Модуляторы активности нес1 и способы для них

Модуляторы активности нес1 и способы для них

Иллюстрации

Показать все

Реферат

По данной заявке испрашивается приоритет по находящейся на совместном рассмотрении временной заявке авторов настоящего изобретения с серийным номером 61/314798, которая была подана 17 марта 2010 года.

Область изобретения

Областью изобретения являются различные соединения, композиции и способы, связанные с модулированием активности HEC1, особенно в отношении ингибирования размножения опухолевых клеток.

Уровень техники

Хотя механизмы, ассоциированные с митотической регуляцией, концептуально являются привлекательной мишенью в попытках уменьшить рост опухолевых клеток, соединения с высокой удельной активностью и селективностью и желаемым фармакологическим профилем являются труднодостижимыми. Например, на аппарат веретена деления можно осуществлять нацеливание с помощью действующих на веретено деления ядов (например, таксаны, алкалоиды барвинка и т.д.) с относительно высокой активностью, однако многие действующие на веретено деления яды являются неприемлемыми для фармацевтического вмешательства, поскольку такие яды часто являются неспецифическими.

Для увеличения специфичности лечения можно выбирать компоненты для регуляции веретена деления и кинетохора или регуляции митотической системы контроля, для которых было показано, что они являются функционально ассоциированными со злокачественной опухолью. Например, Hec1 является важным компонентом передачи сигнала в системе контроля веретена деления, который в высокой степени экспрессируется при злокачественной опухоли и помогает обеспечить правильное расхождение хромосом в процессе деления клеток. Hec1 взаимодействует с различными другими компонентами кинетохора, включая Nuf2, Spc 24, Spc25 и Zwint-1, а также с митотическими киназами Nek2 и Aurora B. Сверхэкспрессия Hec1 является частой среди большого множества злокачественных опухолей и злокачественных клеточных линий, и часто она может служить в качестве прогностического маркера при первичном раке молочной железы и других злокачественных опухолях. Исходя из кажущейся важности Hec1 при росте опухолевых клеток, используют РНКi для снижения экспрессии Hec1, и это оказалось достаточно перспективным, по меньшей мере в моделях на животных. Однако доставка миРНК in vivo с высокой специфичностью в опухоль часто является проблематичной.

Позднее были разработаны различные низкомолекулярные ингибиторы, которые препятствуют взаимодействию Nek2/Hec1. Поскольку Nek2 является регуляторным компонентом Hec1 при митозе, ожидалось, что устранение функции Hec1/Nek2 приведет к неправильному расхождению хромосом и гибели клеток. Описано несколько перспективных соединений (см. J. Med. Chem., 2009, 52 (6), pp 1757-1767, Cancer Res. 2008 Oct 15; 68(20):8393-9), которые имели значительную активность уничтожения клеток и были прямо нацелены на каскад Hec1/Nek2. Этот и все другие посторонние материалы, обсуждаемые в настоящем описании, включены в качестве ссылки в полном объеме. Когда определение или использование термина во включенной ссылке не соответствует или противоречит определению этого термина, предоставленному в настоящем описании, применяется определение этого термина, предоставленное в настоящем описании, и определение этого термина в ссылке не применяется. Однако, хотя наблюдаемая активность была по меньшей мере в некоторых случаях перспективной, тем не менее, оставались проблемы, ассоциированные с растворимостью, токсичностью и относительно высокими полумаксимальными ингибиторными концентрациями.

Таким образом, все еще остается потребность в усовершенствованных соединениях, композициях и способах для ингибирования Hec1, особенно в отношении применения таких соединений для лечения злокачественной опухоли.

Сущность изобретения

Объектом изобретения являются различные соединения, композиции и способы для ингибирования Hec1. Более конкретно, предусматриваемые соединения включают соединения формулы I

где R¹, R², R³, R⁴ и R⁵ описаны дополнительно ниже. Кроме того, особенно предпочтительные соединения имеют структуру формул II и III (где соответствующие радикалы также более подробно описаны ниже).

В одном аспекте объекта изобретения рассматриваемые соединения представляют собой ингибиторы Hec1, и/или они могут быть охарактеризованы как нарушающие взаимодействие Hec1/Nek2. Следовательно, соединения, представленные в настоящем описании, особенно пригодны для применения в качестве лекарственных средств, которые нарушают каскад митоза. Таким образом и с другой точки зрения, главным образом, рассматриваемые композиции включают фармацевтические композиции, которые содержат одно или несколько из рассматриваемых соединений в концентрации, эффективной для нарушения связывания Hec1/Nek2 у пациента, когда композицию вводят пациенту.

Таким образом, в другом аспекте объекта изобретения предусмотрен способ нарушения взаимодействия Nek2/Hec1, и он включает стадию контактирования комплекса Nek2/Hec1 с одним или несколькими соединениями, представленными в настоящем описании, в количестве, которое является эффективным для нарушения связывания Nek2/Hec1. Хотя, главным образом, предусматриваются все пути контактирования, как правило, предпочтительно, чтобы стадию контактирования комплекса Nek2/Hec1 проводили in vivo у млекопитающего, и чтобы стадию контактирования также можно было проводить в комбинации со средством, которое препятствует образованию или деградации микротрубочек.

Различные задачи, признаки, аспекты и преимущества объекта изобретения станут более понятными из представленного ниже подробного описания предпочтительных вариантов осуществления, а также из прилагаемых чертежей, на которых подобные цифры соответствуют подобным компонентам.

Краткое описание чертежей

На фиг.1A и 1B представлены таблицы, иллюстрирующие цитотоксический эффект выбранных соединений на опухолевые клетки (1A) и нормальные клетки (1B).

На фиг.2A-2D представлены фотографии вестерн-блотов, на которых представлено нарушение взаимодействия Hec1/Nek2 (2A, 2B), деградация Nek2 (2C) и нестабильность Nek2 (2D), вызванная выбранными соединениями.

На фиг.3 представлена таблица, иллюстрирующая процент митотических клеток, поврежденных рассматриваемыми соединениями.

На фиг.4 представлена таблица, иллюстрирующая высокую специфичность рассматриваемых соединений в отношении протеинкиназ.

На фиг.5A и 5B представлены графики, на которых изображен эффект выбранных соединений in vivo на объем опухоли у мышей nude.

Подробное описание

Рассматриваемые соединения

Авторы изобретения открыли, что можно получить определенные соединения формулы I, и что они имеют преимущественные свойства в качестве структур, которые препятствуют Hec1. Особенно предпочтительные соединения включают соединения формулы I

В особенно предпочтительных аспектах R¹ представляет собой водород, алкил, алкенил, алкинил, алкокси, арил, галоген, нитро, циано, циклоалкил, гетероциклоалкил, циклоалкенил, гетероциклоалкенил, OR_a, SR_a, NR_aR_b, -S(O)₂R_a, -S(O)₂NR_aR_b, -C(O)R_a, -C(O)NR_aR_b, -NR_aC(O)R_b, -NR_aS(O)₂R_b, -N=CR_aR_b или -NR_aC(O)NHR_b; R_a и R_b независимо представляют собой водород, алкил, алкенил, алкинил, арил, арилокси, алкокси, гидрокси, гетероарил, циклоалкил, гетероциклоалкил, циклоалкенил или гетероциклоалкенил, или R_a и R_b, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, представляют собой гетероарил, гетероциклоалкил или гетероциклоалкенил; R², R³ и R⁴ независимо представляют собой водород, C₁-C₆алкил, галоген или OR_a; и R⁵ представляет собой алкил, фенилалкил, гетероарилалкил, фенилалкенил, гетероарилалкенил, фенил, гетероарил, гетероциклоалкил или гетероциклоалкенил; где каждый из R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R_a и R_b независимо необязательно является замещенным. Менее предпочтительные соединения включают соединения, где (I) R¹ и R² представляют собой метил и где R³ представляет собой водород, R⁵ не является тиазолилом, N-метилимидазолилом, пиразинилом, пиридинилом, морфолинилом, фенилом или диметоксифенилом; где (II) R¹, R² и R³ представляют собой метил, R⁵ не является тиазолилом, N-метилимидазолилом, пиразинилом, пиридинилом, морфолинилом, фенилом, метоксифенилом, дигидроксифенилом, гидроксиметоксифенилом, трифторметилфенилом или диметоксифенилом; и где (III) R¹ и R² представляют собой метил и где R³ представляет собой гидроксил или метокси, R⁵ не является фенилом.

Особенно предпочтительно, чтобы R¹ представлял собой алкокси, SR_a, OR_a или -S(O)₂R_a, чтобы R_a представлял собой алкил или необязательно замещенный арил, чтобы R², R³ и R⁴ независимо представляли собой водород или C₁-C₆алкил, и чтобы R⁵ представлял собой необязательно замещенный гетероарил. Еще более предпочтительными соединениями среди них являются соединения, где R¹ представляет собой алкокси, SR_a, OR_a или -S(O)₂R_a, где R_a представляет собой алкил или необязательно замещенный арил, где R² и R³ представляют собой C₁-C₆алкил, и где R⁵ представляет собой необязательно замещенный (например, галогенированный) пиридинил. Наиболее предпочтительно, R¹ представляет собой OR_a, где R_a представляет собой необязательно замещенный арил, R² и R³ представляют собой C₁-C₆алкил, и R⁵ представляет собой необязательно замещенный пиридинил.

Следовательно, с другой точки зрения, также являются предпочтительными соединения, которые имеют структуру согласно формуле II

где X¹ и X² независимо представляют собой H, алкил, алкенил, алкинил, галоген, нитро, циано, циклоалкил, гетероциклоалкил, циклоалкенил, гетероциклоалкенил, OR_a, NR_aR_b, -S(O)₂R_a, -S(O)₂NR_aR_b, -C(O)R_a, -C(O)NR_aR_b, -NR_aC(O)R_b, -NR_aS(O)₂R_b, -N=CR_aR_b или -NR_aC(O)NHR_b; Y представляет собой CH₂, CHR_a, CR_aR_b, O, NH, NR_a, S, SO или SO₂; R¹, R² и R³ независимо представляют собой H, алкил, алкокси или галоген; n равно 0, 1 или 2; и в которых A представляет собой необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил, и наиболее предпочтительно соединение, представленное ниже

где каждый из X¹ и X² независимо необязательно является замещенным, и где R_c и R_d независимо представляют собой R_a. Среди таких соединений, кроме того, предпочтительно, чтобы Y представлял собой O, S или SO₂, и/или чтобы A представлял собой необязательно замещенный пиридинил. Наиболее часто X¹ и X² в таких соединениях независимо представляют собой H, алкил и алкокси, и n равно 0 или 1. Что касается остальных радикалов, применимы те же принципы, которые предоставлены для формулы I.

Следующие предпочтительные соединения имеют структуру формулы III

где X¹, X² и X³ независимо представляют собой H, алкил, алкенил, алкинил, галоген, нитро, циано, циклоалкил, гетероциклоалкил, циклоалкенил, гетероциклоалкенил, OR_a, NR_aR_b, -S(O)₂R_a, -S(O)₂NR_aR_b, -C(O)R_a, -C(O)NR_aR_b, -NR_aC(O)R_b, -NR_aS(O)₂R_b, -N=CR_aR_b или -NR_aC(O)NHR_b; Y представляет собой CH₂, CHR_a, CR_aR_b, O, NH, NR_a, S, SO или SO₂; R¹, R² и R³ независимо представляют собой H, алкил, алкокси или галоген; n представляет собой 0, 1 или 2; где каждый из X¹ и X² независимо необязательно является замещенным; где R_c и R_d независимо представляют собой R_a, и в которых A и Het независимо и предпочтительно представляют собой ароматический и необязательно замещенный арил или гетероарил. Среди других пригодных выборов, обычно предпочтительно, чтобы

и чтобы

Что касается остальных радикалов, применяются те же принципы, как и для формулы I. Особенно предпочтительные соединения формулы II включают соединения, в которых A представляет собой необязательно замещенный пиридинил, и/или в которых Y представляет собой O, S или SO₂.

Ввиду вышесказанного и дополнительных экспериментальных данных (см. ниже), особенно предпочтительные соединения имеют структуру, как показано ниже

Термин "алкил", как используют в рамках изобретения, относится к углеводородному радикалу, который может быть прямым, циклическим или разветвленным. Термин "алкенил" относится к алкилу, имеющему по меньшей мере одну двойную связь. Когда присутствует более одной двойной связи, предусматривается, что двойные связи могут быть сопряженными или несопряженными. Термин "алкинил", как используют в рамках изобретения, относится к алкилу, имеющему по меньшей мере одну тройную связь. Предусматриваемые алкинилы, кроме того, могут включать другую тройную связь или двойную связь, которая может быть сопряженной или может не быть сопряженной с первой тройной связью. Термин "алкокси", как используют в рамках изобретения, относится к O-алкильной группе, где "алкил" определяют, как указано выше.

"Циклоалкил", как используют в рамках изобретения, относится к неароматическому одновалентному моноциклическому или полициклическому радикалу, имеющему от 3 до 14 атомов углерода, каждый из которых может быть насыщенным или ненасыщенным, и может быть незамещенным или замещенным одним или несколькими пригодными заместителями, как определено в настоящем описании, и с которым может быть конденсирована одна или несколько арильных групп, гетероарильных групп, циклоалкильных групп или гетероциклоалкильных групп, которые сами по себе могут быть незамещенными или замещены одним или несколькими заместителями. Примеры циклоалкильных групп включают циклопропил, циклогептил, циклооктил, циклодецил, циклобутил, адамантил, норпинанил, декалинил, норборнил, циклогексил и циклопентил.

"Гетероциклоалкил", как используют в рамках изобретения, относится к неароматическому одновалентному моноциклическому или полициклическому радикалу, имеющему 1-5 гетероатомов, выбранных из азота, кислорода и серы, и он может быть незамещенным или замещен одним или несколькими пригодными заместителями, как определено в настоящем описании, и с которым может быть конденсирована одна или несколько арильных групп, гетероарильных групп, циклоалкильных групп или гетероциклоалкильных групп, которые сами по себе могут быть незамещенными или замещены одним или несколькими заместителями. Примеры гетероциклоалкильных групп включают оксиранил, пирролидинил, пиперидил, тетрагидропиран и морфолинил.

"Арил" (Ar), как используют в рамках изобретения, относится к ароматическому моноциклическому или полициклическому радикалу, содержащему, как правило, от 5 до 18 членов углеродного кольца, который может быть незамещенным или замещен одним или несколькими пригодными заместителями, как определено в настоящем описании, и с которым может быть конденсирована одна или несколько циклоалкильных групп, гетероциклоалкильных групп или гетероарильных групп, которые сами по себе могут быть незамещенными или замещены одним или несколькими пригодными заместителями. Таким образом, термин "арильная группа" включает бензильную группу (Bzl). Примеры включают фенил, бифенил, 1,2,3,4-тетрагидронафтил, нафтил, антрил и фенантрил.

"Гетероарил", как используют в рамках изобретения, относится к ароматическому моноциклическому или полициклическому радикалу, содержащему, главным образом, от 4 до 18 членов кольца, включая 1-5 гетероатомов, выбранных из азота, кислорода и серы, который может быть незамещенным или замещен одним или несколькими пригодными заместителями, как определено ниже, и с которым может быть конденсирована одна или несколько циклоалкильных групп, гетероциклоалкильных групп или арильных групп, которые сами по себе могут быть незамещенными или замещены одним или несколькими пригодными заместителями. Примеры включают тиенил, фуранил, тиазолил, триазолил, имидазолил, изоксазолил, оксадиазолил, тетразолил, пиридил, пирролил, тиадиазолил, оксадиазолил, оксатиадиазолил, тиатриазолил, пиримидинил, изохинолинил, хинолинил, нафтиридинил, фталимидил, бензимидазолил и бензоксазолил.

Термин "гетероцикл" или "гетероциклический", как используют в рамках изобретения, относится к ароматическим и неароматическим гетероциклическим группам, как правило, с 4-10 атомами, образующими кольцо, и содержащим один или несколько гетероатомов (как правило, O, S или N). Неароматические гетероциклические группы включают группы, имеющие только 4 атома в их кольцевой системе, однако ароматические гетероциклические группы, как правило, имеют по меньшей мере 5 атомов в их кольцевой системе. Примеры неароматических гетероциклических групп включают пирролидинил, тетрагидрофуранил, тетрагидротиенил, тетрагидропиранил, тетрагидротиопиранил, пиперидино, морфолино, тиоморфолино, тиоксанил, пиперазинил, азетидинил, оксетанил, тиетанил, гомопиперидинил, оксепанил, тиепанил, оксазепинил, диазепинил, тиазепинил, 1,2,3,6-тетрагидропиридинил, 2-пирролинил, 3-пирролинил, индолинил, 2H-пиранил, 4H-пиранил, диоксанил, 1,3-диоксоланил, пиразолинил, дитианил, дитиоланил, дигидропиранил, дигидротиенил, дигидрофуранил, пиразолидинил, имидазолинил, имидазолидинил, 3-азабицикло[3.1.0]гексанил, 3H-индолил и хинолизинил.

Примерами ароматических гетероциклических групп являются пиридинил, имидазолил, пиримидинил, пиразолил, триазолил, пиразинил, тетразолил, фурил, тиенил, изоксазолил, тиазолил, оксазолил, изотиазолил, пирролил, хинолинил, изохинолинил, индолил, бензимидазолил, изобензофуранил, циннолинил, индазолил, индолизинил, фталазинил, пиридазинил, триазинил, изоиндолил, птеридинил, пуринил, оксадиазолил, тиадиазолил, фуразанил, бензофуразанил, бензотиофенил, хиназолинил, бензотиазолил, бензоксазолил, хиноксалинил, нафтиридинил и фуропиридинил. Рассматриваемые 4-10-членные гетероциклы могут быть C-связанными или N-связанными (когда это целесообразно). Например, группа, образованная из пиррола, может представлять собой пиррол-1-ил (N-связанный) или пиррол-3-ил (C-связанный).

Далее, как используют в рамках изобретения, термин "замещенный", как используют в рамках изобретения, относится к замене или модификации атома (радикала) или химической группы (например, NH₂ или OH) в молекуле функциональной группой с получением замещенной молекулы, и, в частности, рассматриваемые функциональные группы включают нуклеофильные группы (например, -NH₂, -OH, -SH, -NC и т.д.), электрофильные группы (например, C(O)OR, C(O)OH и т.д.), полярные группы (например, -OH), неполярные группы (например, арил, алкил, алкенил, алкинил и т.д.), ионные группы (например, -NH₃ ⁺), и галогены (например, -F, -Cl), и все их химически допустимые комбинации. Например, когда молекула представляет собой алкил, замещенный радикал представляет собой водородный радикал, и функциональная группа представляет собой гидроксильную группу, атом H замещен OH-группой с образованием замещенного алкила. В другом примере, когда молекула представляет собой аминокислоту, модифицированная группа представляет собой аминогруппу и функциональная группа представляет собой алкильную группу, аминогруппа является алкилированной с образованием N-замещенной аминокислоты.

Например, пригодные заместители включают галоген (хлор, йод, бром или фтор); C_1-6алкил; C_1-6алкенил; C_1-6алкинил, гидроксил, C_1-6алкоксил; амино; нитро; тиол; простой тиоэфир; имин; циано; амидо; фосфонато; фосфин; карбоксил; карбонил; аминокарбонил; тиокарбонил; сульфонил; сульфонамин; сульфонамид; кетон; альдегид; сложный эфир; кислород (=O); галогеналкил (например, трифторметил); карбоциклический циклоалкил, который может быть моноциклическим или конденсированным или неконденсированным полициклическим радикалом (например, циклопропил, циклобутил, циклопентил или циклогексил), или гетероциклоалкил, который может быть моноциклическим или конденсированным или неконденсированным полициклическим радикалом (например, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил, морфолинил или тиазинил); карбоциклическим или гетероциклическим, моноциклическим или конденсированным или неконденсированным полициклическим арилом (например, фенил, нафтил, пирролил, индолил, фуранил, тиофенил, имидазолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, триазолил, тетразолил, пиразолил, пиридинил, хинолинил, изохинолинил, акридинил, пиразинил, пиридазинил, пиримидинил, бензимидазолил, бензотиофенил или бензофуранил); амино (первичный, вторичный или третичный); нитро; тиол; простой тиоэфир, O-низший алкил; O-арил, арил; арил-низший алкил; CO₂CH₃; CONH₂; OCH₂CONH₂; NH₂; SO₂NH₂; OCHF₂; CF₃; OCF₃; и т.д. Кроме того, следует отметить, что все заместители, предусматриваемые в рамках изобретения, кроме того, могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, указанными выше. Особенно предпочтительные заместители включают гидроксильные группы, галогены, оксогруппы, алкильные группы (и особенно низший алкил), ацильные группы, сульфонильные группы, меркаптогруппы, алкилтиогруппы, алкилоксильные группы, циклоалкильные группы, гетероциклоалкильные группы, арильные группы, гетероарильные группы, карбоксильные группы, аминогруппы, алкиламиногруппы, диалкиламиногруппы, карбамоильные группы, арилоксильные группы, гетероарилоксильные группы, арилтиогруппы, гетероарилтиогруппы.

Более того, должно быть понятно, что соединения согласно объекту изобретения содержат один или несколько асимметричных центров, и, таким образом, могут существовать в различных энантиомерных формах, и все энантиомерные формы рассматриваемых соединений конкретно предусмотрены в рамках изобретения. Аналогично, когда рассматриваемые соединения проявляют оптическую активность и/или имеют стереоизомеры, все случаи оптической активности и/или изомерные формы предусмотрены в рамках изобретения. Когда двойные связи отличают Z-форму от E-формы (или цис- от транс-), предусматриваются оба изомера. Более того, следует отметить, что соединения согласно объекту изобретения также могут быть изотопно меченными. Примерами пригодных изотопов являются ²H, ³H, ¹³C, ¹⁴C, ¹⁵N, ¹⁸O, ¹⁷O, ¹⁸F или ³⁶Cl. Определенные изотопно меченные соединения согласно объекту изобретения, например, соединения, в которые включен ¹⁴C или ³H, могут быть пригодны в анализах распределения в тканях лекарственного средства и/или субстрата. С другой стороны, замена нерадиоактивными изотопами (например, ²H или ¹³C) может обеспечить определенные терапевтические преимущества в результате большей метаболической стабильности, например, увеличенное время полужизни in vivo или сниженные потребности в дозировках и, таким образом, они могут быть предпочтительными в некоторых случаях.

Рассматриваемые соединения можно получать в качестве фармацевтически приемлемой соли(ей), которая, главным образом, включает соли кислотных или основных групп, которые могут присутствовать в рассматриваемых соединениях. Например, когда рассматриваемые соединения являются основными, следует отметить, что такие соединения могут образовывать различные соли с различными неорганическими и органическими кислотами. Пригодные кислоты обеспечивают фармакологически приемлемые анионы, включая хлоридный, бромидный, йодидный, нитратный, сульфатный, бисульфатный, фосфатный, кислый фосфатный, изоникотинатный, ацетатный, лактатный, салицилатный, цитратный, кислый цитратный, тартратный, пантотенатный, битартратный, аскорбатный, сукцинатный, малеатный, гентисинатный, фумаратный, глюконатный, глюкаронатный, сахаратный, формиатный, бензоатный, глутаматный, метансульфонатный, этансульфонатный, бензолсульфонатный, п-толуолсульфонатный и памоатный [1,1'-метилен-бис-(2-гидрокси-3-нафтоатный)] анионы. Аналогично, когда рассматриваемые соединения являются кислотными, следует отметить, что такие соединения могут образовывать основные соли с различными фармакологически приемлемыми катионами, и особенно пригодные катионы включают ионы щелочных металлов или щелочноземельных металлов (например, катионы натрия и калия).

В следующих предусматриваемых аспектах соединения, представленные в настоящем описании, можно получать в качестве пролекарств, и все известные формы и типы пролекарств считаются пригодными для применения в настоящем описании при условии, что такое пролекарство увеличивает концентрацию лекарственного средства (или метаболита пролекарства) в органе-мишени, клетке-мишени и/или Hec1. Например, когда рассматриваемые соединения имеют свободную амино, амидо, гидрокси, тио или карбоновую группу, предусматривается, что такие группы можно использовать для ковалентного и поддающегося высвобождению связывания группы, которая конвертирует лекарственное средство в пролекарство. Таким образом, пролекарства, в частности, включают пролекарства, в которых рассматриваемые соединения образуют сложноэфирную, амидную или дисульфидную связь с другой расщепляемой группой. Такие группы могут способствовать специфической доставке в орган или клетку лекарственного средства и, таким образом, в частности, включают лиганды рецепторов и их аналоги, фрагменты антител или другие высокоаффинные лиганды (K_d<10⁶ М).

Например, карбоксильная группа может быть образована из амида или алкильного сложного эфира, которые могут включать простую эфирную группу, аминогруппу и/или группу карбоновой кислоты. Свободные гидроксильные группы могут быть образованы с использованием гемисукцинатов, фосфатных сложных эфиров, диметиламиноацетатов и фосфорилоксиметилоксикарбонилов, как описано в D. Fleisher, R. Bong, B. H. Stewart, Advanced Drug Delivery 40 Reviews (1996) 19, 115. Также включены карбаматные пролекарства гидроксильной и аминогрупп, а также карбонатные пролекарства и сульфатные сложные эфиры гидроксильных групп. Также предусматривается преобразование гидроксильных групп в простые (ацилокси)метил- и (ацилокси)этилэфиры, где ацильная группа может представлять собой алкильный сложный эфир (необязательно замещенный), или где ацильная группа представляет собой сложный эфир аминокислоты (пролекарства этого типа описаны в R. P. Robinson et al., J. Medicinal Chemistry (1996) 39:p.10).

В следующих предусматриваемых аспектах, следует понимать, что соединения согласно объекту изобретения также могут быть активны в качестве метаболита (пролекарства или непролекарственной формы) и что все такие метаболиты конкретно предусматриваются в рамках изобретения. Например, пригодные метаболиты включают гидроксилированные формы, окисленные формы, глюкуронидированные формы, сульфатированные формы и т.д. Более того, также следует отметить, что метаболиты могут быть более активными, чем первоначально вводимая форма.

Рассматриваемые композиции и составы

Исходя из активности соединений в качестве модуляторов Hec1, авторы изобретения предполагают, что соединения и композиции согласно объекту изобретения можно использовать для профилактики и/или лечения различных заболеваний, ассоциированных с дисфункцией и/или сверхэкспрессией Hec1, и, в действительности, всех заболеваний, которые положительно отвечают на введение рассматриваемых соединений. Термин "дисфункция Hec1", как используют в рамках изобретения, относится к любому нарушению Hec1, особенно он относится к его ассоциации с функцией Nek2 и передачей сигнала системы контроля веретена деления. Такие нарушения могут быть следствием одного или нескольких из мутации (например, увеличение или снижение аффинности в отношении партнера по связыванию), временной или постоянной сверхэкспрессии (например, активированной ненадлежащим или мутантным промотором), необратимого или более прочного связывания активатора, ненадлежащей активации нефизиологической молекулой, и т.д. Следовательно, особенно предусматриваемые заболевания включают неопластические заболевания, и особенно злокачественные неопластические заболевания (например, рак молочной железы, плоскоклеточный рак, рак мочевого пузыря, рак желудка, рак поджелудочной железы, рак головы, рак шеи, рак пищевода, рак предстательной железы, рак ободочной и прямой кишки, рак легкого, рак почки, гинекологический рак или рак щитовидной железы). Незлокачественные неопластические заболевания включают гиперплазию кожи (например, псориаз) или предстательной железы (например, доброкачественная гипертрофия предстательной железы (BPH).

Таким образом, автор изобретения также предусматривает многочисленные фармацевтические композиции, которые включают соединения, представленные в настоящем описании, и, главным образом, предусматривает, что соединения согласно объекту изобретения могут быть изготовлены в виде фармацевтических композиций, которые содержат терапевтически эффективное количество рассматриваемых соединений (или их фармацевтически приемлемой соли, гидрата или пролекарства) и фармацевтически приемлемый носитель.

Активность, токсичность и другие фармакологические и фармакодинамические параметры можно устанавливать для соединений, представленных в настоящем описании, с использованием многочисленных известных протоколов. Аналогично, цитотоксичность можно устанавливать с помощью анализа MTS в различных клеточных линиях, в то время как мониторинг нарушения взаимодействия Hec1-Nek2 можно проводить с помощью коиммунопреципитации или дрожжевой двухгибридной системы. Анализ клеточного цикла можно проводить путем мониторинга различных популяций различных стадий (например, суб-G1, G0/G1, S, и т.д.), и количественное определение нарушения ориентации хромосом в метафазе можно проводить с использованием иммунофлуоресцентных способов, хорошо известных в данной области. Активность in vivo можно устанавливать с использованием различных моделей на животных и особенно моделей с ксенотрансплантатами. Иллюстративные результаты предоставлены в прилагаемой таблице и нормализованных данных. Следовательно, авторы изобретения предусматривают фармацевтическую композицию, которая включает фармацевтически приемлемый носитель и рассматриваемые в настоящем описании соединения, где соединения присутствуют в концентрации, эффективной для нарушения связывания Hec1/Nek2 у пациента, когда композицию вводят пациенту. Авторы изобретения также открыли, что многочисленные соединения согласно объекту изобретения являются биодоступными при пероральном введении и их можно выявить в сыворотке в течение длительных периодов после перорального введения или внутривенного (в/в) введения (см. ниже).

Наиболее предпочтительно, рассматриваемые соединения включают в состав с одним или несколькими нетоксичными фармацевтически приемлемыми носителями, предпочтительно их включают в состав для перорального введения в твердой или жидкой форме или для парентеральной инъекции. Таким образом, следует понимать, что фармацевтические композиции согласно объекту изобретения можно вводить человеку и другим животным с использованием различных путей, в том числе перорально, ректально, парентерально, внутрибрюшинно, вагинально или местно.

Например, пригодные фармацевтические композиции для инъекции предпочтительно содержат фармацевтически приемлемые стерильные водные или неводные растворы, дисперсии, эмульсии или суспензии, а также стерильные порошки для восстановления в стерильные инъецируемые растворы или дисперсии перед применением. Примеры пригодных водных и неводных носителей, разбавителей, растворителей или наполнителей включают воду, этанол, полиолы (например, глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль и т.д.), и их пригодные смеси, масла и инъецируемые органические сложные эфиры (например, этилолеат). Рассматриваемые композиции также могут содержать различные неактивные ингредиенты, в том числе консерванты, смачивающие вещества, эмульгаторы и/или диспергирующие средства. Стерильность можно обеспечивать путем включения антибактериальных и/или противогрибковых средств (например, парабен, фенолсорбиновая кислота, хлорбутанол и т.д.). Когда это целесообразно, могут быть включены осмотически активные средства (например, сахара, хлорид натрия и т.д.).

Альтернативно рассматриваемые композиции могут быть изготовлены в виде твердых дозированных форм для перорального введения, и, таким образом, они могут представлять собой капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В предпочтительных твердых дозированных формах рассматриваемое соединение смешивают по меньшей мере с одним из фармацевтически приемлемого эксципиента или носителя (например, цитрат натрия или дикальцийфосфат), наполнителя или разбавителя (например, крахмал, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит или кремниевая кислота), связующего вещества (например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидон, сахароза и т.д.), увлажнителя (например, глицерин), дезинтегрирующего вещества (например, агар-агар, карбонат кальция, картофельный или маниоковый крахмал, альгиновая кислота, определенные силикаты или карбонат натрия), замедлителя растворения (например, парафин), ускорителя всасывания (например, четвертичное соединение аммония), смачивающих веществ (например, цетиловый спирт и глицерин моностеарат), и абсорбентов (например, каолин или бентонитовая глина), и смазывающих веществ (например, тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия).

Твердые композиции сходного типа также можно использовать в качестве наполнителей в мягких и твердых заполненных желатиновых капсулах с использованием таких эксципиентов, как лактоза или молочный сахар, а также высокомолекулярные полиэтиленгликоли и т.д. Твердые дозированные формы в виде таблеток, драже, капсул, пилюль и гранул можно получать с покрытиями и оболочками, такими как желудочно-резистентные покрытия и другие покрытия, хорошо известные в области изготовления фармацевтических составов. Рассматриваемые композиции, кроме того, можно изготавливать так, чтобы они высвобождали активный ингредиент(ы) только, или предпочтительно, в определенной части кишечного тракта, необязательно, замедленным образом. Примеры композиций для окружения, которые можно использовать, включают полимерные вещества и воски. Рассматриваемые соединения также могут быть в микроинкапсулированной форме, в соответствующим случае, с одним или несколькими из упомянутых выше эксципиентов.

Жидкие дозированные формы для перорального введения включают фармацевтически приемлемые эмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. В дополнение к активным соединениям, жидкие дозированные формы могут содержать инертные разбавители, обычно используемые в данной области (например, воду или другой растворитель, солюбилизирующие агенты), эмульгаторы (например, этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид), масла (и, в частности, хлопковое, арахисовое, кукурузное, зародышевое, оливковое, касторовое и кунжутное масла), глицерин, тетрагидрофурфуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры жирных кислот и сорбитана, и их смеси. Помимо инертных разбавителей, пероральные композиции также могут включать адъюванты, такие как смачивающие вещества, эмульгирующие и суспендирующие вещества, подсластители, вкусовые добавки и отдушки.

Соединения согласно объекту изобретения также можно вводить в форме липосом, которые могу