Среда для разбавления, длительного хранения и криоконсервации спермы индюков "вниигрж-5"

Среда для разбавления, длительного хранения и криоконсервации спермы индюков "вниигрж-5"

Реферат

Изобретение относится к птицеводству и может применяться в биотехнологиях искусственного осеменения индеек.

С развитием методов искусственного осеменения сельскохозяйственной птицы актуальными стали разработки сред для разбавления, длительного хранения и криоконсервации спермы самцов с целью повышения оплодотворенности яиц. При этом составы сред различны для разных видов птицы.

Одной из задач является длительное хранение и криоконсервация спермы индюков. Для ее решения среди прочих была предложена среда, содержащая растворенные в дистилированной воде: инозитол, лактозу, фосфорнокислый калий двузамещенный и однозамещенный, тиосульфат натрия и цинковый комплекс этилендиаминтетраацетата двунатриевого двуводного [1]. Главным недостатком этой среды являются относительно невысокие показатели оплодотворенности яиц (63,3%) и вывода молодняка (49,9%), получаемые после осеменения спермой, прошедшей криоконсерацию.

В качестве прототипа была выбрана среда «ВИРГЖ-4», имеющая наиболее близкий к заявляемому объекту изобретения состав компонентов [2], используемая для криоконсервации спермы петухов и индюков.

Задачей предлагаемого изобретения было существенное повышение биологической полноценности спермиев индюков при длительном хранении при плюсовых температурах и криоконсервации и, как следствие, - повышение оплодотворенности яиц.

По итогам многочисленных экспериментов установлено, что для решения этой задачи целесообразно в качестве источников ионов магния вместо взятого в прототипе ацетата использовать сульфат и привести соотношение растворенных в 100 мл дистиллированной воды компонентов до следующих диапазонов: глутамат натрия - 1,60-2,00 г; глутаминовая кислота - 0,04-0,05 г; инозитол - 0,24-0,26 г; калий фосфорнокислый двузамещенный - 0,32-0,36 г; глюкоза - 1,00-1,14 г; магния сульфат 0,22-0,23.

При использовании этой среды для криоконсервации спермы индюков в качестве криопротектора добавляют к объему разбавленной спермы N,N-диметилацетамид в концентрации 8%.

Для проверки диапазонов содержания компонентов в сравнении с прототипом были испытаны 4 варианта новой среды, получившей название «ВНИИРГЖ-5», составы которых показаны в таблице 1.

Степень разбавления: 1 часть спермы и 3 части среды. Частота осеменения индеек при хранении спермы при плюсовых температурах - 1 раз в 14 дней; при использовании замороженно-оттаянной спермы - 1 раз в 7 дней.

В таблице 2 приведены результаты сравнительных испытаний различных вариантов среды после замораживания, хранения в течение года при температуре жидкого азота и последующего оттаивания, из которой видно, что объект изобретения имеет значительное преимущество перед прототипом, особенно заметное в вариантах II и III.

В таблице 3 показаны результаты сравнительных испытаний прототипа и состава предлагаемой среды по варианту III (оба без N,N-диметилацетамида) при разных сроках хранения при температуре: +1…+3°С. Здесь также наблюдается преимущество объекта изобретения.

Среду «ВНИИГРЖ-5» готовят следующим образом: в первую емкость наливают 50 мл дистиллированной воды, в которой растворяют: глутамат натрия и фосфорнокислый калий двузамещенный. Во второй емкости в 50 мл дистиллированной воды растворяют глюкозу, инозитол, магния сульфат и глутаминовую кислоту. После полного растворения компонентов оба раствора соединяют в одной емкости.

Технический результат предлагаемого изобретения состоит в существенном повышении биологической полноценности спермиев индюков при длительном хранении и криоконсервации.

Таблица 1
Компоненты среды	Ед. измерения	Среда «ВНИИГРЖ-5»	Прототип «ВИРГЖ-4»
		Вариант I	Вариант II	Вариант III	Вариант IV
Глутамат натрия	г	1,26	1,60	2,00	2,40	2,40
Глутаминовая кислота	г	0,03	0,04	0,05	0,06	0,14
Инозитол	г	0,23	0,24	0,26	0,30	0,20
Калий фосфорнокислый двузамещенный	г	0,29	0,32	0,36	0,40	0,35
Глюкоза	г	0,87	1,00	1,14	1,35	0,80
Магния сульфат	г	0,20	0,22	0,23	0,25	-
Магния ацетат	г	-	-	-	-	0,10
Глицин	г	-	-	-	-	0,10
N,N-диметилацетамида	%	8,00	8,00	8,00	8,00	8,00
Вода дистиллированная	мл	100	100	100	100	100

Таблица 2
Среда	Варианты	Проинкубировано яиц, шт.	Оплодотворенность яиц, %	Вывод молодняка, %
Объект изобретения «ВНИИГРЖ-5»	I	200	67,2	60,0
II	213	81,2	72,5
III	198	86,9	79,6
IV	385	70,2	61,3
Прототип «ВИРГЖ-4»	328	79,1	72,9

Таблица 3
Среда	Время хранения спермы, час	Проинкубировано яиц, шт	Оплодотворенность яиц, %	Вывод молодняка, %
Объект изобретения «ВНИИГРЖ-5», вариант III	1	1378	97,0	83,8
24	831	95,2	82,8
48	284	89,1	71,1
Прототип «ВИРГЖ-4»	24	1324	85,6	73,0

Источники информации

1. Осташко Ф.И., Бесулин В.И., Каркач П.М. Среда для разбавления и замораживания спермы индюков: Авт. св. СССР №1477397, А61Д 7/02, 1987.

2. Целютин К.В., Тур Б.К. Искусственное осеменение и криоконсервация спермы сельскохозяйственной птицы (петухи, индюки, гусаки и селезни). - СПб - Пушкин. - 2013. - С. 29.

1. Среда для разбавления и длительного хранения спермы индюков, характеризующаяся тем, что она содержит растворенные в дистиллированной воде глутамат натрия, глутаминовую кислоту, инозитол, калий фосфорнокислый двузамещенный, глюкозу и магния сульфат при следующем соотношении компонентов:Глутамат натрия - 1.60-2.00 гГлутаминовая кислота - 0.04-0.05 гИнозитол - 0.24-0.26 гКалий фосфорнокислый двузамещенный - 0.32-0.36 гГлюкоза - 1.00-1.14 гМагния сульфат - 0.22-0.23 гВода дистиллированная - 100 мл

2. Среда для разбавления и длительного хранения спермы индюков по п. 1, отличающаяся тем, что при криоконсервации спермы она дополнительно содержит N,N-диметилацетамид в концентрации 8%.