Способ лечения неврологических состояний сердечными гликозидами

Способ лечения неврологических состояний сердечными гликозидами

Иллюстрации

Показать все

Реферат

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к способу лечения неврологических состояний соединениями сердечных гликозидов или содержащими их препаратами. В частности, изобретение относится к способу лечения неврологического заболевания или нарушения посредством введения сердечного гликозида нуждающемуся в этом индивидууму.

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Неврологические заболевания и нарушения влияют на функционирование головного мозга. Предпринимали множество попыток разработать лечебные или смягчающие способы терапии данных заболеваний и нарушений; однако, не разрабатывали всеобъемлющую или универсальную лечебную терапию, хотя существует множество медикаментозных подходов, доказавших свою эффективность против различных заболеваний и нарушений.

Болезнь Хантингтона (HD) является наследственным заболеванием головного мозга, затрагивающим нервную систему. Оно вызвано дефектным геном, который передается от родителя к ребенку. Ген HD влияет на производство конкретного белка, известного как "хантингтин", по-видимому, являющегося ключевым для правильного развития мозга. Классические признаки HD включают эмоциональные, когнитивные и моторные нарушения. Болезнь Хантингтона характеризуется отрывистыми непроизвольными движениями (хореей), но иногда вызывает ригидность без аномальных движений, изменения в использовании конечностей (апраксию), потерю контроля функций организма и деменцию, в том числе прогрессирующее ухудшение памяти, скорости мышления, суждения и недостаточное осознание проблем и планирования. Не существует известного лечения болезни Хантингтона. Хотя существует ряд лекарственных средств для помощи в контролировании симптомов, связанных с HD, таких как эмоциональные и двигательные проблемы, не существует лечения для остановки или реверсирования течения заболевания. Болезнь Хантингтона понимают как заболевание с общей мембранной аномалией. В мембранах эритроцитов и базальных ганглиев пациентов с болезнью Хантингтона наблюдают значимо повышенные уровень и активность (10-кратное повышение) Na/K-АТФазы по сравнению с нормальными (Butterfield DA, Oeswein JQ, Prunty ME, Hisle K.C., Markesbery W.R.). Increased sodium, potassium adenosine triphosphatase activity in erythrocyte memberanes in Huntington's diseased. Ann Neurology, 4:60-62, 1978) мембранами фибробластов, полученных из кожи пациентов с болезнью Хантингтона (Schroeder F, Goetz IE, Roberts E, Membrane anomalies in Huntington's disease fibroblasts. J. Neurochem. 43: 526-539, 1984).

Болезнь Альцгеймера является формой деменции, нейродегенеративным заболеванием, поражающим мыслительные функции головного мозга (память, ориентацию, вычисление и т.д.), но обычно с сохранением его моторной функции. При болезни Альцгеймера умственные способности постепенно ухудшаются, вызывая потерю памяти, спутанность сознания, дезориентацию, нарушенное суждение и другие проблемы, которые могут влиять на способность индивидуума выполнять нормальную повседневную деятельность. Тип, тяжесть, последовательность и прогрессирование психических изменений сильно различаются. Не существует известного лечения болезни Альцгеймера и известного способа замедлять ее прогрессирование. Для некоторых людей на ранних или средних стадиях заболевания лекарственное средство, такое как такрин, может облегчать некоторые когнитивные симптомы. Арисепт (донепезил) и экселон (ривастигмин) являются обратимыми ингибиторами ацетилхолинэстеразы, предписываемыми для лечения от легкой до умеренной деменции по типу болезни Альцгеймера. Данные лекарственные средства (называемые ингибиторами холинэстераз) действуют, повышая уровни нейромедиатора ацетилхолина в головном мозге, помогая восстанавливать связь между клетками головного мозга. Некоторые лекарственные средства могут помогать контролировать поведенческие симптомы, такие как бессонница, возбуждение, бродяжничество, тревожность и депрессия. Данные способы лечения направлены на то, чтобы пациенту стало комфортнее. Хотя не известно лекарственное средство для излечения болезни Альцгеймера, ингибиторы холинэстераз могут улучшать выполнение повседневной деятельности или снижать поведенческие проблемы. Тестируемые в настоящее время лекарственные средства для лечения болезни Альцгеймера включают эстрогены, нестероидные противовоспалительные средства, витамин E, селегилин (карбекс, элдеприл) и растительный препарат гинкго билоба.

В нормальных условиях нейроны сохраняют свой мембранный потенциал покоя и функции, регулируемые мембраносвязанными, гомеостатическими, энергозависимыми Na/K-АТФазными насосами. Ишемия запускает изменения ионного гомеостаза, потенциально приводящие к необратимым повреждениям ткани. Предполагают, что нарушенная активность Na/K-АТФазы играет роль в нейропатологическом и апоптотическом процессах на некоторых моделях фокальной ишемии и травматического повреждения головного мозга. Показано, что роль Na/K-АТФазы в инсульт-опосредованном ишемическом повреждении головного мозга связана с несколькими различными молекулярными механизмами. Ингибирование каталитической активности Na/K-АТФазы может, например, приводить к снижению потребления АТФ при ишемии-реперфузии. Кроме того, удаление цитозольного Ca²⁺ может вызывать гибель нервных клеток. Таким образом, ингибирование Na/K-АТФазы, такое как ингибирование сердечными гликозидами, может приводить к повышению уровней внутриклеточного Ca²⁺ и снижению выхода внутриклеточного Ca²⁺ через Na-Ca обменник. В соответствии с этим, в нейронах гиппокампа CA1 наблюдают относительно низкие уровни внутриклеточного Ca²⁺ через три дня после транзиторной ишемии и считают, что повышение уровней кальция обеспечивает защиту от поздней гибели нейронов в широком диапазоне времени постишемического лечения.

Один из фармакологических механизмов действия сердечных гликозидов включает их способность связываться с ионообменным насосом, Na/K-АТФазой, и ингибировать активность данного конкретного фермента. Na/K-АТФаза, трансмембранный белок, катализирующий активный транспорт Na⁺ и K⁺ через цитоплазматическую мембрану, является общепризнанным фармакологическим рецептором для сердечных гликозидов. Данный фермент гидролизует АТФ и использует свободную энергию для запуска транспорта K⁺ в клетку и Na⁺ из клетки против их электрохимических градиентов (Hauptman, P. J., Garg, R., и Kelly, R. A. Cardiac glycosides in the next millennium. Prog. Cardiovasc. Dis. 41: 247-254, 1999).

Na/K-АТФаза состоит из двух гетеродимерных субъединиц, каталитической α-субъединицы и гликозилированной β-субъединицы. Также существует γ-субъединица, но она не изучена подробно. α-субъединица имеет участки связывания для АТФ, Na⁺, K⁺ и сердечных гликозидов. β-субъединица действует, стабилизируя α-субъединицу, а также может играть регуляторную роль. В клетках млекопитающих идентифицировали четыре различные α-изоформы (α1, α2, α3, α4) и три различные β-изоформы (β1, β2 и β3). Относительная экспрессия каждого типа субъединиц значимо изменяется в нормальном и патологическом состояниях. Кроме того, кажущееся сродство сердечных гликозидов к различным изоформам сильно отличается. Связывание сердечных гликозидов с изоформой α1 является меньшим, чем связывание с изоформами α2 и α3, более чувствительными к ингибированию данным типом лекарственных средств в 250 раз или больше (Blanco, G. и Mercer, R. W. Isozymes of the Na,K-ATPase: heterogeneity in structure, diversity in function. Am. J. Physiol. 275 (Renal Physiol. 44): F633-F650, 1998). Sakai et al. (FEBS Letters 563: 151-154, 2004) сообщали, что в клетках колоректального рака человека экспрессия α3-изоформы субъединицы повышена по сравнению с нормальными клетками толстого кишечника.

Существует широкий диапазон относительной водорастворимости в противоположность жирорастворимости сердечных гликозидов. В то время как большинство сердечных гликозидов может связываться с Na/K-АТФазой и ингибировать ее активность, сердечные гликозиды, относительно более водорастворимые (гидрофильные), чем жирорастворимые (липофильные или гидрофобные) обладают только ограниченной способностью преодолевать липидный барьер в головном мозге, известный как гематоэнцефалический барьер. Гематоэнцефалический барьер (ГЭБ) является границей межу циркулирующей кровью и цереброспинальной жидкостью (CSF), поддерживаемой хориоидным сплетением в центральной нервной системе (ЦНС). Эндотелиальные клетки ограничивают диффузию микроскопических объектов (например, бактерий) и больших или гидрофильных молекул в CSF, в то же время позволяя диффундировать небольшим гидрофобным молекулам (O₂, гормонам, жирорастворимым сердечным гликозидам и т.д.)

Nerium oleander является декоративным растением, широко распространенным в субтропической Азии, юго-восточной части США и Средиземноморье. Его медицинские и токсикологические свойства уже давно признаны. Его применяют, например, в лечении геморроя, язв, проказы, укусов змей и даже в вызывании абортов. Олеандрин, важный, но не единственный компонент экстракта олеандра, является сердечным гликозидом.

Экстракция гликозидов из растений видов Nerium предоставляет фармакологически/терапевтически активные ингредиенты Nerium oleander. Среди них олеандрин, нерифолин и другие соединения сердечных гликозидов. Олеандриновые экстракты, получаемые экстракцией горячей водой из Nerium oleander, продаваемые под торговой маркой ANVIRZEL™, содержат концентрированную форму или порошковую форму экстракта Nerium oleander, полученного экстракцией горячей водой. Завершена фаза I исследования экстракта олеандра, полученного экстракцией горячей водой (т.е. Anvirzel™) (Mekhail et al., Am. Soc. Clin. Oncol., vol. 20, p. 82b, 2001). Сделан вывод, что экстракт олеандра, обеспечивающий приблизительно 57 мкг олеандрина/сутки, можно безопасно вводить в дозах до 1,2 мл/м²/сутки. Не обнаруживали ограничивающую дозы токсичность.

Huachansu является экстрактом, получаемым из кожи жабы, и он содержит буфадиенолиды, такие как буфалин, сердечный гликозид. HuaChanSu является одобренным лекарственным средством для лечения злокачественных новообразований в Китае. Его применяют для лечения различных злокачественных новообразований, включая рак печени, желудка, легких, кожи и пищевода.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Изобретение относится к способу лечения неврологического состояния, включающему введение нуждающемуся в этом индивидууму композиции, содержащей сердечный гликозид в эффективном количестве, для лечения указанного неврологического состояния.

Другой аспект изобретения относится к способу лечения у нуждающегося в этом индивидуума неврологического заболевания или нарушения с этиологией, связанной с измененной активностью Na/K-АТФазы, композицией, содержащей сердечный гликозид, где способ, включает:

определение того, что индивидуум страдает неврологическим заболеванием или нарушением с этиологией, связанной с измененным отношением Na/K-АТФаза α3-изоформы и α1-изоформы субъединицы или

связанной с измененной активностью Na/K-АТФазы; и

указание по введению индивидууму композиции, содержащей сердечный гликозид.

Некоторые варианты осуществления изобретения включают варианты, где: 1) индивидууму назначают и вводят терапевтически адекватную дозу композиции, содержащей сердечный гликозид; 2) индивидууму вводят композицию, содержащую сердечный гликозид, по предписанной схеме дозирования; 3) индивидууму вводят композицию, содержащую экстракт, содержащий сердечный гликозид; 4) экстракт дополнительно содержит одно или несколько других терапевтически эффективных средств, получаемых при экстракции вместе с сердечным гликозидом; 5) экстракт дополнительно содержит одно или несколько других терапевтически эффективных средств, получаемых при экстракции вместе с сердечным гликозидом; 6) композиция дополнительно содержит один или несколько других терапевтически эффективных средств, не являющихся сердечными гликозидами; и/или 7) индивидууму вводят экстракт, полученный экстракцией горячей водой из растительного или животного источника, содержащий сердечные гликозиды, в диапазоне от 2 мг до 22,5 мг в сутки, или концентрированный экстракт (например, экстракты, полученные экстракцией сверхкритическим CO₂ или экстракцией органическими растворителями) из растительного или животного источника сердечных гликозидов в диапазоне от 0,6 до 4,8 мг, или чистую химическую форму сердечного гликозида в диапазоне от 10 до 500 мкг.

Изобретение также относится к способу лечения неврологического состояния у нуждающегося в этом индивидуума, включающему:

определение того, является ли или нет неврологическое состояние у индивидуума болезнью Альцгеймера, болезнью Хантингтона, инсультом или другим неврологическим состоянием;

указание по введению сердечного гликозида;

введение начальной дозы сердечного гликозида индивидууму по предписанной начальной схеме дозирования в течение периода времени;

периодическое определение адекватности клинического ответа и/или терапевтического ответа индивидуума на лечение сердечным гликозидом; и

если клинический ответ и/или терапевтический ответ индивидуума является адекватным, то продолжают лечение сердечным гликозидом по мере необходимости до достижения желаемой клинической конечной точки; или

если клинический ответ и/или терапевтический ответ индивидуума является неадекватным при начальной дозе и начальной схеме дозирования, то применяют повышенную или сниженную дозу до достижения желаемого клинического ответа и/или терапевтического ответа индивидуума.

Изобретение также относится к способу предотвращения или снижения частоты развития неврологического состояния в популяции индивидуумов с риском такового, где способ, включает:

введение эффективной дозы сердечного гликозида на регулярной основе в течение продолжительного периода времени одному или нескольким индивидуумам в популяции индивидуумов с риском развития неврологического состояния, такого как болезнь Альцгеймера, болезнь Хантингтона, инсульт или другое неврологическое состояние, таким образом, предотвращая или снижая частоту неврологического состояния в популяции.

Изобретение также включает варианты осуществления, где: a) способ дополнительно включает указание по введению сердечного гликозида одному или нескольким индивидуумам; b) способ дополнительно включает введение эффективной дозы сердечного гликозида индивидууму по предписанной схеме дозирования в течение периода времени; c) способ дополнительно включает периодическое определение адекватности клинического ответа и/или терапевтического ответа одного или нескольких индивидуумов на лечение сердечным гликозидом; d) если клинический ответ и/или терапевтический ответ индивидуума является адекватным, то способ дополнительно включает продолжение лечения сердечным гликозидом по мере необходимости до достижения желаемой клинической конечной точки; e) если клинический ответ и/или терапевтический ответ индивидуума является неадекватным при начальной дозе и начальной схеме дозирования, то способ дополнительно включает повышение или снижение дозы до достижения желаемого клинического ответа и/или терапевтического ответа индивидуума; f) сердечный гликозид вводят многим индивидуумам в популяции; г) регулярная основа представляет собой введение ежедневно, через день, каждый второй день, каждый третий день, каждый четвертый день, каждый пятый день, каждый шестой день, еженедельно, через неделю, каждую вторую неделю, каждую третью неделю, ежемесячно, дважды в месяц, раз в полмесяца, через месяц, каждый второй месяц, раз в квартал, через квартал, раз в триместр, сезонно, раз в полгода и/или ежегодно; h) продолжительный период представляет собой одну или несколько недель, один или несколько месяцев, один или несколько кварталов и/или один год или несколько лет; i) эффективную дозу вводят один или несколько раз в сутки; j) способ дополнительно включает идентификацию популяции индивидуумов с риском развития неврологического состояния, такого как болезнь Альцгеймера, болезнь Хантингтона, инсульт или другое неврологическое состояние; и/или k) популяция индивидуумов с риском отличается преклонным возрастом индивидуумов, семейным анамнезом неврологического состояния, генетической предрасположенностью к неврологическому состоянию, наличием и экспрессией гена ApoE4 у индивидуумов, женским полом (женщины заболевают болезнью Альцгеймера в два раза чаще мужчин), сердечно-сосудистым заболеванием (например, высоким артериальным давлением и высокими уровнями холестерина), диабетом (в особенности, типа 2 или формы данного заболевания с началом во взрослом возрасте), синдромом Дауна, повреждением головы, низким уровнем формального образования, курением, избыточным потреблением алкоголя и/или лекарственной зависимостью.

Изобретение также относится к отсроченному способу лечения инсульта у индивидуума, включающему:

введение начальной дозы сердечного гликозида по начальной схеме дозирования в течение приемлемого периода задержки после развития инсульта у индивидуума;

определение адекватности клинического ответа и/или терапевтического ответа индивидуума на лечение сердечным гликозидом; и

если клинический ответ и/или терапевтический ответ индивидуума является адекватным, то продолжают лечение сердечным гликозидом по мере необходимости до достижения желаемой клинической конечной точки; или

если клинический ответ и/или терапевтический ответ индивидуума является неадекватным при начальной дозе и начальной схеме дозирования, то повышают или снижают дозу до достижения желаемого клинического ответа и/или терапевтического ответа индивидуума.

Некоторые варианты осуществления изобретения включают варианты, где: 1) период задержки составляет 10 часов или менее, 8 часов или менее, 6 часов или менее, 4 часа или менее, 3 часа или менее, 2 часа или менее, 1 час или менее, 45 минут или менее, 30 минут или менее, 20 минут или менее или 10 мин или менее; 2) определение адекватности клинического и/или терапевтического ответа индивидуума осуществляют посредством оценки любой слабости лица, руки и/или ноги на одной стороне тела, онемения лица, руки и/или ноги на одной стороне тела, неспособности понимать устную речь, неспособности говорить или говорить четко, неспособности писать, головокружения и/или нарушения походки, двоения в глазах и необычно тяжелой головной боли; или 3) их сочетание.

Изобретение также относится к применению сердечного гликозида в производстве лекарственного средства для лечения неврологического состояния у индивидуума. В некоторых вариантах осуществления производство такого лекарственного средства включает: получение сердечного гликозида; включение дозы сердечного гликозида в фармацевтическую лекарственную форму; и упаковку фармацевтической лекарственной формы. В некоторых вариантах осуществления производство можно осуществлять, как описано в международной заявке PCT № PCT/US06/29061. Производство также может включать один или несколько дополнительных этапов, таких как: доставка упакованной лекарственной формы поставщику (оператору розничной торговли, оптовику и/или дистрибьютору); продажа или иное предоставление упакованной лекарственной формы индивидууму с неврологическим состоянием; включение в упаковку вместе с лекарственным средством ярлыка и вкладыша, представляющего инструкции по применению, схему дозирования, введения, описание содержимого и токсикологический профиль лекарственной формы. В некоторых вариантах осуществления лечение неврологического состояния включает: определение того, что индивидуум имеет неврологическое заболевание или нарушение; указание по введению сердечного гликозида индивидууму по схеме дозирования; введение индивидууму одной или нескольких фармацевтических лекарственных форм, содержащих сердечный гликозид, где одну или несколько фармацевтических лекарственных форм вводят по схеме дозирования.

Изобретение также относится к сердечному гликозиду или содержащей сердечный гликозид композиции, т.е. фармацевтическому составу или лекарственной форме, для лечения неврологического состояния. В некоторых вариантах осуществления содержащая сердечный гликозид композиция является такой, как описано в настоящем документе или в патенте США № 7402325, международной заявке PCT № PCT/US06/29061, заявке США № 12/019435, полное описание которых включено, таким образом, в качестве ссылки.

В некоторых вариантах осуществления индивидуум с неврологическим состоянием, т.е. нуждающийся в этом индивидуум, является частью популяции таких индивидуумов. Изобретение относится к способу улучшения клинического статуса статистически значимого числа индивидуумов в популяции индивидуумов с неврологическим состоянием, способ, включающий: введение популяции индивидуумов сердечного гликозида или содержащей сердечный гликозид композиции; и определение клинического статуса индивидуумов. В некоторых вариантах осуществления статистически значимое количество составляет, по меньшей мере, 5% популяции.

В некоторых вариантах осуществления неврологическое состояние является болезнью Альцгеймера, болезнью Хантингтона, инсультом или другим неврологическим состоянием, таким, как описано в настоящем документе. Лекарственное средство можно производить посредством включения сердечного гликозида в фармацевтическую лекарственную форму, содержащую один или несколько фармацевтически приемлемых эксципиентов.

Лечение индивидуума сердечным гликозидом продолжают по мере необходимости. Дозу или схему дозирования по мере необходимости можно регулировать до достижения пациентом желаемой клинической конечной точки (точек), такой как снижение или смягчение специфических неврологических симптомов, связанных с заболеванием. Определение адекватности клинического ответа и/или терапевтического ответа может осуществлять практикующий врач, хорошо знакомый с подвергаемым лечению неврологическим состоянием.

В некоторых вариантах осуществления неврологическое состояние выбрано из группы, состоящей из неврологического заболевания, неврологического нарушения и инсульта. В некоторых вариантах осуществления неврологическое заболевание является нейродегенеративным заболеванием. В некоторых вариантах осуществления нейродегенеративное заболевание выбрано из группы, состоящей из болезни Хантингтона, болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, бокового амиотрофического склероза, губчатой энцефалопатии крупного рогатого скота, рассеянного склероза, диабетической нейропатии, аутизма и ювенильного нейронального восковидного липофусциноза. В некоторых вариантах осуществления инсульт является ишемическим инсультом или инсульт-опосредованным ишемическим повреждением.

В некоторых вариантах осуществления: 1) сердечный гликозид выбран из группы, состоящей из олеандрина, уабаина, буфалина, дигитоксина, цинобуфаталина, цинобуфагина и резибуфогенина; 2) сердечный гликозид находится в чистой форме, полученной посредством экстракции из растительного или животного источника, синтезированной или произведенной посредством химической модификации (например, получения производных) доступного сердечного гликозида; 3) сердечный гликозид присутствует в экстракте; 4) сердечный гликозид присутствует в фармацевтическом составе или композиции; 5) сердечный гликозид получают из растительной массы олеандра; 6) растительная масса олеандра содержит виды Nerium, такие как Nerium oleander, или виды Thevetia, такие как Thevetia neriifolia (известный также как желтый олеандр); 7) после введения индивидууму сердечный гликозид преодолевает гематоэнцефалитический барьер (ГЭБ); 8) экстракт с сердечным гликозидом получали сверхкритической флюидной экстракцией (SCF), необязательно, в присутствие модификатора; 9) сердечный гликозид является олеандрином; 10) сердечный гликозид имеет скорость выведения для ткани головного мозга не более чем 4 л/час; и/или 11) после введения любым из путей, описываемых в настоящем документе, сердечный гликозид остается в ткани головного мозга в течение периода, по меньшей мере, 8 часов. В некоторых вариантах осуществления сердечный гликозид исключает нерифолин.

В некоторых вариантах осуществления: 1) SCF-экстракт дополнительно содержит, по меньшей мере, одно другое фармакологически активное средство помимо сердечного гликозида, указанное другое фармакологически активное средство получали вместе с сердечным гликозидом при экстракции, применяемой для получения экстракта; 2) SCF-экстракт дополнительно содержит, по меньшей мере, одно другое фармакологически активное средство, не являющееся сердечным гликозидом; 3) другое фармакологически активное средство может способствовать терапевтической эффективности сердечного гликозида при введении экстракта индивидуума; 4) другое фармакологически активное средство функционирует аддитивно или синергично, способствуя терапевтической эффективности сердечного гликозида; и/или 5) экстракт получали из кожи жабы или ее выделений.

В некоторых вариантах осуществления неврологическое состояние обладает этиологией, связанной со специфическими изменениями активности Na/K-АТФазы через повышение активности фермента, например, связанной с ювенильным аутизмом (Clin. Biochem. 2009; 42(10-11), 949-957), снижение активности фермента, например, наблюдаемое при диабетической нейропатии (Neuroscience 2009), болезни Баттена (Exp. Cell Res. 2008, 314(15):2895-2905), возрастной деменции и болезни Альцгеймера (J. Alzheimers Dis. 2008, 14(1): 85-93; Neurobiol. Aging 2007, 28(7):987-994), или конкретными мутациями структуры субъединицы Na/K-АТФазы, например, связанными с болезнью Паркинсона (Human Gen. 2009, 126(3):431-447).

Отдельные этапы способов по изобретению можно осуществлять в различных группах обслуживания или в одной группе.

В некоторых вариантах осуществления нейроны находятся in vitro, ex vivo или in vivo. В некоторых вариантах осуществления нейроны являются нейронами CA-1.

Изобретение также относится к: способу лечения неврологического состояния; способу лечения неврологического заболевания или нарушения с этиологией, связанной с измененной активностью Na/K-АТФазы, у нуждающегося в этом индивидуума; применению сердечного гликозида в производстве лекарственного средства для лечения неврологического состояния; и/или сердечному гликозиду или содержащей сердечный гликозид композиции для лечения неврологического состояния, по существу, как показано и описано в настоящем документе.

Изобретение включает все сочетания аспектов, вариантов осуществления и подвариантов осуществления описываемого в настоящем документе изобретения.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

Следующие фигуры образуют часть настоящего описания, и с их помощью описывают примеры вариантов осуществления описываемого в заявке изобретения. В свете данных фигур и описания в настоящем документе специалисты в данной области будут способны осуществлять изобретение на практике без излишнего экспериментирования.

На фиг. 1A-1C изображены результаты сравнительной оценки олеандрина и нерифолина в анализе нейропротективного действия при "инсульте" на основе срезов головного мозга (пример 8), где количество здоровых кортикальных нейронов определяют после 5-6 минут кислородного и глюкозного голодания (OGD) в присутствие или отсутствие данных средств. Представлены результаты трех независимых экспериментов.

На фиг. 1D изображены данные концентрация-ответ, полученные при сравнительной оценке олеандрина и нерифолина, контроля, в анализе нейропротективного действия при "инсульте" на основе срезов головного мозга (пример 11), где количество здоровых кортикальных нейронов определяют после 5-6 минут кислородного и глюкозного голодания (OGD) в присутствие или отсутствие данных средств.

На фиг. 1E изображены результаты анализа концентрация-ответ для содержащего олеандрин SCF-экстракта в анализе нейропротективного действия при "инсульте" на основе срезов головного мозга, как описано в настоящем документе (пример 11), где не применяли кислородное или глюкозное голодание в качестве контроля.

На фиг. 2A-2C изображены результаты сравнительной оценки олеандрина и нерифолина в анализе нейропротективного действия при "не-инсульте" на основе срезов головного мозга (пример 8), где количество здоровых кортикальных нейронов определяют без OGD в присутствие или отсутствие данных средств.

На фиг. 3A-3C изображены результаты сравнительной оценки олеандрина и олеандринового экстракта в анализе нейропротективного действия при "болезни Альцгеймера" на основе срезов головного мозга (пример 9), где количество здоровых кортикальных нейронов определяют после ΑΡΡ/Αβ-индуцированной дегенерации в присутствие или отсутствие изменяющегося количества данных средств.

На фиг. 4A-4D изображены результаты дублируемых экспериментов при сравнительной оценке олеандрина в анализе нейропротективного действия при "болезни Хантингтона" при совместном культивировании кортико-стриарных нейронов (пример 10), где процент сохраненных относительно контроля кортикальных нейронов и стриарных нейронов, трансфицированных мутантной формой белка хантингтина (htt), определяют в присутствие или отсутствие изменяющегося количества олеандрина.

На фиг. 4E изображена кривая концентрация-ответ для олеандрина в контексте его относительной способности предотвращать нейрональное повреждение и гибель по причине трансфекции болезни Хантингтона (результаты анализа in vitro; пример 10).

На фиг. 5 изображены результаты анализа отсроченного нейропротективного действия при "инсульте" на основе срезов головного мозга, как описано в настоящем документе (пример 13), где "подвергнутую инсульту" ткань головного мозга обрабатывают содержащим сердечный гликозид раствором (содержащий олеандрин SCF-экстракт) после истечения приблизительно 2, приблизительно 4 или приблизительно 6 часов после OGD.

На фиг. 6 изображен график отношения концентрация-время в плазме и ткани головного мозга для олеандрина в течение 24-часового периода после i.p. введения содержащего олеандрин SCF-экстракта (треугольники, идентификационный код: PBI-05204) и олеандрина мыши CD1 (круги). Представлена средняя концентрация +SD олеандрина в головном мозге (нг/г) и плазме (нг/мл) для 5 мышей. PBI-05204 (38 мг/кг, содержащие 0,8 мг/кг олеандрина, 50 мкл) и олеандрин (3 мг/кг, 100 мкл) растворяли в наполнителе DMSO:PEG400, 50:50 об./об. (PBI-05204, 28,6 мг/мл) или 25:75 об./об. (олеандрин, 1 мг/мл). Контрольные группы получали только наполнитель DMSO:PEG400. Через 0,5, 1, 2, 4, 8 и 24 часов плазму и ткань головного мозга собирали для анализа жидкостной хроматографией с тандемной масс-спектрометрией. Быстрое и длительное проникновение в ЦНС наблюдали после введения и PBI-05204, и олеандрина.

На фиг. 7A и 7B изображены результаты анализа нейропротективного действия на основе срезов головного мозга, проведенного, как описано в настоящем документе. На фиг. 7A изображена кривая концентрация-ответ, демонстрирующая отношение для олеандрина (серые закрашенные круги). Совокупность 6 серий экспериментов, нормализованных по различию между внутренним положительным (не-OGD) и отрицательным (OGD) контролями для каждой серии экспериментов на 100%; представлены средние + SEM. Отношение концентраций для нерифолина (не закрашенные квадраты) перепечатано из Wang et al. (Proc. Natl. Acad. Sci. USA (2006), 103(27), 10461-10466) для сравнения. На фиг. 7B изображена кривая концентрация-ответ, демонстрирующая отношение для PBI-05204 (закрашенные черным квадраты). Совокупность 13 серий экспериментов, нормализованных по различию между внутренним положительным (не-OGD) и отрицательным (OGD) контролями для каждой серии экспериментов на 100%; представлены средние + SEM. Данные из фиг. 7A для олеандрина перечерчены на фиг. 7B с учетом 3% композиции для олеандрина в экстракте PBI-05204.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Изобретение относится к способу лечения неврологического состояния введением нуждающемуся в этом индивидууму эффективной дозы сердечного гликозида. Сердечный гликозид вводят по схеме дозирования, наиболее подходящей индивидууму, пригодность дозы и схемы дозирования определяют клинически в соответствии с общепринятой клинической практикой и клиническими конечными точками лечения для подвергаемого лечению неврологического состояния.

В некоторых вариантах осуществления подвергаемое лечению нейродегенеративное нарушение или неврологическое состояние обладает этиологией, связанной со связывающей активностью Na/K-АТФазы или с нарушением регуляции Na/K-АТФазы в клетке или ткани. В некоторых вариантах осуществления подвергаемое лечению нейродегенеративное нарушение или неврологическое состояние обладает этиологией, связанной со связывающей активностью HIF-1α или с нарушением регуляции HIF-1α в клетке или ткани. Такое нарушение регуляции может происходить, например, в виде значительного изменения степени ферментативной активности. В свою очередь это может являться результатом изменения функции фермента, содержания фермента или даже его распределения в пораженной ткани.

Подвергаемый лечению индивидуум по изобретению будет проявлять терапевтический ответ. "Терапевтический ответ" означает, что индивидуум страдающий заболеванием или нарушением, получает пользу, по меньшей мере, от одного из следующих клинических преимуществ в результате лечения сердечным гликозидом: облегчения заболевания или нарушения, снижения развития симптомов, связанных с заболеванием или нарушением, частичной ремиссии заболевания или нарушения, полной ремиссии заболевания или нарушения или увеличения времени до прогрессирования. Другими словами, терапевтический ответ может являться полным или частичным терапевтическим ответом.

Терапевтический ответ также можно описывать, как ответ, при котором улучшают качество жизни пациента, страдающего нейродегенеративным заболеванием. Улучшение качества жизни может происходить, например, через снижение развития, частоты или тяжести связанных с заболеванием симптомов (например, тремора, непроизвольных сокращений мышц, потери или частичную потерю нервно-мышечной координации, сохранения в памяти и т.д.).

"Предотвращение развития неврологического состояния в популяции индивидуумов с риском" означает, что неврологическое состояние не будет возникать в течение заранее определенного периода времени в демографически заранее определенной популяции индивидуумов с риском развития неврологического состояния. Предотвращение в течение заранее определенного периода времени происходит в результате того, что индивидуумам в данной популяции вводят сердечный гликозид по способам по изобретению. Например, если содержащую сердечный гликозид композицию вводят в течение заранее определенного периода времени индивидуумам в популяции индивидуумов с риском развития инсульта, инсульт не будет возникать у тех индивидуумов в течение заранее определенного периода времени. В частности, содержащую сердечный гликозид композицию постоянно вводят в течение одного года популяции индивидуумов с риском развития болезни Альцгеймера, и индивидуумы в такой популяции не проявляют симптомы, связанные с болезнью Альцгеймера, в течение этого одного года.

"Снижение частоты развития неврологического состояния в популяции индивидуумов с риском" относится к "предотвращению повышения частоты", за исключением того, что "снижение частоты развития" допускает развитие неврологического состояния в демографически заранее определенной популяции индивидуумов, но с интенсивностью развития или уровнем тяжести, сниженными по сравнению с иной демографически схожей заранее определенной популяцией индивидуумов с риском, которым не вводят содержащую сердечный гликозид композицию по способам по изобретению.

Как применяют в настоящем документе, "время до прогрессирования" является периодом, продолжительностью или длительностью времени после диагностики (или лечения) заболевания до начала ухудшения заболевания. Оно представляет собой период времени, в течение которого уровень заболевания сохраняется без дальнейшего прогрессирования заболевания, и период времени заканчивается, когда заболевание снова начинает прогрессировать. Прогрессирование заболевания определяют по "стадийности заболевания" у индивидуума, страдающего неврологическим состоянием до терапии и