Средство для купирования нежелательных поствакцинальных реакций и осложнений при первичном оспопрививании оспенными вакцинами и способ его применения

Средство для купирования нежелательных поствакцинальных реакций и осложнений при первичном оспопрививании оспенными вакцинами и способ его применения

Реферат

Изобретение относится к медицинской вирусологии, а именно к средству и способу применения противовирусных препаратов для купирования побочных реакций и осложнений, вызываемых живыми оспенными вакцинами и в том числе орального применения.

Массовая вакцинация населения против натуральной оспы была прекращена уже более 30 лет назад, в связи с этим у большей части населения России и всего мира нет иммунитета против натуральной оспы. Данная ситуация создает серьезную обеспокоенность экспертов, полагающих, что вирус натуральной оспы может быть использован в качестве биологического оружия в террористических целях. Кроме того, существует предположение, что вирус может неофициально храниться в лабораториях стран, поддерживающих террористические организации [Henderson D.A. Lessons from the eradication campaigns. Vaccine. 1999; Suppi 3: S53-5; Онищенко Г.Г., Сандахчиев Л.С., Нетесов С.В., Мартынюк Р.А. Биотерроризм: национальная и глобальная угроза. Вестник Российской Академии наук. 2003; 73 (3): 195-204]. Угрозу возникновения эпидемиологической опасности также может представлять вирус оспы обезьян. В ряде стран Африки периодически происходят вспышки оспы обезьян. В связи с растущим мировым рынком и транспортным сообщением между странами возрастает риск завоза оспы обезьян в страны, для которых данное заболевание не характерно. Так, в США в 2003 году около 100 американцев инфицировались вирусом оспы обезьян, завезенным случайно с инфицированными экзотическими животными из Западной Африки. Заражение людей произошло от больных оспой обезьян луговых собачек, приобретенных в качестве домашних питомцев, которые на удивление экспертам оказались чувствительными к данному вирусу [Reed K.D., Melski J.W., Graham M.B., Regnery R.L., Sotir M.J., Wegner M.V., Kazmierczak J.J., Stratman E.J., Li Y., Fairley J.A., Swain G.R., Olson V.A., Sargent E.K., Kehl S.C., Frace M.A., Kline R., Foldy S.L., Davis J.P., Damon I.K. The detection of monkeypox in humans in the Western Hemisphere. New England Journal of Medicine. 2004; 350 (4): 342-350]. В Европе в 2009-2011 годах сообщалось о нескольких случаях заражения людей оспой коров от ручных крыс [Stronger V., Muller M., Richter S., Fernandez R.S, Nitsche A., Klee S.R. et al. A 17-year-old girl with a black eschar. Cowpox virus infection. Clin Infect Dis. 2009; 48 (1): 91-92; Elsendoorn A., Agius G., Le Moal G. et al., Severe ear chondritis due to cowpox virus transmitted by a pet rat. Journal of Infection. 2011; 63 (5): 391-393].

Единственным эффективным и проверенным способом защиты населения от натуральной оспы и других ортопоксвирусных инфекций является вакцинопрофилактика.

В России альтернативой традиционной сухой оспенной вакцине накожного применения, созданной на основе кожи телят, является эмбриональная живая таблетированная оспенная вакцина ТЭОВак [РП 482-94. Вакцина оспенная эмбриональная живая таблетированная для орального применения / ВЦ НИИМ МО РФ. - 1993. - Арх. ВЦ НИИМ МО РФ, 1994. - Инв. 5/52], лишенная многих недостатков, присущих инъекционным вакцинам за счет использования перорального способа ее применения. В условиях отдаленной ревакцинации эта вакцина по сравнению с накожной обладает более высокой безвредностью, эпидемиологической безопасностью и низкой реактогенностью [Максимов В.А., Мельников С.А., Бектемиров Т.А. и др. Выбор и оценка иммуногенности и реактогенности оптимальной иммунизирующей дозы ТЭОВак для первичной иммунизации при испытании вакцины на ограниченной группе взрослых людей. В кн: Санитарная охрана территорий государств-участников Содружества Независимых Государств: проблемы биологической безопасности и противодействия биотерроризму в современных условиях: Матер. VI Межгос. Науч. практ. конф. государств-участников СНГ. Волгоград: Панорама. 2005; 257-258].

Кроме того, в процессе разработки находится вакцина Ревакс-ВТ для орального применения, основанная на использовании высокоаттенуированного штамма вируса осповакцины (ВОВ), которая в клинических исследованиях при использовании двукратной схемы прививания малой и большой дозами вакцины практически не вызывала каких-либо побочных реакций у людей [Плясунов И.В., Сергеев А.Н., Сергеев А.А., Петрищенко В.А., Шишкина Л.Н., Генералов В.В., Сафатов А.С., Сандахчиев Л.С., Удут В.В., Мельников С.А., Подкуйко В.Н. Клинические исследования рекомбинантной бивакцины против оспы и гепатита В в условиях двукратной оральной вакцинации. Вопр. вирусол. 2006; 2:31-35].

Тем не менее, сохраняется риск того, что используемые в России оспенные вакцины, как для накожного введения, так и вводимые перорально, могут в ряде случаев, связанных с нарушениями в иммунной системе прививаемого человека, вызывать тяжелые поствакцинальные реакции и осложнения [Centers for Disease Control and Prevention. Smallpox vaccination and adverse reactions: guidance for clinicians. MMWR. 2003; 52 (No. RR-4): [inclusive page numbers].

Учитывая прогнозы экспертов, основанные на состоянии здоровья населения, в случае эпидемической необходимости, связанной с ортопоксвирусными заболеваниями, с учетом противопоказаний смогут быть привиты не более 50% населения [Maurer D.M., Harrington В., Lane J.M. Smallpox Vaccine: Contraindications, Administration, and Adverse Reactions. American Family Physician. 2003; 68 (5): 889-896]. Сложившаяся опасная ситуация требует разработки способов безопасного первичного оспопрививания.

Таким образом, крайне важно разработать способ прививания оспенными вакцинами, в том числе орального применения, в сочетании с противовирусными препаратами, способными купировать возможные поствакцинальные реакции и осложнения после первичной вакцинации, не ослабляя при этом антигенность и иммуногенность используемой вакцины.

Предшествующий уровень техники

Существуют препараты (аналоги), использовавшиеся как средства сопровождения противооспенной вакцинации для профилактики возникновения поствакцинальных осложнений, а также для лечения уже возникших осложнений: Метисазон, препараты противооспенного иммуноглобулина. Однако препарат Метисазон показал свою эффективность только при накожном способе введения противооспенных вакцин [Kackell M.Y., Schneweis K.E., Spiess H. Untersuchungen uber die Wirkung von Marboran, Antivaccine-Hyperimmun-Serum und Vorimpfung mit Vaccineantigen auf die intracutane Pockenimpfung beim Kaninchen. Klinische Wochenschrift. 1966; 44 (20): 1199-1204]. Эффективность противооспенного иммуноглобулина в качестве средства купирования поствакцинальных осложнений, а также в качестве лечебного препарата при проявлении осложнений не доказана посредством официальных клинических испытаний [Hopkins R.J., Lane J.M. Clinical efficacy of intramuscular vaccinia immune globulin: a literature review. Clin Infect Dis. 2004; 39 (6): 819-826].

Наиболее близким по техническому решению, принятому за прототип, является препарат ST-246 - химическое соединение 4-трифторметил-N-(3,3а,4,4а,5,5а,6,6а-октагидро-1,3-диоксо-4,6-етеноциклопроп [f]изоиндол-2(1Н)-ил) бензамида. Данный препарат является ингибитором диссеминации ортопоксвирусов, что обусловливает его противооспенную эффективность. Как известно из зарубежных источников, препарат ST-246 был использован как препарат-сопровождение противооспенной вакцинации в экспериментах на животных. Было показано, что ST-246 снижает реактогенность используемых вакцин, при этом, не снижая их иммуногенности [Grosenbach D.W., Jordan R., King D.S., Berhanu A., Warren Т.К., Kirkwood-Watts D.L., Tyavanagimatt Sh., Tan Y., Wilson R.L., Jones K.F., Hruby D.E. Immune responses to the smallpox vaccine given in combination with ST-246, a small-molecule inhibitor of poxvirus dissemination. Vaccine. 2008; 26 (7): 933-946]. Кроме того, сообщается, что данный препарат способен предотвращать вторичную и третичную передачу вируса осповакцины от вакцинированного человека [Berhanu A., King D.S., Mosier S., Jordan R., Jones K.F., Hruby D.E. and Grosenbach D.W. ST-246 Inhibits In Vivo Poxvirus Dissemination, Virus Shedding, and Systemic Disease Manifestation. Antimicrob Agents Chemother. 2009; 53 (12): 4999-5009].

Однако основным недостатком прототипа является то, что исследования его купирующего действия в отношении возможных поствакцинальных реакций и осложнений проводились только с противооспенными вакцинами накожного применения и только у мышей.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является новое средство для купирования нежелательных поствакцинальных реакций и осложнений при первичном оспопрививании оспенными вакцинами как накожной, так и оральной схемы введения у мышей, морских свинок и человека и способ его применения, не снижающий иммуногенности вакцин.

Указанный технический результат достигается созданием средства для купирования нежелательных поствакцинальных реакций и осложнений при первичном оспопрививании оспенными вакцинами на основе химического соединения 7-[N'-(4-трифторметилбензоил)-гидразинокарбонил]-трицикло[3.2.2.02,4]нон-8-ен-6-карбоновой кислоты (НИОХ-14) в дозах 3,3-50 мг/кг массы тела.

Указанный технический результат достигается также способом применения средства для купирования нежелательных поствакцинальных реакций и осложнений при первичном оспопрививании оспенными вакцинами, включающий оральное введение средства на основе химического соединения 7-[N'-(4-трифторметилбензоил)-гидразино-карбонил]-трицикло[3.2.2.02,4]нон-8-ен-6-карбоновой кислоты (НИОХ-14) в дозах 3,3-50 мг/кг массы тела один раз в сутки в день вакцинации и в течение двух дней после вакцинации.

Характеристика заявляемого средства. Препарат НИОХ-14 для купирования нежелательных поствакцинальных реакций и осложнений, возникающих при первичном оспопрививании. Данный препарат позволяет снизить проявление остаточных вирулентных свойств штаммов вируса осповакцины (ВОВ), входящих в состав оспенных вакцин орального применения. Схема основана на оральном применении противовирусного препарата НИОХ-14 в сочетании с первичной вакцинацией оспенной вакциной.

Источник получения препарата НИОХ-14. В работе было использовано химическое соединение НИОХ-14 (7-[N'-(4-трифторметилбензоил)-гидразинокарбонил]-трицикло[3.2.2.02,4]нон-8-ен-6-карбоновая кислота), синтезированное в Новосибирском институте органической химии (НИОХ) им. Н.Н. Ворожцова СО РАН в соответствии с Лабораторным регламентом №1-ТО-2012 и Техническими условиями (ТУ 9328-088-03533903-12).

Характеристики используемого препарата:

Подлинность. Подлинность химического соединения НИОХ-14 подтверждается ПК-спектрами, ЯМР ¹Н и ЯМР ¹⁹F в соответствии с Лабораторным регламентом №1-ТО-2012 и Техническими условиями (ТУ 9328-088-03533903-12).

Данные о параметрах токсичности субстанции препарата НИОХ-14. В токсикологическом эксперименте было установлено, что однократное внутрижелудочное введение препарата НИОХ-14 в дозе 5 г/кг не приводило к гибели лабораторных мышей. В ходе ежедневного клинического осмотра животных не были обнаружены признаки интоксикации. Препарат не приводил к снижению массы тела или скорости ее прироста. Эти данные позволяют отнести препарат НИОХ-14 (субстанция) к классу малоопасных соединений для данного способа введения (по ГОСТ 12.1.007-76).

Противовирусное действие. Препарат НИОХ-14 обладает высокой активностью в отношении ортопоксвирусов, ранее описанной нами, в экспериментах in vitro и in vivo [Кабанов А.С., Сергеев Ал.А., Булычев Л.Е., Бормотов Н.И., Шишкина Л.Н., Сергеев Ар.А. и др. Изучение противовирусной активности химически синтезированных соединений в отношении ортопоксвирусов в экспериментах in vitro. Проблемы особо опасных инфекций. 2013; 2: 54-59; Кабанов А.С., Сергеев Ал.А., Шишкина Л.Н., Булычев Л.Е., Скарнович М.О., Сергеев Ар.А. и др. Сравнительное изучение противовирусной активности химических соединений в отношении ортопоксвирусов в экспериментах in vivo. Вопросы вирусологии. 2013; 4: 39-43; Сергеев Ал.А., Кабанов А.С., Булычев Л.Е., Пьянков О.В., Сергеев Ар.А., Таранов О.С. и др. Использование мыши в качестве модельного животного для оценки эффективности лечебно-профилактического действия препаратов против оспы обезьян. Проблемы особо опасных инфекций. 2013; 2: 60-65].

Ниже приведены составы заявляемого средства.

Состав 1 для млекопитающих, в том числе для человека, с низким уровнем обмена веществ в организме. Средство для купирования нежелательных поствакцинальных реакций и осложнений при первичном оспопрививании оспенными вакцинами и способ его применения на основе химического соединения 7-[N'-(4-трифторметилбензоил)-гидразинокарбонил]-трицикло[3.2.2.02,4] нон-8-ен-6-карбоновой кислоты (НИОХ-14) в дозе 3,3 мг/кг массы тела.

Состав 2 для млекопитающих с высоким уровнем обмена веществ в организме. Средство для купирования нежелательных поствакцинальных реакций и осложнений при первичном оспопрививании оспенными вакцинами и способ его применения на основе химического соединения 7-[N'-(4-трифторметилбензоил)-гидразинокарбонил]-трицикло[3.2.2.02,4] нон-8-ен-6-карбоновой кислоты (НИОХ-14) в дозе 50 мг/кг массы тела.

Способ применения. Препарат НИОХ-14 вводят мышам, морским свинкам и кроликам в дозе 50 мг/кг или людям в дозе 3,3 мг/кг массы тела перорально один раз в сутки в день вакцинации и в течение двух суток после вакцинации.

Пример 1. Определение эффективности купирования побочного действия ВОВ препаратом НИОХ-14 у орально вакцинированных мышей

Оценку эффективности перорального применения препарата НИОХ-14 в дозе 50 мг/кг для купирования поствакцинальных реакций и осложнений в схеме его применения в день вакцинации и в течение 2 дней после вакцинации проводили в сравнении со схемой применения другого противовирусного препарата, зарегистрированного в России, а именно: Ингавирин (пр-ва ОАО «Валента-Фармацевтика», Россия).

Поствакцинальные реакции, выражающиеся летальным исходом, моделировали у мышей с массой тела 10-15 г, перорально вакцинированных (инфицированных) штаммом НВ-92 вируса осповакцины. Данные влияния препаратов на выживаемость мышей представлены в таблице 1.

Таблица 1
Влияние различных схем применения препаратов на гибель мышей, орально вакцинированных (инфицированных) штаммом НВ-92 вируса осповакцины в дозе 10 ЛД50
№	Группы мышей, получавших препараты	Схема применения препарата и его дозировка	Количество и процент (%) выживших мышей	Коэффициент защиты
1	Ингавирин (n=15)	Препарат в дозе 50 мг/кг вводили орально 1 раз в день за 1 сутки до инфицирования и в течение 2 суток после инфицирования	0 (0%)	-
3	НИОХ-14 (n=15)	Препарат в дозе 50 мг/кг вводили орально 1 раз в день за 1 сутки до инфицирования и в течение 2 суток после инфицирования	15* (100%)	100%
4	Контроль (n=15)	Физ. раствор вводили орально 1 раз в день за 1 сутки до инфицирования и в течение 2 суток после инфицирования	0 (0%)	0%
Примечание: n - количество животных в группе; * - достоверное отличие от контроля (p<0,05).

Таким образом, определили, что схема применения препарата НИОХ-14 значимо защищает мышей от летальной инфекции (p<0,05), что подтверждает эффективность купирования побочного действия (поствакцинальной реакции) вируса осповакцины.

Пример 2. Определение эффективности купирования побочного действия ВОВ препаратом НИОХ-14 у первично вакцинированных (инфицированных) морских свинок

Для определения эффективности купирования побочного действия ВОВ у морских свинок использовали те же препараты, что и в эксперименте с использованием мышей. Сравнительную оценку эффективности перорального применения препарата НИОХ-14 в дозе 50 мг/кг для купирования поствакцинальных реакций и осложнений в схеме его применения 1 раз в сутки в день вакцинации и в течение 2 дней после вакцинации проводили с использованием морских свинок с массой тела 200-300 г. Морских свинок вакцинировали (инфицировали) интраназальным способом, так как для орального инфицирования морских свинок необходима очень высокая доза штамма GPA вируса осповакцины (более 8,5 lg БОЕ). Учитывая тот факт, что основными клетками мишенями для вируса осповакцины являются клетки ретикулоэндотелиальной системы [McFadden, G. Poxvirus tropism. Nature Reviews. Microbiology. 2005; 3(3): 201-213], которые в изобилии присутствуют в носовой полости морских свинок и, видимо, слабо представлены в области зева в связи с анатомической особенностью полости рта этих животных, нами было проведено интраназальное вакцинирование морских свинок. Интраназальное вакцинирование морских свинок штаммом GPA вируса осповакцины сопровождалось развитием у них поствакцинальных реакций, заканчивающихся летальным исходом. Данные влияния препаратов на выживаемость морских свинок представлены в таблице 2.

В результате установили, что исследованная схема препарата НИОХ-14 достоверно защищает морских свинок от поствакцинальной реакции (летального исхода), вызванной введением штамма GPA вируса осповакцины.

Таблица 2
Данные гибели морских свинок, интраназально вакцинированных (инфицированных) штаммом GPA вируса осповакцины в дозе 10 LD50 и обработанных препаратами в разных схемах
№	Группы морских свинок, получавших препараты	Схема применения препарата и его дозировка	Количество и процент (%) выживших морских свинок	Коэффициент защиты
1	Ингавирин (n=8)	Препарат в дозе 50 мг/кг вводили орально 1 раз в сутки в день инфицирования и в течение 2 суток после инфицирования	0 (0%)	0%
3	НИОХ-14 (n=8)	Препарат в дозе 50 мг/кг вводили орально 1 раз в сутки в день инфицирования и в течение 2 суток после инфицирования	8* (100%)	87,5%
4	Контроль (n=8)	Физ. раствор вводили орально 1 раз в сутки в день инфицирования и в течение 2 суток после инфицирования	1 (12,5%)	-
Примечание: n - количество животных в группе; * - достоверное отличие от контроля (p<0,05).

Пример 3. Определение эффективности купирования побочного действия ВОВ препаратом НИОХ-14 у первично вакцинированных (инфицированных) накожным способом кроликов

Для определения эффективности купирования побочного действия ВОВ у кроликов использовали те же препараты, что и в экспериментах с использованием мышей и морских свинок.

Таблица 3
Влияние препаратов и схем их введения на дермонекротическую активность штамма Л-ИВП у кроликов
№	Группы кроликов, получавших препараты	Схема применения препарата и его дозировка	Количество и процент (%) кроликов без некрозов	Коэффициент защиты
1	Ингавирин (n=6)	Препарат в дозе 50 мг/кг вводили орально 1 раз в сутки в день инфицирования и в течение 2 суток после инфицирования	1 (17%)	17%
3	НИОХ-14 (n=6)	Препарат в дозе 50 мг/кг вводили орально 1 раз в сутки в день инфицирования и в течение 2 суток после инфицирования	5* (84%)	84%
4	Контроль (n=6)	Физ. раствор вводили орально 1 раз в сутки в день инфицирования и в течение 2 суток после инфицирования	0 (0%)	-
Примечание: n - количество животных в группе; * - достоверное отличие от контроля (p<0,05).

Сравнительную оценку эффективности перорального применения препарата НИОХ-14 в дозе 50 мг/кг для купирования поствакцинальных реакций и осложнений (дермонекротических проявлений) при применении 1 раз в сутки в день вакцинации и в течение 2 дней после вакцинации проводили с использованием кроликов породы Шиншилла с массой тела 2,0-2,5 кг. Кроликов вакцинировали (инфицировали) внутрикожным способом, вводя 50 мкл штамма Л-ИВП ВОВ в дозе 10 НД₅₀ (50% некротическая доза). Накожное вакцинирование кроликов штаммом Л-ИВП ВОВ сопровождалось развитием у них воспалительно-некротических реакций в области введения ВОВ. Данные влияния препаратов на снижение дермонекротической активности штамма Л-ИВП ВОВ у кроликов представлены в таблице 3.

В результате установили, что исследованная схема применения препарата НИОХ-14 достоверно защищает кроликов от развития некротических поражений кожи в месте введения штамма Л-ИВП ВОВ.

Пример 4. Оценка влияния схем применения препаратов на иммуногенность используемых оспенных вакцин

В экспериментах на мышах с массой тела 28-30 г оценивали влияние препаратов НИОХ-14 и Ингавирин на иммуногенность таблетированной эмбриональной живой оспенной вакцины ТЭОВак (пр-ва ФГКУ «33 ЦНИИИ МО РФ»). Вакцину ТЭОВак вводили орально с помощью поролоновой губки, пропитанной 0,1 мл вируссодержащей жидкости, полученной после предварительного растворения одной таблетки в 3 мл разводящей жидкости (физ. раствор). Доза вакцины составила 6,0 lg БОЕ. Препарат НИОХ-14 вводили в дозе 50 мг/кг один раз в сутки в день вакцинации и в течение двух суток после вакцинации, препарат Ингавирин вводили орально в такой же дозе аналогичным способом.

Полученные результаты свидетельствуют об отсутствии значимых изменений в формировании гуморального ответа у мышей орально привитых вакциной ТЭОВак под воздействием схем применения препаратов НИОХ-14 и Ингавирин (табл.4).

Таблица 4
Влияние схем применения препаратов НИОХ-14 и Ингавирина на титры противооспенных антител у мышей, однократно привитых вакциной ТЭОВак
№	Группы мышей	Сероконверсия (%)	Средний геометрический титр (СГТ) противооспенных антител	Диапазон СГТ (min-max)
2	Ингавирин*	100	164	(82-326)
3	НИОХ-14*	66	214	(89-511)
4	Контроль	66	125	-
* - препараты вводили в схемах, подробно описанных в тексте.

Таким образом, исследуемые препараты достоверно не снижают иммуногенность оспенных вакцин орального применения.

Пример 5. Пример расчета дозы препарата НИОХ-14 для человека с целью его использования в трехкратной схеме при первичной вакцинации оспенными вакцинами орального применения.

Закон зависимости обмена веществ от массы тела отражает тенденцию к установлению соответствия между теплопродукцией и интенсивностью теплоотдачи в окружающее пространство. Потеря тепла на единицу массы тела оказывается тем больше, чем больше соотношение между поверхностью и объемом тела, при этом последнее соотношение уменьшается с увеличением размера тела. Кроме того, у мелких животных изолирующий слой тела более тонкий: интенсивность метаболизма у мыши на 1 г массы тела больше, чем у человека.

У человека массой (m) 65 кг (65000 г) площадь поверхности тела (S) составляет ~1,99 м² (19900 см²), коэффициент S/m ≈ 0,31 см²/г. Площадь поверхности тела мыши массой 12 г равна ~60 см². У мыши коэффициент соотношения S/m ≈ 4,62 см²/г. Отношение этих коэффициентов для мыши и человека равно 4,62 см²/г ÷ 0,31 см²/г = 14,9. Исходя из того, что коэффициент S/m у мышей выше, чем у человека, практически в 15 раз, можно сделать заключение, что интенсивность обмена веществ и скорость метаболизма введенного вещества у мыши в 15 раз выше, чем у человека. По этой причине доза препарата, вводимая мыши, на единицу массы может быть в 15 раз больше, чем у человека.

Исходя из того, что при проверке противовирусной эффективности препарата НИОХ-14 в экспериментах на мышах была использована доза 50 мг/кг (50 мкг/г) массы мыши (0,6 мг/мышь = 600 мкг/мышь), то для человека эти дозы могут быть в 15 меньше, чем для мыши, и составлять ~3,3 мг/кг массы тела человека (200-250 мг/человека).

Таким образом, в рамках полученных результатов было показано, что способ введения препарата НИОХ-14 один раз в сутки в день вакцинации и в течение двух суток после вакцинации оспенными вакцинами может быть успешно использован для купирования негативных побочных реакций и осложнений при проведении первичной противооспенной вакцинопрофилактики.

1. Средство для купирования нежелательных поствакцинальных реакций и осложнений при первичном оспопрививании оспенными вакцинами, характеризующееся тем, что содержит 7-[N′-(4-трифторметилбензоил)-гидразинокарбонил]-трицикло[3.2.2.02,4]нон-8-ен-6-карбоновую кислоту.

2. Способ применения средства для купирования нежелательных поствакцинальных реакций и осложнений при первичном оспопрививании оспенными вакцинами, включающий оральное введение средства по п.1 в дозах 3,3-50 мг/кг массы тела один раз в сутки в день вакцинации и в течение двух суток после вакцинации.