2604139 - Фармацевтические композиции, содержащие антитела к pcsk9 человека

Фармацевтические композиции, содержащие антитела к pcsk9 человека

Иллюстрации

Показать все

Группа изобретений раскрывает фармацевтические композиции для лечения заболеваний или состояний, которые вызываются воздействием экспрессии или активности PCSK9, содержащие антитело, которое специфически связывается с человеческим пропротеином конвертазы субтилизина/кексина типа 9 (PCSK9). Применение композиций согласно группе изобретений обеспечивает эффективное снижение уровня LDL-C, увеличение уровня холестерина HDL в сыворотке, снижение одного или нескольких из: уровней общего холестерина, уровней АроВ, уровней холестерина, не относящегося к HDL-C, соотношения Аро-В/АроА-1. 4 н. и 15 з.п. ф-лы, 6 ил., 1 табл., 6 пр.

Реферат

Настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим специфические антитела к пропротеину конвертазы субтилизина/кексина типа 9 (PCSK9) или их антигенсвязывающий фрагмент, предпочтительно, содержащим ингибитор 3-гидрокси-3-метил-глутарил-КоА-редуктазы (HMG-CoA-редуктазы). Настоящее изобретение также относится к инъекционным растворам, сухим составам и лекарственным формам, содержащим PCSK9-специфические антитела к или их антигенсвязывающие фрагменты, а также к их применению (предпочтительно, в комбинации с ингибитором HMG-CoA-редуктазы) для лечения заболеваний или состояний, которые вызываются воздействием экспрессии или активности PCSK9.

Настоящее изобретение также относится к изделиям, содержащим упаковку, PCSK9-специфические антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, и этикетку или вкладыш в упаковку, в которой, например, указаны группы пациентов, которых можно лечить с помощью указанных антител или фрагментов, группы пациентов, которых нельзя лечить указанными антителами или фрагментами, и режим дозирования, который должен быть использован.

ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Пропротеин конвертазы субтилизина/кексина типа 9 (PCSK9) является пропротеином конвертазы подсемейства К-протеиназ семейства секретируемых субтилаз. Кодированный белок синтезируется в виде растворимого зимогена, который подвергается автокаталитическому внутримолекулярному процессингу в эндоплазматическом ретикулуме (ЕР). Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что PCSK9 увеличивает уровни LDL холестерина (холестерина, относящегося к липопротеинам низкой плотности) в плазме, промотируя деградацию рецептора LDL, который опосредует эндоцитоз LDL в печени, являясь главным выведения LDL из циркуляции. Структура белка PCSK9 показывает, что он имеет сигнальную последовательность, затем продомен, каталитический домен, который содержит консервативную триаду остатков (D186, H226 и S386), и С-концевой домен. Он синтезируется в виде растворимого 74 кДа предшественника, который подвергается автокаталитическому расщеплению в ЕР, формируя 14 кДа продомен и 60 кДа каталитический фрагмент. Было показано, что его автокаталитическая активность требуется для секреции. После его расщепления, продомен остается жестко связанным с каталитическим доменом.

Антитела к PCSK9 описаны, например, в WO 2008/057457, WO 2008/057458, WO 2008/057459, WO 2008/063382, WO 2008/125623 и заявке США на патент № 2008/0008697. Антитела против PCSK9, которые, в частности, особенно хорошо подходит для целей настоящего изобретения, раскрыты в заявке на патент США № 2010/0166768 А1, содержание которой включено в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме.

ТЕХНИЧЕСКИЕ ПРОБЛЕМЫ, ЛЕЖАЩИЕ В ОСНОВЕ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ

Статины являются одними из наиболее широко используемых лекарственных средств в мире. Хотя статины обычно обладают высокой безопасностью, желательно дополнительно оптимизировать профиль безопасности за счет снижения и без того низкого уровня нежелательных побочных эффектов (например, миопатии).

Несмотря на широкую доступность гиполипидемических препаратов, таких как статины, в Соединенных Штатах в период между 1999 и 2006, приблизительно 30% всех взрослых пациентов, подвергавшихся лечению по поводу гиперхолестеринемии, не смогли достичь рекомендуемого для них уровня LDL-C. Причинами этого являются плохое соблюдение режима терапии, невосприимчивость/непереносимость лекарственных средств и наличие положительной связи между нежелательными явлениями и увеличением дозировки. Кроме того, поскольку наиболее эффективные гиполипидемические препараты могут уменьшить уровень LDL-C только на 55%, то достигаемые мишеневые уровни у пациентов, таких как с семейной гиперхолестеринемией, для которых требуется существенное снижение LDL-C, зачастую значительно ниже, чем ожидаемые. В этой связи для этих пациентов являются необходимыми более эффективные гиполипидемические средства и режимы лечения для достижения целевых уровней.

Авторы настоящего изобретения абсолютно неожиданно обнаружили, что введение антител против PCSK9 или их фрагментов увеличивает активности статинов по снижению LDL холестерина, при введении с конкретными режимами дозирования и/или при введении конкретным группам пациентов.

Таким образом, совместное введение антител против PCSK9 или их фрагментов повышает эффективность статинов и позволяет уменьшить дозы статинов, тем самым снижая нежелательные побочные эффекты.

Кроме того, авторы настоящего изобретения обнаружили, что конкретные режимы дозирования антител против PCSK9 и/или статинов, лучше подходят для снижения уровней LDL холестерина, чем другие. Авторы изобретения также обнаружили, что некоторые подгруппы пациентов получают большую выгоду, чем другие пациенты, в случае лечения их антителами против PCSK9 или их фрагментами и/или статинами. Авторы изобретения также обнаружили, что лечение антителами против PCSK9 или их фрагментами и/или статинами противопоказано для некоторых подгрупп пациентов.

Вышеприведенный обзор не может в полной мере описать все задачи, решаемые настоящим изобретением.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В первом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, специфически связывающий пропротеин конвертазы субтилизина/кексина типа 9 (PCSK9) вместе с фармацевтически приемлемым эксципиентом или носителем.

Во втором аспекте настоящее изобретение относится к инъекционному раствору, описанному в настоящем документе, содержащему антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по изобретению, и, предпочтительно, содержащему в 1 мл объема от приблизительно 40 мг до приблизительно 200 мг или от приблизительно 50 мг до приблизительно 200 мг, например, приблизительно 40 мг, приблизительно 50 мг, приблизительно 75 мг, приблизительно 100 мг, приблизительно 150 мг или приблизительно 200 мг указанного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента.

В третьем аспекте настоящее изобретение относится к сухому составу, описанному в настоящем описании, содержащему антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по изобретению, и, предпочтительно, содержащему от приблизительно 40 мг до приблизительно 500 мг, от приблизительно 50 мг до приблизительно 500 мг, от приблизительно 50 мг до приблизительно 400 мг, от приблизительно 50 мг до приблизительно 300 мг, например, приблизительно 40 мг, приблизительно 50 мг, приблизительно 75 мг, приблизительно 100 мг, приблизительно 150 мг, приблизительно 200 мг, приблизительно 250 мг, приблизительно 300 мг, приблизительно 350 мг, приблизительно 400 мг, приблизительно 450 мг или приблизительно 500 мг и, более предпочтительно, приблизительно 50 мг, приблизительно 100 мг, приблизительно 150 мг, приблизительно 200 мг, приблизительно 250 мг, приблизительно 300 мг и, еще более предпочтительно, приблизительно 150 мг, приблизительно 200 мг или приблизительно 300 мг антитела или его антигенсвязывающего фрагмента на одну дозу.

В четвертом аспекте настоящее изобретение относится к антителу или его антигенсвязывающему фрагменту, содержащемуся в одной из фармацевтических композиций согласно девятнадцатому аспекту настоящего изобретения.

В пятом аспекте настоящее изобретение относится к лекарственной форме, содержащей антитело, его антигенсвязывающий фрагмент или фармацевтическую композицию по настоящему изобретению.

В шестом аспекте настоящее изобретение относится к изделию, содержащему фармацевтическую композицию по изобретению, жидкий состав по изобретению или сухой состав по изобретению, антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по изобретению, или одну или несколько лекарственных форм по изобретению, и контейнер или пакет.

В седьмом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции или антителу или его антигенсвязывающему фрагменту по изобретению для применения при лечении заболевания или состояния, которое вызывается воздействием экспрессии или активности PCSK9. Если в следующих вариантах осуществления изобретения по седьмому аспекту указано, например, "антитело для применения в» или «антитело или его антигенсвязывающий фрагмент для применения в ..." в определенном медицинском режиме, то это указание также применяется для соответствующего применения фармацевтической композиции по изобретению.

В восьмом аспекте настоящее изобретение относится к способу получения фармацевтической композиции по изобретению, например, согласно девятнадцатому аспекту, включающему смешивание антитела или его антигенсвязывающего фрагмента и, необязательно, ингибитора HMG-CoA-редуктазы с одним или несколькими фармацевтическими эксципиентами или носителями.

В девятом аспекте настоящее изобретение относится к способу получения лекарственной формы по изобретению, включающему отмеривание количества фармацевтической композиции, антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, жидкого состава или сухого состава по изобретению, содержащего одну или несколько доз антитела или его антигенсвязывающего фрагмента и, необязательно, ингибитора HMG-CoA-редуктазы, и придания им формы в виде физически дискретных единиц, подходящих в качестве единичных доз для введения человеку и/или животному.

В десятом аспекте настоящее изобретение относится к способу получения или сборки изделия по изобретению, включающему упаковку фармацевтической композиции, антитела, жидкого состава или сухого состава по изобретению в контейнер, необязательно вместе с одним или несколькими из следующих компонентов: этикетка, инструкции по применению, устройство для применения.

В одиннадцатом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения заболевания или состояния, которое вызывается воздействием экспрессии или активности PCSK9, включающему:

введение терапевтического количества антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, который специфически связывает hPCSK9 (пропротеин конвертазы субтилизина/кексина типа 9 человека), индивиду, нуждающемуся в этом, где антитело или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в дозе в диапазоне от 5 мг до 500 мг, и

введение терапевтического количества ингибитора HMG-CoA-редуктазы указанному индивиду, где ингибитор HMG-CoA-редуктазы вводят в дозе в диапазоне от 0,05 мг до 100 мг.

В двенадцатом аспекте настоящее изобретение относится к способу испытания эффективности антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, который специфически связывает hPCSK9, для лечения заболевания или состояния, выбранного из группы, состоящей из гиперхолестеринемии, гиперлипидемии, дислипидемии, атеросклероза и сердечно-сосудистых заболеваний, где указанный способ включает:

лечение выбранной популяции пациентов указанным антителом или его антигенсвязывающим фрагментом, где каждый пациент в указанной популяции имеет уровень LDL холестерина (LDL-C) более 100 мг/дл; и

определение эффективности указанного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, путем определения уровня LDL-C в популяции пациентов до и после введения указанного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, при этом снижение уровня LDL-C по меньшей мере на 25%, по отношению к уровню перед введением дозы, по меньшей мере у 75% пациентов популяции свидетельствует о том, что указанное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент является эффективным для лечения указанного заболевания или состояния в указанной популяции пациентов.

В тринадцатом аспекте настоящее изобретение относится к способу испытания эффективности антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, который специфически связывает hPCSK9, для лечения заболевания или состояния, выбранного из группы, состоящей из гиперхолестеринемии, гиперлипидемии, дислипидемии, атеросклероза и сердечно-сосудистых заболеваний, где указанный способ включает:

определение эффективности антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, который был использован для лечения выбранной популяции пациентов указанным антителом или его антигенсвязывающим фрагментом, где каждый пациент в указанной популяции имеет уровень LDL холестерина (LDL-C) более 100 мг/дл, путем определения уровня LDL-C в популяции пациентов до и после введения указанного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, где снижение уровня LDL-C, по меньшей мере на 25%, по сравнению с уровнем до введения дозы, по меньшей мере у 75% пациентов популяции свидетельствует о том, что указанное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент является эффективным для лечения указанного заболевания или состояния в указанной популяции пациентов.

В четырнадцатом аспекте настоящее изобретение относится к упаковке, включающей антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает hPCSK9 (см. раздел "Предпочтительные антитела для осуществления настоящего изобретения"), и метку.

В пятнадцатом аспекте настоящее изобретение относится к способу регулирования уровня LDL в крови, где способ включает:

введение терапевтического количества антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, который специфически связывает hPCSK9 (пропротеин конвертазы субтилизина/кексина типа 9 человека) индивиду, нуждающемуся в этом, где антитело или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в дозе в диапазоне от 5 мг до 500 мг, и

В шестнадцатом аспекте настоящее изобретение относится к способу предотвращения эффектов (постоянных) увеличенного уровня LDL в крови, где способ включает:

В семнадцатом аспекте настоящее изобретение относится к способу определения того, что используемое фармацевтическое соединение облегчает, улучшает, ингибирует или предотвращает заболевание или состояние, которое вызывается воздействием экспрессии или активности PCSK9, где способ включает: (а) введение индивиду соединения, которое специфически связывается с PCSK9, предпочтительно, антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, специфически связывающегося с PCSK9, и (b) определение, какая часть PCSK9 в крови связана с соединением, указанным в (а).

В восемнадцатом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения заболевания или состояния, которое вызывается воздействием экспрессии или активности PCSK9, где способ включает:

где индивид, нуждающийся в этом, входит в одну или несколько из следующих групп индивидов: (i) индивиды, имеющие уровень LDL холестерина (LDL-C) в сыворотке по меньшей мере 100 мг/дл; (ii) индивиды, имеющие уровень HDL-C в сыворотке менее 40 мг/дл; (iii) индивиды, имеющие уровень холестерина в сыворотке по меньшей мере 200 мг/дл; (iv) индивиды, имеющие уровень триглицеридов сыворотки по меньшей мере 150 мг/дл, где указанный уровень триглицеридов определяется после голодания в течение по меньшей мере 8 часов; (v) индивиды в возрасте по меньшей мере 35 лет; (vi) индивиды в возрасте до 75 лет; (vii) индивиды, имеющие индекс массы тела (BMI) 25 или более; (viii) индивиды мужского пола; (ix) индивиды женского пола; (х) индивиды, у которых введение указанного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента приводит к снижению уровня LDL-С в сыворотке по меньшей мере на 30 мг/дл, по сравнению с уровнем до введения дозы; или (xi) индивиды, у которых введение указанного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента приводит к снижению уровня LDL-С в сыворотке по меньшей мере на 20% по сравнению с уровнем до введения дозы.

В девятнадцатом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения заболевания или состояния, которое вызывается воздействием экспрессии или активности PCSK9, где способ включает:

при этом индивид, нуждающийся в этом, не входит в одну или несколько групп из числа следующих групп индивидов: (i) курильщики; (ii) лица в возрасте 70 лет или старше; (iii) лица, страдающие от гипертензии; (iv) беременные женщины; (v) женщины, пытающиеся забеременеть; (vi) женщины, которые кормят грудью; (vii) лица, которые имеют или когда-либо имели заболевание, поражающее печень; (viii) лица, которые имели любые необъяснимые аномальные анализы крови в отношении функции печени; (ix) лица, которые употребляют чрезмерное количество алкоголя; (х) лица, имеющие проблемы с почками; (xi) лица, страдающие гипотиреозом; (xii) лица, страдающие мышечными расстройствами; (xiii) лица, ранее сталкивавшиеся с мышечной проблемой во время лечения гиполипидемическими лекарственными средствами; (xiv) лица, имеющие серьезные проблемы с дыханием; (xv) лица, которые принимают один или несколько из следующих препаратов: лекарственные средства, изменяющие работу иммунной системы, (например, циклоспорин или антигистаминные препараты), антибиотики и противогрибковые препараты (например, эритромицин, кларитромицин, кетоконазол, итраконазол, рифампицин и фузидиевая кислота), лекарственные препараты, регулирующие уровни липидов, (например, гемфиброзил, колестипол), блокаторы кальциевых каналов (например, верапамил, дилтиазем), лекарственные препараты, регулирующие сердечный ритм (дигоксин, амиодарон), ингибиторы протеазы, используемые при лечении ВИЧ (например, нелфинавир), варфарин, пероральные контрацептивы, антациды или зверобой; (xvi) лица, выпивающие более 0,1 л сока грейпфрута в день; (xvii) лица, имеющие индекс массы тела (BMI) более 40; (xviii) лица, имеющие индекс массы тела (BMI) менее 18; (xix) лица, страдающие сахарным диабетом типа 1 или сахарным диабетом типа 2; и (xx) лица, имеющие положительную реакцию на гепатит В или С; (xxi) лица, имеющие зарегистрированную чувствительность к терапии моноклональными антителами.

В двадцатом аспекте настоящее изобретение относится к способу испытания эффективности антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, который специфически связывает hPCSK9, для лечения заболевания или состояния, выбранного из группы, состоящей из гиперхолестеринемии, гиперлипидемии, дислипидемии, атеросклероза и сердечно-сосудистых заболеваний, где указанный способ включает:

определение эффективности указанного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, путем определения уровня LDL-C в популяции пациентов до и после введения указанного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, при этом снижение уровня LDL-C, по меньшей мере на 25%, по отношению к уровню до введения дозы, по меньшей мере у 75% пациентов популяции показывает, что указанное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент является эффективным для лечения указанного заболевания или состояния в указанной популяции пациентов;

при этом каждый пациент входит в одну или несколько групп индивидов, как указано в тринадцатом аспекте.

В двадцать первом аспекте настоящее изобретения относится к способу испытания эффективности антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, который специфически связывает hPCSK9, для лечения заболевания или состояния, выбранного из группы, состоящей из гиперхолестеринемии, гиперлипидемии, дислипидемии, атеросклероза и сердечно-сосудистых заболеваний, где указанный способ включает:

определение эффективности антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, который был использован для лечения выбранной популяции пациентов указанным антителом или его антигенсвязывающим фрагментом, где каждый пациент в указанной популяции имеет уровень LDL холестерина (LDL-C) более 100 мг/дл, путем определения уровня LDL-C в популяции пациентов до и после введения указанного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, при этом снижение уровня LDL-C, по меньшей мере на 25%, по отношению к уровню до введения дозы, по меньшей мере у 75% пациентов популяции показывает, что указанное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент является эффективным для лечения указанного заболевания или состояния в указанной популяции пациентов;

где каждый пациент входит в одну или несколько групп индивидов, как изложено в тринадцатом аспекте.

В двадцать втором аспекте настоящее изобретение относится к способу испытания эффективности соединения для снижения уровней холестерина у индивида, где способ включает стадии: (а) предоставление животных грызунов, (b) введение антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, который специфически связывает PCSK9 у грызунов, (c) введение испытуемого соединения указанным грызунам, (d) определение эффекта испытуемого соединения у грызунов, где снижение уровня холестерина у грызунов по сравнению с уровнем холестерина у контрольного животного означает, что испытуемое соединение эффективно для снижения уровней холестерина у индивида, при этом контрольное животное относится к тому же виду, как и указанные грызуны, и где испытуемое соединение не вводилось контрольному животному.

В двадцать третьем аспекте настоящее изобретение относится к способу повышения активности статинов по снижению уровней LDL-C у индивида, проходящему статиновую терапию, где способ включает введение индивиду антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, который специфически связывает пропротеин конвертазы субтилизина/кексина типа 9 человека (hPCSK9), при этом антитело или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в дозе количестве от приблизительно 5 мг до приблизительно 500 мг, повышая тем самым активность статинов в терапии по снижению уровней LCL-C у индивида.

В двадцать четвертом аспекте настоящее изобретение относится к набору для лечения повышенных уровней холестерина, относящегося к липопротеинам низкой плотности (LDL-C), у индивида, где набор включает (а) фармацевтическую лекарственную форму, содержащую антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с hPCSK9, и фармацевтически приемлемый носитель, при этом антитело или его антигенсвязывающий фрагмент присутствует в дозе количестве от приблизительно 5 мг до приблизительно 500 мг, и (b) этикетку или вкладыш в упаковку с инструкциями по применению.

В двадцать пятом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения индивида, страдающего заболеванием или расстройством, которое характеризуется повышенными уровнями холестерина, относящегося к липопротеинам низкой плотности (LDL-C), где способ включает:

(а) выбор индивида с уровнем LDL-C в крови выше 100 мг/дл, и

(b) введение указанному индивиду композиции, содержащей антитело или антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает пропротеин конвертазы субтилизина/кексина типа 9 человека (hPCSK9); снижая, тем самым, уровни холестерина у индивида, нуждающегося в этом.

В двадцать шестом аспекте настоящее изобретение относится к способу снижения уровней холестерина у индивида, нуждающегося в этом, где способ включает:

(а) выбор индивида с уровнем холестерина, относящегося к липопротеинам низкой плотности (LDL-C), в крови более 100 мг/дл; и

Это краткое изложение сущности изобретения не обязательно описывает все признаки настоящего изобретения. Другие варианты осуществления изобретения будут очевидны из рассмотрения нижеприведенного подробного описания.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР

На фиг.1 показано процентное снижение уровней LDL холестерина (LDL-C) по отношению к исходному уровню для трех групп пациентов при лечении антителами 316P, направленными против PCSK9. Эти группы пациентов представляют собой следующие группы: (1) пациенты с наследственной гиперхолестеринемией (HeFH), (2) пациенты с другими формами первичной гиперхолестеринемии (не-FH), находящиеся на диете, и подвергающиеся постоянной терапии аторвастатином, и (3) пациенты с другими формами первичной гиперхолестеринемии (не-FH), находящиеся только на диете. Дозу 50 мг антител против PCSK9 вводили подкожно в дни 1, 29 и 43. Результаты, полученные в отношении групп пациентов, получавших антитела (50 мг для не-FH, 50 мг для FH; 50 мг для комбинированной группы) показаны сплошными линиями, а результаты, полученные в случае пациентов, получавших плацебо (PBO - не-FH; PBO-FH; PBO-комбинированная), показаны пунктирными линиями.

На фиг.2 показано процентное снижение уровня LDL холестерина (LDL-C) по отношению к исходному уровню для трех групп пациентов при лечении антителами 316P, направленными против PCSK9. Эти группы пациентов представляют собой следующие группы: (1) пациенты с наследственной гиперхолестеринемией (HeFH), (2) пациенты с другими формами первичной гиперхолестеринемии (не-FH), находящиеся на диете, и подвергающиеся постоянной терапии аторвастатином, и (3) пациенты с другими формами первичной гиперхолестеринемии (не-FH), находящиеся только на диете. Дозу 100 мг антител против PCSK9 вводили подкожно в дни 1, 29 и 43. Результаты, полученные в отношении групп пациентов, получавших антитела (100 мг для не-FH, 100 мг для FH; 100 мг для комбинированной группы) показаны сплошными линиями, а результаты, полученные в случае пациентов, получавших плацебо (PBO - не-FH; PBO - FH; PBO - комбинированная), показаны пунктирными линиями.

На фиг.3 показано процентное снижение уровня LDL холестерина (LDL-C) по отношению к исходному уровню для трех групп пациентов при лечении антителами 316P, направленными против PCSK9. Эти группы пациентов представляют собой следующие группы: (1) пациенты с наследственной гиперхолестеринемией (HeFH), (2) пациенты с другими формами первичной гиперхолестеринемии (не-FH), находящиеся на диете, и подвергающиеся постоянной терапии аторвастатином, и (3) пациенты с другими формами первичной гиперхолестеринемии (не-FH), находящиеся только на диете. Дозу 150 мг антител против PCSK9 вводили подкожно в дни 1, 29 и 43. Результаты, полученные в отношении групп пациентов, получавших антитела (150 мг для не-FH, 150 мг для FH; 150 мг для комбинированной группы) показаны сплошными линиями, а результаты, полученные в случае пациентов, получавших плацебо (PBO-не-FH; PBO-FH; PBO-комбинированная), показаны пунктирными линиями.

На фиг.4 показана схема исследования стадии 2 для группы пациентов, получавших гиполипидемическое лечение помимо аторвастатина или не получавших такое лечение, при постоянной дозе аторвастатина 10 мг в течение не менее 6 недель до скрининга, или для пациентов, не получавших никакого лечения.

На фиг.5 показана схема исследования 2 для группы пациентов, получавших постоянную дозу аторвастатина 10 мг по меньшей мере в течение 6 недель до скрининга.

На фиг.6 показано распределение средних значений LDL-C у пациентов стадии 1, получавших антитела 316Р при постоянном лечении аторвастатином в течение 12 недель и LOCF (перенос вперед данных последнего наблюдения). Исследование было разработано для оценки эффективности и безопасности применения антител 316P в отношении пациентов с гиперхолестеринемией с повышенным LDL-С (>100 мг/дл или >2,59 ммоль/л), получавшими постоянные дозы аторвастатина (10 мг, 20 мг или 40 мг). Во время вводного периода, состояние пациентов было стабилизировано приемом аторвастатина (10 мг, 20 мг или 40 мг), если он не принимался ранее. После одной дополнительной недели пациенты были рандомизированы по центру IVRS/IWRS в отношении 1:1:1:1:1:1 в одну из 6 групп (плацебо, 50 мг 316P E2W, 316P 100 мг E2W, 316P 150 мг E2W, 316P 200 мг E4W, 316P 300 мг E4W) и были подвергнуты лечению в двойной слепой выборке в течение приблизительно 12 недель. Рандомизация представляла собой группировку по дозам аторвастатина, полученных до рандомизации. В ходе двойного слепого лечения пациентов возвращали на место каждые 2 недели для приема исследуемого препарата (316Р или плацебо). Затем период двойного слепого лечения был заменен на базовый уровень с 8-недельным периодом наблюдения. Как следует из фиг.6, все группы пациентов, получавших лечение, за исключением группы пациентов, получавших плацебо, имели значительное и постоянное снижение уровней LDL-C в течение всего периода исследования.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Определения

До подробного описания настоящего изобретения, приведенного ниже, следует понимать, что данное изобретение не ограничивается конкретной методологией, протоколами и реагентами, описанными в настоящем описании, поскольку они могут варьироваться. Кроме того, следует понимать, что используемая в настоящем описании терминология предназначена для целей описания конкретных вариантов осуществления изобретения и не предназначена для ограничения объема настоящего изобретения, который ограничивается только прилагаемой формулой изобретения. Если не определено иначе, все технические и научные термины, используемые в настоящем описании, имеют те же значения, которые обычно понятны обычному специалисту в области техники, к которой относится изобретение.

Предпочтительно, чтобы термины, используемые в настоящем описании, определены, как описано в "A multilingual glossary of biotechnological terms: (IUPAC Recommendations)", Leuenberger, H.G.W, Nagel, B. and Kölbl, H. eds. (1995), Helvetica Chimica Acta, CH-4010 Basel, Switzerland).

В данном описании и формуле изобретения, если контекст не требует иного, слово "содержать" и его вариации, такие как "содержит" и "содержащий", подразумевает включение определенного целого или определенной стадии, или группы целых или группы стадий, но не исключает любое другое целое или стадию, или группы целых или стадий.

Несколько документов (например, патенты, заявки на патенты, научные публикации, инструкции производителя, инструкции, номера последовательностей, представленные GenBank, и т.д.) приведены по тексту настоящего описания. В настоящем описании ничего не должно быть истолковано как допущение того, что изобретение не может предполагать свое раскрытие на основании предшествующих изобретений. Некоторые документы, процитированные в настоящем описании, характеризуется как "включенные в качестве ссылки". В случае конфликта между определениями или раскрытиями, представленными в таких включенных ссылках, и определениями или раскрытиями, представленными в настоящем описании, текст настоящего описания имеет безусловный приоритет.

Последовательности: все последовательности, упомянутые в настоящем описании, раскрыты в прилагаемом списке последовательностей, полное содержание и раскрытие которого является частью настоящего описания.

Термин "приблизительно", используемый вместе с числовым значением, предназначен для охвата числового значения в пределах диапазона, имеющего нижний предел, равный на 5% меньше, чем указанное числовое значение, и имеющего верхний предел, равный на 5% больше, чем указанное числовое значение.

Термин "пропротеин конвертазы субтилизина/кексина типа 9 человека" или "hPCSK9", используемый в настоящем описании, относится к hPCSK9, имеющему аминокислотную последовательность SEQ ID NO:755, кодируемого последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO:754, и или к его биологически активному фрагменту.

Термин "специфически связывает", "специфическое связывание" и т.п. означает, что антитело или его антигенсвязывающий фрагмент образует комплекс с антигеном, который в физиологических условиях является относительно стабильными. Специфическое связывание можно охарактеризовать константой равновесной диссоциации, равной по меньшей мере приблизительно 1×10^-6 М или менее (например, меньшее значение K_D обозначает сильное связывание). Методы определения того, являются ли две молекулы специфически связанными, хорошо известны специалистам в данной области, и включают, например, равновесный диализ, поверхностный плазмонный резонанс и т.п. Выделенное антитело, которое специфически связывается с hPCSK9, может, однако, обладать перекрестной реактивностью в отношении других антигенов, таких как молекулы PCSK9 из других видов. Кроме того, как используется в настоящем описании, мультиспецифические антитела (например, биспецифические), которые связываются с hPCSK9 и с одним или несколькими дополнительными антигенами, рассматриваются, тем не менее, как антитела, которые "специфически связываются" с hPCSK9.

Термин "K_D", используемый в настоящем описании, предназначен для обозначения константы равновесной диссоциации конкретного взаимодействия антитело-антиген. Константа равновесной диссоциации обычно измеряется в единицах "моль/л" (используется сокращение "M").

Термин "низкая скорость диссоциации", "Koff" или "kd" связан с антителом, которое диссоциирует из комплекса с hPCSK9 с константой скорости 1×10^-3 с^-1 или менее, предпочтительно, от 1×10^-4 с^-1 или менее, как определяется с помощью поверхностного плазмонного резонанса, например, с помощью BIACORE™.

Термин "высокая аффинность" антитела относится к таким моноклональным антителам (mAb), которые имеют аффинность связывания hPCSK9 не менее 10^-10 М, предпочтительно, 10^-11 М, еще более предпочтительно, 10^-12 М, измеряемую с помощью поверхностного плазмонного резонанса, например, с помощью BIACORE™ или анализом ELISA для определения аффинности в растворе.

Термин "поверхностный плазмонный резонанс", используемый в настоящем описании, относится к оптическому явлению, которое позволяет проводить анализ биоспецифических взаимодействий в режиме реального времени путем обнаружения изменений концентраций белка в биосенсорной матрице, например, с помощью системы BIACORE™ (Pharmacia Biosensor AB, Uppsala, Sweden and Piscataway, N.J.).

"Эпитоп", также известный как антигенная детерминанта, является областью антигена, который распознается иммунной системой, в частности, антителами, В-клетками или Т-клетками. Используемый в настоящем описании термин "эпитоп" является частью антигена, которая способна связываться с антителом или его антигенсвязывающим фрагментом, как описано в настоящем документе. В этом контексте термин "связывание" относится, предпочтительно, к "специфическому связыванию", как определено в настоящем описании. Эпитопы обычно состоят из химически активных поверхностных группировок молекул, таких как аминокислоты, боковые цепи сахаров, фосфорильные группы или сульфонильные группы, и могут иметь специфические трехмерные структурные характеристики и/или специфические характеристики заряда. Конформационные и не конформационные эпитопы можно отличить тем, что в присутствии денатурирующих растворителей связывание разрушается для первых, и не разрушается для вторых.

"Паратоп" является частью антитела, которое специфически связывается с эпитопом.

Термин "антитело", используемый в настоящем описании, предназначен для обозначения молекул иммуноглобулина, состоящего из четырех полипептидных цепей: двух тяжелых (Н) цепей и двух легких (L) цепей, соединенных между собой дисульфидными связями. Термин "антитело" также охватывает все рекомбинантные формы антител, в частности, антител, описанных в настоящем описании, например, антитела, экспрессируемые прокариотами, негликозилированные антитела и любые антигенсвязывающие фрагменты антитела и производные антител, как описано ниже. Каждая тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи ("HCVR" или "VH"), и константную область тяжелой цепи (состоящую из доменов CH1, CH2 и CH3). Каждая легкая цепь состоит из вариабельной области легкой цепи ("LCVR" или "VL") и константной области легкой цепи (CL). Области VH и VL могут быть дополнительно разделены на гипервариабельные области, называемые областями, определяющими комплементарность (CDR), чередующиеся с более конс

Фармацевтические композиции, содержащие антитела к pcsk9 человека

Патент 2604139