действие или вообще не оказывает какого-либо действия на нуклеиновые кислоты, не являющиеся мишенями, в условиях, при которых такое специфическое связывание является желательным, то есть в физиологических условиях при проведении in vivo анализов и терапевтического лечения.

Термин «нацеливание» или «нацеленный» относится к способу конструирования и отбора антисмыслового соединения, которое будет специфически гибридизоваться с нуклеиновой кислотой-мишенью и давать желаемый эффект.

Термины «нуклеиновая кислота-мишень», «РНК-мишень» и «РНК-транскрипт, являющийся мишенью» означают нуклеиновую кислоту, на которую могут быть нацелены антисмысловые соединения.

Термин «сегмент-мишень» означает нуклеотидную последовательность нуклеиновой кислоты-мишени, на которую нацелено антисмысловое соединение. Термин «5′-сайт-мишень» означает самый крайний 5′-концевой нуклеотид сегмента-мишени. Термин «3′-сайт-мишень» означает самый крайний 3′-концевой нуклеотид сегмента-мишени.

Термин «терапевтически эффективное количество» означает количество фармацевтического средства, достаточное для достижения у индивидуума терапевтического эффекта.

Термин «тромбоэмболическое осложнение» означает любое заболевание, расстройство или состояние, приводящее к эмболии, вызываемой тромбами. Примерами таких заболеваний, расстройств и состояний являются различные категории тромбоза, эмболии и тромбоэмболии. В некоторых вариантах изобретения, такими заболеваниями, расстройствами и состояниями являются тромбоз глубокой вены, эмболия легких, инфаркт миокарда и инсульт.

Термин «лечение» означает введение фармацевтической композиции для положительного изменения течения заболевания, расстройства или состояния или улучшение состояния здоровья пациента при таком заболевании, расстройстве или состоянии.

Термин «немодифицированный нуклеотид» означает нуклеотид, состоящий из природных нуклеотидных оснований,