Способ прогнозирования гематогенного метастазирования при трипл негативной инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы

Способ прогнозирования гематогенного метастазирования при трипл негативной инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способов прогнозирования гематогенного метастазирования при трипл негативной инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы.

Независимым прогностическим маркером гематогенного метастазирования рака молочной железы (РМЖ) является размер первичного опухолевого узла. Считается, что в случаях с наличием опухолей размером менее 2 см имеется низкий риск развития отдаленных метастазов, в то время как при наличии опухолей размером 2-5 см - высокий, а размером более 5 см - очень высокий риск гематогенного метастазирования [1].

В настоящее время к прогностическим критериям гематогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы относят степень злокачественности опухоли, которую определяют по модифицированной схеме P. Scarff, Н. Bloom и W. Richardson. При этом учитывается количество тубулярных и протоковых структур, число митозов и клеточный полиморфизм [2, 3, 4].

Низкая (первая) степень злокачественности ассоциируется с низким риском отдаленного метастазирования, умеренная (вторая) степень злокачественности имеет промежуточный риск метастазирования, опухоли с высокой степенью злокачественности (третьей) обладают высоким риском отдаленного метастазирования [5].

Инвазия в сосуды является прогностическим критерием отдаленного метастазирования только у больных без метастатического поражения аксиллярных лимфоузлов. При этом присутствие опухолевых эмболов более чем в трех кровеносных сосудах связывается с высоким риском отдаленного метастазирования [6, 7].

Наиболее близким к настоящему является способ прогнозирования метастазирования при раке молочной железы, предложенный Perou С.М. и соавт. Суть этого способа основывается на определении молекулярно-генетического типа рака молочной железы в зависимости от сочетания экспрессии рецепторов к эстрогенам, прогестерону, Her2/neu и Ki67 (показателя пролиферативной активности) с последующим выявлением риска гематогенного метастазирования при каждом молекулярно-генетическом типе рака молочной железы. Люминальным A типом называют рак молочной железы в случаях с позитивной экспрессией рецепторов к эстрогенам и/или к прогестерону, негативным Her2/neu статусом и Ki67 менее 20%. Люминальным B типом - случаи с позитивной экспрессией рецепторов к эстрогенам и/или к прогестерону, негативным Her2/neu статусом и экспрессией Ki67 более 20% или позитивной экспрессией рецепторов к эстрогенам и/или к прогестерону, и позитивным Her2/neu статусом, независимо от уровня экспрессии Ki67. Трипл негативным типом - случаи с негативной экспрессией рецепторов к эстрогенам и прогестерону и негативным Her2/neu статусом. К типу с гиперэкспрессией Her2/neu относят случаи с негативной экспрессией рецепторов к эстрогенам, прогестерону и позитивным Her2/neu статусом. Люминальный тип A и B связывают с низкой частотой возникновения гематогенных метастазов, а трипл негативный тип и тип с гиперэкспрессией Her2/neu с высокой [8]. Недостатком этого способа является то, что не учитывается морфологическое строение первичного опухолевого узла, поскольку гистологическая гетерогенность новообразования играет немаловажную роль в прогнозе гематогенного метастазирования, независимо от молекулярно-генетического типа рака молочной железы.

Техническая задача - повышение точности и информативности способа.

Для решения поставленной задачи в способе прогнозирования гематогенного метастазирования при трипл негативной инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы, включающем определение молекулярно-генетического типа рака молочной железы с помощью иммуногистохимического исследования препаратов ткани первичной опухоли, дополнительно определяют следующие признаки: учитывают размер первичной опухоли и при размерах 2 см, от 2-5 см и от 5 см и более, присваивают значения 1, 2, 3 соответственно, определяют наличие лимфогенных метастазов, и при их отсутствии присваивают значение 1, а при наличии - значение 2, проводят морфологическое исследование строения первичной опухоли, где подсчитывают количество разных типов структур в инфильтративном компоненте опухоли, причем присутствие в инфильтративной компоненте одного типа структур оценивают как 1, присутствие в инфильтративном компоненте двух разных типов структур оценивают как 2, присутствие в инфильтративном компоненте трех разных типов структур оценивают как 3 и т.д. до 5 в инфильтративном компоненте, а также оценивают выраженность гиалиноза стромы опухоли: слабо равным 1, умеренном равном 2, резко выраженным равным 3,

Рассчитывают значение уравнения регрессии Y по формуле

Y=(-8-22X₁+20X₂+2,08X₃+6,8X₄),

где (-8) - значение коэффициента регрессии свободного члена;

X₁ - размер первичной опухоли (1 - до 2 см; 2 - 2-5 см; 3 - более 5 см),

(-22) - значение коэффициента регрессии этого признака;

X₂ - наличие лимфогенных метастазов (1 - нет; 2 - есть),

(20) - значение коэффициента регрессии этого признака;

X₃ - количество разных типов структур в инфильтративном компоненте опухоли (присутствие в инфильтративной компоненте одного типа структур оценивают как 1, присутствие в инфильтративном компоненте двух разных типов структур оценивают как 2, присутствие в инфильтративном компоненте трех разных типов структур оценивают как 3 и т.д. до 5), (2,08) - значение коэффициента регрессии этого признака;

X₄ - выраженность гиалиноза в строме опухолевого узла (1 - слабо, 2 - умеренно, 3 - резко выражен),

(6,8) - значение коэффициента регрессии этого признака.

Значение вероятности развития гематогенных метастазов определяют по формуле

P=e^Y/(1+e^Y),

где e - математическая константа, равная 2,72, и при P≥50% определяют высокий риск, а при P<50% - низкий риск развития гематогенных метастазов.

Способ осуществляют следующим образом.

Макроскопической оценке подвергают ткань первичной опухоли и все удаленные лимфатические узлы.

Материал фиксируют в 10-12% растворе нейтрального формалина. Проводку материала и изготовление гистологических препаратов осуществляют по стандартной методике. Препараты окрашивают гематоксилином и эозином. Гистологический тип рака устанавливают согласно рекомендациям ВОЗ, Женева, 2012.

Иммуногистохимическое исследование осуществляют по стандартной методике. Применяют антитела фирмы «Dako» к рецепторам эстрогена (клон 1D5, RTU, мышиные), к рецепторам прогестерона (клон PgR636, RTU, мышиные), к онкопротеину с - erbB - 2 (рабочее разведение 1:500, кроличьи), к Ki67 (клон MIB-1, RTU, мышиные).

Определяют положительную ядерную экспрессию рецепторов к эстрогенам, к прогестерону, к Ki67 и положительную мембранную экспрессию HER2/neu.

Дополнительно проводят морфологическое исследование определяют следующие признаки: учитывают размер первичной опухоли и при размерах 2 см, от 2-5 см и от 5 см и более, присваивают значения 1, 2, 3 соответственно, определяют наличие лимфогенных метастазов, и при их отсутствии присваивают значение 1, а при наличии - значение 2, проводят морфологическое исследование строения первичной опухоли, где подсчитывают количество разных типов структур в инфильтративном компоненте опухоли, причем присутствие в инфильтративной компоненте одного типа структур оценивают как 1, присутствие в инфильтративном компоненте двух разных типов структур оценивают как 2, присутствие в инфильтративном компоненте трех разных типов структур оценивают как 3 и т.д. до 5 в инфильтративном компоненте, а также оценивают выраженность гиалиноза стромы опухоли: слабо равным 1, умеренно равном 2, резко выраженным равным 3.

Рассчитывают значение уравнения регрессии Y по формуле

Y=(-8-22X₁+20X₂+2,08X₃+6,8X₄),

где (-8) - значение коэффициента регрессии свободного члена;

X₁ - размер первичной опухоли (1 - до 2 см; 2 - 2-5 см; 3 - более 5 см), (-22) - значение коэффициента регрессии этого признака;

X₂ - наличие лимфогенных метастазов (1 - нет; 2 - есть), (20) - значение коэффициента регрессии этого признака;

X₃ - количество разных типов структур в инфильтративном компоненте опухоли (присутствие в инфильтративной компоненте одного типа структур оценивают как 1, присутствие в инфильтративном компоненте двух разных типов структур оценивают как 2, присутствие в инфильтративном компоненте трех разных типов структур оценивают как 3 и т.д. до 5),

(2,08) - значение коэффициента регрессии этого признака;

X₄ - выраженность гиалиноза в строме опухолевого узла (1 - слабо, 2 - умеренно, 3 - резко выражен),

(6,8) - значение коэффициента регрессии этого признака.

Значение вероятности развития гематогенных метастазов P определяют по формуле

P=e^Y/(1+e^Y),

где e - математическая константа, равная 2,72,

и при P≥50% определяют высокий, а при P<50% - низкий риск развития гематогенных метастазов.

Сущность предлагаемого способа иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Больная К., 60 лет, с трипл негативной инвазивной карциномой неспецифического типа молочной железы, с размером опухоли 2,9 см (2), с наличием лимфогенных метастазов (2), с наличием в инфильтративном компоненте опухоли трех разных типов структур (3), со слабо выраженным гиалинозом стромы опухоли (1).

Рассчитывали значение уравнения регрессии Y:

Y=-8-22X₁+20X₂+2,08X₃+6,8X₄=-8-22x2+20x2+2,08x3+6,8x1=-8-44+40+6,24+6,8=-5,7

Значение вероятности развития гематогенных метастазов определяли по формуле

P=e^Y/(1+e^Y)=2,72^-5,7/(1+2,72^-5,7)=0,99.

Вероятность развития гематогенных метастазов составила 99%. При динамическом наблюдении через 27 месяцев после операции у пациентки были диагностированы гематогенные метастазы в печени.

Пример 2. Больная А., 55 лет, с трипл негативной инвазивной карциномой неспецифического типа молочной железы, с размером опухоли 2,7 см (2), с наличием лимфогенных метастазов (2), с наличием в инфильтративном компоненте опухоли двух разных типов структур (2), со слабо выраженным гиалинозом стромы опухоли (1).

Риск развития гематогенных метастазов оценивался по формуле

Y=-8-22X₁+20X₂+2,08X₃+6,8X₄=-8-22x2+20x2+2,08x2+6,8x1=-8-44+40+4,16+6,8=-1,04

Значение вероятности развития гематогенных метастазов определялось по формуле

P=e^Y/(1+e^Y)=2,72^-1,04/(1+2,72^-1,04)=0,33.

Вероятность развития гематогенных метастазов составила 33%. При динамическом наблюдении через 60 месяцев после операции у пациентки не были обнаружены гематогенные метастазы.

Предлагаемый способ основан на анализе результатов клинических наблюдений и данных морфологического исследования операционного материала.

Изучался операционный материал от 163 больных инвазивной карциномой неспецифического типа молочной железы стадии T1-3N0-3M0. Средний возраст больных составил 55,9±11,1 лет. Больные не получали неоадъювантной терапии. Операция выполнялась в объеме радикальной мастэктомии, радикальной или секторальной резекции молочной железы.

Макроскопической оценке подвергалась ткань первичной опухоли и все удаленные лимфатические узлы.

Материал фиксировался в 10-12% растворе нейтрального формалина. Проводка материала и изготовление гистологических препаратов осуществлялись по стандартной методике. Препараты окрашивались гематоксилином и эозином. Гистологический тип рака устанавливался согласно рекомендациям ВОЗ (Женева, 2012).

Иммуногистохимическое исследование осуществлялось по стандартной методике. Применялись антитела фирмы «Dako» к рецепторам эстрогена (клон 1D5, RTU, мышиные), к рецепторам прогестерона (клон PgR636, RTU, мышиные), к онкопротеину с - erbB - 2 (рабочее разведение 1:500, кроличьи), к Ki67 (клон MIB-1, RTU, мышиные).

Определяли положительную ядерную экспрессию рецепторов к эстрогенам, к прогестерону, к Ki67 и положительную мембранную экспрессию HER2/neu. На основании сочетания экспрессии рецепторов к эстрогенам, прогестерону, экспрессии HER2/neu и Ki67 случаи подразделялись на 4 молекулярно-генетических типа: люминальный A (n=101) (позитивная экспрессия рецепторов к эстрогенам, к прогестерону, негативная экспрессия HER2/neu, Ki67 менее 20%), люминальный B (n=23) (позитивная экспрессия рецепторов к эстрогенам, к прогестерону, позитивная экспрессия HER2/neu, независимо от уровня экспрессии Ki67 или позитивная экспрессия рецепторов к эстрогенам, к прогестерону, негативная экспрессия HER2/neu, Ki67 более 20%), трипл негативный (n=25) (негативная экспрессия рецепторов к эстрогенам, к прогестерону, негативная экспрессия HER2/neu), тип с гиперэкспрессией HER2/neu (n=14) (негативная экспрессия рецепторов к эстрогенам, к прогестерону, позитивная экспрессия HER2/neu). В группе больных с трипл негативным раком в препаратах, окрашенных гематоксилином и эозином, в инфильтративном компоненте выделяли трабекулярные, тубулярные, альвеолярные, солидные структуры и дискретные группы опухолевых клеток. Подсчитывалось количество разных типов структур в каждом случае, а также оценивалась выраженность гиалиноза в строме опухолевого узла.

Статистическая обработка результатов выполнялась с помощью пакета программ «Statistica 6.0 for Windows».

Для предсказания риска развития гематогенных метастазов использовался метод логистической регрессии. Была определена формула Y=(-8-22X₁+20X₂+2,08X₃+6,8X₄),

где Y - значение уравнения регрессии;

(-8) - значение коэффициента регрессии свободного члена;

X₁ - размер первичной опухоли (1 - до 2 см; 2 - 2-5 см; 3 - более 5 см), (-22) - значение коэффициента регрессии этого признака;

X₂ - наличие лимфогенных метастазов (1 - нет; 2 - есть), (20) - значение коэффициента регрессии этого признака;

X₃ - количество разных типов структур в инфильтративном компоненте опухоли (присутствие в инфильтративной компоненте одного типа структур оценивают как 1, присутствие в инфильтративном компоненте двух разных типов структур оценивают как 2, присутствие в инфильтративном компоненте трех разных типов структур оценивают как 3 и т.д. до 5), (2,08) - значение коэффициента регрессии этого признака;

X₄ - выраженность гиалиноза в строме опухолевого узла (1 - слабо, 2 - умеренно, 3 - резко выражен), (6,8) - значение коэффициента регрессии этого признака.

Значение вероятности развития гематогенных метастазов определяется по формуле P=e^Y/(1+e^Y),

где P - значение вероятности развития признака, e - математическая константа, равная 2,72. При P≥50% определяется высокий, а при вероятности P<50% - низкий риск развития гематогенных метастазов.

Модель имеет высокую степень достоверности (x²=30,6; p=0,00000). Чувствительность составила 90%, специфичность 97%.

При анализе частоты возникновения гематогенных метастазов от признаков, вошедших в прогностическую модель, оказалось, что гематогенные метастазы чаще возникали у больных с наличием лимфогенных метастазов (табл. 1) и в случаях с резко выраженным гиалинозом стромы опухоли (табл. 2). Изолированно, вне прогностической модели, связи гематогенного метастазирования с размером опухоли и количеством разных типов структур обнаружено не было (χ²=4,7; p=0,10 и χ²=2,1; p=0,72 соответственно).

Таким образом, предлагаемый способ позволяет с большей точностью и информативностью прогнозировать вероятность развития гематогенных метастазов при трипл негативной инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы и оптимизировать тактику ведения таких больных.

Источники информации, принятые во внимание

1. Weigelt B. Breast cancer metastasis: marcers and models [Text] / B. Weigelt, J.L. Peterse, L.J. Van′t Veer // Nature reviews cancer. - Vol. 5. - 2005. - P. 591-602.

2. Bloom H.J.G. Histological grading and prognosis in breast cancer. A study of 1049 cases, of which 359 have been followed 15 years [Text] / H.J.G. Bloom, W.W. Richardson // Br J Cancer. - 1957. - Vol. 11. - P. 359-377.

3. Bloom H.J.G. Prognosis in carcinoma of the breast [Text] / H.J.G. Bloom // Br J Cancer. - 1950. - Vol. 4. - P. 259-288.

4. Pinder S.E. The importance of the histologic grade of invasive breast carcinoma and response to chemotherapy [Text] / S.E. Pinder, S. Murray, I.O. Ellis // Cancer. - 1998. - Vol. 83. - P. 1529-1539.

5. Page D.L. Prognosis and breast cancer. Recognition of lethal and favourable prognostic types [Text] / D.L. Page // Am. J. Surg. Pathol. - 1991. - Vol. 15. - P. 334-349.

6. Mascarel I. De Obvious peritumoural emboli: an elusive prognostic factor reappraised. Multivariate analysis of 1320 node-negative breast cancers [Text] / I. de Mascarel // Eur. J. Cancer. - 1998. - Vol. 34. - P. 58-65.

7. Pinder S.E. Pathological prognostic factors in breast cancer. III. Vascular invasion: relationship with recurrence and survival in a large study with long-term follow-up [Text] / S.E. Pinder // Histopathology. - 1994. - Vol. 24. - P. 41-47.

8. Perou C.M. Molecular portraits of human breast tumours [Text] / C.M. Perou // Nature. - 2000. - Vol. 406. - P. 747-752.

Таблица 1

Частота развития гематогенных метастазов при трипл негативной инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы в зависимости от наличия лимфогенных метастазов

Таблица 2

Частота гематогенного метастазирования при трипл негативной инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы в зависимости от выраженности гиалиноза в строме первичной опухоли

Способ прогнозирования гематогенного метастазирования при трипл негативной инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы, включающий определение молекулярно-генетического типа рака молочной железы с помощью иммуногистохимического исследования препаратов ткани первичной опухоли, отличающийся тем, что дополнительно определяют следующие признаки: учитывают размер первичной опухоли и при размерах 2 см, от 2-5 см и от 5 см и более присваивают значения 1, 2, 3 соответственно, определяют наличие лимфогенных метастазов, и при их отсутствии присваивают значение 1, а при наличии - значение 2, проводят морфологическое исследование строения первичной опухоли, где подсчитывают количество разных типов структур в инфильтративном компоненте опухоли, причем присутствие в инфильтративной компоненте одного типа структур оценивают как 1, присутствие в инфильтративном компоненте двух разных типов структур оценивают как 2, присутствие в инфильтративном компоненте трех разных типов структур оценивают как 3 и т.д. до 5 в инфильтративном компоненте, а также оценивают выраженность гиалиноза стромы опухоли: слабо равным 1, умеренно равном 2, резко выражен равным 3,рассчитывают значение уравнения регрессии Y по формуле:Y=(-8-22X₁+20X₂+2,08X₃+6,8X₄), где (-8) - значение коэффициента регрессии свободного члена;X₁ - размер первичной опухоли (1 - до 2 см; 2 - 2-5 см; 3 - более 5 см),(-22) - значение коэффициента регрессии этого признака;X₂ - наличие лимфогенных метастазов (1 - нет; 2 - есть),(20) - значение коэффициента регрессии этого признака;X₃ - количество разных типов структур в инфильтративном компоненте опухоли (присутствие в инфильтративной компоненте одного типа структур оценивают как 1, присутствие в инфильтративном компоненте двух разных типов структур оценивают как 2, присутствие в инфильтративном компоненте трех разных типов структур оценивают как 3 и т.д. до 5),(2,08) - значение коэффициента регрессии этого признака;X₄ - выраженность гиалиноза в строме опухолевого узла (1 - слабо, 2 - умеренно, 3 - резко выражен),(6,8) - значение коэффициента регрессии этого признака,далее, значение вероятности развития гематогенных метастазов определяют по формулеP=e^Y/(1+e^Y), где e - математическая константа, равная 2,72, и при P≥50% определяют высокий риск, а при P<50% - низкий риск развития гематогенных метастазов.