Способ лечения респираторных заболеваний, фармацевтическая композиция и её применение

Способ лечения респираторных заболеваний, фармацевтическая композиция и её применение

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Область изобретения

Данное изобретение относится к новому способу и группе углеводов формулы (1) и/или (2) и их композициям для лечения кашля и связанных респираторных состояний, в том числе поствирусных/бактериальных инфекций, острых/хронических бронхитов, COPD (хронического обструктивного легочного заболевания) и воспалительных процессов.

Предшествующий уровень техники

У людей дыхательные пути, площадью с футбольное поле, представляют собой наибольшую поверхность соединения тела с внешним миром, требуемую для достаточного воздухообмена; в то же время дыхательные пути поражаются многими физическими, химическими и биологическими веществами, находящимися в воздухе, которые вызывают нарушения, в том числе астму, хроническое обструктивное легочное заболевание, воспалительные процессы легких и дыхательных путей. Также некоторые генетические нарушения, такие как кистозный фиброз, зависят от связи дыхательных путей с внешним миром. Вирусы и бактерии могут проникать в организм и вызывать появление инфекций в дыхательных путях.

Кашель является одним из распространенных заболеваний, которые нуждаются в лечении. Однако существующие в настоящее время способы лечения ограничены только облегчением симптомов, оставляя организм восстанавливаться самостоятельно, и во многих случаях восстановление является медленным.

В Австралии продажа сиропа от кашля составляет более 20 миллионов долларов в год. Установлено, что мировой рынок сиропа от кашля превышает 1 миллиард долларов в год.

Непрекращающийся кашель, иногда с периодом нормального состояния продолжительностью нескольких месяцев или даже лет, приписывается бронхиальной астме, рефлексу неизвестного происхождения или поствирусным/бактериальным инфекциям и курению, заставляющими дыхательные пути становиться гиперчувствительными/гиперреактивными. Таким образом, существует необходимость в эффективном лечении, которое может помочь организму восстановиться после того, как он был поражен многими физическими, химическими и биологическими веществами, находящимися в воздухе, которые могут вызывать нарушения в дыхательной системе.

Рассмотрение документов, актов, материалов, устройств, статей и т.п. включено в данное описание исключительно в целях обеспечения контекста данного изобретения. Не предполагается или не представляется, что некоторые или все из этих предметов, входящих в состав известного уровня техники, были основой или широко распространенными общедоступными сведениями в области, родственной данному изобретению, поскольку они существовали до даты приоритета каждой формулы данной заявки на патент.

Краткое изложение изобретения

Данное изобретение обеспечивает в одном аспекте способ активации восстановления сиалилированных гликоконъюгатов (сиалил-гликоконъюгатов) на поверхности пораженной респираторной клетки субъекта для лечения респираторного состояния у субъекта, в том числе способ введения субъекту по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого соединения, способного ускорять биосинтез сиалилированных гликоконъюгатов.

В одном варианте осуществления данного изобретения способ обеспечивает восстановление жизнеспособности клетки, при котором клетка находится в лучшем состоянии для нормальной биологической функции в ответ на факторы, которые могут поражать респираторную поверхность, что приводит к респираторным заболеваниям, таким как, но без ограничения, кашель, поствирусные или бактериальные инфекции, острый/хронический бронхит, хроническое обструктивное легочное заболевание (COPD), кистозный фиброз и другие респираторные воспалительные процессы.

В другом варианте осуществления данное изобретение обеспечивает применение соединения, выбранного из группы, состоящей из соединений формулы (1) и формулы (2), и их фармацевтически приемлемых солей и производных и их комбинаций. Применение означает для лечения или предупреждения респираторного состояния, как описано здесь.

В других аспектах изобретения обеспечиваются составы и фармацевтические композиции, содержащие по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое соединение, способное ускорять биосинтез сиалилированных гликоконъюгатов для применения в лечении и предупреждении респираторных состояний.

Еще в другом аспекте изобретения обеспечивается способ скрининга для выявления соединения для лечения респираторного состояния, содержащий:

действие на клетки, имеющие пониженное содержание сиалилированных гликоконъюгатов на поверхности клетки, тестируемого соединения и

измерение восстановления сиалилированных гликоконъюгатов на поверхности клетки после действия тестируемого соединения на клетку.

Измерение восстановления сиалилированных гликоконъюгатов на поверхности клетки может быть определено путем измерения жизнеспособности клетки.

Еще в другом аспекте данного изобретения обеспечивается способ лечения или предупреждения респираторного состояния у субъекта, способ, включающий в себя стадию введения субъекту по меньшей мере одного соединения, идентифицированного методом скрининга.

Краткое описание графического материала

Фиг.1 демонстрирует путь биосинтеза сиалилированных гликоконъюгатов в живой клетке.

Подробное описание изобретения

С точки зрения биологии клетки и молекулярной биологии гиперчувствительность/гиперреактивность пораженных дыхательных путей может быть вызвана их пораженной клеточной поверхностью, которая затем будет чувствительна к активации раздражителями. Например, заявители обнаружили, что клетки дыхательных путей после вирусной или бактериальной инфекции часто теряли концевые сиаловые кислоты сиалилированных гликоконъюгатов на поверхности клеток дыхательных путей. Вследствие этого жизнеспособность "голой" клетки была снижена. Потеря концевых сиаловых кислот затем и запускала воспалительный ответ, приводя к бронхиту и кашлю. Не будучи ограниченными теорией, постулируется, что восстановление сиаловых кислот на клеточной поверхности может восстанавливать дыхательные пути, пораженные инфекцией или другими физическими, химическими, биологическими факторами, в конечном счете для выявления бронхита и остановки кашля.

В данной заявке заявители показали эксперименты на культурах клеток, проведенные на двух линиях клеток дыхательных путей: небольших эпителиальных клетках дыхательных путей (SAEC) и человеческих нормальных эпителиальных бронхиальных/трахеальных клетках (NHBE). Вначале клетки обрабатывали нейраминидазами (NAs) вируса гриппа или бактерии. NAs отщепляют сиаловые кислоты от поверхностных клеточных сиалилированных гликоконъюгатов, в результате чего снижали жизнеспособность "голых (лысых)" клеток. Например, SAEC теряли жизнеспособность более чем на 25% при обработке NA (нейраминидазой) С. perfringens в конечной концентрации 0,01 Ед/мл или NA (нейраминидазой) вируса гриппа NWS/G70C в конечной концентрации 0,17 мкг/лунку. Аналогичные результаты также получали на линии клеток NHBE. После того как клетки обрабатывали NA, клетки промывали для удаления NA, затем инкубировали с соединениями формулы (1) и/или (2) в течение 24 часов. В конечном счете, определяли жизнеспособность клеток. Результаты (примеры 7-36) показали, что группа углеводов формулы (1) и/или (2) могла бы помочь восстановлению жизнеспособности пораженных клеток дыхательных путей путем восстановления сиалилированных гликоконъюгатов на их поверхности.

Таким образом, данное изобретение обеспечивает в одном аспекте изобретения способ активации восстановления сиалилированного гликоконъюгата на поверхности пораженной респираторной клетки субъекта для лечения респираторного состояния у субъекта, способ, включающий в себя стадию введения субъекту по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого соединения, способного ускорять биосинтез сиалилированных гликоконъюгатов.

Данное изобретение обеспечивает в другом аспекте изобретения способ активации жизнеспособности пораженной респираторной клетки субъекта для лечения респираторного состояния у субъекта, способ, включающий в себя стадию введения субъекту по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого соединения, способного ускорять биосинтез сиалилированных гликоконъюгатов.

Активация восстановления сиалилированных гликоконъюгатов на поверхности респираторной клетки также может указывать на возврат клетки к жизнеспособному состоянию, такому, при котором клетка оказывается в лучшем состоянии для нормальной биологической функции в ответ на факторы, которые могут влиять на дыхательную поверхность, что приводит к распираторным состояниям, таким как, но без ограничения, кашель, поствирусные или бактериальные инфекции, острый/хронический бронхит, хроническое обструктивное легочное заболевание (COPD), кистозный фиброз и другие респираторные воспалительные процессы.

В другом варианте воплощения данного изобретения по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое соединение выбрано из группы, состоящей из углеводов, способных участвовать в виде промежуточных продуктов в биосинтезе сиалилированных гликоконъюгатов, их предшественников и их пролекарств и их фармацевтически приемлемых солей и производных и их комбинаций.

Указанные выше соединения могут быть использованы для приема внутрь, путем ингаляционного или инъекционного введения для лечения респираторных состояний, выбранных из группы, содержащей кашель, поствирусные или бактериальные инфекции, острый/хронический бронхит, хроническое обструктивное легочное заболевание (COPD), кистозный фиброз и другие респираторные воспалительные процессы.

На всем протяжении описания и формулы данного изобретения слово "содержать" и вариации слова, такие как "содержащий" и "содержит", не предполагают исключения других добавок, компонентов, целых чисел или стадий.

В другом варианте осуществления данное изобретение обеспечивает применение соединения, выбранного из группы, состоящей из;

соединений формулы (1):

в которойпри В=Н А может быть NHCOCH₃, NH₂, ОН, NH₂·HX или при А=Н В может быть NHCOCH₃, NH₂, NH₂·HX, НХ может быть фармацевтически приемлемыми неорганическими или органическими кислотами, такими как соляная кислота, серная кислота, фосфорная кислота, уксусная кислота, лимонная кислота и т.д.;

R¹, R², R³, R⁴ могут быть одинаковыми или различными. Они могут быть Н, СН₃, (СН₂)_nСН₃ (n=1~20), CH₂Ph, COCR⁵R⁶R⁷, СО-активными сложными эфирами, такими как пивалоксиметиловый сложный эфир (pivaloyloxymethyl ester) (piva ester), индениловый сложный эфир;

R⁵, R⁶, R⁷ могут быть одинаковыми или различными. Они могут быть Н, СН₃, (СН₂)_nСН₃ (n=1~20), С₆Н₅, CH₂Ph, CH₃CH₂(OCH₂CH₂)_mCH₃ (m=1~200); и

R4 может быть

;

R^5′, R^6′ могут быть одинаковыми или различными. Они могут быть Н или фармацевтически приемлемой неорганической или органической солью, такой как, Na, К, Са, Mg, Zn, NH₃, триэтиламин и т.д., или R^5′, R^6′ могут быть фармацевтически приемлемым сложным эфиром, таким как (СН₂)_nСН₃ (n=1~20) или СН₃СН₂(ОСН₂СН₂)_mСН₃ (m=1~200), или активным сложным эфиром, таким как пивалоксиметиловый сложный эфир, индениловый сложный эфир;

и соединений формулы (2)

в которой

R⁸ может быть Н, СН₃, (СН₂)_nСН₃ (n=1~20), CH₂Ph, COCH₂Ph, СО-активным сложным эфиром, таким как пивалоксиметил сложный эфир (piva ester), индениловый сложный эфир, COCR¹⁴R¹⁵R¹⁶ _, где R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶ могут быть одинаковыми или различными. Они могут быть Н, СН₃, (CH₂)_nCH₃ (n=1~20), С₆Н₅, CH₂Ph, CH₂CH₂(OCH₂CH₂)_mCH₃ (m=1~200);

R⁸ может быть цитидином, цитидинмонофосфатом, цитидиндифосфатом, цитидинтрифосфатом, аденозином, аденозинмонофосфатом, аденозиндифосфатом, аденозинтрифосфатом;

R⁹ может быть Н, СН₃, фармацевтически приемлемой неорганической или органической солью, такой как Na, К, Са, Mg, Zn, NH₃, триэтиламин и т.д., или фармацевтически приемлемым активным сложным эфиром, таким как пивалоксиметиловый сложный эфир, индениловый сложный эфир и т.д., или CH₂CR¹⁷R¹⁸R¹⁹, в котором R¹⁷, R¹⁸, R¹⁹ могут быть одинаковыми или различными. Они могут быть Н, СН₃, (СН₂)_nСН₃ (n=1~20), CH₂CH₂(OCH₂CH₂)_mCH₃ (m=1~200), С₆Н₅, CH₂Ph;

R¹⁰, R¹¹, R¹², R¹³ могут быть одинаковыми или различными. Они могут быть Н, СН₃, (СН₂)_nСН₃ (n=1~20), СН₂Ph, активным сложным эфиром, таким как пивалоксиметиловый сложный эфир, или COCR²⁰R²¹R²², в котором R²⁰, R²¹  ,R²² могут быть одинаковыми или различными. Они могут быть Н, СН₃, (CH₂)_nCH₃ (n=~20), С₆Н₅, CH₂Ph, CH₂CH₂(OCH₂CH₂)_mCH₃ (m=1~200);

R¹³ может быть

R²³, R²⁴ могут быть одинаковыми или различными. Они могут быть Н, СН₃, (СН₂)nСН₃ (n=1~20), СН₂СН₂(ОСН₂СН₂)_mСН₃ (m=1~200), CH₂Ph или активным сложным эфиром, таким как пивалоксиметиловый сложный эфир, индениловый сложный эфир или CH₂CR²⁵R²⁶R²⁷, или фармацевтически приемлемой неорганической или органической солью, такой как Na, К, Са, Mg, Zn, NH₃, триэтиламин и т.д., и R²⁵, R²⁶, R²⁷ могут быть одинаковыми или различными. Они могут быть Н, СН₃, (CH₂)_nCH₃ (n=1~20), С₆Н₅, CH₂Ph.

В одном варианте воплощения в формуле (1) при A=NHCOCH₃, В=Н, R¹, R², R³, R⁴=H соединение представляет собой N-ацетил-D-маннозамин. N-ацетил-D-маннозамин будут называть соединением (1) на всем протяжении данного описания изобретения.

В другом варианте воплощения в формуле (2) при R⁸, R¹⁰, R¹¹, R¹², R¹³=H, R⁹=Na соединение представляет собой натриевую соль N-ацетилнейраминовой кислоты (Натриевая соль сиаловой кислоты). Натриевую соль N-ацетилнейраминовой кислоты будут называть соединением (2) на всем протяжении данного описания изобретения.

В том случае, когда R⁸ представляет собой цитидинмонофосфат и R⁹, R¹⁰, R¹¹, R¹², R¹³=H, соединение представляет собой ЦМФ-сиаловую кислоту.

Сиаловые кислоты в виде терминальных (концевых) сахаров на олигосахаридных цепях гликоконъюгата на поверхности клетки хорошо изучены в виде молекулярных детерминант специфических биологических процессов, таких как клеточная адгезия^[1], образование или маскировка распознающих детерминант^[2][3] и стабилизация структуры гликопротеинов^[4]. Путь биосинтеза сиалилированных гликоконъюгатов в живой клетке показан ниже на фиг.1^[5].

Сообщалось, что N-ацетилнейраминовая кислота, но не лактоза, в зависимости от дозы защищала от нарушения мукоциллиарного транспорта ^[6]. Кроме того, предварительная обработка повторными введениями (ингаляциями) N-ацетилнейраминовой кислоты заметно предотвращала воспалительные изменения, вызванные продолжительным воздействием SO₂ у кроликов^[7]. Также сообщалось, что пероральное введение N-ацетил-D-маннозамина млекопитающему быстро метаболизировалось в глюкозу ^[8]. Также сообщалось, что способы введения N-ацетилманнозамина или его производного (для получения сиаловой кислоты у пациентов, которые испытывают дефицит молекулы сахара) для лечения мышечной атрофии, в том числе наследственной миопатии с включением телец (HIMB) и дистальной миопатии Нонака с вакуолями с ободком (rimmed vacuoles) (миопатия Нонака). Также некоторые состояния почек, например, состояния, возникающие из-за недостаточного сиалирования почечных мембран, могут быть подвергнуты лечению данным способом^[8b][8с].

Однако ни один из этих способов лечения, связанных с использованием данных промежуточных продуктов, не применялось для лечения респираторных состояний.

Соединения формулы (1) и/или (2) были проанализированы заявителями на безопасность. Например, соединения (1) и (2) использовали в анализе на толерантность и подострую токсичность мышей Balb-C (код подтверждения в АЕС (Комиссии по атомной энергии): ВАМ / В / 2005 / 16). Результаты анализа толерантности показали, что оба соединения при 5 г/кг для пероральной дозы или 2 г/кг для внутрибрюшинной дозы были хорошо переносимы. В анализе подострой токсичности результаты показали, что оба соединения при 1 г/кг/день х 30 дней для пероральной дозы или 0,5 г/кг/день х 30 дней для интраперитонеальной дозы были нетоксичны.

Также заявителями признана модель кашля у морских свинок. На этой модели анализировали соединения (1) и (2). При пероральной дозе 500 мг/кг/день х 3 дня оба соединения могли восстанавливать поражения дыхательных путей, вызываемые нейраминидазой у морских свинок. Эти результаты in vivo находятся в соответствии с данными in vitro. Таким образом, данные как эффективности, так и безопасности подтверждают, что соединения формулы (1) и/или (2) и, в частности, соединения (1) и (2) могут быть применимы для медицинских применений.

Заявителями было обнаружено, что соединения формулы (1) и/или (2) могут ускорять восстановление жизнеспособности пораженных клеток дыхательных путей путем восстановления сиалилированных гликоконъюгатов на поверхности клеток.

Соединения формулы (1) и/или (2) усиливают продуцирование сиалилированных гликоконъюгатов после проникновения в клетку. Таким образом, один аспект данного изобретения относится к применению соединений формулы (1) и/или (2) и их фармацевтически приемлемых солей и производных и их комбинаций или их смесей в виде активных терапевтических агентов для лечения кашля и родственных респираторных состояний, в том числе поствирусных/бактериальных инфекций, острого/хронического бронхита, хронического обструктивного легочного заболевания (COPD), кистозного фиброза и воспалительных процессов.

Фармацевтически приемлемые композиции соединений формулы (1) и/или (2) и их смеси также могут быть образованы комбинированием их с одним или несколькими другими активными ингредиентами для лечения респираторных состояний. Например, такими как: холин теофиллинат (бронходилататор), теофиллин (бронходилататор), сальбутамол и тербуталина сульфат (купирование бронхоспазма, связанного с астмой и другими респираторными состояниями), бромгексин (отхаркивающее, муколитическое), кодеин, фолкодеин (анальгезирующее, противокашлевое (средство)), клофеданол (противокашлевое), пентоксиверин (противокашлевое), диметоксанат, глауцин (противокашлевое), промдат, талоксимин, ацетилпиперацетамид (acetyl piperacetamide), эвкалиптовое масло, хлорид аммония и лекарственные травы, такие как Fritillariae cirrhosa (Рябчик усатый) (противокашлевое растение). Такими как ингибиторы синтеза муцина, такими как талнифлюмат, 2-аминофенилуксусные кислоты или комбинирование с некоторыми глюкокортикоидами, такими как флунизолид (противоастматический), или комбинирование с фармацевтически совместимыми сиропами от кашля, ослабляющими симптом, или комбинирование с ингибитором фосфодиэстеразы-4, таким как циломиласт (Ariflo) для лечения хронического обструктивного легочного заболевания (COPD).

Кроме того, фармацевтически приемлемые композиции соединений формулы (1) и/или (2) и их фармацевтически приемлемые соли и производные и их комбинации и их смеси также могут быть образованы путем их комбинирования с одним или несколькими другими активными ингредиентами, например, противовирусными средствами, такими как занамивир и/или осельтамивир (агенты против вируса гриппа), плеконарил и/или энвироксим (противориновирусные агенты), антимикробными агентами, такими как антибиотики, например, эритромицин, тетрациклин, рифамицин, пенициллин, цефалоспорин; хинолоны, фторхинолоны; сульфаниламиды и триметоприм; противогрибковыми препаратами, такими как амфотерицин, клотримазол, эконазол, флюконазол, флуцитозин и т.д..

Ссылки на соединения формулы (1) и/или (2) здесь включают в себя соединения формулы (1) и/или (2) и их фармацевтически приемлемые производные и их соли.

В дополнительном или альтернативном варианте осуществления данного изобретения обеспечивается способ лечения или предупреждения респираторных состояний, в том числе поствирусных/бактериальных инфекций, острого/хронического бронхита, COPD, кистозного фиброза и воспалительных процессов у животных, в том числе людей, содержащий введение эффективного количества соединений формулы (1) и/или (2).

В дополнительном или альтернативном аспекте обеспечивается также применение соединений формулы (1) и/или (2) в производстве лекарственного средства для лечения респираторных состояний, в том числе поствирусных/бактериальных инфекций, острого/хронического бронхита, COPD, кистозного фиброза и воспалительных процессов у животных, в том числе людей.

Количество соединений формулы (1) и/или (2), необходимое для применения в лечении, будет изменяться вместе со способом введения, природой состояния, подлежащего лечению, и возрастом и состоянием животного (в том числе людей) и, в конечном счете, будет на усмотрении обслуживающего ветеринара или врача.

В целом, подходящая доза будет находиться в диапазоне от приблизительно 0,1 мг до 500 мг/кг массы тела в день, предпочтительно в диапазоне от 0,1 мг до 50 мг/кг/день.

В целом, дозировка для перорального введения будет составлять от 1 мг/кг/день до 500 мг/кг/день, доза для инъекции будет от 1 мг/кг/день до 100 мг/кг/день. Доза для ингаляции будет составлять от 0,01 мг/кг/день до 5 мг/кг/день. Предпочтительно доза будет от 5 мг до 50 мг/кг для перорального или инъекционного введения, от двух до трех раз в день в течение от 5 до 10 дней; доза будет от 0,1 до 0,5 мг/кг для ингаляции, от одного до пяти раз в день в течение периода от 5 до 10 дней.

Лечение предпочтительно начинают после или во время появления кашля или родственных состояний и продолжают до прекращения кашля или родственных заболеваний. Подходящее лечение предоставляют от 1 до 4 раз ежедневно и продолжают в течение от 3 до 30 дней.

Желаемая доза может быть представлена в виде разовой дозы или разделенных доз, вводимых через определенные промежутки времени, например, в виде двух, трех, четырех или нескольких суб-доз в день.

Соединения формулы (1) и/или (2) удобно вводить в виде дозированной лекарственной формы, например, содержащей от 0,1 до 500 мг активного ингредиента на дозированную лекарственную форму. В применении здесь термин "дозированная лекарственная форма" включает в себя не только индивидуально упакованные дозированные лекарственные формы, такие как флаконы, но также аликвоты, распределенные из флаконов в шприцы, и композиции для инфузии, содержащиеся в контейнерах для инфузионных растворов.

Хотя вполне возможно, что для использования в терапии соединения формулы (1) и/или (2) могут быть введены в виде химического соединения как такового, но предпочтительно представить активный ингредиент в виде фармацевтической композиции.

Таким образом, данное изобретение дополнительно обеспечивает фармацевтическую композицию, включающую соединения формулы (1) и/или (2) или их фармацевтически приемлемое производное вместе с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями и необязательно другими терапевтическими и/или профилактическими ингредиентами. Причем носитель (носители) должен быть ′приемлемым′(и) в смысле совместимости с другими ингредиентами композиции и не вредным для их реципиента.

Фармацевтические композиции включают в себя композиции, подходящие для перорального, ректального, назального или парентерального (в том числе внутримышечного, интрадермального, подкожного и внутривенного) введения или в форме, подходящей для введения в желудочно-кишечный тракт, или в форме, подходящей для введения в дыхательные пути (в том числе носовые проходы), например, ингаляцией или инсуффляцией, или для интрадермальной или подкожной имплантации, или для трансдермального пластыря. Композиции, в случае необходимости, могут быть удобно представлены в дискретных дозирующих устройствах и могут быть получены любым из способов, хорошо известных в области фармацевтики. Все способы включают в себя стадию ассоциации активного соединения с жидкостными носителями или тонкоизмельченными твердыми носителями или обоими и затем, в случае необходимости, формование продукта в желаемую композицию.

Фармацевтические композиции, подходящие для перорального введения, могут быть представлены в виде дискретных единиц, таких как капсулы, облатки или таблетки, каждая содержащая предопределенное количество активного ингредиента; в виде порошка или гранул; в виде раствора, суспензии или в виде эмульсии. Активный ингредиент также может быть представлен в виде болюса, электуария или пасты. Таблетки и капсулы для перорального введения могут содержать традиционные наполнители, такие как связующие вещества, заполнители, смазки, разрыхлители или смачивающие агенты. Таблетки могут быть покрыты в соответствии со способами, хорошо известными в данной области. Жидкие средства для перорального применения могут быть, например, в форме водных масляных суспензий, растворов, эмульсий, сиропов или эликсиров или могут быть представлены в виде сухого продукта для разбавления водой или другим подходящим носителем перед применением. Такие жидкие препараты могут содержать традиционные добавки, такие как суспендирующие вещества, эмульгирующие агенты, неводную основу (которая может включать в себя пищевое масло) или консерванты.

Соединения формулы (1) и/или (2) также могут быть приготовлены для парентерального введения (например, инъекцией, например, болюсной инъекцией или непрерывной инфузией) и могут быть представлены в дозированной лекарственной форме в ампулах, предварительно заполненных шприцев, инфузии небольшого объема или в многодозовых контейнерах с добавленным консервантом. Композиции могут принимать такие формы в виде суспензий, растворов или эмульсий в масляных или водных носителях и могут содержать агенты для приготовления композиции, такие как суспендирующие агенты, стабилизирующие и/или диспергирующие агенты. Альтернативно, активный ингредиент может быть в порошкообразной форме, полученной путем асептического выделения стерильного сухого вещества или лиофилизацией из раствора для формирования с подходящим носителем, например, стерильной апирогенной водой перед применением.

Для ректального введения предпочтительными являются суппозитории с разовой дозой, у которых носителем является твердое вещество. Подходящий носитель включает в себя масло какао и другие вещества, традиционно используемые в данной области техники, и данные суппозитории могут быть традиционно образованы путем смешивания активного соединения с размягченным или расплавленным носителем (носителями) с последующим охлаждением и формованием в формах.

Для введения в дыхательные пути (в том числе для интраназального введения) соединения формулы (1) и/или (2) могут быть введены любыми из способов и (в форме) композиций, применяемых в данной области для введения в дыхательные пути.

Таким образом, в целом соединения формулы (1) и/или (2) могут быть введены в форме раствора или суспензии или в виде сухого порошка.

Растворы и суспензии предпочтительно будут водными, например, приготовленными из воды в чистом виде (например, стерильной или апирогенной воды), или воды и физиологически приемлемого сорастворителя (например, этанола, пропиленгликоля, полиэтиленгликолей, таких как ПЭГ 400).

Такие растворы или суспензии могут дополнительно содержать другие вспомогательные вещества, например, консерванты (такие как бензалкония хлорид), солюбилизаторы/поверхностно-активные вещества, такие как полисорбаты (например, Tween ^®80, Span ^®80, бензалкония хлорид), буферы, агенты, регулирующие изотоничность (например, хлорид натрия), усилители абсорбции и усилители вязкости. Суспензии могут дополнительно содержать суспендирующие агенты (например, микрокристаллическую целлюлозу, натрий-карбоксиметилцеллюлозу).

Растворы или суспензии применяются непосредственно в носовой полости традиционными способами, например, с помощью капельницы, пипетки или распылителя. Композиции могут быть обеспечены в виде одноразовой или многоразовой формы. В последнем случае желательно обеспечение дозиметрическим средством. В случае капельницы или пипетки дозирование может быть осуществлено пациентом, вводящим подходящий, предварительно определенный, объем раствора или суспензии. В случае распыляемого раствора дозирование может быть достигнуто, например, посредством измерения распыления насосом для опрыскивания.

Аэрозольная композиция также может быть использована для введения в дыхательные пути, в которой соединения формулы (1) и/или (2) обеспечивают в аэрозольном баллоне с подходящим пропеллентом, таким как хлорофторуглерод (CFC), например, дихлордифторметан, трихлорфторметан или дихлортетрафторэтан, углекислый газ или другой подходящий газ. Также аэрозоль может удобно содержать поверхностно-активное вещество, такое как лецитин. Доза лекарственного средства может быть контролируема обеспечением дозирующего клапана.

Альтернативно соединения формулы (1) и/или (2) могут быть обеспечены в форме сухого порошка, например, смеси порошка соединения в подходящей основе для порошка, такой как лактоза, крахмал, производные крахмала, такие как гидроксипропилметил целлюлоза и поливинилпирролидин (PVP). Удобно, что порошковый носитель будет образовывать гель в носовой полости. Композиция в форме порошка может быть представлена в виде дозированной лекарственной формы; представленной в дозированной лекарственной форме, например, в капсулах или патронах, например, желатина или блистерной упаковке, из которых порошок может быть введен с помощью ингалятора.

В композициях, предназначенных для введения в дыхательные пути, в том числе интраназальных композициях, соединение обычно будет иметь частицы небольшого размера, например, порядка 5 микрон или меньше. Такой размер частиц может быть получен способами, известными в данной области, например, при помощи очень тонкого измельчения.

При желании могут быть использованы композиции, адаптированные для обеспечения замедленного высвобождения активного ингредиента.

Соединения формулы (1) и/или (2) также могут быть использованы в сочетании с другими терапевтическими агентами, например, антибактериальными средствами, такими как антибиотики, противовирусные средства и агенты для лечения респираторных состояний. Таким образом, изобретение обеспечивает в дополнительном аспекте комбинацию, содержащую соединения формулы (1) и/или (2) или их фармацевтически приемлемого производного, вместе с другим терапевтически активным агентом.

Указанные выше комбинации могут быть удобно представлены для применения в форме фармацевтической композиции, и, таким образом, такие композиции, содержащие комбинацию, как определено выше, вместе с фармацевтически приемлемым носителем, следовательно, составляют дополнительный аспект изобретения.

Отдельные компоненты таких комбинаций могут быть введены или последовательно, или одновременно в отдельных или комбинированных фармацевтических композициях.

При применении соединений формулы (1) и/или (2) вместе со вторым эффективным в лечении терапевтическим агентом, доза каждого соединения может быть или такой же, или отличаться от дозы, при которой каждое соединение используется отдельно. Подходящие дозы будут легко определены специалистами в данной области.

Соединения формулы (1) и/или (2) и их фармацевтически приемлемые производные могут быть приготовлены любыми способами, известными специалистам в данной области получения соединений аналогичной структуры.

В другом аспекте изобретения обеспечивается способ скрининга для выявления соединения для лечения респираторного заболевания, содержащий следующее клетки, имеющие пониженное количество сиалил-гликоконъюгатов на поверхности клетки, подвергают действию тестируемого соединения; и

проводят измерение восстановления жизнеспособности клетки после воздействия тестируемого соединения на клетку.

На основе данного изобретения другие соединения могут быть использованы для стимуляции восстановления сиалилированных гликоконъюгатов на поверхности респираторной клетки; или для активизации восстановления жизнеспособности клетки за счет способности клетки ускорять биосинтез сиалилированных гликоконъюгатов. Следовательно, восстановление клеток лучшего состояния для нормальной биологической функции в ответ на факторы, которые могут влиять на дыхательную поверхность, что приводит к респираторным состояниям, может быть достигнуто обеспечением сиалилированных гликоконъюгатов, которые восстанавливаются на поверхности клетки.

Способ включает в себя получение клетки, предпочтительно респираторной клетки, которая имеет пониженные сиалилированные гликоконъюгаты на поверхности. Данная клетка называется "голой клеткой", которая является восприимчивой к факторам, которые могут влиять на ее способность нормально функционировать.

Данная клетка может быть получена путем подвергания нормальной клетки, такой как респираторная клетка, действию нейраминидазы для удаления сиаловой кислоты из сиалилированных гликоконъюгатов на поверхности клетки. Затем эту клетку измеряют по способности тестируемого соединения восстанавливать сиалилированные гликоконъюгаты на поверхности. Тестируемое соединение может восстанавливать сиалилированные гликоконъюгаты путем ускорения биосинтеза сиалилированных гликоконъюгатов или другими способами, которые приводят к восстановлению сиалилированных гликоконъюгатов на поверхности клетки.

Способность восстанавливать сиалилированные гликоконъюгаты на поверхности клеток может быть измерена путем восстановления жизнеспособности клетки. Жизнеспособность клетки может быть измерена любыми способами, доступными квалифицированному специалисту в данной области. Однако жизнеспособность может быть определена способностью клетки к клеточной пролиферации. Клеточная пролиферация может быть измерена путем применения стандартных наборов для клеточной пролиферации, таких как, но не ограничиваются ими, набор для определения клеточной пролиферации методом ELISA (Cell Proliferation ELISA kit) для измерения бромдезоксиуридина (BrdU), включенного во вновь синтезированную ДНК реплицирующихся клеток, или путем применения анализов клеточной пролиферации на основе [³Н]-тимидина.

Способность также может быть измерена определением числа сиалилированных гликоконъюгатов, восстановленных на клетке в результате воздействия на клетку тестируемого соединения. Она может быть измерена способами, доступными специалистам, которым адресовано данное изобретение, такими как, но не ограничиваясь ими, применение антител к сиалилированным гликоконъюгатам.

Еще в другом варианте осуществления данного изобретения обеспечивается способ лечения или предупреждения респираторного состояния у субъекта, способ, включающий в себя стадию введения субъекту, по меньшей мере одного соединения, идентифицированного методом скрининга.

В заключение, поскольку данное изобретение, как описано выше, является восприимчивым к изменениям, модификациям и/или дополнениям, кроме тех, которые конкретно описаны, и понятно, что изобретение включает в себя все такие изменения, модификации и/или дополнения, которые могут быть сделаны, должно быть понятно, что различные другие модификации и/или дополнения подпадают в описание, как описано выше. Следующие примеры существуют только в качестве иллюстрации и не должны быть истолкованы в виде ограничения данного изобретения.