Режим дозирования для введения биспецифичного антитела cd19×cd3

Режим дозирования для введения биспецифичного антитела cd19×cd3

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Настоящее изобретение относится к способу оценки (анализа) риска возникновения возможного побочного эффекта у пациента-человека, обусловленного введением указанному пациенту биспецифичного антитела CD19×CD3, и указанный способ предусматривает определение соотношения B-клеток к Т-клеткам у указанного пациента, при этом соотношение примерно 1:5 или ниже указывает на риск возникновения возможного побочного эффекта у указанного пациента. Соответственно, настоящее изобретение относится к способу введения (режиму дозирования) биспецифичного антитела CD19×CD3 пациенту, у которого соотношение B:T клеток составляет примерно 1:5 или ниже, и указанный способ предусматривает (a) введение первой дозы указанного антитела в первый промежуток времени; и затем (b) введение второй дозы указанного антитела во второй промежуток времени, при этом указанная вторая доза превышает указанную первую дозу. В некоторых вариантах осуществления вводят третью дозу указанного антитела в третий промежуток времени. Этот режим дозирования можно использовать для способов лечения злокачественных CD19-положительных лимфоцитов или для облегчения и/или профилактики возникновения побочного эффекта, обусловленного введением указанного биспецифичного антитела. Настоящее изобретение также относится к использованию биспецифичного антитела CD19×CD3 для получения фармацевтической композиции, которую можно использовать в способе настоящего изобретения. Также в изобретении раскрыты фармацевтический набор или комплект, содержащие первую дозу и вторую дозу и, необязательно, третью дозу указанного антитела, согласно определению способов/режимов дозирования настоящего изобретения.

Для лечения рака способами, основанными на применении антител, необходим мишеневый антиген, который, чтобы быть активным, прочно связан с поверхностью раковых клеток. Связываясь с поверхностью-мишенью, антитело, если оно представляет собой биспецифичное антитело, может доставлять смертельный сигнал раковой клетке прямым способом или опосредованно, например, путем рекрутинга цитотоксической Т-клетки. При идеальном сценарии лечения мишеневый антиген присутствует на каждой раковой клетке в изобилии и доступен, а на нормальных клетках мишеневый антиген отсутствует, экранирован или представлен в значительно меньшем количестве. Эта ситуация обеспечивает основу для терапевтического окна, в котором определенное количество терапевтического средства на основе антитела эффективно поражает раковые клетки, но сберегает нормальные клетки.

Антитела представляют собой эффективное средство для лечения многих болезней, в частности рака, но вместе с тем при их введении не обязательно отсутствуют побочные эффекты. Побочные эффекты могут вызывать обратимое или необратимое изменение состояния здоровья пациента. Необходимо избегать побочных эффектов, поскольку они могут быть вредными и нежелательными. Несмотря на известную возможность лекарства вызывать побочные эффекты, при этом допускается его назначение и введение или этого нельзя избежать, поскольку лекарство обладает преимущественным терапевтическим эффектом или даже может сохранить жизнь пациенту.

В клинических исследованиях можно делать общее различие между побочными эффектами (ПЭ) и серьезными побочными эффектами (СПЭ). Более конкретно, побочные эффекты можно классифицировать по 5 уровням в соответствии с Общей терминологией критериев побочных явлений (СТСАЕ). Уровень 1 относится к слабому ПЭ, уровень 2 к умеренному ПЭ, уровень 3 к серьезному ПЭ, уровень 4 к опасному для жизни или инвалидизирующему ПЭ и, наконец, уровень 5 означает смерть, обусловленную ПЭ.

Побочный эффект, наблюдаемый при лечении антителами, представляет собой возникновение связанных с вливанием побочных эффектов, таких как синдром выброса цитокинов ("CRS"). Другими неблагоприятными побочными эффектами, которые описаны как связанные с CRS, являются слабость, рвота, тахикардия, гипертония, боль в спине, а также реакции центральной нервной системы (реакции ЦНС), такие как пароксизмы, энцефалопатия, отек мозга, асептический менингит и головная боль.

Выброс цитокинов и возникновение неврологических реакций были отмечены не только при связывании моноклональных антител с рецептором Т-клеток, но также при связывании биспецифичного одноцепочечного антитела CD19×CD3 с CD3-частью рецептора Т-клетки (под названием блинатумомаб (MT103)).

Блинатумомаб (MT103) представляет собой нацеленное на лимфому рекомбинантное биспецифичное одноцепочечное антитело CD19×CD3, которое связывается с CD19 на поверхности почти всех B-клеток и опухолевых B-клеток, и одновременно может затрагивать Т-клетки, и таким образом запускает T-клетки на уничтожение мишеневых B-клеток или опухолевых В-клеток. Блинатумомаб состоит из четырех вариабельных областей иммуноглобулина, собранных в единственную полипептидную цепь. Две из вариабельных областей образуют сайт связывания для CD19, антиген клеточной поверхности, экспрессируемый на большинстве В-клеток и опухолевых В-клеток. Другие два вариабельных домена образуют сайт связывания для комплекса CD3 на T-клетках. Блинатумомаб разработан таким образом, чтобы нацеливать T-клетки, которые в организме являются цитотоксическими или разрушающими клетки, против опухолевых клеток, и представляет собой новый терапевтический подход к лечению рака. В настоящее время проводятся клинические исследования блинатумомаба.

Как описано, например, в патенте WO 99/54440, побочные эффекты наблюдались в предыдущем исследовании блинатумомаба, который использовали для повторяемых болюсных вливаний больным с хроническим B-клеточным лимфолейкозом (B-ХЛЛ). Как показано на фигурах 19 и 20 из патента WO 99/54440, было выявлено высвобождение фактора некроза опухоли ФНО, интерлейкинов ИЛ-6 и ИЛ-8 в ответ на каждое из двух назначенных 20-минутных вливаний 3 микрограмм и 10 микрограмм упомянутого биспецифичного одноцепочечного антитела, соответственно, с выбросом цитокинов после каждого введения. Максимальный выброс цитокинов наблюдался после введения 10 микрограмм биспецифичного одноцепочечного антитела. В дополнительном клиническом исследовании, в котором пациентам со злокачественными В-клеточными опухолями вводили возрастающие дозы биспецифичного одноцепочечного антитела CD19×CD3 в виде болюсных вливаний, также наблюдались побочные эффекты. Согласно ретроспективному анализу, у 7 из 22 пациентов были выявлены ранние неврологические реакции, включающие, например, спутанность сознания, атаксию, нарушения речи или дезориентацию.

В попытках улучшения контроля указанных побочных эффектов был изменен способ введения биспецифичного одноцепочечного антитела CD19×CD3, таким образом, что его переключили от болюсного вливания на непрерывное внутривенное введение указанного антитела в течение более продолжительного периода времени. Как показано Bargou et al. (Science 321 (2008): 974-7), дозы до 0,005 миллиграммов на квадратный метр в день, которые непрерывно вводили больным с неходжкинской лимфомой на протяжении четырех недель, приводили к уничтожению в крови клеток-мишеней лимфомы. Частичный и полный регресс опухолей вначале наблюдался на уровне дозы 0,015 мг/м²/день, и регресс опухоли был выявлен у всех семерых больных, получавших лечение дозой на уровне 0,06 мг/м²/день (Bargou et al., см выше). Биспецифичное одноцепочечное антитело CD19×CD3 также вызывало устранение опухолевых клеток из костного мозга и печени. Однако, несмотря на то, что в этом исследовании (продолжающемся в настоящее время) представлены клинические доказательства концепции терапевтического потенциала использования биспецифичного одноцепочечного антитела CD19×CD3 для лечения рака крови, в ходе вышеупомянутого клинического исследования были выявлены неврологические реакции. Соответственно, поскольку блинатумомаб представляет собой очень многообещающее лекарство-кандидат для лечения неходжкинской лимфомы (НХЛ), острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ), хронического лимфобластного лейкоза (ХЛЛ) и/или лимфомы из мантийных клеток, очень желательно уменьшить или даже полностью избежать побочных эффектов при лечении пациентов с помощью биспецифичного одноцепочечного антитела CD19×CD3.

Очевидно, что трудно разработать терапевтическое средство на основе антитела CD19×CD3, которое не вызывает реакций со стороны ЦНС (центральной нервной системы), включающих неврологические реакции, или, выражаясь иначе, желательно получить терапевтические средства на основе антитела CD19×CD13 с повышенной переносимостью пациентами, то есть с уменьшенными нежелательными побочными эффектами или даже с отсутствием каких-либо нежелательных побочных эффектов, таких как реакции со стороны ЦНС.

Несмотря на то, что фармацевтические средства и способы, позволяющие более постепенно активировать Т-клеточный пул (см. WO 2007/068354), уже помогают избегать значительные неблагоприятные побочные эффекты у пациентов, получавших лечение биспецифичным одноцепочечным антителом CD19×CD3, но, к сожалению, указанные способы не могут предотвращать неврологические реакции, в частности, в случаях введения дозы антитела больше 5-10 микрограмм на квадратный метр в день (то есть 24 часа).

Таким образом, техническая проблема, лежащая в основе настоящего изобретения, состоит в разработке режимов дозирования и способов решения вышеупомянутой проблемы.

Настоящее изобретение относится к указанной потребности и, таким образом, рассматривает варианты осуществления, относящиеся к этим способам, а также к режимам дозирования для введения пациенту-человеку биспецифичного антитела CD19×CD3.

В настоящем изобретении приведены характеристики и описание этих вариантов осуществления, и они отражены в формуле изобретения.

Необходимо отметить, что согласно изобретению используемые формы единственного числа включают соответствующие формы множественного числа, если в контексте явно не указано иначе. Таким образом, например, ссылка на "реагент" включает один или больше таких разных реагентов, и ссылка на "способ" включает ссылку на известные рядовым специалистам в данной области техники эквивалентные стадии и способы, которые можно модифицировать или заменять способами, описанными в изобретении.

Все публикации и патенты, цитируемые в настоящем раскрытии, включены в него в качестве ссылки в полном объеме. При условии, если материал, включенный со ссылкой, противоречит или не согласуется с настоящим описанием, любой такой материал в описании будет обойден.

Если не указано иначе, необходимо понимать, что термин "по меньшей мере", предшествующий ряду элементов, относится к каждому элементу в ряду. Специалистам в данной области техники будет очевидно, или они смогут установить с помощью не более чем рутинных экспериментов наличие многих эквивалентов для конкретных вариантов осуществления описываемого изобретения. Предполагается, что такие эквиваленты входят в объем настоящего изобретения.

По всему тексту описания и последующей формулы изобретения, если из контекста не следует иначе, необходимо понимать, что слово "содержать" и его варианты, такие как "содержит" и "содержащий", подразумевает включение в него установленного чего-либо целого или стадии или группы из чего-либо целого или стадий, без исключения любого другого целого или стадии или группы из чего-либо целого или стадий.

В тексте настоящего описания цитируется ряд документов. Каждый из цитируемых в описании документов (включая в этот ряд все патенты, патентные заявки, научные публикации, спецификации изготовителя, инструкции и т.д.), упомянутые как выше, так и ниже, включен в изобретение путем ссылки во всей своей полноте. Ничто в изобретении не должно быть истолковано как признание, что изобретение не правомочно предшествовать такому раскрытию на основании предшествующего изобретения.

Ввиду побочных явлений, в частности явлений со стороны ЦНС, которые включают неврологические реакции, наблюдаемые при введении антител, также включающих биспецифичных антител CD19×CD3, определенно примечательным является выявленный факт, что можно вводить биспецифичное одноцепочечное антитело CD19×CD3 таким образом, чтобы оно переносилось пациентами, если его вводят по схеме дозирования согласно настоящему изобретению.

Более конкретно, по наблюдению авторов настоящего изобретения, при введении биспецифичного антитела CD19×CD3 явления со стороны ЦНС наблюдались у тех больных, у которых соотношение B:T клеток составляло примерно 1:5 или ниже. Соответственно, настоящее изобретение впервые заявляет, что низкое соотношение B:T клеток является фактором потенциально высокого риска для возникновения побочных эффектов, включающих неврологические реакции, при лечении злокачественных CD19-положительных лимфоцитов, встречающихся при лейкозах и лимфомах (см. примеры 2, 3 и 4).

В частности, авторы настоящей заявки отметили, что у больных с неходжкинской лимфомой (НХЛ) и больных с острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ) с низким соотношением B:T клеток в периферической крови существует повышенный риск развития ранней неврологической реакции. Эта неврологическая реакция встречается в основном в течение первого дня (дней) лечения с помощью биспецифичного антитела CD19×CD13. В частности, большинство неврологических реакций наблюдалось примерно через 12-120 часов после начала лечения. Эти неврологические реакции были транзиторными, полностью обратимыми и проходили без осложнений в течение от 3 до 72 часов после прекращения лечения.

Авторы изобретения сделали эти неожиданные наблюдения в разных клинических исследованиях с использованием биспецифичного антитела CD19×CD3.

В ходе изучения исследования с "краткосрочным" (болюсным) вливанием у 7 из 22 больных была выявлена ранняя неврологическая реакция. У 6 из этих 7 больных перед лечением соотношение B:T клеток было низким, а именно, соотношение клеток B:T составляло примерно 1:5 или ниже. У остальных 15 больных без неврологической реакции только у 1 больного соотношение клеток B:T было низким.

В клиническом исследовании НХЛ (см. Bargou et al., цитированную выше) лечение получали в общей сложности 39 больных до августа 2008 года. На этот момент времени было выявлено низкое соотношение B:T клеток у всех больных с неврологической реакцией, которая привела к постоянному прекращению лечения биспецифичным антителом CD19×CD3 (то есть порог соотношения B:T клеток был ниже 1:5). В частности, 5 неврологических реакций наблюдались у 10 больных с низким соотношением B:T клеток (5/10), при этом ни у одного больного с высоким соотношением B:T клеток (то есть, при соотношении B:T клеток выше 1:5) не выявлена неврологическая реакция, которая могла бы привести к постоянному прекращению лечения биспецифичным антителом CD19×CD3 (0/29).

Следующей стадией была выделена определенная когорта больных с низким соотношением B:T клеток, то есть с повышенным риском ранних неврологических реакций, для проспективного анализа изложенной теории и конкретного поиска действий по уменьшению для этих больных повышенного риска.

В соответствии с этими выделенными отдельными когортами больных с высоким риском проспективное лечение проводили у 8 больных с НХЛ (данные на июль 2009 года): 6 больных имели низкое соотношение B:T клеток, 2 больных имели высокое соотношение B:T клеток. И в этом случае ни один больной с высоким соотношением B:T клеток не проявлял неврологическую реакцию, тогда как у 3 из 6 больных с низким соотношением B:T клеток выявлена неврологическая реакция, что привело к прекращению лечения.

В целом 69 больных НХЛ, включающих больных с В-клеточным хроническим лимфобластным лейкозом (ХЛЛ) и лимфомой из мантийных клеток (ЛМК), лечили биспецифичным антителом CD19×CD3 как путем болюсного вливания, так и путем непрерывного вливания:

Неврологические реакции наблюдались у 61% больных с низким соотношением B:T клеток. Напротив, только у 2% больных с высоким соотношением B:T клеток выявлены такие неблагоприятные явления (см. следующие примеры).

В другом клиническом исследовании в фазе II исследования взрослым больным ОЛЛ вводили биспецифичное одноцепочечное антитело CD19×CD3 в дозе 15 мкг на квадратный метр поверхности тела пациента в день путем непрерывного вливания в течение по меньшей мере четырех недель. У одного из 11 больных ОЛЛ из группы высокого риска с соотношением клеток B:T ниже 1:5 была выявлена неврологическая реакция, что привело к прекращению лечения. Напротив, в группе низкого риска с соотношением клеток B:T выше 1:5 ни один из 6 больных не показал неврологическую реакцию.

Кроме того, в ретроспективном анализе 39 больных с НХЛ было установлено, что исходный уровень соотношения B-клеток к Т-клеткам (B:T) в периферической крови, составляющий от 1:5 до 1:10 или ниже, является единственным прогностическим фактором последующего возникновения неврологических ПЭ. Прогностическое значение затем было проспективно подтверждено у 8 дополнительных больных (см. пример 1).

В сумме эти данные показывают, что низкое соотношение B:T клеток, а именно, соотношение B:T клеток около 1:5 или ниже, представляют собой фактор потенциально высокого риска для возникновения побочных эффектов, включающих неврологические реакции, при лечении злокачественных CD19-положительных лимфоцитов, встречающихся при лейкозе и лимфоме, например, при НХЛ, ЛМК, ХЛЛ и ВЛЛ у больных, которые получают лечение биспецифичным антителом CD19×CD3 (см. примеры 1 и 4).

Таким образом, целью настоящего изобретения является способ, позволяющий выявлять больных, которые могут находиться в группе риска возникновения побочных эффектов при лечении биспецифичным антителом CD19×CD3. Указанный способ улучшит соблюдение приема лекарства, поскольку идентификация больных, которые составляют группу риска возникновения побочных эффектов, позволяет регулировать режим дозирования биспецифичного антитела CD19×CD3. Фактически, авторы настоящего изобретения применили выявленный ими факт, что соотношение B:T клеток около 1:5 или ниже может быть возможным фактором риска для возникновения побочных эффектов при лечении биспецифичным антителом CD19×CD3, и, в этой связи, разработали режим дозирования, который предназначен для профилактики возникновения и/или для облегчения течения этих побочных эффектов.

Соответственно, в первом аспекте настоящее изобретение относится к способу оценки (анализа) риска возникновения возможных побочных эффектов у пациента-человека, обусловленных введением биспецифичного антитела CD19×CD3 указанному пациенту, и указанный способ предусматривает определение в образце, полученном от указанного пациента, соотношения В-клеток к Т-клеткам указанного пациента, при этом соотношение около 1:5 или ниже указывает на риск возникновения возможных побочных эффектов у указанного пациента.

"Оценка (анализ) риска" означает, что способ первого аспекта настоящего изобретения направлен на оценку или анализ наличия у пациента более высокой или более низкой вероятности или возможности (то есть, соответственно, повышенного или уменьшенного риска) для возникновения побочных эффектов. Соответственно, как общеизвестно, риск не обязательно означает, что у пациента возникнут или не возникнут побочные эффекты.

В настоящем изобретении, при наличии у пациента соотношения B:T клеток около 1:5 или ниже, указанный пациент имеет (находится в состоянии) повышенный риск возможных побочных эффектов, также включающий возникновение побочного эффекта, тогда как пациент, соотношение B:T клеток у которого выше 1:5, не имеет (не находится в состоянии) риск возможных побочных эффектов, или по меньшей мере имеет (находится в состоянии) уменьшенный риск возможных побочных эффектов, также включающий возникновение побочного эффекта.

Таким образом, соотношение B:T клеток примерно 1:5 или ниже указывает на риск возникновения побочных эффектов, в то время как B:T соотношением клеток выше чем 1:5 не показательно для риска побочных эффектов.

Таким образом, термин "показатель" при его использовании в контексте способа первого аспекта настоящего изобретения, означает, что пациент имеет повышенный риск возможных побочных эффектов, если соотношение B:T клеток составляет примерно 1:5 или ниже, или имеет уменьшенный риск возможных побочных эффектов, если соотношение B:T клеток выше чем 1:5.

Понятие "побочный эффект" означает вредное и неблагоприятное воздействие, являющееся следствием применения лекарства при лечении больного биспецифичным антителом CD19×CD3. Побочный эффект можно также называть "нежелательным эффектом". Некоторые побочные эффекты возникают только в начале лечения, при увеличении дозы или прекращении лечения. Авторы изобретения отмечают, что побочный эффект, выявленный при лечении больных биспецифичным антителом CD19×CD3, возникал примерно через 12-120 часов после начала лечения и являлся обратимым.

Побочный эффект может вызывать медицинские осложнения. Авторы изобретения выявили неврологические реакции у больных при лечении биспецифичным антителом CD19×CD3. Эти неврологические реакции, если их было невозможно прекратить или избежать, приводили к несоблюдению лечения биспецифичным антителом CD19×CD3.

Вместе с тем, как упомянуто в настоящем изобретении, авторы выявили, что соотношение B:T клеток является показателем для включения пациентов в группу риска возможных неблагоприятных побочных эффектов. Более конкретно, соотношение B:T клеток около 1:5 или ниже указывает на то, что пациенты находятся в группе риска возникновения возможных побочных эффектов, тогда как соотношение B:T клеток выше чем около 1:5 указывает на то, что пациенты не относятся к группе риска или по меньшей мере имеют уменьшенный риск возникновения возможных побочных эффектов.

Как упомянуто выше, способ согласно первому аспекту настоящего изобретения предназначен для оценки (анализа) риска побочных эффектов, и риск включает оценку/анализ возможности или вероятности. Соответственно, понятие "возможный", используемое в контексте побочных эффектов, означает, что, несмотря на возможное наличие у пациента соотношения B:T клеток около 1:5 или ниже, у указанного пациента не обязательно должны возникнуть побочные эффекты.

Аналогично, несмотря на возможное наличие у пациента соотношения B:T клеток выше чем около 1:5, у этого пациента не обязательно не должны возникнуть побочные эффекты. Соответственно, понятие "возможный" подразумевает, что способ первого аспекта настоящего изобретения обеспечивает прогноз в отношении возникновения у пациента побочных эффектов, но очевидно, что невозможно обеспечить 100% прогноз безопасности, поскольку на возможность возникновения у пациента побочных эффектов могут влиять, кроме соотношения B:T клеток, такие индивидуальные факторы человека, как пол, возраст, вес, состояние питания, состояние здоровья, предыдущее лечение и т.д.

Согласно настоящему изобретению побочный эффект, предпочтительно, характеризуется неврологической реакцией (также иногда упоминаемой в изобретении как "реакция со стороны ЦНС" или "явление со стороны ЦНС", и эти термины можно эквивалентно использовать для указанной причины). Указанная неврологическая реакция представляет собой, предпочтительно, одно или больше явлений, выбираемых из группы, состоящей из: спутанности сознания, атаксии, дезориентации, дисфазии, афазии, нарушения речи, мозжечковых симптомов, тремора, апраксии, пароксизмов, больших судорожных припадков, пареза и нарушений равновесия.

Степень побочных эффектов можно измерять, например, по уровням согласно Общей терминологии критериев побочных явлений (СТСАЕ) NCI (дата публикации: 12 декабря 2003 года). Уровень относится к степени тяжести побочных эффектов. Система CTCAE v3.0 показывает уровни 1-5 с уникальными клиническими описаниями степени тяжести для каждого уровня побочных воздействий:

Уровень 1: слабые побочные эффекты.

Уровень 2: умеренные побочные эффекты.

Уровень 3: серьезные побочные эффекты.

Уровень 4: опасные для жизни или инвалидизирующие побочные эффекты.

Уровень 5: смерть пациента.

"Пациент/больной" является человеком, который будет получать лечение биспецифичным антителом CD19×CD3. Согласно настоящему изобретению предполагается/принимается, что у пациента имеются или уже имелись злокачественные положительные лимфоциты CD19 (в частности, В-клетки). В последнем случае указанному пациенту уже был поставлен диагноз наличия таких клеток. Эти злокачественные CD19-положительные лимфоциты (в частности, В-клетки) присутствуют у пациента с развивающимся лейкозом и/или лимфомой и/или уже страдающего лейкозом и/или лимфомой. Таким образом, согласно настоящему изобретению, больной нуждается в указанном лечении злокачественных CD19-положительных лимфоцитов. Предпочтительно, больной, который будет проходить лечение или лечится биспецифичным антителом CD19×CD3, подвергается диагностике (или ранее был диагностирован) согласно описанному способу первого аспекта изобретения.

Понятие "обусловленный чем-либо", используемое в контексте способа первого аспекта настоящего изобретения, означает, что побочные эффекты, которые могут возникнуть, или, возможно, не возникнут у пациента, вызваны введением биспецифичного антитела CD19×CD3. Иными словами, антитело CD19×CD3 является причиной, способной оказывать возможные побочные эффекты на больного.

Введение может происходить путем болюсного введения или непрерывного введения, и предпочтительным является непрерывное введение.

Согласно настоящему изобретению термин "образец" предполагает любой полученный от больного человека биологический образец, который содержит полинуклеотиды, или полипептиды, или их части. Биологические образцы включают жидкости организма (такие как кровь, сыворотку, плазму, мочу, слюнную жидкость, синовиальную жидкость и спинномозговую жидкость) и источники тканей с выявленными злокачественными CD19-положительными лимфоцитами. Способы получения от пациентов биоптатов тканей и жидкостей организма известны в данной области техники. Обычно в качестве источника предпочтителен биологический образец, который включает мононуклеарные клетки периферической крови (МКПК), в частности В-клетки и Т-клетки. Образец, который включает мононуклеарные клетки периферической крови (МКПК), в частности В-клетки и Т-клетки, предпочтительно, забирают из периферической крови больного человека.

Другие предпочтительные образцы представляют собой цельную кровь, сыворотку, плазму или синовиальную жидкость, и наиболее предпочтительными образцами является плазма или сыворотка. Вместе с тем, особенно предпочтительным является образец из периферической крови пациента-человека.

Понятие "соотношение B:T клеток", используемое в изобретении, относится к отношению числа В-клеток к числу Т-клеток. Это соотношение, предпочтительно, определяют в образце, взятом от пациента-человека. Предпочтительно, образец забирают из периферической крови пациента-человека. Число B-клеток или Т-клеток, например, в образце периферической крови можно определять любым способом, обычно используемым в данной области техники, например, анализом сортировки флуоресцентно-активированных клеток (FACS).

Соотношение B:T клеток, предпочтительно, составляет примерно 1:5 или ниже, включая соотношение B:T клеток около 1:6, 1:7, 1:8, 1:9, 1:10, 1:11, 1:12, 1:13, 1:14, 1:15, 1:20, 1:100, 1:200, 1:400, 1:500, 1:1000, 1:2000, 1:3000, 1:4000, 1:5000 или еще ниже, с предпочтительным соотношением 1:9, 1:10, 1:50, 1:100, 1:500, 1:1000, при этом особенно предпочтительным является соотношение 1:9.

"Определение соотношение B:T клеток" включает:

(a) определение общего количества B-клеток в образце, взятом от пациента, предпочтительно, в образце периферической крови пациента;

(b) определение общего количества T-клеток в образце, взятом от пациента, предпочтительно, в образце периферической крови пациента;

(c) вычисление соотношения числа B-клеток на стадии (a) и числа T-клеток на стадии (b) для получения соотношения B:T клеток.

Необходимо отметить, что низкое соотношение B:T клеток можно также рассматривать как высокое соотношение T:B; и наоборот. Соответственно, в этом случае необходимо изменять наоборот соотношения, приведенные в изобретении для низкого значения соотношения B:T клеток.

Напротив, уменьшенный риск возникновения возможных побочных эффектов при введении биспецифичного антитела CD19×CD3 выявляют у больных, показывающих соотношение B:T клеток выше чем около 1:5 (предпочтительно, 1:9), включая в эти показатели соотношение B:T клеток выше чем около 1:4, 1:3, 1:2, 1:1, 2:1, 3:1, 4:1, 5:1, 6:1, 7:1, 8:1, 9:1, 10:1 или выше.

Соответственно, настоящее изобретение также предусматривает способ оценки (анализа) риска возникновения возможных побочных эффектов у пациента-человека, обусловленных введением биспецифичного антитела CD19×CD3 указанному пациенту, и этот способ предусматривает определение в образце указанного пациента соотношения В-клеток к Т-клеткам указанного пациента, при этом соотношение выше чем около 1:5 (предпочтительно, 1:9) указывает на уменьшенный риск возникновения возможных побочных эффектов у указанного пациента.

При наблюдении пациентов с повышенным риском возможных побочных эффектов, соотношение B:T клеток у которых составляет около 1:5 или ниже, авторы изобретения разработали концепцию, позволяющую лечить этих пациентов биспецифичным антителом CD19×CD3. Принимая это во внимание, было выяснено, что T-клетки таких пациентов с высокой степенью риска должны быть предварительно адаптированы или частично активированы путем введения низкой дозы антитела в течение нескольких дней перед возможным наращиванием дозы. Таким образом, было обнаружено, что значительное снижение дозы, вводимой за единицу времени, потенциально увеличивает переносимость указанного антитела у пациентов с высокой степенью риска.

По сути, авторы изобретения выявили, что "адаптация" пациента к биспецифичному антителу CD19×CD3 перед лечением биспецифичным антителом CD19×CD3 является полезной для профилактики побочного эффекта (в частности, нежелательных неврологических реакций) (см. примеры 6 и 7).

Таким образом, настоящее изобретение во втором аспекте относится к способу (режиму дозирования) для введения биспецифичного антитела CD19×CD3 пациенту-человеку, у которого соотношение B:T клеток составляет около 1:5 или ниже, и указанный способ предусматривает:

(a) введение первой дозы указанного антитела в течение первого периода времени; и затем

(b) введение второй дозы указанного антитела в течение второго периода времени;

при этом указанная вторая доза превышает указанную первую дозу.

Подразумевается, что в контексте настоящего изобретения термин "способ" включает "режим дозирования", используемый в способе настоящего изобретения.

В контексте настоящего изобретения "введение биспецифичного антитела CD19×CD3" или "вводить биспецифичное антитело CD19×CD3" или любая другая грамматическая форма этого выражения подразумевает, что антитело CD19×CD3 находится в виде фармацевтической композиции, необязательно содержащей фармацевтически приемлемый носитель. Соответственно, необходимо подразумевать, что фармацевтическую композицию, содержащую биспецифичное антитело CD19×CD3, вводят пациенту-человеку.

Термин "введение" во всех его грамматических формах означает введение биспецифичного антитела CD19×CD3 (в виде фармацевтической композиции) как в виде единственного терапевтического средства, так и в комбинации с другим терапевтическим средством.

Таким образом, предусмотрено, что фармацевтическая композиция по настоящему изобретению применяется в подходах сочетанной терапии, то есть при введении больному совместно с другими медикаментами или лекарственными средствами, например с другими лекарствами для лечения злокачественных CD19-положительных лимфоцитов и/или с любым другим терапевтическим средством, которое может быть полезным в контексте способов настоящего изобретения.

Например, если способы настоящего изобретения проводят для лечения B-клеточного острого лимфобластного лейкоза или агрессивной НХЛ, может быть полезным сочетание этих способов с интратекальной химиотерапией с целью уничтожения в ЦНС B-клеток -мишеней. Например, интратекальную химиотерапию можно проводить перед введением биспецифичного одноцепочечного антитела CD19×CD3 согласно описанным в изобретении способам.

Введение упомянутой в описании фармацевтической композиции, предпочтительно, осуществляют путем внутривенного введения. Из этого следует, что в способах настоящего изобретения путем введения на стадии (a) и/или путем введения на стадии (b) являются внутривенное введение. Введение может происходить в виде болюсного вливания или постоянного (непрерывного) вливания, и предпочтительным способом является непрерывное вливание.

Введение биспецифичного антитела CD19×CD3 (например, в виде фармацевтической композиции) может представлять собой болюсное вливание или постоянное вливание, или, как иногда также используемое в настоящем изобретении, непрерывное вливание, при этом предпочтительным путем является постоянное или непрерывное введение. Постоянное вливание относится к способу введения, которое по существу происходит без перерыва. "По существу без перерыва" включает постоянное введение обычно без непрерываемого потока или пространственного расширения.

В некоторых вариантах осуществления указанная первая доза не является терапевтически активной, то есть представляет собой субтерапевтическую дозу. Без строгой связи считается, что для целей настоящего изобретения доза 5 мкг/м²/день или ниже является субтерапевтической.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения вторая доза является терапевтически активной.

Под "терапевтически эффективным количеством" или "терапевтически активным количеством" подразумевается доза биспецифичного антитела CD19×CD3, которая оказывает терапевтические действия, для которых осуществляется ее введение.

Точная доза зависит от цели лечения и может быть установлена специалистом в данной области техники с использованием известных методик. Как известно в данной области техники и описано выше, может быть необходимым регулировать дозу в зависимости от возраста, массы тела, общего состояния здоровья, пола, питания, лекарственного взаимодействия и степени тяжести состояния, и доза будет установлена при рутинном экспериментировании специалиста в данной области техники. Терапевтический эффект соответствующих способов или стадий способа настоящего изобретения дополнительно можно выявлять всеми общепринятыми способами и подходами, с помощью которых будет обнаружен терапевтический эффект. Например, предусмотрено выявление терапевтического эффекта посредством хирургической резекции или биопсии пораженной ткани/органа, которые соответственно обнаруживают иммуногистохимическим (ИГХ) анализом или сопоставимыми иммунологическими способами. Альтернативно, также предполагается, что опухолевые маркеры в сыворотке пациента (в случае их присутствия) выявляют для диагностики эффективности или неэффективности терапевтического подхода. Дополнительно или альтернативно, также можно оценить общее состояние соответствующего пациента (физическое состояние, самочувствие, ослабление болезни, которая обусловлена опухолью, и т.д.), что также поможет практикующему специалисту оценить наличие терапевтического эффекта. Специалисту в данной области техники известны многочисленные другие способы, которые позволят ему или ей наблюдать терапевтический эффект соединений настоящего изобретения.

В третьем аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения злокачественных CD19-положительных лимфоцитов у пациента-человека, имеющего соотношение B:T клеток около 1:5 или ниже, и указанный способ предусматривает:

(a) введение первой дозы биспецифичного антитела CD19xCD3 в течение первого промежутка времени; и затем

(b) введение второй дозы указанного антитела за второй промежуток времени;

при этом указанная вторая доза превышает указанную первую доза.

При лейкозе и/или при лимфоме выявляют злокачественные CD19-положительные лимфоциты (в частности, В-клетки). Соответственно, CD19-положительные лимфоциты являются преимущественными клетками при лимфоме или лейкозе.

Термин "злокаче