Способ получения гистологического красителя из растительного сырья

Способ получения гистологического красителя из растительного сырья

Реферат

Изобретение относится к гистологии, разработке доступных, дешевых и нетоксичных красителей растительного происхождения на основе флоры Центрально-Черноземного района.

Известны способы получения гистологических красителей для окрашивания ядер клеток из плодов воронца заостренного, черемухи Мака, марены сердцелистной лесной, луносемянника: авт. свид. СССР N1781259, кл. С09В 61/00, 1992; авт. свид. СССР №1597376 С09В 61/00, 1990, патент РФ 2078105, кл. С09В 61/00, 1997, Патент РФ №2098440, 1997.

Наиболее близким прототипом является первый метод, который заключается в том, что в 70%-ном спирте настаивают плоды воронца заостренного в течение 24-48 ч с последующей обработкой фильтрата ледяной уксусной кислотой, алюмокалиевыми квасцами и мочевиной при их соотношении 8-10:1-1,6:1,6-2,4 соответственно на 100 мл фильтрата.

В собственном исследовании (Ишунина Т.А., Барабанщикова Т.Н., Сгонникова А.О., 2014, Морфологические ведомости 2014, №1, с. 112-114) на основе свекольного сока получен цитоплазматический краситель, в который перед окрашиванием добавляют железоаммонийные квасцы, уксусную кислоту и 96% спирт.

Техническим результатом настоящего изобретения является получение ядерного красителя на основе спиртового экстракта корнеплодов столовой свеклы. От вышеупомянутых красителей отличается источником растительного сырья, методом экстракции, цветом окрашиваемых структур, способом приготовления красящего раствора, использованием водного раствора алюмокалиевых квасцов.

Указанный технический результат достигается тем, что в качестве исходного сырья используются измельченные на терке корнеплоды столовой свеклы, которые настаивают на 90%-ном этиловом спирте с добавлением уксусной кислоты. К 30 мл фильтрата непосредственно перед окрашиванием добавляют 10 мл водного раствора алюмокалиевых квасцов и 10 капель уксусной кислоты. Изобретение поясняется чертежом.

Пример конкретного выполнения

Корнеплоды столовой свеклы (желательно с более интенсивной окраской) очищают от кожуры, натирают на терке, плотно укладывают в стеклянную емкость и заливают 90% спиртом, в который предварительно добавляют уксусную кислоту из расчета 5 мл уксусной кислоты на 100 мл этилового спирта. Полученную смесь помещают в водяную баню на 25-30 минут при температуре 90°С. Вода до уровня 75% высоты емкости. После остывания настаивают в течение недели. Перед окрашиванием настой отжимают и получают непрозрачный раствор бордового цвета. К 30 мл полученного раствора добавляют 10 мл свежего водного раствора алюмокалиевых квасцов (3 грамма квасцов на 50 мл дистиллированной воды), 10 капель уксусной кислоты и хорошо размешивают. Новый краситель подходит для окраски гистологических срезов после стандартной фиксации материала в 10% растворе формалина. Препараты помещают в красящий раствор на 25-30 минут. Результат: ядра клеток окрашиваются в красный цвет (чертеж).

Способ получения гистологического красителя для окраски ядер клеток, отличающийся тем, что в качестве сырья используют корнеплоды столовой свеклы, которые очищают и измельчают на тёрке, экстрагирование производится в 90%-ном растворе этилового спирта, подкисленном уксусной кислотой из расчета 5 мл уксусной кислоты на 100 мл этилового спирта, а непосредственно перед окрашиванием к 30 мл полученного после выжимки раствора добавляют 10 мл свежего водного раствора алюмокалиевых квасцов (3 грамма квасцов на 50 мл дистиллированной воды) и 10 капель уксусной кислоты.