Лечение интерстициального цистита

Лечение интерстициального цистита

Иллюстрации

Показать все

Реферат

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение связано с применением антитела против ФРН (фактор роста нервов) для лечения или профилактики боли и/или симптома со стороны нижних мочевыводящих путей ((LUTS), lower urinary tract symptom), ассоциированного с интерстициальным циститом и/или с синдромом раздраженного мочевого пузыря, и/или с болевым синдромом мочевого пузыря.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Интерстициальный цистит (ИЦ), или [IC], является хроническим заболеванием мочевого пузыря неизвестной природы, характеризующимся болевыми симптомами, такими как боль в области таза, и симптомами со стороны нижних мочевыводящих путей (LUTS), такими как учащенные неотложные позывы/частота мочеиспускания. В более современной терминологии, наряду с ИЦ, выделяют синдром раздраженного мочевого пузыря (СРМП) [painful bladder syndrome, PBS] (MacDiarmid SA et al. Rev Urol 2007; 9(1):9-16) или болевой синдром мочевого пузыря (БСМП) [bladder pain syndrome, BPS] (van der Merve et al. European Urology 53(2008) 60-67), то есть для более полного описания указанного симптомокомплекса используют терминологию ИЦ/СРМП/БСМП.

Коэффициент распространенности ИЦ/СРМП/БСМП колеблется от 67 до 230 на 100000 женщин, имеющих клинически подтвержденный диагноз заболевания, хотя на самом деле этот показатель, по-видимому, выше в связи с наличием ошибочно диагностированных или не диагностированных случаев, обычно в связи с эндометриозом, рецидивирующей инфекцией мочевых путей, с гиперактивным мочевым пузырем или вульводинией (Forrest J B et al. Clinical Courier 2006; 24(3):1-8). ИЦ существенно влияет на качество жизни, являясь помехой в путешествиях, в семейных отношениях и на службе (Slade D et al. Urol 1997; 49 (5A Suppl):10-3), а кроме того, он ассоциирован с депрессивными симптомами (Rothrock N E et al. J Urol 2002; 167: 1763-1767).

Проведено несколько качественно выполненных плацебо-контролируемых рандомизированных испытаний, связанных с терапией, нацеленной на ИЦ, и лечение часто состоит в мультимодальном подходе метода проб и ошибок, как следует из обзора патентов, составленного на основании изучения базы данных по интерстициальному циститу, в котором сообщается о 183 различных типах лечения (Rovner E et al. J Urol 2000; 56:940-5).

Единой этиологии идентифицировано не было, и наиболее вероятно, что имеет место многофакторный процесс с участием нескольких урологических повреждающих факторов, вызывающих самоподдерживающийся процесс дисфункции эпителиальных клеток, активации нервного волокна C и пролиферации тучных клеток, приводящих к усугублению тканевого повреждения, образованию рубцов и фиброзу. Повторная стимуляция волокон C от воспаления и повышающая регуляция афферентных нервов в мочевом пузыре в конечном итоге приводят к перманентным перестройкам (централизация), приводящим к гиперальгезии, хронической боли мочевого пузыря и дисфункции его опорожнения (Forrest J B et al. Clinical Courier 2006; 24(3):1-8).

Несмотря на то, что единого мнения относительно фундаментальных причин ИЦ достичь не удается, существующие данные приводят к заключению, что здесь могут участвовать три патофизиологических механизма: эпителиальная дисфункция, активация тучных клеток и нейрогенное воспаление (Nazif O et al. Urol 2007; 69 (Suppl 4A):24-33).

По-прежнему остается потребность в обеспечении нового, эффективного лечения боли и/или симптома интерстициального цистита со стороны нижних мочевыводящих путей, и/или синдрома раздраженного мочевого пузыря, и/или болевого синдрома мочевого пузыря, которое было бы лишено нежелательных побочных эффектов или ограничений эффективности существующих в настоящее время терапевтических подходов.

Имеется сообщение, в котором описано, как у пациентов с интерстициальным циститом тестировали рекомбинантное человеческое антитело против ФРН (фактор роста нервов) (Dimitrakov, et al., J. Urology. Vol. 171 (4), Supplement, 363 (2004)). Хотя предметом изучения и являлась оценка эффективности и безопасности "в группе пациентов с ИЦ со значительным повреждением нерва и невропатическим болевым компонентом, для которых целый ряд предшествующих попыток лечения оказался безуспешным", в указанной публикации с использованием уровней маркера повреждения нерва были представлены только эффекты, связанные с повреждением нерва. Важно отметить, что в ней не сообщается ни о какой эффективности в лечении боли и/или симптома со стороны нижних мочевыводящих путей при указанном состоянии.

Анти-ФРН-антитело E3 было ранее описано как антитело, применимое для лечения боли, включая боль при ревматоидном артрите, боль при остеоартрите и послеоперационную боль (см., например, WO 2004/058184). Однако если принять во внимание этиологию интерстициального цистита и плохое понимание механизмов указанного состояния, нелегко предугадать, что анти-ФРН-антитело, такое как антитело E3, может быть использовано для лечения боли и/или симптома со стороны нижних мочевыводящих путей (LUTS), ассоциированных с интерстициальным циститом и/или синдромом раздраженного мочевого пузыря, и/или с болевым синдромом мочевого пузыря.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В одном из аспектов данного изобретения предложен способ лечения или профилактики боли и/или симптома со стороны нижних мочевыводящих путей (LUTS), ассоциированных с интерстициальным циститом и/или синдромом раздраженного мочевого пузыря, и/или болевым синдромом мочевого пузыря, предусматривающий введение эффективного количества антагонистического антитела против ФРН. В одном из аспектов изобретения указанное антитело

(a) связывается с ФРН с K_D, составляющей менее приблизительно 2 нМ;

(b) ингибирует зависимое от человеческого ФРН выживание тригеминальных нейронов мыши E13.5 с IC₅₀, составляющей приблизительно 100 пМ или менее, где показатель IC₅₀ измеряют в присутствии приблизительно 15 пМ человеческого ФРН; и/или

(c) ингибирует зависимое от человеческого ФРН выживание тригеминальных нейронов мыши E13.5 с IC₅₀, составляющей приблизительно 10 пМ или менее, где показатель IC₅₀ измеряют в присутствии приблизительно 1,5 пМ ФРН.

Боль, ассоциированная с интерстициальным циститом и/или синдромом раздраженного мочевого пузыря, и/или болевым синдромом мочевого пузыря, включает в себя боль в нижнем брюшном (тазовом) отделе; боль, связанную с мочевым пузырем; боль в надлобковой области; вагинальную боль; боль в пенисе, яичке, мошонке и в промежности; боль в уретре; диспареунию; боль, давление или дискомфорт, которые могут нарастать при наполнении мочевого пузыря.

Симптомы со стороны нижних мочевыводящих путей включают в себя три группы симптомов мочевыводящих путей, которые могут быть определены как симптомы накопления (раздражение), опорожнения (непроходимость) и постмочеиспускательный симптом. Симптомы, связанные с накоплением, включают в себя императивность позывов, их частоту, ночные позывы, императивное недержание и недержание мочи при напряжении, которые могут быть ассоциированы с гиперактивностью мочевого пузыря (ГАМП) [over active bladder, OAB] и доброкачественной гиперплазией предстательной железы (ДГПЖ) [benign prostatic hyperplasia, BPH]. Симптомы, связанные с опорожнением, включают в себя затрудненное начало мочеиспускания, недостаточность струи, прерывистость, растянутость и расстройство мочеиспускания. Постмочеиспускательные симптомы включают в себя отхождение мочи по каплям в конце акта мочеиспускания, отхождение мочи по каплям после мочеиспускания и ощущение неполного опорожнения.

Гиперактивность мочевого пузыря (ГАМП) определяется как императивность позывов к мочеиспусканию в сочетании с императивным недержанием или без него, обычно с повышенной частотой мочеиспускания и ночными позывами [Abrams et al., Neurourology and Urodynamics 21:167-178 (2002)]. Распространенность ГАМП у мужчин и женщин сходна, при этом в США от этого состояния страдает приблизительно 16% популяции [Stewart et al, Prevalence of Overactive Bladder in the United States: Results from the NOBLE Program; Abstract Presented at the 2^nd International Consultation on Incontinence, July 2001, Paris, France].

Термины мокрая и сухая ГАМП относятся, соответственно, к пациентам с наличием или отсутствием недержания мочи. Раньше кардинальным симптомом ГАМП считалось недержание мочи. Однако с появлением новых терминов это не имеет никакого смысла для большого числа страдающих этим заболеванием, у которых нет недержания (т.е. для пациентов с сухой ГАМП). Таким образом, в исследовании, проведенном в 2001 году Liberman et al. ['Health Related Quality of Life Among Adults with Symptoms of Overactive Bladder: Results From A US Community-Based Survey'; Urology 57(6), 1044-1050, 2001], изучали влияние всех симптомов ГАМП на качество жизни на примере местного населения в популяции США. Данное исследование показало, что индивиды, страдающие от ГАМП, и так, без какого-либо заметного непроизвольного мочеиспускания, имеют ухудшенное качество жизни по сравнению с контролем.

ДГПЖ является хронически прогрессирующим заболеванием, которое может привести к таким осложнениям как острая задержка мочи, возвратная инфекция мочевыводящих путей, камни в мочевом пузыре и почечная дисфункция. Большая частота встречаемости и средняя степень тяжести LUTS, ассоциированного с ДГПЖ, у мужчин с возрастом повышается.

ДГПЖ приводит к увеличению объема предстательной железы, вызывая обструкцию выходного потока из уретры и мочевого пузыря, а также вторичные изменения функции мочевого пузыря. Эти эффекты обнаружены как на уровне симптомов накопления (вызывающих раздражение), так и на уровне симптомов опорожнения (непроходимость).

Согласно настоящему изобретению, показано, что антагонистическое антитело против ФРН способно к ингибированию или блокированию боли и/или симптома со стороны нижних мочевыводящих путей (LUTS), ассоциированных с интерстициальным циститом и/или синдромом раздраженного мочевого пузыря, и/или болевым синдром мочевого пузыря. В некоторых воплощениях указанная боль и/или симптом со стороны нижних мочевыводящих путей облегчается(блегчаются) в течение приблизительно 24 часов после введения антагонистического антитела против ФРН. В некоторых воплощениях указанная боль и/или симптом со стороны нижних мочевыводящих путей облегчается(облегчаются) в течение приблизительно 4 дней после введения антагонистического антитела против ФРН. В некоторых воплощениях указанная боль и/или симптом со стороны нижних мочевыводящих путей облегчается(облегчаются) еще до контрольного осмотра в ходе испытаний или же в отсутствие каких-либо признаков, указывающих на то, что состояние индивида улучшилось.

В следующем аспекте данного изобретения предложен способ лечения или профилактики боли и/или симптома со стороны нижних мочевыводящих путей (LUTS), ассоциированных с интерстициальным циститом и/или синдромом раздраженного мочевого пузыря, и/или болевым синдромом мочевого пузыря, предусматривающий введение эффективного количества антагонистического антитела против ФРН, включающего в себя вариабельную область тяжелой цепи, содержащую

(a) область CDR1, представленную в SEQ ID NO: 3;

(b) область CDR2, представленную в SEQ ID NO: 4; и

(c) область CDR3, представленную в SEQ ID NO: 5.

В следующем аспекте данного изобретения предложен способ лечения или профилактики боли и/или симптома со стороны нижних мочевыводящих путей (LUTS), ассоциированных с интерстициальным циститом и/или синдромом раздраженного мочевого пузыря, и/или болевым синдромом мочевого пузыря, предусматривающий введение эффективного количества антагонистического антитела против ФРН, включающего в себя вариабельную область легкой цепи, содержащую

(a) область CDR1, представленную в SEQ ID NO: 6;

(b) область CDR2, представленную в SEQ ID NO: 7; и

(c) область CDR3, представленную в SEQ ID NO: 8.

Антагонистическое антитело против ФРН может дополнительно включать в себя вариабельную область тяжелой цепи, содержащую

(a) область CDR1, представленную в SEQ ID NO: 3;

(b) область CDR2, представленную в SEQ ID NO: 4; и

(c) область CDR3, представленную в SEQ ID NO: 5.

Антагонистическое антитело против ФРН может включать в себя вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 2, при этом указанное антитело должно специфически связываться с ФРН.

Вариабельная область тяжелой цепи и/или вариабельная область легкой цепи анти-ФРН-антитела могут содержать одну или более соответствующих мутаций рамки считывания. В одном из аспектов мутация рамки считывания может быть связана с заменой остатка в человеческой рамке считывания комплементарным остатком мышиной рамки считывания. Такая мутация может включать в себя замену V71K в вариабельной области тяжелой цепи.

Антагонистическое антитело против ФРН может включать в себя вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, и/или может включать в себя вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2.

Антагонистическое антитело против ФРН может быть антителом, содержащим аминокислотные последовательности, представленные в SEQ ID NO: 1 и 2. Антагонистическое антитело против ФРН может быть антителом, содержащим аминокислотные последовательности, представленные в SEQ ID NO: 16 и 17.

Антагонистическое антитело против ФРН может включать в себя тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 16, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 17, при этом указанное антитело должно специфически связываться с ФРН.

При этом, как определено в настоящем описании, антагонистическое антитело против ФРН может конкурировать за связывание с ФРН с другим антагонистическим антителом против ФРН. Антагонистическое антитело против ФРН может конкурировать за связывание с ФРН с антителом, включающим в себя вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2.

Антагонистическое антитело против ФРН может быть гуманизированным. Указанное антитело может быть антителом E3, которое специфически связывается с человеческим ФРН и с ФРН грызунов. Антитело E3 описано в международной заявке WO 2004/058184, содержание которой в полном объеме включено в настоящее описание в виде ссылки. Аминокислотные последовательности вариабельных областей тяжелой цепи и легкой цепи антитела E3 представлены, соответственно, в SEQ ID NO: 1 и 2 (фиг.1A и 1B в международной заявке WO 2004/058184). Области CDR антитела E3 (включая области CDR Чата и Кабат) представлены в виде диаграммы на фиг.1A и 1B в международной заявке WO 2004/058184. Аминокислотные последовательности тяжелых и легких цепей антитела E3, также как и индивидуальных удлиненных областей CDR, также приведены ниже (см. "последовательности антител" ниже). Антитело E3 является очень эффективным в блокировании ФРН и предотвращении взаимодействия с его рецептором. Антитело E3 и его мышиный предшественник, антитело 911, являются эффективными анальгетиками, как было показано на неклинических животных моделях патологической боли, включая боль при артритах, боль при злокачественной опухоли и послеоперационную боль.

В другом аспекте указанное антитело включает в себя фрагмент или область антитела E3 (которое может быть обозначено в настоящем описании просто как "E3"). В одном из аспектов указанный фрагмент является легкой цепью антитела E3, как показано на фиг.1B в международной заявке WO 2004/058184, а также здесь в последовательности SEQ ID NO: 17. В другом воплощении указанный фрагмент является тяжелой цепью антитела E3, как показано на фиг.1A в международной заявке WO 2004/058184, также как и здесь в последовательности SEQ ID NO: 16. Еще в одном воплощении указанный фрагмент содержит одну или более вариабельных областей из легкой цепи и/или тяжелой цепи антитела E3. Еще в одном воплощении указанный фрагмент содержит одну или более областей CDR из легкой цепи и/или тяжелой цепи антитела E3, как показано на фиг.1A и 1B в международной заявке WO 2004/058184 и здесь, в последовательностях SEQ ID NO: 17 и 16, соответственно.

В другом аспекте указанное антитело содержит легкую цепь, которая кодируется полинуклеотидом, который продуцируется клеткой-хозяином с номером депозита в ATCC № PTA-4893 или ATCC № PTA-4894. В другом аспекте указанное антитело содержит тяжелую цепь, которая кодируется полинуклеотидом, который продуцируется клеткой-хозяином с номером депозита в ATCC № PTA-4895. В другом аспекте указанное антитело содержит (a) легкую цепь, которая кодируется полинуклеотидом, который продуцируется клеткой-хозяином с номером депозита в ATCC № PTA-4894 или ATCC № PTA-4893; и (b) тяжелую цепь, которая кодируется полинуклеотидом, который продуцируется клеткой-хозяином с номером депозита в ATCC № PTA-4895 (здесь для удобства полинуклеотиды, продуцируемые депонированной клеткой-хозяином, обозначаются как имеющие депозитарные номера в ATCC No. PTA-4894, PTA-4893 и PTA-4895). В другом аспекте указанное антитело содержит вариабельную область легкой цепи такой легкой цепи, которая кодируется полинуклеотидом, который продуцируется клеткой-хозяином с номером депозита в ATCC № PTA-4894 или ATCC № PTA-4893. В другом аспекте указанное антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи такой тяжелой цепи, которая кодируется полинуклеотидом, который продуцируется клеткой-хозяином с номером депозита в ATCC № PTA-4895. В другом аспекте указанное антитело содержит (a) вариабельную область легкой цепи такой легкой цепи, которая кодируется полинуклеотидом, который продуцируется клеткой-хозяином с номером депозита в ATCC № PTA-4894 или ATCC № PTA-4893, и (b) вариабельную область тяжелой цепи такой тяжелой цепи, которая кодируется полинуклеотидом, который продуцируется клеткой-хозяином с номером депозита в ATCC № PTA-4895. Еще в одном аспекте указанное антитело содержит одну или более областей CDR, кодируемых (a) полинуклеотидом, который продуцируется клеткой-хозяином с номером депозита в ATCC № PTA-4894; и/или (b) тяжелую цепь, которая кодируется полинуклеотидом, который продуцируется клеткой-хозяином с номером депозита в ATCC № PTA-4895.

В некоторых воплощениях указанное антитело может быть полноразмерным антителом, которое может относиться к антителам подкласса IgG2. Указанное антитело может включать в себя константную область тяжелой цепи IgG2a человека. В некоторых воплощениях указанное антитело содержит константную область легкой каппа-цепи человека. В некоторых воплощениях указанное антитело содержит модифицированную константную область, такую как константная область, которая является иммунологически инертной, например, такой, которая не является триггером опосредованного комплементом лизиса или которая не стимулирует антитело-зависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность (ADCC, antibody-dependent cell mediated cytotoxicity). В других воплощениях константная область является модифицированной, как описано в публикациях Eur. J. Immunol. (1999) 29: 2613-2624; PCT WO 9958572. Указанное антитело может включать в себя константную область тяжелой цепи IgG2a человека, содержащую следующие мутации: от A330P331 до S330S331 (нумерация аминокислот соответствует таковой в последовательности IgG2a дикого типа).

В некоторых воплощениях указанное антитело может быть фрагментом антитела, таким как Fab- или Fab'2-фрагменты, или одноцепочечным антителом.

В другом аспекте указанное антитело содержит любой один или более из указанных ниже элементов: a) одну или более областей CDR антитела E3, представленных в SEQ ID NO: 1-8 (фиг.1A и 1B в международной заявке WO 2004/058184); b) CDR H3 из тяжелой цепи антитела E3, представленной в SEQ ID NO: 1 и 5 (фиг.1A в международной заявке WO 2004/058184); c) CDR L3 из легкой цепи антитела E3, представленной в SEQ ID NO: 2 и 8 (фиг.1B в международной заявке WO 2004/058184); d) три области CDR из легкой цепи антитела E3, представленные в SEQ ID NO: 2, 6-8 (фиг.1B в международной заявке WO 2004/058184); e) три области CDR из легкой цепи антитела E3, представленные в SEQ ID NO: 1, 3-5 (фиг.1A в международной заявке WO 2004/058184); и f) три области CDR из легкой цепи и три области CDR из тяжелой цепи антитела E3, представленного в SEQ ID NO: 1-8 (фиг.1A и 1B в международной заявке WO 2004/058184). В другом аспекте указанное антитело может содержать любой один или более из указанных ниже элементов: a) одну или более (одну, две, три, четыре, пять или шесть) областей CDR из антитела E3, представленных в SEQ ID NO: 1-8 (фиг.1A и 1B в международной заявке WO 2004/058184); b) область CDR, полученную из CDR H3 из тяжелой цепи антитела E3, представленной в SEQ ID NO: 1 и 5 (фиг.1A в международной заявке WO 2004/058184); и/или c) область CDR, полученную из CDR L3 из легкой цепи антитела E3, представленной в SEQ ID NO: 2 и 8 (фиг.1B в международной заявке WO 2004/058184). В некоторых воплощениях области CDR могут быть областями CDR Кабат, областями CDR Чата или же комбинацией областей CDR Чата и Кабат (обозначаемых здесь как «удлиненные» или «комбинированные» области CDR). В некоторых воплощениях указанные полипептиды содержат любую из описанных здесь конфигураций CDR (включая комбинации, варианты и т.д.).

В одном из аспектов указанное антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 9, в которой I34 представляет собой S, L, V, A или I; и N35 заменено на N, T или S. Здесь для удобства термины "замененный" или "является, представляет собой", в данном контексте, со ссылкой на аминокислоту, относятся к заменам аминокислоты (аминокислот) в данном положении. Следует понимать, что замещение или выборка могут относиться здесь к аминокислоте, представленной в SEQ ID.

В другом аспекте указанное антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 10, в которой M50 представляет собой M, I, G, Q, S или L; A62 представляет собой A или S; и L63 представляет собой L или V.

В другом аспекте указанное антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 11, в которой Y100 представляет собой Y, L или R; где Y101 представляет собой Y или W; где G103 представляет собой G, A или S; где T104 представляет собой T или S; где S105 представляет собой S, A или T; где Y106 представляет собой Y, R, T или M; где Y107 представляет собой Y или F; где F108 представляет собой F или W; где D109 представляет собой D, N или G; и где Y110 представляет собой Y, K, S, R или T.

В другом аспекте указанное антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 11, в которой Y100 представляет собой Y, L или R; где Y101 представляет собой Y или W; где G103 представляет собой G, A или S; где T104 представляет собой T или S; где S105 представляет собой S, A или T; где Y106 представляет собой Y, R, T или M; где Y107 представляет собой Y или F; где F108 представляет собой F или W; где D109 представляет собой S, A, C, G, D, N, T или G; и где Y110 представляет собой любую аминокислоту.

В другом аспекте указанное антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 11, в которой G98 представляет собой G, S, A, C, V, N, D или T; в которой G99 представляет собой G, S, A, C, V, N, D или T; в которой Y100 представляет собой Y, L или R; в которой Y101 представляет собой Y или W; в которой G103 представляет собой G, A или S; в которой T104 представляет собой T или S; в которой S105 представляет собой S, A или T; в которой Y106 представляет собой Y, R, T или M; в которой Y107 представляет собой Y или F; в которой F108 представляет собой F или W; в которой D109 представляет собой S, A, C, G, D, N, T или G; и в которой Y110 представляет собой любую аминокислоту.

В другом аспекте указанное антитело содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 12, в которой S26 представляет собой S или F; D28 представляет собой D, S, A или Y; и H32 представляет собой H, N или Q.

В другом аспекте указанное антитело содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 13, в которой I51 представляет собой I, T, V или A; и S56 представляет собой S или T.

В другом аспекте указанное антитело содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 14, в которой S91 представляет собой S или E; K92 представляет собой K, H, R или S; и в которой Y96 представляет собой Y или R. В другом аспекте указанное антитело содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 14, в которой S91 представляет собой S или E; K92 представляет собой любую аминокислоту; T93 представляет собой любую аминокислоту; и в которой Y96 представляет собой Y или R.

В одном из аспектов указанное антитело содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 9, в которой I34 представляет собой S, L, V, A или I; и N35 представляет собой N, T или S.

В другом аспекте указанное антитело содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 10, в которой M50 представляет собой M, I, G, Q, S или L; A62 представляет собой A или S; и L63 представляет собой L или V.

В другом аспекте указанное антитело содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 11, в которой Y100 представляет собой Y, L или R; в которой Y101 представляет собой Y или W; в которой G103 представляет собой G, A или S; в которой T104 представляет собой T или S; в которой S105 представляет собой S, A или T; в которой Y106 представляет собой Y, R, T или M; в которой Y107 представляет собой Y или F; в которой F108 представляет собой F или W; в которой D109 представляет собой D, N или G; и в которой Y110 представляет собой Y, K, S, R или T.

В другом аспекте указанное антитело содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 11, в которой Y100 представляет собой Y, L или R; в которой Y101 представляет собой Y или W; в которой G103 представляет собой G, A или S; в которой T104 представляет собой T или S; в которой S105 представляет собой S, A или T; в которой Y106 представляет собой Y, R, T или M; в которой Y107 представляет собой Y или F; в которой F108 представляет собой F или W; в которой D109 представляет собой S, A, C, G, D, N, T или G; и в которой Y110 является любой аминокислотой.

В другом аспекте указанное антитело содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 11, в которой G98 представляет собой G, S, A, C, V, N, D или T; в которой G99 представляет собой G, S, A, C, V, N, D или T; в которой Y100 представляет собой Y, L или R; в которой Y101 представляет собой Y или W; в которой G103 представляет собой G, A или S; в которой T104 представляет собой T или S; в которой S105 представляет собой S, A или T; в которой Y106 представляет собой Y, R, T или M; в которой Y107 представляет собой Y или F; в которой F108 представляет собой F или W; в которой D109 представляет собой S, A, C, G, D, N, T или G; и в которой Y110 является любой аминокислотой.

В другом аспекте указанное антитело содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 12, в которой S26 представляет собой S или F; D28 представляет собой D, S, A или Y; и H32 представляет собой H, N или Q.

В другом аспекте указанное антитело содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 13, в которой I51 представляет собой I, T, V или A; и S56 представляет собой S или T.

В другом аспекте указанное антитело содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 14, в которой S91 представляет собой S или E; K92 представляет собой K, H, R или S; и в которой Y96 представляет собой Y или R.

В другом аспекте указанное антитело содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 14, в которой S91 представляет собой S или E; K92 является любой аминокислотой; T93 является любой аминокислотой; и в которой Y96 представляет собой Y или R.

В другом аспекте указанное антитело включает в себя вариабельную область тяжелой цепи, содержащую область CDR1 с последовательностью SEQ ID NO: 9, в которой I34 представляет собой S, L, V, A или I; и N35 представляет собой N, T или S; область CDR2 с последовательностью SEQ ID NO: 10, в которой M50 представляет собой M, I, G, Q, S или L; A62 представляет собой A или S; и L63 представляет собой L или V; и область CDR3 с последовательностью SEQ ID NO: 11, в которой Y100 представляет собой Y, L или R; в которой Y101 представляет собой Y или W; в которой G103 представляет собой G, A или S; в которой T104 представляет собой T или S; в которой S105 представляет собой S, A или T; в которой Y106 представляет собой Y, R, T или M; в которой Y107 представляет собой Y или F; в которой F108 представляет собой F или W; в которой D109 представляет собой D, N или G; в которой Y110 представляет собой Y, K, S, R или T. В некоторых воплощениях вариабельная область тяжелой цепи содержит область CDR3 с последовательностью SEQ ID NO: 11, в которой Y100 представляет собой Y, L или R; в которой Y101 представляет собой Y или W; в которой G103 представляет собой G, A или S; в которой T104 представляет собой T или S; в которой S105 представляет собой S, A или T; в которой Y106 представляет собой Y, R, T или M; в которой Y107 представляет собой Y или F; в которой F108 представляет собой F или W; в которой D109 представляет собой S, A, C, G, D, N, T или G; в которой Y110 является любой аминокислотой. В других воплощениях вариабельная область тяжелой цепи содержит область CDR3 с последовательностью SEQ ID NO: 11, в которой G98 представляет собой G, S, A, C, V, N, D или T; в которой G99 представляет собой G, S, A, C, V, N, D или T; в которой Y100 представляет собой Y, L или R; в которой Y101 представляет собой Y или W; в которой G103 представляет собой G, A или S; в которой T104 представляет собой T или S; в которой S105 представляет собой S, A или T; в которой Y106 представляет собой Y, R, T или M; в которой Y107 представляет собой Y или F; в которой F108 представляет собой F или W; в которой D109 представляет собой S, A, C, G, D, N, T или G; и в которой Y110 является любой аминокислотой. В некоторых воплощениях антитело дополнительно содержит вариабельную область легкой цепи антитела.

В другом аспекте указанное антитело включает в себя вариабельную область легкой цепи, содержащую область CDR1 с последовательностью SEQ ID NO: 12, в которой S26 представляет собой S или F; D28 представляет собой D, S, A или Y; и H32 представляет собой H, N или Q; область CDR2 с последовательностью SEQ ID NO: 13, в которой I51 представляет собой I, T, V или A; и S56 представляет собой S или T; и область CDR3 с последовательностью SEQ ID NO: 14, в которой S91 представляет собой S или E; K92 представляет собой K, H, R или S; и в которой Y96 представляет собой Y или R. В некоторых воплощениях вариабельная область легкой цепи содержит область CDR3 с последовательностью SEQ ID NO: 14, в которой S91 представляет собой S или E; K92 является любой аминокислотой; T93 является любой аминокислотой; и в которой Y96 представляет собой Y или R. В некоторых воплощениях антитело дополнительно содержит вариабельную область тяжелой цепи антитела.

В другом аспекте указанное антитело включает в себя (a) вариабельную область легкой цепи, содержащую область CDR1 с последовательностью SEQ ID NO: 9, в которой I34 представляет собой S, L, V, A или I; и N35 представляет собой N, T или S; область CDR2 с последовательностью SEQ ID NO: 10, в которой M50 представляет собой M, I, G, Q, S или L; A62 представляет собой A или S; и L63 представляет собой L или V; и область CDR3 с последовательностью SEQ ID NO: 11, в которой Y100 представляет собой Y, L или R; в которой Y101 представляет собой Y или W; в которой G103 представляет собой G, A или S; в которой T104 представляет собой T или S; в которой S105 представляет собой S, A или T; в которой Y106 представляет собой Y, R, T или M; в которой Y107 представляет собой Y или F; в которой F108 представляет собой F или W; в которой D109 представляет собой D, N или G; в которой Y110 представляет собой Y, K, S, R или T; и (b) вариабельную область легкой цепи, содержащую область CDR1 с последовательностью SEQ ID NO: 12, в которой S26 представляет собой S или F; D28 представляет собой D, S, A или Y; и H32 представляет собой H, N или Q; область CDR2 с последовательностью SEQ ID NO: 13, в которой I51 представляет собой I, T, V или A; и S56 представляет собой S или T; и область CDR3 с последовательностью SEQ ID NO: 14, в которой S91 представляет собой S или E; K92 представляет собой K, H, R или S; и в которой Y96 представляет собой Y или R. В некоторых воплощениях вариабельная область легкой цепи содержит область CDR3 с последовательностью SEQ ID NO: 14, в которой S91 представляет собой S или E; K92 представляет собой любую аминокислоту; T93 представляет собой любую аминокислоту; и в которой Y96 представляет собой Y или R. В некоторых воплощениях вариабельная область тяжелой цепи содержит область CDR3 с последовательностью SEQ ID NO: 11, в которой Y100 представляет собой Y, L или R; в которой Y101 представляет собой Y или W; в которой G103 представляет собой G, A или S; в которой T104 представляет собой T или S; в которой S105 представляет собой S, A или T; в которой Y106 представляет собой Y, R, T или M; в которой Y107 представляет собой Y или F; в которой F108 представляет собой F или W; в которой D109 представляет собой S, A, C, G, D, N, T или G; в которой Y110 представляет собой любую аминокислоту. В других воплощениях вариабельная область тяжелой цепи содержит область CDR3 с последовательностью SEQ ID NO: 11, в которой G98 представляет собой G, S, A, C, V, N, D или T; в которой G99 представляет собой G, S, A, C, V, N, D или T; в которой Y100 представляет собой Y, L или R; в которой Y101 представляет собой Y или W; в которой G103 представляет собой G, A или S; в которой T104 представляет собой T или S; в которой S105 представляет собой S, A или T; в которой Y106 представляет собой Y, R, T или M; в которой Y107 представляет собой Y или F; в которой F108 представляет собой F или W; в которой D109 представляет собой S, A, C, G, D, N, T или G; и в которой Y110 представляет собой любую аминокислоту. В некоторых воплощениях указанное антитело дополнительно содержит легкую цепь антитела.

В другом аспекте указанное антитело содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 9, в которой I34 представляет собой S, L, V, A или I; и N35 представляет собой N, T или S; аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 10, в которой M50 представляет собой M, I, G, Q, S или L; A62 представляет собой A или S; и L63 представляет собой L или V; и аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 11, в которой Y100 представляет собой Y, L или R; в которой Y101 представляет собой Y или W; в которой G103 представляет собой G, A или S; в которой T104 представляет собой T или S; в которой S105 представляет собой S, A или T; в которой Y106 представляет собой Y, R, T или M; в которой Y107 представляет собой Y или F; в которой F108 представляет собой F или W; в которой D109 представляет собой D, N или G; в которой Y110 представляет собой Y, K, S, R или T. В некоторых воплощениях указанное антитело содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 11, в которой Y100 представляет собой Y, L или R; и в которой Y101 представляет собой Y или W; в которой G103 представляет собой G, A или S; в которой T104 представляет собой T или S; в которой S105 представляет собой S, A или T; в которой Y106 представляет собой Y, R, T или M; в которой Y107 представляет собой Y или F; в которой F108 представляет собой F или W; в которой D109 представляет собой S, A, C, G, D, N, T или G; и в которой Y110 представляет собой любую аминокислоту. В других воплощениях указанный полипептид содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 11, в которой G98 представляет собой G, S, A, C, V, N, D или T; в которой G99 представляет собой G, S, A, C, V, N, D или T; в которой Y100 представляет собой Y, L или R; в которой Y101 представляет собой Y или W; в которой G103 представляет собой G, A или S; в которой T104 представляет собой T или S; в которой S105 представляет собой S, A или T; в которой Y106 представляет собой Y, R, T или M; в которой Y107 представляет собой Y или F; в которой F108 представляет собой F или W; в которой D109 представляет собой S, A, C, G, D, N, T или G; и в которой Y110 представляет собой любую аминокислоту. В некоторых воплощениях указанное антитело дополнительно содержит вариабельную область легкой цепи антитела.

В другом аспекте указанное антитело содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 12, в которой S26 представляет собой S или F; D28 представляет собой D, S, A или Y; и H32 представляет собой H, N или Q; аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 13, в которой I51 представляет собой I, T, V или A; и S56 представляет собой S или T; и аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 14, в которой S91 представляет собой S или E; K92 представляет собой K, H, R или S; и в которой Y96 представляет собой Y или R. В некоторых воплощениях указанное антитело содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 14, в которой S91 представляет собой S или E; K92 представляет собой любую аминокислоту; T93 представляет собой любую аминокислоту; и в которой Y96 представляет собой Y или R. В некоторых воплощениях указанное антитело дополнительно содержит вариабельную область тяжелой цепи антитела.

В другом аспекте указанное антитело содержит (a) аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 9, в которой I34 представляет собой S, L, V, A или I; и N35 представляет собой N, T или S; аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 10, в котор