Антитело против siglec-15

Антитело против siglec-15

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к веществу, используемому в качестве терапевтического и/или профилактического средства против патологического метаболизма костной ткани, и к способу лечения и/или профилактики патологического метаболизма костной ткани.

Предпосылки изобретения

Известно, что кость является динамическим органом с постоянной перестройкой путем повторяющегося формирования и резорбции, в связи с чем изменяется ее морфология и поддерживаются уровни кальция в крови. В здоровой кости поддерживается равновесие между формированием кости остеобластами и резорбцией кости остеокластами, и костная масса поддерживается постоянной. В отличие от этого, при потере равновесия между формированием кости и резорбцией кости, происходит патологический метаболизм костной ткани, такой как остеопороз (WO 07/093042 и Endocrinological Review, (1992) 13, pp. 66-80).

В качестве факторов, регулирующих метаболизм костной ткани, опубликовано множество системных гормонов и местных цитокинов, и эти факторы взаимодействуют друг с другом для формирования и поддержания кости (WO 07/093042 и Endocrinological Review, (1996) 17, pp. 308-332). Изменение костной ткани при старении и возникновение в связи с этим остеопороза, хорошо известно, но механизм его возникновения включает различные факторы, такие как уменьшение секреции половых гормонов и аномалии рецепторов гормонов; изменение местной экспрессии цитокинов в кости; экспрессия связанных со старением генов; и невозможность дифференцировки или дисфункция остеокластов или остеобластов, и таким образом, остеопороз трудно рассматривать как просто связанный с возрастом физиологический феномен. Первичный остеопороз в основном разделяют на постменопаузальный остеопороз, связанный с уменьшением секреции эстрогенов, и старческий остеопороз, связанный со старением, но прогрессирование фундаментальных исследований механизмов регуляции формирования кости и резорбции кости является необходимым для выяснения механизма его возникновения и для поиска лекарственных средств против него.

Остеокласты представляют собой многоядерные клетки, происходящие из гематопоэтических стволовых клеток, и посредством высвобождения ионов хлорида и ионов водорода на поверхность кости, на которой происходит адгезия остеокластов, остеокласты окисляют промежуток между поверхностью кости и остеокластами, а также секретируют катепсин К, который представляет собой кислую протеазу, или тому подобное. (American Journal of Physiology, (1991) 260, C1315-C1324). Это вызывает деградацию фосфата кальция, активацию кислых протеаз и деградацию белков костного матрикса, что приводит к резорбции кости.

Обнаружено, что клетки-предшественники остеокластов дифференцируются до остеокластов путем стимуляции RANKL (лигандом активатора рецептора NF-кВ), экспрессированным на клеточной мембране остеобластов/стромальных клеток, присутствующих на поверхности кости (Proceedings of the National Academy of Science of the United States of America, (1998) 95, pp. 3597-3602, и Cell, (1998) 93, pp. 165-176). Выявлено, что RANKL представляет собой мембранный белок, продуцируемый остеобластами/стромальными клетками, его экспрессию регулирует фактор резорбции кости, RANKL индуцирует дифференцировку клеток-предшественников остеокластов в зрелые многоядерные остеокласты, и тому подобное. (Proceedings of the National Academy of Science of the United States of America, (1998) 95, pp. 3597-3602, и Journal of Bone and Mineral Research, (1998) 23, S222). Кроме того, обнаружено, что у мышей с нокаутом, лишенных RANKL, развивается подобное остеопетрозу заболевание, и таким образом, доказано, что RANKL является физиологическим фактором, индуцирующим дифференцировку остеокластов (Nature, (1999) 397, pp. 315-323).

В качестве фармацевтических препаратов для лечения заболеваний метаболизма костной ткани или для сокращения времени лечения используют бисфосфонаты, активный витамин D3, кальцитонин и его производные, гормоны, такие как эстрадиол, SERM (избирательные модуляторы рецепторов эстрогенов), иприфлавон, витамин K2 (менатетренон), PTH, препараты кальция и тому подобное. Однако эти лекарственные средства не всегда являются удовлетворительными в отношении терапевтического эффекта, и необходима разработка лекарственного средства с более сильным терапевтическим эффектом.

Клеточные мембраны иммуноцитов покрыты плотным покрытием из различных гликанов, таких как сиалированные гликаны, которые узнают различные гликан-связывающие белки. Связывающие сиаловую кислоту иммуноглобулиноподобные лектины (далее в настоящем документе обозначенные как «siglec»), представляют собой семейство мембранных белков типа I, которые узнают сиалированные гликаны и связывают их. Многие siglec экспрессированы на клеточных мембранах иммуноцитов и узнают сиаловую кислоту, сходным образом присутствующую на клеточных мембранах иммуноцитов, и регулируют взаимодействие клеток или функцию клеток, и считают, что они вовлечены в иммунные ответы (Nature Reviews Immunology, (2007) 7, pp. 255-266). Однако, существует также множество молекул siglec, физиологические функции которых еще не выяснены. Siglec-15 (связывающий сиаловую кислоту иммуноглобулиноподобный лектин 15) представляет собой молекулу, которая, как недавно опубликовано, принадлежит к Siglec (смотри, например, Непатентный документ 10) и является идентичной молекуле, называемой CD33L3 (подобная CD33 молекула 3). Эта молекула является высоко эволюционно консервативной от рыб до человека, и обнаружена ее сильная экспрессия в дендритных клетках и/или макрофагах селезенки и лимфатических узлов человека. Кроме того, в результате тестирования связывания с использованием пробы сиаловой кислоты, обнаружено также, что Siglec-15 человека связывает Neu5Acα2-6GalNAc, и что Siglec-15 мыши дополнительно связывает Neu5Acα2-3Galβ1-4Glc и тому подобное (смотри, например, Glycobiology, (2007) 17, pp. 838-846). До недавнего времени физиологическая роль Siglec-15 не была выявлена, однако, опубликовано, что экспрессия Siglec-15 увеличивается при дифференцировке и созревании остеокластов, и дифференцировку остеокластов ингибируют уменьшением экспрессии Siglec-15 посредством РНК-интерференции (смотри, например, WO 07/093042). Кроме того, эффект антитела против Siglec-15 на дифференцировку остеокластов впервые выявили в WO 09/48072 (опубликованной 16 апреля 2009 г.), однако, последовательность антитела, которое можно вводить человеку, еще не выяснена.

Краткое изложение сущности изобретения

Проблемы, решаемые настоящим изобретением

Целью изобретения является ген, специфически экспрессирующийся при различных формах патологического метаболизма костной ткани, который наблюдают при остеопорозе, ревматоидном артрите, метастазировании злокачественной опухоли в кость или тому подобное, вещества, ингибирующего дифференцировку и созревание остеокластов и их активность, и терапевтического и/или профилактического средства против патологического метаболизма костной ткани.

Средства для решения проблем

Авторы настоящего изобретения проводили исследования для выяснения механизма дифференцировки, созревания и активации остеокластов, с целью обнаружения вещества, оказывающего терапевтический и/или профилактический эффект при патологическом метаболизме костной ткани. В результате авторы настоящего изобретения обнаружили, что экспрессия гена Siglec-15 увеличивается при дифференцировке и созревании остеокластов, и обнаружили также, что дифференцировку остеокластов ингибирует антитело, специфически связывающееся с Siglec-15. Кроме того, авторы настоящего изобретения гуманизировали полученное антитело крысы против Siglec-15 мыши, и таким образом, было создано настоящее изобретение.

Таким образом, изобретение относится к следующим изобретениям.

(1) Антитело, связывающее полипептид, содержащий остатки аминокислот 39-165 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2, и ингибирующее образование остеокластов и/или резорбцию кости остеокластами, или функциональный фрагмент антитела.

(2) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(1), отличающиеся тем, что:

последовательность тяжелой цепи содержит вариабельную область с CDRH1, CDRH2 и CDRH3, и CDRH1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:44, CDRH2 содержит любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO:45 и SEQ ID NO:97, и CDRH3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:46; и

последовательность легкой цепи содержит вариабельную область с CDRL1, CDRL2, и CDRL3, и CDRL1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:47, CDRL2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:48, и CDRL3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:49.

(3) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(2), отличающиеся тем, что содержат последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую остатки аминокислот 20-140 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:41, и последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую остатки аминокислот 21-132 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:43.

(4) Функциональный фрагмент антитела по любому из пп.(1)-(3), выбранный из группы, состоящей из Fab, F(ab')2, Fab' и Fv.

(5) Антитело по любому из пп.(1)-(3), отличающееся тем, что представляет собой scFv.

(6) Антитело или функциональный фрагмент антитела по любому из пп.(1)-(4), отличающийся тем, что антитело представляет собой химерное антитело.

(7) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(6), отличающиеся тем, что содержат последовательность тяжелой цепи, содержащую остатки аминокислот 20-470 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:41 и последовательность легкой цепи, содержащую остатки аминокислот 21-237 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:43.

(8) Антитело или функциональный фрагмент антитела по любому из пп.(1)-(4) и (6), отличающийся тем, что антитело является гуманизированным.

(9) Антитело по пп.(7) или (8), где тяжелая цепь обладает константной областью тяжелой цепи иммуноглобулина G2 человека, и легкая цепь обладает константной областью легкой цепи иммуноглобулина κ человека.

(10) Антитело, ингибирующее образование остеокластов и/или резорбцию кости остеокластами, или функциональный фрагмент антитела, где антитело содержит:

(a) вариабельную область тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из следующих аминокислотных последовательностей:

a1) аминокислотная последовательность, содержащая остатки аминокислот 20-140 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:51;

a2) аминокислотная последовательность, содержащая остатки аминокислот 20-140 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:53;

a3) аминокислотная последовательность, содержащая остатки аминокислот 20-140 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:55;

a4) аминокислотная последовательность, содержащая остатки аминокислот 20-140 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:57;

a5) аминокислотная последовательность, содержащая остатки аминокислот 20-140 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:59;

а6) аминокислотная последовательность, содержащая остатки аминокислот 20-140 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:99;

a7) аминокислотная последовательность, содержащая остатки аминокислот 20-140 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:101;

a8) аминокислотная последовательность, обладающая гомологией по меньшей мере 95% с любой из аминокислотных последовательностей, выбранных из a1)-a7);

a9) аминокислотная последовательность, обладающая гомологией по меньшей мере 99% с любой из аминокислотных последовательностей, выбранных из a1)-a7); и

a10) аминокислотная последовательность, включающая замену, делецию или добавление от одного до нескольких остатков аминокислот в любой из аминокислотных последовательностей, выбранных из a1)-a7); и

(b) вариабельную область легкой цепи, выбранную из группы, состоящей из следующих аминокислотных последовательностей:

b1) аминокислотная последовательность, содержащая остатки аминокислот 21-133 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:61;

b2) аминокислотная последовательность, содержащая остатки аминокислот 21-133 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:63;

b3) аминокислотная последовательность, содержащая остатки аминокислот 21-133 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:65;

b4) аминокислотная последовательность, содержащая остатки аминокислот 21-132 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:67;

b5) аминокислотная последовательность, содержащая остатки аминокислот 21-133 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:69;

b6) аминокислотная последовательность, содержащая остатки аминокислот 21-133 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:71;

b7) аминокислотная последовательность, содержащая остатки аминокислот 21-133 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:103;

b8) аминокислотная последовательность, содержащая остатки аминокислот 21-133 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:105;

b9) аминокислотная последовательность, обладающая гомологией по меньшей мере 95% с любой из аминокислотных последовательностей, выбранных из b1)-a8);

b10) аминокислотная последовательность, обладающая гомологией по меньшей мере 99% с любой из аминокислотных последовательностей, выбранных из b1)-b8); и

b11) аминокислотная последовательность, включающая замену, делецию или добавление от одного до нескольких остатков аминокислот в любой из аминокислотных последовательностей, выбранных из b1)-b8).

(11) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(10), отличающиеся тем, что содержат последовательность тяжелой цепи, содержащую вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, содержащую остатки аминокислот 20-140 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:51 и последовательность легкой цепи, содержащую вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, содержащую остатки аминокислот 21-133 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:61.

(12) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(10), отличающиеся тем, что содержат последовательность тяжелой цепи, содержащую вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, содержащую остатки аминокислот 20-140 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:53, и последовательность легкой цепи, содержащую вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, содержащую остатки аминокислот 21-133 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:63.

(13) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(10), отличающиеся тем, что содержат последовательность тяжелой цепи, содержащую вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, содержащую остатки аминокислот 20-140 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:55, и последовательность легкой цепи, содержащую вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, содержащую остатки аминокислот 21-133 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:65.

(14) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(10), отличающиеся тем, что содержат последовательность тяжелой цепи, содержащую вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, содержащую остатки аминокислот 20-140 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:55, и последовательность легкой цепи, содержащую вариабельную область легкой цепи, содержащую остатки аминокислот 21-133 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:67.

(15) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(10), отличающиеся тем, что содержат последовательность тяжелой цепи, содержащую вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, содержащую остатки аминокислот 20-140 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:57, и последовательность легкой цепи, содержащую вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, содержащую остатки аминокислот 21-133 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:69.

(16) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(10), отличающиеся тем, что содержат последовательность тяжелой цепи, содержащую вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, содержащую остатки аминокислот 20-140 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:59, и последовательность легкой цепи, содержащую вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, содержащую остатки аминокислот 21-133 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:71.

(17) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(10), отличающиеся тем, что содержат последовательность тяжелой цепи, содержащую вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, содержащую остатки аминокислот 20-140 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:99, и последовательность легкой цепи, содержащую вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, содержащую остатки аминокислот 21-133 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:69.

(18) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(10), отличающиеся тем, что содержат последовательность тяжелой цепи, содержащую вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, содержащую остатки аминокислот 20-140 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:101, и последовательность легкой цепи, содержащую вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, содержащую остатки аминокислот 21-133 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:69.

(19) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(10), отличающиеся тем, что содержат последовательность тяжелой цепи, содержащую вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, содержащую остатки аминокислот 20-140 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:99, и последовательность легкой цепи, содержащую вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, содержащую остатки аминокислот 21-133 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:103.

(20) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(10), отличающиеся тем, что содержат последовательность тяжелой цепи, содержащую вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, содержащую остатки аминокислот 20-140 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:99, и последовательность легкой цепи, содержащую вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, содержащую остатки аминокислот 21-133 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:105.

(21) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(10), отличающиеся тем, что содержат последовательность тяжелой цепи, содержащую остатки аминокислот 20-470 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:51, и последовательность легкой цепи, содержащую остатки аминокислот 21-238 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:61.

(22) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(10), отличающиеся тем, что содержат последовательность тяжелой цепи, содержащую остатки аминокислот 20-470 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:53, и последовательность легкой цепи, содержащую остатки аминокислот 21-238 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:63.

(23) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(10), отличающиеся тем, что содержат последовательность тяжелой цепи, содержащую остатки аминокислот 20-470 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:55, и последовательность легкой цепи, содержащую остатки аминокислот 21-238 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:65.

(24) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(10), отличающиеся тем, что содержат последовательность тяжелой цепи, содержащую остатки аминокислот 20-470 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:55, и последовательность легкой цепи, содержащую остатки аминокислот 21-237 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:67.

(25) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(10), отличающиеся тем, что содержат последовательность тяжелой цепи, содержащую остатки аминокислот 20-470 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:57, и последовательность легкой цепи, содержащую остатки аминокислот 21-238 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:69.

(26) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(10), отличающиеся тем, что содержат последовательность тяжелой цепи, содержащую остатки аминокислот 20-470 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:59, и последовательность легкой цепи, содержащую остатки аминокислот 21-238 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:71.

(27) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(10), отличающиеся тем, что содержат последовательность тяжелой цепи, содержащую остатки аминокислот 20-466 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:99, и последовательность легкой цепи, содержащую остатки аминокислот 21-238 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:69.

(28) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(10), отличающиеся тем, что содержат последовательность тяжелой цепи, содержащую остатки аминокислот 20-466 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:101, и последовательность легкой цепи, содержащую остатки аминокислот 21-238 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:69.

(29) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(10), отличающиеся тем, что содержат последовательность тяжелой цепи, содержащую остатки аминокислот 20-466 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:99, и последовательность легкой цепи, содержащую остатки аминокислот остатки 21-238 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:103.

(30) Антитело или функциональный фрагмент антитела по п.(10), отличающиеся тем, что содержат последовательность тяжелой цепи, содержащую остатки аминокислот 20-466 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:99 и последовательность легкой цепи, содержащую остатки аминокислот 21-238 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:105.

(31) Фармацевтическая композиция, отличающаяся тем, что содержит по меньшей мере одно из антител или функциональных фрагментов антител по пп.(1)-(30).

(32) Фармацевтическая композиция по п.(31), отличающаяся тем, что является терапевтическим и/или профилактическим средством против патологического метаболизма костной ткани.

(33) Фармацевтическая композиция для лечения и/или профилактики патологического метаболизма костной ткани, отличающаяся тем, что содержит по меньшей мере одно из антител или функциональных фрагментов антител по пп.(1)-(30) и по меньшей мере один член, выбранный из группы, состоящей из бисфосфонатов, активного витамина D3, кальцитонина и его производных, гормонов, таких как эстрадиол, SERM (избирательных модуляторов рецепторов эстрогенов), иприфлавона, витамина K2 (менатетренона), препаратов кальция, PTH (паратиреоидного гормона), нестероидных противовоспалительных средств, растворимых рецепторов TNF, антител против TNF-α или функциональных фрагментов антител, антител против PTHrP (родственного паратиреоидному гормону белка) или функциональных фрагментов антител, антагонистов рецептора IL-1, антител против рецептора IL-6 или функциональных фрагментов антител, антител против RANKL или функциональных фрагментов антител и OCIF (фактора ингибирования остеокластогенеза).

(34) Фармацевтическая композиция по п.(32) или (33), где патологический метаболизм костной ткани выбран из группы, состоящей из остеопороза, разрушения кости, сопровождающего ревматоидный артрит, злокачественной гиперкальциемии, разрушения кости, сопровождающего множественную миелому или метастазирование злокачественной опухоли в кость, гигантоклеточной опухоли, остеопении, потери зубов из-за периодонтита, остеолиза около протеза сустава, разрушения кости при хроническом остеомиелите, болезни Педжета кости, нефрогенной остеодистрофии и несовершенного остеогенеза.

(35) Фармацевтическая композиция по п.(34), отличающаяся тем, что патологический метаболизм костной ткани представляет собой остеопороз, разрушение кости, сопровождающее ревматоидный артрит, или разрушение кости, сопровождающее метастазирование злокачественной опухоли в кость.

(36) Фармацевтическая композиция по п.(35), отличающаяся тем, что патологический метаболизм костной ткани представляет собой остеопороз.

(37) Фармацевтическая композиция по п.(36), отличающаяся тем, что остеопороз представляет собой постменопаузальный остеопороз, старческий остеопороз, вторичный остеопороз из-за применения лекарственного средства, такого как стероид или иммунодепрессант, или остеопороз, сопровождающий ревматоидный артрит.

(38) Способ лечения и/или профилактики патологического метаболизма костной ткани, отличающийся введением по меньшей мере одного из антител или функциональных фрагментов антител по пп.(1)-(30).

(39) Способ лечения и/или профилактики патологического метаболизма костной ткани, отличающийся введением одновременно или последовательно по меньшей мере одного из антител или функциональных фрагментов антител по пп.(1)-(30) и по меньшей мере одного члена, выбранного из группы, состоящей из бисфосфонатов, активного витамина D3, кальцитонина и его производных, гормонов, таких как эстрадиол, SERM (избирательных модуляторов рецепторов эстрогенов), иприфлавона, витамина K2 (менатетренона), препаратов кальция, PTH (паратиреоидного гормона), нестероидных противовоспалительных средств, растворимых рецепторов TNF, антител против TNF-α или функциональных фрагментов антител, антител против PTHrP (родственного паратиреоидному гормону белка) или функциональных фрагментов антител, антагонистов рецептора IL-1, антител против рецептора IL-6 или функциональных фрагментов антител, антител против RANKL или функциональных фрагментов антител и OCIF (фактора ингибирования остеокластогенеза).

(40) Способ лечения и/или профилактики по п.(38) или (39), отличающийся тем, что патологический метаболизм костной ткани представляет собой остеопороз, разрушение кости, сопровождающее ревматоидный артрит, или разрушение кости, сопровождающее метастазирование злокачественной опухоли в кость.

(41) Способ лечения и/или профилактики по п.(40), отличающийся тем, что патологический метаболизм костной ткани представляет собой остеопороз.

(42) Способ лечения и/или профилактики по п.(41), отличающийся тем, что остеопороз представляет собой постменопаузальный остеопороз, старческий остеопороз, вторичный остеопороз из-за применения лекарственного средства, такого как стероид или иммунодепрессант, или остеопороз, сопровождающий ревматоидный артрит.

(43) Полинуклеотид, кодирующий антитело по любому из пп.(3), (7) и (10)-(30).

(44) Полинуклеотид по п.(43), отличающийся тем, что содержит нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 58-420 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:40, и нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 61-396 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:42.

(45) Полинуклеотид по п.(44), отличающийся тем, что содержит нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 58-1410 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:40, и нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 61-711 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:42.

(46) Полинуклеотид по п.(43), отличающийся тем, что содержит:

(a) полинуклеотид, выбранный из группы, состоящей из следующих нуклеотидных последовательностей:

a1) нуклеотидная последовательность, содержащая нуклеотиды 58-420 нуклеотидной последовательности SEQ ID N0: 50;

a2) нуклеотидная последовательность, содержащая нуклеотиды 58-420 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:52;

a3) нуклеотидная последовательность, содержащая нуклеотиды 58-420 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:54;

a4) нуклеотидная последовательность, содержащая нуклеотиды 58-420 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:56;

a5) нуклеотидная последовательность, содержащая нуклеотиды 58-420 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:58;

a6) нуклеотидная последовательность, содержащая нуклеотиды 58-420 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:98;

a7) нуклеотидная последовательность, содержащая нуклеотиды 58-420 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:100;

a8) нуклеотидная последовательность полинуклеотида, который гибридизуется с полинуклеотидом, содержащим нуклеотидную последовательность, комплементарную любой из нуклеотидных последовательностей, выбранных из a1)-a7), в жестких условиях; и

a9) нуклеотидная последовательность, включающая замену, делецию или добавление от одного до нескольких остатков аминокислот в любой из нуклеотидных последовательностей, выбранных из a1)-a7); и

(b) полинуклеотид, выбранный из группы, состоящей из следующих нуклеотидных последовательностей:

b1) нуклеотидная последовательность, содержащая нуклеотиды 61-399 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:60;

b2) нуклеотидная последовательность, содержащая нуклеотиды 61-399 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:62;

b3) нуклеотидная последовательность, содержащая нуклеотиды 61-399 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:64;

b4) нуклеотидная последовательность, содержащая нуклеотиды 61-396 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:66;

b5) нуклеотидная последовательность, содержащая нуклеотиды 61-399 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:68;

b6) нуклеотидная последовательность, содержащая нуклеотиды 61-399 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:70;

b7) нуклеотидная последовательность, содержащая нуклеотиды 61-399 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:102;

b8) нуклеотидная последовательность, содержащая нуклеотиды 61-399 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:104;

b9) нуклеотидная последовательность полинуклеотида, который гибридизуется с полинуклеотидом, содержащим нуклеотидную последовательность, комплементарную любой из нуклеотидных последовательностей, выбранных из b1) - b8), в жестких условиях; и

b10) нуклеотидная последовательность, включающая замену, делецию или добавление от одного до нескольких нуклеотидов в любой из нуклеотидных последовательностей, выбранных из b1) - b8).

(47) Полинуклеотид по п.(46), отличающийся тем, что содержит полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 58-420 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:50, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 61-399 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:60.

(48) Полинуклеотид по п.(46), отличающийся тем, что содержит полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 58-420 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:52, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 61-399 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:62.

(49) Полинуклеотид по п.(46), отличающийся тем, что содержит полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 58-420 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:54, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 61-399 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:64.

(50) Полинуклеотид по п.(46), отличающийся тем, что содержит полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 58-420 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:54, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 61-399 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:66.

(51) Полинуклеотид по п.(46), отличающийся тем, что содержит полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 58-420 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:56, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 61-399 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:68.

(52) Полинуклеотид по п.(46), отличающийся тем, что содержит полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 58-420 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:58, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 61-399 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:70.

(53) Полинуклеотид по п.(46), отличающийся тем, что содержит полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 58-420 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:98, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 61-399 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:68.

(54) Полинуклеотид по п.(46), отличающийся тем, что содержит полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 58-420 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:100, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 61-399 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:68.

(55) Полинуклеотид по п.(46), отличающийся тем, что содержит полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 58-420 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:98, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 61-399 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:102.

(56) Полинуклеотид по п.(46), отличающийся тем, что содержит полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 58-420 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:98, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 61-399 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:104.

(57) Полинуклеотид по п.(46), отличающийся тем, что содержит полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 58-1410 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:50, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 61-714 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:60.

(58) Полинуклеотид по п.(46), отличающийся тем, что содержит полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 58-1410 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:52, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 61-714 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:62.

(59) Полинуклеотид по п.(46), отличающийся тем, что содержит полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 58-1410 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:54, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 61-714 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:64.

(60) Полинуклеотид по п.(46), отличающийся тем, что содержит полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 58-1410 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:54, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 61-711 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:66.

(61) Полинуклеотид по п.(46), отличающийся тем, что содержит полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 58-1410 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:56, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 61-714 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:68.

(62) Полинуклеотид по п.(46), отличающийся тем, что содержит полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 58-1410 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:58, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 61-714 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:70.

(63) Полинуклеотид по п.(46), отличающийся тем, что содержит полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 58-1398 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:98, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 61-714 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:68.

(64) Полинуклеотид по п.(46), отличающийся тем, что содержит полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 58-1398 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:100, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 61-714 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:68.

(65) Полинуклеотид по п.(46), отличающийся тем, что содержит полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 58-1398 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:98, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 61-714 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:102.

(66) Полинуклеотид, по п.(46), отличающийся тем, что содержит полинуклеотид, содержащий нуклеотидную, последовательность, содержащую нуклеотиды 58-1398 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:98, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, содержащую нуклеотиды 61-714 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:104.

(67) Вектор, содержащий любой из полинуклеотидов по пп.(43)-(66).

(68) Трансформированная клетка-хозяин, содержащая любой из полинуклеотидов по пп.(43)-(66).

(69) Трансформированная клетка-хозяин, содержащая вектор