Композиции, образующие перкислоту

Композиции, образующие перкислоту

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Перекрестная ссылка на родственные заявки

Настоящая заявка притязает на приоритет заявки на патент США № 61/577499, поданной 19 декабря 2011 г., которая полностью включена в настоящее описание изобретения в качестве ссылки.

Уровень техники

Существует потребность в отбеливающих полосках, предназначенных для использования в домашних условиях, которые характеризуются более низким общим содержанием пероксида и при этом обладают более высокой отбеливающей способностью.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение относится к отбеливающим полоскам, содержащим гранулированный отбеливающий ингредиент в комбинации с ферментом, обладающим пергидролитической активностью (“пергидролаза”), который включает консервативный структурный фрагмент семейства карбогидрат-эстераз 7 и донор ацильной группы, благодаря чему в процессе использования полоски пероксид, высвобождаемый гранулированным отбеливающим ингредиентом, взаимодействует с донором ацильной группы в присутствии пергидролазы с образованием перкислоты в непосредственной близости от зубов без значительного разбавления наполнителями препарата, что обеспечивает лучшее отбеливание зубов при значительно меньших общих количествах пероксида.

Полоски включают однослойную или многослойную (например, состоящую из двух слоев) адгезивную пленку, которая, гидратируя в присутствии воды или слюны, становится достаточно адгезивной и прилипает к зубам. Гранулированный отбеливающий ингредиент нанесен на пленку со стороны, контактирующей с зубами. В процессе использования полоски отбеливающий ингредиент непосредственно соприкасается с зубами (то есть располагается между зубами и адгезивным слоем). Гранулы высвобождают пероксид, быстро растворяющийся в воде. Отбеливающий ингредиент может быть необязательно покрыт быстро растворяющимся веществом, таким как сульфат натрия, кукурузный крахмал или аравийская камедь. На полоски может быть необязательно нанесен второй слой, позволяющий продлить время воздействия. Указанный второй слой может быть нерастворимым в воде, что требует удаления полоски после воздействия, или растворимым в воде, что вызывает растворение полоски после достаточного воздействия. Далее полоска включает пергидролазу (фермент, способный катализировать взаимодействие сложного эфира карбоновой кислоты и пероксида водорода с образованием перкислоты), которая также может быть нанесена в виде гранул на поверхность пленки, и донор ацильной группы, например, выбираемый из карбоновых кислот и ацильных соединений, таких как триацетин или гексаацетат сорбита, который взаимодействует с источником пероксида на полоске в присутствии пергидролазы с образованием перкислоты, усиливающей отбеливающее действие полоски.

Некоторые варианты осуществления настоящего изобретения относятся к отбеливающей зубы полоске, включающей двухстороннюю гидратируемую адгезивную пленку, на одну сторону которой нанесен гранулированный отбеливающий ингредиент, при этом отбеливающая зубы полоска далее включает нижеследующие вещества, которые находятся внутри или снаружи пленки либо нанесены на одну сторону пленки в виде гранул:

а) фермент, обладающий пергидролитической активностью и содержащий сигнатурный фрагмент семейства карбогидрат-эстераз 7 (СЕ-7), соответствующий эталонной последовательности SEQ ID NO:1, который включает:

i) фрагмент RGQ в положениях, соответствующих положениям 118-120 SEQ ID NO:1;

ii) фрагмент GXSQG в положениях, соответствующих положениям 186-190 SEQ ID NO:1, и

iii) фрагмент НЕ в положениях, соответствующих положениям 303-304 SEQ ID NO:1;

b) по меньшей мере один субстрат донора ацильной группы, выбираемый из группы, состоящей из:

i) сложных эфиров формулы

[X]_mR_5,

где Х означает сложноэфирную группу формулы R₆C(O)O;

R₆ означает C1-C7 гидрокарбильную часть с линейной, разветвленной или циклической структурой, необязательно замещенную гидроксильными группами или С1-С4 алкоксильными группами, при этом R₆, означающий С2-С7 часть, необязательно имеет одну или несколько простых эфирных связей;

R₅ означает С1-С6 гидрокарбильную часть с линейной, разветвленной или циклической структурой, пятичленную циклическую гетероароматическую часть или шестичленную циклическую ароматическую или гетероароматическую часть, необязательно замещенную гидроксильными группами, при этом каждый атом углерода в R₅ независимо включает не более одной гидроксильной группы, не более одной сложноэфирной группы или группы карбоновой кислоты и R₅ необязательно включает одну или несколько простых эфирных связей;

m является целым числом от 1 до числа атомов углерода в R₅, и растворимость указанных сложных эфиров в воде равна по меньшей мере 5 частям на миллион при 25°С;

ii) глицериды формулы:

где R₁ означает С1-С7 алкил с прямой или разветвленной цепью, необязательно замещенный гидроксилом или С1-С4 алкоксильной группой, R₃ и R₄ независимо означают Н или R₁C(O);

iii) один или несколько сложных эфиров формулы:

где R₁ означает С1-С7 алкил с прямой или разветвленной цепью, необязательно замещенный гидроксилом или С1-С4 алкоксильной группой, и R₂ означает С1-С10 алкил с прямой или разветвленной цепью, алкенил, алкинил, арил, алкиларил, алкилгетероарил, гетероарил, (СН₂СН₂О)_n или (СН₂СН(СН₃)-О)_nH, и n равно 1-10;

iv) ацетилированные сахариды, выбираемые из группы, состоящей из ацетилированных моносахаридов, ацетилированных дисахаридов и ацетилированных полисахаридов:

гидратируемая адгезивная пленка при гидратации высвобождает пероксид водорода из гранулированного отбеливающего ингредиента и указанный фермент катализирует образование эффективного количества перкислоты.

Другие варианты осуществления настоящего изобретения относятся к способу отбеливания зубов, который включает получение упаковочной системы, содержащей отбеливающую зубы полоску по любому из вышеуказанных пунктов, удаление отбеливающей зубы полоски из упаковочной системы и осуществление контактирования отбеливающей зубы полоски с зубами в течение периода времени, достаточного для отбеливания зубов, при этом отбеливающая зубы полоска гидратирует в присутствии влаги, находящейся в полости рта или на поверхности зубов, после стадии (b), но до стадии (с).

Другие области применения настоящего изобретения будут очевидны из приведенного ниже подробного описания изобретения. Следует отметить, что подробное описание изобретения и конкретные примеры, хотя и относятся к предпочтительному варианту осуществления изобретения, предназначены только для иллюстрации изобретения и не ограничивают объем изобретения.

Краткое описание биологических последовательностей

Нижеследующие последовательности соответствуют разделу 37 Свода федеральных правил, §§ 1.821-1.825 (“Требования к заявкам на патенты, содержащим описания нуклеотидных последовательностей и/или аминокислотных последовательностей - Правила представления последовательностей”), совместимы со стандартом ST.25 (2009) Всемирной организации интеллектуальной собственности (WIPO) и отвечают требованиям, предъявляемым к списку последовательностей, Европейской патентной конвенции (ЕРС) и Договора о патентной кооперации (РСТ), правила 5.2 и 49.5(а-bis), раздел 208 и приложение С административных инструкций. Символы и форма представления нуклеотидных и аминокислотных последовательностей соответствуют правилам, изложенным в разделе 37 Свода федеральных правил, § 1.822.

SEQ ID NO:1 является аминокислотной последовательностью варианта пергидролазы Thermotoga maritima C277S.

SEQ ID NO:2 является аминокислотной последовательностью гибридного белка, включающего вариант пергидролазы Thermotoga maritima C277S, связанной с доменом связывания с зубами (также известной как “EZ-7” в публикации международной заявки на патент № WO 2012/087970 A2, Butterick et al.).

SEQ ID NO:3 является последовательностью нуклеиновой кислоты, кодирующей деацетилазу цефалоспорина С из Bacillus subtilis ATCC® 31954™.

SEQ ID NO:4 является аминокислотной последовательностью деацетилазы цефалоспорина С из Bacillus subtilis ATCC® 31954™.

SEQ ID NO:5 является аминокислотной последовательностью деацетилазы цефалоспорина С из Bacillus subtilis, штамм 168 подвида subtilis.

SEQ ID NO:6 является аминокислотной последовательностью деацетилазы цефалоспорина С из B. subtilis ATCC® 6633™.

SEQ ID NO:7 является аминокислотной последовательностью деацетилазы цефалоспорина С из B. licheniformis ATCC® 14580™.

SEQ ID NO:8 является аминокислотной последовательностью ацетилксиланэстеразы из B. pumilus PS213.

SEQ ID NO:9 является аминокислотной последовательностью ацетилксиланэстеразы из Clostridium thermocellum ATCC® 27405™.

SEQ ID NO:10 является аминокислотной последовательностью ацетилксиланэстеразы из Thermotoga neapolitana.

SEQ ID NO:11 является аминокислотной последовательностью ацетилксиланэстеразы из Thermotoga maritima MSB8.

SEQ ID NO:12 является аминокислотной последовательностью ацетилксиланэстеразы из Thermoanaerobacterium sp. JW/SL YS485.

SEQ ID NO:13 является аминокислотной последовательностью деацетилазы цефалоспорина С из Bacillus halodurans C-125.

SEQ ID NO:14 является аминокислотной последовательностью деацетилазы цефалоспорина С из Bacillus clausii KSM-K16.

SEQ ID NO:15 является аминокислотной последовательностью варианта ацетилксиланэстеразы Thermotoga neapolitana из публикации заявки на патент США № 2010-0087529 (которая полностью включена в настоящее описание изобретения в качестве ссылки), где остаток Хаа в положении 277 является Ala, Val, Ser или Thr.

SEQ ID NO:16 является аминокислотной последовательностью варианта ацетилксиланэстеразы Thermotoga maritima MSB8 из публикации заявки на патент США № 2010-0087529, где остаток Хаа в положении 277 является Ala, Val, Ser или Thr.

SEQ ID NO:17 является выведенной аминокислотной последовательностью варианта ацетилксиланэстеразы Thermotoga lettingae из публикации заявки на патент США № 2010-0087529, где остаток Хаа в положении 277 является Ala, Val, Ser или Thr.

SEQ ID NO:18 является аминокислотной последовательностью варианта ацетилксиланэстеразы Thermotoga petrophila из публикации заявки на патент США № 2010-0087529, где остаток Хаа в положении 277 является Ala, Val, Ser или Thr.

SEQ ID NO:19 является аминокислотной последовательностью варианта ацетилксиланэстеразы Thermotoga sp. RQ2, выделенного из “RQ2(a)”, из публикации заявки на патент США № 2010-0087529, где остаток Хаа в положении 277 является Ala, Val, Ser или Thr.

SEQ ID NO:20 является аминокислотной последовательностью варианта ацетилксиланэстеразы Thermotoga sp. RQ2, выделенного из “RQ2(b)”, из публикации заявки на патент США № 2010-0087529, где остаток Хаа в положении 278 является Ala, Val, Ser или Thr.

SEQ ID NO:21 является аминокислотной последовательностью ацетилксиланэстеразы Thermotoga lettingae.

SEQ ID NO:22 является аминокислотной последовательностью ацетилксиланэстеразы Thermotoga petrophila.

SEQ ID NO:23 является аминокислотной последовательностью первой ацетилксиланэстеразы из Thermotoga sp. RQ2, описанной как “RQ2(a)”.

SEQ ID NO:24 является аминокислотной последовательностью второй ацетилксиланэстеразы из Thermotoga sp. RQ2, описанной как “RQ2(b)”.

SEQ ID NO:25 является аминокислотной последовательностью деацетилазы цефалоспорина С Thermoanearobacterium saccharolyticum.

SEQ ID NO:26 является аминокислотной последовательностью ацетилксиланэстеразы из Lactococcus lactis (номер доступа GENBANK® АВХ75634.1).

SEQ ID NO:27 является аминокислотной последовательностью ацетилксиланэстеразы из Mesorhizobium loti (номер доступа GENBANK® ВАВ53179.1).

SEQ ID NO:28 является аминокислотной последовательностью ацетилксиланэстеразы из Geobacillus stearothermophilus (номер доступа GENBANK® AAF70202.1).

SEQ ID NO:29-163 являются аминокислотными последовательностями пептидов, обладающих сродством к поверхности полости рта.

SEQ ID NO:164-177 являются аминокислотными последовательностями пептидных линкеров/спейсеров.

SEQ ID NO:178-197 являются аминокислотными последовательностями разных целенаправленных гибридных конструкций пергидролазы, включающих пергидролитический фермент, связанный пептидным линкером со связывающим доменом, обладающим сродством к поверхности полости рта (см. публикацию международной заявки на патент № WO 2012/087970 A2, Butterick et al.).

Подробное описание изобретения

Приведенное ниже описание предпочтительных вариантов осуществления изобретения является по сути иллюстративным и никоим образом не ограничивает изобретение или его применения.

В использованном здесь значении форма единственного числа элемента или компонента по настоящему изобретению не ограничивает количество элементов или компонентов. Поэтому форму единственного числа следует читать как один или по меньшей мере один, при этом форма единственного числа также включает множественное число за исключением случаев очевидного использования единственного числа.

В использованном здесь значении термин ”включающий” означает наличие указанных признаков, целых чисел, стадий или компонентов, приведенных в формуле изобретения, но не исключает наличия или добавления одного или нескольких других признаков, целых чисел, стадий, компонентов или групп. Термин “включающий” означает варианты, определяемые терминами “по существу состоящий из” и “состоящий из”. Аналогичным образом термин “по существу состоящий из” включает варианты, определяемые термином “состоящий из”.

В использованном здесь значении термин “примерно”, модифицирующий количество использованного ингредиента или реагента, означает варьирование количества, выраженного числовым значением, которое может иметь место, например, при использовании обычных методов измерения и работы с жидкостями, применяемых для получения концентратов или растворов, в результате возникновения непреднамеренной ошибки, различий в производственном процессе, источнике или чистоте ингредиентов, использованных при создании композиций, методах и тому подобного. Термин “примерно” также означает количества, отличающиеся из-за разных условий уравновешивания композиции вследствие использования определенной исходной смеси. Независимо от использования термина “примерно” в формуле изобретения представлены эквиваленты указанных количеств.

В указанные диапазоны входят все значения с возможностью комбинирования. Например, диапазон “1-5” включает диапазоны “1-4”, “1-3”, “1-2”, “1-2 и 4-5”, “1-3 и 5” и тому подобные.

В использованном здесь значении термины “субстрат”, “приемлемый субстрат”, “донор ацильной группы” и “субстрат сложного эфира карбоновой кислоты” взаимозаменяемо означают:

(а) один или несколько сложных эфиров формулы:

[X]_mR₅,

где Х означает сложноэфирную группу формулы R₆C(O)O;

R₆ означает C1-C7 гидрокарбильную часть с линейной, разветвленной или циклической структурой, необязательно замещенную гидроксильной группой или С1-С4 алкоксильной группой, при этом R₆, означающий С2-С7 часть, необязательно имеет одну или несколько простых эфирных связей;

R₅ означает С1-С6 гидрокарбильную часть с линейной, разветвленной или циклической структурой, пятичленную циклическую гетероароматическую часть или шестичленную циклическую ароматическую или гетероароматическую часть, необязательно замещенную гидроксильной группой, при этом каждый атом углерода в R₅ включает не более одной гидроксильной группы или не более одной сложноэфирной группы и R₅ необязательно включает одну или несколько простых эфирных связей;

m является целым числом от 1 до числа атомов углерода в R₅, и растворимость одного или нескольких указанных сложных эфиров в воде равна по меньшей мере 5 частям на миллион при 25°С;

(b) один или несколько глицеридов формулы:

где R₁ означает С1-С7 алкил с прямой или разветвленной цепью, необязательно замещенный гидроксилом или С1-С4 алкоксильной группой, R₃ и R₄ независимо означают Н или R₁C(O);

(с) один или несколько сложных эфиров формулы:

где R₁ означает С1-С7 алкил с прямой или разветвленной цепью, необязательно замещенный гидроксилом или С1-С4 алкоксильной группой, и R₂ означает С1-С10 алкил с прямой или разветвленной цепью, алкенил, алкинил, арил, алкиларил, алкилгетероарил, гетероарил, (СН₂СН₂О)_n или (СН₂СН(СН₃)-О)_nH, и n равно 1-10;

(d) один или несколько ацетилированных моносахаридов, ацетилированных дисахаридов или ацетилированных полисахаридов; либо

(е) любую комбинацию веществ по пунктам (а)-(d).

В использованном здесь значении термин “перкислота” является синонимом пероксикислоты, пероксикарбоновой кислоты, перкарбоновой кислоты и пероксоевой кислоты.

В использованном здесь значении термин “перуксусная кислота” обозначен аббревиатурой “РАА” и является синонимом пероксиуксусной кислоты, этанпероксоевой кислоты и всех других синонимов, представленных под регистрационным номером CAS 79-21-0.

В использованном здесь значении термин “моноацетин” является синонимом глицеролмоноацетата, моноацетата глицерина и глицерилмоноацетата.

В использованном здесь значении термин “диацетин” является синонимом глицеролдиацетата, диацетата глицерина, глицерилдиацетата и всех других синонимов, представленных под регистрационным номером CAS 25395-31-7.

В использованном здесь значении термин “триацетин” является синонимом триацетата глицерина, глицеролтриацетата, глицерилтриацетата, 1,2,3-триацетоксипропана, 1,2,3-пропантриолтриацетата и всех других синонимов, представленных под регистрационным номером CAS 102-76-1.

В использованном здесь значении термины “ацетилированный сахар” и “ацетилированный сахарид” означают моно-, ди- и полисахариды, включающие по меньшей мере одну ацетильную группу. Примеры указанных соединений включают, не ограничиваясь ими, пентаацетат глюкозы, тетраацетат ксилозы, ацетилированный ксилан, фрагменты ацетилированного ксилана, β-D-рибофураноза-1,2,3,5-тетраацетат, три-О-ацетил-D-галакталь и три-О-ацетилглюкаль.

В использованном здесь значении термины “гидрокарбил”, “гидрокарбильная группа” и “гидрокарбильная часть” означают прямую цепь, разветвленную цепь или циклическое расположение атомов углерода, соединенных простыми, двойными или тройными углерод-углеродными связями и/или простыми эфирными связями и замещенных соответствующим образом атомами водорода. Такие гидрокарбильные группы могут быть алифатическими и/или ароматическими. Примеры гидрокарбильных групп включают метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутил, циклопропил, циклобутил, пентил, циклопентил, метилциклопентил, гексил, циклогексил, бензил и фенил. В предпочтительном варианте осуществления изобретения гидрокарбильная часть представляет собой прямую цепь, разветвленную цепь или циклическое расположение атомов углерода, соединенных простыми углерод-углеродными связями и/или простыми эфирными связями и замещенных соответствующим образом атомами водорода.

В использованном здесь значении термины “сложные моноэфиры” и “сложные диэфиры” 1,2-этандиола, 1,2-пропандиола, 1,3-пропандиола, 1,2-бутандиола, 1,3-бутандиола, 2,3-бутандиола, 1,4-бутандиола, 1,2-пентандиола, 2,5-пентандиола, 1,5-пентандиола, 1,6-пентандиола, 1,2-гександиола, 2,5-гександиола, 1,6-гександиола и их смесей означают указанные соединения, включающие по меньшей мере одну сложноэфирную группу формулы RC(O)O, где R означает С1-С7 гидрокарбильную часть с линейной цепью. В одном варианте осуществления изобретения субстрат сложного эфира карбоновой кислоты выбирают из группы, состоящей из диацетата пропиленгликоля (PGDA), диацетата этиленгликоля (EDGA) и их смесей.

В использованном здесь значении термин “диацетат пропиленгликоля” является синонимом 1,2-диацетоксипропана, пропилендиацетата, 1,2-пропандиолдиацетата и всех других синонимов, представленных под регистрационным номером CAS 623-84-7.

В использованном здесь значении термин “диацетат этиленгликоля” является синонимом 1,2-диацетоксиэтана, этилендиацетата, диацетата гликоля и всех других синонимов, представленных под регистрационным номером CAS 111-55-7.

В использованном здесь значении термины “приемлемая реакционная смесь ферментов”, “компоненты, пригодные для образования перкислоты in situ”, “приемлемые реакционные компоненты”, “приемлемая водная реакционная смесь”, “реакционная смесь” и “компоненты, образующие перкислоту” означают вещества и воду (из слюны и/или наносимую пользователем на гидратируемую адгезивную пленку перед использованием), обеспечивающие контактирование реагентов и катализатора, являющегося пергидролитическим ферментом. Компоненты, образующие перкислоту, включают по меньшей мере один фермент, обладающий пергидролитической активностью, при этом пергидролитический фермент предпочтительно является по меньшей мере одной пергидролазой СЕ-7 (необязательно в виде гибридного белка, направленно воздействующего на поверхность тела), по меньшей мере одним приемлемым субстратом сложного эфира карбоновой кислоты, источником перкислорода, и воду (из слюны и/или наносимую пользователем на гидратируемую адгезивную пленку перед использованием).

В использованном здесь значении термин “пергидролиз” означает взаимодействие выбранного субстрата с пероксидом с образованием перкислоты. Неорганический пероксид обычно взаимодействует с выбранным субстратом в присутствии катализатора с образованием пероксикарбоновой кислоты. В использованном здесь значении термин “химический пергидролиз” означает реакции пергидролиза, при выполнении которых субстрат (предшественник пероксикарбоновой кислоты) объединяют с источником пероксида водорода, в результате чего пероксикарбоновая кислота образуется при отсутствии ферментного катализатора. В использованном здесь значении термин “ферментативный пергидролиз” означает реакции пергидролиза, при выполнении которых субстрат сложного эфира карбоновой кислоты (предшественник перкислоты; “донор ацильной группы”) объединяют с источником пероксида водорода и водой, в результате чего ферментный катализатор катализирует образование перкислоты.

В использованном здесь значении термин ”активность пергидролазы” означает активность катализатора на единицу массы (например, миллиграмм) белка, массу клетки в сухом состоянии или массу иммобилизованного катализатора.

В использованном здесь значении термин “одна единица активности фермента”, “одна единица активности” или “ед.” означает величину активности пергидролазы, необходимую для образования 1 мкмоль продукта пероксикарбоновой кислоты в минуту при определенной температуре.

В использованном здесь значении термины “ферментный катализатор” или “пергидролазный катализатор” означает катализатор, который включает фермент, обладающий активностью пергидролазы, и может представлять собой цельную микробную клетку, проницаемую микробную клетку, один или несколько компонентов экстракта микробных клеток, частично очищенный фермент или очищенный фермент. Ферментный катализатор может быть также химически модифицирован (например, путем пегилирования или взаимодействия с перекрестносшивающими реагентами). Пергидролазный катализатор может быть также иммобилизован на растворимом или нерастворимом носителе методами, хорошо известными специалистам в данной области; см., например, публикацию Immobilization of Enzymes and Cells; Gordon F. Bickerstaff, Editor; Humana Press, Totowa, NJ, USA; 1997. В одном варианте осуществления изобретения пергидролазный катализатор может быть нековалентно иммобилизован внутри или снаружи полоски для ухода за полостью рта (например, отбеливающей полоски) или на стоматологической оттискной ложке. В другом варианте осуществления изобретения нековалентная иммобилизация на полоске или стоматологической оттискной ложке может быть произведена при помощи пептидного связывающего домена, обладающего сильным сродством к материалу полоски или оттискной ложки (например, гибридный белок, включающий пергидролитический фермент, связанный при помощи необязательного пептидного спейсера с пептидным связывающим доменом). В другом варианте осуществления изобретения стоматологическая оттискная ложка является деформируемой оттискной ложкой. В другом варианте осуществления изобретения пергидролазный катализатор иммобилизован внутри или снаружи деформируемой оттискной ложки после получения оттиска зубов.

В использованном здесь значении термин “ацетилксиланэстераза” означает фермент (E.C. 3.1.1.72; AXE), который катализирует деацетилирование ацетилированных ксиланов и других ацетилированных сахаридов.

В использованном здесь значении термины “деацетилаза цефалоспорина С” и “ацетилгидролаза цефалоспорина С” означают фермент (Е.С. 3.1.1.41), который катализирует деацетилирование цефалоспоринов, таких как цефалоспорин С и 7-аминоцефалоспорановая кислота (Mitsushima et al., (1995) Appl. Env. Microbiol. 61(6): 2224-2229). Настоящее изобретение относится к аминокислотным последовательностям нескольких деацетилаз цефалоспорина С, обладающих значительной пергидролитической активностью.

В использованном здесь значении термин “Bacillus subtilis ATCC® 31954™” означает бактериальную клетку, депонированную в Американскую коллекцию типовых культур (АТСС) под номером доступа международного депозитария ATCC® 31954™. Как указано в настоящем описании изобретения, фермент, обладающий значительной активностью пергидролазы из B. subtilis ATCC® 31954™, представлен в виде SEQ ID NO:4 (см. публикацию заявки на патент США № 2010-0041752).

В использованном здесь значении термин “Thermotoga maritima MSB8” означает бактериальную клетку, которая, как известно, обладает активностью ацетилксиланэстеразы (GENBANK® NP_227893.1; см. публикацию заявки на патент США № 2008-0176299). Аминокислотная последовательность фермента, обладающего активностью пергидролазы из Thermotoga maritima MSB8, представлена в виде SEQ ID NO:11. Варианты пергидролазы Thermotoga maritima MSB8 представлены в виде SEQ ID NO:1 и 16.

В использованном здесь значении термины “молекула выделенной нуклеиновой кислоты”, “выделенный полинуклеотид” и “фрагмент выделенной нуклеиновой кислоты” имеют взаимозаменяемые значения и означают полимер РНК или одноцепочечной или двухцепочечной ДНК, необязательно содержащей синтетические, неприродные или измененные нуклеотидные основания. Молекула выделенной нуклеиновой кислоты в форме полимера ДНК может состоять из одного или нескольких сегментов кДНК, геномной ДНК или синтетической ДНК.

Термин “аминокислота” означает основную химическую структурную единицу белка или полипептида. В настоящем описании изобретения использованы следующие аббревиатуры для идентификации определенных аминокислот:

Аминокислота	Трехбуквенная аббревиатура	Однобуквенная аббревиатура
Аланин	Ala	A
Аргинин	Arg	R
Аспарагин	Asn	N
Аспарагиновая кислота	Asp	D
Цистеин	Cys	C
Глутамин	Gln	Q
Глутаминовая кислота	Glu	E
Глицин	Gly	G
Гистидин	His	H
Изолейцин	Ile	I
Лейцин	Leu	L
Лизин	Lys	K
Метионин	Met	M
Фенилаланин	Phe	F
Пролин	Pro	P
Серин	Ser	S
Треонин	Thr	T

Триптофан	Trp	W
Тирозин	Tyr	Y
Валин	Val	V
Любая аминокислота или указанная в настоящем описании изобретения	Хаа	Х

В использованном здесь значении термин “примерно”, модифицирующий количество использованного ингредиента или реагента, означает варьирование количества, выраженного числовым значением, которое может иметь место, например, при использовании обычных методов измерения и работы с жидкостями, применяемых для получения концентратов или растворов.

В использованном здесь значении термины “сигнатурный фрагмент” и “диагностический фрагмент” означают консервативные структуры, присутствующие в семействе ферментов, обладающих определенной активностью. Сигнатурный фрагмент может быть использован для определения и/или идентификации семейства структурно родственных ферментов, обладающих ферментативной активностью, подобной определенному семейству субстратов. Сигнатурный фрагмент может представлять собой одну непрерывную аминокислотную последовательность или совокупность прерывающихся консервативных фрагментов, совместно образующих сигнатурный фрагмент. Консервативный фрагмент обычно представлен аминокислотной последовательностью. В одном варианте осуществления изобретения пергидролитические ферменты, использованные в композициях и способах по настоящему изобретению, включают сигнатурный фрагмент карбогидрат-эстеразы СЕ-7.

В использованном здесь значении термин “программное обеспечение анализа последовательностей” означает любой компьютерный алгоритм или программу, используемую для анализа нуклеотидных или аминокислотных последовательностей. “Программное обеспечение анализа последовательностей” может быть коммерчески доступным или независимо разработанным. Типичное программное обеспечение анализа последовательностей может включать, не ограничиваясь ими, комплект программ GCG (Wisconsin Package Version 9.0, Accelrys Software Corp., San Diego, CA), BLASTP, BLASTN, BLASTX (Altschul et al., J. Mol. Biol. 215: 403-410 (1990)), DNASTAR (DNASTAR, Inc. 1228 S. Park St. Madison, WI 53715 USA), CLUSTALW (например, версия 1.83; Thompson et al., Nucleic Acids Research, 22(22): 4673-4680 (1994)), программу FASTA, включающую алгоритм Смита-Ватермана (W.R. Pearson, Comput. Methods Genome Res., [Proc. Int. Symp.] (1994), Meeting Date 1992, 111-20. Editor(s): Suhai, Sandor. Publisher: Plenum, New York, NY), Vector NTI (Informax, Bethesda, MD) и Sequencher v. 4.05. В контексте настоящей заявки следует отметить, что результаты анализа, выполненного при помощи программного обеспечения анализа последовательностей, будут основаны на “значениях по умолчанию” используемой программы за исключением особо оговоренных случаев. В использованном здесь значении термин “значения по умолчанию” означает любую совокупность значений или параметров, заданную изготовителем программного обеспечения, которая была введена в программное обеспечение при начальной загрузке.

Термин “поверхность тела” означает любую поверхность тела человека, которая может служить в качестве мишени для благоприятно воздействующего агента, такого как перкислота. Способы и композиции по настоящему изобретению относятся к продуктам для ухода за полостью рта и их применениям. Таким образом, поверхность тела включает вещество/поверхность полости рта. В одном варианте осуществления изобретения веществом полости рта является зубная эмаль.

В использованном здесь значении термины “отбеливание зубов” и “обесцвечивание зубов” имеют взаимозаменяемые значения и означают придание зубу или зубам большей яркости (например, отбеливание). Отбеливающие полоски по настоящему изобретению включают ингредиенты, пригодные для ферментативного образования эффективного количества перкислоты для отбеливания зубов в гидратированном состоянии.

В использованном здесь значении термин “внутренние пятна” на зубах означает изменение цвета зубов под воздействием хромогенов в эмали и дентине. У человека цвет зубов желтеет в процессе старения из-за истончения эмали и потемнения желтого дентина. Удаление внутреннего пятна обычно требует использования пероксидов или других окисляющих химических веществ, которые проникают в эмаль и обесцвечивают внутренние хромогены.

В отличие от внутренних пятен “наружные пятна” образуются на поверхности зубов при связывании экзогенных хромогенных веществ с эмалью, обычно в тонкой пленке, покрывающей зубы. У большинства людей на зубах с течением времени образуется некоторое количество некрасивых наружных пятен. Процесс образования пятен стимулируется такими факторами как: (1) потребление содержащих таннин продуктов и напитков, таких как кофе, чай или красное вино; (2) использование табачных изделий и/или (3) воздействие определенных катионных веществ (например, олова, железа и хлоргексидина). Указанные вещества сцепляются с гидроксиапатитной структурой эмали, что вызывает изменение цвета и сопутствующее уменьшение белизны зубов. В течение многих лет наружные пятна могут проникать через слой эмали и образовывать внутренние пятна.

В использованном здесь значении термин “удаление пятен” означает процесс удаление пятна с поверхности полости рта. Пятна могут быть внутренними пятнами, наружными пятнами или их комбинацией.

В использованном здесь значении термин “эффективное количество фермента пергидролазы” означает количество фермента пергидролазы, необходимое для достижения ферментативной активности, требуемой в конкретном применении. Такие эффективные количества, которые могут быть легко определены специалистом в данной области, базируются на многих факторах, таких как конкретный вариант используемого фермента.

В использованном здесь значении термин “источник перкислорода” означает соединения, способные образовывать пероксид водорода в концентрации около 1 мМ или более в водном растворе, которые включают, не ограничиваясь ими, пероксид водорода, аддукты пероксида водорода (например, аддукт мочевины и пероксида водорода (пероксид карбамида)), пербораты и перкарбонаты. Как указано в настоящем описании изобретения, источник перкислорода в отбеливающих полосках по настоящему изобретению имеет форму гранулированных частиц, которые должны быть гидратированы пользователем для высвобождения эффективного количества пероксида водорода. Как указано в настоящем описании изобретения концентрация пероксида водорода, обеспечиваемая перкислородным соединением в водном реакционном препарате, первоначально равна по меньшей мере 0,1 мМ или больше при объединении реакционных компонентов. В одном варианте осуществления изобретения концентрация пероксида водорода в водном реакционном препарате равна по меньшей мере 0,5 мМ. В одном варианте осуществления изобретения концентрация пероксида водорода в водном реакционном препарате равна по меньшей мере 1 мМ. В другом варианте осуществления изобретения концентрация пероксида водорода в водном реакционном препарате равна по меньшей мере 10 мМ. В другом варианте осуществления изобретения концентрация пероксида водорода в водном реакционном препарате равна по меньшей мере 100 мМ. В другом варианте осуществления изобретения концентрация пероксида водорода в водном реакционном препарате равна по меньшей мере 200 мМ. В другом варианте осуществления изобретения концентрация пероксида водорода в водном реакционном препарате равна 500 мМ или больше. В другом варианте осуществления изобретения концентрация пероксида водорода в водном реакционном препарате равна 1000 мМ или больше. Молярное отношение пероксида водорода к субстрату для фермента, например, триглицериду (Н₂О₂:субстрат) в препарате может составлять примерно 0,002:20, предпочтительно примерно 0,1:10 и наиболее предпочтительно примерно 0,5:5.

В использованном здесь значении термин “олигосахарид” означает соединения, содержащие от 2 до по меньшей мере 24 моносахаридных звеньев, связанных гликозидными связями. Термин “моносахарид” означает соединение эмпирической формулы (СН₂О)_n, где n≥3, углеродный остов является неразветвленным, каждый атом углерода, за исключением одного атома, содержит гидроксильную группу и оставшийся атом углерода является альдегидом или кетоном в положении атома углерода 1. Термин ”моносахарид” также означает внутриклеточные циклические формы гемиацеталей или гемикеталей.

В использованном здесь значении термин “гидратируемый адгезив” означает адгезивное вещество, способное гидратировать. Гидратируемый адгезив является по существу сухим и неадгезивным до гидратации. После гидратации гидратируемый адгезив становится достаточно липким для связывания отбеливающей зубы полоски/пленки с поверхностью зубов. Гидратируемая адгезивная пленка также включает гранулированный отбеливающий ингредиент, который в результате гидратации высвобождает эффективное коли