Средство, обладающее церебропротекторным, эндотелиопозитивным и антитромботическим действием

Средство, обладающее церебропротекторным, эндотелиопозитивным и антитромботическим действием

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и медицине и касается производных γ-аминомасляной кислоты, проявляющих церебропротекторное, эндотелиопозитивное и антитромботическое действие.

Гамма-аминомасляная кислота (ГАМК) является важнейшим тормозным нейромедиатором центральной нервной системы человека и млекопитающих, регулирует обмен веществ в головном мозге. Как ноотропное средство она используется для лечения сосудистых заболеваний головного мозга [1. Машковский М.Д. Лекарственные средства. М.: «Новая волна». 2012; 2. Раевский, К.С. Нейрофармакологические и нейрохимические аспекты / К.С. Раевский, В.П. Георгиев // Медиаторные аминокислоты 1986. М.: «Медицина». - 165 с.; 3. Ковалев Г.В. Ноотропные средства. Волгоград: Нижне-Волжское книжное издательство. 1990. 368 с.]. Известно средство, обладающее антиишемической, гипотензивной, противоаритмической и ноотропной активностью, включающее производное ГАМК 4-амино-3-фенилбутановую кислоту и глутаминовую или никотиновую кислоты (RU №2216322). Церебропротекторное, эндотелиопозитивное и антитромботическое действие композиции не описано. Известно также, что соли 4-амино-3-фенилбутановой кислоты обладают церебропротекторной активностью в условиях алкогольного и электроконвульсивного повреждения мозга (RU №2393855). Однако вышеперечисленные средства не нашли применения в терапии нарушений мозгового кровообращения.

L-Аргинин относится к условно-незаменимым α-аминокислотам. Это один из ключевых метаболитов в процессах азотистого обмена млекопитающих. L-Аргинин является субстратом NO-синтаз в синтезе оксида азота, обладающего уникальными биологическими эффектами [1. Львова О.А. и др. К вопросу о роли оксида азота в норме и при патологии нервной системы // Electronic scientific magazine "System integration in public health services ". - 2011. - C. 20.; 2. Andrew P.J., Mayer B. Enzymatic function of nitric oxide synthases // Cardiovascular research. - 1999. - T. 43. - №. 3. - С. 521-531.] Как субстрат NO-синтаз L-аргинин улучшает эндотелиальную функцию сосудов при стенокардии, сердечно-сосудистой недостаточности, сахарном диабете и гиперхолестеринемии [3. Palmer R.M.J., Ferige A.G., Moncada S. (1987) Nitric oxide release accounts for the biological activity of endothelium-derived relaxing factor. Nature 1987;327; 524-526. 4. Бувальцев В.И. Международ. мед. журнал. 2001 //Т. - Т. 3. - С. 9-14.; 5. Марков X.М. Молекулярные механизмы дисфункции сосудистого эндотелия // Кардиология. - 2005. - Т. 45. -№. 12. - С. 62-72.]. L-Аргинин входит в состав композиций, обладающих эндотелиопротективным, вазодилатирующим и ангиопротекторным эффектами (RU 2464019). Однако церебропротекторное, эндотелиопозитивное и антитромботическое действие L-аргинина в условиях ишемического нарушения мозгового кровообращения неизвестно.

Салициловая кислота обладает слабыми антисептическими, раздражающими и кератолитическими (в больших концентрациях) свойствами. Она применяется в медицине наружно [Машковский М.Д. Лекарственные средства. М.: «Новая волна». 2012]. Нейропротекторное действие салициловой кислоты в условиях ишемического нарушения мозгового кровообращения не описано.

Современные социально-экономические условия отличаются обилием стрессовых ситуаций и характеризуются высокой распространенностью психоневрологических заболеваний, связанных с нарушением мозгового кровообращения (НМК). При этом неуклонно растет доля сосудистых заболеваний мозга в структуре заболеваемости и смертности населения, высоких показателей временной нетрудоспособности и первичной инвалидизации [Суслина 3. А. и др. Нейропротекция при ишемическом инсульте: эффективность Милдроната // Фарматека. - 2005. - Т. 13. - С. 99-104.]. Основную роль в нарушении мозгового кровообращения играет эндотелиальная дисфункция сосудов (снижение вазодилатирующей и антитромботической функции, увеличение свертываемости и ухудшение реологии крови) [Смирнов И.Е. и др. Эндотелиальная дисфункция при гипоксически-ишемических поражениях мозга у детей // Российский педиатрический журнал. - 2010. -№. 4. - С. 32-37].

Известно, что лекарственные препараты для лечения и реабилитации больных с НМК применяются комплексно, каждая группа средств имеет свое индивидуальное назначение. Однако при сочетанной терапии возникает риск суммации свойств назначаемых препаратов, многие из которых обладают серьезными побочными эффектами и недостаточной клинической эффективностью.

В практической медицине в качестве нейропротекторного средства в настоящее время широкое распространение получил ноотропный препарат пирацетам. Он оказывает положительное влияние на обменные процессы и кровообращение мозга. Пирацетам применяют при разных заболеваниях центральной нервной системы, особенно связанных с сосудистыми нарушениями и патологией обменных процессов головного мозга, в том числе у людей пожилого и старческого возраста. Однако по многим общим фармакологическим тестам он имеет невысокую эффективность. Кроме этого, пирацетам обладает рядом существенных побочных действий, таких как повышенная раздражительность, депрессия, нарушение сна, обострение коронарной недостаточности у больных пожилого возраста [Машковский М. Д. Лекарственные средства. М.: «Новая волна». 2012].

Несмотря на широкий спектр лекарственных средств, применяющихся для профилактики и лечения нарушений мозгового кровообращения, эффективность их остается низкой [Путилина М. В. Особенности комбинированной нейропротекторной терапии острых нарушений мозгового кровообращения // РМЖ. - 2009. - Т. 17. - №. 4. - С. 261-266].

Поэтому, поиск и разработка новых безопасных при длительном применении высокоэффективных средств с широким спектром церебропротекторного, эндотелиопозитивного и антитромботического действия, позволяющих осуществлять фармакологическую коррекцию совокупности симптомов ишемического нарушения мозгового кровообращения и избежать полипрагмазии, по-прежнему остается одной из актуальных задач современной фармакологии и терапии ишемических нарушений мозгового кровообращения.

Задача изобретения - получить высокоэффективное и малотоксичное производное ГАМК, обладающее церебропротекторным, эндотелиопозитивным и антитромботическим действием и расширить ассортимент подобных средств.

Поставленная задача реализуется предлагаемым средством, включающим 4-амино-3-фенилбутановую кислоту, L-аргинин гидрохлорид и салициловую кислоту. Причем соотношение 4-амино-3-фенилбутановая кислота: L-аргинин гидрохлорид:салициловая кислота как 1:1:1. При этом получают комбинированное средство, обладающее комплексом фармакологических свойств - церебропротекторным, эндотелиопозитивным и антитромботическим действием.

Лекарственное средство содержит эффективную дозу композиции 4-амино-3-фенилбутановой кислоты, L-аргинина гидрохлорида и салициловой кислоты, фармакологически приемлемые носители и целевые добавки.

Технический результат предлагаемого изобретения заключается в том, что предлагаемое комбинированное средство малотоксично и способно оказывать церебропротекторное, эндотелиопозитивное и антитромботическое действие.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами

Пример

В шаровую мельницу загружают 11.6 г (0.06 моль) 4-амино-3-фенилбутановой кислоты, 13.6 (0.06 моль) L-аргинина гидрохлорида и 9.0 г (0.06 моль) салициловой кислоты. Смесь тщательно перемешивают в течение 0,5-1 часа, затем выгружают полученный продукт. Выход количественный.

Полученное таким образом средство было изучено в опытах на животных.

Далее приводятся примеры, иллюстрирующие фармакологическую активность композиции 4-амино-3-фенилбутановой кислоты, гидрохлорида L-аргинина и салициловой кислоты (ФБАС).

Для изучения церебропротекторного, эндотелиотропного и антитромботического действия композиции ФБАС использованы стандартные методы исследования [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. Под ред. А.Н. Миронова. М.: Гриф и К, 2012. 944 с.].

Для изучения церебро- и эндотелиотропного действия композиции ФБАС использовали модель острого нарушения мозгового кровотока (ОНМК), вызванного одномоментной билатеральной окклюзией общих сонных артерий [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. Под ред. А.Н. Миронова. М.: Гриф и К, 2012. 944 с.]. Животным под эфирным наркозом была осуществлена одномоментная двухсторонняя перевязка общих сонных артерий (ОСА) с регистрацией количества выживших животных через 6, 12, 24, 48 и 72 часа после операции.

Для выявления церебропротекторного действия композиции ФБАС использовали тесты, позволяющие оценить неврологический статус животных в постишемический период: неврологический дефицит, спонтанное двигательное и ориетировочно-исследовательское поведение, мнестическую функцию. Неврологический дефицит оценивали в баллах по шкале McGrow в модификации Ганнушкиной И.В. (1996). Двигательную и ориетировочно-исследовательскую активность определяли в тестах «Открытое поле» (ОП) [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. Под ред. А.Н. Миронова. М.: Гриф и К, 2012. 944 с.]. Оценку мнестической функции животных проводили в стандартных психоневрологических тестах: «Условная реакция пассивного избегания» (УРПИ), «Тест экстраполяционного избавления» (ТЭИ) [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. Под ред. А.Н. Миронова. М.: Гриф и К, 2012. 944 с.].

Обработка полученных данных проводилась с использованием статистических методов обработки результатов исследования, которые позволяют оценить степень фармакологической активности вещества.

В работе были использованы белые беспородные крысы-самцы, рандомизированные по возрасту (4 - 4,5 месяца) и массе (220 - 240 г), содержавшиеся в условиях стандартного лабораторного вивария, на стандартном пищевом рационе, при свободном доступе к воде, при естественном световом режиме. Приводимые в таблицах значения показателей представляют собой среднестатистическую оценку результатов измерения параметров с учетом принятых уровней достоверности (р<0,05).

Острая токсичность (LD₅₀ мг/кг) композиции ФБАС, оцениваемая по выживаемости белых мышей через 24 часа после введения средства внутрибрюшинно, составляет 1321 мг/кг, что позволяет классифицировать исследуемое вещество как малотоксичное. Для сравнения, острая токсичность пирацетама составляет 12000 мг/кг [Оганисян А. Ш. и др. Производные конденсированных тиенопиримидинов. Синтез и нейротропные свойства новых производных пирано [4′, 3′: 4, 5] тиено [3, 2-е] триазоло [3, 4-b] пиримидинов //Химико-фармацевтический журнал. - 2003. - Т. 37. - №.1. - С.15-16].

Экспериментальное изучение эффективности заявляемой композиции ФБАС в условиях ишемического нарушения мозгового кровообращения проводили в сравнении с каждым препаратом, входящим в состав композиции [4-амино-3-фенилбутановой кислотой (АФК), салициловой кислотой (СК), L-аргинином гидрохлоридом (L-АГХ)], и с препаратом сравнения пирацетамом.

Для проведения эксперимента были сформированы следующие группы животных: контрольная группа 1 - ложно оперированные животные, которым после подведения лигатуры под сосуды общие сонные артерии не затягивались - позитивный контроль; контрольная группа 2 - животные с одномоментной окклюзией сонных артерий, получавшие дистиллированную воду - негативный контроль; опытная группа 3 - животные с ишемией, получавшие композицию ФБАС; опытная группа 4 - животные с ишемией, получавшие 4-амино-3-фенилбутановую кислоту (АФК); опытная группа 5 -животные с ишемией, получавшие салициловую кислоту (СК); опытная группа 6 - крысы с ишемией, получавшие L -аргинин гидрохлорид (L-АГХ); опытная группа 7 - крысы с ишемией, получавшие препарат сравнения пирацетам.

Исследуемую композицию - ФБАС в дозе 27 мг/кг, 4-амино-3-фенилбутановую кислоту (9 мг/кг), салициловую кислоту (7 мг/кг), L -аргинин гидрохлорид (11 мг/кг) и препарат сравнения пирацетам (800 мг/кг) вводили внутрибрюшинно.

Изучение церебропротекторного действия (табл. 1-5)

Количество выживших животных и неврологический дефицит регистрировали через 6, 12, 24, 48 и 72 часа после операции перевязки артерий. Неврологический дефицит оценивали в баллах по шкале McGrow в модификации Ганнушкиной И.В. Спонтанное двигательное и ориетировочно-исследовательское поведение определяли в тесте: «Открытое поле».

Неврологический дефицит (табл. 1, 2)

Результаты эксперимента показали, что при перевязке общих сонных артерий у животных к 72-му часу наблюдений после операции показатель выживаемости был достоверно выше у крыс опытной группы 3 по сравнению с животными контрольной группы 2 (табл. 1). При этом на протяжении всего периода наблюдения балл неврологического дефицита был наивысшим (от 9.5±0.1 до 8.4±0.2 балла) у животных контрольной группы 2 (табл. 2). У крыс опытной группы 3, получавших композицию ФБАС до окклюзии, нарастание неврологической симптоматики было наименьшим (от 7,2±0,2 до 5,5±0.9) (табл. 2). Пирацетам незначительно уменьшал проявления неврологического дефицита (от 7,8±0,2 до 7,2±0,7) (табл. 2).

Таким образом, композиция ФБАС обладает нейропротекторным действием в условиях ишемии мозга и по активности превосходит таковое у компонентов композиции АФК, АГХ и препарата сравнения пирацетама (табл. 1, 2).

Тест «Открытое поле» (табл. 3)

Двигательное поведение животных в условиях ишемии головного мозга изучали в тесте «Открытое поле» (ОП). Методика открытого поля используется для изучения влияния вещества на показатели спонтанного индивидуального поведения животных (двигательную, ориентировочно-исследовательскую активность и эмоциональный статус). Эксперимент проводился в стандартном круглом манеже диаметром 97 см и высотой 42 см. Крысу помещали в центр камеры хвостом к экспериментатору и наблюдали за ее поведением в течение 3 минут. В тесте регистрировали: число пересеченных секторов на периферии, число пересеченных ярко освещенных секторов, количество вертикальных стоек, количество заглядываний в отверстия. Количество пересеченных секторов характеризует спонтанную двигательную активность животных, сумма стоек и заглядываний в отверстия - суммарную ориентировочно-исследовательскую активность.

Результаты эксперимента в тесте «ОП» показали, что у животных опытной группы 3, получавших композицию ФБАС, через 72 часа после операции статистически значимо повышалось количество пересеченных секторов (двигательная активность), число стоек и заглядываний в отверстия (ориентировочно-исследовательская активность), что указывает на наличие у заявляемой композиции значительного церебропротекторного действия (табл. 3). У животных опытной группы 4, получавших 4-амино-3-фенилбутановую кислоту (АФК), показатели двигательной активности несколько меньше, чем у крыс, получавших композицию ФБАС (табл. 3).

Таким образом, результаты эксперимента показали, что введение экспериментальным животным заявляемой композиции ФБАС в условиях недостаточности мозгового кровообращения существенно повышает выживаемость животных и снижает выраженность их неврологического дефицита. Это указывает, что композиция ФБАС обладает выраженным церебропротекторным действием, при этом компоненты ее состава (АФК, АГХ, СК) значительно уступают по активности композиции ФБАС (табл. 3).

Тест «Условная реакция пассивного избегания» (табл.4)

Методика теста УРПИ позволяет оценить влияния веществ на формирование, сохранение и воспроизведение памятного следа в норме и в условиях его нарушения.

Обучение животных проводилось в установке, состоящей из двух смежных отсеков, один из которых размером 60×40×40 см открыт сверху и ярко освещен (лампа мощностью 100 ватт). Другая камера с электрифицированным полом меньшего размера (15×15×15 см) - затемненная, закрытая со всех сторон и имеет отверстие (8×8 см) для сообщения с большим отсеком. Эксперимент выполнялся в два этапа: выработка у животных условного рефлекса пассивного избегания и воспроизведение памятного следа в динамике через 24 и 72 часа.

Во время обучения тестируемое животное помещали на середину площадки освещенного отсека, хвостом к отверстию в темный отсек. В течение трех минут за животным велось визуальное наблюдение. После каждого захода в темный отсек животному наносили электроболевое раздражение (40 В, 3 импульса по 1 сек с интервалом 0,5 сек), животных, не заходящих в темную камеру за это время, из опыта исключали. На этапе обучения животных регистрировали следующие показатели: время от момента помещения животного в середину площадки до первого захода в темный отсек (латентный период первого захода) и количество заходов в него.

В эксперименте воспроизведения памятного следа после каждого захода в темный отсек животному не наносили электроболевую стимуляцию. На этом этапе регистрировали следующие показатели: латентный период первого захода (ЛП), количество заходов в него и общее время нахождения животного в темном отсеке. Сравнивали ЛП первого захода животных в темный отсек и количество заходов в него в тесте воспроизведения памятного следа с аналогичными показателями при обучении. Увеличение ЛП и уменьшение числа заходов указывают на обученность животного и сохранность в памяти информации об аверсивности темного отсека [Буреш Я. и др. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения. - Высш. шк., 1991, 309 с.]. Общее время нахождения в темном отсеке, регистрируемое при воспроизведениях навыка, также отражает сохранность памятного следа у животного - чем меньше времени животное проводит в темном отсеке, тем лучше оно помнит о нанесенном ему здесь электроболевом раздражении.

При введении композиции ФБАС у животных с церебральной ишемией на этапе воспроизведения навыка избегания через 72 часа после операции наблюдалось увеличение латентного периода захода животных в темный отсек, уменьшение количества заходов в него и времени пребывания в нем по отношению к контрольной группе 2 (табл. 4). Такое положительное влияние композиции ФБАС на обучаемость и память животных, замедление угасания памятного следа в динамике свидетельствуют о наличии церебропротекторного действия у заявляемой композиции.

Тест «Экстраполяционного избавления» (табл. 5)

Методика теста ТЭИ позволяет оценить индивидуальные различия когнитивного стиля решения задачи (поиска пути активного избавления из аверсивной среды).

Обучение животных проводилось в цилиндрической емкости диаметром 35 см, заполненной водой с температурой 16-18°С. Емкость содержала пластиковый цилиндрический колпак диаметром 9 см и высотой 23 см, края которого погружались в воду на 2.5 см. Эксперимент выполнялся в два этапа: выработка у животных условного рефлекса избавления и проверка сохранности навыка экстраполяционного избавления в динамике через 24 и 72 часа.

Во время обучения тестируемое животное помещали в емкость под колпак. В течение трех минут за ним велось визуальное наблюдение. Животные подныривали под края колпака и избавлялись таким образом от аверсивной водной среды. Не решившие задачу животные из опыта исключались. На этапе обучения животных регистрировали следующие показатели: время от момента погружения животного в воду до начала активного плавания (латентный период двигательной активности), время иммобилизации (животное пассивно плавает в воде со слегка поднятой головой, все четыре конечности неподвижны), количество прыжков в колпаке (активные попытки выпрыгнуть из воды) и время от момента погружения животного в воду до подныривания под края колпака (латентный период подныривания)

В эксперименте воспроизведения навыка экстраполяционного избавления при оценке когнитивных функций регистрировали наиболее значимые показатели: латентный период двигательной активности (характеристика скорости ориентировочных реакций); латентный период подныривания (показатель способности к экстраполяции - чем меньше значение показателя, тем выше скорость решения экстраполяционной задачи). Сравнивали показатели, определяющие степень обученности животного и состояние памяти - чем значительнее уменьшается латентный период (ЛП) подныривания животного при воспроизведении навыка, тем больше обученность его и сохраннее памятный след.

При введении композиции ФБАС животным с церебральной ишемией на этапе воспроизведения навыка через 72 часа наблюдалось уменьшение времени решения экстраполяционной задачи и числа животных, не нашедших выход из аверсивной ситуации (табл. 5). При этом компоненты композиции АФК, АГХ, СК и препарат сравнения пирацетам значительно уступали композиции ФБАС по активности.

Результаты эксперимента показали, что введение композиция ФБАС в дозе 27 мг/кг препятствовало нарушению локомоторной и ориентировочно-исследовательской активности животных и снижало выраженность постишемической амнезии (табл. 3, 4, 5). Такое положительное влияние композиции ФБАС на когнитивные функции у животных свидетельствует, что она обладает выраженным церебропротекторным действием в условиях ишемического нарушения мозгового кровообращения.

Изучение эндотелиотропного действия (табл. 6)

Исследование вазодилатирующей функции эндотелия у животных осуществляли в проекции среднемозговой артерии в теменной области мозга крыс при внутривенном введении ацетилхолина (АЦХ) в дозе 0,01 мг/кг (для анализа стимулируемой выработки оксида азота) и нитроглицерина в дозе 0,007 мг/кг (для оценки эндотелий-независимой вазодилатации). Изменение церебрального кровотока регистрировали через 72 часа после окклюзии с помощью аппарата для электрофизиологических исследований MP 150, системно-интерфейсного блока (производство фирмы Biopac Systems, Inc., США), модуля, усиливающего сигналы, и иглообразного лазерного доплеровского датчика. Активность ФБАС оценивали по изменению скорости мозгового кровотока в проекции средней мозговой артерии.

Результаты эксперимента показали, что уровень локального мозгового кровотока (МК) у животных контрольной группы 2 (15,1 у.е.) был достоверно ниже, чем контрольной группы 1 (32,6 у.е.) (табл.6). При введении композиции ФБАС у животных опытной группы 3 уровень МК был значительно выше (20,8±1,7 у.е.) по сравнению с таковым контрольной группы 2. При введении АЦХ у животных контрольной группы 1 наблюдался прирост мозгового кровотока на 40,4% от исходного. У крыс контрольной группы - 2 почти в два раза меньше - 19,4%. У животных опытной группы 3 при введении АЦХ наблюдалось увеличение МК на 30,5% по сравнению с исходными показателями, что статистически выше, чем у крыс контрольной группы 2 (табл. 6).

Таким образом, у животных опытной группы 3, получавших до окклюзии сонных артерий композицию ФБАС, эндотелий-зависимая вазодилатация была более выражена, чем в группе негативного контроля 2 (табл. 6).

Для оценки эндотелий-независимой вазодилатации животным аналогично АЦХ вводился нитроглицерин (табл. 6).

При введении нитроглицерина увеличение МК было статистически сопоставимым во всех экспериментальных группах животных (табл. 6). При этом процентное соотношение прироста МК на введение индукторов эндотелий-зависимой и эндотелий-независимой вазодилатации показало, что индекс эндотелиальной дисфункции значительно меньше у животных опытной группы 3.

Таким образом, введение композиции ФБАС увеличивает выживаемость животных, снижает выраженность неврологических нарушений, увеличивает мозговой кровоток и улучшает вазодилатирующую функцию эндотелия после перевязки сонных артерий, что свидетельствует о наличии у нее церебро- и эндотелиотропного действия.

Изучение антитромботического действия (табл. 7)

Антитромботическую активность ФБАС изучали на модели артериального тромбоза, который моделировали поверхностным наложением 50%-ного раствора хлорида железа (III) на участок выделенной сонной артерии наркотизированных интактных крыс [Kurz K.D, Main В. W., Sandusky G.E. Rat model of arterial thrombosis induced by ferric chloride // Thromb. Res. 1990. Vol. 15. P. 269-280]. Животных наркотизировали хлоралгидратом в дозе 400 мг/кг. На участок предварительно выделенной сонной артерии длиной 1 см накладывали ватный диск, смоченный 50%-ным раствором хлорида железа (0,025 мл). Окружающие ткани изолировали размещением под сосудом пленки Parafilm. Кровоток в сосуде регистрировали до полной его остановки с помощью ультразвукового датчика аппарата Допплер (Минимакс-Допплер-К, г. Санкт-Петербург). Скорость формирования тромба оценивали по количеству времени от момента наложения раствора хлорида железа (III) до полного прекращения кровотока.

Экспериментальное изучение эффективности заявляемой композиции ФБАС в условиях артериального тромбоза проводили в сравнении с препаратом сравнения аспирином.

Для проведения эксперимента были сформированы следующие группы животных: контрольная группа 1 - интактные животные, получавшие однократно перед моделированием артериального тромбоза эквивалентное количество физиологического раствора; опытная группа 2 - животные, получавшие однократно внутрибрюшинно перед моделированием артериального тромбоза композицию ФБАС в дозе 27 мг/кг; опытная группа 3 - животные, получавшие однократно внутрибрюшинно перед моделированием артериального тромбоза аспирин в дозе 20 мг/кг (в качестве препарата сравнения). Каждая группа состояла из 10 животных.

Результаты эксперимента показали, что полная окклюзия участка выделенной сонной артерии у экспериментальных животных наблюдалась: в контрольной группе 1 - на 19,9±0,7 минуте, в опытных группах 2 и 3 - на 22.5±1,8 и 26,6±1,1 минутах соответственно (табл.7). Полученные данные свидетельствуют, что исследуемая композиция ФБАС снижает скорость образования тромба у крыс опытной группы 2 по сравнению с контрольной группой животных 1, что свидетельствует о наличии у нее антитромботической активности, сопоставимой с таковой у аспирина (табл. 7).

Таким образом, результаты экспериментов показали, что композиция 4-амино-3-фенилбутановой кислоты, L-аргинина гидрохлорида и салициловой кислоты ФБАС обладает оригинальным комплексом фармакологических свойств: церебропротекторным, эндотелиопозитивным и антитромботическим действием в условиях ишемического нарушения мозгового кровообращения. Введение ФБАС существенно увеличивает выживаемость животных и снижает выраженность неврологических нарушений. ФБАС значительно уменьшает выраженность эндотелиальной дисфункции, улучшает вазодилатирующую и антитромботическую функции эндотелия, увеличивает мозговой кровоток при недостаточности мозгового кровообращения.

Заявляемая композиция ФБАС по своей активности превосходит как пирацетам, так и составные компоненты композиции (4-амино-3-фенилбутановую кислоту, L -аргинин гидрохлорид и салициловую кислоту), обладает низкой токсичностью, а оказываемое ею антитромботическое действие сопоставимо с таковым у аспирина.

Разработанное на основе предлагаемой композиции ФБАС лекарственное средство может быть рекомендовано в качестве церебропротектора с эндотелиопротекторным и антитромботическим действием лицам различных возрастных категорий, страдающих нарушением мозгового кровотока различной степени выраженности (от легких функциональных и пограничных расстройств до тяжелых патологий), сопровождающим хронические заболевания, травмы и интоксикации (в том числе).

Лекарственное средство, содержащее в качестве действующего вещества композицию 4-амино-3-фенилбутановой кислоты, L-аргинина гидрохлорида и салициловую кислоту (ФБАС), в зависимости от выбранных носителей и целевых добавок, может быть изготовлено в любой твердой или жидкой лекарственной форме.

Средство, обладающее церебропротекторным, эндотелиопозитивным и антитромботическим действием в условиях ишемического нарушения мозгового кровообращения, характеризующееся тем, что оно включает 4-амино-3-фенилбутановую кислоту, L-аргинин гидрохлорид и салициловую кислоту, при этом мольное соотношение 4-амино-3-фенилбутановой кислоты, L-аргинина гидрохлорида и салициловой кислоты составляет 1:1:1.