Способ борьбы с нежелательной травянистой растительностью класса dicotyledones

Способ борьбы с нежелательной травянистой растительностью класса dicotyledones

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии, в частности к защите растений от инвазивной и сорной растительности путем последовательного применения в начале химического гербицида в сублетальных дозах, а затем суспензии на основе вегетативного мицелия фитопатогенных фома-подобных микромицетов.

Известным способом борьбы с двудольными (класс Dicotylédones) инвазивными и многолетними корнеотпрысковыми сорными растениями является способ обработки химическими гербицидами (Государственный каталог..., 2012 [7]). Однако негативные последствия применения химических гербицидов, а также появление резистентных популяций таких растений отрицательно сказывается на экологии и ведёт к снижению эффективности этого способа.

В качестве альтернативы химическим гербицидам для борьбы с трудноискоренимыми, доминирующими видами сорняков наиболее перспективными считаются препараты на основе фитопатогенных грибов (TeBeest, 1996; Гасич, Берестецкий, 2007 [24, 4]). К их достоинствам относят экологическую безопасность, высокую специфичность, длительность последействия, а также возможность совместного использования с некоторыми химическими препаратами и фитофагами (Leathers et all., 1993; Gressel, 1997 [21, 19]). Однако спектр разрабатываемых биологических средств борьбы с такими двудольными (класс Dicotylédones) растениями ограничен (Берестецкий, Сокорнова, 2009; De Faria,Wright, 2007 [3, 17]), более того эффективность их применения находится в сильной зависимости от температурно-влажностных условий (Leathers et all., 1993; Сокорнова, 2011; Сокорнова, Берестецкий, 2012 [21, 10, 11]).

Фома-подобные грибы - группа фитопатогенных грибов, объединенных по общим морфологическим признакам и путям инфицирования целевых объектов, включающая на данный момент род Phoma, Phomopsis, Stagonospora и т.д. (Boerema et al., 2004 [14]). Суспензия на основе фрагментов мицелия фома-подобных микромицетов является экологически безопасной и в большинстве случаев проявляет агрессивность преимущественно к видам одного семейства двудольных растений (Kungurtseva et al., 2006; Гасич и др., 2010; Сокорнова, 2011 [20, 5, 10]).

Известен способ использования фрагментов мицелия Phoma macrostoma для борьбы с двудольными растениями бодяк полевой (Cirsium arvense L.) и одуванчиком лекарственным {Taraxacum officinale F.H.Wigg) (Bailey&Derby, 2006, [12]). Мицелий получали на зерновом субстрате и 100% гибель растений наблюдали путем внесения измельченного, обросшего мицелием субстрата в почву при норме расхода 1 кг/м² и высоком расходе мицелия - 100 мг/мл, что говорит о сложности применения и большом расходе препарата (Bailey&Derby, 2006, [12]).

Проведенные микофлористические исследования выявили высоко агрессивные в отношении бодяка полевого {Cirsium arvense L.) штамм 163 микромицета Stagonospora cirsii J.J. Davis (Берестецкий, 2005 [1]) и штамм 17.7 микромицета Phoma exigua var. exigua Sacc. {=Ascochyta sonchi (Sacc.) Grove) (Levitin et al, 2007 [22]), а также в отношении борщевика Сосновского {Heracleum sosnowskyi Manden.) штамм 1.40 микромицета Phoma complanata (Tode:Fr.) Desm. (Гасич и др., 2010 [5]). Было обнаружено, что штаммы этих фома-подобных микромицетов могут образовывать вирулентный мицелий, способный успешно заражать целевые растения при 24-часовом периоде повышенной влажности и более низкой, чем при заражении спорами, инфекционной нагрузке (Гасич и др., 2010; Берестецкий, 2005 [5, 1]). Также было показано, что эти микромицеты имеют узкую специализацию (Kungurtseva et al., 2006; Гасич и др., 2010; Сокорнова, 2011 [20, 5, 10]). Однако при применении суспензий на основе этих микромицетов в полевых условиях, наблюдаемая эффективность применения находилась в сильной зависимости от температуры и относительной влажности, а также требовала высоких концентраций фрагментов мицелия в суспензии (Берестецкий, 2005; Гасич и др., 2010; Сокорнова, 2011 [1,5,10]).

Глифосат - неселективный системный гербицид, применяемый преимущественно для борьбы с многолетними сорными растениями класса Dicotylédones. Применяется путем опрыскивания вегетирующих сорняков весной или летом (при условии защиты культуры) при расходе рабочей жидкости - 25-200 л/га. Входит в качестве действующего вещества в препараты Торнадо, Торнадо 500, Алаз, Дефолт, Доминатор, Фозат, Истребитель, Pan, Космик, Глифор, Глифос, Глифос Премиум, Спрут, Факел, Аргумент, Граунд, Сангли, Зеро, Тотал, Раунд, Тайфун, Глидер, Глитерр, Глиф Алт, Зевс, Кайман, Ураган Экстра, Спрут Экстра и т.д. Концентрация действующего вещества в препаратах, применяемых в поле, от 360 до 540 г/л (Государственный..., 2012 [7]). Таким образом, при применении глифосата против двудольных многолетних корнеотпрысковых сорных и инвазивных растений вносится от 13,5 до 108 кг/га.

Известен способ борьбы с бодяком полевым ( Cirsium arvense L.), принятый за прототип, в котором применяли суспензию на основе мицелия фитопатогенного гриба Stagonospora cirsii Davis, полученного на зерновом субстрате либо сахарозо-соевой среде, в концентрации 75 мг/мл совместно с химическим гербицидом на основе глифосата в концентрациях 0,1-0,4 мг/мл (Сокорнова, 2011 [10]). Норма расхода в прототипе от 200 до 1000 л/га. При этом биологическая эффективность была близка к 100%. Однако рассмотренный способ требует большего расхода химического гербицида и инфекционной нагрузки гриба, что приводит к большей химической нагрузке на экосистему, ведёт к увеличению объёма производства мицелия и затрудняет применение суспензии с помощью распыления. Более того в прототипе не изучалась селективность такого применения. В то же время рассмотренный способ может быть, так же как и в прототипе, применен на всех стадиях развития растений.

Задачей изобретения является повышение эффективности способа борьбы с инвазивными и многолетними корнеотпрысковыми растениями класса Dicotylédones, путём применения экологически безвредных средств на основе вегетативного мицелия фома-подобных грибов при минимальных дозах гербицида и концентрации мицелия.

Поставленная задача решена способом, заключающимся в опрыскивании растений водным раствором гербицида с действующим веществом глифосат и суспензией мицелия фома-подобных грибов с ПАВ, отличающимся тем, что обработку ведут на всех стадиях развития растений, последовательно, сначала гербицидом, при норме расхода по действующему веществу глифосату 0,02-0,32 кг/га, а затем суспензией на основе фрагментов мицелия фома-подобных грибов, содержащую в качестве поверхностно-активного вещества (ПАВ) - Твин-80 или Silwet L-77, и следующем соотношении компонентов, мас.%:

Фрагменты мицелия фома-подобных грибов	2,5-10
(при исходной концентрации не менее 0,5×106 КОЕ/г)
Твин-80 или Silwet L77	0,05 - 0,2
Вода	остальное,

при этом норма расхода рабочей жидкости составляет 50-300 л/га.

При последовательном способе применения в начале химического гербицида на основе глифосата, а затем суспензии на основе измельченного мицелия фома-подобных грибов происходит усиление эффективности действия в отношении всех двудольных растений в пределах семейств, приуроченных к фитопатогенам, мицелий которых входит в состав суспензии.

Практическое применение иллюстрируют нижеследующие примеры, которые свидетельствуют о высокой эффективности такого способа борьбы с двудольной нежелательной растительностью, позволяющего снизить химическую нагрузку на экосистему и демонстрирующего селективное действие в пределах семейства.

Пример 1. Влияние последовательности применения химического гербицида и суспензии на основе мицелия фома-подобного гриба на степень поражения наземной части двудольных растений: бодяка полевого и борщевика Сосновского

Вирулентный мицелий фома-подобных грибов штамма 163 S.cirsii, или штамма 17.7 Ph. exigua var. exigua, иди штамма 32.121 Ph.complanata получали на сахарозо-соевой среде (Sokornova, Berestetskiy, 2007; Гасич и др., 2010; Сокорнова, 2011 [23, 5, 10]). Полученный таким образом мицелий вместе с остатками питательной среды измельчали блендером Braun MR 6550 ВС-НС-М 40 секунд при 10000 об/мин. Полученная "маточная" суспензия на основе фрагментов мицелия фома-подобных грибов содержала жизнеспособных единиц не менее 0,5×10⁶ КОЕ/г (таблица 1). Затем эту суспензию разводили раствором 0,01% Твин 80 до конечной концентрации фрагментов мицелия 0,5×10⁴ КОЕ/г (10% раствор).

Количество жизнеспособных единиц определяли общепринятыми микологическими методами (Методы, 1982 [8]).

Патогенность мицелия оценивали по площади некрозов на листовых дисках (Berestetskiy et al., 2007 [13]).

Раствор химического гербицида Торнадо BP (действующее вещество - глифосат) готовили путем разведения концентрата (исходная концентрация 360 г/л) до концентрации 0,2 г/л. Рабочие растворы применяли путем опрыскивания растений в фазе розетки при норме расхода 60 мл/м² как для гербицида, так и для суспензии гриба. При последовательном применении обработки путем распыления проводили подряд, без временных интервалов. Эффективность поражения растений оценивали по площади некрозов листьев на 7 сутки после обработки в полевых условиях при среднесуточной температуре 20-25°С и 65-85% относительной влажности воздуха.

Как видно из таблицы 2, достоверно наибольшее поражение двудольных целевых растений (бодяка полевого и борщевика Сосновского) наблюдалось при последовательном применении в начале химического гербицида, затем суспензии на основе мицелия фома-подобных микромицетов. При этом площадь поражения листьев бодяка полевого при последовательном применении суспензии на основе фрагментов мицелия S.cirsii и химического гербицида на основе глифосата составляет 95%, что соизмеримо с прототипом, но при уменьшении концентрации мицелия в суспензии на 25%, а глифосата в рабочем растворе химического гербицида, более чем в 10 раз (Сокорнова, 2011 [10]). Как видно из таблицы 2, последовательное применение значительно увеличило эффективность способа применения, что открыло возможность использовать и другие виды фома-подобных грибов в этом способе при уменьшении нормы расхода.

Пример 2. Характер взаимодействия глифосата и мицелия фома-подобных грибов при последовательном применении в отношении двудольных растений: бодяка полевого и борщевика Сосновского

Основа для рабочих растворов готовилась, как в примере 1. Затем ее разводили до приведенных в таблице 3, 4, 5 концентраций. Норма расхода рабочих растворов и условия окружающей среды были, как в примере 1. Обработка растений в фазе розетки проводилась опрыскиванием последовательно, без временных интервалов: глифосатом в концентрации от 0 до 0,54 г/л, затем суспензией на основе мицелия фома-подобных микромицетов концентрациях 0, 12, 5, 25 и 50 г/л.

Как видно из таблицы 3, синергетический эффект при последовательном применении в начале химического гербицида Торнадо BP (действующее вещество - глифосат), а затем суспензии на основе мицелия штамма 163 S.cirsii, наблюдается, когда концентрация глифосата по действующему веществу 0,05 и 0,1 г/л при концентрации мицелия 25 и 50 мг/мл, что позволяет получить эффективность в отношении бодяка полевого близкую к наблюдаемой в прототипе (90 и 94%), при снижении концентрации глифосата в 6 раз и концентрации мицелия в 1,5 и 2 раза по сравнению с прототипом. Как видно из таблицы 4, близкую к 100% эффективность в отношении инвазивного растения борщевика Сосновского наблюдают при последовательном применении в начале химического гербицида Торнадо BP (действующее вещество - глифосат), а затем суспензии на основе мицелия штамма 32.121 Ph.complanata. При этом концентрация химического гербицида ниже в 10 раз, а концентрация мицелия в 1,5 и 2 раза по сравнению с прототипом. Как видно из таблицы 5, близкую к 100% эффективность в отношении бодяка полевого наблюдают при последовательном применении в начале химического гербицида Торнадо BP (действующее вещество - глифосат), а затем суспензии на основе мицелия штамма 17.7 Ph. exigua var. exigua. При этом концентрация химического гербицида ниже в 1,5 раза, а концентрация мицелия в 2 и 4 раза по сравнению с прототипом. В случае химического гербицида концентрация более чем в 100 раз ниже рекомендованной для борьбы с этими видами нежелательной растительности (Государственный..., 2012 [7]).

Анализ эффективности последовательного применения химического и биологического препаратов оценивается по достижению синергетического эффекта. Синергетический эффект проявляется, когда воздействие активных ингредиентов комбинации соединений превышает суммарное (аддитивное) воздействие активных компонентов, применяемых по отдельности. Классический расчет ожидаемого воздействия комбинации из двух гербицидов (We) предложен Колби и проводится по следующей формуле:

We=(100-Х_А)·(100-Хв)/100,

где Х_А -воздействие при обработке гербицидом А при норме расхода, равной р_А, выраженное в процентах, Хв -воздействие при обработке гербицидом В при норме расхода, равной р_B, выраженное в процентах (Colby, 1967 [16]).

Величину ожидаемого воздействия сравнивают с величиной, наблюдаемой при совместном применении гербицидов А и В при тех же нормах расхода компонентов р_А и р_B, соответственно. Для этого рассчитывают уровень взаимодействия R как отношение ожидаемого и наблюдаемого воздействия. Согласно Колби аддитивное взаимодействие происходит при R=1, синергизм наблюдается при R>1, а антагонизм при R<1. Однако для биологических систем характерен широкий разброс параметров, поэтому для них принято считать, что синергизм существенен при R>1,5, а антагонизм при R<0,5. Соответственно при значениях R от 0,5 до 1,5 взаимодействие рассматривается как аддитивное (Gisi et all., [18]).

Все суспензии на основе мицелия фома-подобных грибов совместимы с химическим гербицидом глифосатом в сублетальных дозах. Более того при последовательном применении в начале глифосат, затем композиция на основе мицелия фома-подобных грибов в отношении целевых двудольных растений наблюдается синергетический эффект, приводящий к сопоставимой с прототипом эффективности при снижении норм расхода химического препарата и мицелия в суспензии.

Пример 3. Последовательное применение химического гербицида на основе глифосата и суспензии на основе фрагментов мицелия фома-подобных микромицетов при граничных и запредельных значениях компонентов

Суспензию на основе мицелия фома-подобных грибов: штамм 163 S.cirsii, или штамм 17.7 Ph. exigua var. exigua, или штамма 32.121 Phcomplanata и рабочий раствор химического гербицида на основе глифосата готовили, как в примерах 1, 2. Обрабатывали при среднесуточной температуре 20-25°С и 65-85% относительной влажности воздуха двудольные растения в фазе розетки путем распыления с нормой расхода 60 мл/м² в начале гербицидом Лонтрел (действующее вещество глифосат 360 г/л), затем суспензией на основе фрагментов мицелия гриба. Как видно из таблицы 6, при минимальном расходе гербицида на основе глифосата (0,02 кг/га по действующему веществу), в 20 раз меньшей, чем в прототипе, и концентрации суспензии на основе мицелия на 25% выше, чем в прототипе, площадь некроза на 15% выше, чем при применении суспензии на основе мицелия фома-подобных грибов без химического гербицида в прототипе, и на 25% ниже, чем при применении в 20 раз большей химической нагрузки. Максимальные по данному изобретению концентрации химического гербицида и концентрации мицелия в суспензии сопоставимы с прототипом и приводят к 100% поражению растений.

Снижение нижних предельных концентраций (запредельные концентрации) химического гербицида и (или) мицелия в суспензии приводит к низкой эффективности (площадь некрозов листьев менее 20%) и может инициировать резистентность целевых растений к химическим гербицидам на основе глифосата. Применение расхода химического гербицида с действующим веществом глифосат выше максимальных предельных, не увеличивая эффективность, ведет к расширению круга поражаемых культурных растений, к повышению химической нагрузки на экосистему. Повышение концентрации мицелия в суспензии выше 100 мг/мл не увеличивает эффективность, а потому ведет к необоснованному увеличению расхода мицелия. Кроме того из-за повышения плотности суспензии может происходить забивание сопла распылительной техники.

Пример 4. Селективность способа последовательного применения химического гербицида и суспензии на основе мицелия фома-подобных грибов

Суспензию на основе мицелия фома-подобных грибов и рабочий раствор на основе химического гербицида на основе глифосата готовили, как в примерах 1, 2. Оценку селективности способа применения химического гербицида и суспензии на основе мицелия штамма 163 S.cirsii, или штамма 17.7 Ph. exigua var. exigua, или штамм 32.121 Phcomplanata проводили по площади некрозов при последовательной обработке путем распыления растений в фазе розетки в начале суспензией. Оценка "+++" соответствует площади некрозов листьев от 75 до 100%, "++- " соответствует площади некрозов листьев от 50 до 75%, "+--" соответствует площади некрозов листьев от 25 до 50% и "---" менее 25%. Как видно из таблиц 7, 8, 9, последовательное применение химического гербицида на основе глифосата и суспензии на основе мицелия Phcomplanata, S.cirsii и Ph. exigua var. exigua, не увеличивает количество семейств растений класса Dicotylédones, поражаемых грибом, но расширяет спектр поражаемых растений в пределах семейства. Как видно из таблиц 7, 8 и 9 последовательное применение химического гербицида (целевое вещество глифосат) и суспензии на основе мицелия штамма 163 S.cirsii, или штамма 17.7 Ph. exigua var. exigua позволяет также с эффективностью, сопоставимой с прототипом, бороться с такими сорными растениями, как бодяк седой и осот розовый, а суспензии на основе штамма 32.121 Phcomplanata с двумя видами гигантских борщевиков (Heracleum mantegazzianum Somm. et Levier, H. sosnowskyi Manden). Таким образом, эффективность действия композиции на основе мицелия фома-подобных грибов на двудольные растения возрастает, а селективность не изменяется, что позволяет с помощью рассмотренного способа бороться с большим количеством видов нежелательной травянистой растительности. В прототипе и его аналогах этот параметр не рассматривался.

Пример 5. Расход рабочего раствора суспензии на основе мицелия фома-подобных грибов при последовательном способе применения химического гербицида и мицелиальной суспензии

Суспензию на основе на основе мицелия штамма 163 S.cirsii, или штамма 17.7 Ph. exigua var. exigua, или штамм 32.121 Phcomplanata и рабочий раствор на основе химического гербицида Торнадо (действующее вещество глифосат в концентрации 360 г/л) готовили, как в примере 1. В примере применяли мицелиальную суспензию в концентрации 25 г/л, содержащую 0,2% раствор ПАВ Silwet L-77. Концентрация целевого вещества глифосат в растворе на основе химического гербицида Торнадо составляла 0,2 г/л. Для этого Торнадо разводили дистиллированной водой путем последовательного разведения в 1800 раз.

Так как на разных фазах развития целевые растения имеют различный размер наземной части, более того рассматриваемые в данном изобретении гигантские борщевики отличаются тем, что их наземная часть достигает 3 метров (Практическое пособие..., 2013, [9]), требуемый объем рабочих растворов рассчитывался таким образом, чтобы суспензия была капельно распределена по всей поверхности листьев. В опыте обрабатывали растения бодяка полевого в фазе розетки (средняя высота растений 10 см) при плотности 9 растений/м², бодяка полевого в фазе цветения (средняя высота растений 25 см) при плотности 4 растения/м² и борщевик Сосновского в фазе цветения (средняя высота растений 1 м 20 см) при плотности 4 растения/м². Как видно из таблицы 10, при ручном опрыскивании с помощью ручного опрыскивателя STIHL SG 10 (Германия) расход рабочих растворов, приводящих к гибели растений, составил 50 л/га для бодяка полевого и 300 л/га для борщевика Сосновского.

Способ борьбы со сложно искоренимой нежелательной двудольной растительностью, такой как многолетние корнеотпрысковые сорные растения (Cirsium arvense (L.) Scop. s.I. (=C. setosum (Willd.) Besser ex M. Bíeb.), C. incanum (S.G.Gmel.) Fisch.), Sonchus arvensis L.) и инвазивные растения, в частности гигантские борщевики (Heracleum mantegazzianum Sornm. et Levier, H. sosnowskyi Manden и H. persicum Desf.), позволяет снизить химическую нагрузку на экосистему в 1,5 - 10 раз, инфекционную нагрузку (концентрацию мицелия фитопатогенных грибов) в 1,5- 4 раза по сравнению с прототипом. Способ может быть применен на всех стадиях развития растений, не требуя дополнительной защиты возделываемой культуры.

Таблица 1. Выход мицелия фома-подобных грибов и его патогенные свойства при культивировании в течение 3 суток на сахарозо-соевой среде

Таблица 3. Характер взаимодействия глифосата и мицелия S.cirsii при последовательном применении в отношении двудольного растения бодяк полевой (Cirsium arvense L.)

Таблица 4. Характер взаимодействия глифосата и мицелия Р.complánala при последовательном применении в отношении двудольного растения борщевик Сосновского (Heracleum sosnowskyi Manden.)

Таблица 6. Последовательное применение химического гербицида на основе глифосата и суспензии на основе фрагментов мицелия фома-подобных микромицетов при граничных значениях глифосата и мицелиальной суспензии

,

Таблица 10. Расход рабочего раствора суспензии на основе мицелия фома-подобных грибов при последовательном способе применения химического гербицида и мицелиальной суспензии

Использованная литература

1. Берестецкий А.О. Эффективность штаммов различных видов грибов и методов инокуляции для биологической борьбы с бодяком полевым // Фитосанитарное оздоровление экосистем: материалы II Всероссийского Съезда по защите растений. ГНУ ВИЗР. СПб, 2005. Т. 2. С. 136-138.

2. Берестецкий А.О., Кунгурцева О.В. Влияние влажности зернового субстрата на патогенные свойства и выживаемость мицелия Stagonospora cirsii //Микология и фитопатология. 2012. № 4. Том 46. С. 280-286.

3. Берестецкий А.О., Сокорнова C.B. Получение и хранение биопестицидов на основе микромицетов // Микология и фитопатология. 2009. Т. 43, № 6. С. 473-489.

4. Гасич Е.Л., Берестецкий А.О. Влияние долговременного хранения на стабильность штаммов микромицетов, перспективных для биологической борьбы с Cirsium arvense // Микология и фитопатология. 2007. Т.41, № 4. С. 342-347.

5. Гасич Е.Л., Хлопунова Л.Б., Берестецкий А.О., Сокорнова СВ. Штамм гриба Phoma complanata (Tode) Desm. 1.40 (ВИЗР), обладающий гербицидной активностью против борщевика Сосновского. Патент RU 2439141 Cl от 06.10.2010, 9 с.

6. Гасич Е.Л., Хлопунова Л.Б., Берестецкий А.О., Сокорнова C.B. Штамм гриба Phoma complanata (Tode) Desm. 1.40 (ВИЗР), обладающий гербицидной активностью против борщевика Сосновского. Патент RU 2439141 Cl от 06.10.2010, 9 с.

7. Государственный каталог пестицидов и агрохимикатов, разрешенных к применению на территории Российской Федерации, и дополнения к нему (2012 г.) (http://mcx.ru/docimients/document/v7_show/23396.285.htm).

8. Методы экспериментальной микологии. Справочник /ред. В.И. Билай. - Киев: Наукова Думка, 1982, 550 с.

9. Практическое пособие по борьбе с гигантскими борщевиками /ред. Шнильсен, Г.П.Равн, В.Нентвиг, М.Вэйд, изд. Forest & Landscape Denmark, Hoersholm Kongevej 11, DK-2970 Hoersholm, Denmark, sl@kvl.dk, 44 p. www.giant-alien.dk

10. Сокорнова СВ. Биологическое обоснование создания микогербицида на основе фитопатогенного гриба Stagonospora cirsii: автореф. дис. на соиск. учен. степ. канд. биол. наук; ГНУ Всероссийский НИИ защиты растений РАСХН. СПб, 2011. 18 с.

11. Сокорнова C.B., Берестецкий А.О. Влияние температурно-влажностных условий на заражение бодяка полевого мицелием фитопатогенного гриба Stagonospora cirsii Davis //Современная микология в России. Материалы 3-го Съезда микологов России. М.: Национальная академия микологии. 2012. Том 3. С. 396.

12. Bailey K.L., Derby J.A. Fungal isolates and biological control compositions for control of weeds. US 2006/0084574 Al.

13. Berestetskiy A.O., Fyodorova A.F., Kustova S.V. A laboratory technique for the evalution of pathogenicity of Septoria cirsii for Cirsium arvense // XV Congress of European mycologists, 2007, p,242,

14. Boerema G.H., de Gruyter J., Noordeloos M.E., Hamers M.E.C. Phoma identification manual, CABI Publishing, 2004, 470 ρ.

15. Boyette CD., Hoagland R.E., Weaver M.A. Interaction of a bioherbicide and glyphosate for controlling hemp sesbania in glyphosate-resistant soybean // Weed Biology and Management 2008. Vol. 8. P. 18-24.

16. Colby S.R. Calculating Synergistic and Antagonistic Responses of Herbicide Combinations // Weeds. 1967. Vol. 15, No. 1. P. 20-22.

17. De Faria M.R., Wright S.P. Mycoinsecticides and Mycoacaricides: A comprehensive list with worldwide.coverage and international classification of formulation types // Biological Control 2007. Vol.43. P. 237-256.

18. Gisi U., Binder H., Rimbach Ε. Synergistic interactions of fungicides with different modes of action // Trans. Br. Mycol. Soc. 1985. Vol. 85, Iss. 2. P. 299-306.

19. Gressel J., Amsellem Z., Michaeli S.D., Sharon A. Synergized mycoherbicides for resistance management // Weed and crop resistance to herbicides / eds. R. De Prado, J. Jorrín, L. García-Torres. - Dordrecht: Kluwer Academic Publishers. 1997. P. 267-273.

20. Kungurtseva O.V., Sokornova S.V., Berestetskiy A.O. Host range of the bioherbicidal fungus, Stagonospora cirsii and its formulations // International Conference; Development of Environmentally Friendly Plant Protection; Piihajârve, Estonia, 5-7.09.2006. - Tartu: Eesti Taimekaitse Selts, 2006. - P. 33.

21. Leathers T.D., Gupta S.C., Alexander N.J. Mycopesticides: status, challenges and potential / // J. Ind. Microbiol. 1993. Vol. 12, No. 2, P. 69-75.

22. Levitin M., Berestetsky Α., Bilder I., Gagkaeva T., Gannibal Ph., Gasich E., Khlopunova L. Pathogenic micromycetes of Cirsium arvense and selection of species for biological control // Best practice in disease, pest and weed management. The state of the art; Proceedings of an international symposium held at Humboldt University, Berlin, Germany, 10-12 May 2007 / eds. D.V. Alford, F. Feldmann, J. Hasler, A. von Tiedemann. Alton: BCPC, 2007. P. 94-95 (Symposium proceedings, No. 82).

23. Sokornova S.V., Berestetskiy A.O. (2007) Production of virulent mycelial inoculum of Stagonospora cirsii Davis by liquid state fermentation. Proc. XV Congress of European Mycologists, SPb, Russia, September 16-21, 2007. SPb: TREEART LLC, p. 204-205.

24. TeBeest D.O. Biological control of weeds with plant pathogens and microbial pesticides // Advances in Agronomy; Vol. 56 / ed. D.L. Sparks. - San Diego: Academic Press, 1996. P. 115-137.

Способ борьбы с нежелательной травянистой растительностью класса Dicotyledones путем обработки растений опрыскиванием водным раствором гербицида с действующим веществом глифосат и суспензией мицелия фома-подобных грибов с ПАВ, отличающийся тем, что обработку ведут на всех стадиях развития растений последовательно, сначала гербицидом при норме расхода по действующему веществу глифосату 0,02-0,32 кг/га, а затем суспензией на основе фрагментов мицелия фома-подобных грибов, содержащей в качестве поверхностно-активного вещества (ПАВ) - Твин-80 или Silwet L-77, и следующем соотношении компонентов, мас.%:Фрагменты мицелия фома-подобных грибов

(при исходной концентрации не менее 0,5×106 КОЕ/г)	2,5-10
Твин-80 или Silwet L-77	0,05-0,2
Вода	остальное,

при этом норма расхода рабочей жидкости составляет 50-300 л/га.