Производное 23-ин-витамина d3

Производное 23-ин-витамина d3

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к производному витамина D₃ или его медицински приемлемому сольвату, которые применимы в качестве лекарственного средства, к терапевтическому средству с использованием их, к фармацевтической композиции, включающей их, и к промежуточному соединению для их получения. Конкретнее, настоящее изобретение относится к производному 23-ин-витамина D₃ или его медицински приемлемому сольвату, к фармацевтической композиции, включающей их, к включающему их в качестве активного ингредиента терапевтическому средству против остеопороза, злокачественной опухоли, псориаза, гиперпаратиреоза, воспалительного заболевания дыхательных путей, ревматоидного артрита, сахарного диабета, гипертензии, алопеции, акне или дерматита, и к промежуточному соединению для их получения.

Уровень техники

Активированные производные витамина D₃ регулируют ремоделирование костной ткани, состоящее из образования костной ткани и резорбции костной ткани, и показывают эффект повышения плотности костной ткани. Таким образом, они используются как ценные терапевтические средства в случае остеопороза. Однако такие активные производные витамина D₃, например, 1α,25-дигидроксивитамин D₃, не всегда показывают удовлетворительное повышение плотности минерального костного вещества. Когда дозу повышают для того, чтобы повысить плотность минерального костного вещества, происходит повышение уровня кальция в сыворотке, а не дополнительное повышение плотности минерального костного вещества, что вызывает повышение сывороточного показателя кальция в на 1 мг/л или более - величину, рассматриваемую как один из критериев, клинически нежелательных. Так, иногда имеют место случаи, когда достаточного эффекта повышения плотности минерального костного вещества не получают (международная публикация №WO 01/62723). Поэтому весьма желательно производное витамина D₃, которое проявляет сильное действие повышения плотности минерального костного вещества без возрастания показателя кальция в сыворотке. До сих пор синтезировано множество производных витамина D₃ в попытке получить такое производное, но пока еще не найдено какое-либо производное, которое имеет удовлетворительный профиль.

Раскрытие изобретения

Целью настоящего изобретения является новое производное витамина D₃ или его медицински приемлемый сольват, проявляющие желательное фармакологическое действие, отделенное от эффекта возрастания содержания кальция в крови.

Кроме того, целью настоящего изобретения является терапевтическое средство против остеопороза, злокачественной опухоли, псориаза, гиперпаратиреоза, воспалительного заболевания дыхательных путей, ревматоидного артрита, сахарного диабета, гипертензии, алопеции, акне или дерматита, включающее в качестве активного ингредиента производное витамина D₃ или его медицински приемлемый сольват.

Кроме того, целью настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, включающая производное витамина D₃ или его медицински приемлемый сольват.

И также целью настоящего изобретения является промежуточное соединение производного витамина D₃, подходящее для получения производного витамина D₃ или его медицински приемлемого сольвата.

Авторы настоящего изобретения провели кропотливое исследование для того, чтобы решить вышеуказанные проблемы, и в результате осуществили описанное далее изобретение.

Иными словами, настоящее изобретение относится к производному витамина D₃, представленному приведенной далее формулой (1), или его медицински приемлемому сольвату.

где

R₁ представляет собой атом водорода, алкильную группу с 1-6 атомами углерода, алкилкарбонилоксиалкильную группу, причем каждый алкил имеет 1-6 атомов углерода, или арилкарбонилоксиалкильную группу, причем арил имеет 6-10 атомов углерода и алкил имеет 1-6 атомов углерода; R₂ представляет собой атом водорода или алкильную группу с 1-6 атомами углерода или вместе с другим R₂ и атомом углерода, с которым они связаны, может образовывать циклическую алкильную группу с 3-6 атомами углерода; R₃ представляет собой алкильную группу с 1-6 атомами углерода или вместе с другим R₃ и атомом углерода, с которым они связаны, может образовывать циклическую алкильную группу с 3-6 атомами углерода; Х представляет собой атом кислорода или метиленовую группу; и n равен целому числу 1 или 2.

Кроме того, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей производное витамина D₃, представленное приведенной выше формулой (1), или его медицински приемлемый сольват и фармацевтически приемлемый носитель.

Кроме того, настоящее изобретение относится к терапевтическому средству против одного или нескольких заболеваний, выбранных из группы, включающей остеопороз, злокачественную опухоль, псориаз, гиперпаратиреоз, воспалительное заболевание дыхательных путей, ревматоидный артрит, сахарный диабет, гипертензию, алопецию, акне или дерматит, включающему в качестве активного ингредиента производное витамина D₃, представленное приведенной выше формулой (1), или его медицински приемлемый сольват.

И, кроме того, настоящее изобретение относится к промежуточному соединению для производного витамина D₃, представленному формулой (2)

,

где

R₂, X и n являются такими же, как в приведенной выше формуле (1); R₄ представляет собой R₁ в приведенной выше формуле (1), метоксим стильную группу, метоксиэтоксиметильную группу, тетрагидрофуранильную группу, тетрагидропиранильную группу или бензилоксиметильную группу; и R₅ представляет собой защитную группу для гидроксильной группы.

Согласно настоящему изобретению, предлагается новое производное витамина D₃ или его медицински приемлемый сольват, которые эффективны для лечения различных заболеваний, представленных остеопорозом, злокачественной опухолью, псориазом, гиперпаратиреозом, воспалительным заболеванием дыхательных путей, ревматоидным артритом, сахарным диабетом, гипертензией, алопецией, акне, дерматитом и т.п. Кроме того, получаемое промежуточное соединение, представленное приведенной выше формулой (2), применимо для получения производного витамина D₃ и т.п. по настоящему изобретению.

Осуществление изобретения

Термины, используемые в настоящем изобретении, определяются так, как описано далее.

«Алкильная группа» обозначает линейную, разветвленную или циклическую алифатическую углеводородную группу. Алкильная группа с 1-6 атомами углерода конкретно включает, например, метильную группу, этильную группу, изобутильную группу, трет-бутильную группу, пентильную группу, изопентильную группу, гексильную группу, циклопропильную группу, циклопропилметильную группу и циклогексильную группу.

«Алкилкарбонилоксиалкильная группа» конкретно включает трет-бутилкарбонилоксиметильную группу.

«Арилкарбонилоксиалкильная группа» конкретно включает фенилкарбонилоксиметильную группу.

В приведенной выше формуле (1) R₁ представляет собой атом водорода, алкильную группу с 1-6 атомами углерода, алкилкарбонилоксиалкильную группу, причем каждый алкил имеет 1-6 атомов углерода, или арилкарбонилоксиалкильную группу, причем арил имеет 6-10 атомов углерода и алкил имеет 1-6 атомов углерода. Из них предпочтительными являются атом водорода, метильная группа, этильная группа, пропильная группа, изопропильная группа или трет-бутильная группа; и особенно предпочтительны атом водорода или изопропильная группа. Как алкилкарбонилоксиалкильная группа предпочтительной является трет-бутилкарбонилоксиметильная группа. Кроме того, предпочтительной в качестве арилкарбонилоксиалкильной группы является фенилкарбонилоксиалкильная группа.

В приведенной выше формуле (1) R₂ представляет собой атом водорода или алкильную группу с 1-6 атомами углерода или вместе с другим R₂ и атомом углерода, с которым они связаны, может образовывать циклическую алкильную группу с 3-6 атомами углерода. Из них R₂ предпочтительно представляет собой атом водорода или метильную группу; или, когда R₂ вместе с другим R; и атомом углерода, с которым они связаны, образует циклоалкильную группу, предпочтительной является циклопропильная группа.

В приведенной выше формуле (1) R₃ представляет собой алкильную группу с 1-6 атомами углерода или вместе с другим R₃ и атомом углерода, с которым они связаны, может образовывать циклическую алкильную группу. В качестве алкильной группы с 1-6 атомами углерода предпочтительными являются метальная группа и этильная группа. Кроме того, когда R₃ вместе с другим R₃ и атомом углерода, с которым они связаны, образует циклоалкильную группу, предпочтительной является циклопентильная группа.

Кроме того, в приведенной выше формуле (1) Х представляет собой атом кислорода или метиленовую группу.

Кроме того, в приведенной выше формуле (1) n равен целому числу 1 или 2, где особенно предпочтительно, n равен 1.

В качестве предпочтительного конкретного примера производного витамина D₃ по настоящему изобретению, представленного формулой (1), можно упомянуть соединения, указанные в следующей далее таблице.

Таблица 1
Соединение №	R1	R2	R3	Х	n
C-1	Атом водорода	Атом водорода	Метальная группа	Атом кислорода	1
С-2	Метальная группа	Атом водорода	Метальная группа	Атом кислорода	1
С-3	Этильная группа	Атом водорода	Метальная группа	Атом кислорода	1
С-4	Пропильная группа	Атом водорода	Метальная группа	Атом кислорода	1
С-5	Изопропильная группа	Атом водорода	Метальная группа	Атом кислорода	1
С-6	трет-Бутильная	Атом водорода	Метальная	Атом кислорода	1

	группа		группа
C-7	трет-Бутилкарбонил-оксим стильная группа	Атом водорода	Метильная группа	Атом кислорода	1
С-8	Фенилкарбонил-оксиметильная группа	Атом водорода	Метильная группа	Атом кислорода	1
D-1	Атом водорода	Атом водорода	Метильная группа	Метиленовая группа	1
D-2	Метильная группа	Атом водорода	Метильная группа	Метиленовая группа	1
D-3	Этильная группа	Атом водорода	Метильная группа	Метиленовая группа	1
D-4	Пропильная группа	Атом водорода	Метильная группа	Метиленовая группа	1
D-5	Изопропильная группа	Атом водорода	Метильная группа	Метиленовая группа	1
D-6	трет-Бутильная группа	Атом водорода	Метильная группа	Метиленовая группа	1
Е-1	Атом водорода	Циклопропил	Метильная группа	Атом кислорода	1
Е-2	Метильная группа	Метильная группа	Метильная группа	Атом кислорода	1
F-1	Атом водорода	Атом водорода	Этильная группа	Атом кислорода	1
F-2	Атом водорода	Атом водорода	Циклопентил	Атом кислорода	1

При необходимости производное витамина Ds по настоящему изобретению можно превратить в медицински приемлемый сольват. Такой растворитель включает воду, метанол, этанол, 1-пропанол, 2-пропанол, бутанол, трет-бутанол, ацетонитрил, ацетон, метилэтилкетон, хлороформ, этилацетат, диэтиловый эфир, трет-бутилметиловый эфир, бензол, толуол, ДМФА, ДМСО и подобные растворители. В особенности как предпочтительные растворители можно упомянуть воду, метанол, этанол, 1-пропанол, 2-пропанол, ацетонитрил, ацетон, метилэтилкетон и этилацетат.

Кроме того, R₅ в приведенной выше формуле (2) представляет собой защитную группу для гидроксильной группы. Защитная группа для гидроксильной группы включает метоксиметильную группу, ацильную группу с 1-3 атомами углерода (указанное число атомов углерода включает углерод карбонила), триметилсилильную группу, триэтилсилильную группу, трет-бутилдиметилсилильную группу, трет-бутилдифенилсилильную группу- и подобные группы. Из них как предпочтительные примеры можно назвать триэтилсилильную группу и трет-бутилдиметилсилильную группу.

Кроме того, R₄ в приведенной выше формуле (2) представляет собой R₁ в приведенной выше формуле (1) или представляет собой метоксиметильную группу, метоксиэтоксиметильную группу, тетрагидрофуранильную группу, тетрагидропиранильную группу или бензилоксиметильную группу. Из них предпочтительными являются метильная группа, этильная группа, пропильная группа, изопропильная группа; или трет-бутильная группа, трет-бутилкарбонилоксиметильная группа, фенилкарбонилоксиалкильная группа или бензилоксиметильная группа.

Кроме того, в приведенной выше формуле (2) n равен целому числу 1 или 2, при этом особенно предпочтительный n равен 1.

Синтез производного витамина D₃, представленного приведенной выше формулой (1), можно выполнить любым способом, но можно осуществить, например, так, как описано на следующей далее схеме 1. Иными словами, после того, как соединение (2) и соединение (3) подвергают реакции сочетания, группу, защищающую гидроксильную группу, удаляют, и при необходимости сложноэфирную группу гидролизуют, и получают целевой материал (1).

Схема 1

В формулах на приведенной выше схеме реакции R₁-R₅ в соединении (1) и соединении (2) являются такими же, как в приведенных выше формулах (1) и (2). Кроме того, в формулах на приведенной выше схеме реакции R₃ в соединении (3) являются такими же, как в приведенной выше формуле (1). Кроме того, OPG в соединении (3) представляет собой защищенную гидроксильную группу. Конкретно защитная группа включает триметилсилильную группу, триэтилсилильную группу и метоксиметильную группу.

Когда на приведенной выше схеме 1 R₂ представляет собой атом водорода, соединение (2) можно синтезировать из ен-инового соединения (4) согласно следующей далее схеме 2, причем ен-иновое соединение (4) описано, например, в литературе (Takayama et al., «Vitamin D Analog in Cancer Prevention and Therapy», Recent Results in Cancer Research, Vol.164, Springer, pp.289-317, 2003; и т.п.). Иными словами, путем селективного удаления защитной группы (трет-бутилдиметилсилильной группы - группы TBS) из первичной гидроксильной группы (4) получают соединение (5). Затем гидроксильную группу (5) окисляют до карбоксильной группы, которую впоследствии этерифицируют, и получают нужное соединение (2) (R₂=TBS).

Схема 2

Между тем, когда на приведенной выше схеме 1 R₃ представляет собой метальную группу, соединение (3) можно синтезировать так, как описано на следующей далее схеме 3.

Иными словами, соединение (3) можно получить бромметилированием соединения (6), причем последнее соединение описано в литературе (например, в патенте США №4804502).

Схема 3

Кроме того, из производных витамина D₃, представленных приведенной выше формулой (1), соединение, в котором R₂ представляет собой атом водорода, кроме как по описанной выше схеме 1, также можно синтезировать согласно способу, показанному на приведенной далее схеме 4. Иными словами, в соединение (5) на схеме 2 вводят защитную пивалоильную группу, и получают соединение (7), которое подвергают сочетанию с соединением (3) на схеме 1, и удаляют группу, защищающую гидроксильную группу на конце заместителя, присоединенного в положении 2 цикла А, и получают соединение (8).

Гидроксильную группу полученного соединения окисляют до карбоновой кислоты, и наконец, все группы, защищающие гидроксильные группы, удаляют и получают соединение (1) (R₂=Н).

Схема 4

Кроме того, когда на приведенной выше схеме 1 R₂ является замещенным, например, когда R₂ в соединении (2) образует циклоалкильную группу вместе с другим R₂ и атомом углерода, с которым они связаны, соединение (10) получают эпоксидированием коммерческого 4,6-O-бензилиден-α-O-метилглюкопиранозида (9), который используют в качестве исходного материала, и затем осуществляют раскрытие цикла эпоксида в щелочной среде таким же способом, как ен-инового соединения (4), описанного в литературе (Takayama et al., «Vitamin D Analog in Cancer Prevention and Therapy», Recent Results in Cancer Research, Vol. 164, Springer, pp.289-317, 2003; и т.п.). После получения соединения (11) путем защиты гидроксильных групп соединения (10), осуществляют раскрытие бензилиденового цикла и далее восстановление 1-положения глюкозы, и получают соединение (12). Затем получают эпоксид из диольной части, и получают соединение (13), после чего следует взаимодействие эпоксида с ацетиленом с образованием соединения (14), имеющего введенную тройную связь. Защищая подходящим образом гидроксильные группы, можно получить соединение (15). Путем сочетания соединения (15) и цикла CD промежуточного соединения (3), описанного на схеме 1, и селективного удаления защитной группы получают соединение (16). Далее, путем окисления первичной гидроксильной группы до карбоксильной и последующего удаления защитных групп из гидроксильных групп можно получить нужное соединение (1).

Схема 5

Терапевтическое средство против остеопороза и т.п., включающее в качестве активного ингредиента производное витамина D₃ или его медицински приемлемый сольват по настоящему изобретению, получают с использованием носителя, наполнителя и других добавок, обычно используемых в композициях лекарственных средств. Носитель и наполнитель для лекарственного препарата могут быть твердыми или жидкими и включают, например, лактозу, стеарат магния, крахмал, тальк, желатин, агар, аравийскую камедь, оливковое масло, сезамовое масло, масло какао, этиленгликоль и т.п.; и другие обычно используемые материалы. Тип введения может быть или пероральным введением посредством таблеток, пилюль, капсул, гранул, порошка, жидкостей и т.п.; или парентеральным введением посредством инъекций, таких как внутривенная инъекция, внутримышечная инъекция и т.п., суппозиториев, трансдермальных лекарственных средств и т.п.

В терапевтическом средстве по настоящему изобретению терапевтически эффективное количество активного ингредиента изменяется в зависимости от способа введения, возраста и пола пациента и степени заболевания. Однако оно, как правило, составляет примерно 0,01-10 мкг/сутки, и число введений, как правило, составляет 1-3 раз/сутки или 1-3 раз/неделя. Таким образом, предпочтительно получают композицию, удовлетворяющую таким условиям.

Примеры

Далее настоящее изобретение будет описываться подробнее с обращением к примерам. Однако следует иметь в виду, что не предполагается ограничение ими настоящего изобретения. Кроме того, в настоящем изобретении используются следующие аббревиатуры:

TBS = трет-бутилдиметилсилильная группа;

TES = триэтилсилильная группа;

TESCl = хлортриэтилсилан;

TMS = триметилсилильная группа;

TMSCl = хлортриметилсилан;

Piv = пивалоильная группа;

PivCl = пивалоилхлорид;

TBAF = фторид тетрабутиламмония;

CSA = (+/-)-камфор-10-сульфоновая кислота;

PDC = дихромат пиридиния;

TBSOTf = трет-бутилдиметилсилилтрифторметансульфонат;

DIBAL = гидрид дибутилалюминия;

ДМФА = N,N-диметилформамид;

ТГФ = тетрагидрофуран;

TsCl = п-толуолсульфонилхлорид; и

Ts = п-толуолсульфонил.

Пример 1

Получение (5Z,7Е)-(1R,2S,3R,20R)-2-(2-карбоксиэтокси)-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триола (соединение С-1)

(1) Соединение А-1 (2,29 г, 4,11 ммоль), известное из литературы (например, из Kittaka et al., J. Org. Chem., 69, 7463-7471 (2004)), растворяют в этаноле (20 мл), к раствору при охлаждении льдом добавляют (+/-)-камфор-10-сульфоновую кислоту (954 мг, 4,11 ммоль), и смесь перемешивают при 0°C в течение 1 часа. Реакцию обрывают путем добавления насыщенного водного раствора гидрокарбоната натрия, и смесь разбавляют этилацетатом. Смесь промывают водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия, и органический слой сушат над сульфатом натрия. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 9/1), и получают соединение А-2 (1,64 г, выход 90%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 5,96-5,88 (1Н, м), 5,27-5,21 (2Н, м), 4,29 (1Н, дд, J=6,8, 3,9 Гц), 3,88-3,72 (5Н, м), 3,45 (1Н, дд, J=5,4, 4,1 Гц), 3,00 (1Н, т, J=6,0 Гц), 2,50-2,46 (1Н, м), 2,38-2,33 (1Н, м), 2,01 (1Н, т, J=2,6 Гц), 1,85-1,68 (2Н, м), 0,91 (9Н, с), 0,91 (9Н, с), 0,10 (9Н, с),0,07(3Н, с).

(2) Соединение А-2 (1,0 г, 2,26 ммоль), полученное в (1), растворяют в пиридине (10 мл), и после добавления пивалоилхлорида (0,69 мл, 5,65 ммоль) при 0°C, реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре. К смеси добавляют безводный метанол (3 мл), и смесь перемешивают при комнатной температуре еще в течение 30 минут.

Добавляют толуол, и смесь концентрируют при пониженном давлении. К полученному остатку добавляют этилацетат, смесь промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, и органический слой сушат над безводным сульфатом магния. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 9/1), и получают соединение А-3 (1,072 г, выход 90%).

¹Н-ЯМР (CDCl) δ: 5,95 (1Н, ддд, J=17,0, 11,0, 6,0 Гц), 5,21 (1Н, ддд, J=17, 2,0,1,0 Гц), 5,14 (1Н, ддд, J=11,0, 2,0, 1,0 Гц), 4,32-4,28 (1Н, м), 4,18-4,10 (2Н, м), 3,86 (1Н, к, J=5,6 Гц), 3,81-3,74 (1Н, м), 3,68-3,60 (1Н, м), 3,39 (1Н, дд, J=5,4, 3,4 Гц), 2,49 (1Н, дк, J=17,0, 2,7 Гц), 2,35 (1Н, дк, J=16,9, 2,8 Гц), 1,96 (1Н, т, J=2,7 Гц), 1,87 (2Н, дт, J=14,0, 7,0 Гц), 1,19 (9Н, с), 0,90 (9Н, с), 0,89 (9Н, с), 0,10 (3Н, с), 0,08 (3Н, с), 0,07 (5Н, с), 0,03 (3Н, с).

(3) Бромид (брометил)трифенилфосфония (1,25 г, 2,87 ммоль) растворяют в тетрагидрофуране (7 мл), и раствор охлаждают до 0°C в атмосфере азота. К раствору добавляют бис(триметилсилил)амид натрия (1,0 М раствор в тетрагидрофуране, 2,90 мл, 2,87 ммоль), и смесь перемешивают при охлаждении льдом в течение 30 минут. Реакционную смесь охлаждают до -78°C, и к ней добавляют раствор соединения В-1 (200 мг, 0,574 ммоль), растворенное в тетрагидрофуране (1,5 мл), причем указанное соединение известно из литературы (например, из Uskokovic et al., патент США №4804502). После перемешивания при -78°C в течение 1 часа смесь еще в течение 1 часа перемешивают при 0°C. К реакционной смеси добавляют силикагель (2,5 г), и после энергичного перемешивания при комнатной температуре в течение 10 минут смесь фильтруют через целит. Полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении, остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 9/1), и получают соединение В-2 (161 мг, выход 67%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 5,65 (1Н, с), 2,90-2,86 (1Н, м), 2,28-1,24 (20Н, м), 1,08 (3Н, д, J=6,3 Гц), 0,58 (3Н, с), 0,18 (9Н, с).

(4) Соединение В-2 (1,2 г, 2,82 ммоль), полученное в (3), растворяют в тетрагидрофуране (10 мл), к раствору добавляют фторид тетрабутиламмония (1 М раствор в тетрагидрофуране, 4,23 мл, 4,23 ммоль), и смесь перемешивают при 50°c в течение 30 минут. Добавляют этилацетат, смесь промывают водой, и органический слой сушат над безводным сульфатом магния. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, и полученный остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 19/1). Очищенный материал растворяют в безводном пиридине (10 мл), и раствор охлаждают до 0°C в атмосфере азота. К раствору добавляют хлортриэтилсилан (0,944 мл, 5,70 ммоль), и смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 2,5 часов. Реакционную смесь охлаждают до 0°C, и после добавления насыщенного водного раствора хлорида аммония и воды выполняют экстракцию толуолом. Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушат над безводным сульфатом магния. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток очищают хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 99/1), и получают соединение В-3 (783 мг, выход 88%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 5,65 (1Н, с), 2,92-2,85 (1Н, м), 2,23 (1Н, дд, J=16,5, 3,4 Гц), 2,07-1,24 (19Н, м), 1,08 (3Н, д, J=6,6 Гц), 0,96 (9Н, т, J=7,9 Гц), 0,66 (6Н, к, J=7,9 Гц), 0,57 (3Н, с).

(5) Соединение В-3 (783 мг, 1,67 ммоль), полученное в (4), и соединение А-3 (733 мг, 1,39 ммоль), полученное в (2). растворяют в смеси безводный толуол/триэтиламин (1/1, 11,1 мл), к полученной смеси добавляют тетракис(трифенилфосфин)палладий (289 мг, 0,25 ммоль), и смесь перемешивают в атмосфере азота при 105°C в течение 2 часов. После охлаждения до комнатной температуры к смеси добавляют диамин-силикагель (производство Fuji Silysia Chemical Ltd., 6 г) и н-гексан (20 мл), и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем смесь фильтруют с использованием этилацетата, полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении, и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 100/0 → 95/5). Полученный очищенный материал безводном тетрагидрофуране (5,5 мл) и безводном метаноле (4,6 мл), к раствору добавляют раствор метоксида натрия в метаноле (0,91 мл, 5,46 ммоль), и смесь кипятят с обратным холодильником в течение 1 часа. Добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония, и смесь концентрируют при пониженном давлении. К полученному остатку добавляют этилацетат, смесь промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, и органический слой сушат над безводным сульфатом магния. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток очищают хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 100/0 → 50/50), и получают соединение АВ-1 (609 мг, выход 67%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 6,18 (1Н, д, J=11,2 Гц), 6,02 (1Н, д, J=11,2 Гц), 5,30 (1Н, ушс), 5,00 (1Н, ушс), 4,46 (1Н, ушс), 4,05 (1Н, м), 3,88-3,69 (4Н, м), 3,36 (1Н, ушс), 2,94 (1Н, ушс), 2,83-2,77 (1Н, м), 2,62-2,56 (1Н, м), 2,24 (1Н, дд, J=16,5, 3,4 Гц), 2,10 (1Н, дд, J=13,9, 4,4 Гц), 2,06-1,21 (21Н, м), 1,07 (3Н, д, J=6,6 Гц), 0,96 (9Н, т, J=7,9 Гц), 0,93 (9Н, с), 0,87 (9Н, с), 0,67 (6Н, к, J=7,9 Гц), 0,55 (3Н, с), 0,10 (3Н, с), 0,10 (3Н, с), 0,08 (3Н, с), 0,07 (3Н, с).

(6) Соединение АВ-1 (427 мг, 0,514 ммоль), полученное в (5), растворяют в безводном дихлорметане (5,2 мл), и раствор охлаждают до 0°C. Затем добавляют реагент Десса-Мартина (523 мг, 1,23 ммоль), и после перемешивания при охлаждении льдом в течение 2 часов смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 1 часа. К смеси добавляют насыщенный водный раствор тиосульфата натрия и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, и смесь экстрагируют дихлорметаном. Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток растворяют в трет-бутаноле (21 мл), к раствору добавляют тетрагидрофуран (37 мл) и 2-метил-2-бутен (6,47 мл), и смесь охлаждают на льду. Добавляют водный раствор (7,3 мл) гипохлорита натрия (чистота 80%, 580 мг, 5,14 ммоль) и дигидрат дигидрофосфата натрия (400 мг, 2,57 ммоль), и смесь перемешивают при охлаждении льдом в течение 45 минут. К смеси добавляют насыщенный водный раствор тиосульфата натрия и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, и смесь экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушат над безводным сульфатом натрия. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток очищают хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 100/0 → 80/20), и получают соединение АВ-2 (341 мг, выход 78%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 6,22 (1Н, д, J=11,2 Гц), 6,00 (1Н, д, J=11,2 Гц), 5,27 (1Н, ушс), 4,99 (1Н, ушс), 4,45 (1Н, ушс), 4,07 (1Н, м), 3,91 (2Н, т, J=6,1 Гц), 3,36 (1Н, ушс), 2,84-2,77 (1Н, м), 2,64 (2Н, д, J=6,1, 1,5 Гц), 2,60-2,53 (1Н, м), 2,24 (1Н, дд, J=16,5, 3,4 Гц), 2,13 (1Н, дд, J=13,9, 5,4 Гц), 2,07-1,21 (19Н, м), 1,07 (3Н, д, J=6,3 Гц), 0,96 (9Н, т, J=7,9 Гц), 0,90 (9Н, с), 0,87 (9Н, с), 0,67 (6Н, к, J=7,9 Гц), 0,55 (3Н, с), 0,09 (3Н, с), 0,09 (6Н, с), 0,07 (3Н, с).

(7) Соединение АВ-2 (140 мг, 0,165 ммоль), полученное в (6), растворяют в ацетоне (1,65 мл), и раствор охлаждают до 0°C. Затем добавляют разбавленный раствор (1,65 мл) хлороводородной кислоты (6 N, 0,332 мл) в ацетоне, и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 часов. К смеси добавляют н-гексан (3,3 мл), и смесь предварительно очищают хроматографией на силикагеле (н-гексан/ацетон = 1/1) и тонкослойной хроматографией на силикагеле (н-гексан/ацетон = 4/5) и дополнительно очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (А = 0,1% муравьиной кислоты/1% метанола/4% ацетонитрила/вода; В = 0,1% муравьиной кислоты/5% воды/19% метанола/ацетонитрил; 0-2 мин: В=20%, 2-20 мин: В=20% → 98%, 20-25 мин: В=98%, 25-30 мин: В=20%), и получают соединение С-1 (34,9 мг, выход 42%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 6,42 (1Н, д, J=11,2 Гц), 6,00 (1Н, д, J=11,2 Гц), 5,39 (1Н, д, J=1,9 Гц), 5,09 (1Н, д, J=1,9 Гц), 4,50 (1Н, д, J=2,9 Гц), 4,36-3,58 (6Н, м), 3,35 (1Н, дд, J=8,1, 3,2 Гц), 2,86-2,79 (1Н, м), 2,72-2,57 (3Н, м), 2,29-2,19 (2Н, м), 2,04-1,20 (19Н, м), 1,06 (3Н, д, J=6,6 Гц),0,54(3Н, с).

Пример 2

Получение (5Z,7E)-(1R,2S,3R,20R)-2-(2-метоксикарбонилэтокси)-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триола (соединение С-2)

(1) Соединение А-2 (1,45 г, 3,27 ммоль), полученное в примере 1 (1), растворяют в безводном диметилформамиде (15 мл), к раствору добавляют дихромат пиридиния (6,17 г, 16,4 ммоль), и смесь перемешивают в течение 12 часов. Добавляют воду, смесь экстрагируют этилацетатом, и полученный органический слой сушат над безводным сульфатом магния. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (20% этилацетата/н-гексан), и получают соединение А-4 (0,82 г, выход 55%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 5,90 (1Н, ддд, J=17,0, 6,0, 11,0 Гц), 5,30-5,20 (2Н, м), 4,33 (1Н, ддт, J=7,0, 3,0, 1,0 Гц). 3,96 (2Н, тд, J=6,0, 1,2 Гц), 3,85-3,75 (1Н, м), 3,55 (1Н, дд, J=6,3, 3,7 Гц), 2,63 (2Н, тд, J=5,9, 1,9 Гц), 2,50-2,32 (2Н, м), 2,02 (1Н, т, J=2,7 Гц), 0,91 (9Н, с), 0,90 (9Н, с), 0,11 (3Н, с), 0,10 (3Н, с), 0,09 (3Н, с), 0,08 (3Н, с).

(2) Соединение А-4 (0,82 г, 1,79 ммоль), полученное в (1), растворяют в безводном метаноле (8 мл), к раствору добавляют концентрированную серную кислоту (74 мкл, 1,5 ммоль), и смесь перемешивают в течение 2,5 часов. После охлаждения до комнатной температуры к смеси добавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, и смесь экстрагируют этилацетатом. Полученный органический слой сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток растворяют в безводном дихлорметане, к раствору при охлаждении льдом добавляют 2,6-лутидин (1,01 мл, 9 ммоль) и трет-бутилдиметилсилилтрифторметансульфонат (1,65 мл, 7,2 ммоль), и затем смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Добавляют безводный метанол (1,5 мл), и смесь перемешивают при комнатной температуре еще в течение 10 минут. К смеси добавляют смесь н-гексан/этилацетат (9/1), смесь промывают водой, и полученный органический слой сушат над безводным сульфатом натрия. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (3% этилацетата/н-гексан), и получают соединение А-5 (683,4 мг, выход 81%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 5,94 (1Н, ддд, J=10,0, 17,2, 6,5 Гц), 5,21 (1Н, дт, J=17,3, 1,3 Гц), 5,14 (1Н, дт, J=10,0, 1,3 Гц), 4,30 (1Н, дд, J=6,8, 3,4 Гц), 4,00-3,97 (1Н, м), 3,88-3,82 (2Н, м), 3,68 (3Н, с), 3,40 (1Н, дд, J=5,5, 3,5 Гц), 2,57 (2Н, т, J=6,6 Гц), 2,48 (1Н, дк, J=16,8, 2,7 Гц), 2,35 (1Н, дк, J=17,0, 2,8 Гц), 1,96 (1Н, т, J=2,6 Гц), 0,90 (9Н, с), 0,89 (9Н, с), 0,09 (3Н, с), 0,08 (3Н, с), 0,07 (3Н, с), 0,03 (3Н, с).

(3) Соединение А-5 (47.0 мг, 0,1 ммоль), полученное в (2), и соединение В-2 (46,2 мг, 0,11 ммоль), полученное в примере 1 (3), растворяют в смеси толуол/триэтиламин (1/1, 2 мл), добавляют тетракис(трифенилфосфин)палладий (12,5 мг, 0,0108 ммоль), и смесь перемешивают в атмосфере азота при 110°C в течение 3 часов. Смесь охлаждают до комнатной температуры и концентрируют при пониженном давлении. Остаток предварительно очищают тонкослойной хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 19/1). Полученный предварительно очищенный материал растворяют в смеси безводный дихлорметан/ацетонитрил (1/1, 1 мл), к смеси при 0°C в атмосфере азота добавляют тетрафторборат лития (78 мг, 0,8 ммоль) и серную кислоту (1 М раствор в ацетонитриле, 0,08 мл, 0,08 ммоль), и смесь перемешивают в течение 30 минут. К смеси добавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, и смесь экстрагируют этилацетатом. Полученный органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушат над безводным сульфатом натрия. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток предварительно очищают тонкослойной хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 1/2) и дополнительно очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (А = 95% воды/ацетонитрил; В = 0,5% воды/40% метанола/ацетонитрил; В = 75%),и получают соединение С-2 (6,8 мг, 13%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 6,42 (1Н, д, J=11,2 Гц), 6,03 (1Н, д, J=11,2 Гц), 5,40 (1Н, д, J=1,2 Гц), 5,09 (1Н, д, J=2,2 Гц), 4,45 (1Н, т, J=3,3 Гц), 4,06-3,79 (3Н, м), 3,73 (3Н, с), 3,36 (1Н, дд, J=7,7, 3,3 Гц), 2,85-2,60 (7Н, м), 2,24 (2Н, дт, J=18,8, 5,9 Гц), 2,02-1,96 (3Н, м), 1,89-1,82 (2Н, м), 1,72-1,54 (6Н, м), 1,51 (6Н, s), 1,47-1,24 (4H, м), 1,06 (3Н, д, J=6,3 Гц), 0,54 (3Н, с).

МС m/z 537,2 (М+23)+523.3 (М+18)+.

Пример 3 Получение (5Z,7Е)-(1R,2S,3R,20R)-2-(2-пропоксикарбонилэтокси)-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триола (соединение С-4)

(1) С использованием в качестве исходного материала соединения А-4 (240 мг, 0,525 ммоль), полученного в примере 2 (1), и заменяя метанол пропанолом, осуществляют синтез так же, как в примере 2 (2), и получают соединение А-6 (18,5 мг, выход 27%).

(2) С использованием в качестве исходных материалов соединения А-6 (40,5 мг, 0,081 ммоль), полученного в (1), и соединения В-2 (47 мг, 0,11 ммоль), полученного в примере 1 (3), осуществляют синтез так же, как в примере 2 (3), и получают соединение С-4 (6,8 мг, выход 15%).

1Н-ЯМР (CDCl3) δ: 6,42 (1Н, д, J=11,2 Гц), 6,03 (1Н, д, J=11,2 Гц), 5,39 (1Н, д, J=1,2 Гц), 5,09 (1Н, д, J=2,2 Гц), 4,45 (1Н, т, J=3,5 Гц), 4,08 (2Н, т, J=6,7 Гц), 4,06-3,95 (2Н, м), 3,85-3,77 (1Н, м), 3,36 (1Н, дд, J=7,8, 3,2 Гц), 2,85-2,82 (1Н, м), 2,79 (1Н, д, J=4,1 Гц), 2,70-2,62 (4Н, м), 2,26-2,22 (2Н, м), 2,03-1,98 (3Н, м), 1,90-1,80 (3Н, м), 1,70-1,64 (7Н, м), 1,58-1,53 (4Н, м), 1,51 (6Н, с),1,48-1,45 (2Н, м), 1,40-1,20 (4Н, м), 1,06 (3Н, д, J=6,6 Гц), 0,94 (4Н, т, J=7,4 Hz), 0,54 (3Н, с).

(1) С использованием в качестве исходного материала соединения А-4 (240 мг, 0,525 ммоль), полученного в примере 2 (1), и заменяя метанол изопропанолом, осуществляют синтез так же, как в примере 2 (2), и получают соединение А-7 (157,4 мг, выход 60%).

(2) С использованием в качестве исходных материалов соединения А-7 (35 мг, 0,07 ммоль), полученного в (1), и соединения В-2 (44 мг, 0,11 ммоль), полученного в примере 1 (3), осуществляют синтез так же, как в примере 2 (3), и получают соединение С-5 (6,8 мг, выход 17%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 6,42 (1Н, д, J=11,0 Гц), 6,03 (1Н, д, J=11,5 Гц), 5,39 (1Н, д, J=1,5 Гц), 5,09-5,02 (2Н, м), 4,45 (1Н, т, J=3,5 Гц), 4,05-3,78 (3Н, м), 3,35 (1Н, дд, J=7,7, 3,3 Гц), 2,85-2,58 (6Н, м), 2,28-1,53 (18Н, м), 1,51 (6Н, с), 1,46-1,30 (5Н, м), 1,26 (3Н, д, J=1,7 Гц), 1,24 (3Н, д, J=1,5 Гц), 1,06 (3Н, д, J=6,3 Гц), 0,54 (3Н, с).

Пример 5

Получение (5Z,7Е)-(1R,2S,3R,20R)-2-(2-карбоксипропил)-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триола (соединение D-1)

(1) Соединение А-8 (0,72 г, 1,69 ммоль), полученное таким же способом, как в примере 1 (1) из (3R,4R,5S)-3,5-бис[(трет-бутилдиметилсилил)окси]-4-[3-{(трет-бутилдиметилсилил)окси}пропил]окт-1-ен-7-ина - соединения, известного из литературы (например, из Saito, et al., Tetrahedron, 60, 7951-7961 (2004)), растворяют в дихлорметане (6,8 мл). К раствору при 0°C добавляют триэтиламин (0,47 мл, 3,37 ммоль), гидрохлорид триметиламина (16 мг, 0,169 ммоль) и п-толуолсульфонилхлорид (0,48 г, 2,53 ммоль), и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. К смеси добавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, смесь экстрагируют этилацетатом, и органический слой сушат над безводным сульфатом магния. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, и полученный остаток растворяют в диметилформамиде (3 мл). К раствору добавляют цианид натрия (199 мг, 4,06 ммоль) и иодид натрия (380 мг, 2,53 ммоль), и смесь перемешивают при 50°C в течение 2 часов. Добавляют воду, и смесь экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом магния, концентрируют при пониженном давлении, и получают сырое соединение А-9. Его растворяют в тетрагидрофуране (5 мл), к раствору добавляют фторид тетрабутиламмония (1 М раствор в тетрагидрофуране, 5,07 мл, 5,07 ммоль), и смесь перемешивают при 60°C в течение 1 часа. Добавляют этилацетат, смесь промывают водой, и органический слой сушат над безводным сульфатом м