Композиции и способы полисахаридов алоэ
Иллюстрации
Показать всеИзобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к тонкозернистому порошку алоэ и его использованию. Способ приготовления тонкозернистого порошка экстракта алоэ, включающий дозирование сублимированного порошка алоэ, где сублимированный порошок алоэ имеет как минимум 25% полисахаридов алоэ; растворение сублимированного порошка алоэ в деионизированной воде для получения раствора; добавление органического растворителя в раствор для получения первой смеси; отстаивание первой смеси для образования осадка; извлечение части надосадочной жидкости из первой смеси и добавление органического растворителя в количестве, превышающем объем взятого надосадочного раствора, для получения второй смеси; обработку второй смеси в центрифуге; отслеживание появления осадка во второй смеси; добавление органического растворителя в первую смесь, если наблюдается образование любого осадка во второй смеси; сцеживание надосадочной жидкости первой смеси, где сцеживание происходит только в том случае, если не наблюдается никакой осадок во второй смеси; фильтрацию осадка из первой смеси; извлечение порошка экстракта алоэ; помещение порошка экстракта алоэ в колбу для сублимиционной сушки в морозильной установке; сублимирование замороженного порошка экстракта алоэ в сублимиционной сушке; и измельчение сублимированного порошка экстракта алоэ в аппарате для измельчения до тонкозернистой текстуры, при этом органический растворитель выбран из группы метанол, этанол, изопропиловый спирт, пропанол, при определенных условиях. Применение тонкозернистого порошка экстракта алоэ вера в изготовлении лекарственного средства с иммуномодулирующими и противораковыми свойствами. Инъекционный состав, обладающий иммуномодулирующими и противораковыми свойствами, содержащий экстракт алоэ вера и один или несколько фармацевтических консервантов. Применение инъекционного состава для изготовления лекарственного средства для лечения одного или более раковых заболеваний, выбраных из группы, включающей лейкемию, лимфому, рак простаты, рак груди и рак толстой кишки. Применение инъекционного состава для изготовления лекарственного средства для иммуномодуляции или иммуностимуляции у человека с нарушенной иммунной системой или иммунным заболеванием. Вышеописанный порошок экстракта алоэ характеризуется содержанием полисахаридов с высоким молекулярным весом, обладает выраженными иммуномодулирующими и противораковыми свойствами. 5 н. и 32 з.п. ф-лы, 7 ил., 9 табл.
Реферат
ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к области полисахаридов алоэ, и, болей конкретно, к составам полисахаридов алоэ и использованию данных составов в качестве иммуномодулирующих средств и для лечения различных видов раковых заболеваний.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Не ограничивая объем изобретения, его уровень описан в связи с составами, способами изготовления и терапевтическим использованием полисахаридов Алоэ Вера.
Патент США No. 7,196,072 опубликованный Pasco и др. (2007) описывает соединение, где фракция водорастворимого полисахарида, выделенного из Алоэ Вера, имеет иммуностимулирующее действие. Полисахаридная фракция имеет молекулярный вес около 2 миллионов Дальтон, с глюкозой, галактозой, маннозой и арабинозой в качестве ее основных компонентов. Изобретение далее описывает фармацевтические составы, содержащие растворимую полисахаридную фракцию, желательно в комбинации с подходящими фармацевтическими носителями и/или индифферентными веществами, вводимыми в лекарственную форму для придания массы. Данные фармацевтические соединения могут использоваться для обеспечения иммуностимуляции отдельному человеку с целью лечения путем введения этому индивидууму оптимального количества соединения.
Патент США No. 6,083,508, опубликованный Avalos и Danhof (2000), описывает процесс получения продукта алоэ только из вещества листа, происходящее после рассечения на сегменты листьев алоэ, которые имеют внутреннее наполнение, удаляющееся после. В соответствии с '508 патентом вещество превращается в кашицу после толчения в ступке, а продукт алоэ затем выделяется из кашицы. Дополнительно этапы изготовления продукта алоэ содержат очистку листа алоэ перед рассечением на сегменты, отделение жидкости от твердых веществ в кашице, и далее очистка выделенной жидкости для удаления слабительных веществ перед изготовлением продукта алоэ. Также, способ, включающий в себя все описанные выше этапы, может быть использован для изготовления жидкости.
Заявка на патент США No. 2006/0084629 (Needleman и Needleman, 2006) описывает соединение двух определенных фракций с высоким молекулярным весом и имеющих длинные цепочки, полученных из Алоэ Вера и грифолы курчавой, для стимулирования активности иммунной системы, содержащие длинные цепочки полисахаридов с высоким молекулярным весом, которые активируют естественную иммунную реакцию тела, запускают механизм увеличения образования макрофагов, Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов, естественных клеток-киллеров, цитокинов и антител. Эти длинные цепочки полисахаридов вместе с другими активными веществами могут обеспечить иммунной системе подходящую поддержку и, таким образом, предотвратить тяжело протекающие заболевания, такие как рак, болезни сердца и старение
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение описывает соединение полисахарида алоэ и использование соединения в качестве иммуномодулирующего вещества и при лечении различных типов раковых заболеваний, таких как лейкемия и лимфома, рак простаты, рак груди, рак толстой кишки, иммунных заболеваний, особенно опухоли с иммунной природой.
Настоящее изобретение раскрывает способ приготовления тонокозернистого порошка экстракта полиманнана, состоящего из следующих этапов: (i) дозирование определенного количества сублимированного порошка алоэ, где количество регулируется для степени увлажненности, (ii) растворение сублимированного порошка алоэ в деионизированной воде для получения раствора, (iii) добавление органического растворителя в раствор для получения первой смеси; где соотношение органического растворителя и деионизированной воды как минимум 2.5:1, (iv) первая смесь отставляется на 8 часов для образования осадка, (v) извлечение определенного объема надосадочной жидкости из первой смеси и добавление превышающего объема надосадочного раствора для получения второй смеси, (vi) обработка второй смеси в центрифуге, (vii) отслеживание появления осадка во второй смеси, (vii) добавление дополнительного количества органического растворителя в первую смесь, если наблюдается образование любого осадка во второй смеси, (viii) сцеживание надосадочной жидкости первой смеси через сифон, где сцеживание происходит только в том случае, если не наблюдается никакой осадок во второй смеси, (ix) фильтрация осадка из первой смеси с помощью фильтровальной бумаги и воронки Бюхнера в вакууме, (х) извлечение порошка экстракта полиманнана из воронки Бюхнера путем соскабливания, (xi) помещение порошка экстракта полиманнана в колбу с колпачком для сублимиционной сушки в морозильную установку как минимум на 8 часов, (xii) сублимирование замороженного порошка экстракта полиманнана в сублимиционной сушке, и (xiii) измельчение сублимированного порошка экстракта полиманнана в аппарате для измельчения до очень тонкозернистой текстуры.
Особенностью описанного способа является наличие этапов дозирования, прикрепления этикеток и хранения тонкозернистого порошка экстракта полиманнана в контейнере. Сублимированный порошок алоэ, как описано в варианте настоящего изобретения, получен из видов Алоэ, выделенных из группы, содержащей Алоэ Вера, Алоэ древовидное, Алоэ остистое, Алоэ дрожащее, Aloe nyeriensis, Алоэ тигровое, Алоэ барбадосское и Алоэ wildii. Сублимированный порошок алоэ, использующийся в настоящем изобретении, содержит полисахариды алоэ, где полисахариды алоэ содержат одну или несколько небольших, средних, больших, очень больших цепочек полисахаридов, или другие их комбинации. Одна из особенностей заключается в том, что органический растворитель выбирается из группы, состоящей из метанола, этанола, изопропилового спирта и пропанола. Другая особенность заключается в том, что полисахариды алоэ также включают в себя сахара, выбранные из группы, состоящей из глюкозы, маннозы, арабинозы и галактозы, и имеющие молекулярный вес от 11,500 Дальтон до более 10,000,000 Дальтон.
Другой особенностью являются то, что сублимированный порошок алоэ содержит как минимум 25% полисахаридов алоэ. Другой особенностью является то, что сублимированный порошок алоэ содержит 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% и 95% полисахаридов алоэ. Сублимированный порошок алоэ, как описано в способе настоящего изобретения, содержит как минимум 14% полисахаридов алоэ, имеющих молекулярный вес 66,000 Дальтон, как минимум 9% полисахаридов алое, имеющих молекулярный вес 480,000 Дальтон, как минимум 3.5% полисахаридов алоэ, имеющих молекулярный вес 1,000,000 Дальтон, как минимум 2.4% полисахаридов алоэ, имеющих молекулярный вес 2,000,000 Дальтон.
Отличительной особенностью способа является то, что соотношение соединения полисахаридов алоэ в сублимированном порошке алоэ около 1.32%-6.36% полисахаридов алоэ, имеющих молекулярный вес 2,000,000 Дальтон, 2.55%-3.89%, имеющих молекулярный вес 1,000,000, и 63.85%-73.36% полисахаридов алоэ, имеющих молекулярный вес 480,000 Дальтон. Особенность заключается в том, что сублимированный порошок алоэ может содержать один или более вид осадочных веществ с маленьким молекулярным весом, выбранных из группы, содержащей глюкозу, органические кислоты, молочную кислоту, яблочные кислоты, лимонные кислоты и аспарагиновую кислоту. Особенность заключается в том, что один или более вид осадочных веществ с маленьким молекулярным весом представлены в размере от 14%-24%. Еще одна особенность заключается в том, что тонкозернистый порошок экстракта полиманнана используется для приготовления фармацевтического соединения для использования в качестве лечения одного или более злокачественного образования, выбранного из группы, содержащей лейкемию и лимфому, рак простаты, рак груди, рак толстой кишки, и для лечения одного или более иммунологических нарушений.
В качестве варианта настоящего изобретения описывается стерильный инъекционный состав экстракта полиманнана, который содержит: определенное количество очень тонкозернистого экстракта полиманнана, растворенного в деионизированной воде, и один или несколько фармацевтических консервантов. Один или несколько фармацевтических консервантов, которые могут использоваться в составе, описанном выше, выбраны из группы, содержащей парааминобензойную кислоту, бензойную кислоту и их соли, ртутные вещества, четвертично-аммониевые соли, бензиловый спирт и другие схожие спирты, и фенолы. Важная особенность состоит в том, что консервантом является бензиловый спирт. Особенностью является то, что экстракт полиманнана содержит полисахариды алоэ, где полисахариды алоэ содержат одну или несколько небольших, средних, больших, очень больших цепочек полисахаридов, или другие их комбинации. Особенностью является то, что полисахариды алоэ также содержат простые сахара, выбранные из группы, содержащей глюкозу, маннозу, арабинозу и галактозу.
Особенностью является то, что полисахариды алоэ имеют молекулярный вес от 11,500 Дальтон до более 10,000,000 Дальтон, а экстракт полиманнана содержит как минимум 25% полисахаридов алоэ, где экстракт полиманнана содержит 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% и 95% полисахаридов алоэ. Важной особенностью является то, что экстракт полиманнана содержит как минимум 14% полисахаридов алоэ, имеющих молекулярный вес 66,000 Дальтон, как минимум 9% полисахаридов алое, имеющих молекулярный вес 480,000 Дальтон, как минимум 3.5% полисахаридов алоэ, имеющих молекулярный вес 1,000,000 Дальтон, как минимум 2.4% полисахаридов алоэ, имеющих молекулярный вес 2,000,000 Дальтон. Состав настоящего изобретения используется в лечении одного или нескольких видов раковых заболеваний, выбранных из группы, содержащей лейкемию и лимфому, рак простаты, рак груди, рак толстой кишки, для иммуномодуляции, иммуностимуляции, или для лечения человека со сниженной иммунной системой или с иммунными заболеваниями. Состав настоящего изобретения вызывает 75-80% увеличение одного или более видов натуральных клеткок-киллеров.
Еще один пример осуществления настоящего изобретения описывает лечение одного или нескольких видов раковых заболеваний, выбранных из группы, содержащей лейкемии и лимфомы, рак простаты, рак груди, рак толстой кишки, состоящее из следующих этапов: определение того, что человек нуждается в лечении одного или нескольких видов раковых заболеваний и введение стерильного инъекционного состава экстракта полиманнана два или три раза в неделю в дозировке, подходящей для лечения одного или нескольких видов раковых заболеваний, где стерильный инъекционный состав экстракта полиманнана содержит определенное количество очень тонкозернистого экстракта, растворенного в деионизированной воде; и один или несколько фармацевтических консервантов. Способ также содержит следующие этапы: извлечение образцов крови у человека в один или несколько определенных временных промежутков, и измерение уровня каспазы 3 протеина в крови, и сравнение наблюдаемого уровня с тем уровнем, который был перед инъекцией, где повышенный уровень каспазы 3 напрямую относится к повышенному уровню апоптозы одной или нескольких раковых клеток.
Особенностью является то, что дозировка стерильного инъекционного состава экстракта полиманнана основывается на весе, возрасте, этнической принадлежности и поле человека. Особенностью является то, что экстракт полиманнана содержит полисахариды алоэ, где полисахариды алоэ содержат одну или несколько небольших, средних, больших, очень больших цепочек полисахаридов, или другие их комбинации. Особенностью является то, что полисахариды алоэ имеют молекулярный вес от 11,500 Дальтон до 10,000,000 Дальтон. Экстракт полиманнана, как описано в способе настоящего изобретения, имеет как минимум 25% полисахаридов алоэ. Экстракт полиманнана в способе настоящего изобретения вызывает 75-80% увеличение одного или более видов натуральных клеткок-киллеров.
Один из вариантов настоящего изобретения описывает способ иммуномодуляци или иммуностимуляции у человека со сниженной иммунной системой или с иммунным заболеванием, содержащий следующие этапы: (i) определение сниженной иммунной системы у человека или иммунного заболевания и потребности иммуномодуляции или иммуностимуляции, (ii) введение внутривенно определенной дозы стерильного инъекционного состава экстракта полиманнана, где стерильный инъекционный состав экстракта полиманнана содержит определенное количество очень тонкозернистого экстракта полиманнана, растворенного в деионизированной воде; и один или несколько фармацевтических консервантов, где дозировка стерильного инъекционного состава экстракта полиманнана зависит от веса, возраста, этнической принадлежности и пола человека, (iii) взятие образцов крови у человека в один или несколько определенных временных промежутков, и измерение уровня фактора некроза опухоли (ФНО) альфа в крови, и сравнение наблюдаемого уровня с тем уровнем, который был перед инъекцией; где повышенный уровень фактора некроза опухоли альфа обозначает иммуномодуляцию или иммуностимуляцию. Особенностью является то, что иммунное заболевание - это опухоль с иммунной природой. Особенностью является то, что экстракт полиманнана содержит полисахариды алоэ, где полисахариды алоэ содержат одну или несколько небольших, средних, больших, очень больших цепочек полисахаридов, или другие их комбинации. Особенностью является то, что экстракт полиманнана вызывает 75-80% увеличение одного или нескольких видов натуральных клеткок-киллеров. Другой особенностью являются то, что экстракт полиманнана содержит как минимум 25% полисахаридов алоэ.
ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
Для более полного понимания характеристик и преимуществ настоящего изобретения дается ссылка на подробное описание изобретения в совокупности с прилагающимися фигурами, где:
ФИГ.1 изображает хромотограмму по размеру молекул полисахарида алоэ, показывающую время пребывания различных элементных групп глюкозы и маннозы;
ФИГ.2 изображает хромотограмму по размеру молекул полисахарида алоэ, показывающую максимальное соответствие различных элементных групп глюкозы и маннозы;
ФИГ.3 это протонная магнитно-резонансная схема экстракта полиманнана настоящего изобретения;
ФИГ.4А является высокоэффективной жидкостной хроматограммой (ВЭЖХ), показывающей количество полисахаридов в каждой полисахаридной молекулярной группе в концентрате полисахарида алоэ в осадке метилового спирта;
ФИГ.4В это протонная магнитно-резонансная схема концентрата полисахарида алоэ в осадке метилового спирта;
ФИГ.5А является высокоэффективной жидкостной хроматограммой (ВЭЖХ), показывающей количество полисахаридов в каждой полисахаридной молекулярной группе в концентрате полисахарида алоэ в осадке этилового спирта;
ФИГ.5В это протонная магнитно-резонансная схема концентрата полисахарида алоэ в осадке этилового спирта;
ФИГ.6А является высокоэффективной жидкостной хроматограммой (ВЭЖХ), показывающей количество полисахаридов в каждой полисахаридной молекулярной группе в концентрате полисахарида алоэ в осадке изопропилового спирта;
ФИГ.5В это протонная магнитно-резонансная схема концентрата полисахарида алоэ в осадке изопропилового спирта;
ФИГ.7А является высокоэффективной жидкостной хроматограммой (ВЭЖХ), показывающей количество полисахаридов в каждой полисахаридной молекулярной группе в концентрате полисахарида алоэ в осадке пропанола; и
ФИГ.7В это протонная магнитно-резонансная схема концентрата полисахарида алоэ в осадке пропанола.
Описание Изобретения
В то время, как ниже подробно рассматриваются создание и использование различных вариантов настоящего изобретения, следует понимать, что настоящее изобретение касается множества применений самой идеи изобретения, которые могут быть осуществлены в широком спектре конкретных контекстов. Конкретные варианты, обсуждаемые здесь же, являются только иллюстрациями описываемых способов для создания и использования изобретения и не определяют границы объема изобретения.
Для облегчения понимания данного изобретения ниже приведен список терминов. Термины, используемые здесь, имеют такие значения, которые были бы понятны специалисту в областях, относящихся к настоящему изобретению. Данная терминология используется, чтобы описать конкретные примеры изобретения, но их использование не определяет границы изобретения, кроме того, что подчеркнуто в формуле.
Настоящее изобретение описывает процесс изготовления экстракта полиманнана и использование указанного экстракта в виде инъекций в качестве вещества, стимулирующего иммунную систему. Иммунная стимуляция достигается при использовании макрофагов/моноцитов человеческого происхождения, и тип клетки определяется из выделения фактора некроза опухолей альфа (ФНО-α).
Полисахаридами алоэ обычно считаются такие молекулы, которые преимущественно состоят из простых сахаров глюкозы и маннозы, имеющих цепочки длиной от 10,000 Дальтон и молекулярный вес 10,000,000 Дальтон. Чем выше содержание маннозы и чем длиннее цепочка, тем сильнее выражается иммуномодуляторная активность полисахаридов. Неразветвленные цепочки различной длины таких полисахаридов алоэ представлены в Таблице 1.
Таблица 1 | |||
Составы полисахаридов алоэ и фармакологические действия | |||
# Вещества сахара | Молекулярный вес (Дальтон) | Фармакологические действия | |
Полисахариды с маленькими цепочками | 70-650 | 11,500->100,000 | ДиабетыЗадержка тирозинана (отбеливание кожи)Противовоспалительное действие (ЦОГ-2 ингибирование) |
Полисахариды со средними цепочками | 1500 | 250,000 | АнтиоксидантЗащищает сердце, легкие (эмфизема) и нервную систему (болезнь Паркинсона) |
Полисахариды с большими цепочками | 4000-5000 | 650,000 | АнтибактериальноеЗаживляющее действие |
Очень крупные полисахариды | 8000-9000 | 2,000,000-10,000,000 | Иммуномодуляторное действиеСтимуляция β-лимфоцитов с выработкой антителУвеличение уровня натуральных клеток-киллеровВыброс большого количества ФНОα вызывает регенерацию тканей в ранах и способствует заживлению |
Полисахариды алоэ с молекулярным весом 100,000 Дальтон или более представлены в Таблице 2.
Таблица 2 | ||
Составы и молекулярный вес полисахаридов алоэ, имеющих молекулярный вес от 100,000 или более | ||
Молекулярный вес (Дальтон) | Основные компоненты | |
Алоэрид | 2,000,000-10,000,000 | Арабиноза, галактоза, глюкоза, манноза |
Ацеманнан | 900,000-1,500,000 | Глюкоза, манноза |
Манапол | 500,000-900,000 | Глюкоза, манноза |
Алоэманнан | 100,000-500,000 | Глюкоза, манноза |
Предшествующий материал по экстракту полиманнана описан в предыдущем патенте (Патент США No. 6,083,508 - Avalos и Danhof, 2000), который называется "Способ Обработки Листьев Алоэ". Свидетельство изучения предшествующего материала по экстракту полиманнана представлено в Таблице 3.
ФИГ.1 изображает хромотограмму по размеру молекул полисахарида алоэ, показывающую время пребывания элементных групп глюкозы и маннозы различных размеров. ФИГ.2 изображает хромотограмму по размеру молекул полисахарида алоэ при препарировании с молекулярным весом от 100 до 10,000,000 Дальтон. ФИГ.3 это протонная магнитно-резонансная схема экстракта полиманнана настоящего изобретения. ФИГ.3 изображает: (i) отсутствие стандартных консервантов - бензоата натрия и сорбата калия, (ii) наличие меньших моногексоз, (iii) выбросы изолимонной кислоты, указывающие, что в процессе обработки сырьевого продукта алоэ используется весь лист, (iv) наличие выброса яблочной кислоты - главный показатель Алоэ вера, (v) наличие выброса алоэрида/ацеманнана в части схемы полисахарида, подтверждающее наличие больших соединений полисахарида, и (vi) присутствуют ацетильные группы, подтверждающие наличие частично ацетилированных глюкоманнанов полисахарида.
Хромотография по размеру молекул препарирования алоэ перед выделением полиманнана:
Оборудование: ВЭЖХ система это насосный механизм Hitachi L-7100 и автоматический дозатор 7250, спаренные для соединения с дифференциальным рефрактометром Waters 410. Хромотография по размеру молекул выполняется Tosoh Biosep G6000 PWXL TSK Gel 30 см×7.8 мм, работающим в нагревателе колонки при 70°С. Стандарты молекулярного веса - от сигмы до 2,000,000 Дальтон, 1,000,000 Дальтон, 480,000 Дальтон, 66,000 Дальтон и 180 Дальтон (глюкоза). Подвижная фаза - деионизированная вода со скоростью потока 0.70 мл/мин. Объем инъекции - 10 мкл. Способ хромотографии по размеру молекул описан Pugh и др. (2001).1
Таблица 3 | |||
Свидетельство об изучении предыдущего материала по экстракту полиманнана | |||
Параметры | Допустимый диапазон | Полученное значение | Оценка |
Порошок: | |||
Цвет: | От белого до светло-коричневого | Белый с металлическим оттенком | Удовлетворяет |
Характеристики: | Тонкозернистый | Тонкозернистый | Удовлетворяет |
Текучесть: | Свободнотекучий | Свободнотекучий | Удовлетворяет |
Вкус: | Соленый | Соленый | Удовлетворяет |
Тест на йод: | Отрицательный | Отрицательный | Удовлетворяет |
Влагосодержание: | 2.2-7.0% | 3.70% | Удовлетворяет |
Растворяемость: | Полная | Полная | Удовлетворяет |
Минералы: | |||
Са++ | >25 мг/г | 56.3 мг/г | Удовлетворяет |
Mg++ | >10 мг/г | 14.3 мг/г | Удовлетворяет |
Органические кислоты: | |||
Лимонная: | Присутствует | Присутствует | Удовлетворяет |
Изолимонная: | Присутствует | Присутствует | Удовлетворяет |
Молочная: | <25 мг/г | 12 м.д | Удовлетворяет |
Яблочная: | >250 мг/г | 410 мг/г | Удовлетворяет |
Антрохиноны: | |||
Алоин А: | <0.05 м.д | 0.02 м.д | Удовлетворяет |
Алоин В: | <0.03 м.д | 0.01 м.д | Удовлетворяет |
Алоэ-эмодин: | <0.02 м.д | 0.005 м.д | Удовлетворяет |
Эмодин: | <0.01 м.д | 0.001 м.д | Удовлетворяет |
Градус Брикса: | <0.1 | Отсутствует | Удовлетворяет |
Таблица 4 | |||||
Результаты хромотографии по размеру молекул препарирования алоэ перед выделением полиманнана | |||||
Алоэ | |||||
#09116 | |||||
Время отстаивания | Показатель преломления | Площадь | Σ Площади | % Площади | Молекулярный размер |
0:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
1:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
1:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
2:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
2:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
3:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
3:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
4:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
4:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
5:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
5:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
6:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
6:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
7:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
7:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
8:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
8:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
9:00 | 0 0000 | 0.0000 | |||
9:30 | 0.0010 | 0.0014 | |||
10:00 | 0.0020 | 0.0046 | |||
10:30 | 0.0015 | 0.0058 | 0.012 | 2.44% | 2×106 |
11:00 | 0.0010 | 0.0042 | |||
11:30 | 0.0015 | 0.0039 | |||
12:00 | 0.0015 | 0.0049 | |||
12:30 | 0.0015 | 0.0049 | 0.018 | 3.69% | 1×106 |
13:00 | 0.0015 | 0.0049 | |||
13:30 | 0.0020 | 0.0056 | |||
14:00 | 0.0020 | 0.0065 | |||
14:30 | 0.0025 | 0.0072 | |||
15:00 | 0.0030 | 0.0088 | |||
15:30 | 0.0040 | 0.0111 | 0.044 | 9.09% | 4.80×105 |
16:00 | 0.0050 | 0.0144 | |||
16:30 | 0.0055 | 0 0169 | |||
17:00 | 0.0060 | 0.0186 | |||
17:30 | 0.0070 | 0.0209 | 0.071 | 14.59% | 6.6×104 |
18:00 | 0.0080 | 0.0241 | |||
18:30 | 0.0090 | 0.0274 | |||
19:00 | 0.0110 | 0.0320 | |||
19:30 | 0.0130 | 0.0385 | |||
20:00 | 0.0155 | 0.0457 | |||
20:30 | 0.0170 | 0.0524 | |||
21:00 | 0.0240 | 0.0649 | |||
21:30 | 0.0005 | 0.0457 | |||
22:00 | 0.0004 | 0.0015 | |||
22:30 | 0.0005 | 0.0014 | |||
23:00 | 0.0004 | 0.0015 | |||
23:30 | 0.0003 | 0.0012 | |||
24:00 | 0.0000 | 0.0000 | 0.340 | 70.20% | |
0.0000 | 0.4849 | 100.00% |
Анализ изучения осаждающего вещества алоэ: 25 мл образца концентрированного алоэ были помещены в 200 мл колбу, и 125 мл осаждающих жидкостей различных полисахаридов было добавлено в колбу и тщательно размешено. Осевшие полисахариды были собраны после фильтрации через пропитанную дегтем обезвоженную фильтрованную бумагу, и после фильтрации размещены в сушильном шкафу на ночь. На следующее утро был определен сухой вес осевших полисахаридов. Разработчики изучили четыре спиртовых осадителя, где изучение включало метиловый спирт, этиловый спирт, изопропиловый спирт и пропанол. Порошки были подвергнуты процедуре ВЭЖХ, что определило различное количество всех молекулярных веществ, которые были связаны с определением количества полисахаридов в каждой молекулярной группе полисахаридов, включая большую, чем 2,000,000 Дальтон, большую чем 1,000,000 Дальтон, большую, чем 480,000 Дальтон, большую, чем 66,000 Дальтон, и осадочную часть, состоящую из очень маленьких молекулярных видов, как например глюкоза, имеющая молекулярный вес 180. (данные ВЭЖХ продемонстрированы в Таблицах 6-9). Хромотограммы ВЭЖХ, указывающие на четыре осадителя - метиловый спирт, этиловый спирт, изопропиловый спирт и пропанол, показаны в ФИГ.4А, 5А, 6А и 7А соответственно. Протонные Магнитно-Резонансные Схемы осадителей также были получены, и показаны в ФИГ.4В, 5В, 6В и 7В соответственно. Собранные данные показаны в Таблице 5.
Таблица 5 | |||||
Данные анализа изучения осаждающего вещества алоэ | |||||
Осадитель: | Мол. вес 2.0×106 | Мол. вес 1.0×106 | Мол. вес 4.8×105 | Мол. вес 6.6×104 | Мол. вес Остаток |
метиловый спирт | 6.36% | 3.89% | 68.56% | 6.92% | 14.27% |
этиловый спирт | 2.52% | 3.21% | 70.70% | 6.94% | 16.57% |
изопропиловый спирт | 1.32% | 3.43% | 73.36% | 5.91% | 15.99% |
пропанол | 2.74% | 2.55% | 63.85% | 6.92% | 23.94% |
Таблица 6 | |||||
Данные ВЭЖХ показывают количество полисахаридов в каждой полисахаридной молекулярной группе в концентрате полисахарида алоэ в осадке метилового спирта | |||||
Алоэ | |||||
#09423-А | |||||
Время отстаивания | Показатель преломления | Площадь | Σ Площади | % Площади | Молекулярный размер |
0:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
1:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
1:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
2:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
2:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
3:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
3:30 | 0.0010 | 0.0014 | |||
4:00 | 0.0010 | 0.0033 | |||
4:30 | 0.0010 | 0.0033 | |||
5:00 | 0.0005 | 0.0026 | |||
5:30 | 0.0005 | 0.0016 | |||
6:00 | 0.0005 | 0.0016 | |||
6:30 | 0.0080 | 0.0119 | |||
7:00 | 0.0030 | 0.0191 | 0.045 | 6.36% | 2×106 |
7:30 | 0.0020 | 0.0084 | |||
8:00 | 0.0030 | 0.0079 | |||
8:30 | 0.0040 | 0.0111 | 0.027 | 3.89% | 1×106 |
9:00 | 0.0060 | 0.0158 | |||
9:30 | 0.0070 | 0.0209 | |||
10:00 | 0.0090 | 0.0255 | |||
10:30 | 0.0130 | 0.0348 | |||
11:00 | 0.0180 | 0.0491 | |||
11:30 | 0.0220 | 0.0640 | |||
12:00 | 0.0250 | 0.0756 | |||
12:30 | 0.0230 | 0.0785 | |||
13:00 | 0.0170 | 0.0665 | |||
13:30 | 0.0040 | 0.0374 | |||
14:00 | 0.0050 | 0.0144 | 0.482 | 68.56% | 4.80×105 |
14:30 | 0.0050 | 0.0163 | |||
15:00 | 0.0050 | 0.0163 | |||
15:30 | 0.0050 | 0.0163 | 0.049 | 6.93% | 6.6×104 |
16:00 | 0.0060 | 0.0176 | |||
16:30 | 0.0070 | 0.0209 | |||
17:00 | 0.0050 | 0.0200 | |||
17:30 | 0.0040 | 0.0149 | |||
18:00 | 0.0030 | 0.0116 | |||
18:30 | 0.0020 | 0.0084 | |||
19:00 | 0.0010 | 0.0051 | |||
19:30 | 0.0000 | 0.0019 | |||
20:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
20:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
21:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
21:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
22:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
22:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
23:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
23:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
24:00 | 0.0000 | 0.0000 | 0.100 | 14.27% | |
0.0000 | 0.7036 | 100.00% |
Таблица 7 | |||||
Данные ВЭЖХ показывают количество полисахаридов в каждой полисахаридной молекулярной группе в концентрате полисахарида алоэ в осадке этилового спирта | |||||
Алоэ | |||||
#09423-В | |||||
Время отстаивания | Показатель преломления | Площадь | Σ Площади | % Площади | Молекулярный размер |
0:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
1:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
1:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
2:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
2:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
3:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
3:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
4:00 | 0.0005 | 0.0007 | |||
4:30 | 0.0010 | 0.0023 | |||
5:00 | 0.0005 | 0.0026 | |||
5:30 | 0.0005 | 0.0016 | |||
6:00 | 0.0010 | 0.0023 | |||
6:30 | 0.0010 | 0.0033 | |||
7:00 | 0.0015 | 0.0039 | 0.017 | 2.52% | 2×106 |
7:30 | 0.0020 | 0.0056 | |||
8:00 | 0.0020 | 0.0065 | |||
8:30 | 0.0040 | 0.0093 | 0.021 | 3.21% | 1×106 |
9:00 | 0.0050 | 0.0144 | |||
9:30 | 0.0070 | 0.0190 | |||
10:00 | 0.0100 | 0.0269 | |||
10:30 | 0.0130 | 0.0366 | |||
11:00 | 0.0160 | 0.0464 | |||
11:30 | 0.0200 | 0.0575 | |||
12:00 | 0.0240 | 0.0705 | |||
12:30 | 0.0210 | 0.0739 | |||
13:00 | 0.0185 | 0.0648 | |||
13:30 | 0.0050 | 0.0416 | |||
14:00 | 0.0060 | 0.0176 | 0.469 | 70.76% | 4.80×105 |
14:30 | 0.0050 | 0.0181 | |||
15:00 | 0.0040 | 0.0149 | |||
15:30 | 0.0040 | 0.0130 | 0.046 | 6.94% | 6.6×104 |
16:00 | 0.0050 | 0.0144 | |||
16:30 | 0.0075 | 0.0197 | |||
17:00 | 0.0080 | 0.0251 | |||
17:30 | 0.0035 | 0.0198 | |||
18:00 | 0.0025 | 0.0100 | |||
18:30 | 0.0050 | 0.0116 | |||
19:00 | 0.0000 | 0.0094 | |||
19:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
20:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
20:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
21:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
21:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
22:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
22:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
23:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
23:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
24:00 | 0.0000 | 0.0000 | 0.110 | 16.57% | |
0.0000 | 0.6630 | 100.00% |
Таблица 8 | |||||
Данные ВЭЖХ показывают количество полисахаридов в каждой полисахаридной молекулярной группе в концентрате полисахарида алоэ в осадке изопропилового спирта | |||||
Алоэ | |||||
#09423-С | |||||
Время отстаивания | Показатель преломления | Площадь | Σ Площади | % Площади | Молекулярный размер |
0:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
1:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
1:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
2:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
2:30 | 0.0001 | 0.0001 | |||
3:00 | 0.0000 | 0.0002 | |||
3:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
4:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
4:30 | 0.0001 | 0.0001 | |||
5:00 | 0.0001 | 0.0003 | |||
5:30 | 0.0001 | 0.0003 | |||
6:00 | 0.0001 | 0.0003 | |||
6:30 | 0.0015 | 0.0023 | |||
7:00 | 0.0015 | 0.0049 | 0.009 | 1.32% | 2×106 |
7:30 | 0.0020 | 0.0056 | |||
8:00 | 0.0025 | 0.0072 | |||
8:30 | 0.0035 | 0.0095 | 0.022 | 3.43% | 1×106 |
9:00 | 0.0060 | 0.0148 | |||
9:30 | 0.0080 | 0.0223 | |||
10:00 | 0.0095 | 0.0281 | |||
10:30 | 0.0120 | 0.0343 | |||
11.00 | 0.0165 | 0.0452 | |||
11:30 | 0.0190 | 0.0571 | |||
12:00 | 0.0200 | 0.0631 | |||
12:30 | 0.0215 | 0.0671 | |||
13:00 | 0.0200 | 0.0678 | |||
13:30 | 0.0100 | 0.0513 | |||
14:00 | 0.0045 | 0.0249 | 0.476 | 73.36% | 4.80×105 |
14:30 | 0.0040 | 0.0139 | |||
15:00 | 0.0035 | 0.0123 | |||
15:30 | 0.0040 | 0.0121 | 0.038 | 5.91% | 6.6×104 |
16:00 | 0.0065 | 0.0164 | |||
16:30 | 0.0096 | 0.0254 | |||
17:00 | 0.0075 | 0.0283 | |||
17:30 | 0.0030 | 0.0182 | |||
18:00 | 0.0020 | 0.0084 | |||
18:30 | 0.0010 | 0.0051 | |||
19:00 | 0.0000 | 0.0019 | |||
19:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
20:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
20:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
21:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
21:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
22:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
22:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
23:00 | 0.0000 | 0.0000 | |||
23:30 | 0.0000 | 0.0000 | |||
24:00 | 0.0000 | 0.0000 | 0.104 | 15.99% | |
0.0000 | 0.6487 | 100.00% |
Таблица 9 |
Данные ВЭЖХ показывают количество полисахар |