Стильбеноидные соединения в качестве ингибиторов плоскоклеточной карциномы и гепатомы и их применения

Стильбеноидные соединения в качестве ингибиторов плоскоклеточной карциномы и гепатомы и их применения

Иллюстрации

Показать все

Реферат

ПЕРЕКРЕСТНЫЕ ССЫЛКИ НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

[0001] Настоящая заявка испрашивает приоритет на основании приоритетной заявки на патент США №. 61/807837, поданной 3 апреля 2013 г, содержание которой полностью включено в настоящую заявку посредством ссылки.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

1. Область техники

[0002] Настоящее изобретение относится к стильбеноидным соединениям в качестве ингибиторов плоскоклеточной карциномы и гепатомы и их применениям. В частности, изобретение относится к соединениям, способным подавлять жизнеспособность клеток и разрастание плоскоклеточной карциномы и гепатоцеллюлярной карциномы, фармацевтическим композициям указанных соединений, способу лечения рака с применением указанных соединений и способу получения указанных соединений.

2. Уровень техники

[0003] Рак головы и шеи является шестым по распространенности в мире видом рака и составляет 6% от всех случаев рака. В то же время он является четвертым из наиболее часто встречающихся видов рака на Тайване. Рак головы и шеи - это широкий термин, относящийся к эпителиальным злокачественным опухолям, возникающим в придаточных пазухах носа, носовой полости, полости рта, глотке и гортани. Приблизительно 95% гистологических типов составляет плоскоклеточная карцинома (ПКГШ), а остальные представляют собой опухоли слюнных желез, лимфомы и саркомы. В настоящее время выявлено несколько факторов риска, связанных с возникновением ПКГШ. Наиболее важные факторы риска ПКГШ связаны с употреблением табака и алкоголя. Другие факторы риска включают ингаляционные производственные воздействия, заражение вирусом папилломы человека (ВПЧ) и заражение вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ). Несмотря на улучшения в лечении ПКГШ, пациенты продолжают страдать от очень плохого прогноза с последующей прогрессией после стандартных схем терапии. Из-за высокой частоты рецидивов и способности к метастазированию коэффициент выживаемости большинства пациентов очень низок.

[0004] В настоящее время существуют три основных способа лечения ПКГШ: лучевая терапия, хирургическое вмешательство и химиотерапия. Основными способами лечения являются облучение и хирургическое вмешательство, или оба из гих в сочетании с адьювантной химиотерапией. Оптимальное сочетание способов лечения зависит от локализации рака и стадии заболевания. Более того, наиболее распространенными препаратами, используемыми в сочетании с лучевой терапией, в так называемой химиолучевой терапии, являются цисплатин (доступный под товарными знаками Платинол (Platinol), Платинол-AQ (Platinol-AQ)), флюороурацил, (доступный под товарными знаками Адруцил (Adrucil), Эфудекс (Efudex), Фтороплекс (Fluoroplex)) и Цетуксимаб (доступный под товарным знаком эрбитукс (Erbitux)). Другие применяемые химиотерапевтические препараты включают карбоплатин (доступный под товарным знаком Параплатин (Paraplatin)), доцетаксел (доступный под товарным знаком Таксотер (Taxotere)) и гемцитабин, паклитаксел (доступный под товарным знаком Таксол (Taxol)), метотрексат (доступный под товарными знаками Абитрексат (Abitrexate), Фолекс (Folex), Фолекс PFS (Folex PFS), Мексат (Mexate), Мексат-AQ (Mexate-AQ)) и блеомицин (доступный под товарным знаком Бленоксан (Blenoxane)).

[0005] Несмотря на их противоопухолевую активность химиотерапия вызывает множество побочных эффектов. Трудности, связанные с побочными эффектами, включают высокий риск инфекции, кровоподтеки, анемию, тошноту, рвоту, стоматит, потерю слуха, усталость и потерю волос, которые беспокоят пациентов с ПКГШ. Клинические наблюдения показали, что цисплатин может вызывать почечную недостаточность и цитотоксический эффект. И цисплатин, и таксаны могут вызывать токсический эффект, в том числе гематологический токсический эффект, нейротоксический эффект, нефротоксический эффект и ототоксический эффект.

Фторурацил, метотрексат и таксаны могут вызывать мукозный цитотоксический эффект, ухудшающий результаты лучевой терапии. Химиотерапия на основе цисплатина до сих пор является наиболее широко применяемой при лечении ПКГШ из-за благоприятных показателей выживаемости. Тем не менее, существуют ограничения для химиотерапии цисплатином, такие как частые случаи устойчивости резистентности к лекарственному средству и высокая токсичность из-за больших доз. Идеальное лекарственное средство для химиотерапии при ПКГШ, которое может эффективно проявлять противоопухолевую активность, избегая при этом рецидивов и метастазов ПКГШ, должно обладать низкой цитотоксичностью и слабыми побочными эффектами.

[0006] Гепатоцеллюлярная карцинома (ГЦК) является пятой из самых распространенных злокачественных опухолей в мире, и второй из наиболее распространенных причин онкологической смертности. Она была наиболее распространена в странах Азии и Африки; однако в настоящее время наблюдается рост заболеваемости в странах Запада. ГЦК, являющаяся агрессивной опухолью, часто возникает на фоне хронических заболеваний печени и цирроза печени. Основные факторы риска, связанные с возникновением ГЦК, включают инфекции вируса гепатита В (ВГВ) или вируса гепатита С (ВГС), алкогольные болезни печени и неалкогольные жировые дистрофии печени. В западных странах диабет II типа и ожирение являются двумя растущими причинами возникновения ГЦК. Клинически ГЦК часто поздно диагностируется и демонстрирует крайне плохой прогноз после стандартных схем терапии, а также очень низкую выживаемость.

[0007] В настоящее время доступны несколько способов лечения ГЦК, включая хирургическое вмешательство (резекция опухоли и трансплантация печени), чрескожные вмешательства (инъекции этанола или уксусной кислоты, радиочастотная тепловая абляция, микроволновая абляция и криоабляция), трансартериальные вмешательства (эмболизация, хемоперфузия или химиоэмболизация), систематическая химиотерапия и молекулярно-целевые терапии. Лекарственные средства, применяемые при системной химиотерапии, можно разделить на цитотоксические препараты и молекулярно-целевые препараты. Цитотоксические лекарственные средства включают Кселоду (Xeloda) (капецитабин), Этопозид (Etoposide), Иринотекан (Irinotecan), 5-Fu, Доксорубицин (Doxorubicin), Митоксантрон (Mitoxantrone) и Тимитак (Thymitaq) (нолатрексед), которые демонстрируют сильные побочные эффекты и высокую частоту возникновения резистентности к лекарственному средству. Молекулярно-целевые лекарственные средства включают Нексавар (Nexavar) (сорафениб), Сулент (Sutent) (сунитиниб), Авастин (Avastin) (бевацизумаб), и т.д., также демонстрирующие высокую частоту возникновения резистентности к препарату. Побочные эффекты химиотерапии не только влияют на качество жизни пациентов с ГЦК, но и снижают выживаемость.

[0008] Разработка новых препаратов, эффективных против ГЦК и обладающих низкой токсичностью, является одной из важных задач в области медицины и фармации. Принципиальное значение имеет борьба с побочными эффектами, снижение заболеваемости и смертности от ГЦК, а также разработка новой системной химиотерапии для передовых методов лечения ГЦК. Идеальные химиотерапевтические лекарственные средства должны обладать противоопухолевыми свойствами с высокой эффективностью и очень низкой цитотоксичностью для пациентов.

[0009] Ресвератрол (3,5,4′-тригидрокси-транс-стильбен) - стильбеноид, тип природных фенолов и фитоалексин. В 1939 году Михио Такаока (Michio Takaoka) впервые сообщил в японской статье о выделении ресвератрола из ядовитого, но лекарственного Veratrum album крупноцветкового сорта. Ресвератрол содержится в кожуре красного винограда и в других фруктов, а также в корнях японского горца (Polygonum cuspidatum). Фармакологические эффекты ресвератрола включают продление жизни, кардиопротекторный эффект, антидиабетический эффект и противовоспалительный эффект. Кроме того, ресвератрол показывает противораковое действие на животных моделях. Однако это фармацевтическое противораковое действие ограниченно из-за низкой биодоступности.

[0010] Заметной токсичности ресвератрола не наблюдалось на группе крыс, получавших 0,3 г/кг в день на протяжении 4 недель. В предыдущих исследованиях обсуждались нежелательные явления ресвератрола, который был протестирован на 104 пациентах (включая плацебо-группу). Самыми высокими дозами были 5 г/70 кг для однократного приема и 0,9 г в день для итерационного приема. Ни в одном из этих исследований серьезные нежелательные явления не были обнаружены. Нежелательные явления были незначительными и продолжались лишь в течении нескольких дней.

[0011] Птеростильбен представляет собой фенольный стильбеноид естественного происхождения, являющийся фитоалексином. Птеростильбен может содержаться в винограде, разнообразных ягодах и лекарственных растениях. Фармакологическими эффектами птеростильбена являются антимикробный, антиоксидантный, противовоспалительный, гиполипидемический, антидиабетический эффекты и улучшение памяти. Побочные эффекты и токсичность птеростильбена очень низки. Результаты 28-дневного исследования подострой токсичности показали, что при дозе до 3,0 г/кг в день не было отмечено серьезных нежелательных биохимических показателей и токсических эффектов.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0012] В результате, согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы I:

или его стереоизомер, геометрический изомер, таутомер, N-оксид, гидрат, сольват, метаболит или фармацевтически приемлемая соль или пролекарство,

где R′, R представляет собой водород или С_1-3 алкил; R₁, R₂, R₃ каждый независимо представляют собой водород, С_1-3 алкил или ;

R₄, R₅, R₆ каждый независимо представляют собой водород, C_1-3алкил, (СН₂)_n-CH₂OH или (СНОН)_n-СН₂ОН (n=0-3); и

по меньшей мере один из R₁, R₂, R₃ представляет собой .

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения, когда R₁, R₂, R₃ каждый независимо представляют собой , по меньшей мере один из R₄, R₅, R₆ представляет собой (СН₂)n-СН₂ОН, n=от 0 до 3; в некоторых вариантах реализации настоящего изобретения, когда R₁, R₂, R₃ представляет собой , по меньшей мере один из R₄, R₅, R₆ представляет собой (CHOH)_n-CH₂OH, n=от 0 до 3.

[0013] Еще одним аспектом настоящего изобретения является обеспечение фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы I. Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению дополнительно содержит фармацевтически приемлемый носитель, вспомогательное вещество, разбавитель, адъювант, среду или их комбинации.

[0014] Еще одним аспектом настоящего изобретения является обеспечение способа лечения плоскоклеточной карциномы/гепатомы у субъекта, нуждающегося в этом, способ, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы I.

[0015] Еще одним аспектом настоящего изобретения является обеспечение способа изготовления соединения формулы I, включающего снятие защитных групп с соединения формулы II:

где R′, R представляют собой водород или C_1-3 алкил;

Х₁, Х₂, X₃ каждый независимо представляют собой водород или С_1-3 алкил, или , где R₇ и R₈ независимо представляют собой водород или С_1-3 алкил; Х₁, Х₂, Х₃ не являются выбранными из водорода и С_1-3алкила, с получением соединения формулы I:

где R′, R представляют собой водород или С_1-3алкил;

R₁, R₂, R₃ каждый независимо представляют собой водород, С_1-3алкил, или ;

R₄, R₅, R₆ каждый независимо представляют собой водород, С_1-3алкил, (СН₂)_n-СН₂ОН или (СНОН)_n-СН₂ОН, n=от 0 до 3;

по меньшей мере один из R₁, R₂, R₃ представляет собой ;

когда R₁, R₂, R₃ каждый независимо представляют собой , по меньшей мере один из R₄, R₅, R₆ представляет собой (CH₂)_n-CH₂OH, n=от 0 до 3; и

когда R₁, R₂, R₃ независимо представляют собой , по меньшей мере один из R₄, R₅, R₆ представляет собой (СНОН)_n-СН₂ОН, n=от 0 до 3.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения соединение формулы II синтезируют путем взаимодействия соединения формулы III:

с соединением формулы IV:

где R′, R представляют собой водород или C_1-3алкил; Y₁, Y₂, Y₃ каждый независимо представляют собой водород или С_1-3алкил; и Р представляет собой OH или Cl.

[0016] Согласно другому аспекту настоящего изобретения, предложено соединение формулы II:

где R′, R представляют собой водород или С_1-3алкил;

Х₁, Х₂, Х₃ каждый независимо представляют собой водород, C_1-3алкил или

,

где R₇ и R₈ каждый независимо представляют собой водород или С_1-3алкил;

Х₁, Х₂, Х₃ не все выбраны из водорода и C_1-3алкила.

[0017] Соединения по настоящему изобретению демонстрируют мощное противораковое действие с очень низкой токсичностью по сравнению с некоторыми из лекарственных средств/соединений, используемых на известном уровне техники; кроме того, высокая растворимость соединений по настоящему изобретению в воде может дополнительно привести к высокой скорости всасывания у субъекта, и, таким образом, полезна и безопасна для применения в лечении рака.

[0018] Настоящее изобретение описано далее в следующих вариантах реализации, иллюстрациях и примерах. Не следует, однако, рассматривать примеры ниже как ограничивающие объем изобретения, предполагается, что модификации будут очевидны специалистам в данной области, что модификации будут в пределах сущности изобретения и объема прилагаемой формулы изобретения.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

[0019] ФИГ. 1: влияние соединения 2-4 на жизнеспособность устойчивой к цисплатину клетки плоскоклеточной карциномы (ПКК) головы и шеи.

[0020] ФИГ. 2: влияние соединения 2-4 на жизнеспособность клеток гепатомы Нер3В.

[0021] ФИГ. 3: влияние соединения 2-4 в голой мышиной модели с ксенотрансплантатной ПКК.

[0022] ФИГ. 4: влияние соединения 2-4 на размер опухоли в голой мышиной модели с ксенотрансплантатной ПКК.

[0023] ФИГ. 5: влияние соединения 2-4 на массу опухоли в голой мышиной модели с ксенотрансплантатной ПКК.

[0024] ФИГ. 6: средний профиль масса тела - время соединения 2-4 в голой мышиной модели с ксенотрансплантатной ПКК.

[0025] ФИГ. 7: влияние соединения 2-4 на нормальные клетки полости рта.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНОГО ВАРИАНТА РЕАЛИЗАЦИИ

Определение и общая терминология

[0026] Если не указано иное, изображенные здесь структуры также включают все изомерные (например, энантиомерные, диастереомерные и геометрические (или конформационные)) формы структуры; например, R и S конфигурации для каждого асимметричного центра, (Z) и (Е) изомеры по положению двойной связи и (Z) и (Е) конформационные изомеры. Следовательно, отдельные стереохимические изомеры, а также энантиомерные, диастереомерные и геометрические (или конформационные) смеси настоящих соединений находятся в пределах объема настоящего изобретения.

[0027] Термин "пролекарство" относится к соединению, которое превращается in vivo в соединение формулы (I). Такое превращение может быть вызвано, например, гидролизом в крови или ферментативным превращением пролекарственной формы в родительскую форму в крови или ткани. Пролекарства соединений по изобретению могут представлять собой, например, сложные эфиры. Сложные эфиры, которые могут быть использованы в качестве пролекарств в настоящем изобретении, представляют собой фенильные сложные эфиры, алифатические С_1-24 сложные эфиры, ацилоксиметильные сложные эфиры, карбонаты, карбаматы и сложные эфиры аминокислот. Например, соединение по настоящему изобретению, содержащее ОН-группу, может быть ацилировано в этом положении в его пролекарственной форме. Другие пролекарственные формы включают фосфаты, такие как, например, фосфаты, образующиеся при фосфонировании ОН-группы родительского соединения. Подробное обсуждение пролекарств приводится в статьях "Pro-drags as Novel Delivery Systems", Higuchi и соавт., Vol.14, A.C.S. Symposium Series; "Bioreversible Carriers in Drug Design", Roche и соавт., American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987; "Prodrugs: Design and Clinical Applications", Rautio и соавт., Nature Reviews Drug Discovery, 2008, 7, 255-270 и "Prodrugs of Phosphates and Phosphonates", Hecker и соавт., J. Med. Chem., 2008, 51, 2328-2345, каждая из которых включена в настоящий документ посредством ссылки.

[0028] Если не указано иное, все таутомерные формы соединений согласно изобретению находятся в пределах объема настоящего изобретения. Кроме того, если не указано иное, структуры, изображенные здесь, также включают соединения, которые отличаются только присутствием одного или более изотопно-обогащенных атомов.

[0029] "Сольват" относится к ассоциации или комплексу одной или более молекул растворителя и соединения согласно изобретению. Примеры растворителей, образующих сольваты, включают, но не ограничиваются ими, воду, изопропанол, этанол, метанол, ДМСО, этилацетат, уксусную кислоту и этаноламин. Термин "гидрат" относится к комплексу, где молекула растворителя представляет собой воду.

[0030] "Метаболит" представляет собой продукт, полученный путем метаболизма указанного соединения или его соли в организме. Метаболиты соединения могут быть идентифицированы с использованием обычных методик, известных в данной области, и их активности могут определены с помощью тестов, подобных описанным в настоящем документе. Такие продукты могут быть результатом, например, окисления, восстановления, гидролиза, амидирования, дезамидирования, этерификации, деэтерификации, ферментативного расщепления, и т.п. введенного соединения. Соответственно, настоящее изобретение включает метаболит соединения согласно настоящему изобретению, который включает метаболит, полученный после контактирования соединения согласно настоящему изобретению с млекопитающим в течение определенного периода времени.

[0031] Используемый здесь термин "фармацевтически приемлемая соль" относится к органическим или неорганическим солям соединения согласно изобретению. Фармацевтически приемлемые соли хорошо известны в данной области. Например, Берге (Berge) и соавт. описывают фармацевтически приемлемые соли в статье в J. Pharmacol Sci, 1977, 66, 1-19, включенной в настоящий документ посредством ссылки. Некоторые неограничивающие примеры фармацевтически приемлемых, нетоксичных солей включают соли аминогруппы, образованные с неорганическими кислотами, такими как соляная кислота, бромистоводородная кислота, фосфорная кислота, серная кислота и хлорная кислота или с органическими кислотами, такими как уксусная кислота, щавелевая кислота, малеиновая кислота, винная кислота, лимонная кислота, янтарная кислота или малоновая кислота, или с помощью других способов, используемых в данной области, такими как ионный обмен. Другие фармацевтически приемлемые соли включают адипат, альгинат, аскорбат, аспартат, бензолсульфонат, бензоат, бисульфат, борат, бутират, камфорат, камфорсульфонат, цитрат, циклопентанпропионат, диглюконат, додецилсульфат, этансульфонат, формиат, фумарат, глюкогептонат, глицерофосфат, глюконат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, гидроиодид, 2-гидрокси-этансульфонат, лактобионат, лактат, лаурат, лаурилсульфат, малат, малеат, малонат, метансульфонат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, нитрат, олеат, оксалат, пальмитат, памоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, фосфат, пикрат, пивалат, пропионат, стеарат, сукцинат, сульфат, тартрат, тиоцианат, п-толуолсульфонат, ундеканоат, соли валериановой кислоты и тому подобные. Фармацевтически приемлемая соль представляет собой соль щелочного металла, соль щелочноземельного металла, соль аммония или соль N⁺(C_1-4алкил)₄. Это изобретение также предусматривает кватернизацию любых основных азотсодержащих групп соединений, описанных здесь. Растворимые в воде или в масле или диспергируемые продукты могут быть получены путем такой кватернизации. Типичные соли щелочных или щелочноземельных включают натрий, калий, кальций, магний и им подобные. Далее фармацевтически приемлемые соли включают, когда это целесообразно, нетоксичные аммониевые, четвертичные аммониевые и аминовые катионы, образованные с использованием противоионов, таких как галогенид, гидроксид, карбоксилат, сульфат, фосфат, нитрат, C_1-8 сульфонат и арилсульфонат.

[0032] Фраза "фармацевтически приемлемый" означает, что соединение, сырье, композиция и/или дозы должны быть совместимы в пределах разумного при медицинской оценке и, при контакте с тканями пациентов, не проявлять высокой токсичности, не вызывать раздражение, преобразование, или другие проблемы и осложнения, которые связаны с разумным соотношением польза/риск, при этом являясь эффективно применимыми для заданных целей.

[0033] Используемый здесь термин "терапевтически эффективное количество" означает количество соединения, которое при введении млекопитающему для лечения заболевания является достаточным для осуществления такого лечения заболевания. "Терапевтически эффективное количество" будет варьироваться в зависимости от соединения, заболевания и его тяжести, и возраста, веса и т.д., млекопитающего, подлежащего лечению.

Синтез соединений согласно изобретению

[0034] В целом, соединения согласно изобретению синтезируют согласно схеме 1. Как показано на схеме 1, трифенольное соединение (соединение 1-1) и различные эквиваленты соединения 1-2 подвергали взаимодействию в N,N-диметиламинопиридине (ДМАП) и катализировались N,N-дициклогексилкарбодиимидом (ДЦК) для получения различных сложных эфиров (от соединения 1-3 до соединения 1-7) после связывания и очистки. Полученные сложные эфиры затем подвергали снятию защитных групп в метаноле в присутствии кислоты Льюиса с образованием соответствующих соединений (от соединения 1-8 до соединения 1-9).

Схема 1

[0035] Синтез соединения 2-3 и соединения 2-4 см. в схеме 2.

Схема 2

Пример 1

Получение 4-(3,5-диметоксистирил)фенил

2,2,5-триметил-1,3-диоксан-5-карбоксилата (соединение 2-3).

[0036] См. схему 2. К перемешиваемому раствору соединения 2-2 (0,740 г, 4,25 ммоль) в CH₂Cl₂ (25 мл), при комнатной температуре последовательно добавляли N,N-дициклогексилкарбодиимид (ДЦК, 1,140 г, 5,53 ммоль), соединение 2-1 (1,090 г, 4,25 ммоль) и N,N-диметиламинопиридин (ДМАП, 0.052 g, 0,43 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при той же температуре в течение 18 часов и затем добавляли Н₂О (15 мл), чтобы остановить реакцию. Водный слой отделяли и экстрагировали CH₂Cl₂ (2×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, который затем очищали путем флеш-хроматографии на силикагеле (элюент: EtOAc/н-гексан (1:2)) с получением соединения 2-3 (1,070 г, выход 61%) в виде белого твердого вещества.

[0037] ¹Н ЯМР (CDCl₃, 200 МГц): δ 7,49 (д, J=8,6 Гц, 2Н), 7,09-6,99 (м, 4Н), 6,65-6,63 (м, 2Н), 6,38 (с, 1Н), 4,1 (д, J=11,8 Гц, 2Н), 3,80 (с, 6Н), 3,75 (д, J=11,8 Гц, 2Н), 1,46 (с, 3Н), 1,43 (с, 3Н), 1,33 (с, 3Н); ¹³С ЯМР (CDCl₃, 50 МГц): δ 172,7, 160,7, 150,1, 139,1, 134,5, 129,0, 128,0, 127,4, 121,7, 104,5, 100,1, 97,0, 66,0, 55,3, 43,0, 24,8, 22,1, 18,0

Пример 2

Получение 4-(3,5-диметоксистирил)фенил-3-гидрокси-2-гидроксиметил)-2-метилпропаноата (соединение 2-4).

[0038] См. схему 2. К перемешиваемому раствору соединения 2-3 (0,900 г, 2,18 ммоль) в CH₂Cl₂ (20 мл) добавляли при комнатной температуре 12 Н HCl/МеОН (1:30, 2 мл). Реакционную смесь перемешивали при той же температуре в течение 30 минут и затем концентрировали с получением неочищенного продукта, который затем перекристаллизовывали с получением соединения 2-4 (0,66 г, выход 81%) в виде белого твердого вещества.

[0039] ¹Н ЯМР (CDCl₃, 200 МГц): δ 7,50 (д, J=8.6 Гц, 2Н), 7,19-6,99 (м, 4Н), 6,64-6,63 (м, 2Н), 6,38 (с, 1Н), 4,05 (д, J=10,0 Гц, 2Н), 3,85-3,80 (м, 8Н), 2,89 (шир с, 2Н), 1,21 (с, 3Н); ¹³С ЯМР (CDCl₃, 50 МГц): δ 174,7, 160,9, 149,9, 139,1, 135,2, 129,0, 128,0, 127,5, 121,8, 104,5, 100,1, 68,7, 55,3, 49,5, 17,0. Температура плавления соединения 2-4: 108,0-109,5°C.

[0040] Подробный синтез соединений 3-3, 3-4, 3-5 и 3-6 см. в схеме 3.

Схема 3

Пример 3

Получение 4′-(2,2,5-триметил-1,3-диоксан-5-карбокси)-ресвератрола (соединение 3-3) и 3,4′-(2,2,5-триметил-1,3-диоксан-5-карбокси)-ресвератрола (соединение 3-4)

[0041] К перемешиваемому раствору соединения 3-2 (1,373 г, 7,88 ммоль) в ДМФ (25 мл) при комнатной температуре последовательно добавляли 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (ЭДК, 1,224 г, 7,88 ммоль), гидроксибензотриазол (ГОБТ, 1,065 г, 7,88 ммоль), соединение 3-1 (0,600 г, 2,62 ммоль) и Et3N (0.797 g, 7,88 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при той же температуре в течение 32 часов и затем добавляли H₂O (30 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, который затем очищали путем флеш-хроматографии на силикагеле (элюент: EtOAc /CH₂Cl₂/н-гексан (1:1:1)) с получением соединения 3-3 (0.537 г, выход 53%) в виде белого твердого вещества и соединения 3-4 (0,125, 9% выход) в виде белого твердого вещества. Следует обратить внимание, что соединение 3-3 данного примера является также соединением 1-3 на схеме 1; соединение 3-4 данного примера является также соединением 1-4 на схеме 1.

[0042] Соединение 3-3: ¹Н ЯМР (CDCl₃, 500 МГц):δ 7,44 (д, J=6,5 Гц, 2Н), 7,07 (д, J=6,5 Гц, 2Н), 6,94-6,77 (м, 2Н), 6,55 (с, 2Н), 6,33 (с, 1H), 4,37 (д, 7=12,0 Гц, 2Н), 3,80 (д, J=12,0 Гц, 2Н), 1,51 (с, 3Н), 1,48 (с, 3Н), 1,35 (с, 3Н); ¹³С ЯМР (CDCl₃, 125 МГц): δ173,1, 157,5, 149,9, 139,5, 135,2, 128,7, 127,9, 127,4, 121,6, 121,7, 105,8, 102,6, 98,4, 66,0, 42,4, 25,3, 22,0, 18,4

[0043] Соединение 3-4: ¹H ЯМР (CDCl₃, 500 МГц): δ 7.49 (d, J=6.5 Гц, 2Н), 7.11 (d, J=6.5 Гц, 2Н), 7.09-6.91 (m, 2Н), 6.84 (s, 2Н), 6.53 (s, 1Н), 4.36 (d, J=11.0 Гц, 4Н), 3.80 (d, J=11.5 Гц, 4Н), 1.51(s, 6Н), 1.48 (s, 6Н), 1,38 (s, 6Н); ¹³С ЯМР (CDCl₃, 125 МГц): δ173.2, 157.3, 151.9, 150.5, 139.6, 134.8, 129.0, 127.7, 127.6, 121.7, 111.7, 111.1, 108.3, 98.3, 66.0, 42.3, 25.1,22.2, 18.5

Пример 4

Получение 4′-[2,2-бис(гидроксиметил)пропанокси]-ресвератрола (соединение 3-5)

[0044] К перемешиваемому раствору соединения 3-3 (0,232 г, 0,60 ммоль) в CH₂Cl₂ (10 мл) добавляли при комнатной температуре 12Н HCl/МеОН (1:30, 1 мл). Реакционную смесь перемешивали при той же температуре в течение 30 минут и затем концентрировали с получением неочищенного продукта, который затем перекристаллизовывали с получением соединения 3-5 (0,188 г, выход 90%) в виде белого твердого вещества. Следует обратить внимание, что соединение 3-5 данного примера является также соединением 1-8 на схеме 1.

[0045] ¹Н ЯМР (MeOD, 200 МГц): δ 7,65 (д, J=8,6 Гц, 2Н), 7.23-7.07 (м, 4Н), 6.64-6.63 (м, 2Н), 6,35 (с, 1Н), 3,98 (д, J=10,0 Гц, 2Н), 3,87 (д, J=10,0 Гц, 2Н), 1,43 (с, 3Н); ¹³С ЯМР (MeOD, 50 МГц): δ172.5, 156,8, 148,8, 137,7, 133,6, 127,3, 125,5, 125,4, 120,2, 103,2, 100,3, 63,0, 49,2, 14,4. Температура плавления соединения 3-5: 138,0-139,5°C.

Пример 5

Получение 3,4′-[2,2-бис(гидроксиметил)пропанокси]-ресвератрола (соединение 3-6)

[0046] К перемешиваемому раствору соединения 3-4 (0,098 г, 0,18 ммоль) в CH₂Cl₂ (2 мл) добавляли при комнатной температуре 12Н HCl/МеОН (1:30, 0,2 мл). Реакционную смесь перемешивали при той же температуре в течение 30 минут и затем концентрировали с получением неочищенного продукта, который затем перекристаллизовывали с получением соединения 3-6 (0,075 г, выход 90%) в виде белого твердого вещества. Следует обратить внимание, что соединение 3-6 данного примера является также соединением 1-9 на схеме 1.

[0047] ¹Н-ЯМР (MeOD, 500 МГц): δ 7,58 (д, J=8,0 Гц, 2Н), 7,20-7,05 (м, 4Н), 6.87-6.84 (м, 2Н), 6,49 (с, 1Н), 3,87 (д, J=11,0 Гц, 4Н), 3,77 (д, J=11,0 Гц, 4Н), 1,32 (с, 6Н); ¹³С ЯМР (MeOD, 125 МГц): δ172.5, 158,2, 152,2, 150,6, 139,4, 134,9, 128,2, 127,1, 121,7, 110,5, 108,0, 64,5, 50,8, 50,7, 50,6, 16,0, 15,9. Температура плавления соединения 3-6: 146,0-148,0°C.

Пример 6

Получение 3,5,4′-[2,2-бис(гидроксиметил)пропанокси]-ресвератрола (соединение 4-3)

[0048] Синтез соединения 4-3 см. в схеме 4.

Схема 4

[0049] К раствору соединения 4-1 (228 мг, 1,0 ммоль) в метиленхлориде (5,0 мл) медленно добавляли 2,2,5-триметил-1,3-диоксан-5-карбонил (636 мг, 3,3 ммоль) и триэтиламин(0,55 мл, 3,96 ммоль) и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 1,0 часа. Реакционную смесь охлаждали водой и экстрагировали метиленхлоридом. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO₄ (тв.) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток затем очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле с получением соединения 4-2.

[0050] К раствору соединения 4-2 (348 мг, 0,5 ммоль) в ТГФ (3,0 мл) медленно добавляли 2Н HCl (водн.) (3,0 мл) и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 1,0 часа. Раствор разбавляли водой и экстрагировали EtOAc. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO₄ (тв.) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток затем очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле с получением соединения 4-3 (230 мг, 0,4 ммоль) с выходом 80%. Следует обратить внимание, что соединение 4-2 данного примера является также соединением 1-5 на схеме 1; соединение 4-3 данного примера является также соединением 1-10 на схеме 1.

[0051] ¹Н-ЯМР (500 МГц, ДМСО-d⁶): δ: 1,21 (с, 9Н), 3.52-3.55 (м, 6Н), 3,65-3,70 (м, 6Н), 4.90-4.96 (м, 6Н), 6,78 (с, 1H), 7,09 (д, 2Н), 7,22 (д, 2Н), 7,27 (д, 2Н), 7,66 (д, 2Н). МС: 577 (М+1). Температура плавления соединения 4-3: 228,0-229,5°C

Пример 7

Получение 5-[2,2-бис(гидроксиметил)пропанокси]-ресвератрола (соединение 5-3) [0052] Синтез соединения 5-3 см. в схеме 5.

Схема 5

[0053] К раствору соединения 5-1 (256 мг, 1,0 ммоль) в метиленхлориде (5,0 мл) медленно добавляли 2,2,5-триметил-1,3-диоксан-5-карбонил (212 мг, 1,1 ммоль) и триэтиламин (0,17 мл, 1,2 ммоль) и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 1,0 часа. Реакционную смесь охлаждали водой и экстрагировали метиленхлоридом. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO₄ (тв.) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток затем очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле с получением соединения

5-2.

[0054] К раствору соединения 5-2 (412 мг, 1,0 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (10 мл), медленно добавляли BCl₃.SMe₂ (2,0 М в CH₂Cl₂, 2,5 мл, 5,0 ммоль), а затем нагревали с обратным холодильником в течение 16 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, останавливали реакцию водой и экстрагировали EtOAc. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO₄ (тв.) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток затем очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле с получением соединения 5-3 (207 мг, 0,6 ммоль) с выходом 60%. Следует обратить внимание, что соединение 5-3 данного примера является также соединением 1-11 на схеме 1.

[0055] ¹Н-ЯМР (500 МГц, ДМСО-d⁶): δ: 1,19 (с, 3Н), 3,52 (д, 4Н), 3,65 (д, 3Н), 4,90 (с, 2Н), 6,35 (т, 1Н), 6,70 (с, 1Н), 6.74-6.78 (м, 3Н), 6,90 (д, 1Н), 7,02 (д, 1Н), 7,41 (д, 2Н), 9,64 (с (шир.), 2Н). МС: 345 (М+1). Температура плавления соединения 5-3: 135,6-136,9°C.

Пример 8

Получение 3,5-[2,2-бис(гидроксиметил)пропанокси]-ресвератрола (соединение 6-3)

[0056] Синтез соединения 6-3 см. в схеме 6.

Схема 6

[0057] К раствору соединения 6-1 (242 мг, 1,0 ммоль) в метиленхлориде (5,0 мл) медленно добавляли 2,2,5-триметил-1,3-диоксан-5-карбонилхлорид (424 мг, 2,2 ммоль) и триэтиламин (0,37 мл, 2,64 ммоль) и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 1,0 часа. Реакционную смесь охлаждали водой и экстрагировали метиленхлоридом. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO₄ (тв.) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток затем очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле с получением соединения 6-2.

[0058] К раствору соединения 6-2 (554 мг, 1,0 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (10 мл), медленно добавляли BCl₂.SMe₂ (2,0 М в CH₂Cl₂, 2,5 мл, 5,0 ммоль), а затем нагревали с обратным холодильником в течение 16 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, охлаждали водой и экстрагировали EtOAc. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO₄ (тв.) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток затем очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле с получением соединения 6-3 (300 мг, 0,65 ммоль) с выходом 65%. Следует обратить внимание, что соединение 6-3 данного примера является также соединением 1-12 на схеме 1.

[0059] ¹Н-ЯМР (500 МГц, ДМСО-d⁶): δ: 1,20 (с, 6Н), 3,53 (м, 4Н), 3,68 (м, 4Н), 4,95 (м, 3Н), 6,71 (м, 1H), 6,77 (д, 2Н), 7,00-7,03 (м, 1Н), 7,15 (м, 3Н), 7,45 (д, 2Н). МС: 461 (М+1). Температура плавления соединения 6-3: 195,0-197,0°C.

Пример 9

Получение 3,4′метил-5-[2,2-бис(гидроксиметил)пропанокси]-ресвератрола (соединение 7-3)

[0060] Синтез соединения 7-3 см. на схеме 7.

Схема 7

[0061] К раствору соединения 7-1 (256 мг, 1,0 ммоль) в метиленхлориде (5,0 мл) медленно добавляли 2,2,5-триметил-1,3-диоксан-5-карбонилхлорид (212 мг, 1,1 ммоль) и триэтиламин (0,17 мл, 1,2 ммоль) и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 1,0 часа. Реакционную смесь охлаждали водой и экстрагировали метиленхлоридом. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO₄ (тв.) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток затем очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле с получением соединения 7-2

[0062] К раствору соединения 7-2 (206 мг, 0,5 ммоль) в ТГФ (3,0 мл) медленно добавляли 2H HCl (водн.) (3,0 мл) и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 1,0 часа. Раствор разбавляли водой и экстрагировали EtOAc. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO₄ (тв.) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток затем очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле с получением соединения 7-3 (158 мг, 0,42 ммоль) с выходом 84%.

[0063] ¹Н-ЯМР (500 МГц, ДМСО-d⁶): δ: 1,20 (с, 3Н), 3,54 (м, 2Н), 3,68 (м, 2Н), 3,78 (с, 6Н), 4,89 (с, 2Н), 6,53 (с, 1H), 6,87 (с, 1Н), 6,94 (д, 2Н), 7,04 (т, 2Н), 7,19 (д, 1Н), 7,54 (д, 2Н). МС: 372,9 (М+1). Температура плавления соединения 7-3: 101,0-102,5°C.

Пример 10

Получение 3-метил-5,4′-[2,2-бис(гидроксиметил)пропанокси]-ресвератрола (соединение 8-3)

[0064] Синтез соединения 8-3 см. на схеме 8.

Схема 8

[0065] К раствору соединения 8-1 (242 мг, 1,0 ммоль) в метиленхлориде (5,0 мл) медленно добавляли 2,2,5-триметил-1,3-диоксан-5-карбонилхлорид (424 мг, 2,2 ммоль) и триэтиламин (0,42 мл, 3,0 ммоль) и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 1,0 часа. Реакционную смесь охлаждали водой и экстрагировали метиленхлоридом. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO₄ (тв.) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток затем очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле с получением соединения 8-2.

[0066] К раствору соединения 8-2 (277 мг, 0,5 ммоль) в ТГФ (3,0 мл) медленно добавляли 2Н HCl (водн.) (3,0 мл) и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 1,0 часа. Раствор разбавляли водой и экстрагировали EtOAc. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO₄ (тв.) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток затем очищали путем колоночной хроматографии на силикагеле с получением соединения 8-3 (190 мг, 0,4 ммоль) с выходом 80%.

[0067] ¹Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d⁶): δ: 1,20 (с, 6Н), 3,53 (м, 4Н), 3,67 (м, 4Н), 3,79 (с, 3Н), 4,93 (т, 4Н), 6,57 (т, 1Н), 6,92 (с, 1Н), 7.06-7.09 (м, 3Н), 7.18-7.29 (м, 2Н), 7,63 (д, 2Н). МС: 475,4 (М+1). Температура плавления соединения 8-3: 168,0-169,5°C.

Пример 11

Получение 3,5-ацетил-4′-[2,2-бис(гидроксиметил)пропанокси]-ресвератрола (соединение 9-4)

[0068] Синтез соединения 9-4 см. на схеме 9.

Схема 9

[0069] К раствору соединения 9-1 (824 мг, 2,0 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (20 мл), медл