Способы и композиции для модулирования экспрессии аполипопротеина (а)

Способы и композиции для модулирования экспрессии аполипопротеина (а)

Иллюстрации

Показать все

Реферат

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

Настоящая заявка подается вместе со списком последовательностей в электронном формате. Перечень последовательностей обеспечивается в виде файла под названием BIOL0177WOSEQ.txt, созданного 22 мая 2013, который имеет размер 396 Кб. Информация, содержащаяся в электронном виде в перечне последовательностей, включена в данный документ в виде ссылки во всей своей полноте.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Варианты реализации, описанные в данном документе, обеспечивают способы, соединения и композиции для снижения экспрессии mRNA аполипопротеина (а) и протеина у животного. Подобные способы, соединения и композиции применяются для лечения, профилактики или улучшения сердечно-сосудистых и/или метаболических болезней, расстройств или состояний.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Липопротеины представляют собой глобулярные, мицеллоподобные частицы, которые состоят из неполярного ядра ацилглицеролов и сложных эфиров холестерина, окруженного амфифильным слоем из белков, фосфолипидов и холестерина. Липопротеины разделяют на пять основных категорий на основе их функциональных и физических свойств: хиломикроны, липопротеины очень низкой плотности (VLDL), липопротеиды средней плотности (IDL), липопротеины низкой плотности (LDL) и липопротеины высокой плотности (HDL). Хиломикроны транспортируют пищевые липиды из кишечника в ткани. Все VLDL, IDL и LDL транспортируют триглицериды и холестерин из печени в ткани. HDL транспортируют эндогенный холестерин из тканей в печень.

Липопротеиновые частицы подвергаются непрерывной метаболической обработке и имеют различные свойства и композиции. Плотности липопротеина увеличиваются без увеличения диаметра частиц, так как плотность их внешних слоев меньше, чем таковая у внутреннего ядра. Белковые компоненты липопротеинов известны как аполипопротеины. Среди различных липопротеинов человека по меньшей мере девять аполипопротеинов распределены в значительных количествах.

Частица липопротеина(а) [Lp(a)] была определена почти 50 лет назад и состоит из весьма уникальной частицы LDL, в которой отдельный протеин аполипопротеин В (аро(а)) связан посредством дисульфидной связи с отдельным протеином аполипопротеина (а) [аро(а)]. Протеин аро(а) разделяет высокую степень гомологии с плазминогеном, в частности, в рамках повторяющегося домена 2-го типа двойной петли IV. Уровни циркулирующего Lp(a) обратно пропорциональны количеству варьирующихся повторов двойной петли IV 2-го типа, присутствующих в молекуле, и, так как обе аллели коэкспрессируются у отдельных индивидуумов, могут отображать гетерозиготные профили изоформ в плазме (Kraft et al., Eur J Hum Genet, 1996; 4(2): 74-87). Считается, что этот повторяющийся домен двойной петли в аро(а) может быть ответственным за его протромботические и антифибринолитические свойства, потенциально повышая атеросклеротическое прогрессирование.

Аро(а) транскрипционно регулируют с помощью IL-6 и в исследованиях с пациентами с ревматоидным артритом, получавшими ингибитор IL-6 (тоцилизумаб), снижают уровни в плазме на 30% после 3-месячного лечения (Schultz et al., PLoS One 2010; 5:el4328).

Apo(a) был показан для преимущественно связанных окисленных фосфолипидов и усиления васкулярного воспаления (Bergmark et al., J Lipid Res 2008; 49:2230-2239; Tsimikas et al., Circulation. 2009; 119(13):1711-1719).

Кроме того, исследования демонстрируют, что частица Lp(a) может также стимулировать эндотелиальную проницаемость, вызывать экспрессию ингибитора активатора плазминогена типа-1 и активировать секрецию макрофагального интерлейкина-8 (Koschinsky и Marcovina, Curr Opin Lipidol 2004; 15:167-174). Важно отметить, что недавние исследования генетической связи показали, что Lp(a) является независимым фактором риска развития инфаркта миокарда, инсульта, заболевания периферических сосудов и аневризмы брюшной аорты (Rifai et al., Clin Chem 2004; 50:1364-71; Erqou et al., JAMA 2009;302:412-23; Kamstrup et al., Circulation 2008; 117:176-84). Кроме того, в недавнем исследовании Precocious Coronary Artery Disease (PROCARDIS), Clarke et al. (Clarke et al., NEJM (2009)361; 2518-2528) описаны надежные и независимые связи между ишемической болезнью сердца и концентрацией Lp(a) в плазме. Дополнительно, Solfrizzi et al. предполагают, что увеличение Lp(a) в сыворотке может быть связано с повышенным риском развития болезни Альцгеймера (AD) (Solfrizzi et al., J Neurol Neurosurg Psychiatry 2002, 72:732-736. В настоящее время, в условиях клиники, примеры непрямых ингибиторов аро(а) для лечения сердечно-сосудистых заболеваний содержат аспирин, Niaspan, Mipomersen, Anacetrapib, Epirotirome и Lomitapide, которые снижают в плазме уровни Lp(a) на 18%, 39%, 32%, 36%, 43% и 17%, соответственно. Кроме того, аферез Lp(a) используют в клиническом испытании для снижения аро(а), который содержит частицы Lp(a).

На сегодняшний день терапевтические стратегии для лечения сердечно-сосудистых заболеваний с помощью непосредственно направленных уровней аро(а) были ограничены. Были разработаны рибозимные олигонуклеотиды (патент США 5877022) и антисмысловые олигонуклеотиды (WO 2005/000201; WO 2003/014397; патент США 8138328; Merki et al., J Am Coll Cardiol 2011; 57:1611-1621), но ни одно из соединений, непосредственно нацеленное на аро(а), в настоящее время не используется в клинике.

Таким образом, существует явно выраженная неудовлетворенная медицинская потребность в новых средствах, которые могут эффективно и селективно снижать уровни аро(а) у больных с повышенным риском сердечно-сосудистых осложнений в связи с хронически повышенными уровнями Lp(a) в плазме.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Обеспечиваемое в данном документе представляет собой композиции и способы модулирования экспрессии mRNA аро(а) и протеина. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения аро(а)-специфичный ингибитор уменьшает экспрессию mRNA аро(а) и протеина.

В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения композиция представляет собой аро(а)-специфичный ингибитор. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения аро(а)-специфичный ингибитор представляет собой нуклеиновую кислоту, протеин или малую молекулу. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения аро(а)-специфичный ингибитор представляет собой антисмысловой олигонуклеотид, специфичный по отношению к аро(а). В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения аро(а)-специфичный модифицированный олигонуклеотид, который состоит из от 12 до 30 связанных нуклеозидов и содержит нуклеотидную последовательность, содержащую сегмент из по меньшей мере 8 последовательных нуклеотидов, комплементарную равной длине сегмента нуклеиновых оснований от 3901 до 3920 из SEQ ID NO: 1, при том что последовательность нуклеиновых оснований модифицированного олигонуклеотида по меньшей мере на 80% комплементарна последовательности SEQ ID NO: 1. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения аро(а)-специфичный ингибитор представляет собой модифицированный олигонуклеотид состоит из от 12 до 30 связанных нуклеозидов и имеет последовательность нуклеиновых оснований, которая содержит по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 смежных нуклеиновых оснований последовательности нуклеиновых оснований SEQ ID NO: 1-130, 133, 134. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения аро(а)-специфичный ингибитор представляет собой модифицированный олигонуклеотид, который состоит из 20 связанных нуклеозидов и имеет последовательность нуклеиновых оснований, которая содержит по меньшей мере 8 смежных нуклеиновых оснований любой из SEQ ID NO: 58, при том что модифицированный олигонуклеотид содержит: (а) сегмент разрыва, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; (б) 5'-концевой сегмент, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; (в) 3'-концевой сегмент, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и в котором сегмент зазора расположен между 5'-концевым сегментом и 3'-концевым сегментом, при том что каждый нуклеозид каждого концевого сегмента содержит 2'-O-метоксиэтилированный сахар, причем каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь, при том что каждый остаток цитозина представляет собой 5-метилцитозин.

Отдельные варианты реализации настоящего изобретения обеспечивают композицию, которая содержит соединение, описанное в данном документе, или его соль и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.

В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения модуляция экспрессии аро(а) происходит в клетке или ткани. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения модуляции происходят в клетке или ткани у животного. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения животное представляет собой человека. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения модуляция представляет собой снижение уровня mRNA аро(а). В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения модуляция представляет собой снижение уровня протеина аро(а). В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения снижают уровни mRNA аро(а) и протеина. Такое уменьшение может происходить в зависимости от времени или дозозависимо.

Отдельные варианты реализации настоящего изобретения обеспечивает композиции и способы для применения в терапии. Отдельные варианты реализации настоящего изобретения обеспечивают композиции и способы для профилактики, лечения, запаздывания, замедления прогрессирования и/или уменьшения интенсивности связанных с аро(а) болезней, расстройств и заболеваний. Отдельные варианты реализации настоящего изобретения обеспечивают композиции и способы для профилактики, лечения, запаздывания, замедления прогрессирования и/или уменьшения интенсивности связанных с Lp(a) болезней, расстройств и заболеваний. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения подобные болезни, расстройства и заболевания представляют собой воспалительные, сердечно-сосудистые и/или метаболические болезни, расстройства и состояния. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения композиции и способы терапии содержат введение аро(а)-специфичного ингибитора индивидууму, нуждающемуся в этом. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения аро(а)-специфичный ингибитор представляет собой нуклеиновую кислоту. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения нуклеиновая кислота представляет собой антисмысловое соединение. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения антисмысловое соединение представляет собой модифицированный олигонуклеотид.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Следует понимать, что и предшествующее общее описание, и последующее подробное описание являются исключительно примерными и пояснительными и не ограничивают настоящее изобретение, как заявлено. В данном документе использование единственного числа содержит множественное число, если специально не указано иное. Как используется в данном описании, использование "или" подразумевает "и/или", если не указано иное. Кроме того, как используют в данном описании, использование "и" подразумевает "и/или", если не указано иное. Кроме того, использование термина "который содержит", а также других форм, таких как "содержит" и "содержится", не ограничено. Кроме того, такие термины, как "элемент" или "компонент" охватывают элементы и компоненты, которые содержат одну единицу, элементы и компоненты, имеющие больше одной субъединицы, если специально не указано иное.

Заголовки разделов, используемых в данном документе, предназначены только для организационных целей и не должны быть истолкованы как описанный предмет изобретения. Все документы или части документов, цитируемые в данном описании, в том числе, но без ограничения ими, патенты, патентные заявки, опубликованные патентные заявки, статьи, книги, монографии и регистрационные номера GENBANK и связанная с ними информация о последовательности, получаемая из таких баз данных, как National Center for Biotechnology Information (NCBI), и другие данные, указанные по всему объему описания, тем самым явно включены в качестве ссылки в частях документа, обсуждаемых в данном документе, а также во всей их полноте.

Определения

Если не предусматривают конкретные определения, используемая номенклатура, связанная и с методиками, и со способами аналитической химии, химии органического синтез, медицинской и фармацевтической химии, описанными в данном документе, является хорошо известной и широко используемой в данной области техники. Стандартные способы могут быть использованы для химического синтеза и химического анализа.

Если не указано иное, следующие термины имеют следующие значения:

"2'-O-метоксиэтил" (либо 2'-МОЕ, МОЕ, 2'-O(СН₂)₂-ОСН₃ и 2'-O-(2-метоксиэтил)) соответствует модификации О-метоксиэтилом положения 2' фуранозного кольца. 2'-O-метоксиэтилированный сахар представляет собой модифицированный сахар.

"2'-дезоксирибонуклеозид" означает нуклеозид, который содержит 2'-Н фуранозильный остаток сахара, как обнаружено в случае встречающихся в природе дезоксирибонуклеозидов (DNA).

"2'-МОЕ нуклеозид" (либо 2'-метоксиэтилнуклеозид) означает нуклеозид, который содержит модифицированный 2'-МОЕ остаток сахара. "2'-O-метоксиэтилнуклеотид" означает нуклеотид, который содержит модифицированный 2'-O-метоксиэтилом остаток сахара.

"3'-фтор-HNA" (либо "F-HNA" или "3'-F-HNA") означает остаток сахара нуклеозида, который имеет следующую структуру:

где Вх представляет собой нуклеиновое основание.

"Сайт-мишень 3"' соответствует нуклеотиду нуклеиновой кислоты-мишени, который является комплементарной крайнему 3' нуклеотиду конкретного антисмыслового соединения.

"Сайт-мишень 5"' соответствует нуклеотиду нуклеиновой кислоты-мишени, который является комплементарной крайнему 5' нуклеотиду конкретного антисмыслового соединения.

"5-метилцитозин" означает цитозин, модифицированный метильной группой, присоединенной в положении 5'. 5-метилцитозин представляет собой модифицированное нуклеиновое основание.

"Около" означает в пределах ±10% величины. Например, если указано, что "маркер может быть увеличен на около 50%", подразумевается, что маркер может быть увеличен на 45%-55%.

"Активное фармацевтическое средство" означает вещество или вещества в фармацевтической композиции, которые при введении индивидууму обеспечивают терапевтический эффект. Например, в отдельных вариантах реализации настоящего изобретения антисмысловой олигонуклеотид, направленный на аро(а), представляет собой активное фармацевтическое средство.

"Активная область-мишень" или "область-мишень" означает область, к которой одно или несколько активных антисмысловых соединений являются специфичными. "Активные антисмысловые соединения" означает антисмысловое соединения, которое снижает уровни нуклеиновой кислоты-мишени или уровни протеина.

"Осуществляют параллельно" относится к совместному введению двух средств любым путем, при котором фармакологические эффекты обоих проявляются у пациента в одно и то же время. Одновременное введение не требует, чтобы оба средства могли быть введены в виде отдельной фармацевтической композиции, в той же лекарственной форме или же с помощью того же способа введения. Эффекты обоих средств могут не проявиться в то же время. Эффекты должны быть перекрывающимися только в течение периода времени и не обязательно должны иметь одинаковое протяжение во времени.

"Применение" или "введение" означает обеспечение фармацевтического средства индивидууму и содержит, но без ограничения ими, введение медицинским работником и самостоятельное введение. Введение фармацевтического средства индивидууму может быть непрерывным, хроническим, коротким или периодическим. Введение может быть парентеральным или энтеральным.

"Средство" означает активное вещество, которое при введении животному может обеспечивать терапевтический эффект. "Первое средство" означает терапевтическое соединение по настоящему изобретению. Например, первое средство может быть антисмысловым олигонуклеотидом, специфичным по отношению к аро(а). "Второе средство" означает второе терапевтическое соединение по настоящему изобретению (например, второй антисмысловой олигонуклеотид, специфичный по отношению к аро(а)), и/или терапевтическое соединение отличное от аро(а).

"Нейтрализация" или "деинтенсификация" или "уменьшение интенсивности" относится к уменьшению по меньшей мере одного индикатора, признака или симптома ассоциированной болезни, расстройства или заболевания. Тяжесть индикаторов можно определить с помощью субъективных и объективных мер, которые известны специалистам в данной области техники.

"Животное" соответствует человеку или животному, отличному от человека, в том числе, но без ограничения ими, мышам, крысам, кроликам, собакам, кошкам, свиньям и приматам, в том числе, но без ограничения ими, обезьянам и шимпанзе.

"Антитело" соответствует молекуле, которая характеризуется специфичным взаимодействием с антигеном таким способом, где каждое антитело и антиген определено в терминах другого. Антитело может относиться к полной молекуле антитела или любому его фрагменту или области, такой как тяжелая цепь, легкая цепь, область Fab и область Fc.

"Антисмысловая активность" означает заметную или измеримую активность, обусловленную гибридизацией антисмыслового соединения со своей нуклеиновой кислотой-мишенью. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения антисмысловая активность представляет собой уменьшение количества или экспрессии нуклеиновой кислоты-мишени или протеина, кодируемого такой нуклеиновой кислотой-мишенью.

"Антисмысловое соединение" означает олигомерное соединение, которое способно вступать в гибридизацию с нуклеиновой кислотой-мишенью с помощью водородных связей. Примеры антисмысловых соединений содержат одноцепочечные и двухцепочечные соединения, такие как, антисмысловые олигонуклеотиды, siRNA, shRNA, snoRNA, miRNA и сателлитные повторы. Как используют в данном документе, термин "антисмысловое соединение" охватывает фармацевтически приемлемые производные соединений, описанных в данном документе.

"Антисмысловое ингибирование" означает снижение уровней нуклеиновой кислоты-мишени или уровней протеина-мишени в присутствии антисмыслового соединения, комплементарного нуклеиновой кислоте-мишени по сравнению с уровнями нуклеиновой кислоты-мишени или уровнями протеина-мишени при отсутствии антисмыслового соединения.

"Антисмысловой олигонуклеотид" означает одноцепочечный олигонуклеотид, имеющий последовательность нуклеиновых оснований, которая делает возможной гибридизацию соответствующей области или сегмента нуклеиновой кислоты-мишени. Как используют в данном документе, термин "антисмысловой олигонуклеотид" охватывает фармацевтически приемлемые производные соединений, описанных в данном документе.

"Аро(а)" означает любую нуклеиновую кислоту или белковую последовательность, кодирующую аро(а). Например, в отдельных вариантах реализации настоящего изобретения аро(а) содержит последовательность DNA, кодирующую аро(а), последовательность RNA, транскрибируемую из DNA, кодирующей аро(а) (в том числе геномных DNA, содержащей интроны и экзоны), последовательность mRNA, кодирующую аро(а) или последовательность, кодирующую пептид аро(а).

"Нуклеиновая кислота аро(а)" означает любую нуклеиновую кислоту, которая кодирует аро(а). Например, в отдельных вариантах реализации настоящего изобретения нуклеиновая кислота аро(а) содержит последовательность DNA, кодирующую аро(а), последовательность RNA, транскрибируемую из DNA, кодирующей аро(а) (в том числе геномной DNA, содержащей интроны и экзоны) и последовательность mRNA, кодирующую аро(а).

"mRNA аро(а)" означает mRNA, кодирующую протеин аро(а).

"Протеин аро(а)" означает любую белковую последовательность, кодирующую Аро(а).

"Аро(а)-специфичный ингибитор" соответствует любому средству, способному специфично ингибировать экспрессию нуклеиновой кислоты аро(а) и/или протеина аро(а). Например, аро(а)-специфичный ингибитор содержит нуклеиновые кислоты (в том числе антисмысловые соединения), пептиды, антитела, малые молекулы и другие средства, способные ингибировать экспрессию нуклеиновой кислоты аро(а) и/или протеина аро(а). В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения с помощью специфичного модулирования экспрессии нуклеиновой кислоты аро(а) и/или экспрессии протеина аро(а), аро(а)-специфичный ингибитор может влиять на другие компоненты системы транспорта липидов, в том числе компоненты ниже по потоку. Аналогичным образом, в отдельных вариантах реализации настоящего изобретения аро(а)-специфичные ингибиторы могут влиять на другие молекулярные процессы в организме животного.

"Атеросклероз" означает артериосклероз, затрагивающий большие и средние артерии и характеризующийся наличием жировых отложений. Жировые отложения называются "атеромы" или "бляшки", которые состоят в основном из холестерина и других жиров, кальция и рубцовой ткани, и повреждают оболочку артерий.

"Бициклический сахар" означает фуранозильное кольцо, модифицированное мостиком из двух атомов. Бициклический сахар является модифицированным сахаром.

"Бициклический нуклеозид" (либо BNA) означает нуклеозид, который имеет остаток сахара, содержащий мостик, соединяющий два атома углерода кольца сахара, тем самым образуя бициклическую кольцевую систему. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения мостик соединяет углерод 4' и углерод 2' кольца сахара.

"Структура кэпа" или "концевой остаток кэпа" означает химические модификации, которые содержатся на любом конце антисмыслового соединения.

"Сердечно-сосудистое заболевание" или "сердечно-сосудистое расстройство" относится к группе заболеваний, связанных с сердцем, кровеносными сосудами или циркуляцией. Примеры сердечно-сосудистых болезней содержат, но без ограничения ими, аневризму, стенокардию, аритмию, атеросклероз, болезни сосудов головного мозга (удар), ишемическую болезнь сердца, гипертензию, дислипидемию, гиперлипидемию, гипертриглицеридемию и гиперхолестеринемию.

"Химически индивидуальная область" относится к области антисмыслового соединения, которая является в некотором роде химически отличной от другой области того же антисмыслового соединения. Например, область, которая имеет 2'-O-метоксиэтилнуклеотиды, является химически отличной от области, которая имеет нуклеотиды без модификации 2'-O-метоксиэтилом.

"Гибридное антисмысловое соединение" означает антисмысловое соединение, которое имеет по меньшей мере две химически различные области.

"Холестерин" представляет собой молекулу стерина, обнаруживаемую в клеточных мембранах всех тканей животных. Холестерин должен переноситься в плазме крови животного с помощью липопротеинов, в том числе липопротеинов очень низкой плотности (VLDL), липопротеидов средней плотности (IDL), липопротеинов низкой плотности (LDL) и липопротеинов высокой плотности (HDL). "Холестерин плазмы" соответствует сумме всех липопротеинов (VDL, IDL, LDL, HDL) этерифицированного и/или этерифицированного холестерина, присутствующего в плазме или сыворотке.

"Ингибитор поглощения холестерина" означает средство, которое ингибирует всасывание экзогенного холестерина, полученного из питания.

"Совместное введение" означает введение индивидууму двух или более средств. Два или более средств могут быть в одной фармацевтической композиции или могут быть в виде отдельных фармацевтических композиций. Каждое из двух или более средств может быть введено с помощью одинаковых или различных путей введения. Совместное введение охватывает параллельное или последовательное введение.

"Комплементарность" означает способность к спариванию между нуклеиновыми основаниями первой нуклеиновой кислоты и второй нуклеиновой кислоты. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения комплементарность между первой и второй нуклеиновыми кислотами может быть между двумя нитями DNA, между двумя нитями RNA или между нитями DNA и RNA. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения некоторые из нуклеотидов в одной нити совпадают с комплементарным, в соответствии с образованием водородных связей, основанием на другой нити. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения все из нуклеотидов на одной нити совпадают с комплементарными, в соответствии с образованием водородных связей, основаниями другой нити. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения первая нуклеиновая кислота представляет собой антисмысловое соединение, а вторая нуклеиновая кислота представляет собой нуклеиновую кислоту-мишень. В отдельных подобных вариантах реализации настоящего изобретения антисмысловой олигонуклеотид представляет собой первую нуклеиновую кислоту, а нуклеиновая кислота-мишень представляет собой вторую нуклеиновую кислоту.

"Этил с ограниченной конформационной свободой" или "cEt" соответствует бициклическому нуклеозиду, который имеет фуранозный сахар, содержащий мостик метил(метиленокси) (4'-СН(СН₃)-O-2') между атомами углерода 4' и 2'.

"Этилнуклеозид с ограниченной конформационной свободой" (либо нуклеозид cEt) означает нуклеозид, который содержит бициклический остаток сахара, содержащий мостик 4'-СН(СН₃)-O-2'.

"Смежные нуклеиновые основания" означают нуклеиновые основания в непосредственной близости друг к другу.

"Перекрестно-реагирующий" означает, что олигомерное соединение, специфичное по отношению к одной последовательности нуклеиновой кислоты, может гибридизоваться с другой последовательностью нуклеиновой кислоты. Например, в некоторых случаях антисмысловой олигонуклеотид, специфичный по отношению к аро(а) человека, может перекрестно реагировать с аро(а) другого вида. Не смотря на то, что олигомерное соединение перекрестно реагирует с последовательностью нуклеиновой кислоты не так, как это задумано, мишень зависит от степени комплементарности соединения, которую имеет с последовательностью, отличной от последовательности нуклеиновой кислоты-мишени. Чем выше комплементарность между олигомерным соединением и нуклеиновой кислотой, отличной от нуклеиновой кислоты-мишени, более вероятно, что олигомерное соединение будет перекрестно реагировать с нуклеиновой кислотой.

"Лечение" означает способ, который восстанавливает здоровье или предписанное лечение в случае болезни.

"Ишемическая болезнь сердца (CHD)" означает сужение мелких кровеносных сосудов, снабжающих кровь и кислород к сердцу, что часто является результатом атеросклероза.

"Дезоксирибонуклеотид" означает нуклеотид, который имеет водород в 2' положении остатка сахара нуклеотида. Дезоксирибонуклеотиды могут быть модифицированы любым из множества заместителей.

"Сахарный диабет" или "диабет" представляет собой синдром, характеризующийся расстроенным метаболизмом и аномально высоким уровнем сахара в крови (гипергликемией) в результате недостаточного уровня инсулина или снижения чувствительности к инсулину. Характерными симптомами являются чрезмерное производство мочи (полиурия) за счет высоких уровней глюкозы в крови, чрезмерная жажда и повышенное потребления жидкости (полидипсии), которые приводят к компенсированию повышенного мочеиспускания, нарушения зрения, в связи с высокими влияниями глюкозы крови на оптику глаза, необъяснимая потеря веса и вялость.

"Диабетическая дислипидемия" или "диабет 2-го типа с дислипидемией" означает заболевание, которое характеризуется сахарным диабетом 2-го типа, снижением HDL-C, повышенными триглицеридами (ТГ) и повышенными маленькими, плотными частицами LDL.

"Разбавитель" означает ингредиент в композиции, которая испытывает недостаток фармакологической активности, но фармацевтически необходимый или желателен. Например, разбавитель в инъектируемой композиции может представлять собой жидкость, например, солевой раствор.

"Дислипидемия" относится к расстройству липидного и/или липопротеинового метаболизма, в том числе перепроизводства или дефицита липида и/или липопротеина. Дислипидемии могут проявляться с помощью повышения липидов, таких как хиломикрон, холестерин и триглицериды, а также липопротеины, такие как липопротеины низкой плотности (LDL).

"Единица дозирования" означает форму, в которой фармацевтическое средство обеспечивают, например, пилюли, таблетки или другую единицу дозирования, известную в данной области. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения единица дозирования представляет собой пробирку, которая содержит лиофилизированный антисмысловой олигонуклеотид. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения единица дозирования представляет собой пробирку, которая содержит восстановленный антисмысловой олигонуклеотид.

"Доза" означает указанное количество фармацевтического средства, обеспеченного в отдельном введении или в течение определенного периода времени. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения доза может быть введена в виде одного, двух или более болюсов, таблеток или инъекций. Например, в отдельных вариантах реализации настоящего изобретения, если желательно подкожное введение, а желаемая доза требует объем, который не так легко разместить с помощью одной инъекции, то для достижения требуемой дозы могут быть использованы две или более инъекций. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения фармацевтическое средство вводят с помощью инфузии в течение длительного периода времени или непрерывно. Дозы могут быть выражены в качестве количества фармацевтического средства за час, день, неделю или месяц. Дозы могут быть выражены как мг/кг или г/кг.

"Эффективное количество" или "терапевтически эффективное количество" означает количество активного фармацевтического средства, достаточное для осуществления желаемого физиологического результата у индивидуума, нуждающегося в средстве. Эффективное количество может варьироваться между отдельными людьми в зависимости от здоровья и физического состояния человека, которого лечат, таксономической группы лиц, которых лечат, состава композиции, оценки состояния здоровья индивида и других соответствующих факторов.

"Полностью комплементарный" или "100% комплементарный" означает, что каждое нуклеиновое основание из последовательности нуклеиновых оснований первой нуклеиновой кислоты имеет комплементарное ему нуклеиновое основание во второй последовательности нуклеиновых оснований второй нуклеиновой кислоты. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения первая нуклеиновая кислота представляет собой антисмысловое соединение, а вторая нуклеиновая кислота представляет собой нуклеиновую кислоту-мишень.

"Фуранозил" означает структуру, которая содержит 5-членное кольцо, содержащее четыре атома углерода и один атом кислорода.

"Гэпмер" означает гибридное антисмысловое соединение, в котором внутренняя область, имеющая множество нуклеозидов, которые поддерживают расщепление RNaзой H, расположено между внешними областями, имеющими один или несколько нуклеозидов, при том что нуклеозиды содержат внутреннюю область, химически отличную от нуклеозида или нуклеозидов, которые содержат внешние регионы. Внутренняя область может упоминаться как "разрыв", а внешние области могут упоминаться как "концы".

"С увеличенным разрывом" означает гибридное антисмысловое соединение, которое имеет сегмент разрыва из 12 или более смежных 2'-дезоксирибонуклеотидов, расположенных между и в непосредственной близости к сегментам 5' и 3' конца, которые имеют от одного до шести нуклеозидов.

"Глюкоза" является моносахаридом, который используют с помощью клеток в качестве источника энергии и промежуточного продукта воспаления. "Глюкоза в плазме" соответствует глюкозе, которая присутствует в плазме.

"Высокая плотность липопротеина-С" или "HDL-C" означает уровень холестерина, связанного с частицами липопротеинов высокой плотности. Концентрация HDL-C в сыворотке крови (или плазме), как правило, количественно определяют в мг/дл или нмоль/л. "HDL-C в сыворотке" и "HDL-C в плазме" означает HDL-C в сыворотке крови и плазмы, соответственно.

"Ингибитор HMG-CoA редуктазы" означает средство, которое действует через ингибирование фермента HMG-CoA-редуктазы, такое как аторвастатин, розувастатин, флувастатин, ловастатин, правастатин и симвастатин.

"Гибридизация" означает ренатурацию комплементарных молекул нуклеиновых кислот. В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения комплементарные молекулы нуклеиновых кислот содержат антисмысловое соединение и нуклеиновую кислоту-мишень.

"Гиперхолестеринемия" означает заболевание, характеризующееся повышенным уровнем холестерина или циркулирующего (в плазме) холестерина, LDL-холестерина и VLDL-холестерина, в соответствии с рекомендациями Expert Panel Report National Cholesterol Educational Program (NCEP) of Detection, Evaluation of Treatment касательно высокого уровня холестерина у взрослых (смотри, Arch. Int. Med. (1988) 148, 36-39).

"Гиперлипидемия" или "гиперлипемия" является заболеванием, характеризующимся повышенными липидами в сыворотке или циркулирующими липидами (в плазме). Это заболевание проявляет аномально высокую концентрацию жиров. Липидные фракции в циркулирующей крови представляют собой холестерин, липопротеины низкой плотности, липопротеины очень низкой плотности, хиломикроны и триглицериды. Классификация гиперлипидемий по Фредриксону основана на структуре TG и липопротеиновых частицы богатых на холестерин, что измеряют с помощью электрофореза или ультрацентрифугированием и обычно используют для определения основных причин гиперлипидемий, таких как гипертриглицеридемия (Fredrickson и Lee, Circulation, 1965, 31:321-327; Fredrickson et al., New Eng J Med, 1967, 276 (1): 34-42).

"Гипертриглицеридемия" означает заболевание, которое характеризуется повышенными уровнями триглицерида. Этиология содержит первичные (т.е. генетические причины) и вторичные (другие лежащие в основе причины, такие как диабеты, метаболический синдром/инсулинорезистентность, ожирение, отсутствие физической активности, курение, избыток алкоголя и диета с очень высоким содержанием углеводов) факторы или, чаще всего, комбинация обоих (Yuan et al. CMAJ, 2007, 176:1113-1120).

"Идентификация" или "выбор животного с метаболическим или сердечно-сосудистым заболеванием" означает определение или выбор пациента, склонного к, или имеющего, диагнозу метаболического заболевания, сердечно-сосудистого заболевания или метаболического синдрома; или, идентификация или выбор пациента, который имеет любой симптом метаболического заболевания, сердечно-сосудистого заболевания или метаболического синдрома, в том числе, но без ограничения ими, гиперхолестеринемии, гипергликемии, гиперлипидемии, гипертриглицеридемии, инсулинорезистентности, вызванной гипертонии, снижения чувствительности к инсулину, массы тела выше нормальной и/или содержания жира выше нормального или их любую комбинацию. Такая идентификация может быть выполнена любым способом, который включает, но без ограничения ими, стандартные клинические тесты или оценки, такие как измерения холестерина в сыворотке или циркулирующего (в плазме) холестерина, измерения глюкозы в сыворотке или глюкозы, циркулирующей (в плазме) в крови, измерения триглицеридов в сыворотке или триглицеридов, циркулирующих (в плазме) в крови, измерение кровяного давления, измерение содержания жира, измерение массы тела и подобные.

"Улучшенный сердечно-сосудистый результат" означает снижение возникновения неблагоприятных сердечно-сосудистых осложнений или их риска. Примеры неблагоприятных сердечно-сосудистых событий содержат, но без ограничения ими, смерть, повторный инфаркт, инсульт, кардиогенный шок, отек легких, остановку сердца и предсердную аритмию.

"В непосредственной близости" означает отсутствие промежуточных элементов между непосредственно примыкающими элементами, например, между областями, сегментами, нуклеотидами и/или нуклеозидами.

"Повышение HDL" или "рост HDL" означает повышение уровня HDL у животного после введения по меньшей мере одного соединения по настоящему изобретению, по сравнению с уровнем HDL у животного, которому не вводили никакого соединения.

"Индивидуум", "пациент" или "животное" означает человека или отличного от человека животного, выбранного для лечения или терапии.

"Инд