Связывающая мср-1 нуклеиновая кислота и ее применение

Связывающая мср-1 нуклеиновая кислота и ее применение

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Настоящее изобретение относится к нуклеиновым кислотам, которые связываются с MCP-1, и к их применению для получения лекарственного средства и диагностического средства, соответственно.

MCP-1 (хемоаттрактантный белок моноцитов-1; альтернативные названия: MCAF [хемоаттрактантный и активирующий фактор моноцитов]; CCL2; SMC-CF [колониестимулирующий фактор гладкомышечных клеток]; HC-11; LDCF; GDCF; TSG-8; SCYA2; A2; код доступа SwissProt: P13500) человека был охарактеризован независимо тремя исследовательскими группами (Matsushima 1988; Rollins 1989; Yoshimura 1989). Он состоит из 76 аминокислот и, подобно всем хемокинам, характеризуется участком связывания гепарина. Две внутримолекулярных дисульфидных связи обеспечивают стабильную жесткую структуру молекулы. Более того, MCP-1 имеет пироглутамат на N-конце. В участке Thr 71 расположен вероятный участок O-связанного гликозилирования. Существуют другие члены семейства MCP, как у человека (MCP-2, -3, -4), так и у мышей (MCP-2, -3, -5). Белки человека приблизительно на 70% гомологичны MCP-1 человека.

Структура MCP-1 была выполнена с помощью ЯМР (Handel 1996) и рентгенограммы (Lubkowski 1997). Мономер MCP-1 имеет характерную для хемокинов укладку, при которой за N-концевыми остатками цистеина следует длинная петля, которая образует три встречно параллельные β-складчатые слои в повторе "Greek key". Белок заканчивается α-спиралью, которая расположена над тремя β-слоями (код доступа данных PDB: 1DOK).

Несмотря на то, что трехмерная структура форм MCP-1 различных видов млекопитающих в основном сохраняется, аминокислотная последовательность в ходе эволюции сохранилась в меньшей степени. При выравнивании последовательностей общее сходство последовательностей составляет 55%, между MCP-1 (также называемым JE) человека и мыши в участке первых 76 аминокислот. Кроме аминокислотной последовательности, MCP-1 мыши отличается от MCP-1 человека размером молекулы (125 аминокислоты) и степенью гликозилирования. MCP-1 мыши содержит С-концевой домен из 49 аминокислот, который отсутствует у MCP-1 человека, и не требуется для биологической активности in vitro. MCP-1 человека имеет следующий процент аминокислотной идентичности с MCP-1 следующих видов:

- MCP-1 Macaca mulatta (макак-резус)	97%
- MCP-1 Sus scrofa (свинья)	79%
- Equus caballus (лошадь)	78%
- MCP-1 Canis familiaris (собака)	76%
- MCP-1 Oryctolagus cuniculus (кролик)	75%
- Bos Taurus (бык)	72%
- MCP-3 Homo sapiens	71%
- Эотаксин Homo sapiens	64%
- MCP-2 Homo sapiens	62%
- MCP-1 Mus musculus (мышь)	55%
- MCP-1 Rattus norvegicus (крыса)	55%

С учетом высокой степени дивергенции, для успешного проведения фармакологических испытаний на моделях грызунов может возникнуть необходимость в получении антагонистов MCP-1 грызунов.

MCP-1 является сильным аттрактантом моноцитов/макрофагов, базофилов, активированных T-клеток и NK-клеток. Широкое множество типов клеток, таких как эндотелиальные клетки, эпителиальные клетки, фибробласты, кератиноциты, синовиальные клетки, мезангиальные клетки, остеобласты, гладкомышечные клетки, а также множество опухолевых клеток, экспрессируют MCP-1 (Baggiolini 1994). Его экспрессию стимулирует несколько типов провоспалительных агентов, таких как IL-1β, TNF-α, IFN-γ, LPS (липополисахарид) и GM-CSF.

Довольно необычный в разнородной сети хемокинов, MCP-1 является высоко специфичным в отношении использования рецепторов, так как связывается с высокой аффинностью только с рецептором хемокинов CCR2. Подобно всем рецепторам хемокинов, CCR2 является сопряженным с G-белком рецептором (GPCR) (Dawson 2003). CCR2, по-видимому, экспрессируется в виде двух немного отличающихся формах, CCR2a и CCR2b, образующихся в результате альтернативного сплайсинга мРНК, кодирующей С-концевую область (Charo 1994). Эти рецепторы экспрессируются на моноцитах, миелоидных клетках-предшественниках и активированных T-клетках (Myers 1995; Qin 1996). Константа диссоциации MCP-1 и рецептора, трансфицированного в клетки HEK-293, составляет 260 пМ, что согласуется со значениями, измеренными на моноцитах (Myers 1995; Van Riper 1993). Активация CCR2b на трансфицированных клетках HEK-293 посредством MCP-1 ингибирует аденилилциклазу в концентрации 90 пМ, и мобилизует внутриклеточный кальций при несколько более высоких концентрациях, по-видимому, независимо от гидролиза фосфатидилинозитола. Эффекты аденилилциклазы и внутриклеточного высвобождения кальция жестко ингибируются токсином коклюша, что указывает на вовлечение в передачу сигнала гетеротримерных G-белков G_i-типа (Myers 1995).

MCP-1 связан с привлечением моноцитов в воспаленные ткани. Там, оседлые макрофаги высвобождают хемокины, такие как MCP-1 и другие хемокины, и цитокины, такие как TNF, IL-1β и другие цитокины, которые активируют экспрессию ряда молекул адгезии эндотелиальными клетками. В результате этого процесса, моноциты катятся по поверхности "липкого" эндотелия. В этот момент, моноциты встречаются с MCP-1, находящимся на поверхности эндотелия, и МСР-1 связывается с CCR2 моноцитов, активируя их. Такое связывание в конечном итоге приводит к полной остановке моноцитов, распространению их по эндотелию, и миграции в окружающую ткань, где моноциты дифференцируются до макрофагов и мигрируют в направлении области максимальной концентрации MCP-1.

MCP-1 является членом семейства хемокинов, которое представляет собой семейство низкомолекулярных (приблизительно 8-14 кДа) связывающих гепарин, в большинстве случаев основных и структурно родственных, молекул. Они образуются, главным образом, в воспаленных тканях, и регулируют привлечение, активацию и пролиферацию белых клеток крови (лейкоцитов) (Baggiolini 1994; Springer 1995; Schall 1994). Хемокины селективно индуцируют хемотаксис нейтрофилов, эозинофилов, базофилов, моноцитов, макрофагов, тучных клеток, T- и B-клеток. Кроме хемотактического эффекта, они могут селективно оказывать другие эффекты в отвечающих клетках, например, изменять форму клеток, временно повышать концентрацию свободных внутриклеточных ионов кальция, обеспечивать дегрануляцию, активацию интегринов, образование биологически активных липидов, таких как лейкотриены, простагландины, тромбоксаны, или дыхательный взрыв (высвобождение активных форм кислорода для разрушения патогенных организмов или опухолевых клеток). Таким образом, провоцируя высвобождение дополнительных провоспалительных медиаторов, хемотаксис и экстравазацию лейкоцитов в инфицированной области или в области воспаления, хемокины стимулируют усиление воспалительной реакции.

По расположению первых двух из четырех консервативных остатков цистеина, хемокины разделяют на четыре класса: CC или β-хемокины, в которых цистеины расположены тандемно, CXC или α-хемокины, где они разделены одним дополнительным аминокислотным остатком, XC или γ-хемокины, единственным представителем которых на сегодняшний день является лимфотактин, которые обладают лишь одним дисульфидным мостиком, и CX3C-хемокины, которые характеризуются тремя аминокислотными остатками между остатками цистеина, и единственным представителем которых на сегодняшний день является мембраносвязанный фракталкин (Bazan 1997).

CXC-хемокины, в частности, те CXC-хемокины, которые обладают аминокислотной последовательностью ELR на их N-конце, действуют, главным образом, на нейтрофилы. Примерами CXC-хемокинов, которые являются активными в отношении нейтрофилов, являются IL-8, GROα, -β и -γ, NAP-2, ENA-78 и GCP-2. CC-хемокины действуют на широкое множество лейкоцитов, такие как моноциты, макрофаги, эозинофилы, базофилы, а также T- и B-лимфоциты (Oppenheim 1991; Baggiolini 1994; Miller 1992; Jose 1994; Ponath 1996a). Их примерами являются I-309; MCP-1, -2, -3, -4, MIP-1α и -β, RANTES и эотаксин.

Хемокины действуют посредством рецепторов, которые относят к суперсемейству сопряженных с G-белком рецепторов с семью трансмембранными доменами (GPCR; Murphy 2000). В целом, взаимодействия хемокинов и рецепторов хемокинов обычно бывает разнородным в том смысле, что один хемокин может связывать множество рецепторов хемокинов и, наоборот, один рецептор хемокинов может взаимодействовать с несколькими хемокинами. Некоторые известные рецепторы CC-хемокинов включают CCR1, который связывает MIP-1α и RANTES (Neote 1993; Gao 1993); CCR2, который связывает хемокины, включая MCP-1, -2, -3 и -4 (Charo 1994; Myers 1995; Gong 1997; Garcia-Zepeda 1996); CCR3, который связывает хемокины, включая эотаксин, RANTES и MCP-3 (Ponath 1996b); CCR4, который, как было выявлено, передает сигнал в ответ на MCP-1, MIP-1α и RANTES (Power 1995); и CCR5, который, как было показано, передает сигнал в ответ на MIP-1α и -β и RANTES (Boring 1996; Raport 1996; Samson 1996).

Как указано выше, все четыре члена семейства MCP (1-4) связываются с CCR2, в то время как MCP-2, MCP-3 и MCP-4 также могут взаимодействовать с CCR1 и CCR3 (Gong 1997; Heath 1997; Uguccioni 1997) а, в случае MCP-2, с CCR5 (Ruffing 1998). Другим CC-хемокином, демонстрирующим высокую гомологию с семейством MCP, является эотаксин, который первоначально был выделен из жидкости бронхоальвеолярного лаважа, взятого у сенсибилизированных морских свинок, стимулированных аллергеном (Jose 1994). Было показано, что эотаксин также способен активировать CCR2 (Martinelli 2001).

Проблемой, с которой связано создание настоящего изобретения, является получение средства, которое специфично взаимодействует с MCP-1 и которое может использоваться для профилактики и/или лечения хронического заболевания и хронического нарушения, соответственно. Более конкретно, проблемой, с которой связано создание настоящего изобретения, является получение средств на основе нуклеиновой кислоты, которая специфично взаимодействует с MCP-1 и которая может использоваться для профилактики и/или лечения хронического заболевания и хронического нарушения, соответственно.

Еще одной проблемой, с которой связано создание настоящего изобретения, является разработка способа получения диагностического средства для лечения заболевания, которое представляет собой хроническое заболевание и хроническое нарушение, соответственно.

В связи с указными выше проблемами, хроническое заболевание и хроническое нарушение, соответственно, предпочтительно, представляет собой хроническое респираторное заболевание, хроническое заболевание почек и системную красную волчанку.

Эти и другие проблемы, с которыми связано создание настоящего изобретения, решают благодаря объекту изобретения, представленным в независимых пунктах формулы изобретения. Предпочтительные варианты осуществления представлены в зависимых пунктах формулы изобретения.

Проблема, с которой связано создание настоящего изобретения, решается благодаря объектам независимых пунктов формулы изобретения. Предпочтительные варианты осуществления представлены в зависимых пунктах формулы изобретения.

Более конкретно, в первом аспекте, который также является первым вариантом осуществления указанного аспекта, проблема, с которой связано создание настоящего изобретения, решается с помощью молекулы нуклеиновой кислоты, способной связываться с MCP-1, причем молекула нуклеиновой кислоты предназначена для использования в качестве лекарственного средства для лечения и/или профилактики хронического заболевания или хронического нарушения, предпочтительно, выбранного из группы, состоящей из хронического респираторного заболевания, хронического заболевания почек и системной красной волчанки.

Во втором аспекте, который также является первым вариантом осуществления указанного аспекта, проблема, с которой связано создание настоящего изобретения, решается с помощью молекулы нуклеиновой кислоты, способной связываться с MCP-1, причем молекула нуклеиновой кислоты предназначена для использования в качестве диагностического средства для диагностики хронического заболевания или хронического нарушения, предпочтительно, выбранного из группы, состоящей из хронического респираторного заболевания, хронического заболевания почек и системной красной волчанки.

Во втором варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления первого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта, хроническое респираторное заболевание выбрано из группы, состоящей из пневмонии, воспаления легких и плевры, плеврита, плеврального выпота, пневмонии при волчанке, хронической диффузной интерстициальной болезни легких, эмболии легких, кровоизлияния в легкие, синдрома сморщенного легкого, легочной гипертензии и хронической обструктивной болезни легких и их комбинаций.

В третьем варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления первого и второго варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта, легочная гипертензия выбрана из группы, состоящей из легочной гипертензии, связанной с болезнью левого отдела сердца, легочной гипертензии, связанной с заболеваниями легких и/или гипоксемией, легочной гипертензии вследствие хронического тромботического и/или эмболического заболевания, гипертензии легочной артерии, предпочтительно, идиопатической гипертензии легочной артерии, гипертензии легочной артерии, связанной с коллагенозом, семейной гипертензии легочной артерии, гипертензии легочной артерии, связанной с другими заболеваниями, и гипертензии легочной артерии, связанной с заболеваниями вен и капилляров.

В четвертом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления первого, второго и третьего варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта, хроническая обструктивная болезнь легких представляет собой хроническую обструктивную болезнь легких с вовлечением сосудов легких или без такого вовлечения.

В пятом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления первого, второго, третьего и четвертого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта, хроническая обструктивная болезнь легких выбрана из группы, состоящей из хронического бронхита и эмфиземы.

В шестом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления первого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта, хроническое заболевание почек выбрано из группы, состоящей из волчаночного нефрита, мембрано-пролиферативного гломерулонефрита, мембранозного гломерулонефрита, IgA-нефропатии, пост-стрептококкового гломерулонефрита, быстро прогрессирующего гломерулонефрита, нефритического синдрома, фокального сегментного гломерулосклероза, диабетической нефропатии, нефротического синдрома и нефротического синдрома, предпочтительно, волчаночного нефрита.

В седьмом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления первого, второго, третьего, четвертого, пятого и шестого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта, нуклеиновая кислота выбрана из группы, содержащей нуклеиновые кислоты типа 1A, нуклеиновые кислоты типа 1B, нуклеиновые кислоты типа 2, нуклеиновые кислоты типа 3, нуклеиновые кислоты типа 4 и нуклеиновые кислоты, имеющие последовательность нуклеиновой кислоты согласно любой из SEQ ID NO:87-115.

В восьмом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления седьмого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта, нуклеиновая кислота типа 2 содержит в направлении 5'->3' первый участок Бокс B1A, второй участок Бокс B2 и третий участок Бокс B1B, где

первый участок Бокс B1A и третий участок Бокс B1B необязательно гибридизуются друг с другом, причем при гибридизации образуется двухцепочечная структура,

первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, содержащей ACGCA, CGCA и GCA,

второй участок Бокс B2 содержит нуклеотидную последовательность CSUCCCUCACCGGUGCAAGUGAAGCCGYGGCUC, и

третий участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, содержащей UGCGU, UGCG и UGC.

В девятом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления восьмого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

второй участок Бокс B2 содержит нуклеотидную последовательность CGUCCCUCACCGGUGCAAGUGAAGCCGUGGCUC.

В десятом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления восьмого и девятого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

a) первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность ACGCA, и

третий участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность UGCGU; или

b) первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность CGCA, и

третий участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность UGCG; или

c) первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность GCA, и

третий участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность UGC или UGCG.

В одиннадцатом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления восьмого, девятого и десятого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность GCA.

В двенадцатом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления восьмого, девятого, десятого и одиннадцатого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта, предпочтительно, одиннадцатого варианта осуществления первого и второго аспекта

третий участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность UGCG.

В 13-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления восьмого, девятого, десятого, одиннадцатого и двенадцатого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта, нуклеиновая кислота содержит последовательность нуклеиновой кислоты согласно SEQ ID NO:37, SEQ ID NO:116, SEQ ID NO:117 и SEQ ID NO:278.

В 14-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления первого, второго, третьего, четвертого, пятого, шестого и седьмого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта, нуклеиновая кислота типа 3 содержит в направлении 5'->3' первый участок Бокс B1A, второй участок Бокс B2A, третий участок Бокс B3, четвертый участок Бокс B2B, пятый участок Бокс B4, шестой участок Бокс B5A, седьмой участок Бокс B6, восьмой участок Бокс B5B и девятый участок Бокс B1B, где

первый участок Бокс B1A и девятый участок Бокс B1B необязательно гибридизуются друг с другом, причем при гибридизации образуется двухцепочечная структура,

второй участок Бокс B2A и четвертый участок Бокс B2B необязательно гибридизуются друг с другом, причем при гибридизации образуется двухцепочечная структура,

шестой участок Бокс B5A и восьмой участок Бокс B5B необязательно гибридизуются друг с другом, причем при гибридизации образуется двухцепочечная структура,

первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность, которая выбрана из группы, содержащей GURCUGC, GKSYGC, KBBSC и BNGC,

второй участок Бокс B2A содержит нуклеотидную последовательность GKMGU,

третий участок Бокс B3 содержит нуклеотидную последовательность KRRAR,

четвертый участок Бокс B2B содержит нуклеотидную последовательность ACKMC,

пятый участок Бокс B4 содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, содержащей CURYGA, CUWAUGA, CWRMGACW и UGCCAGUG,

шестой участок Бокс B5A содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, содержащей GGY и CWGC,

седьмой участок Бокс B6 содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, содержащей YAGA, CKAAU и CCUUUAU,

восьмой участок Бокс B5B содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, содержащей GCYR и GCWG, и

девятый участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, содержащей GCAGCAC, GCRSMC, GSVVM и GCNV.

В 15-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 14-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

третий участок Бокс B3 содержит нуклеотидную последовательность GAGAA или UAAAA.

В 16-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 14-ого и 15-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

пятый участок Бокс B4 содержит нуклеотидную последовательность CAGCGACU или CAACGACU.

В 17-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 14-ого, 15-ого и 16-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

пятый участок Бокс B4 содержит нуклеотидную последовательность CAGCGACU, и Бокс B3 содержит нуклеотидную последовательность UAAAA.

В 18-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 14-ого, 15-ого и 16-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

пятый участок Бокс B4 содержит нуклеотидную последовательность CAACGACU, и третий участок Бокс B3 содержит нуклеотидную последовательность GAGAA.

В 19-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 14-ого, 15-ого, 16-ого, 17-ого и 18-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

седьмой участок Бокс B6 содержит нуклеотидную последовательность UAGA.

В 20-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 14-ого, 15-ого, 16-ого, 17-ого, 18-ого и 19-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

a) первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность GURCUGC, и

девятый участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность GCAGCAC; или

b) первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность GKSYGC, и

девятый участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность GCRSMC; или

c) первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность KBBSC, и

девятый участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность GSVVM; или

d) первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность BNGC, и

девятый участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность GCNV.

В 21-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 20-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

a) первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность GUGCUGC, и

девятый участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность GCAGCAC; или

b) первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность GUGCGC, и

девятый участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность GCGCAC; или

c) первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность KKSSC, и

девятый участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность GSSMM; или

d) первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность SNGC, и

девятый участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность GCNS.

В 22-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 21-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность GGGC, и

девятый участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность GCCC.

В 23-ем варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 14-ого, 15-ого, 16-ого, 17-ого, 18-ого, 19-ого, 20-ого, 21-ого и 22-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта, второй участок Бокс B2A содержит нуклеотидную последовательность GKMGU, и четвертый участок Бокс B2B содержит нуклеотидную последовательность ACKMC.

В 24-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 23-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта, второй участок Бокс B2A содержит нуклеотидную последовательность GUAGU, и четвертый участок Бокс B2B содержит нуклеотидную последовательность ACUAC.

В 25-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 14-ого, 15-ого, 16-ого, 17-ого, 18-ого, 19-ого, 20-ого, 21-ого, 22-ого, 23-его и 24-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

a) шестой участок Бокс B5A содержит нуклеотидную последовательность GGY, и

восьмой участок Бокс B5B содержит нуклеотидную последовательность GCYR; или

b) шестой участок Бокс B5A содержит нуклеотидную последовательность CWGC, и

восьмой участок Бокс B5B содержит нуклеотидную последовательность GCWG.

В 26-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 25-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

шестой участок Бокс B5A содержит нуклеотидную последовательность GGC, и

восьмой участок Бокс B5B содержит нуклеотидную последовательность GCCG.

В 27-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 14-ого, 15-ого, 16-ого, 17-ого, 18-ого, 19-ого, 20-ого, 21-ого, 22-ого, 23-его, 24-ого, 25-ого и 26-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта, предпочтительно, 25-ого и 26-ого варианта осуществления первого и второго аспекта, шестой участок Бокс B5A гибридизуется с нуклеотидами GCY восьмого участка Бокс B5B.

В 28-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 14-ого, 15-ого, 16-ого, 17-ого и 19-ого, 20-ого, 21-ого, 22-ого, 23-его, 24-ого, 25-ого, 26-ого и 27-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта, нуклеиновая кислота содержит последовательность нуклеиновой кислоты согласно SEQ ID NO:56.

В 29-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 14-ого, 15-ого, 16-ого и 18-ого, 19-ого, 20-ого, 21-ого, 22-ого, 23-его, 24-ого, 25-ого, 26-ого и 27-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта, нуклеиновая кислота содержит последовательность нуклеиновой кислоты, выбранную из группы, содержащей последовательности нуклеиновых кислот согласно SEQ ID NO:57-61, SEQ ID NO:67-71 и SEQ ID NO:73.

В 30-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления первого, второго, третьего, четвертого, пятого, шестого и седьмого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта, нуклеиновая кислота типа 4 содержит в направлении 5'->3' первый участок Бокс B1A, второй участок Бокс B2, третий участок Бокс B1B, где

первый участок Бокс B1A и третий участок Бокс B1B необязательно гибридизуются друг с другом, причем при гибридизации образуется двухцепочечная структура,

первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, содержащей AGCGUGDU, GCGCGAG, CSKSUU, GUGUU и UGUU;

второй участок Бокс B2 содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, содержащей AGNDRDGBKGGURGYARGUAAAG, AGGUGGGUGGUAGUAAGUAAAG и CAGGUGGGUGGUAGAAUGUAAAGA, и

третий участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, содержащей GNCASGCU, CUCGCGUC, GRSMSG, GRCAC и GGCA.

В 31-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 30-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

a) первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность GUGUU, и

третий участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность GRCAC;

b) первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность GCGCGAG, и

третий участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность CUCGCGUC; или

c) первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность CSKSUU, и

третий участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность GRSMSG, или

d) первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность UGUU, и

третий участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность GGCA, или

e) первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность AGCGUGDU, и

третий участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность GNCASGCU.

В 32-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 31-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта, первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность CSKSUU, и третий участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность GRSMSG.

В 33-ем варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 32-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта, первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность CCGCUU, и третий участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность GGGCGG.

В 34-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 30-ого, 31-ого, 32-ого и 33-его варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

второй участок Бокс B2 содержит нуклеотидную последовательность AGGUGGGUGGUAGUAAGUAAAG.

В 35-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 30-ого, 31-ого, 32-ого, 33-его и 34-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта, нуклеиновая кислота содержит последовательность нуклеиновой кислоты согласно SEQ ID NO:80 и SEQ ID NO:81.

В 36-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления первого, второго, третьего, четвертого, пятого, шестого и седьмого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта, нуклеиновая кислота типа 1A содержит в направлении 5'->3' первый участок Бокс B1A, второй участок Бокс B2, третий участок Бокс B3, четвертый участок Бокс B4, пятый участок Бокс B5, шестой участок Бокс B6 и седьмой участок Бокс B1B, где

первый участок Бокс B1A и седьмой участок Бокс B1B необязательно гибридизуются друг с другом, причем при гибридизации образуется двухцепочечная структура,

первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность AGCRUG,

второй участок Бокс B2 содержит нуклеотидную последовательность CCCGGW,

третий участок Бокс B3 содержит нуклеотидную последовательность GUR,

четвертый участок Бокс B4 содержит нуклеотидную последовательность RYA,

пятый участок Бокс B5 содержит нуклеотидную последовательность GGGGGRCGCGAYC

шестой участок Бокс B6 содержит нуклеотидную последовательность UGCAAUAAUG или URYAWUUG, и

седьмой участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность CRYGCU.

В 37-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 36-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность AGCGUG.

В 38-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 36-ого и 37-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

второй участок Бокс B2 содержит нуклеотидную последовательность CCCGGU.

В 39-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 36-ого, 37-ого и 38-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

третий участок Бокс B3 содержит нуклеотидную последовательность GUG.

В 40-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 36-ого, 37-ого, 38-ого и 39-ого варианта осуществления первого и второго аспекта

четвертый участок Бокс B4 содержит нуклеотидную последовательность GUA.

В 41-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 36-ого, 37-ого, 38-ого, 39-ого и 40-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

пятый участок Бокс B5 содержит нуклеотидную последовательность GGGGGGCGCGACC.

В 42-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 36-ого, 37-ого, 38-ого, 39-ого, 40-ого и 41-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

шестой участок Бокс B6 содержит нуклеотидную последовательность UACAUUUG.

В 43-ем варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 36-ого, 37-ого, 38-ого, 39-ого, 40-ого, 41-ого и 42-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

седьмой участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность CACGCU.

В 44-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 36-ого, 37-ого, 38-ого, 39-ого, 40-ого, 41-ого, 42-ого и 43-его варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта, нуклеиновая кислота содержит последовательность нуклеиновой кислоты согласно SEQ ID NO:21.

В 45-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления первого, второго, третьего, четвертого, пятого, шестого и седьмого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта, нуклеиновая кислота типа 1B содержит в направлении 5'->3' первый участок Бокс B1A, второй участок Бокс B2, третий участок Бокс B3, четвертый участок Бокс B4, пятый участок Бокс B5, шестой участок Бокс B6 и седьмой участок Бокс B1B, где

первый участок Бокс B1A и седьмой участок Бокс B1B необязательно гибридизуются друг с другом, причем при гибридизации образуется двухцепочечная структура,

первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность AGYRUG,

второй участок Бокс B2 содержит нуклеотидную последовательность CCAGCU или CCAGY,

третий участок Бокс B3 содержит нуклеотидную последовательность GUG,

четвертый участок Бокс B4 содержит нуклеотидную последовательность AUG,

пятый участок Бокс B5 содержит нуклеотидную последовательность GGGGGGCGCGACC

шестой участок Бокс B6 содержит нуклеотидную последовательность CAUUUUA или CAUUUA, и

седьмой участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность CAYRCU.

В 46-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 45-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

первый участок Бокс B1A содержит нуклеотидную последовательность AGCGUG.

В 47-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 45-ого и 46-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

второй участок Бокс B2 содержит нуклеотидную последовательность CCAGU.

В 48-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 45-ого, 46-ого и 47-ого варианта осуществления первого аспекта и второго аспекта,

шестой участок Бокс B6 содержит нуклеотидную последовательность CAUUUUA.

В 49-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 45-го, 46-го, 47-го и 48-го варианта осуществления первого и второго аспекта,

седьмой участок Бокс B1B содержит нуклеотидную последовательность CACGCU.

В 50-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления 45-ого, 46-ого, 47-ого, 48-ого и 49-ого варианта осуществления первого и второго аспекта, нуклеиновая кислота содержит последовательность нуклеиновой кислоты согласно SEQ ID NO:28 и SEQ ID NO:27.

В 51-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления любого из с первого по 50-ый вариантов осуществления первого и второго аспекта, MCP-1 выбран из группы, содержащей MCP-1 обезьяны, MCP-1 лошади, MCP-1 кролика, MCP-1 быка, MCP-1 собаки, MCP-1 свиньи и MCP-1 человека.

В 52-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления любого из с первого по 51-ый вариантов осуществления первого и второго аспекта, нуклеиновая кислота способна связывать MCP-1 человека.

В 53-ем варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления любого из с первого по 52-ой вариантов осуществления первого и второго аспекта, предпочтительно, 52-ого варианта осуществления первого и второго аспекта, MCP-1 имеет аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO:1.

В 54-ом варианте осуществления первого и второго аспекта, который также является вариантом осуществления любого из с первого по 53-ий вариантов осуществления первого и второго аспекта, нуклеиновая кислота содержит модификацию, где модифицирующая группа предпочтительно представляет собой высокомолекулярную группу и/или где модифицирующая группа предпочтительно позволяет модифицировать характеристики нуклеиновой кислоты по любому из 1-54 с точки зрения времени нахождения в организме животного или человека, предпочти