Комбинация синбиотиков для улучшения мозговой деятельности

Комбинация синбиотиков для улучшения мозговой деятельности

Реферат

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение касается питательных композиций, содержащих синбиотики, для применения с целью улучшения мозговой деятельности и когнитивных функций, в частности, характеристик социального взаимодействия и пространственной памяти. Изобретение особенно подходит для младенцев в возрасте 6 месяцев или менее, недоношенных младенцев и младенцев или детей младшего возраста, страдающих от воспаления, аллергии или атопического заболевания.

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Повышенное внимание вызывает связь кишечника и головного мозга и роль, которую играет питание в этой связи. Существует сложная двусторонняя система связи между кишечником и головным мозгом, которая обеспечивает желудочно-кишечный гомеостаз и поддерживает пищеварение и которая в обратном направлении может влиять на когнитивную и психологическую функцию и поведение. У некоторых субъектов эта связь между кишечником и головным мозгом нарушена, в результате чего появляется сопутствующая патология между воспалением кишечника и повышенной тревожностью, депрессией, измененной чувствительностью к боли и/или пониженными когнитивными функциями.

Такие сопутствующие патологии являются нежелательными особенно у младенцев и детей, начинающих ходить, поскольку в период младенчества когнитивная система еще развивается, и нарушение этого развития может иметь длительные последствия. Перинатальная пластичность головного мозга повышает уязвимость в отношении ранних стрессовых состояний, таких как повторяющаяся боль или воспаление, что может приводить к нарушениям когнитивного развития и поведения.

Грудное вскармливание является предпочтительным способом кормления грудных младенцев. Однако есть обстоятельства, которые делают грудное вскармливание невозможным или менее желательным. В этих случаях хорошей альтернативой являются детские смеси. Состав современных смесей для детского питания адаптирован таким образом, что он соответствует многим специальным требованиям по питанию быстро растущего и развивающегося младенца. Кроме того, можно сделать дополнительные усовершенствования. Настоящее изобретение касается питательных композиций для младенцев, в частности, детских смесей, которые содержат конкретные ингредиенты для улучшения когнитивных функций и поведения.

В WO 2012/092160 и US2012/0171165 раскрыты питательные композиции, включающие олигосахариды человеческого грудного молока, которые можно вводить индивидуумам, в том числе недоношенным младенцам, младенцам, детям, начинающим ходить, и детям для улучшения функции желудочно-кишечного тракта и переносимости, а также для развития полезных бактерий. Раскрыты также дополнительные подходящие способы применения питательных композиций, включающих олигосахариды человеческого грудного молока. В WO 2011/051482 раскрыты питательные композиции для младенцев и/или детей, включающие лактоферрин и пробиотики. В WO 2008/111832 раскрыта терапия, направленная на развитие лингвистических и/или социальных навыков у младенцев посредством введения компонентов, стимулирующих развитие здоровой кишечной флоры.

В WO 20011/047107 и заявке США 2011/086809 раскрыт способ поддержки развития сетчатки, кишечной и/или нервной системы у новорожденных, обеспечивающий дипептид аргинин-глутамин. Многочисленные другие ингредиенты указаны как компоненты детских смесей, которые можно использовать для введения дипептида. Эффекты, подтверждаемые в примерах, представляют профилактику ретинопатии у недоношенных на мышиной модели кислород-индуцированной ретинопатии и защиту от поражения кишечника и головного мозга, индуцированного гипероксией, на мышиной модели при мониторинге активности каспазы-3 и «показателя поражения кишечника».

В заявке США 2007/207132 раскрыт препарат, содержащий Bifidobacterium breve и смесь неусваиваемых углеводов, для младенцев без грудного вскармливания или на частичном грудном вскармливании, а также его применение для обработки с целью профилактики иммунных нарушений у младенцев без грудного вскармливания или на частичном грудном вскармливании.

В JP19950099779, согласно реферату, раскрыта композиция, улучшающая способность к обучению, включающая производное олигосахарида, содержащее сиаловую кислоту.

В работе Olubukunola и др. "Перфорация кишечника у младенцев с очень низкой массой тела при рождении: рост и нейроразвитие в возрасте 1 года" J. Perinatology vol. 25, №9 (2005) 583-589 [XP002704986] сравнивается рост и нейроразвитие у выживших младенцев с очень низкой массой тела при перфорации кишечника, вызванной некротическим энтероколитом, и при спонтанной перфорации кишечника. Вмешательство не раскрывается.

В работе Field и др. "Сравнение симптомов, используемых матерями и медсестрами, для идентификации колик у младенца" Int. J. Nursing Studies vol. 31, №2 (1994) 201-215 [XP022870583] рассматриваются способы, по которым родители предполагают идентифицировать колики с различными факторами, включающими пищевое поведение, тревожность матери, пищу ребенка и матери и стресс ребенка. Вмешательство не раскрывается.

В заявке США 2011/208153 описаны составы и способы доставки водорастворимых и липидорастворимых питательных веществ для профилактики или коррекции недостатка питательных веществ у субъектов, нуждающихся в обеспечении питательными веществами при малом объеме, таких как недоношенные дети. Питательная композиция, содержащая жирные кислоты, такие как DHA и/или ARA, аминокислоты, такие как аргинин и глутамин, и других питательные вещества, подходит для доставки через назогастральный зонд, внутрижелудочного кормления и транспилорического введения. Среди многих других компонентов пребиотики упоминаются только в качестве дополнительного ингредиента. B. breve не упоминается среди различных ингредиентов, и согласно описанию предпосылок, глутамин может быть ингредиентом в качестве основного топлива для быстро делящихся клеток, таких как кишечные энтероциты и лимфоциты.

В работе De Kieviet и др. "Влияние глутамина на развитие мозга у сильно недоношенных детей в школьном возрасте", Pediatrics vol. 130, №5 (2012) 1121-1127 [SP009168039] изучается эффект краткосрочного введения глутамина сильно недоношенным детям в первый месяц после рождения на развитие головного мозга в дальнейшей жизни, в школьном возрасте. О подобном исследовании сообщается в работе De Kieviet и др. "Эффекты энтерального снабжения глутамином новорожденных сильно недоношенных детей и/или детей с очень низкой массой при рождении на когнитивные, двигательные и поведенческие результаты в школьном возрасте" British J. Nutrition, vol. 108, №12 (2012) 2215-2220. На основании результатов применяемых поведенческих тестов сделан вывод, что добавка глутамина между 3 и 30 днями жизни сильно недоношенных и/или VLBW-детей не оказывает ни полезных, ни вредных эффектов на долгосрочные когнитивные, двигательные и поведенческие результаты в школьном возрасте, хотя визиомотрные способности хуже, у детей, которые получают глутамин.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Заявители неожиданно обнаружили, что при использовании животных моделей пищевая добавка с Bifidobacterium breve в комбинации с неусваиваемыми олигосахаридами, предпочтительно также в сочетании с глутамином, дает в результате улучшенные когнитивные и поведенческие характеристики. В частности, обнаружено, что снижаются уровни беспокойства и улучшается пространственная память. В предпочтительном варианте осуществления, в частности, сильно и/или в значительной степени улучшается пространственная память. В другом предпочтительном варианте осуществления также сильно и/или в значительной степени улучшается социальное взаимодействие.

Кроме того, заявители обнаружили, что мыши, сенсибилизированные к овальбумину (OVA) в качестве модели пищевой аллергии или атопии, мыши, ранее подвергшиеся воздействию аллергена, демонстрируют более высокие уровни тревоги и нарушение пространственной памяти по сравнению с контрольными мышами, хотя в момент тестирования не применяется воздействие аллергена. Кроме того, экспрессия матричной РНК (мРНК) нейротрофического фактора головного мозга (BDNF) и p-гликопротеина в гиппокампе повышается у мышей, предварительно подвергаемых действию аллергена. FACS-анализ гомогенизированных клеток гиппокампа этих животных выявляет повышение OVA-индуцированных CD11c⁺F4/80⁺CD68^- макрофагов. Повышенные уровни макрофагов, наблюдаемые в головном мозге OVA-аллергических мышей, происходят в результате циркуляции, что в комбинации с наблюдаемым снижением гематоэнцефалического барьера подразумевает роль приносимых с периферии моноцитов в индуцировании снижения функции головного мозга, наблюдаемого у аллергических мышей. Имеющиеся данные показывают, что зависимое от аллергии или атопии периферическое воспаление модифицирует воспалительный статус и гасит когнитивные способности животных, указывая, что аллергия играет некоторую роль в развитии и/или прогрессировании неврологических расстройств, таких как когнитивные и поведенческие нарушения и нейровоспаление. Таким образом, насколько известно заявителям, впервые было показано, что субъекты, страдающие от аллергии или атопии, имеют симптомы, аналогичные нарушению оси кишечник-головной мозг.

Обнаружено, что OVA-индуцированные аберрантные когнитивные, поведенческие и молекулярные изменения возвращаются к уровням, наблюдаемым у неаллергических контрольных мышей, при добавке к пище Bifidobacterium breve в комбинации с неусваиваемыми олигосахаридами (синбиотиками), показывая, что у аллергических мышей это диетическое вмешательство приводит к еще более заметному улучшению когнитивных и поведенческих характеристик. Кроме того, повышенное количество OVA-индуцированных CD11c⁺F4/80⁺CD68^- макрофагов уменьшается при лечении синбиотиком. Лечение синбиотиком дает повышенный уровень клеток CD11bCD68⁺F4/80^low.

Используя мышиную модель с декстрансульфатом натрия (DSS) для индуцирования воспаления кишечника, обнаружили, что DSS-обработанные мыши демонстрируют более высокие уровни беспокойства и нарушения пространственной памяти, тогда как двигательная активность не затрагивается. Воздействие синбиотиков ослабляет эти эффекты в значительно большей степени, чем можно было бы ожидать, основываясь на противовоспалительном эффекте одних синбиотиков. Более того, данные показывают, что композиция синбиотиков является более эффективной, чем отдельно используемые B. breve или неусваиваемые олигосахариды.

Поэтому использование B. breve вместе с неусваиваемыми олигосахаридами особенно подходит для улучшения когнитивных и поведенческих характеристик у младенцев и маленьких детей, в частности, у младенцев в возрасте 6 месяцев или менее, недоношенных детей, маленьких для гестационного возраста (SGA) младенцев, младенцев, родившихся с помощью кесарева сечения, младенцев и детей младшего возраста, страдающих или находящихся под риском аллергии, и младенцев и маленьких детей, страдающих от воспаления кишечника.

Кроме того, заявители обнаружили, что модель аллергии на коровье молоко (СМА) связана с нарушением социального взаимодействия и нарушением пространственной памяти, мыши, ранее сенсибилизированные к белку молочной сыворотки, демонстрируют меньшее социальное взаимодействие и худшую пространственную память по сравнению с неаллергическими контрольными мышами. Эти наблюдения подчеркивают эффекты аллергии на когнитивные и поведенческие характеристики, как рассмотрено в указанных выше моделях. У мышей, которым дополнительно давали Bifidobacterium breve, неусваиваемые олигосахариды (синбиотики) и глутамин, уровни социального взаимодействия и альтерационной или пространственной памяти улучшаются до уровней, сравнимых с данными для неаллергических мышей. Поэтому использование B. breve вместе с неусваиваемыми олигосахаридами и глутамином особенно подходит для улучшения когнитивных и поведенческих характеристик, особенно для улучшения пространственной памяти и/или социального взаимодействия у младенцев и детей младшего возраста, в частности, у детей в возрасте 6 месяцев или менее, недоношенных младенцев, маленьких для гестационного возраста (SGA) младенцев, младенцев, родившихся с помощью кесарева сечения, младенцев и детей младшего возраста, страдающих или находящихся под риском аллергии, и младенцев и маленьких детей, страдающих от воспаления кишечника.

Здесь также представлены интересные данные, которые показывают, что добавление в корм обычных неаллергических мышей питательных добавок, содержащих Bifidobacterium breve, неусваиваемые олигосахариды (синбиотики) с глутамином или без оного, приводит к улучшению социального взаимодействия, и что добавка в корм Bifidobacterium breve, неперевариваемых олигосахаридов (синбиотиков) и глутамина приводит к значительному улучшению характеристик пространственной памяти.

Настоящее изобретение также касается набора компонентов, пригодного для кормления недоношенных младенцев, содержащего или состоящего из двух, трех, четырех или пяти различных контейнеров и инструкций по применению, это означает, что указанный набор компонентов содержит или состоит из первого контейнера, содержащего глутамин, фруктоолигосахариды (FOS) и галактоолигосахариды (GOS), и второго контейнера, содержащего Bifidobacterium breve. Предпочтительно указанный набор компонентов включает также один или более дополнительных контейнеров, содержащих белковую добавку, обогатитель грудного молока и/или смесь для недоношенных младенцев. Комплект предпочтительно включает инструкции по применению набора компонентов для кормления недоношенных младенцев.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Таким образом, настоящее изобретение касается способа улучшения когнитивных функций, когнитивного развития, поведенческих характеристик, поведенческого развития и/или социального взаимодействия младенца или ребенка, начинающего ходить, включающего введение младенцу или ребенку, начинающему ходить, питательной композиции, содержащей Bifidobacterium breve и содержащей по меньшей мере один неусваиваемый олигосахарид, выбранный из группы, включающей фруктоолигосахариды, галактоолигосахариды, глюкоолигосахариды, арабиноолигосахариды, маннанолигосахариды, ксилоолигосахариды, фукоолигосахариды, арабиногалактоолигосахариды, глюкоманноолигосахариды, галактоманноолигосахариды, олигосахариды, содержащие сиаловую кислоту, и олигосахариды уроновой кислоты.

Изобретение также можно сформулировать как применение Bifidobacterium breve и по меньшей мере одного неусваиваемого олигосахарида, выбранного из группы, включающей фруктоолигосахариды, галактоолигосахариды, глюкоолигосахариды, арабиноолигосахариды, маннанолигосахариды, ксилоолигосахариды, фукоолигосахариды, арабиногалактоолигосахариды, глюкоманноолигосахариды, галактоманноолигосахариды, олигосахариды, содержащие сиаловую кислоту, и олигосахариды уроновой кислоты, или композиции, содержащей Bifidobacterium breve и по меньшей мере один неусваиваемый олигосахарид, для изготовления питательной композиции для улучшения когнитивных функций, когнитивного развития, поведенческих характеристик, поведенческого развития и/или социального взаимодействия младенца или ребенка, начинающего ходить. В одном аспекте изобретение, в частности, касается улучшения когнитивных функций, предпочтительно включающих характеристики памяти, предпочтительно характеристики пространственной памяти. Также изобретение, в частности, касается улучшения социального взаимодействия.

Изобретение также можно сформулировать следующим образом: питательная композиция, содержащая Bifidobacterium breve и содержащая по меньшей мере один неусваиваемый олигосахарид, выбранный из группы, включающей фруктоолигосахариды, галактоолигосахариды, глюкоолигосахариды, олигосахариды, арабиноманнанолигосахариды, ксилоолигосахариды, фукоолигосахариды, арабиногалактоолигосахариды, глюкоманноолигосахариды, галактоманноолигосахариды, олигосахариды, содержащие сиаловую кислоту, и олигосахариды уроновой кислоты, для применения с целью улучшения когнитивных функций, когнитивного развития, поведенческих характеристик, поведенческого развития и/или социального взаимодействия младенца или ребенка, начинающего ходить. В одном аспекте изобретение, в частности, касается улучшения когнитивных функций, предпочтительно включающих характеристики памяти, предпочтительно характеристики пространственной памяти. Также изобретение, в частности, касается улучшения социального взаимодействия.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего способа или применения младенец или ребенок, начинающий ходить, выбран из группы, включающей младенцев в возрасте 6 месяцев или менее, недоношенных младенцев, маленьких для гестационного возраста (SGA) младенцев, детей, родившихся с помощью кесарева сечения, младенцев или детей, начинающих ходить, страдающих от аллергии, или младенцев или детей, начинающих ходить, подверженных риску аллергии, и младенцев или детей, начинающих ходить, страдающих от воспаления кишечника. Предпочтительным является вариант осуществления настоящего способа или применения для обеспечения питания младенца или ребенка, начинающего ходить.

Изобретение также касается способа лечения или предупреждения ухудшенных когнитивных функций, пониженного когнитивного развития, ухудшенных поведенческих характеристик, пониженного поведенческого развития, пониженного социального взаимодействия и/или нейровоспаления, предпочтительно ухудшенных когнитивных функций, предпочтительно пониженных характеристик памяти, предпочтительно пониженных характеристик пространственной памяти и предпочтительно пониженного социального взаимодействия у младенца или ребенка, начинающего ходить, выбранного из группы, включающей младенцев или детей, начинающих ходить, страдающих от аллергии, младенцев или детей, начинающих ходить, находящихся под риском аллергии, младенцев или детей, начинающих ходить, страдающих от воспаления кишечника, и недоношенных младенцев, причем указанный способ включает введение младенцу или ребенку, начинающему ходить, питательной композиции, содержащей Bifidobacterium breve и содержащей по меньшей мере один неусваиваемый олигосахарид, выбранный из группы, включающей фруктоолигосахариды, галактоолигосахариды, глюкоолигосахариды, арабиноолигосахариды, маннанолигосахариды, ксилоолигосахариды, фукоолигосахариды, арабиногалактоолигосахариды, глюкоманноолигосахариды, галактоманноолигосахариды, олигосахариды, содержащие сиаловую кислоту, и олигосахариды уроновой кислоты.

Изобретение также можно сформулировать как применение Bifidobacterium breve и по меньшей мере одного неусваиваемого олигосахарида, выбранного из группы, включающей фруктоолигосахариды, галактоолигосахариды, глюкоолигосахариды, арабиноолигосахариды, маннанолигосахариды, ксилоолигосахариды, фукоолигосахариды, арабиногалактоолигосахариды, глюкоманноолигосахариды, галактоманноолигосахариды, олигосахариды, содержащие сиаловую кислоту, и олигосахариды уроновой кислоты, или композицию, содержащую Bifidobacterium breve и по меньшей мере один неусваиваемый олигосахарид, для изготовления питательной композиции для лечения или предупреждения ухудшенных когнитивных функций, пониженного когнитивного развития, ухудшенных поведенческих характеристик, пониженного поведенческого развития, пониженного социального взаимодействия и/или нейровоспаления, предпочтительно ухудшенных когнитивных функций, предпочтительно пониженных характеристик памяти, предпочтительно пониженных характеристик пространственной памяти и предпочтительно пониженного социального взаимодействия у младенца или ребенка, начинающего ходить, выбранного из группы, включающей младенцев в возрасте 6 месяцев и менее, недоношенных младенцев, маленьких для гестационного возраста (SGA) младенцев, младенцев, родившихся с помощью кесарева сечения, младенцев или детей, начинающих ходить, страдающих от аллергии или младенцев или детей, начинающих ходить, находящихся под риском аллергии, или младенцев или детей, начинающих ходить, страдающих от воспаления кишечника.

Изобретение также можно сформулировать следующим образом: питательная композиция, содержащая Bifidobacterium breve и содержащая по меньшей мере один неусваиваемый олигосахарид, выбранный из группы, включающей фруктоолигосахариды, галактоолигосахариды, глюкоолигосахариды, олигосахариды, арабиноманнанолигосахариды, ксилоолигосахариды, фукоолигосахариды, арабиногалактоолигосахариды, глюкоманноолигосахариды, галактоманноолигосахариды, олигосахариды, содержащие сиаловую кислоту, и олигосахариды уроновой кислоты для применения с целью лечения или предупреждения ухудшенных когнитивных функций, пониженного когнитивного развития, ухудшенных поведенческих характеристик, пониженного поведенческого развития, пониженного социального взаимодействия и/или нейровоспаления, предпочтительно ухудшенных когнитивных функций, предпочтительно пониженных характеристик памяти, предпочтительно пониженных характеристик пространственной памяти и предпочтительно пониженного социального взаимодействия у младенца или ребенка, начинающего ходить, выбранного из группы, включающей младенцев в возрасте 6 месяцев или менее, недоношенных младенцев, маленьких для гестационного возраста (SGA) младенцев, младенцев, родившихся с помощью кесарева сечения, младенцев или детей, начинающих ходить, страдающих от аллергии, или младенцев или детей, начинающих ходить, находящихся под риском аллергии, и младенцев или детей, начинающих ходить, страдающих от воспаления кишечника.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего способа или применения для обеспечения питания младенца или ребенка, начинающего ходить, выбранного из группы, включающей младенцев в возрасте 6 месяцев или менее, недоношенных младенцев, маленьких для гестационного возраста (SGA) младенцев, младенцев, родившихся с помощью кесарева сечения, младенцев или детей, начинающих ходить, страдающих от аллергии, или младенцев или детей, начинающих ходить, находящихся под риском аллергии, и младенцев или детей, начинающих ходить, страдающих от воспаления кишечника.

Изобретение также касается способа кормления или способа обеспечения питания младенца или ребенка, начинающего ходить, выбранного из группы, включающей младенцев в возрасте 6 месяцев или менее, недоношенных младенцев, маленьких для гестационного возраста (SGA) младенцев, младенцев, родившихся с помощью кесарева сечения, младенцев или детей, начинающих ходить, страдающих от аллергии, младенцев или детей, начинающих ходить, находящихся под риском аллергии, и младенцев или детей, начинающих ходить, страдающих от воспаления кишечника, включающего введение питательной композиции, содержащей а) Bifidobacterium breve, b) по меньшей мере один неусваиваемый олигосахарид, выбранный из группы, включающей фруктоолигосахариды, галактоолигосахариды, глюкоолигосахариды, арабиноолигосахариды, маннанолигосахариды, ксилоолигосахариды, фукоолигосахариды, арабиногалактоолигосахариды, глюкоманноолигосахариды, галактоманноолигосахариды, олигосахариды, содержащие сиаловую кислоту, и олигосахариды уроновой кислоты, c) глутамин в виде свободной аминокислоты, и/или глутаминсодержащего дипептида, и/или глутаминсодержащего трипептида, и предпочтительно d) LC-PUFA в виде или арахидоновой кислоты, и/или докозагексаеновой кислоты.

Другими словами, изобретение касается применения питательной композиции, содержащей a) Bifidobacterium breve, b) по меньшей мере один неусваиваемый олигосахарид, выбранный из группы, включающей фруктоолигосахариды, галактоолигосахариды, глюкоолигосахариды, арабиноолигосахариды, маннанолигосахариды, ксилоолигосахариды, фукоолигосахариды, арабиногалактоолигосахариды, глюкоманноолигосахариды, галактоманноолигосахариды, олигосахариды, содержащие сиаловую кислоту, и олигосахариды уроновой кислоты, c) глутамин в виде свободной аминокислоты, и/или глутаминсодержащего дипептида, и/или глутаминсодержащего трипептида, и d) LC-PUFA в виде или арахидоновой кислоты, и/или докозагексаеновой кислоты, для обеспечения питания младенца или ребенка, начинающего ходить, выбранного из группы, включающей младенцев в возрасте 6 месяцев или менее, недоношенных младенцев, маленьких для гестационного возраста (SGA) младенцев, младенцев, родившихся с помощью кесарева сечения, младенцев или детей, начинающих ходить, страдающих от аллергии, или младенцев или детей, начинающих ходить, находящихся под риском аллергии, и младенцев или детей, начинающих ходить, страдающих от воспаления кишечника.

Изобретение также можно сформулировать следующим образом: питательная композиция, содержащая a) Bifidobacterium breve, b) по меньшей мере один неусваиваемый олигосахарид, выбранный из группы, включающей фруктоолигосахариды, галактоолигосахариды, глюкоолигосахариды, арабиноолигосахариды, маннанолигосахариды, ксилоолигосахариды, фукоолигосахариды, арабиногалактоолигосахариды, глюкоманноолигосахариды, галактоманноолигосахариды, олигосахариды, содержащие сиаловую кислоту, и олигосахариды уроновой кислоты, c) глутамин в виде свободной аминокислоты, и/или глутаминсодержащего дипептида, и/или глутаминсодержащего трипептида, и d) LC-PUFA в виде или арахидоновой кислоты, и/или докозагексаеновой кислоты, для применения с целью обеспечения питания младенца или ребенка, начинающего ходить, выбранного из группы, включающей младенцев в возрасте 6 месяцев или менее, недоношенных младенцев, маленьких для гестационного возраста (SGA) младенцев, младенцев, родившихся с помощью кесарева сечения, младенцев или детей, начинающих ходить, страдающих от аллергии, или младенцев или детей, начинающих ходить, находящихся под риском аллергии, и младенцев или детей, начинающих ходить, страдающих от воспаления кишечника.

Предпочтительно композиция включает:

а) Bifidobacterium breve в количестве от 10² до 10¹³ КОЕ на г сухой массы питательной композиции;

b) по меньшей мере один неусваиваемой олигосахарид, выбранный из группы, включающей фруктоолигосахариды, галактоолигосахариды, в количестве от 0,5 до 20% масс. в расчете на сухую массу питательной композиции;

c) глутамин в виде свободной аминокислоты, и/или глутаминсодержащего дипептида, и/или глутаминсодержащего трипептида в количестве по меньшей мере 1,5% масс. в расчете на сухую массу питательной композиции; и предпочтительно,

d) LC-PUFA в виде или арахидоновой кислоты, и/или докозагексаеновой кислоты.

Также изобретение касается питательной композиции, содержащей белок, жир и усваиваемые углеводы и дополнительно содержащей:

a) Bifidobacterium breve в количестве от 10² до 10¹³ КОЕ на г сухой массы питательной композиции;

b) по меньшей мере один неусваиваемый олигосахарид, выбранный из группы, включающей фруктоолигосахариды, галактоолигосахариды, в количестве от 0,5 до 20% масс. в расчете на сухую массу питательной композиции;

c) глутамин в виде свободной аминокислоты, и/или глутаминсодержащего дипептида, и/или глутаминсодержащего трипептида в количестве по меньшей мере 1,5% масс. в расчете на сухую массу питательной композиции; и предпочтительно

d) LC-PUFA в виде или арахидоновой кислоты, и/или докозагексаеновой кислоты.

Bifidobacterium breve

Настоящая композиция содержит Bifidobacterium breve. Bifidobacterium breve представляет собой грамположительную, анаэробную, разветвленную палочковидную бактерию. B.breve предпочтительно имеет по меньшей мере 95% идентичность последовательности 16S рРНК при сравнении с типовым штаммом B. breve ATCC 15700, более предпочтительно по меньшей мере 97% идентичность (Stackebrandt & Goebel, 1994, Int. J. Syst. Bacteriol 44: 846-849). Предпочтительными являются штаммы B. breve, выделенные из фекалий здоровых младенцев, находящихся на грудном вскармливании. Как правило, они коммерчески доступны от производителей молочнокислых бактерий, но их также можно выделить непосредственно из фекалий, идентифицировать, охарактеризовать и получить. Согласно предпочтительному варианту осуществления настоящая композиция содержит по меньшей мере один штамм B. breve, выбранный из группы, включающей B. breve Bb-03 (Rhodia/Danisco), B. breve М-16V (Morinaga), B. breve R0070 (Institute Rosell, Lallemand), B. breve BR03 (Probiotical), B. breve BR92) (Cell Biotech), DSM 20091, LMG 11613, YIT4065, FERM BP-6223 и CNCM 1-2219. Наиболее предпочтительно, если B. breve выбран из группы, включающей B. breve M-16V и B. breve CNCM 1-2219, наиболее предпочтительно М-16В. B. breve 1-2219 опубликован в WO 2004/093899 и депонирован в Collection Nationale de Cultures de Microorganisms, institute Pasteur, Paris, France 31 мая 1999 компанией Compagnie Gervais Danone. B. breve M-16V депонирован как BCCM/LMG23729 и доступен коммерчески от Morinaga Milk Industry Co., Ltd.

Настоящая композиция предпочтительно содержит от 10² до 10¹³ колониеобразующих единиц (КОЕ) B. breve на г сухой массы данной композиции, предпочтительно от 10⁴ до 10¹², более предпочтительно от 10⁵ до 10¹⁰, наиболее предпочтительно от 10⁵ до 10⁸ КОЕ B. breve на г сухой массы настоящей композиции. B. breve по настоящему изобретению предпочтительно вводят при суточной дозе от 10² до 10¹³, более предпочтительно от 10⁵ до 10¹², наиболее предпочтительно от 10⁷ до 5×10⁹ колониеобразующих единиц (КОЕ). Предпочтительно композиция содержит от 10³ до 10¹³ КОЕ B. breve на 100 мл, более предпочтительно от 10⁶ до 10¹¹ КОЕ B. breve на 100 мл, наиболее предпочтительно от 10⁷ до 10⁹ КОЕ В. breve на 100 мл.

Настоящая композиция предпочтительно содержит жизнеспособные B. breve. Альтернативно, настоящая композиция предпочтительно содержит нежизнеспособные B. breve в количестве, эквивалентном описанному выше количеству КОЕ. Эквивалент КОЕ можно определить, выполняя 5'нуклеазный анализ с пробами B. breve и праймерами, как раскрыто в WO 2005/039319, в продукте (например, смеси для младенцев), содержащем нежизнеспособные B. Breve, и сравнивая его с калибровочной кривой, полученной для сопоставимого продукта (например, стандартной детской смеси), к которому добавлены известные количества КОЕ жизнеспособных, предпочтительно высушенных B. breve. Высушенные жизнеспособные бифидобактерии можно получить коммерчески, как описано выше. Клетки B. breve можно сделать нежизнеспособными, применяя способы, известные в данной области, в том числе стадии термообработки (включая стерилизацию, пастеризацию, СВТ-обработку), облучение (УФ), обработку кислородом, обработку бактерицидными агентами, такими как этанол, обработку ультразвуком, применение сверхвысокого давления, гомогенизацию при высоком давлении и применение клеточного дезинтегратора. Предпочтительны B. Breve, убитые термически. Присутствие нежизнеспособных B. breve благоприятным образом обеспечивает много технологических преимуществ продуктов, в том числе увеличение срока годности, снижение случаев бактериального заражения, снижение последующего скисания продукта, улучшенный контроль дозировки и повышенное удобство восстановления. Потребление инактивированных B. breve также демонстрирует благоприятные эффекты по снижению аллергии и воспаления.

Неусваиваемые олигосахариды

Настоящая композиция содержит неусваиваемые олигосахариды (NDO). Используемый в настоящем изобретении термин "олигосахарид" предпочтительно касается сахарида со степенью полимеризации (DP) от 2 до 250, предпочтительно от 2 до 100, более предпочтительно от 2 до 60. Понятно, что в контексте настоящего изобретения сахарид с DP в определенном диапазоне может включать смесь сахаридов с различными средними DP, например, если в настоящую композицию включен олигосахарид с DP от 2 до 100, то он может включать композиции, которые содержат олигосахариды со средней DP от 2 до 5, средней DP от 50 до 70 и средней DP от 7 до 60. Используемое в настоящем изобретении выражение "неусваиваемый олигосахарид" касается олигосахаридов, которые не перевариваются или только частично перевариваются в кишечнике под действием кислот или пищеварительных ферментов, присутствующих в верхней части пищеварительного тракта человека (тонкий кишечник и желудок), но которые ферментируются кишечной флорой человека. Например, сахароза, лактоза, мальтоза и мальтодекстрины считаются усваиваемыми. Например, галактоолигосахариды, фруктоолигосахариды считаются неусваиваемыми олигосахаридами.

Неусваиваемый олигосахарид выбран из группы, включающей фруктоолигосахариды (например, инулин), галактоолигосахариды (например, трансгалактоолигосахариды или бета-галактоолигосахариды), глюкоолигосахариды (например, гентио-, нигеро- и циклодекстрин-олигосахариды), арабиноолигосахариды, маннанолигосахариды, ксилоолигосахариды, фукоолигосахариды, арабиногалактоолигосахариды, глюкоманноолигосахариды галактоманноолигосахариды, олигосахариды, содержащие сиаловую кислоту, и олигосахариды уроновой кислоты. В одном варианте осуществления настоящая питательная композиция содержит от 0,5 до 20% масс. неусваиваемых олигосахаридов на г сухой массы питательной композиции.

Предпочтительно настоящая композиция содержит фруктоолигосахариды и/или галактоолигосахариды, более предпочтительно галактоолигосахариды, наиболее предпочтительно трансгалактоолигосахариды. В предпочтительном варианте осуществления композиция содержит смесь трансгалактоолигосахаридов и фруктоолигосахаридов. Предпочтительно настоящая композиция включает галактоолигосахариды с DP 2-10, предпочтительно со средней DP от 2 до 10 и/или фруктоолигосахариды с DP 2-60, предпочтительно со средней DP от 2 до 60, предпочтительно со средней DP от 10 до 60, предпочтительно со средней DP от 20 до 60. В одном варианте осуществления настоящая композиция содержит галактоолигосахариды с DP 2-10, предпочтительно со средней DP от 2 до 10 и/или фруктоолигосахариды с DP 2-10, предпочтительно со средней DP от 2 до 10. Предпочтительно композиция содержит галактоолигосахариды и фруктоолигосахариды при массовом соотношении от 20 до 0,5, более предпочтительно от 20 до 1, наиболее предпочтительно от 12 до 2.

Галактоолигосахариды предпочтительно выбраны из группы, включающей трансгалактоолигосахариды, лакто-N-тетраозу (LNT), лакто-N-неотетраозу (нео-LNT), фукозиллактозу, фукозилированную LNT и фукозилированную нео-LNT. В особо предпочтительном варианте осуществления настоящий способ включает введение трансгалактоолигосахаридов ([галактоза]_n-глюкоза, где n равно целому числу от 1 до 60, т.е. 2, 3, 4, 5, 6, …, 59, 60, предпочтительно n выбрано из 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10). Трансгалактоолигосахариды (TOS) продаются, например, под торговой маркой Vivinal™ (Borculo Domo Ingredients, Netherlands). Предпочтительно трансгалактоолигосахариды являются β-связанными.

В одном варианте осуществления настоящая композиция предпочтительно содержит фруктоолигосахарид. Используемый здесь термин "фруктоолигосахарид" касается неусваиваемого полисахарида, содержащего цепочку по меньшей мере из 2 β-связанных звеньев фруктозы с DP от 2 до 250, предпочтительно от 7 до 100, более предпочтительно от 20 до 60. В одном из вариантов осуществления предпочтительно используют инулин. Инулин доступен, например, под торговой маркой "Raftilin HP^®"(Orafti). Средняя DP настоящего фруктоолигосахарида предпочтительно составляет по меньшей мере 7, более предпочтительно по меньшей мере 10, предпочтительно менее 100. Используемый фруктоолигосахарид предпочтительно имеет (большинство) звенья фруктозы, связанные β-связями (2→1). Другие термины для фруктоолигосахаридов включают инулин, фруктополисахарид, полифруктозу, фруктаны и олигофруктозу. Настоящая композиция предпочтительно содержит фруктоолигосахариды с DP от 2 до 200, предпочтительно от 7 до 100, более предпочтительно от 20 до 60. В одном варианте осуществления настоящая питательная композиция предпочтительно содержит две различных фракции фруктоолигосахаридов: одну фракцию со средней DP от 2 до 20 и вторую фракцию со средней DP от 20 до 60 или одну фракцию со средней DP от 2 до 10 и вторую фракцию со средней DP от 10 до 60.

Предпочтительно композиция содержит от 80 мг до 2 г неусваиваемых олигосахаридов на 100 мл, более предпочтительно от 150 мг до 1,50 г, еще более предпочтительно от 300 мг до 1 г на 100 мл. В расчете на сухую массу композиция предпочтительно содержит от 0,25% масс. до 20% масс., более предпочтительно от 0,5% масс. до 10% масс., еще более предпочтительно от 1,5% масс. до 7,5% масс. неусваиваемых олигосахаридов. Предпочтительно композиция содержит от 10² до 10¹³ КОЕ B. breve на грамм и от 0,25% масс. до 20% масс. неусваи