Фармацевтическая композиция, обладающая иммуностимулирующим действием

Фармацевтическая композиция, обладающая иммуностимулирующим действием

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Область применения

Изобретение относится к области медицины и фармации, конкретно к иммуностимулирующему средству, содержащему N-{2-[3,4-бис-(4-нитробензоилокси)фенил]этил}-4-нитробензамид (фентрал) и фармацевтической композиции в виде дозированной пероральной лекарственной формы.

Уровень техники

Увеличение частоты заболеваний, связанных с нарушением и снижением иммунных функций организма, делает актуальной разработку фармакологических средств коррекции иммунитета. В районах, пострадавших от чрезвычайных ситуаций (аварий, катастроф), вследствие воздействий химических, физических, психологических факторов резко ухудшается состояние здоровья населения. В частности, возрастает частота микробных и вирусных инфекций, лейкозов, аллергий и т.д., т.е. заболеваний, опосредованных нарушениями функций иммунитета.

В этой связи становится актуальной разработка препаратов для лечения иммунодефицитных состояний, вызванных снижением функции иммунитета, в частности, в качестве дополнительного средства для терапии инфекционных заболеваний, средства профилактики послеоперационных осложнений, в основном связанных с инфекциями вследствие иммунодепрессии, а также для коррекции иммунодефицитов, наблюдающихся, в том числе и при длительном применении цитостатиков, стероидных препаратов.

Известно, что N-{2-[3,4-бис-(4-нитробензоилокси)фенил]этил}-4-нитробензамид (соединение 1) обладает иммунотропной активностью и способностью тормозить репликацию вируса (патент РФ N 2039733).

Однако фармацевтические композиции в виде твердой дозированной пероральной лекарственной формы, содержащие соединение 1, в литературе не описаны.

Раскрытие изобретения

Технический результат достигается тем, что предложена фармацевтическая композиция, обладающая иммуностимулирующей активностью, представляющая собой соединение 1, а также возможность применения предлагаемой фармацевтической композиции на основе данного соединения для профилактики и лечения иммунодефицитных состояний. Выявленная фармакологическая активность делает соединение 1 перспективным для создания лекарственного средства, обладающего иммуностимулирующей активностью.

Твердая дозированная фармацевтическая композиция в виде таблеток, капсул, содержащая активное вещество - соединение 1 и целевые добавки, получают как путем смешения и гомогенизации сухих порошков с дальнейшим прямым прессованием таблеток или заполнением капсул, так и путем предварительного гранулирования с последующим таблетированием или заполнением капсул.

При этом соотношение активного вещества и целевых добавок составляет, мас. %:

активное вещество	0,5-97,0
целевые добавки	3,0-99,5

В качестве целевых добавок фармацевтическая композиция содержит не обязательно одновременно крахмал, натрия кроскармеллозу, поливинилпирролидоны, сахара, производные целлюлозы, кремния диоксид, неорганические соли кальция, соли бензойной кислоты, соли стеариновой кислоты при следующем соотношении компонентов, мас. %:

крахмал кукурузный	до 15,0
натрия кроскармеллозу	до 10,0
поливинилпирролидон	до 10,0
сорбит или манит или лактозу до	10,0
гидроксипропилцеллюлозу или
микрокристаллическую целлюлозу	до 60,0
кальция дигидрофосфат	до 5,0
натрия бензоат	до 20,0
магния стеарат или кальция стеарат	до 1,0

Присутствие в твердых лекарственных формах крахмала, сахаров, поливинилпирролидонов, натрия кроскармеллозы, производных целлюлозы обеспечивает повышение скорости высвобождения и полноту всасывания активного вещества, увеличивает распадаемость и растворение лекарственной формы, а также создает условия для проникновения воды и ферментов в таблетку. Крахмал предпочтительно использовать кукурузный или картофельный. Присутствие солей бензойной кислоты предотвращает микробную контаминацию. Присутствие солей стеариновой кислоты обеспечивает эффект скольжения, необходимый на стадии прессования таблеток и заполнения порошка в капсулы. В качестве солей целесообразно применять соли магния или кальция.

Заявляемые соотношения компонентов неочевидны, найдены экспериментальным путем, являются оптимальными и позволяют получить технический результат, соответствующий поставленной задаче - фармацевтическую композицию, представляющую собой дозированную пероральную лекарственную форму, выполненную в виде таблеток, капсул, соответствующих требованиям Государственной Фармакопеи XII и XIII изд., имеющих срок годности не менее 2-х лет и обеспечивающих высокий фармакотерапевтический эффект активного вещества.

Состав и способы получения заявляемой фармацевтической композиции приведены в следующих примерах.

Пример 1. В колбу с мешалкой загружают 17,0 г 1,5%-ного водного раствора гидроксипропилцеллюлозы, к раствору при перемешивании постепенно добавляют 256 г соединения 1, 1,6 г кальция дигидрофосфата, 3,0 г крахмала кукурузного, 2,5 г сорбита. Смесь тщательно перемешивают до образования равномерно увлажненной массы, которую гранулируют до размера гранул 1,5-2,0 мм. Гранулы сушат при 50-60°C (гранулят №1). Высушенные гранулы измельчают на грануляторе до размера гранул 0,6-0,7 мм. Гранулы в смесителе смешивают с 3,0 г магния стеарата (гранулят №2). Полученный гранулят №2 заполняют в капсулы. Получают 1000 капсул, в одной капсуле содержится 250 мг соединения 1 (фентрал). Капсулы соответствуют требованиям Государственной Фармакопеи XI и XII изд.

Пример 2. Аналогично примеру 1 гранулят №1 получают исходя из 17,0 г 2%-ного водного раствора гидроксипропилцеллюлозы, 5,0 г соединения 1, 6,0 г маннита, 20 г микрокристаллической целлюлозы, 4,0 натрия бензоата. Гранулят №2 получают добавляя к грануляту №1 3,0 г магния стеарата. Массу таблетируют, получают 1000 таблеток, в одной таблетке содержится 5,0 мг соединения 1. Таблетки соответствуют требованиям Государственной Фармакопеи XI и XII изд.

Пример 3. Аналогично примеру 1 гранулят №1 получают исходя из 21,0 г 50% раствора поливинилпирролидона, 132,0 г соединения 1, 54, г лактозы. Гранулят №2 получают, добавляя к грануляту №1 2,5 г кальция стеарата. Массу таблетируют, получают 1000 таблеток, в одной таблетке содержится 130 мг соединения 1. Таблетки соответствуют требованиям Государственной Фармакопеи XI и XII изд.

Пример 4. В смеситель-гомогенизатор загружают 5,0 г натрия кроскармеллозы, 30,0 г микрокристаллической целлюлозы, постепенно 53,0 г соединения 1. Затем добавляют 10,0 г сорбита, 2,0 г магния стеарата. После каждой порции компоненты тщательно гомогенизируют и проводят прямое прессование массы на таблеточном прессе. Получают 1000 таблеток в одной таблетке содержится 50 мг соединения 1. Таблетки соответствуют требованиям Государственной Фармакопеи XI и XII изд.

Пример 5. Аналогично примеру 4 гомогенизированный порошок для прямого прессования получают исходя из 506,0 г соединения 1, 100,0 г микрокристаллической целлюлозы и 3,0 г магния стеарата. Массу таблетируют, получают 1000 таблеток, с содержанием в одной таблетке 500 мг соединения 1. Таблетки соответствуют требованиям Государственной Фармакопеи XI и XII изд.

Показатели качества фармацевтической композиции приведены в таблице 1.

Биологические и фармакологические исследования

В эксперименте были использованы белые мыши массой 20-25 г. Животные содержались в стандартных условиях вивария ОАО «ВНЦ БАВ» при 12-часовом режиме освещения, доступе к воде и корму. Экспериментальные исследования проведены в соответствии с требованиями Министерства здравоохранения РФ и международными рекомендациями по работе с животными.

1. Исследование фармацевтической композиции на гуморальные (ТИТРЫ сывороточных антител, формирование антителообразующих клеток), клеточные реакции (реакция гиперчувствительности замедленного типа) и фагоцитирующую активность нейтрофилов (фагоцитоз клеток стафилококка, реакция восстановления нитросинего тетразолия). Результаты приведены в таблице 2.

2. Учитывая, что целью работы было выявление именно иммуностимулирующего действия фармацевтической композиции, использовались методические подходы, позволяющие с большей эффективностью выявлять такую активность.

В частности, при иммунизации экспериментальных животных использовалась субоптимальная доза тест-антигена - 10⁷ эритроцитов барана на мышь. Кроме того, используемый для растворения испытуемого препарата Твин 80 обладал слабой иммунодепрессивной активностью, то есть фармацевтическая композиция изучалась на фоне иммунодепрессии.

Как видно из таблицы 3, Твин 80 в концентрации 0,17% снижает содержание гемолизинов в сыворотках. При действии фармацевтической композиции в дозе 10 мг/кг их образование повышается почти в 2 раза (189), в дозе 100 мг/кг стимуляция составляет 709%, что значительно превосходит также и уровень иммунного ответа животных, получавших физиологический раствор.

Выраженность иммуностимулирующего эффекта существенно зависела от исходного уровня активности иммунной системы. При низком уровне иммунного ответа действие фармацевтической композиции было намного выше, тогда как сильные иммунные реакции стимулировались слабее.

3. Изучение влияния фармацевтической композиции на пролификацию клеток мозга мышей.

В связи с тем, что в медицинской практике отсутствуют препараты с близкой структурой и аналогичным механизмом действия соединению 1 в разных экспериментах использовали различные препараты сравнения (таблица 4).

Как следует из таблицы 4 введение мышам 0,1%-ного твина 80 приводит к снижению пролиферации клеток костного мозга. Фармацевтическая композиция в дозах 10,0 и 50,0 мг/кг восстанавливает интенсивность пролиферации до уровня контрольных животных. Фармацевтическая композиция не уступает эффекту известного стимулятора лейкопоэза метиурацилу.

4. Изучение влияния фармацевтической композиции и препарата сравнения нуклеината натрия на формирование антителобразующих клеток (АОК) в селезенках мышей и титры сывороточных антител представлены в таблице 5.

Как видно из таблицы, фармацевтическая композиция увеличивает число антителообразующих клеток в селезенках и титры антител в сыворотках, превосходя по активности препарат сравнения нуклеинат натрия.

5. Исследование эффективности фармацевтической композиции на животных со сниженным уровнем активности иммунной системы.

Для моделирования иммунодефицита использовали гидрокортизон, который, как известно, подавляет клеточные иммунологические реакции. Гидрокортизон вводили однократно подкожно самкам нелинейных мышей в дозе 5 мг на мышь за 5 суток до иммунизации. Исследуемые фармацевтические композиции вводили однократно в день иммунизации. Результаты представлены в таблице 6.

Практическое применение изобретения.

Выявленная фармакологическая активность делает соединение 1 перспективным для создания лекарственного средства, обладающего иммуностимулирующей активностью. Лекарственное средство планируется для лечения иммунодефицитных состояний, вызванных снижением функции иммунитета, в частности, в качестве дополнительного средства для терапии инфекционных заболеваний, средства профилактики послеоперационных осложнений, в основном связанных с инфекциями вследствие иммунодепрессии, а также для коррекции иммунодефицитов, наблюдающихся при длительном применении цитостатиков, стероидных препаратов.

1. Фармацевтическая композиция, обладающая иммуностимулирующим действием, характеризующаяся тем, что она выполнена в виде таблетки или капсулы и содержит в качестве действующего вещества N-{2-[3,4-бис-(4-нитробензоилокси)фенил]этил}-4-нитробензамид и в качестве целевых добавок необязательно одновременно крахмал кукурузный, гидроксипропилцеллюлозу, микрокристаллическую целлюлозу, кальция дигидрофосфат, поливинилпирролидон, натрия кроскармеллозу, лактозу, натрия бензоат, магния стеарат, кальция стеарат, сорбит, маннит, при следующем соотношении указанных действующего вещества и целевых добавок, мас.%:

Указанное действующее вещество	0,5-97,0
Указанные целевые добавки	3,0-99,5

2. Фармацевтическая композиция по п.1, характеризующаяся тем, что она содержит указанные целевые добавки в следующих количествах, мас. %:

Крахмал кукурузный	до 15,0
Натрия кроскармеллозу	до 10,0
Поливинилпирролидон	до 10,0
Сорбит или маннит или лактозу	до 10,0
Гидроксипропилцеллюлозу или
Микрокристаллическую целлюлозу	до 60,0
Кальция дигидрофосфат	до 5,0
Натрия бензоат	до 20,0
Магния стеарат или кальция стеарат	до 1,0