Оценка прогноза и риска пациентов с неспецифическими жалобами

Оценка прогноза и риска пациентов с неспецифическими жалобами

Иллюстрации

Показать все

Реферат

ОБЛАСТЬ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к области клинической диагностики. В частности, настоящее изобретение относится к определению уровня маркерных пептидов в образце полученном из физиологической жидкости субъекта, доставленного в отделение неотложной помощи с неспецифическими жалобами.

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Пациенты, доставленные в отделения неотложной помощи (ED) с неспецифическими жалобами (NSC), представляют собой хорошо известную, но слабо изученную популяцию. Страдающие индивидуумы часто жалуются на то, что "нехорошо себя чувствуют", "чувствуют слабость", "являются уставшими", чувствуют "головокружение", или просто жалуются на то, что неспособны справляться с обычной повседневной деятельностью (van Bokhoven и др. 2008. J Clin Epidemiol; 61: 318-22). Некоторые пациенты могут быть не в состоянии вспомнить, почему они были доставлены в ED. При уходе за такими NSC пациентами, лечащие врачи ED сталкиваются с широким спектром дифференциальной диагностики, который колеблется от несоответствующей помощи на дому до острых состояний, угрожающих жизни (Gordon 1986. Geriatrics 41(4): 75-80). Пациенты с NSC находятся среди тех, которые являются наиболее затруднительными для лечащих врачей ED (Chew and Birnbaumer 1999. Emerg Med Clin North Am 17(1): 265-78). Кроме того, клиническая картина часто является смазанной такими факторами, как сопутствующие заболевания, одновременное назначение больному нескольких лекарственных средств или измененное психическое состояние.

Vanpee и др. продемонстрировали, что вплоть до 20% пожилых индивидуумов, доставленных в ED, не имеют специфических жалоб (Vanpee и др. 2001. Eur J Emerg Med 8(4): 301-4). Кроме того, 50% пожилых индивидуумов без специфических жалоб страдали от острой медицинской проблемы (Rutschmann и др. 2005. Swiss Med Wkly 135(9-10): 145-50). ED гериатрическая популяция представляет собой, в частности, группу высокого риска для неблагоприятных исходов (например, функциональное ухудшение, зависимость и смерть) (McCusker и др. 2001. J Am Geriatr Soc 49(10): 1272-81). Потребности этих пациентов с NSC должны быть определены лучше, кроме того, разработка стратегий эффективного и безопасного решения и ведения пациента является существенной (Vanpee и др. 2001. Eur J Emerg Med 8(4): 301-4; Rutschmann и др. 2005. Swiss Med Wkly 135(9-10): 145-50; Sanders AB. Emergency Care of the Elder Person. St. Louis: Beverly Cracom Publications ред. 1996).

Ведение пациентов в неотложной медицине часто полагается на диагностические и лечебные протоколах, которые основываются на представлении основных жалоб, таких, как острая боль в груди, затруднение дыхания и боль в боку (Lee and Goldman 2000. N Engl J Med 342(16): 1187-95; Gupta и др. 2002. Ann Emerg Med 40(2): 180-6; American Thoracic Society 1999. Am J Respir Crit Care Med 159(1): 321-40; Wang и др. 2005. JAMA 294(15): 1944-56; Kartal и др. 2006. Emerg Med J 23(5): 341-4; European Curriculum for Emergency Medicine. A document of the EuSEM Task Force on Curriculum approved by the Council of the European Society for Emergency Medicine and by the UEMS Multidisciplinary Joint Committee on Emergency Medicine. 2008). Никаких сравнимых протоколов ведения пациентов не было опубликовано для NSC - наиболее вероятно, по причине отсутствия соответствующего определения для NSC и недостаточного количества исследований, которые относятся к дифференциальной диагностике и эффективным рабочим стратегиям в этой популяции (Rosendal и др. 2005. BMJ 330(7481): 4-5). Неопределенность часто сопровождает диагностический процесс с потенциально чрезмерными подтверждающими анализами для того, чтобы исключить лежащее в основе серьезное заболевание (Vanpee и др. 2001. Eur J Emerg Med 8(4): 301-4; Sanders AB. Emergency Care of the Elder Person. St. Louis: Beverly Cracom Publications ред. 1996). Это может приводить к длительному времени ожидания, нерезультативному установлению очередности оказания помощи и неадекватным направлениям к врачу (Sanders 1992. Ann Emerg Med 21(7): 830-4; Knottnerus и др. 1986. Ned Tijdschr Geneeskd 130(9): 402-5).

Nemec и др. обеспечили четкое определение неспецифических жалоб, указанный источник является включенным в данную заявку в качестве ссылки (Nemec и др. 2010. Acad Emerg Med 17(3): 284-292).

Было неожиданно обнаружено, что маркерные пептиды или их фрагменты, или предшественники или их фрагменты, представляют собой независимые прогностические факторы для серьезных состояний, включая смерть и госпитализацию, у пациентов, доставленных в отделения неотложной медицины с неспецифическими жалобами.

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Объектом настоящего изобретения является способ оценки прогноза и риска у пациентов с неспецифическими жалобами, включающий определение маркерных пептидов или их фрагментов, или предшественников или их фрагментов, по крайней мере, с 12 аминокислотами, в образце, взятом от указанного субъекта.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Объект настоящего изобретения представляет собой способ оценки прогноза и риска пациентов с неспецифическими жалобами, включающий определение маркерных пептидов или их фрагментов, или предшественников или их фрагментов, по крайней мере, с 12 аминокислотами, в образце, взятом от указанного субъекта.

Объект настоящего изобретения представляет собой способ для оценки риска или прогноза исхода или для стратификации пациентов с неспецифическими жалобами,

при этом способ включает этапы:

- обеспечения образца физиологической жидкости, полученной от указанного пациента,

- определения в образце уровня маркерного пептида, выбранного из группы, которая состоит из проANP, проBNP, проAVP, проADM, проET-1, PCT, PRX-4 или их фрагментов, включающих, по крайней мере, 12 аминокислот в длину, и

- корреляции уровня указанного маркерного пептида с риском приобретения серьезного состояния и/или смерти или с прогнозом наступления серьезного состояния и/или смерти у пациента с неспецифическими жалобами.

В одном воплощении неспецифические жалобы определяются как форма жалоб, которые не являются частью совокупности специфических жалоб, для которых существует доказательно обоснованные протоколы ведения больных для врачей неотложной помощи (ЕР).

Серьезные состояния могут быть определены как потенциально угрожающие жизни или требующие раннего вмешательства для предотвращения ухудшения состояния здоровья.

В предпочтительном воплощении способа в соответствии с изобретением оценка риска или прогноза, или стратификация относятся к риску приобретения серьезного состояния, включая смерть, или пациенты подвергаются стратификации либо в группу пациентов, которые вероятно подвергаются серьезному состоянию и/или смерти, либо в группу пациентов, которые вероятно не подвергаются серьезному состоянию, включая смерть. Стратификация пациентов может представлять собой стратификацию в соответствии с тяжестью их состояния либо в группу пациентов, которые вероятно подвергаются серьезному состоянию и/или смерти, либо в группу пациентов, которые вероятно не подвергаются серьезному состоянию, включая смерть.

В предпочтительном воплощении пациент не имеет первичного заболевания, которое уже было диагностировано ранее. Это означает, что пациент считался здоровым до возникновения указанных неспецифических жалоб.

В другом предпочтительном воплощении пациент имеет первичное заболевание, когда возникли указанные неспецифические жалобы, вероятно, уже диагностированное первичное заболевание. Определение уровня маркерного пептида, выбранного из группы, которая состоит из проANP, проBNP, проAVP, проADM, проET-1, PCT, PRX-4 или их фрагментов, включающих, по крайней мере, 12 аминокислот в длину, позволяет осуществлять оценку риска или прогноза исхода, или стратификацию пациентов с неспецифическими жалобами путем корреляции указанного уровня с риском приобретения серьезного состояния и/или смерти или с прогнозом получения серьезного состояния и/или смерти у пациента с неспецифическими жалобами, где это серьезное состояние и/или смерть могут либо быть связаны с (а) указанным (диагностированным) первичным заболеванием, либо со (b) вторым дополнительным заболеванием, которое может быть уже диагностированным или недиагностированным. Эти неспецифические жалобы могут рассматриваться как ранние, хотя и неспецифические, симптомы, связанные с указанным первичным заболеванием, или как ранние, хотя и неспецифические, симптомы, второго дополнительного заболевания, которое уже было приобретено.

Один пациент с неспецифическими жалобами может иметь несколько сопутствующих заболеваний. Таким образом, пациенты могут иметь множественные заболевания, то есть, иметь множество сопутствующих заболеваний. Некоторые пациенты, включенные в это исследование, имели вплоть до 11 сопутствующих заболеваний, включая хроническую гипертензию, заболевание коронарной артерии, деменцию, диабет, цереброваскулярное расстройство, хронический алкоголизм, депрессию, хроническое обструктивное заболевание легких (COPD), какую-либо солидную опухоль, хроническую сердечную недостаточность, лейкемию, потери сознание в течение последних 3 месяцев, какое-либо психиатрическое расстройство.

"Серьезное состояние" в контексте настоящего изобретения определяется как любое потенциально угрожающее жизни состояние (например, инфаркт миокарда) или любое состояние, которое требует раннего вмешательства для предотвращения ухудшения состояния здоровья, что приводит к возможной заболеваемости, инвалидности или смерти (например, тяжелая гипонатриемия). Несомненно, природное течение заболевания, лежащего в основе серьезного состояния, в соответствии с этим определением не предполагается. Кроме того, любое состояние, приводящее к смерти после определенного периода времени, например, через 3 дня, 5 дней, 7 дней, 10 дней, 14 дней, 20 дней, 3 недели, 4 недели, 30 дней, 45 дней, 60 дней, 90 дней, 3 месяца, 6 месяцев, 1 год, от изначального поступления в ED оценивается как серьезное состояние.

Термин "исход" в данной заявке относится, например, к выживанию пациента или возникновению серьезного состояния, включая смерть, после определенного периода времени, например, через 3 дня, 5 дней, 7 дней, 10 дней, 14 дней, 20 дней, 3 недели, 4 недели, 30 дней, 45 дней, 60 дней, 90 дней, 3 месяца, 6 месяцев, 1 год.

В соответствии со способом пациент с неспецифическими жалобами считается таким, который имеет риск приобретения серьезного состояния, включая смерть, при поступлении в ED в течение 1 года, более предпочтительно в течение 6 месяцев, даже более предпочтительно в течение 3 месяцев, даже более предпочтительно в течение 60 дней, наиболее предпочтительно в течение 30 дней.

В настоящем изобретении термин "прогноз" означает предсказание, как будет развиваться медицинское состояние субъекта (например, пациента). Этот термин может включать оценку шанса выздоровления или шанса неблагоприятного исхода для указанного субъекта.

В настоящем изобретении термин "оценка риска" означает оценку вероятности для индивидуума испытать определенные неблагоприятные события. Таким образом, индивидуум может предпочтительно причисляться к определенной категории риска, где категории включают, например, высокий риск против низкого риска, или категории риска основываются на количественных значениях, таких, как категории риска 1, 2, 3, и т.д.

В предпочтительном воплощении серьезное состояние выбирают из группы, которая включает смерть, госпитализацию или направление в отделение интенсивной терапии.

Как упоминается в данной заявке в контексте маркерных пептидов и их предшественников, термин "фрагмент" относится к меньшим белкам или пептидам, которые происходят от больших белков или пептидов, которые, таким образом, включают частичную последовательность большего белка или пептида. Указанные фрагменты являются такими, которые получают из больших белков или пептидов путем сапонификации одной или более их пептидных связей. "Фрагменты" маркерных пептидов проANP, проBNP, проЕТ-1, проADM, проAVP, пероксиредоксина-4 и РСТ предпочтительно относятся к фрагментам, которые имеют, по крайней мере, 12 аминокислот в длину. Такие фрагменты предпочтительно определяются с помощью иммунологических анализов и описывается в данной заявке.

Последовательность из 153 аминокислот пре-про-ANP является показанной в SEQ ID NO: 1. При расщеплении N-терминального сигнального пептида (25 аминокислот) и двух С-терминальных аминокислот высвобождается проANP (SEQ ID NO: 2). Этот прогормон расщепляется на зрелый пептид ANP из 28 аминокислот, также известный как ANP (1-28) или α-ANP, и амино-терминальный фрагмент ANP (1-98) (NT-проANP, SEQ ID NO: 3). Среднерегиональный проANP (MR-проANP) определяется как NT-проANP или любой из их фрагментов, включающий, по крайней мере, аминокислотные остатки 53-90 (SEQ ID NO: 4) проANP.

В предпочтительном воплощении способа в соответствии с изобретением определяют уровень фрагмента предшественника проANP, MR-проANP.

Аминокислотная последовательность предшественника пептида адреномедулина (пре-про-адреномедулин) является приведенной в SEQ ID NO: 5. Про-адреномедулин относится к аминокислотным остаткам 22-185 последовательности пре-про-адреномедулина. Аминокислотная последовательность про-адреномедулина (проADM) является представленной в SEQ ID NO: 6. MR-про-адреномедулин (MR-про-ADM) относится к аминокислотным остаткам 45-92 пре-про-ADM. Аминокислотная последовательность MR-про-ADM обеспечивается в SEQ ID NO: 7.

В другом предпочтительном воплощении способа в соответствии с изобретением определяют уровень фрагмента предшественника проADM, MR-проADM.

Последовательность предшественника пептида вазопрессина из 164 аминокислот (пре-про-вазопрессин) является приведенной в SEQ ID NO: 8. Про-вазопрессин относится к аминокислотным остаткам 29-164 последовательности пре-про-вазопрессина. Аминокислотная последовательность про-вазопрессина является приведенной в SEQ ID NO: 9. Про-вазопрессин расщепляется на зрелый вазопрессин, нейрофизин II и С-терминальный про-вазопрессин (CT-проAVP или копептин). Копептин относится к аминокислотным остаткам 126-164 пре-про-вазопрессина. Аминокислотная последовательность копептина обеспечивается в SEQ ID NO: 10. Нейрофизин II включает аминокислотные остатки 32-124 пре-про-вазопрессина и его последовательность является показанной в SEQ ID NO: 11.

В другом предпочтительном воплощении способа в соответствии с изобретением определяют уровень фрагмента предшественника проAVP, копептина.

Последовательность предшественника пептида эндотелина-1 (пре-про-эндотелин-1) из 212 аминокислот является приведенной в SEQ ID NO: 12. Про-ЕТ-1 относится к аминокислотным остаткам 18-212 последовательности пре-про-ЕТ-1. Аминокислотная последовательность про-ЕТ-1 является приведенной в SEQ ID NO: 13. Про-ЕТ-1 расщепляется на зрелый ЕТ-1, большой-ЕТ-1 и С-терминальный проЕТ-1 (СТ-проЕТ-1). СТ-проЕТ-1 относится к аминокислотным остаткам 168-212 пре-про-ЕТ-1. Аминокислотная последовательность СТ-проЕТ-1 обеспечивается в SEQ ID NO: 14.

В другом предпочтительном воплощении способа в соответствии с изобретением определяют уровень фрагмента предшественника проЕТ-1, СТ-проЕТ-1.

Последовательность предшественника мозгового натрийуретического пептида (пре-про-BNP) из 134 аминокислот является приведенной в SEQ ID NO: 15. Про-BNP относится к аминокислотным остаткам 27-134 про-про-BNP. Последовательность про-BNP является показанной в SEQ ID NO: 16. Про-BNP расщепляется на N-терминальный про-BNP (NT-про-BNP) и зрелый BNP. NT-про-BNP включает аминокислотные остатки 27-102 и его последовательность является показанной в SEQ ID NO: 17. SEQ ID NO: 18 показывает последовательность BNP, включающую аминокислотные остатки 103-134 пре-про-BNP пептида.

В другом предпочтительном воплощении способа в соответствии с изобретением определяют уровень фрагмента предшественника проBNP, NT-проBNP.

Прокальцитонин представляет собой предшественник кальцитонина и катакальцина. Аминокислотная последовательность РСТ 1-116 является приведенной в SEQ ID NO: 19.

В другом предпочтительном воплощении способа в соответствии с изобретением определяют уровень РСТ, который состоит из аминокислот 1-116 или 2-116 или 3-116.

Аминокислотная последовательность PRX-4 является представленной в SEQ ID NO: 20. Определение PRX-4 охватывает определение PRX-4 и/или гомомультимера PRX-4 и/или гетеромультимера PRX-4 с одним или более другими пероксиредоксинами и/или фрагмент PRX-4.

В другом предпочтительном воплощении способа в соответствии с изобретением уровень маркерного пептида, выбранного из группы, которая состоит из проANP, проBNP, проAVP, проADM, проЕТ-1, PRX-4 или их фрагментов, включающих, по крайней мере, 12 аминокислот в длину, определяют в указанном образце.

В другом предпочтительном воплощении способа в соответствии с изобретением определяют уровень, по крайней мере, двух маркерных пептидов, выбранных из группы, которая включает MR-проANP, копептин, MR-проADM, СТ-проЕТ-1, PRX-4, NT-проBNP и РСТ.

Еще в одном предпочтительном воплощении способа в соответствии с изобретением определяют уровень копептина и PRX-4.

Еще в одном предпочтительном воплощении способа в соответствии с изобретением определяют уровень, по крайней мере, одного маркерного пептида, выбранного из группы, которая включает MR-проANP, копептин, MR-проADM, СТ-проЕТ-1, PRX-4, NT-проBNP и РСТ, и сочетают его с одним или более клиническими или лабораторными параметрами или характеристиками пациента, выбранными из группы, включающей С-реактивный белок (CRP), креатинин, альбумин, мочевину, уровень гломерулярной фильтрации (GFR), количество лейкоцитов (WBC), тропонин, миелопероксидазу, неоптерин, GDF-15, ST2, цистатин С, индекс коморбидности Чарльсона (CCI), ADL (критерий независимости в повседневной активности) Каца, возраст и пол.

Еще в одном предпочтительном воплощении способа в соответствии с изобретением определяют уровень копептина и PRX-4 и сочетают его с возрастом и/или полом.

Еще в одном предпочтительном воплощении способа в соответствии с изобретением определяют уровень копептина и PRX-4 и сочетают его с индексом коморбидности Чарльсона.

Еще в одном предпочтительном воплощении способа в соответствии с изобретением определяют уровень копептина и PRX-4 и сочетают его с ADL Каца.

В соответствии с предпочтительным воплощением способа в соответствии с настоящим изобретением стратификация пациента относится к ведению пациента, включая решение о применении госпитального лечения или интенсивной терапии, решение о переведении пациента в специализированный госпиталь или профильный стационар, решение о переведении пациента в специализированный госпиталь или профильный стационар, оценку раннего выхода из отделения интенсивной терапии или госпиталя, или выделение ресурсов (например, лечащего врача и/или среднего медперсонала, диагностических ресурсов, терапевтических средств).

Индекс коморбидности Чарльсона (CCI) предсказывает одногодичную летальность пациента, который может иметь спектр сопутствующих болезненных состояний, таких, как сердечное заболевание, СПИД или рак (в общей сложности 22 состояния) (Charlson и др. 1987. J Chronic Dis 40(5): 373-83). Каждому состоянию приписывается балл 1, 2, 3 или 6 в зависимости от риска смерти, ассоциированного с этим состоянием. Потом баллы суммируются, и выводится общий балл, который предсказывает смертность.

Критерий независимости в повседневной активности Каца, который обычно называется как критерий Каца или ADL Каца, представляет собой наиболее приемлемый инструмент для оценки функционального состояния как меры способности пациентов осуществлять повседневную активность независимо. Клиницисты обычно используют этот инструмент для определения проблем в повседневной активности и, соответственно, для планирования ухода. Критерий классифицирует адекватность в осуществлении шести функций, купания, одевания, пользования туалетом, передвижения, регуляции функций мочевого пузыря или кишечника и питания. Пациенты оцениваются в балльной системе да/нет в отношению независимости в осуществлении каждой из шести функций. Балл 6 указывает на полную функцию, 4 свидетельствует об умеренном повреждении функции, и 2 или меньше свидетельствует о тяжелом функциональном расстройстве (Katz и Akpom 1976. Med Care 14(5 Suppl): 116-8; Katz и др. 1970. Gerontologist 10: 20-30).

Термин "корреляция", как используется в данной заявке в отношении применения диагностического(их) и прогностического(их) маркера(ов), относится к сравнению присутствия или количества маркера(ов) у пациента с их присутствием или количеством у лиц, известных как такие, которые страдают от этого, или известных как такие, которые подвержены риску, данного состояния. Уровень маркера в образце пациента может сравниваться с уровнем, который является известным как такой, который ассоциируется со специфическим диагнозом. Говорят, что уровень маркера в образце является таким, который коррелирует с диагнозом; то есть, квалифицированный специалист может использовать уровень маркера для определения, страдает ли пациент от специфического типа диагноза, и принимать ответные меры, соответственно. Альтернативно, уровень маркера может сравниваться с уровнем маркера, известным как такой, который ассоциируется с благоприятным исходом (например, отсутствие заболевания и т.д.). В предпочтительных воплощениях панель уровней маркера коррелирует с глобальной вероятностью или частным исходом.

Термин "уровень" в контексте настоящего изобретения относится к концентрации (предпочтительно выраженной как вес/объем; вес./об.) маркерных пептидов, взятых из образца пациента.

Определение неспецифических жалоб

Главная специфическая жалоба обычно обеспечивает ключевую информацию и позволяет получить рабочий диагноз или следовать предварительно определенному диагностическому протоколу. Специфические жалобы являются признанными как такие, которые часто применяются в литературе и диагностических протоколах (Marx JA, Hockberger R, Walls R. Rosen's Emergency Medicine: Concepts и Clinical. 6-ая ред. St Louis: Mosby; 2005; Siegenthaler W. Differential Diagnosis in Internal Medicine: From Symptom to Diagnosis. New York: Thieme Medical Publishers; 2007).

В отличие от специфических жалоб, мы определяли NSC как совокупность всех жалоб, которые не являются частью множества специфических жалоб или симптомов, или где исходный рабочий диагноз не может быть установлен. Является необходимым определить NSC как оставшиеся после исключения специфических жалоб, поскольку активное определение будет требовать почти бесконечного перечисления возможных неспецифических жалоб. Такое долгое и сложное определение, вероятно, будет исключать некоторых NSC пациентов, поскольку их симптомы не соответствуют требованиям точного подбора совпадения с предварительно определенным списком. Мы используем термин рабочий диагноз в контексте нашего определения NSC для ситуаций, когда пациенты доставлены с NSC, но диагноз, вероятно, несмотря на это установлен при исследовании фактов на момент поступления.

Фигура 1 подытоживает это определение процедурным путем. В наиболее предпочтительном воплощении неспецифические жалобы определяются как жалобы, которые приводят к включению в соответствии с Фигурой 1. Это означает, что пациент в соответствии с изобретением не демонстрирует одной из следующих жалоб: боль (в груди, животе, голове, ногах, суставах, спине), диспноэ, кашель, слабость (локализованная), симптомы, подобные удару, опухание конечностей (ног, рук), диарея, расстройство мочеиспускания, GCS<14, спутанность сознания, интоксикация, пароксизм, припадок, кровотечение, потеря сознания, беспокойство, психические симптомы, суицидальная направленность мышления, кожные повреждения, аллергическая кожная реакция, лихорадка, головокружение, сильное сердцебиение, тошнота с рвотой, травма. Кроме того, на вопрос существует ли главная жалоба после исходной оценки (история болезни, врачебный осмотр, электрокардиография), который приводит к стандартизованному клиническому исследованию больного с целью постановки диагноза или лечения, отвечают: нет. Кроме того, ни один из показателей состояния организма (температура тела, пульс или сердечный ритм, кровяное давление и частота дыхания) не выходит за пределы у указанного пациента. В дополнение к этому, после исходной оценки рабочий диагноз не может быть установлен, в частности, при отсутствии достаточной определенности.

Неспецифические жалобы: Определение критической точки

Благодаря широкому спектру возможных заболеваний, лежащих в основе представления NSC, узкое специфическое для заболевания определение критической точки не является приемлемым. У пациентов с NSC врачи отделения неотложной помощи больше концентрируются на задаче идентификации, то есть, разделения серьезных и несерьезных исходов или состояний. Таким образом, мы определяем серьезное состояние как любое потенциально угрожающее жизни состояние (например, инфаркт миокарда) или любое состояние, которое требует раннего вмешательства для предотвращения ухудшения состояния здоровья, которое приводит к возможной заболеваемости, инвалидности или смерти (например, тяжелая гипонатриемия). Очевидно, что естественное течение лежащего в основе серьезного состояния в соответствии с этим определением не предполагается. Кроме того, какие-либо случаи смерти, которые происходят в течение 30 дней с момента исходного поступления в ED, будут расцениваться как серьезное состояние.

Наше определение серьезного состояния, таким образом, охватывает полный список (Таблица 1), который был изначально определен и дополнительно уточнен при использовании модифицированной методики Делфи во время проведения трех пилотных исследований, где был аккумулирован опыт в отношении серьезных состояний. Ассоциация NSC и потенциального серьезного состояния является особенно вероятной, если существует близкое временное взаимоотношение между определением развития NSC и исхода.

Пороговые уровни могут быть получены, например, из анализа Каплана-Мейера, где возникновение заболевания или вероятность серьезного состояния и/или смерти коррелирует с квартилями соответствующих маркеров в популяции. В соответствии с этим анализом субъекты с уровнями маркера выше 75 перцентиля имеют значительно повышенный риск для приобретения заболеваний в соответствии с изобретением. Этот результат дополнительно подтверждается с помощью модели пропорциональных рисков Кокса с подгонкой для классических факторов риска. Самый высокий квартиль против всех других субъектов в значительно высокой степени ассоциируется с повышенным риском приобретения заболевания или вероятностью серьезного состояния и/или смерти в соответствии с изобретением.

Другие предпочтительные пороговые значения составляют, например, 90, 95 или 99 перцентиля от нормальной популяции. Путем использования более высокого перцентиля, чем 75 перцентиль, можно снизить количество ложно позитивно идентифицированных субъектов, но можно ошибиться при идентификации субъектов, которые имеют умеренный, хотя все еще и повышенный риск. Таким образом, можно принять пороговое значение в зависимости от того, будет ли считаться более приемлемым идентифицировать большинство субъектов как таких, которые имеют риск, в ущерб тем, которые также были идентифицированы как "ложно положительные", или будет ли считаться более приемлемым идентифицировать в основном субъектов, имеющих высокий риск в ущерб потери некоторых субъектов, которые имеют умеренный риск.

Другие математические возможности для подсчета индивидуального риска путем использования индивидуальных значений уровня маркера и других прогностических лабораторных и клинических параметров представляют собой, например, NRI (общий индекс переклассификации) или IDI (объединенный индекс различения). Индексы могут быть подсчитаны в соответствии с Пенцина (Fencing MJ, и др.: Evaluating the added predictive ability of a new marker: from area under the ROC curve to reclassification and beyond. Stat Med. 2008; 27: 157-172).

В соответствии с этим способом пациента с неспецифическими жалобами относят к группе риска приобретения серьезного состояния, включая смерть, тогда, когда указанный определенный уровень маркерного пептида является выше, чем предварительно определенный пороговый уровень.

Предпочтительно, предварительно определенный пороговый уровень маркерного пептида РСТ составляет от 0,02 нг/мл до 0,5 нг/мл, более предпочтительно от 0,02 нг/мл до 0,25 нг/мл, даже более предпочтительно от 0,02 нг/мл до 0.1 нг/мл, даже более предпочтительно от 0,02 нг/мл до 0,06 нг/мл, наиболее предпочтительно от 0,02 нг/мл до (ниже) 0,05 нг/мл. В предпочтительном воплощении пациента с неспецифическими жалобами относят к группе риска приобретения серьезного состояния, когда указанный определенный уровень РСТ является выше чем 0,1 нг/мл, предпочтительно выше чем 0,05 нг/мл, более предпочтительно выше чем 0,025 нг/мл.

Предпочтительно, предварительно определенный пороговый уровень маркерного пептида PRX-4 составляет от 3 ед./мл до 11 ед./мл, более предпочтительно от 3 ед./мл до 8 ед./мл, даже более предпочтительно от 3 ед./мл до 6 ед./мл, даже более предпочтительно от 3 ед./мл до 5 ед./мл, наиболее предпочтительно от 3 ед./мл до ниже 5 ед./мл. В предпочтительном воплощении пациента с неспецифическими жалобами относят к группе риска приобретения серьезного состояния, когда указанный определенный уровень PRX-4 является выше чем 11 ед./мл, предпочтительно выше чем 6 ед./мл, более предпочтительно выше чем 3 ед./мл.

Предпочтительно, предварительно определенный пороговый уровень маркерного пептида MR-проANP составляет от 80 пМ/л до 430 пМ/л, более предпочтительно от 80 пМ/л до 330 пМ/л, даже более предпочтительно от 80 пМ/л до 185 пМ/л, даже более предпочтительно от 80 пМ/л до 140 пМ/л, наиболее предпочтительно от 80 пМ/л до ниже 140 пМ/л. В предпочтительном воплощении пациента с неспецифическими жалобами относят к группе риска приобретения серьезного состояния, когда указанный определенный уровень MR-проANP является выше чем 430 пМ/л, предпочтительно выше чем 185 пМ/л, более предпочтительно выше чем 80 пМ/л.

Предпочтительно, предварительно определенный пороговый уровень маркерного пептида копептина составляет от 5 пМ/л до 80 пМ/л, более предпочтительно от 5 пМ/л до 40 пМ/л, даже более предпочтительно от 5 пМ/л до 30 пМ/л, даже более предпочтительно от 5 пМ/л до 20 пМ/л, наиболее предпочтительно от 5 пМ/л до 10 пМ/л. В предпочтительном воплощении пациента с неспецифическими жалобами относят к группе риска приобретения серьезного состояния, когда указанный определенный уровень копептина является выше чем 80 пМ/л, предпочтительно выше чем 30 пМ/л, более предпочтительно выше чем 10 пМ/л, даже более предпочтительно выше чем 5 пМ/л.

Предпочтительно, предварительно определенный пороговый уровень маркерного пептида MR-проADM составляет от 0,75 нМ/л до 3 нМ/л, более предпочтительно от 0,75 нМ/л до 2,0 нМ/л, даже более предпочтительно от 0,75 нМ/л до 1,5 нМ/л, наиболее предпочтительно от 0,75 нМ/л до 1,0 нМ/л. В предпочтительном воплощении пациента с неспецифическими жалобами относят к группе риска приобретения серьезного состояния, когда указанный определенный уровень MR-проADM является выше чем 3 нМ/л, предпочтительно выше чем 2 нМ/л, более предпочтительно выше чем 1,5 нМ/л, даже более предпочтительно выше чем 1,0 нМ/л даже более предпочтительно выше чем 0,75 нМ/л.

Как упомянуто в данной заявке, "анализ" или "диагностический анализ" может относиться к любому типу, применяемому в области диагностики. Такой анализ может основываться на связывании аналита, который подвергается определению, с одним или более зондами захвата с определенной аффинностью. В отношении взаимодействия между молекулами захвата и целевыми молекулами или молекулами, которые представляют интерес, константа аффинности предпочтительно является большей чем 10⁸ М^-1.

В контексте настоящего изобретения "молекулы захвата" представляют собой молекулы, которые могут использоваться для связывания целевых молекул или молекул, которые представляют интерес, то есть, аналитов (например, в контексте настоящего изобретения кардиоваскулярного(ых) пептида(ов)), с образцом. Молекулы захвата должны, таким образом, обладать адекватной формой, как пространственно, так и в отношении поверхностных характеристик, таких, как поверхностный заряд, гидрофобность, гидрофильность, присутствие или отсутствие доноров и/или акцепторов Льюиса, для того, чтобы специфически связывать целевые молекулы или молекулы, которые представляют интерес. Таким образом, связывание, например, может быть опосредованным ионными взаимодействиями, взаимодействиями ван-дер-Ваальса, взаимодействиями на основе пи-пи, сигма-пи, гидрофобных или водородных связей или комбинацией двух или более из упомянутых выше взаимодействий между молекулами захвата и целевыми молекулами или молекулами, которые представляют интерес. В контексте настоящего изобретения молекулы захвата могут, например, быть выбранными из группы, включающей молекулу нуклеиновой кислоты, молекулу углевода, молекулу пептид-нуклеиновой кислоты (PNA), белок, антитело, пептид или гликопротеин. Предпочтительно, молекулы захвата представляют собой антитела, включая их фрагменты, с достаточной афинностью к целевой молекуле или молекуле, которая представляет интерес, и включая рекомбинантные антитела или фрагменты рекомбинантных антител, а также химически и/или биохимически модифицированные производные указанных антител или фрагментов, которые имеют происхождение от вариантной цепи с длиной, которая составляет, по крайней мере, 12 их аминокислот.

Предпочтительные способы определения включают иммуноанализы в различных форматах, такие, как например, радиоиммуноанализ (RIA), хемилюминисцентные и флуоресцентные иммуноанализы, твердофазные иммуноферментные анализы (ELISA), Luminex способы анализа, основанные на изучении цепочек гранул, анализы белка с применением микрочипа и способы проведения быстрого анализа, такие, как, например, иммунохроматографические тест-методики.

Анализы могут представлять собой гомогенные или гетерогенные анализы, конкурентные и неконкурентные анализы. В особенно предпочтительном воплощении анализ осуществляют в форме сэндвич-анализа, который не является конкурентным иммуноанализом, в данной заявке молекулу, которая подвергается определению и/или качественной оценке, связывают с первым антителом и со вторым антителом. Первое антитело может связываться с твердой фазой, например, с шариками, поверхностью ячейки или другого контейнера, чипом или лентой, а второе антитело представляет собой антитело, которое является меченным, например, с помощью красителя, радиоизотопа, или реактивного или каталитически активного остатка. Количество меченного антитела, связанного с аналитом, потом измеряют с помощью приемлемого способа. Общая композиция и процедуры, связанные с "сэндвич анализами", являются хорошо описанными и известными квалифицированному специалисту (The Immunoassay Handbook, Ed. David Wild, Elsevier LTD, Oxford; 3-е изд. (May 2005), ISBN-13: 978-0080445267; Hultschig С и др., Curr Opin Chem Biol. 2006 Feb; 10(1): 4-10. PMID: 16376134, являются введенными в данную заявку в качестве ссылки).

В особенно предпочтительном воплощении анализ включает две молекулы захвата, предпочтительно антитела, которые являются присутствующими как в дисперсии, так и в жидкой реакционной смеси, в данной заявке компонент метки присоединяют к первой молекуле захвата, в данной заявке указанный первый компонент метки представляет собой часть системы мечения, которая основывается на ослаблении флуоресценции или хемилюминисценции, а также амплификации, а второй компонент метки указанной системы мечения присоединяют ко второй молекуле захвата, так, что при связывании обоих молекул захвата с аналитом генерируется способный к определению сигнал, который позволяет осуществлять определение образовавшихся комплексов сэндвича в растворе, включающем образец.

Даже более предпочтительным является, когда указанная система мечения включает криптаты редкоземельных металлов или хелаты редкоземельных металлов в комбинации с флуоресцентным красителем или хемилюминисцентным красителем, в частности, красителем цианинового типа. В контексте настоящего изобретения анализ на основе флуоресценции включает применение красителей, которые могут, например, быть выбранными из группы, включающей FAM (5- или 6-карбоксифлуоресцеин), VIC, NED, флуоресцеин, флуоресцеинизотиоцианат (FITC), IRD-700/800, цианиновые красители, такие, как CY3, CY5, CY3,5, CY5,5, Cy7, ксантен, 6-карбокси-2',4',7',4,7-гексафторфлуоресцеин (HEX), TET, 6-карбокси-4',5'-дихлоро-2',7'-диметодифлуоресцеин (JOE), N,N,N',N'-тетраметил-6-карбоксиродамин (TAMRA), 6-карбокси-Х-родамин (ROX), 5-карбоксиродамин-6G (R6G5), 6-карбоксиродамин-6G (RG6), родамин, родамин зеленый, родамин красный, родамин 110, BODIPY красители, такие, как BODIPY TMR, Oregon Green, кумарины, такие, как умбеллиферон, бензимиды, такие, как Hoechst 33258; фенантридины, такие, как Texas красный, Yakima желтый, Alexa фтор, PET, бромид этидия, акридиновые красители, карбазоловые красители, феноксазиновые