Биологические материалы и их применение

Биологические материалы и их применение

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Настоящее изобретение имеет отношение к ICAM-1-антителам и их применению при лечении рака, такого как множественная миелома.

Известный уровень техники

Множественная миелома (также называемая MM или миелома, миеломная болезнь) является результатом злокачественного развития В клеток и составляет от 10% до 20% всех гематологических злокачественных новообразований. В настоящее время она является неизлечимым заболеванием со средним возрастом при постанове диагноза 65-70 лет, в возрасте меньше 40 лет это заболевание обнаруживается в редких случаях. Множественная миелома является вторым по распространенности гематологическим злокачественным заболеванием в Соединенных Штатах Америки, при этом число случаев во всем мире составляет 4 на 100000 человек. В Соединенных Штатах в 2008 году ожидается 19920 новых случаев множественной миеломы и более чем 10000 случаев со смертельным исходом в результате миеломной болезни (American Cancer Society, 2008). Болезнь немного преобладает среди мужчин и чаще обнаруживается у афроамериканцев, а в меньшей степени - в азиатских популяциях (Kyle & Rajkumar, Blood. 2008 Mar 15; 111(6):2962-72. Review).

Диагноз миеломы несет мрачный прогноз со средней выживаемостью от 3 до 4 лет при применении доступных в настоящее время способов лечения, а у пациентов с тяжелыми формами болезни средняя выживаемость составляет только около 2 лет даже при оптимальном лечении (Kyle & Rajkumar, Blood. 2008 Mar 15; 111(6):2962-72. Review).

Типичной клинической картиной миеломы является пациент с сильной болью вследствие патологических переломов костей, в частности грудной клетки или позвоночника (Kyle & Rajkumar, 2004, N Engl J Med. 2004 Oct 28; 351(18):1860-73. Review). Другими общими признаками являются почечная недостаточность, гиперкальциемия, недостаточность костного мозга в сочетании с анемией и тромбоцитопенией, а также повышенный риск инфекции и тромбоэмболических осложнений, таких как тромбоз вен и легочная эмболия. Органная недостаточность иногда вызывается патологическим отложением фибриллярных агрегатов (скоплений) легких цепей иммуноглобулинов, которое называется AL-амилоидоз. В тех случаях, когда происходит AL-амилоидоз, он обычно затрагивает сердце и почки, приводя к тяжелым сердечным аритмиям и/или нарушениям, почечным нарушениям и недостаточности, соответственно.

С множественной миеломой связана огромная нереализованная потребность современной медицины: доступные в настоящее время лекарственные средства для лечения множественной миеломы не являются излечивающими и вызывают значительную токсичность и развитие лекарственной резистентности. Плазматические клетки при множественной миеломе не экспрессируют CD20 или демонстрируют низкую и гетерогенную экспрессию CD20, при этом маловероятно, что CD20-таргентная терапия будет эффективной при этой болезни (Kapooor et al. Haematol, 2008, 141:135-248).

Разработан ряд подходов для лечения пациентов с множественной миеломой, включая применение мелфалана (и других алкилирующих препаратов, таких как циклофосфамид); других химиотерапевтических препаратов (таких как адриамицин, винкристин и цисплатин); высоких дозировок стероидных гормонов; интерферона; бисфосфонатов (таких как памидронат или золедронат). В дополнение к этому используется трансплантация аутологичных и аллогенных стволовых клеток.

Несмотря на последние достижения в создании новых терапевтических средств для лечения или предотвращения множественной миеломы, реальный полезный результат этих лекарственных средств в отношении выживаемости и качества жизни пациента все еще является ограниченным (Kumar et al, Blood, 2008, 111(5):2516-20). Более того, имеющиеся способы лечения связаны с тяжелыми побочными эффектами у значительной части пациентов. Например, химиотерапия приводит к повышенной чувствительности к инфекции, тошноте, потере волос и повреждению органов; лечение стероидами может приводить к увеличению веса, диабету, повышенной чувствительности к инфекции; остеопорозу и психическим расстройствам; лечение интерфероном может приводить к утомляемости, лихорадке, мышечной боли и депрессии; а лечение бисфосфонатом редко, но иногда приводит к повреждению почек и некрозу костей. Способы лечения, использующие трансплантацию стволовых клеток, сопровождаются значительной долей рецидивов, заболеваемостью и смертностью, связанной с трансплантатом. Новые лекарственные средства для лечения миеломы, включая талидомид, бортезомиб и леналидомид, также оказывают побочное действие, что ограничивает их применение у многих пациентов.

В последние годы был достигнут существенный прогресс в понимании патогенеза и молекулярных механизмов множественной миеломы. Генетические исследования выявили наличие значительного числа различных хромосомных изменений, часто имеющих прогностическое значение, связанных с этой болезнью. Коротко, эти хромосомные транслокации во многих случаях затрагивают Н локус (14q32.3) иммуноглобулина (Ig), при этом рядом располагаются различные трансформирующие гены и сегменты, которые активизируются Ig-энхансером, вызывая разрегулированную экспрессию и возможно злокачественную трансформацию (Hideshima et al. Nat Rev Cancer. 2007. 7(8): 585-598). Терапевтический эффект ингибирования протеасом с помощью бортезомиба при миеломе был сначала продемонстрирован на клетках миеломы in vitro, и вероятно является результатом прямой цитотоксичности и уменьшения экспрессии молекул адгезии и различных факторов роста, выживаемости и ангиогенных факторов (Kyle & Rajkumar N Engl J Med. 2004 Oct 28;351(18):1860-73. Review). Фактор транскрипции NKκB обладает повышенной активностью при миеломе вследствие протеасомной деградации его нормального регуляторного белка IκВ, а бортезомиб восстанавливает гомеостаз NFκB путем ингибирования протеасомной активности.

Микросреда костного мозга, состоящая из остеокластов, эндотелиальных клеток, стволовых клеток костного мозга, а также белки внеклеточного матрикса играют решающую роль в патогенезе множественной миеломы (Hideshima et al., Nat Rev Cancer. 2007. 7(8): 585-598), и обеспечивают факторы, опосредующие рост, выживаемость и лекарственную резистентность злокачественных плазмоцитов. Различные молекулы адгезии, экспрессированные клетками миеломы, являются важными для этого взаимодействия, например ICAM-1.

Молекула межклеточной адгезии 1 (ICAM-1) является высоко экспрессированной и участвует в патогенезе многих типов злокачественных новообразований человека, включая миелому (Huang, et al. Hybridoma. 1993. 12(6): 661-675; Huang et al. Cancer Res. 1995. 55(3): 610-616; Smallshaw et al. Immunother 1997. 2004. 27(6): 419-424; Schmidmaier, Int J Biol Markers. 2006. 21(4): 218-222), меланому (Wang et al. Int J Cancer. 2006. 118(4): 932-941; Johnson et al., Immunobiology. 1988. 178(3): 275-284), рак легкого (Grothey et al. Br J Cancer. 1998. 77(5): 801-807), рак желудка (Maruo et al. Int J Cancer. 2002. 100(4): 486-490), рак мочевого пузыря (Roche et al. Thromb Haemost. 2003. 89(6): 1089-1097), рак молочной железы (Rosette С, et al. Carcinogenesis. 2005. 26(5): 943-950), рак предстательной железы (Aalinkeel R et al. Cancer Res 2004. 64(15): 5311-21) и лимфому (Horst et al. Leukemia. 1991. 5(10): 848-853). Повышенная экспрессия ICAM-1 связана с развитием резистентности, индуцированной лекарственными препаратами (Schmidmaier et al. Int J Biol Markers. 2006. 21(4): 218-222), агрессивностью опухолевых клеток (Miele et al., Exp Cell Res 214 (1), 231 1994) и плохим прогнозом Dowlati et al., Clin Cancer Res 14 (5), 1407 (2008).

Стандартное лечение миеломы у более молодых пациентов (т.е. в возрасте меньше 65 лет) заключается в улучшении состояния с помощью комбинации винкристин-адриамицин- дексаметазона с последующим лечением высокими дозами мелфалана при применении поддержки в виде аутологичных стволовых клеток. В течение предыдущего десятилетия было показано, что этот режим, несмотря на достижение полной ремиссии в костном мозге, увеличивал медиану выживаемости приблизительно на 1 год, но только у небольшой части пациентов (Harousseau JL. Hematology Am Soc Hematol Educ Program. 2005;2008:306-12). В связи с рисками, связанными с лечением высокими дозами, пациентов старческого возраста лечили низкими дозами мелфалана в сочетании с преднизоном.

В последние годы для лечения рецидивирующей миеломы были приняты другие методы лечения. Эти новые лекарственные средства включают ингибитор протеасом бортезомиб (Велкейд®) и "иммуномодулирующие" лекарственные средства, талидомид и леналидомид, (Ревлимид^®)) и представляют собой значительный прогресс в методах лечения. Суммарная эффективность терапии для пациентов с рецидивирующей миеломой при применении этих лекарственных средств составляет обычно около 30%, но, как правило, является более высокой, когда лекарственное средство комбинируют с периодическим применением дексаметазона. По результатам этих исследований новые лекарственные средства в комбинации с дексаметазоном и/или химиотерапией в настоящее время проходят клинические испытания в качестве первой линии лечения миеломы (http://clinicaltrials.gov/ct2/search) с обнадеживающими предварительными результатами (American Society of Hematology, December 6-9, 2008).

Хотя бортезомиб, леналидомид и талидомид показали преимущество в выживаемости по сравнению с традиционным лечением у пациентов с рецидивом миеломы (Rajkumar Blood. 2005. 106(13): 4050-4053; Richardson et al. Blood. 2006. 108(10): 3458-3464; Richardson et al. N Engl J Med. 2005. 352(24): 2487-2498; Singhal et al. N Engl J Med. 1999. 341(21): 1565-1571), цель - увеличить длительное выживание или вылечить - до сих пор не достигнута. Кроме того, новые лекарственные средства имеют серьезные побочные эффекты, например, повышенный риск тромбоэмболии, нейропатии, подавления иммунитета и костного мозга, что ограничивает их применение у значительного количества пациентов.

Несмотря на последние достижения в разработке новых способов лечения, реальная польза этих лекарственных препаратов в отношении выживаемости и качества жизни пациентов является небольшой, при этом многие пациенты или не реагируют на лечение или у них развивается лекарственная резистентность и впоследствии рецидив, что требует разработки новых, более эффективных и дополнительных терапевтических средств для борьбы с множественной миеломой. В соответствии с этим, требуются новые потенциальные мишени и лекарственные средства для лечения миеломы, в частности, для применения у пациентов, не отвечающих на современные лекарственные средства, или сначала отвечавших на лечение, а потом заболевших вторично.

Развитие таргетной иммунотерапии и лекарственных средств на основе антител в течение двух последних десятилетий значительно улучшило «вооружение» врачей для борьбы с раком и гематологическими злокачественными заболеваниями (1). CD20-специфическое химерное (мышь-человек) моноклональное антитело ритуксимаб представляет собой показательный пример терапевтического антитела, которое может применяться в режиме монотерапии при гематологических злокачественных заболеваниях (2, 3), а в сочетании с общепринятыми химиотерапевтическими препаратами (4-6) оно способно значительно улучшить выживаемость пациентов с неходжкинской лимфомой (7, 8). Однако, существенная доля пациентов с гематологическими заболеваниями не подходит для анти-CD20-лечения по причине отсутствия экспрессии CD20 в опухолевой клетке или вследствие врожденной или приобретенной устойчивости к CD20-терапии (9). Следовательно, разработка новых поколений антител, обладающих активностью в отношении определенных, в настоящее время неизлечимых видов рака является в высокой степени обоснованной для улучшения клинического исхода.

Заявители в этом документе описывают новое человеческое антитело ICAM-1, нацеленное на эпитоп B11, которое обладает широкой и высокой эффективностью и сильной противоопухолевой активностью по сравнению с доступным в настоящее время лечением против различных трансплантируемых CD20-экспрессирующих и CD20-негативных В-клеточных опухолей человека in vivo. Антитело ICAM-1 В11 было выбрано из наивной библиотеки антител n-CoDeR® (BioInvent) с помощью метода дифференциального биопэннинга и скрининга программируемой клеточной смерти (PCD), основанного на его нацеливании на активированный поверхностный рецептор опухолевых В-клеток и его способности индуцировать программируемую клеточную смерть. Насколько нам известно, впервые методология функционального скрининга была успешно применена для того чтобы, с одной стороны, установить новые функции ранее хорошо охарактеризованного рецептора (ICAM-1) и в то же самое время создать антитела к той же мишени, обладающие значительным терапевтическим потенциалом. Такой подход - "сначала функция" - к обнаружению терапевтических антител представляет собой важную и дополнительную стратегию к более традиционным подходам, использующим пэннинг в отношении рекомбинантного таргетного белка или трансфицированных клеток-мишеней, поскольку найденный пул антител является специфическим исключительно по отношению к заранее определенному таргетному рецептору(ам).

Наше открытие, что IgG B11 обладает конкурентоспособной противоопухолевой активностью in vivo по сравнению с ритуксимабом против CD20-экспрессирующих опухолей одновременно с наблюдаемой обычной экспрессией ICAM-1 в разных подтипах лимфомы, показывает, что его можно применять для лечения лимфом, экспрессирующих CD20. В то время как ритуксимаб значительно улучшает выживаемость пациентов с неходжкинской лимфомой (NHL) при применении отдельно или в комбинации с химиотерапией (8), существенная часть пациентов с рецидивной или устойчивой CD20+ фолликулярной лимфомой не отвечает на первоначальное лечение ритуксимабом (2) и более половины первоначально реагирующих на лечение ритуксимабом пациентов приобретает резистентность и более не получает пользы от лечения (63). Поэтому, дополнительные предклинические исследования противоопухолевой активности IgG B11 против опухолей, экспрессирующих CD20, являются обоснованными и покажут его применимость для лечения релевантной с клинической точки зрения и растущей группы пациентов, резистентных к ритуксимабу, или пациентов с резистентной NHL.

Важным является то, что IgG B11 обладает широкой и сильной антимиеломной активностью in vivo. В то время как CD20 широко экспрессируется во время развития В-клетки из ранней стадии B-клетки-предшественника только после воздействия антигена на B-клетку, секретирующие антитела плазмоциты и раки, происходящие из этой стадии, включая множественную миелому, как правило, не экспрессируют или показывают низкую и гетерогенную экспрессию CD20. По этой причине маловероятно, что множественную миелому можно эффективно лечить с помощью CD20-таргетной терапии, подобной ритуксимабу (23).

В противоположность этому, некоторые исследования указывают на то, что ICAM-1 может быть подходящей мишенью для лечения миеломы, и в частности для таргетной терапии с помощью антител, подобных IgG BH. Прежде всего, последние сообщения описывают, что ICAM-1 сильно экспрессируется плазматическими клетками первичной множественной миеломы, и что ICAM-1 дополнительно повышается у пациентов в ответ на лечение химиотерапевтическими препаратами и особенно у пациентов с развитой резистентностью к химиотерапии (14, 22) - на сегодняшний день эта стадия является неизбежно терминальной стадией множественной миеломы (64).

В соответстви с этими наблюдениями в описании показано, что по сравнению с немиеломатозными лимфоцитами пациента абсолютное большинство миеломных клеток в повышенных количествах экспрессировало эпитоп, на который нацеливается B11.

Высокая и однородная экспрессия мишени на злокачественных клетках, которая повышается при прогрессировании болезни и развитии резистентности к доступным в настоящее время способам лечения, считается главным признаком мишеней, подходящих для терапии, основанной на антителах, и в частности, антителах, обладающих прямой цитотоксичностью в отношении раковых клеток.

В соответствии с прямой цитотоксичностью, являющейся важным механизмом для IgG B11 противоопухолевой активности, показано, что IgG B11 противоопухолевая активность коррелировала с IgG связыванием и насыщением ICAM-1-рецепторов, экспрессированных опухолевой клеткой. Более того, в соответствии с наиболее важным механизмом действия - прямой цитотоксичностью, направленной на опухолевые клетки, IgG В11 в дополнение к его подтвержденной способности вызывать программируемую клеточную смерть (10) обеспечивал Fc:FcγR-зависимую противоопухолевую активность и in vivo и in vitro. Накопленный опыт показывает, что взаимодействие между константным доменом (Fc) антитела и Fc-гамма рецепторами хозяина (FcγR) способствуют клинической активности ритуксимаба и других противоопухолевых антител, по меньшей мере, в различных группах пациентов (52, 53, 65-67).

Таким образом, в независимых исследованиях NHL пациенты, гомозиготные по FcγRIIIa аллелю с самой высокой аффинностью к константному Fc-домену антитела, показывают улучшенную выживаемость в ответ на лечение ритуксимабом по сравнению с пациентами, несущими, по меньшей мере, один FcγRIIIa аллель с более низкой аффинностью, причем противоопухолевая активность ритуксимаба in vivo критически зависит от взаимодействий антитело Fc: FcγR-хозяина (54).

Несмотря на то, что в настоящее время не существует антитела, одобренного для лечения множественной миеломы, терапевтические антитела, включающие Fc:FcγR, преобразовали способ лечения гематологических и солидных раковых заболеваний (1). Доклинические результаты показывают, что ImiDs, используемые в настоящее время и разработанные для лечения миеломы, увеличивают Fc:FcR-зависимую противоопухолевую активность (Wu et al (2008) Clin Cancer Res, 14 pp 4650-7. IMiDs являются структурными и функциональными аналогами талидомида, которые представляют собой новый перспективный класс иммуномодуляторов для лечения воспаления, аутоиммунных и неопластических заболеваний.

Эти наблюдения означают, что в том случае, когда соответствующие рецепторы, связанные с миеломой, и антитела, включающие Fc:FcγR, нацеленные на эти структуры, будут идентифицированы, такие мишень-специфические антитела могут улучшить лечение миеломы и исход заболевания (1). Следовательно, на основе доступной литературы и представленных здесь данных, показано, что ICAM-1: IgG В11 может обеспечить приемлемую базу для лечения миеломы.

В качестве дополнительной поддержки в отношении ICAM-1-нацеленного вмешательства в лечение миеломы можно сказать, что ICAM-1 замешан в патогенезе множественной миеломы и развитии лекарственной резистентности на различных уровнях (12, 14, 22). Множественная миелома характеризуется инфильтрацией и распространением злокачественных плазматических клеток в костный мозг, а пролиферация и выживаемость клеток миеломы зависит от взаимодействий со стромальными клетками. ICAM-1, посредством связывания с его лигандами (интегрином αLβ2, интегрином αМβ2 и muc-1) принимает участие в явлениях клеточной адгезии, инициирующих множество клеточных сигнальных путей, способствующих повышенной пролиферации клеток множественной миеломы, миграции, резистентности к PCD и развитию молекул клеточной адгезии, индуцированных лекарственной резистентностью (12, 68, 69). Плановые исследования направлены на изучение эффекта IgG В11 на ICAM-1-зависимые взаимодействия клеток миеломы человека и клеток стромы человека на примере scid-hu экспериментальной модели in vivo (70) и совместного культивирования in vitro миеломных клеток с остеобластами или остеокластами (71).

Улучшенная противоопухолевая активность IgG В11 по сравнению с ритуксимабом и бортезомибом является привлекательной с точки зрения механизма действия. Улучшенная противоопухолевая активность не является результатом большего количества ICAM-1 эпитопов, экспрессированных опухолевыми клетками, по сравнению с эпитопами к ритуксимабу, указывая, что IgG B11 или доставлял более сильные сигналы смерти или вызывал клеточную смерть с помощью разных сигнальных или эффекторных путей по сравнению с ритуксимабом. Способность инициировать гибель клетки с помощью путей, отличных от путей ритуксимаба и бортезомиба, может быть важна, в частности, при попытке лечить опухоли, которые имеют приобретенную резистентность к этим лекарственным средствам.

Терапевтическое противоопухолевое антитело в дополнение к проявляемой значительной противоопухолевой активности должно быть безопасным и переносимым для пациентов. ICAM-1 показывает ограниченную экспрессию и распределение в тканях при нормальных физиологических обстоятельствах, но активируется в некоторых типах клеток в ответ на повреждение ткани или воспалительный стресс, при этом увеличивая проблемы, связанные с безопасностью лечения анти-ICAM-1 антителами. Предыдущие исследования, проведенные независимыми исследователями, показали, однако, что анти-ICAM-1 антитело хорошо переносилось разными группами пациентов (75-79). Наши доклинические испытания на безопасность B11 показывают, что оно будет безопасным и хорошо переносимым, и не существует данных, что B 11 будет усиливать или вмешиваться в работу иммунной клетки.

Исходя из фармакологической перспективы и в силу его полностью человеческой природы, предполагается, что В11 должно быть низко иммуногенным или неиммуногенным по сравнению с разработанными ранее мышиными или химерными ICAM-1 антителами (80), и должно иметь время полужизни, типичное для человеческих IgGs (2-3 недели). Таким образом, исходя из его значительной доклинической противомиеломной активности и ожидаемого профиля безопасности, в настоящее время в США начинаются клинические испытания с применением IgG В11 при множественной миеломе.

Итак, заявители установили новую клеточную смерть, которую вызывает ICAM-1 антитело (IgG B11), обладающее повышенной противомиеломной активностью по сравнению с применяемыми в настоящее время способами лечения, включая бортезомиб (Велкейд), дексаметазон, ревлимид и алкеран, в доклинических моделях множественной миеломы. Заявители продемонстрировали, что большинство клеток множественной миеломы, собранных после лечения in vivo используемыми в настоящее время средствами, сохраняло или увеличивало экспрессию ICAM-1 (включая В11 эпитоп) наводя на мысль, что такие ICAM-1 антитела будут полезны, в частности, для пациентов, не реагирующих на лечение или вторично заболевших после предшествующего лечения другими средствами.

Следовательно, в первом аспекте изобретения предоставляется:

Применение антитела или его антигенсвязывающего фрагмента со специфичностью связывания с ICAM-1, или варианта, «слитые белки» или производного указанного антитела или антигенсвязывающего фрагмента или «слитые белки» указанного варианта или его производного со специфичностью связывания с ICAM-1 в производстве медикамента для лечения рака у пациента, при этом пациента ранее лечили по поводу рака, но он или не отвечал на указанное лечение, или он раньше отвечал на указанное лечение, а впоследствии вторично заболел (перенес рецидив).

Рецидив определяется как прогрессирование болезни с клиническими проявлениями после достигнутого ранее терапевтического ответа (т.е. улучшения состояния болезни). Отсутствие реакции определяется как прогрессирование болезни во время лечения или отсутствие терапевтического ответа.

Существует целый ряд критериев, которые должны рассматриваться клиницистом с целью определения, наблюдается ли рецидив у пациента, или пациент не реагирует на определенное лечение. Эти факторы включают (но не ограничиваются этим) новые переломы костей в сочетании с болью в костях, усталость вследствие пониженного гемоглобина или повышенной почечной недостаточности, инфекцию, анализ крови, размер опухоли или возобновление роста опухоли, развитие новых злокачественных образований (метастазов).

Лабораторные испытания любых из этих факторов проводятся с применением стандартных клинических и лабораторных методов и оборудования.

В одном варианте осуществления рак, который необходимо лечить, представляет собой тот же самый рак, от которого пациента лечили ранее.

В дополнительном варианте осуществления рак, который необходимо лечить, представляет собой рак, отличный от рака, по поводу которого пациента лечили ранее.

Во втором аспекте изобретения предоставляется:

Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент со специфичностью связывания с ICAM-1 или вариант, «слитый белок» или производное указанного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента или «слитый белок» указанного варианта или его производного со специфичностью связывания с ICAM-1 для применения при лечении рака у пациента, при этом пациента ранее лечили по поводу рака, но он или не отвечал на указанное лечение, или он раньше отвечал на указанное лечение, а впоследствии вторично заболел (перенес рецидив).

В одном варианте осуществления рак, который необходимо лечить, представляет собой тот же самый рак, от которого пациента лечили ранее.

В следующем варианте осуществления рак, который необходимо лечить, представляет собой рак, отличный от рака, по поводу которого пациента лечили ранее.

В третьем аспекте изобретения предоставляется:

Способ лечения рака у пациента, которого лечили ранее по поводу рака, но он или не отвечал на лечение или он раньше отвечал на лечение, а впоследствии перенес рецидив, способ, включающий стадию введения пациенту эффективного количества антитела или его антигенсвязывающего фрагмента со специфичностью связывания с ICAM-1 или варианта, «слитые белки» или производного указанного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента или «слитые белки» указанного варианта или его производного со специфичностью связывания с ICAM-1.

В одном варианте осуществления рак, который необходимо лечить, представляет собой тот же самый рак, от которого пациента лечили ранее.

В следующем варианте осуществления рак, который необходимо лечить, представляет собой рак, отличный от рака, по поводу которого пациента лечили ранее.

Противоопухолевая терапия способствует регрессии опухоли посредством ингибирования пролиферации опухолевых клеток, ингибирования ангиогенеза (роста новых кровеносных сосудов, необходимых для поддержки роста опухоли) и/или подавления метастазирования путем уменьшения подвижности опухолевых клеток или инвазивности.

Антитела изобретения могут быть эффективными при лечении онкологических заболеваний у детей и взрослых, включая солидные опухоли/злокачественные новообразования, местнораспространенные опухоли, саркомы мягких тканей человека, метастатический рак, включая лимфатические метастазы, злокачественные заболевания клеток крови, включая множественную миелому, острый и хронический лейкоз и лимфому, раки головы и шеи, включая рак ротовой полости, рак глотки и рак щитовидной железы, рак легкого, включая мелкоклеточную карциному и немелкоклеточный рак легкого, рак молочной железы, включая мелкоклеточную карциному и дуктальную карциному, раки желудочно-кишечного тракта, включая рак пищевода, рак желудка, рак толстой кишки, колоректальный рак и полипы, связанные с колоректальной неоплазией, рак поджелудочной железы, рак печени, урологические раки и рак простаты, злокачественные образования женских половых путей, включая карциному яичника, рак матки (включая рак эндометрия) и солидную опухоль в овариальном фолликуле, рак почки, включая почечноклеточную карциному, рак мозга, включая врожденные опухоли мозга, нейробластому, астроцитарные опухоли мозга, глиому, метастатическую инвазию опухолевых клеток в центральную нервную систему, рак костей, включая остеому, раки кожи, включая злокачественную меланому, опухолевую прогрессию кератиноцитов кожи человека, плоскоклеточную карциному, базальноклеточную карциному, гемангиоперицитому и саркому Капоши.

Терапевтические композиции могут быть введены в терапевтически эффективных дозировках отдельно или в комбинации с адъювантной терапией рака, такой как, хирургическое вмешательство, химиотерапия, радиотерапия, термотерапия и лазерная терапия, и могут обеспечивать благоприятное воздействие, например, уменьшение размера опухоли, уменьшение скорости роста опухоли, ингибирование метастазирования или иным образом улучшать клиническое состояние, без обязательного уничтожения опухоли.

Кроме того, терапевтические композиции изобретения могут применяться для профилактического лечения рака. Существуют наследственные состояния и/или ситуации, связанные с экологической обстановкой (например, воздействием канцерогенов), которые, как известно в данной области, предрасполагают индивидуума к развитию раковых заболеваний. При таких обстоятельствах может быть полезным лечение этих индивидуумов терапевтически эффективными дозами антител или антигенсвязывающих фрагментов изобретения для уменьшения риска развития рака.

Модели in vitro могут использоваться для определения эффективных доз антитела или его антигенсвязывающего фрагмента изобретения как потенциальной противоопухолевой терапии. Такие модели in vitro включают методы анализа пролиферации культивируемых опухолевых клеток, выращивание культивируемых опухолевых клеток в мягком агаре (см. Freshney, (1987) Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique, Wily-Liss, New York, NY Ch 18 and Ch 21), опухолевые системы на безтимусных мышах, как описано в Giovanella et al, J. Natl. Can. Inst., 52: 921-30 (1974), метод анализа подвижности и инвазивного потенциала опухолевых клеток в камере Бойдена, как описано в Pilkington et al., Anticancer Res., 17: 4107-9 (1997), и исследование ангиогенеза, например, методом индукции васкуляризации хориоаллантоисной оболочки цыпленка или индукции миграции эндотелиальных клеток сосудов, как описано в Ribatta et al, Intl. J. Dev. Biol, 40: 1189-97 (1999) и Li et al, Clin. Exp.Metastasis, 17:423-9 (1999), соответственно. Подходящие линии опухолевых клеток доступны, например, из каталога Американской коллекции культур.

В одном варианте осуществления рак, который необходимо лечить, представляет собой гематологическую опухоль.

Гематологические опухоли затрагивают кровь, костный мозг и лимфатические узлы. Поскольку кровь, костный мозг и лимфатические узлы неразрывно связаны благодаря иммунной системе, болезнь, затрагивающая что-то одно из трех, во многих случаях будет затрагивать остальные: несмотря на то, что лимфома в принципе является болезнью лимфатических узлов, она часто распространяется на костный мозг, затрагивая кровь и в некоторых случаях продуцируя парапротеин.

Гематологические злокачественные новообразования могут происходить от любой из двух основных линий дифференцировки клеток крови: клеток миелоидной и лимфоидной линий. Линия миелоидных клеток обычно продуцирует гранулоциты, эритроциты, тромбоциты, макрофаги и тучные клетки; лимфоидная линия клеток продуцирует В, Т, NK и плазматические клетки. Лимфома, лимфоцитарный лейкоз и миелома происходят от лимфоидной линии, тогда как острый и хронический миелогенный лейкоз, миелодиспластические синдромы и миелопролиферативные заболевания имеют миелоидное происхождение.

В одном варианте осуществления рак, который необходимо лечить, представляет собой лимфопролиферативное заболевание (LPD).

Лимфопролиферативные заболевания (LPDs) относятся к состояниям, при которых лимфоциты вырабатываются в избыточных количествах. Как правило, они возникают у пациентов с нарушенной иммунной системой.

Примеры LPD включают

- Фолликулярную лимфому

- Хронический лимфоцитарный лейкоз

- Острый лимфобластный лейкоз

- Лейкоз ворсистых клеток

- Лимфому

- Множественную миелому

- Макроглобулинемию Вальденстрема

- Синдром Вискотта-Олдрича

- Посттрансплантационное лимфопролиферативное расстройство

- Аутоиммунный лимфопролиферативный синдром (SLE)

В одном варианте осуществления рак, который необходимо лечить, представляет собой лимфому или неходжкинскую лимфому (NHL).

Лимфома - это раковое заболевание, начинающееся в лимфатических клетках иммунной системы и являющееся солидной опухолью лимфоидных клеток. Эти злокачественные клетки часто возникают в лимфатических узлах, приводя к увеличению лимфатического узла (образованию опухоли). Лимфомы тесно связаны с лимфоидным лейкозом, который также возникает в лимфоцитах, но, как правило, затрагивает только циркулирующую кровь и костный мозг (когда клетки крови вырабатываются в процессе гематопоэза) и обычно не образует статических опухолей. Существует много типов лимфом, и в свою очередь, лимфомы являются обширной группой болезней, называемых гематологическими опухолями.

В одном варианте осуществления рак, который необходимо лечить, является болезнью плазматических клеток (также известной, как плазмоклеточная дискразия).

- Раки могут принимать вид нарушений (плазмоклеточная дискразия). Плазмоклеточная дискразия является результатом злокачественной пролиферации моноклональной популяции плазматических клеток, которые могут секретировать или не секретировать обнаружимые уровни моноклонального иммуноглобулина или парапротеина, обычно называемого М протеином. Обычная плазмоклеточная дискразия включает моноклональную гаммапатию неопределенного значения (MGUS), множественную миелому, солитарную плазмоцитому кости, экстрамедуллярную плазмоцитому, макроглобулинемию Вальденстрема (WM), первичный амилоидоз и болезнь тяжелых цепей.

В дополнительном варианте осуществления рак, который необходимо лечить, является множественной миеломой.

В одном варианте осуществления способ лечения рака включает дополнительное противораковое средство, обычно служащее для лечения множественной миеломы.

С помощью термина 'лечение' мы включаем и терапевтическое и профилактическое лечение субъекта/пациента. Термин 'профилактическое' используется, чтобы охватить применение полипептида или композиции, описанных здесь, которое предотвращает или уменьшает вероятность появления или развития рака (такого как множественная миелома) у пациента или субъекта.

Терапевтически эффективное количество' или 'эффективное количество' или 'терапевтически эффективный' при применении в описании относится к количеству, которое обеспечивает терапевтический эффект в отношении данного состояния и режима введения. Оно представляет собой заранее определенное количество активного вещества, рассчитанное с целью получения желательного терапевтического эффекта, в сочетании с необходимым для введения вспомогательным веществом и разбавителем, т.е. носителем или наполнителем. Кроме того, оно означает количество, достаточное для уменьшения или предотвращения имеющей клиническое значение недостаточности активности, функции и ответа у хозяина. Альтернативно, терапевтически эффективное количество является достаточным для того, чтобы вызвать улучшение имеющего клиническое значение состояния у хозяина.

В предпочтительном варианте осуществления применение первого и второго аспекта изобретения и способа согласно третьему аспекту изобретения включает стадию введения пациенту, нуждающемуся в этом, количества в промежутке примерно от 0,02 мг/кг до 20 мг/кг антитела, антигенсвязывающего фрагмента, варианта, «слитые белки» или его производного.

В особенно предпочтительном варианте осуществления количество антитела, антигенсвязывающего фрагмента, варианта, «слитые белки» или производного, введенное пациенту находится в промежутке приблизительно от 0,02 мг/кг до 0,10 мг/кг; или от 0,10 мг до 0,20 мг/кг; или от 0,20 мг до 0,30 мг/кг; или от 0,30 мг до 0,40 мг/кг; или от 0,40 мг до 0,50 мг/кг; или от 0,50 мг до 0,60 мг/кг; или от 0,60 мг до 0,70 мг/кг; или от 0,70 мг до 0,80 мг/кг; или от 0,80 мг до 0,90 мг/кг; или от 0,90 мг до 1,00 мг/кг; или от 1,00 мг до 1,10 мг/кг; или от 1,10 мг до 1,20 мг/кг; или от 1,20 мг до 1,30 мг/кг; или от 1,30 мг до 1,40 мг/кг; или от 1,40 мг до 1,50 мг/кг; или от 1,50 мг до 1,60 мг/кг; или от 1,60 мг до 1,70 мг/кг; или от 1,70 мг до 1,80 мг/кг; или от 1,80 мг до 1,90 мг/кг; или от 1,90 мг до 2,00 мг/кг; или от 2,00 мг/кг до 2,10 мг/кг; или от 2,10 мг до 2,20 мг/кг; или от 2,20 мг до 2,30 мг/кг; или от 2,30 мг до 2,40 мг/кг; или от 2,40 мг до 2,50 мг/кг; или от 2,50 мг до 2,60 мг/кг; или от 2,60 мг до 2,70 мг/кг; или от 2,70 мг до 2,80 мг/кг; или от 2,80 мг до 2,90 мг/кг; или от 2,90 мг до 3,00 мг/кг; или от 3,00 мг до 3,10 мг/кг; или от 3,10 мг до 3,20 мг/кг; или от 3,20 мг до 3,30 мг/кг; или от 3,30 мг до 3,40 мг/кг; или от 3,40 мг до 3,50 мг/кг; или от 3,50 мг до 3,60 мг/кг; или от 3,60 мг до 3,70 мг/кг; или от 3,70 мг до 3,80 мг/кг; или от 3,80 мг до 3,90 мг/кг; или от 3,90 мг до 4,00 мг/кг; или от 4,00 мг до 4,10 мг/кг; или от 4,10 мг до 4,20 мг/кг; или от 4,20 мг до 4,30 мг/кг; или от 4,30 мг до 4,40 мг/кг; или от 4,40 мг до 4,50 мг/кг; или от 4,50 мг до 4,60 мг/кг; или от 4,60 мг до 4,70 мг/кг; или от 4,70 мг до 4,80 мг/кг; или от 4,80 мг до 4,90 мг/кг; или от 4,90 мг до 5,00 мг/кг; или от 5,00 мг/кг до 6,00 мг/кг; или от 6,00 мг до 7,00 мг/кг; или от 7,00 мг до 8,00 мг/кг; или от 8,00 мг до 9,00 мг/кг; или от 9,00 мг до 10,00 мг/кг; или от 10,00 мг до 11,00 мг/кг; или от 11,00 мг до 12,00 мг/