Производные соединения пиразола

Производные соединения пиразола

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Перекрестная ссылка на родственные заявки

В данной заявке заявляется приоритет предварительной заявки на патент США № 61/541182, поданной 30 сентября 2011 года, содержание которой во всей ее полноте включено в данное описание посредством ссылки.

Уровень техники

Центральные каннабиноидные (CB1) рецепторы 1 экспрессируются в мозге. Их функция оказывает влияние на многие неврологические и психологические осложнения. См., например, Goutopoulos et al., Pharmacol. Ther., 2002, 95, 103-7; и Shia et al., патент США № 7834046. Римонабант, антагонист центрального рецептора СВ1, использовали для лечения ожирения. Однако указанное лекарственное средство оказывает вредное побочное психиатрическое действие. См., например, Wu et al., Curr. Top. Med. Chem., 2011, 11, 1421-29.

Рецепторы CB1 экспрессируются также в ряде периферических тканей, например, в печени, в жировых тканях, адипоцитах и надпочечниках. См. Marzo et al., Nat. Rev. Endocrinol., 2009, 5, 633-638. Антагонисты периферических рецепторов CB1 являются потенциальными лекарственными препаратами для лечения многих расстройств, таких как ожирение, избыточный вес, неалкогольная жировая болезнь печени, сахарный диабет 2 типа, нефропатия, фиброз почек, остеопороз и остеоартрит. См., например, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2009, 19, 639-643; J. Clin. Invest., 2010, 120, 2953-2966; Bioorg. Med. Chem. Lett., 2010, 20, 4573-4577; и Diabetes 2010, 59, 1046-1054. Общепризнано, что подобные лекарственные препараты не должны иметь нежелательных побочных эффектов, которые наблюдаются для римонабанта. См., например, Wu et al., Curr. Top. Med. Chem., 2011, 11, 1421-29.

Еще предстоит выявить среди периферических рецепторов CB1, как синтезированных, так и еще не синтезированных, безопасные и эффективные кандидаты для использования в качестве лекарственных средств.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение основано на открытии, заключающемся в том, что некоторые производные соединения пиразола эффективны при лечении расстройств, опосредованных периферическим рецептором CB1.

В соответствии с одним аспектом, настоящее изобретение касается производных соединений пиразола формулы (I):

В указанной формуле R₁ обозначает Н, С₁-С₁₀ алкил, С₂-С₁₀ алкенил, С₂-С₁₀ алкинил, C₃-C₂₀ циклоалкил, С₃-С₂₀ циклоалкенил, С₃-С₂₀ гетероциклоалкил, C₃-C₂₀ гетероциклоалкенил, арил или гетероарил; каждый из R₂ и R₃ независимо обозначает Н, С₁-С₁₀ алкил, С₃-С₂₀ циклоалкил, C₃-C₂₀ гетероциклоалкил, арил или гетероарил; или R₂ вместе с R₃ и атомом азота, к которому они присоединены, образуют C₃-C₂₀ гетероциклоалкил, C₃-C₂₀ гетероциклоалкенил или гетероарил; каждый из R₄ и R₅ независимо обозначает Н, С₁-С₁₀ алкил, С₃-С₂₀ циклоалкил, C₃-C₂₀ циклоалкенил, С₃-С₂₀ гетероциклоалкил, C₃-C₂₀ гетероциклоалкенил, арил, гетероарил, C(O)R_a, C(O)OR_a, C(O)NR_aR_b, C(S)NR_aR_b, C(=NH)NR_aR_b, C(=N-CN)NR_aR_b, C(=N-NO₂)NR_aR_b, S(O)R_a, S(O₂)R_a, S(O)NR_aR_b или S(O₂)NR_aR_b; или R₄ вместе с R₅ и атомом азота, к которому они присоединены, образуют C₃-C₂₀ гетероциклоалкил, C₃-С₂₀ гетероциклоалкенил или гетероарил; где каждый из R_a и R_b независимо обозначает H, C₁-C₁₀ алкил, C₃-C₂₀ циклоалкил, С₃-C₂₀ гетероциклоалкил, арил или гетероарил, или R_a вместе с R_b и атомом азота, к которому они присоединены, образуют C₃-C₂₀ гетероциклоалкил, C₃-C₂₀ гетероциклоалкенил или гетероарил, а Х обозначает группу или где R₆ обозначает Н, C₁-C₁₀ алкил, C₃-C₂₀ циклоалкил, C₃-C₂₀ циклоалкенил, С₃-С₂₀ гетероциклоалкил, С₃-C₂₀ гетероциклоалкенил, арил или гетероарил; R₇ представляет собой Н, атом галогена, трифторметил, C₁-C₁₀ алкил, C₁-C₁₀ алкокси, нитро, циано, амино или гидрокси; а m принимает значение 0, 1, 2, 3, 4 или 5.

Одно подмножество вышеописанных соединений составляют производные соединения пиразола, в которых X обозначает: .

В указанных соединениях R₁ обозначает арил, замещенный атомом галогена (например, 2,4-дихлорфенил); каждый из R₂ и R₃ независимо обозначает Н или пиперидинил; каждый из R₄ и R₅ независимо обозначает Н или S(O₂)NR_aR_b, где каждый из R_a и R_b независимо обозначает Н, C₁-C₁₀ алкил, С₃-C₂₀ циклоалкил, С₃-C₂₀ гетероциклоалкил, арил или гетероарил; или R_a вместе с R_b и атомом азота, к которому они присоединены, образуют C₃-C₂₀ гетероциклоалкил, С₃-C₂₀ гетероциклоалкенил или гетероарил; R₆ обозначает C₁-C₁₀ алкил, С₃-C₂₀ циклоалкил или арил.

Другое подмножество вышеописанных соединений составляют производные соединения пиразола, в которых X обозначает:

В указанных соединениях R₁ обозначает арил, замещенный атомом галогена (например, 2,4-дихлорфенил); каждый из R₂ и R₃ независимо обозначает Н или пиперидинил; каждый из R₄ и R₅ независимо обозначает Н или S(O₂)NR_aR_b, где каждый из R_a и R_b независимо обозначает Н, C₁-C₁₀ алкил, С₃-C₂₀ циклоалкил, С₃-C₂₀ гетероциклоалкил, арил или гетероарил; или R_a вместе с R_b и атомом азота, к которому они присоединены, образуют C₃-C₂₀ гетероциклоалкил, С₃-C₂₀ гетероциклоалкенил или гетероарил; R₇ обозначает Н, атом галогена или трифторметил; а m равно 1.

Термин ″алкил″ означает насыщенную, линейную или разветвленную углеводородную группу, такую как -СН₃ или -СН(СН₃)₂. Термин ″алкенил″ означает линейную или разветвленную углеводородную группу, которая содержит по меньшей мере одну двойную связь, такую как -СН=СН-СН₃. Термин ″алкинил″ означает линейную или разветвленную углеводородную группу, которая содержит по меньшей мере одну тройную связь, такую как -С≡С-СН₃. Термин ″алкокси″ относится к -O-алкилу. Примеры алкокси включают, однако этим не ограничиваясь, метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси, изобутокси, втор-бутокси и трет-бутокси. Термин ″циклоалкил″ относится к насыщенной циклической углеводородной группе, такой как циклогексил. Термин ″циклоалкенил″ относится к неароматической циклической углеводородной группе, которая содержит по меньшей мере одну двойную связь, такой как циклогексенил. Термин ″гетероциклоалкил″ относится к насыщенной циклической группе, содержащей в цикле по меньшей мере один гетероатом (например, N, О или S), такой как 4-тетрагидропиранил. Термин ″гетероциклоалкенил″ относится к неароматической циклической группе, содержащей в цикле по меньшей мере один гетероатом (например, N, О или S) и по меньшей мере одну двойную связь, такой как пиранил. Термин ″арил″ относится к углеводородной группе, имеющей один или несколько ароматических циклов. Примеры арильных групп включают фенил (Ph), фенилен, нафтил, нафтилен, пиренил, антрил и фенантрил. Термин ″гетероарил″ относится к группе, включающей один или несколько ароматических циклов, которые содержат по меньшей мере один гетероатом (например, N, O или S). Примеры гетероарильных групп включают фурил, фурилен, флуоренил, пирролил, тиенил, оксазолил, имидазолил, тиазолил, пиридил, пиримидинил, хиназолинил, хинолил, изохинолил и индолил.

Если не указано иное, указанные алкил, алкенил, алкинил, алкокси, циклоалкил, циклоалкенил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкенил, арил и гетероарил включают как замещенные, так и незамещенные радикалы. Возможные заместители в циклоалкиле, циклоалкениле, гетероциклоалкиле, гетероциклоалкениле, ариле и гетероариле включают, однако этим не ограничиваясь, C₁-C₁₀ алкил, С₂-С₁₀ алкенил, С₂-С₁₀ алкинил, C₃-C₂₀ циклоалкил, С₃-С₂₀ циклоалкенил, С₁-С₂₀ гетероциклоалкил, С₁-С₂₀ гетероциклоалкенил, C₁-C₁₀ алкокси, арил, арилокси, гетероарил, гетероарилокси, амино, C₁-C₁₀ алкиламино, C₁-C₂₀ диалкиламино, ариламино, диариламино, C₁-C₁₀ алкилсульфонамино, арилсульфонамино, С₁-С₁₀ алкилимино, арилимино, C₁-C₁₀ арилсульфонимино, арилсульфонимино, гидроксил, атом галогена, тиогруппу, C₁-C₁₀ алкилтио, арилтио, C₁-C₁₀ алкилсульфонил, арилсульфонил, ациламино, аминоацил, аминотиоацил, амидо, амидино, гуанидино, уреидо, тиоуреидо, циано, нитро, нитрозо, азидо, ацил, тиоацил, ацилокси, карбоксил и сложный эфир карбоновой кислоты. С другой стороны, возможные заместители в алкиле, алкениле или алкиниле включают все вышеуказанные заместители, за исключением C₁-C₁₀ алкила. Циклоалкил, циклоалкенил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкенил, арил и гетероарил могут быть конденсированы друг с другом.

В соответствии с другим аспектом, настоящее изобретение относится к способу лечения расстройств, опосредованных периферическими рецепторами CB1. Указанный способ включает введение нуждающемуся в этом пациенту эффективного количества одного или нескольких производных соединений пиразола вышеуказанной формулы (I). Примеры расстройств, опосредованных периферическими рецепторами CB1, включают ожирение, избыточный вес, сахарный диабет 2 типа, неалкогольную жировую болезнь печени, гиперлипидемию, дислипидемию, атеросклероз, инфаркт миокарда, инсульт, артериальную гипертензию, бронходилатацию, геморрагический шок, фиброз печени, цирроз печени, неврологические расстройства, аддиктивные расстройства, нарушения обмена веществ, глаукому, остеопороз, остеоартрит, нефропатию, фиброз почек и хронические воспалительные заболевания.

Термин ″лечение″ или ″терапия″ относится к введению одного или нескольких производных соединений пиразола пациенту, у которого наблюдается вышеописанное расстройство, симптом подобного расстройства или предрасположенность к подобному расстройству, с целью вызвать терапевтический эффект, например, излечить, ослабить, изменить, оказать воздействие, облегчить или предотвратить вышеуказанное расстройство, его симптом или предрасположенность к нему.

Описанные выше производные соединения пиразола включают как сами указанные соединений, а также их соли, пролекарства и сольваты, если они существуют. Например, соль может быть образована анионом и положительно заряженной группой (например, аминогруппой) в производном соединении пиразола. Подходящие анионы включают хлорид, бромид, иодид, сульфат, нитрат, фосфат, цитрат, метансульфонат, трифторацетат, ацетат, малат, тозилат, тартрат, фумарат, глутамат, глюкуронат, лактат, глутарат и малеат. Кроме того, соли могут быть также образованы катионом и отрицательно заряженной группой (например, карбоксилатом) в производном соединении пиразола. Подходящие катионы включают ион натрия, ион калия, ион магния, ион кальция и катион аммония, такой как ион тетраметиламмония. Производные соединения пиразола также включают соли, содержащие четвертичные атомы азота. Примеры пролекарств включают сложные эфиры и другие фармацевтически приемлемые производные, которые при введении пациенту способны высвобождать активные производные соединения пиразола. Сольват относится к комплексу, образованному активным производным соединением пиразола и фармацевтически приемлемым растворителем. Примеры фармацевтически приемлемых растворителей включают воду, этанол, изопропанол, этилацетат, уксусную кислоту и этаноламин.

В объем настоящего изобретения входит также фармацевтическая композиция, содержащая одно или несколько вышеуказанных производных соединений пиразола, которая предназначена для лечения одного из вышеуказанных расстройств, а также применение подобной композиции для изготовления лекарственного средства, предназначенного для проведения подобного лечения.

Подробности одного или нескольких вариантов осуществления настоящего изобретения изложены в приведенном ниже описании. Другие отличительные признаки, объекты и преимущества настоящего изобретения станут очевидны из описания и формулы изобретения.

Подробное описание изобретения

Ниже приведены примеры соединений по настоящему изобретению:

Приведенные в данном описании производные соединения пиразола могут быть получены по способам, хорошо известным из области техники. Последовательность, приведенная ниже на схеме 1, поясняет синтез производных соединений пиразола по настоящему изобретению.

В частности, производное соединение тиофена, содержащее кетонную группу (соединение А), может реагировать с производным оксалата (диэтилоксалатом) в присутствии основания с образованием производного соединения 1,3-диона, содержащего сложноэфирную группу (соединение B). Производное соединение 1,3-диона можно ввести в реакцию сочетания с гидразином с последующей внутримолекулярной циклизацией, которую осуществляют при кипячении с обратным холодильником в уксусной кислоте, с получением производного соединения пиразола, содержащего сложноэфирную группу (соединение С). Региоселективное бромирование производного соединения пиразола можно осуществить с использованием N-бромсукцинимида в ТГФ при комнатной температуре с получением соответствующего 5-бромпроизводного (соединение D). Указанное соединение можно бромировать дальше с получением дибромида (соединение Е), который, в свою очередь, обрабатывают нитратом серебра в смеси ацетон/вода (1:1) и получают бромзамещенное гидроксильное соединение (соединение F). Оно может вступать в реакцию с различными аминами в различных условиях проведения реакции (в присутствии хлорида алюминия) с образованием амида (соединение G). Атом брома в амиде можно затем преобразовать в алкиновую группу, используя Pd(PPh₃)₂Cl₂ и CuI в качестве катализаторов. Гидроксильную группу в полученном указанным образом соединении (соединение H) подвергают бромированию (с использованием PBr₃) и получают бромид (соединение I).

Соединение I можно ввести во взаимодействие с азидом натрия с последующим восстановлением по Штаудингеру (PPh₃) и получить соответствующий первичный амин (соединение J), который можно ввести в реакцию конденсации с различными хлорангидридами кислот (например, сульфонилхлоридом) и получить некоторые соединения по настоящему изобретению (например, соединения 10-85 и 143-157). Соединение I, необязательно, может непосредственно претерпевать S_N2 замещение с образованием других соединений по настоящему изобретению (например, соединений 87-113).

Полученное указанным образом производное соединение пиразола может быть очищено любым подходящим способом, например, колоночной хроматографией, высокоэффективной жидкостной хроматографией или перекристаллизацией.

Другие производные соединения пиразола по настоящему изобретению (например, соединения 119-142) можно получить, используя другие подходящие исходные вещества по вышеуказанным схемам синтеза и другие способы, известные из области техники. Вышеуказанные способы могут также дополнительно включать стадии введения или удаления подходящих защитных групп с тем, чтобы, в конечном счете, позволить провести синтез производных соединений пиразола. Кроме того, с целью получения требуемых соединений, различные этапы синтеза могут быть осуществлены в другой последовательности или в другом порядке. Синтетические химические превращения и методики применения защитных групп (и удаления защитных групп), пригодных для проведения синтеза требуемых производных соединений пиразола, известны из области техники и включают, например, те, что описаны в R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2nd Ed., John Wiley and Sons (1991); L. Fieser and M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); и L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995) и в последующих их изданиях.

Указанные в данном описании производные соединения пиразола могут содержать неароматическую двойную связь и один или несколько асимметрических центров. Таким образом, они могут существовать в виде рацематов и рацемических смесей, отдельных энантиомеров, индивидуальных диастереомеров, смесей диастереомеров и в виде цис- или транс-изомерных форм. Данное изобретение предполагает использование всех подобных изомерных форм.

В объем настоящего изобретения входит также фармацевтическая композиция, содержащая эффективное количество по меньшей мере одного вышеуказанного производного соединения пиразола и фармацевтически приемлемый носитель.

Кроме того, данное изобретение охватывает способ введения эффективного количества одного или нескольких производных соединений пиразола пациенту, страдающего от заболевания, которое описано выше в разделе ″Сущность изобретения″. ″Эффективное количество″ относится к количеству активного производного соединения пиразола, необходимого для оказания терапевтического воздействия на пациента, лечение которого проводят. Как известно специалистам, эффективные дозы меняются в зависимости от заболевания, лечение которого осуществляют, пути введения, используемого наполнителя, а также от возможности совместного использования с другими терапевтическими методами.

При осуществлении способа по настоящему изобретению композицию, содержащую одно или несколько производных соединений пиразола, можно вводить парентерально, перорально, интраназально, ректально, местно или трансбуккально. Термин ″парентеральный″ в данном описании относится к подкожной, внутрикожной, внутривенной, внутримышечной, интраартикулярной, внутриартериальной, внутрисуставной, внутригрудинной, внутриполостной, внутриочаговой или внутричерепной инъекции, а также к любому подходящему способу вливания.

Стерильный состав для инъекции может представлять собой раствор или суспензию в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, такой как раствор в 1,3-бутандиоле. Приемлемыми носителями и растворителями, которые могут использоваться, являются маннит, вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, в качестве растворителя или суспендирующей среды обычно используют нелетучие масла (например, синтетические моно- или диглицериды). Для получения препаратов для инъекций пригодны жирные кислоты, такие как олеиновая кислота и ее производные с глицерином, а также натуральные фармацевтически приемлемые масла, такие как оливковое масло или касторовое масло, в частности, их полиоксиэтилированные производные. Указанные масляные растворы или суспензии могут также содержать в качестве разбавителя или диспергатора длинноцепочечный спирт, карбоксиметилцеллюлозу или подобные диспергирующие средства. Для приготовления композиций могут также применяться другие обычно используемые поверхностно-активные вещества, такие как Tween или Span, или другие подобные эмульгаторы или агенты, повышающие биодоступность, которые обычно используют при изготовлении фармацевтически приемлемых твердых, жидких или других лекарственных форм.

Композицией для перорального введения может быть любая орально приемлемая стандартная лекарственная форма, в том числе капсулы, таблетки, эмульсии и водные суспензии, дисперсии и растворы. В случае таблеток обычно используемые носители включают лактозу и кукурузный крахмал. Как правило, также добавляют лубриканты, такие как стеарат магния. Для перорального введения в форме капсулы пригодные разбавители включают лактозу и сухой кукурузный крахмал. В том случае, когда водные суспензии или эмульсии вводят перорально, активный ингредиент может быть суспендирован или растворен в масляной фазе в комбинации с эмульгирующими или суспендирующими агентами. Если необходимо, могут быть добавлены подсластители, ароматизаторы или красители.

Композицию назального аэрозоля или композицию для ингаляции можно приготовить в соответствии с методиками, хорошо известными из области приготовления фармацевтических композиций. Например, подобную композицию можно приготовить в виде раствора в физиологическом растворе с использованием бензилового спирта или других подходящих консервантов, стимуляторов абсорбции для повышения биодоступности, фторуглеводородов и/или других солюбилизаторов или диспергаторов, известных из области техники.

Композицию, содержащую одно или несколько активных производных соединений пиразола, можно также назначать в форме суппозиториев для ректального введения.

Носитель в фармацевтической композиции должен быть ″приемлемым″ в том смысле, что должен быть совместим с активным ингредиентом композиции (и, предпочтительно, быть способным стабилизировать активные ингредиенты) и не оказывать вредного воздействия на пациента, лечение которого проводят. Один или несколько солюбилизаторов могут использоваться в качестве фармацевтических вспомогательных веществ, с целью доставки активного производного соединения пиразола. Примеры других носителей включают коллоидный оксид кремния, стеарат магния, целлюлозу, лаурилсульфат натрия и D&C Yellow # 10.

Можно предварительно осуществить скрининг описанных выше производных соединений пиразола на их эффективность при лечении вышеуказанных заболеваний путем проведения анализа в условиях in vitro, а затем подтвердить результаты в экспериментах на животных и клиническими испытаниями. Другие методы также должны быть очевидны специалистам в данной области техники.

Приведенные ниже конкретные примеры следует рассматривать лишь как иллюстративные, а не ограничивающие каким-либо образом настоящее изобретение. Авторы настоящего изобретения полагают, что без дальнейших уточнений специалист на основе данного описания сможет осуществить настоящее изобретение в максимально полном объеме. Все процитированные в данном описании публикации во всей их полноте включены в данное описание посредством ссылки.

Пример 1: Синтез соединений 10-85 и 143-157

Общая методика проиллюстрирована приведенной ниже схемой с использованием соединения 10 в качестве конкретного примера.

Реагенты и условия: (a) LiHMDS, диэтилоксалат, ТГФ/Et₂O, от -78°C до комнатной температуры, 20 час, 85%, (b) 2,4-дихлорфенилгидразина гидрохлорид, EtOH, комнатная температура, 22 час; (c) AcOH, 120°С, 24 час, 50% по двум стадиям, (d) NBS (N-бромсукцинимид), CH₃CN, от 0°C до комнатной температуры, 16 час, 95%; (e) NBS, AIBN, CCl₄, 80°С, 16 час; (f) AgNO₃, ацетон/H₂O=1/1, 60°С, 16 час, 68% по двум стадиям; (g) АlСl₃, 1-аминопиперидин, DCE, комнатная температура, 16 час, 97%; (h) PdCl₂(PPh₃)₂, CuI, 1-этинил-4-(трифторметил)бензол, 2-этаноламин, ТГФ/H₂O (1/1), 80°С, 12 час, 70%; (i) PBr₃, CH₂Cl₂, от 0°C до комнатной температуры, 2 час, (j) NaN₃, ДМФА, комнатная температура, 3 час; (k) PPh₃, ТГФ/H₂O (1/1), комнатная температура, 16 час, 66% по трем стадиям; (l) пирролидин-1-сульфонилхлорид, Et₃N, ДМФА, от 0°C до комнатной температуры, 16 час, 87%.

Литиевая соль этил 3-метил-2,4-диоксо-4-тиофен-2-ил-бутаноата (Соединение 2):

В атмосфере аргона к перемешиваемому на магнитной мешалке раствору бис-(триметилсилил)амида лития (22,2 мл; 22,20 ммоль, 1,0 М в ТГФ) в диэтиловом эфире (40 мл) при -78°С по каплям добавляют 1-(2-тиенил)-1-пропанон (2,81 г, 20,04 ммоль) в диэтиловом эфире (15 мл). Смесь перемешивают при той же температуре еще в течение 45 мин и по каплям добавляют диэтилоксалат (3,3 мл, 24,40 ммоль). Реакционной смеси дают нагреться до комнатной температуры и перемешивают еще в течение 16 час. Выпавший из реакционной смеси осадок отфильтровывают, промывают диэтиловым эфиром и сушат в вакууме, получая неочищенную литиевую соль 2 (4,21 г, 85%) в виде твердого вещества бледно-желтого цвета.

1-(2,4-Дихлорфенил)-4-метил-5-тиофен-2-ил-1H-пиразол-3-карбоновой кислоты этиловый эфир (Соединение 3):

К раствору соли лития соединения 2 (3,21 г, 13,04 ммоль) в этаноле (35 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота в один прием добавляют гидрохлорид 2,4-дихлорфенилгидразина (3,01 г, 14,05 ммоль). Полученную смесь перемешивают при той же температуре в течение 22 час. После завершения реакции осадок отфильтровывают, промывают этанолом и диэтиловым эфиром и сушат в вакууме, получая твердое вещество светло-желтого цвета (3,31 г). Указанное сырое твердое вещество без дальнейшей очистки растворяют в уксусной кислоте (30 мл) и кипятят с обратным холодильником в течение 24 час. Реакционную смесь выливают в воду со льдом и экстрагируют этилацетатом (2×30 мл). Экстракты объединяют, промывают водой, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным раствором соли, сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют и упаривают.

Очистка флэш-хроматографией на силикагеле с использованием смеси н-гексан/этилацетат (9:1) дает эфир 3 (2,49 г, 50% по двум стадиям) в виде твердого вещества белого цвета: т.пл. 121-122°С; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,43 (д, J=2,1 Гц, 1H), 7,39-7,34 (м, 2H), 7,32 (д, J=3,6 Гц, 1H), 7,00 (дд, J=5,1, 3,6 Гц, 1H), 6,89 (д, J=5,1 Гц, 1H), 4,45 (кв., J=7,2 Гц, 2H), 2,44 (с, 3H), 1,42 (т, J=7,2 Гц, 3H); ¹³C ЯМР (CDCl₃) δ 162,7, 142,8, 137,8, 136,3, 136,0, 133,9, 131,0, 129,6, 128,8, 128,5, 127,7, 127,6, 127,2, 119,9, 60,9, 14,4, 9,9; ESMS m/z: 381,0 (M+1), 403,0 (M+23).

5-(5-Бромтиофен-2-ил)-1-(2,4-дихлорфенил)-4-метил-1H-пиразол-3-карбоновой кислоты этиловый эфир (Соединение 4):

При 0°C к перемешиваемому на магнитной мешалке раствору соединения 3 (2,21 г, 5,79 ммоль) в ацетонитриле (20 мл) в атмосфере аргона добавляют небольшими порциями NBS (1,24 г, 6,96 ммоль). Полученную смесь затем нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 16 час. Реакцию прерывают, добавив насыщенный водный раствор тиосульфата натрия, и концентрируют при пониженном давлении для удаления ацетонитрила. Водный слой экстрагируют этилацетатом (2×40 мл). Органические слои объединяют, промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют, получая сырой остаток, который очищают флэш-хроматографией, элюируя смесью н-гексан/этилацетат (9:1), и получают 5-бромзамещенный сложный эфир 4 (2,53 г, 95%) в виде твердого вещества белого цвета: т.пл. 93-94°С; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,46 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,36-7,35 (м, 1H), 7,34 (д, J=1,8 Гц, 1H), 6,96 (д, J=3,9 Гц, 1H), 6,64 (д, J=3,9 Гц, 1H), 4,44 (кв., J=7,2 Гц, 2H), 2,42 (с, 3H), 1,42 (т, J=7,2 Гц, 3H); ¹³C ЯМР (CDCl₃) δ 161,7, 142,2, 136,1, 135,8, 134,9, 133,0, 130,3, 129,5, 129,3, 128,6, 127,2, 119,5, 114,2, 114,1, 60,2, 13,8, 9,3; ESMS m/z: 460,9 (M+1), 482,9 (M+23).

Этил 4-(бромметил)-5-(5-бромтиофен-2-ил)-1-(2,4-дихлорфенил)-1H-пиразол-3-карбоксилат (Соединение 5):

К перемешиваемому на магнитной мешалке раствору соединения 4 (2,20 г, 4,78 ммоль) в ССl₄ (22 мл) добавляют NBS (1,1 г, 6,21 ммоль) и AIBN (0,05 г, 0,33 ммоль). Полученную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 16 час. После охлаждения до комнатной температуры осадок отфильтровывают. Растворитель из фильтрата удаляют при пониженном давлении и получают дибромид 5 в виде жидкости бледно-желтого цвета: ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,48 (д, J=2,0 Гц, 1H), 7,38-7,32 (м, 2H), 7,01 (д, J=3,6 Гц, 1H), 6,99 (д, J=3,6 Гц, 1H), 4,77 (с, 2H), 4,48 (кв., J=7,2 Гц, 2H), 1,43 (т, J=7,2 Гц, 3H); ¹³С ЯМР (CDCl₃) δ 161,5, 142,2, 138,4, 137,1, 135,0, 133,8, 130,8, 130,5, 130,3, 130,2, 128,2, 128,0, 120,6, 116,4, 61,6, 22,4, 14,3; ESMS m/z: 538,8 (M+1)

Этил 5-(5-бромтиофен-2-ил)-1-(2,4-дихлорфенил)-4-(гидроксиметил)-1H-пиразол-3-карбоксилат (Соединение 6):

К перемешиваемому на магнитной мешалке раствору нитрата серебра (3,25 г, 19,12 ммоль) в 100 мл 50%-ного водного раствора ацетона при комнатной температуре добавляют суспензию сырого соединения 5 в 70%-ном водном растворе ацетона (50 мл). Смесь оставляют на ночь перемешиваться при 60°С. После охлаждения до комнатной температуры нерастворимый остаток отфильтровывают, а фильтрат концентрируют в вакууме для удаления ацетона. Смесь экстрагируют с помощью CH₂Cl₂, органические экстракты объединяют, промывают водой, сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют, получая сырой остаток, который очищают флэш-хроматографией, элюируя смесью н-гексан/этилацетат (2:1), и получают гидроксизамещенный сложный эфир 6 (1,55 г, 68% по двум стадиям) в виде твердого вещества белого цвета: ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,46 (дд, J=1,2, 1,2 Гц, 1H), 7,33 (д, J=1,2 Гц, 2H), 6,96 (д, J=3,6 Гц, 1H), 6,76 (д, J=3,6 Гц, 1H), 4,71 (д, J=7,2 Гц, 2H), 4,48 (кв., J=7,2 Гц, 2H), 3,76 (т, J=7,2 Гц, 1H), 1,42 (т, J=7,2 Гц, 3H); ¹³С ЯМР (CDCl₃) δ 163,3, 142,9, 137,3, 136,8, 135,0, 133,7, 130,7, 130,4, 130,3, 130,1, 128,4, 127,8, 124,2, 115,8, 61,9, 54,5, 14,2; ESMS m/z: 498,9 (M+23).

5-(5-Бромтиофен-2-ил)-1-(2,4-дихлорфенил)-4-(гидроксиметил)-N-(пиперидин-1-ил)-1H-пиразол-3-карбоксамид (Соединение 7):

К перемешиваемому на магнитной мешалке раствору соединения 6 (4,40 г, 9,24 ммоль) и трихлорида алюминия (2,46 г, 18,48 ммоль) в дихлориде этана (88 мл) в атмосфере аргона при 0°C медленно добавляют 1-аминопиперидин (3,70 г, 36,96 ммоль). Полученную смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры и перемешивают в течение 16 час, затем прекращают реакцию, добавив ледяную воду. Водную фазу экстрагируют с помощью CH₂Cl₂ (2×40 мл). Органические экстракты объединяют, промывают водой и насыщенным раствором соли, сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая сырой остаток, который очищают флэш-хроматографией, элюируя смесью н-гексан/этилацетат (1:1), и получают соединение 7 (4,75 г, 97%) в виде твердого вещества белого цвета: ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,73 (с, 1H), 7,49 (д, J=2,4 Гц, 1H), 7,35 (дд, J=8,4, 2,4 Гц, 1H), 7,28 (д, J=8,4 Гц, 1H), 6,95 (д, J=4,0 Гц, 1H), 6,69 (д, J=4,0 Гц, 1H), 5,17 (т, J=7,2 Гц, 1H), 4,67 (д, J=7,2 Гц, 2H), 2,83 (уш.с, 4Н), 1,78-1,73 (м, 4Н), 1,42 (уш.с, 2Н);

¹³С ЯМР (CDCl₃) δ 160,0, 144,7, 136,9, 136,6, 135,0, 133,6, 130,7, 130,3, 130,2, 128,6, 128,1, 124,0, 115,8, 57,1, 54,7, 25,3, 23,2; ESMS m/z: 529,1 (M+1).

1-(2,4-Дихлорфенил)-5-(5-(2-(4-(трифторметил)фенил)этинил)тиофен-2-ил)-4-(гидроксиметил)-N- (пиперидин-1-ил)-1H-пиразол-3-карбоксамид (Соединение 8):

Раствор бромтиофена 7 (1,20 г, 2,26 ммоль), PdCl₂(PPh₃)₂ (0,16 г, 0,23 ммоль), CuI (0,06 г, 0,28 ммоль) и 2-этаноламина (0,5 М (водный раствор), 14 мл, 6,78 ммоль) в ТГФ (50 мл) перемешивают и дегазируют в атмосфере аргона в автоклаве в течение 10 мин, а затем в один прием добавляют 1-этинил-4-(трифторметил)бензол (0,58 г, 3,39 ммоль). Полученную смесь нагревают до 80°С на масляной бане в течение 12 час. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в воду (20 мл) и водный слой экстрагируют этилацетатом (2×40 мл). Органические экстракты объединяют, промывают водой и насыщенным раствором соли, сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая сырой остаток, который очищают флэш-хроматографией, элюируя смесью н-гексан/этилацетат (1:1), и получают соединение 8 (0,98 г, 70%) в виде твердого вещества белого цвета: ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,75 (с, 1H), 7,57 (с, 1H), 7,50 (д, J=2,0 Гц, 1H), 7,36 (дд, J=8,4, 2,0 Гц, 1H), 7,32 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,18 (д, J=4,0 Гц, 1H), 6,84 (д, J=4,0 Гц, 1H), 5,21 (т, J=3,2 Гц, 1H), 4,73 (д, J=3,2 Гц, 2H), 2,83 (уш.с, 4H), 1,77-1,75 (м, 4H), 1,43 (уш.с, 2H); ¹³С ЯМР (CDCl₃) δ 160,0, 144,8, 136,8, 136,6, 135,1, 133,6, 132,6, 131,5, 130,7, 130,2 (кв., J_C-F=32,6 Гц), 130,3, 129,7, 129,1, 128,0, 126,1, 125,7, 125,3 (кв., J_C-F=3,6 Гц), 123,7 (кв., J_C-F=270,9 Гц), 93,6, 83,7, 57,1, 54,8, 25,3, 23,1; ESMS m/z: 619,1 (M+1).

4-(Аминометил)-1-(2,4-дихлорфенил)-5-(5-(2-(4-(трифторметил)фенил)этинил)тиофен-2-ил)-N-(пиперидин-1-ил)-1H-пиразол-3-карбоксамид (Соединение 9):

К перемешиваемому на магнитной мешалке раствору соединения 8 (1,00 г, 1,62 ммоль) в CH₂Cl₂ (50 мл) при 0°С по каплям добавляют PBr₃ (0,87 г, 3,23 ммоль). Дают полученной смеси нагреться до комнатной температуры и перемешивают в течение 2 час, а затем прекращают реакцию, добавив ледяную воду. Водную фазу экстрагируют с помощью CH₂Cl₂ (2×20 мл). Органические экстракты объединяют, промывают водой и насыщенным раствором соли, сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая соответствующий бромид, который, в свою очередь, без очистки вводят в реакцию с NaN₃ (0,53 г, 8,08 ммоль) в ДМФА (10 мл), которую проводят при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь выливают в воду (10 мл) и водную фазу экстрагируют этилацетатом (2×20 мл). Органические экстракты объединяют, промывают водой и насыщенным раствором соли, сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая соответствующий азид. Указанное азидное производное без очистки затем обрабатывают с помощью PPh₃ (0,51 г, 1,94 ммоль) в ТГФ/H₂O (1/1) (20 мл) при комнатной температуре в течение 16 час и после очистки с помощью хроматографии (CH₂Cl₂:MeOH=9:1) получают соединение 9 (0,66 г, 66% в три стадии) в виде твердого вещества бледно-желтого цвета: ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,85 (уш.с, 1H), 7,62-7,56 (м, 4H), 7,51 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,38-7,32 (м, 2H), 7,19 (д, J=3,9 Гц, 1H), 6,91 (д, J=3,9 Гц, 1H), 3,99 (с, 2H), 2,87-2,79 (м, 4H), 2,01 (с, 1H), 1,76 (квинтет, J=5,4 Гц, 4H), 1,49-1,38 (м, 2H); ESMS m/z: 618,0 (M+1).

1-(2,4-Дихлорфенил)-N-(пиперидин-1-ил)-4-((пирролидин-1-сульфонамидо)метил)-5-(5-((4-(трифторметил)фенил)этинил)тиофен-2-ил)-1H-пиразол-3-карбоксамид (Соединение 10):

К перемешиваемому на магнитной мешалке раствору соединения 9 (1,15 г, 1,86 ммоль) и Et₃N (0,38 г, 3,72 ммоль) в ДМФА (10 мл) при 0°C добавляют пирролидин-1-сульфонилхлорид (0,47 г, 2,79 ммоль). Дают полученной смеси нагреться до комнатной температуры в течение 16 час, а затем прекращают реакцию, добавив воду. Водную фазу экстрагируют этилацетатом (2×20 мл), органические экстракты объединяют, промывают водой и насыщенным раствором соли, сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая сырой остаток, который очищают флэш-хроматографией, элюируя смесью н-гексан/этилацетат (1:1), и получают требуемый продукт 10 (1,21 г, 87%) в виде твердого вещества белого цвета: т.пл. 163-164°С; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,71 (с, 1H), 7,61-7,56 (м, 4H), 7,53 (д, J=2,0 Гц, 1H), 7,40-7,33 (м, 2H), 7,23 (д, J=3,6 Гц, 1H), 7,22 (д, J=3,6 Гц, 1H), 6,50 (т, 6,8 Гц, 1H), 4,34 (д, J=6,8 Гц, 2H), 3,28-3,25 (м, 4H), 2,87-2,81 (м, 4H), 1,86 (квинтет, J=3,6 Гц, 4H), 1,78 (квинтет, J=5,6 Гц, 4H), 1,48-1,42 (м, 2H); ¹³С ЯМР (CDCl₃) δ 159,2, 144,3, 137,4, 136,7, 134,8, 133,3, 132,7, 131,3, 130,6, 130,2, 130,1, 130,0 (кв., J_C-F=33,0 Гц), 128,5, 127,9, 125,9, 125,6, 125,0 (кв., J_C-F=4,0 Гц), 123,5 (кв., J_C-F=270,5 Гц), 119,7, 93,4, 83,7, 56,9, 47,7, 37,2, 25,3, 25,0, 22,9; ESMS m/z: 751,0 (M+1).

(Z)-4-((2-Циано-3-циклопропилгуанидино)метил)-1-(2,4-дихлорфенил)-N-(пиперидин-1-ил)-5-(5-((4-(трифторметил)фенил)этинил)тиофен-2-ил)-1H-пиразол-3-карбоксамид (Соединение 11):

ESMS (M+1): 725,1.

(E)-4-((1-Амино-2-нитровиниламино)метил)-1-(2,4-дихлорфенил)-N-(пиперидин-1-ил)-5-(5-((4-(трифторметил)фенил)этинил)тиофен-2-ил)-1H-пиразол-3-карбоксамид (Соединение 12):

ESMS (M+1): 704,1.

(E)-1-(2,4-Дихлорфенил)-4-((1-(метиламино)-2-нитровиниламино)метил)-N-(пиперидин-1-ил)-5-(5-((4-(трифторметил)фенил)этинил)тиофен-2-ил)-1H-пиразол-3-карбоксамид (Соединение 13):

ESMS (M+1): 718,1.

1-(2,4-Дихлорфенил)-4-(гуанидинометил)-N-(пиперидин-1-ил)-5-(5-((4-(трифторметил)фенил)этинил)тиофен-2-ил)-1H-пиразол-3-карбоксамид (Соединение 14):

ESMS (M+1): 660,2.

1-(2,4-Дихлорфенил)-4-((3-метилгуанидино)метил)-N-(пиперидин-1-ил)-5-(5-((4-(трифторметил)фенил)этинил)тиофен-2-ил)-1H-пиразол-3-карбоксамид (Соединение 15):

ESMS (M+1): 674,2.

4-(Ацетамидометил)-1-(2,4-дихлорфенил)-N-(пиперидин-1-ил)-5-(5-((4-(трифторметил)фенил)этинил)тиофен-2-ил)-1H-пиразол-3-карбоксамид (Соединение 16):

ESMS (M+1): 660,1.

Метил (1-(2,4-дихлорфенил)-3-(пиперидин-1-илкарбамоил)-5-(5-((4-(трифторметил)фенил)этинил)тиофен-2-ил)-1H-пиразол-4-ил)метилкарбамат (Соединение 17):

ESMS (M+1): 676,1.

Этил (1-(2,4-дихлорфенил)-3-(пиперидин-1-илкарбамоил)-5-(5-((4-(трифторметил)фенил)этинил)тиофен-2-ил)-1H-пиразол-4-ил)метилкарбамат (Соединение 18):

ESMS (M+1): 690,1.

1-(2,4-Дихлорфенил)-4-((3-этилуреидо)метил)-N-(пиперидин-1-ил)-5-(5-((4-(трифторметил)фенил)этинил)тиофен-2-ил)-1H-пиразол-3-карбоксамид (Соединение 19):

ESMS (M+1): 689,1.

4-((3-Циклопропилуреидо)метил)-1-(2,4-дихлорфенил)-N-(пиперидин-1-ил)-5-(5-((4-(трифторметил)фенил)этинил)тиофен-2-ил)-1H-пиразол-3-карбоксамид (Соединение 20):

ESMS (M+1): 701,1.

1-(2,4-Дихлорфенил)-4-((3-метилтиоуре