Антагонисты alk1 и их применение в лечении почечно-клеточной карциномы

Антагонисты alk1 и их применение в лечении почечно-клеточной карциномы

Иллюстрации

Показать все

Реферат

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

[0001] На почечно-клеточную карциному (ПКК) приходится более 90% всех случаев злокачественных опухолей почек. Данный тип рака занимает восьмое место среди наиболее часто диагностируемых типов рака у мужчин и женщин в США. По оценке Национального института рака США в 2012 году в США будет диагностировано приблизительно 65000 новых случаев рака почек, и рак почек станет причиной приблизительно 13600 смертей. По всему миру каждый год диагностируют более 200000 новых случаев и более 100000 смертей по причине ПКК. По всему миру увеличиваются как частота возникновения, так и смертность от ПКК.

[0002] ПКК часто может быть вылечен путем хирургического удаления опухоли или почки, если рак диагностировали и приступили к его лечению, когда он еще локализован в почке или в непосредственно прилежащей ткани. Однако по мере того как рак становится васкуляризованным и метастазирует в отдаленные области тела вероятность выживания без болезни значительно снижается. Треть случаев ПКК представляет собой метастазирующее заболевание со значением пятилетней выживаемости менее 10%.

[0003] Метастазирующий ПКК (мПКК) исторически нечувствителен к химиотерапии и гормональной терапии, и до очень недавнего времени его системное лечение было ограничено неспецифической иммунной цитокиновой терапией интерлейкином-2 (ИЛ-2) или интерфероном альфа (ИФН α). Данные варианты терапии сопровождаются низкой степенью ответа и высокой степенью токсичности.

[0004] Исследования, проведенные в течение последнего десятилетия, позволили выявить генетические факторы, связанные с онкогенезом ПКК и прогрессированием заболевания. В частности, было установлено, что нарушение передачи сигналов в путях передачи сигналов с участием фактора роста эндотелия сосудов (VEGF), фактора роста тромбоцитов (PDGF) и AKT/mTOR (мишень рапамицина у млекопитающих) как внутри опухолевых клеток, так и между опухолевыми клетками и окружающей тканью (например, резидентными эндотелиальными клетками и перицитами), играет решающую роль в поддержании васкуляризации ПКК, жизнестойкости клеток и пролиферации опухоли. Обнаружение связи нарушений в данных путях передачи сигналов и ПКК в свою очередь привело к разработке целого ряда вариантов терапии, направленных на ключевые этапы путей передачи сигналов с участием VEGF, PDGF и mTOR. В частности, с 2005 года FDA были одобрены пять агентов, нацеленных на пути передачи сигналов с участием VEGF и PDGF (т.е. сорафениб, сунитиниб, бевацизумаб, пазопаниб и акситиниб), и два варианта терапии, направленной на путь передачи сигналов с участием mTOR (т.е. темсиролимус и эверолимус), для применения в прогрессирующей ПКК.

[0005] За исключением бевацизумаба (который представляет собой гуманизированное антитело, связывающееся с VEGF, общеизвестное как АВАСТИН®), одобренные варианты терапии ПКК, мишенями которых являются пути передачи сигналов с участием VEGF, представляют собой низкомолекулярные ингибирующие соединения-миметики АТФ. Данные низкомолекулярные ингибиторы действуют путем связывания с высококонсервативным АТФ-связывающим каталитическим участком рецепторных тирозинкиназ, таких как VEGFR1, VEGFR2 и VEGFR3, и за счет этого блокируют внутриклеточную передачу сигналов от связанного рецептора. Однако отчасти вследствие высококонсервативной структуры АТФ-связывающего каталитического участка протеинкиназ большинство низкомолекулярных ингибиторов рецепторных киназ также связывается и ингибирует отличные нецелевые рецепторные тирозинкиназы, а иногда и киназы, относящиеся к другим семействам. Подобное «нецелевое» действие ингибиторов рецепторной тирозинкиназы часто приводит к возникновению побочных действий и токсичности, что ограничивает терапевтическое применение и/или эффективность лекарственного препарата.

[0006] Сунитиниб (общеизвестный как СУТЕНТ®) представляет собой ингибитор рецепторных тирозинкиназ, имеющий много мишеней, который первоначально был разработан как низкомолекулярный ингибитор рецепторной тирозинкиназы c-Met. Помимо c-Met, сунитиниб конкурентно ингибирует активность рецепторных тирозинкиназ VEGFR1, VEGFR2, VEGFR3, PDGFRa, PDGFRb, flt-3, с KIT (CD117), RET и CSF-1R. Сунитиниб был одобрен в качестве терапии первой линии для лечения прогрессирующей ПКК после завершения базовых клинических исследований, продемонстрировавших, что сунитиниб вызывает увеличение общей выживаемости у пациентов с прогрессирующим заболеванием приблизительно на пять месяцев по сравнению с интерфероном альфа (26,4 месяцев по сравнению с 21,8 месяцев). Благодаря данному, хотя и небольшому, улучшению выживаемости пациента сунитиниб стал новым стандартом лечения для пациентов с прогрессирующим ПКК, не получавших лекарственной терапии. Терапия сунитинибом связана со значительными побочными действиями, что подтверждается необходимостью уменьшения размера дозы у 50% пациентов с ПКК для уменьшения значительного токсического действия, связанного с сунитинибом.

[0007] Несмотря на недавние достижения в терапии ПКК, остается значительная неудовлетворенная потребность в эффективных вариантах терапии. Доступные в настоящий момент варианты терапии дают пациентам менее одного года выживаемости без прогрессирования заболевания и связаны со значительным токсическим действием. Более того, адаптация опухоли к лечению часто приводит к прерыванию лечения и к ускоренному росту опухоли.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0008] В настоящем изобретении предложены антагонисты регуляторной системы активинподобной киназы I (ALK1) и применение таких антагонистов для лечения почечно-клеточной карциномы (ПКК). Согласно конкретным аспектам настоящего изобретения ПКК представляет собой светлоклеточную почечно-клеточную карциному. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения ПКК представляет собой заболевание стадии III по классификации TNM (классификация по принципу Опухоль/Лимфатический узел/Метастазы, Tumor/Mode/Metastasis). Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения ПКК представляет собой заболевание стадии IV по классификации TNM. Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения ПКК обнаружена во внутрипочечных венах. Согласно другим аспектам настоящего изобретения ПКК инвазировал почечный синус. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения ПКК метастазировала в надпочечники или в лимфатический узел. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения ПКК метастазировала в легкие, внутрибрюшные лимфатические узлы, кость, головной мозг или печень.

[0009] Как описано в настоящей заявке, ALK1 представляет собой рецептор для группы лигандов GDF5 (фактор роста и дифференцировки 5), которая включает GDF6 и GDF7, а также для группы лигандов ВМР9 (морфогенетический белок кости 5), которая включает BMP10. В настоящем тексте продемонстрировано, что передача сигналов, опосредуемая ALK1 и лигандами, описанными выше, вовлечена в ангиогенез in vivo, и что ингибирование данной регуляторной системы обладает потенциальным антиангиогенным действием.

[0010] В настоящем тексте также продемонстрировано, что применение антагонистов регуляторной системы ALK1, таких как слитые белки ALK1-Fc, ингибирует рост опухоли в моделях на животных с ксенотрансплантатами ПКК человека. В настоящем тексте также продемонстрировано, что слитый белок ALK1-Fc, антагонист ALK1, при введении в комбинации с сунитинибом вызывает значительное увеличение активности сунитиниба (ингибитора рецепторной тирозинкиназы VEGF) по ингибированию роста опухоли в моделях на животных с ксенотрансплантатами ПКК человека. Таким образом, согласно некоторым аспектам в настоящем изобретении предложены антагонисты регуляторной системы ALK1, в том числе антагонисты рецептора ALK1 или одного или нескольких лигандов ALK1, для применения в лечении почечно-клеточной карциномы. Согласно конкретным аспектам настоящего изобретения антагонист ALK1 представляет собой слитый белок ALK1-Fc (например, слитый белок ALK1-Fc, описанный в настоящей заявке). Согласно некоторым аспектам в настоящем изобретении предложены антагонисты регуляторной системы ALK1, в том числе антагонисты рецептора ALK1 или одного или нескольких лигандов ALK1, для применения в лечении почечно-клеточной карциномы. Согласно конкретным аспектам настоящего изобретения почечно-клеточная карцинома представляет собой светлоклеточную почечно-клеточную карциному. Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения почечно-клеточная карцинома, которую лечат, инвазировала почечный синус. Согласно некоторым аспектам настоящего изобретения ПКК представляет собой заболевание стадии III по классификации TNM. Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения ПКК представляет собой заболевание стадии IV по классификации TNM. Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения ПКК обнаружена во внутрипочечных венах. Согласно другим аспектам настоящего изобретения ПКК инвазировала почечный синус. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения ПКК метастазировала в надпочечники или в лимфатический узел. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения ПКК метастазировала в легкие, внутрибрюшные лимфатические узлы, кость, головной мозг или печень.

[0011] Согласно некоторым аспектам в настоящем изобретении предложены полипептиды, содержащие лиганд-связывающий участок внеклеточного домена ALK1 («полипептиды ALK1 ECD»), для применения в ингибировании ангиогенеза. Согласно дополнительным аспектам в настоящем изобретении предложены полипептиды, включающие полипептиды ALK1 ECD, для применения в лечении ПКК (например, прозрачноклеточной почечно-клеточной карциномы). Без намерения ограничения каким-либо конкретным механизмом действия, предполагают, что данные полипептиды действуют путем связывания с лигандами ALK1 и ингибирования способности данных лигандов взаимодействовать с ALK1, а также с другими рецепторами. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения полипептид ALK1 ECD содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична последовательности аминокислот 22-118 последовательности ALK1 человека, SEQ ID NO: 1. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения полипептид ALK1 ECD содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична последовательности аминокислот 22-120 последовательности ALK1 человека SEQ ID NO: 1. Полипептид ALK1 ECD можно применять в виде небольшого мономерного белка или в димеризованной форме (например, его можно экспрессировать в форме Fc-слитого белка). ALK1 ECD может также быть слитым со второй частью полипептида для получения улучшенных или желаемых свойств, таких как улучшенная аффинность связывания с лигандом, увеличенный период полужизни или значительное облегчение процесса получения или очистки. Слияние с Fc-фрагментом иммуноглобулина или связывание с группой полиоксиэтилена (например, с полиэтиленгликолем) может быть особенно полезно для увеличения периода полужизни полипептида ALK1 ECD в сыворотке при системном введении (например, при внутривенном, внутриартериальном и внутрибрюшинном введении).

[0012] Как продемонстрировано в настоящей заявке, системно введенный слитый белок ALK1-Fc обладает потенциальным действием по ингибированию роста опухоли при введении отдельно в моделях на мышах с ксенотрансплантатами ПКК человека и вызывает значительное увеличение ингибирования роста опухоли ПКК сунитинибом при системном введении вместе с сунитинибом в исследованных моделях на мышах с ксенотрансплантатами ПКК человека. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения слитый белок ALK1-Fc содержит полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или на 100% идентична последовательности аминокислот 22-118 или 22-120 из SEQ ID NO: 1, причем указанный полипептид слит (гибридизован), через промежуточный линкер или без него, с Fc-фрагментом иммуноглобулина и при этом слитый белок ALK1-Fc связывается с лигандом ALK1, который выбирают из GDF5 (например, имеющего последовательность, приведенную в базе данных Genbank под учетным № САА56874), GDF6 (например, имеющего последовательность, приведенную в базе данных Genbank под учетным № ААН43222), GDF7 (например, имеющего последовательность, приведенную в базе данных Genbank под учетным № NP 878248), BMP9 (например, имеющего последовательность, приведенную в базе данных Genbank под учетным № AF156891, AF188285, АК314956, ВС069643 или ВС074921) и BMP 10 (например, имеющего последовательность, приведенную в базе данных Genbank под учетным № 095393). Согласно следующим аспектам настоящего изобретения слитый белок ALK1-Fc связывается с лигандом ALK1, который выбирают из GDF5, GDF7 и ВМР9, со значением KD, составляющим менее 1×10^-7 М, и связывается с TGFP-1 со значением KD, составляющим более 1×10^-6 М. Fc-фрагменты Fc-слитого белка выбирают таким образом, чтобы они соответствовали организму, который лечат, и таким образом, чтобы белок демонстрировал желаемые фармакокинетические и фармакодинамические свойства. В некоторых случаях Fc-фрагмент представляет собой Fc-фрагмент IgGl человека. Согласно предпочтительным вариантам реализации настоящего изобретения слитый белок ALK1-Fc включает аминокислоты 22-118 или 22-120 из SEQ ID NO: 1. В некоторых случаях слитый белок ALK1-Fc включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3. В некоторых случаях слитый белок ALK1-Fc включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14. В некоторых случаях слитый белок ALK1-Fc представляет собой белок, полученный в результате экспрессии нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 4 в лини клеток млекопитающих, в частности, в линии клеток яичников китайского хомячка (СНО). Полипептиды ALK1-ECD готовят в форме фармацевтических препаратов, которые являются по существу апирогенными. Фармацевтический препарат можно приготовить для системной доставки (например, внутривенная, внутриартериальная или подкожная доставка) или для местной доставки.

[0013] Согласно некоторым аспектам настоящее изобретение направлено на преодоление сложностей при разработке относительно гомогенных препаратов слитого белка ALK1-Fc для их терапевтического применения. Как описано в настоящей заявке, слитые белки ALK1-Fc имеют тенденцию агрегировать с образованием мультимеров более высокого порядка. В настоящем изобретении предложены подходы для решения данных сложностей, а также, на основании этого, предложены фармацевтические препараты, содержащие слитые белки ALK1-Fc, причем такие препараты состоят по меньшей мере на 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или на 99% из димерного слитого белка ALK1-Fc. Соответственно, согласно некоторым аспектам в настоящем изобретении предложены фармацевтические препараты, содержащие слитый белок ALK1-Fc, включающие: полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 90%, 95%, 96% или на 97% идентична последовательности аминокислот 22-118 или 22-120 из SEQ ID NO: 1, причем указанный полипептид слит с Fc-фрагментом иммуноглобулина и при этом слитый белок ALK1-Fc связывается с лигандом, который выбирают из GDF5, GDF6, GDF7, ВМР9 и BMP 10. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения слитый белок ALK1-Fc связывается с GDF5, GDF7 и ВМР9 со значением KD, составляющим менее 1×10^-7 М, и связывается с TGFP-1 со значением KD, составляющим более 1×10^-6 М, и при этом по меньшей мере 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% слитого белка ALK1-Fc присутствует в форме димера.

[0014] Fc-фрагмент слитого белка ALK1-Fc может представлять собой Fc-фрагмент IgGl человека или иммуноглобулинов человека другого подкласса, таких как IgG2 или IgG3. Согласно некоторым аспектам настоящего изобретения слитый белок ALK1-Fc включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:3. Согласно другим аспектам настоящего изобретения слитый белок ALK1-Fc включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения слитый белок ALK1-Fc получают в результате экспрессии нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 4 в линии клеток млекопитающих, такой как линия клеток яичников китайского хомячка (СНО). Такие фармацевтические препараты можно приготовить в составы с целью оптимизации желаемых свойств слитого белка ALK1-Fc с применением известных методик и реактивов.

[0015] Фармацевтические препараты согласно настоящему изобретению можно применять для различных терапевтических целей, описанных в настоящей заявке, в том числе для ингибирования ангиогенеза и лечения ПКК. Согласно конкретному аспекту настоящего изобретения фармацевтические препараты используют для лечения почечно-клеточной карциномы. Согласно следующему аспекту настоящего изобретения фармацевтические препараты используют для лечения ПКК у млекопитающего, который ранее получал терапевтический агент для лечения ПКК. Согласно другому аспекту настоящего изобретения фармацевтические препараты используют для лечения млекопитающего с ПКК, которое проходит медицинские процедуры или которое готовят к прохождению медицинских процедур для лечения ПКК. Согласно следующему аспекту настоящего изобретения фармацевтические препараты согласно настоящему изобретению используют для лечения прогрессирующей (метастазирующей) ПКК. Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения фармацевтические препараты согласно настоящему изобретению используют для ингибирования ангиогенеза и/или для лечения заболевания или нарушения, при котором ингибирование ангиогенеза является желательным.

[0016] Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения фармацевтические препараты ALK1-Fc и препараты, включающие антитела, направленные против ALK1 или против одного или нескольких лигандов ALK1 (например, ВМР9 и/или BMP 10), используются в сочетании с агентом, который ингибирует ангиогенез. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения фармацевтические препараты ALK1-Fc и препараты, включающие антитела, направленные против ALK1 или против одного или нескольких лигандов ALK1 (например, ВМР9 и/или BMP10), используют в сочетании с антагонистом пути передачи сигналов с участием VEGF (например, с антителом, которое связывается с VEGF (например, АВАСТИН®), с рецептором VEGF (например, VEGFR1, VEGFR2 и VEGFR3) и с рецептором-ловушкой VEGF). Согласно конкретным аспектам настоящего изобретения фармацевтические препараты содержат ингибитор рецепторной тирозинкиназы VEGF. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения ингибитор рецепторной тирозинкиназы VEGF представляет собой агент, выбранный из сунитиниба (СУТЕНТ®), сорафениба (НЕКСАВАР®), пазопаниба (ВОТРИЕНТ®), акситиниба (ИНЛИТА®), тивозаниба и вандетаниба.

[0017] Согласно некоторым аспектам в настоящем изобретении предложены способы лечения почечно-клеточной карциномы у млекопитающего путем введения млекопитающему с ПКК, полипептида ALK1 ECD. Согласно следующему аспекту в настоящем изобретении предложен способ лечения ПКК у млекопитающего, включающий введение млекопитающему с ПКК, эффективного количества слитого белка активинподобная киназа I (ALK1)-Fc и ингибитора рецепторной тирозинкиназы VEGF. Согласно одному аспекту настоящего изобретения ПКК, которую лечат, представляет собой прозрачноклеточную почечно-клеточную карциному. Согласно другому аспекту настоящего изобретения ПКК, которую лечат, инвазировала почечный синус. Согласно некоторым аспектам настоящего изобретения ПКК представляет собой заболевание стадии III по классификации TNM. Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения ПКК представляет собой заболевание стадии IV по классификации TNM. Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения ПКК обнаружена во внутрипочечных венах. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения ПКК метастазировала в надпочечники или в лимфатический узел. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения ПКК метастазировала в легкие, внутрибрюшные лимфатические узлы, кость, головной мозг или печень.

[0018] Согласно некоторым аспектам настоящего изобретения слитый белок ALK1-Fc, который вводят в соответствии со способом согласно настоящему изобретению, содержит полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или на 100% идентична последовательности аминокислот 22-118 или 22-120 из SEQ ID NO: 1, причем указанный полипептид слит с Fc-фрагментом иммуноглобулина, и при этом слитый белок ALK1-Fc связывается с лигандом ALK, который выбирают из GDF5, GDF6, GDF7, ВМР9 и ВМР10. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения слитый белок ALK1-Fc связывается с TGFpM со значением KD, составляющим более 1×10^-6 М. В некоторых случаях слитый белок ALK1-Fc имеет последовательность согласно SEQ ID NO: 3. В альтернативном варианте слитый белок ALK1-Fc имеет последовательность согласно SEQ ID NO: 14. Полипептид ALK1 ECD можно доставлять местно или системно (например, внутривенно, внутриартериально или подкожно).

[0019] Согласно следующему аспекту настоящего изобретения ингибитор рецепторной тирозинкиназы VEGF, который вводят вместе со слитым белком ALK1-Fc, представляет собой агент, выбранный из сунитиниба (СУТЕНТ®), сорафениба (НЕКСАВАР®), пазопаниба (ВОТРИЕНТ®), акситиниба (ИНЛИТА®), тивозаниба и вандетаниба.

[0020] Согласно другому аспекту в настоящем изобретении предложен способ лечения ПКК у млекопитающего, включающий введение млекопитающему с ПКК, эффективного количества активинподобной киназы I (ALK1)-Fc, ингибитора рецепторной тирозинкиназы VEGF и ингибитора мишени рапамицина у млекопитающих (mTOR). Согласно следующему аспекту настоящего изобретения слитый белок ALK1-Fc и ингибитор рецепторной тирозинкиназы VEGF вводят вместе с ингибитором, мишенью которого является mTOR, - эверолимусом или темсиролимусом. Согласно другим аспектам настоящего изобретения ингибитор mTOR представляет собой агент, выбранный из: WYE354, YE132 (Pfizer), РР30 и РР242, AZD8055, OSI-027, Torinl, BEZ235, XL765, GDC-0980, PF-04691502 и PF-05212384.

[0021] Согласно одному аспекту настоящего изобретения ПКК, которую лечат, представляет собой прозрачноклеточную почечно-клеточную карциному. Согласно другому аспекту настоящего изобретения ПКК, которую лечат, инвазировала почечный синус. Согласно некоторым аспектам настоящего изобретения ПКК представляет собой заболевание стадии III по классификации TNM. Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения ПКК представляет собой заболевание стадии IV по классификации TNM. Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения ПКК обнаружена во внутрипочечных венах. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения ПКК метастазировала в надпочечники или в лимфатический узел. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения ПКК метастазировала в легкие, внутрибрюшные лимфатические узлы, кость, головной мозг или печень.

[0022] Согласно другому аспекту в настоящем изобретении предложен способ лечения почечно-клеточной карциномы у млекопитающего, которое ранее получало терапевтический агент для лечения ПКК, причем указанный способ включает введение млекопитающему эффективного количества слитого белка активинподобная киназа I (ALK1)-Fc. Согласно одному аспекту настоящего изобретения терапевтический агент, получаемый ранее, представляет собой ингибитор рецепторной тирозинкиназы VEGF. Согласно следующему аспекту настоящего изобретения ингибитор рецепторной тирозинкиназы VEGF представляет собой агент, выбранный из: сунитиниба, сорафениба, пазопаниба, акситиниба, тивозаниба и вандетаниба. Согласно другому аспекту настоящего изобретения терапевтический агент, получаемый ранее, представляет собой ингибитор, мишенью которого является мишень рапамицина у млекопитающих (mTOR). Согласно следующему аспекту настоящего изобретения ингибитор, мишенью которого является mTOR, представляет собой агент, выбранный из эверолимуса и темсиролимуса. Согласно другим аспектам настоящего изобретения ингибитор, мишенью которого является mTOR, представляет собой агент, выбранный из: WYE354, YE132 (Pfizer), РР30 и РР242, AZD8055, OSI-027, Torinl, BEZ235, XL765, GDC-0980, PF-04691502 и PF-05212384. Согласно дополнительному аспекту настоящего изобретения терапевтический агент, получаемый ранее, представляет собой системную цитокиновую терапию. Согласно следующему аспекту настоящего изобретения системная цитокиновая терапия представляет собой терапию интерфероном альфа (ИФН α) или интерлейкином-2 (ИЛ-2). Согласно одному аспекту настоящего изобретения ПКК, которую лечат, представляет собой прозрачноклеточную почечно-клеточную карциному. Согласно другому аспекту настоящего изобретения ПКК, которую лечат, инвазировала почечный синус. Согласно некоторым аспектам настоящего изобретения ПКК представляет собой заболевание стадии III по классификации TNM. Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения ПКК представляет собой заболевание стадии IV по классификации TNM. Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения ПКК обнаружена во внутрипочечных венах. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения ПКК метастазировала в надпочечники или в лимфатический узел. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения ПКК метастазировала в легкие, внутрибрюшные лимфатические узлы, кость, головной мозг или печень.

[0023] Согласно дополнительным аспектам в настоящем изобретении предложен способ лечения почечно-клеточной карциномы у млекопитающего, которое ранее получало терапевтический агент для лечения ПКК, причем указанный способ включает введение млекопитающему эффективного количества слитого белка активинподобная киназа I (ALK1)-Fc и ингибитора рецепторной тирозинкиназы VEGF. Согласно следующему варианту реализации настоящего изобретения ингибитор рецепторной тирозинкиназы VEGF представляет собой агент, выбранный из: сунитиниба, сорафениба, пазопаниба, акситиниба, тивозаниба и вандетаниба. Согласно другому аспекту настоящего изобретения ПКК, которую лечат, инвазировала почечный синус. Согласно одному аспекту настоящего изобретения ПКК представляет собой прозрачноклеточную почечно-клеточную карциному. Согласно другому аспекту настоящего изобретения ПКК, которую лечат, инвазировала почечный синус. Согласно некоторым аспектам настоящего изобретения ПКК представляет собой заболевание стадии III по классификации TNM. Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения ПКК представляет собой заболевание стадии IV по классификации TNM. Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения ПКК обнаружена во внутрипочечных венах. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения ПКК метастазировала в надпочечники или в лимфатический узел. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения ПКК метастазировала в легкие, внутрибрюшные лимфатические узлы, кость, головной мозг или печень.

[0024] Согласно дополнительным аспектам в настоящем изобретении предложен способ лечения почечно-клеточной карциномы у млекопитающего, которое ранее получало терапевтический агент для лечения ПКК, причем указанный способ включает введение млекопитающему эффективного количества слитого белка активинподобная киназа I (ALK1)-Fc и антитела, которое связывается с рецепторной тирозинкиназой. Согласно следующему аспекту настоящего изобретения антитело связывается с рецепторной тирозинкиназой, которую выбирают из: VEGF, VEGFR1, VEGFR2, VEGFR3, PDGFRa, PDGFRb, c-KIT, MET FAK, RET, FGF бета, TiE-1, Tie-2 и EGFR. Согласно дополнительному аспекту настоящего изобретения антитело, которое вводят, представляет собой бевацизумаб. Согласно одному аспекту настоящего изобретения ПКК представляет собой прозрачноклеточную почечно-клеточную карциному. Согласно другому аспекту настоящего изобретения ПКК, которую лечат, инвазировала почечный синус. Согласно некоторым аспектам настоящего изобретения ПКК представляет собой заболевание стадии III по классификации TNM. Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения ПКК представляет собой заболевание стадии IV по классификации TNM. Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения ПКК обнаружена во внутрипочечных венах. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения ПКК метастазировала в надпочечники или в лимфатический узел. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения ПКК метастазировала в легкие, внутрибрюшные лимфатические узлы, кость, головной мозг или печень.

[0025] Согласно дополнительным аспектам в настоящем изобретении предложен способ лечения почечно-клеточной карциномы у млекопитающего, которое ранее получало терапевтический агент для лечения ПКК, причем указанный способ включает введение млекопитающему эффективного количества слитого белка активинподобная киназа I (ALK1)-Fc и ингибитора, мишенью которого является mTOR. Согласно следующему аспекту настоящего изобретения ингибитор, мишенью которого является mTOR, представляет собой агент, выбранный из эверолимуса и темсиролимуса. Согласно другим аспектам настоящего изобретения ингибитор mTOR представляет собой агент, выбранный из: WYE354, YE132 (Pfizer), РР30 и РР242, AZD8055, OSI-027, Torinl, BEZ235, XL765, GDC-0980, PF-04691502 и PF-05212384. Согласно одному аспекту настоящего изобретения ПКК представляет собой прозрачноклеточную почечно-клеточную карциному. Согласно другому аспекту настоящего изобретения ПКК, которую лечат, инвазировала почечный синус. Согласно некоторым аспектам настоящего изобретения ПКК представляет собой заболевание стадии III по классификации TNM. Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения ПКК представляет собой заболевание стадии IV по классификации TNM. Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения ПКК обнаружена во внутрипочечных венах. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения ПКК метастазировала в надпочечники или в лимфатический узел. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения ПКК метастазировала в легкие, внутрибрюшные лимфатические узлы, кость, головной мозг или печень.

[0026] Согласно дополнительным аспектам в настоящем изобретении предложен способ лечения почечно-клеточной карциномы у млекопитающего, которое ранее получало терапевтический агент для лечения ПКК, причем указанный способ включает введение млекопитающему эффективного количества слитого белка активинподобная киназа I (ALK1)-Fc и иммуностимулирующего цитокина. Согласно дополнительному варианту реализации настоящего изобретения иммуностимулирующий цитокин, который вводят, представляет собой ИФН α или ИЛ-2. Согласно другому аспекту настоящего изобретения ПКК, которую лечат, представляет собой прозрачноклеточную почечно-клеточную карциному. Согласно другому аспекту настоящего изобретения ПКК, которую лечат, инвазировала почечный синус. Согласно некоторым аспектам настоящего изобретения ПКК представляет собой заболевание стадии III по классификации TNM. Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения ПКК представляет собой заболевание стадии IV по классификации TNM. Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения ПКК обнаружена во внутрипочечных венах. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения ПКК метастазировала в надпочечники или в лимфатический узел. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения ПКК метастазировала в легкие, внутрибрюшные лимфатические узлы, кость, головной мозг или печень.

[0027] Согласно дополнительному аспекту в настоящем изобретении предложен способ лечения ПКК у млекопитающего, который включает введение млекопитающему с ПКК, которое проходит медицинские процедуры или которое готовят к прохождению медицинских процедур для лечения ПКК, эффективного количества слитого белка активинподобная киназа I (ALK1)-Fc. Согласно одному аспекту настоящего изобретения медицинская процедура выбрана из: нефронсберегающей хирургии, частичной нефрэктомии, полной нефрэктомии и термоаблации. Согласно некоторым аспектам настоящего изобретения ПКК представляет собой прозрачноклеточную почечно-клеточную карциному. Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения ПКК инвазировала почечный синус. Согласно некоторым аспектам настоящего изобретения ПКК представляет собой заболевание стадии III по классификации TNM. Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения ПКК представляет собой заболевание стадии IV по классификации TNM. Согласно дополнительным аспектам настоящего изобретения ПКК обнаружена во внутрипочечных венах. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения ПКК метастазировала в надпочечники или в лимфатический узел. Согласно следующим аспектам настоящего изобретения ПКК метастазировала в легкие, внутрибрюшные лимфатические узлы, кость, головной мозг или печень.

[0028] Согласно одному аспекту настоящего изобретения слитый белок ALK1-Fc, который вводят млекопитающему с ПКК, которое проходит медицинские процедуры или которое готовят к прохождению медицинских процедур для лечения ПКК, содержит полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или на 100% идентична последовательности аминокислот 22-118 или 22-120 из SEQ ID NO: 1, причем слитый белок ALK1-Fc связывается с лигандом ALK1, который выбирают из GDF5, GDF6, GDF7, ВМР9 и BMP10. Согласно дополнительному аспекту настоящего изобретения Fc-фрагмент слитого белка ALK1-Fc представляет собой Fc-фрагмент иммуноглобулина человека IgGl. Согласно следующему аспекту настоящего изобретения слитый белок ALK1-Fc включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3 или SEQ ID NO: 14.

[0029] Согласно следующему аспекту в настоящем изобретении предложен способ лечения ПКК у млекопитающего, которое проходит медицинские процедуры или которое готовят к прохождению медицинских процедур для лечения ПКК, причем указанный способ включает введение млекопитающему эффективного количества слитого белка активинподобная киназа I (ALK1)-Fc и ингибитора рецепторной тирозинкиназы VEGF. Согласно одному аспекту настоящего изобретения ингибитор рецепторной тирозинкиназы VEGF представляет собой агент, выбранный из сунитиниба, сорафениба, пазопаниба, акситиниба, тивозаниба и вандетаниба.

[0030] Согласно другому аспекту в настоящем изобретении предложен способ лечения ПКК у млекопитающего, которое проходит медицинские процедуры или которое готовят к прохождению медицинских процедур для лечения ПКК, причем указанный способ включает введение млекопитающему эффективного количества слитого белка ALK1-Fc, ингибитора рецепторной тирозинкиназы VEGF и ингибитора, мишенью которого является mTOR. Согласно одному аспекту настоящего изобретения ингибитор, мишенью которого является mTOR, представляет собой агент, выбранный из эверолимуса и темсиролимуса. Согласно другому аспекту настоящего изобретения ингибитор mTOR представляет собой агент, выбранный из: WYE354, YE132 (Pfizer), РР30 и РР242, AZD8055, OSI-027, Torinl, BEZ235, XL765, GDC-0980, PF-04691502 и PF-05212384.

[0031] Согласно другому аспекту в настоящем изобретении предложен способ лечения ПКК у млекопитающего, которое проходит медицинские процедуры или которое готовят к прохождению медицинских процедур для лечения ПКК, причем указанный способ включает введение млекопитающему эффективного количества слитого белка ALK1-Fc, ингибитора рецепторной тирозинкиназы VEGF и иммуностимулирующего цитокина. Согласно одному аспекту настоящего изобретения иммуностимулирующий цитокин, который вводят, представляет собой ИФН альфа или ИЛ-2.

[0032] Согласно некоторым аспектам в настоящем изобретении предложен способ лечения ПКК у млекопитающего, которое проходит медицинские процедуры или которое готовят к прохождению медицинских процедур для лечения ПКК, причем указанный способ включает введение млекопитающему антитела, которое связывается с лигандом ALK1 и ингибирует связывание лиганда ALK1 с ALK1. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения антитело связывается с лигандом ALK1 со значением KD, составляющим менее 5×10^-8 М. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения антитело ингибирует ангиогенез, стимулируемый лигандом ALK1. Согласно некоторым аспектам настоящего изобретения антитело связывается с ALK1 во внеклеточном домене, который представляет собой аминокислоты 22-118 или 22-120 из SEQ ID NO: 1, и ингибирует связывание ALK1 с по меньшей мере одним лигандом ALK1, который выбирают из группы, состоящей из: GDF5, GDF6, GDF7, ВМР9 и BMP 10. Исходя из аффинности данных лигандов к ALK1, антитело может связываться со значением KD, составляющим менее 5×10^-8 М, а в некоторых случаях от 5×10^-8 М до 1×10^-10 М. Предполагают, что антитело с аффинностью, находящейся в данном диапазоне, ингибирует передачу сигналов с участием одного или нескольких из GDF5, GFD6 и GFD7 и при э