Комбинированная вакцина с ацеллюлярным коклюшем

Комбинированная вакцина с ацеллюлярным коклюшем

Реферат

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Данное изобретение относится к комбинированной вакцине, включающей смесь антигенов для защиты от заболеваний, таких как дифтерия, столбняк, коклюш и инфекций, вызываемых Haemophilus influenzae и полиовирусами. Данное изобретение также относится к включению одного или более антигенов в указанную комбинированную вакцину для защиты от инфекций, вызываемых вирусом гепатита и другими патогенами, так что введение вакцины может одновременно иммунизировать субъект против более чем одного патогена. Данное изобретение, в частности, касается полностью жидкой стабильной комбинированной вакцины, включающей антигены, как указано выше, и способов ее производства.

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Антигены вакцины

Антигены дифтерии и столбняка

Дифтерия и столбняк представляют собой острые инфекции, вызываемые Cornyebacterium diphtheriae и Clostridium tetani, соответственно. Токсины этих бактерий являются главной причиной соответствующих заболеваний. Вакцины, обеспечивающие защиту против этих бактерий, включают эти токсины, которые являются анатоксинами, теряя свою инфекционность. Токсины обрабатывают, используя химические реагенты, такие как формальдегид или глютаральдегид для создания анатоксинов [анатоксин дифтерии (DT) и анатоксин столбняка (ТТ)]. CRM 197, мутантный токсин дифтерии, также используется в определенных вакцинах.

Антигены коклюша

Болезнь судорожного кашля или коклюш вызывается Bordetella pertussis. Она представляет собой истощающую и серьезную болезнь, которая даже может привести к смерти. Начальные вакцины против болезни были на основе целых клеток, которые обрабатывали химическими реагентами, такими как формальдегид, чтобы убить клетки и инактивировать токсические материалы. Будучи высоко эффективными, такие вакцины, называемые ’цельноклеточные (wP) вакцины’, были связаны с побочными эффектами, включая повышение температуры тела и местные реакции. Была выявлена необходимость в более определенной вакцине, и исследователи затем сменили фокус внимания на разработку вакцины, включающей меньшее количество высокоочищенных антигенов, которая называется ’составная вакцина’. Многие факторы, связанные с вирулентностью, такие как коклюшный токсин (РТ), филаментный гемагглютинин (FHA), пертактин (PRN или Р69), фимбриальные белки (FIM 1, 2 и 3), аденилциклаза, липополисахарид и другие белки внешней мембраны были предложены для включения в ’ацеллюлярную вакцину’, которая является менее определенной по сравнению с составной вакциной. Многие работы были сконцентрированы на вакцине на основе РТ, которая была только частично защитной. Комбинация PT/FHA была более эффективной, но все еще имела меньшую иммуногенность, чем вакцина на основе wP (цельноклеточный коклюш). Другой потенциальный кандидат, PRN или Р69, как было обнаружено, делал коклюшную вакцину более эффективной в комбинации с РТ и FHA. Определенная коклюшная вакцина также имела FIM в качестве четвертого участника, обеспечивая иммуногенность против коклюша.

Антигены полиомиелита

Доступно два различных типа вакцины:

- Живую аттенуированную (ослабленная) пероральную полиомиелитную вакцину (OPV), разработанную Dr. Albert Sabin в 1961. OPV, включающую Sabin штаммы, дают перорально.

- Инактивированную (убитая) полиомиелитную вакцину (IPV), разработанную в 1955 Dr. Jonas Salk. IPV, включающую Salk штаммы, вводят как инъекцию.

Как живая аттенуированная (OPV), так и инактивированная (IPV) полиомиелитные вакцины являются эффективными в контроле заболевания полиомиелита во всем мире. Полиомиелитная вакцина может включать Salk или Sabin штаммы. Mahoney тип 1, MEF тип 2 и Saukett тип 3 являются Salk штаммами, которые используются в вакцине против заболевания полиомиелита. Sabin штаммы включают Sabin 1 и Sabin 2 штаммы.

Антигены Haemophilus influenzae (Hib)

Haemophilus influenzae представляет собой грамотрицательную коккобактерию, которая представляет собой нормальную составляющую флоры верхнего дыхательного пути. Haemophilus influenzae тип b (Hib b) представляет собой главную причину менингитных инвазивных переносимых кровью инфекций у детей младшего возраста и главной причиной менингита на первых 2 годах жизни. Иммунизация против Haemophilus influenzae началась в Канаде в 1987 с полисахар идной вакцины [рибитолфосфат полирибозы (PRP)]. Полирибозилрибитолфосфатная (PRP) капсула Hib представляет собой главный вирулентный фактор для организма. Антитело к PRP является первичным фактором, влияющим на сывороточную бактерицидную активность, и повышение уровней антител связано с пониженным риском инвазивной болезни. PRP представляет собой Т-клеточно независимый антиген и, следовательно, характеризуется следующим: a) индукция слабого ответа антитела у менее чем 18-месячных младенцев и детей, b) изменчивый и количественно меньший ответ антитела, чем тот, который наблюдается с Т-клеточно зависимыми антигенами, с) продукция более высокого соотношения иммуноглобулина М (IgM), и d) неспособность индуцировать вторичный ответ.

Начальные вакцины на основе только PRP компонента доказали свою неэффективность для младенцев. Дополнительные попытки были направлены на PRP конъюгированную вакцину, где PRP конъюгирован с белками, которые называются белки-носители, такие как наружный белок мембраны Neisseria meningitides, анатоксин дифтерии, анатоксин столбняка и CRM 197.

Антигены гепатита (Hep)

Существуют различные штаммы вируса гепатита. Гепатит В представляет собой болезнь, вызываемую вирусом гепатита В (HBV), который инфицирует печень гоминид, включая людей, и вызывает воспаление, называемое гепатитом. Он варьирует по тяжести от легкого заболевания, которое продолжается несколько недель (острого), до серьезного длительно (хронического) заболевания, которое может привести к болезни печени или раку печени. Вакцина против болезни включает один из вирусных оболочечных белков, поверхностный антиген гепатита В (HBsAg). Одобренные FDA вакцины, включающие Hep В, представляют собой Recombivax HB® и Comvax® от Merck, Engerix-B® и Pediarix® от GlaxoSmithKline Biologicals.

Другие антигены

Другие антигены, которые затрагивают человечество, включают Haemophilus influenzae (a, c, d, e, f серотипы и неинкапсулированные штаммы), гепатит (А, С, D, Е, F и G штаммы), менингит А, В или С, грипп, Pneumococci, Streptococci, сибирскую язву, денге, малярию, корь, свинку, краснухуа, БЦЖ, японский энцефалит, ротавирус, натуральную оспу, желтую лихорадку, брюшной тиф, Singles, вирус ветряной оспы и другие.

Комбинированные вакцины

Несмотря на многие десятилетия исследования в области вакцин, инфекционные заболевания остаются угрозой для человечества. Комбинированные вакцины, которые защищают от различных заболеваний, являются очень необходимыми, так как они снижают количество введений вакцины, что снижает количество введений и стоимости продукции, а также улучшает степень согласия пациента с предписанным режимом. Такие комбинированные вакцины, в общем, лучше переносятся.

Однако документально доказанное явление антигенной конкуренции усложняло и тормозило развитие поливалентных вакцин. Это явление касается наблюдения, что введение множественных антигенов вместе часто приводит к ослабленному ответу на определенные антигены сравнительно с иммунным ответом на эти антигены, когда они вводятся отдельно.

Более раннее исследование было сфокусировано на разработке вакцин с множественными валентностями, направленных на различные заболевания и инфекции. Одна такая хорошо известная комбинация вакцины представляет собой ту, которая обеспечивает защиту от дифтерии, столбняка и ацеллюлярного коклюша. Ацеллюлярный коклюшный (аР) компонент в норме включает 2 или все 3 из следующего: детоксифицированный РТ (коклюшный токсин), FHA (филаментный гемагглютинин) и PRN или Р69 (пертактин). В некоторых случаях могут также присутствовать другие коклюшные антигены, такие как антигены фимбрий (Fim 1, 2 или 3). Infanrix® (GlaxoSmithKline Biologicals), Tripedia и Daptacel (Sanofi Pasteur) являются одобренными FDA DTaP комбинированными вакцинами.

Желательно добавить другие антигены к такой комбинированной вакцине, которые будут давать защиту от заболеваний, вызываемых вирусом гепатита (Hep), Haemophilus influenzae (Hib) и полиовирусами (IPV). Также желательно иметь антигены, обеспечивающие защиту от других заболеваний, которые будут добавлены к указанным выше комбинированным вакцинам.

Недавно одобренная FDA вакцина Kinrix® от GlaxoSmithKline Biologicals, представляет собой комбинированную вакцину, которая имеет IPV вместе с DTaP (Infanrix®) антигенами. Infanrix-Hib® представляет собой другую комбинацию, которая предоставлена GlaxoSmithKline Biologicals, где DTaP антигены присутствуют в жидкой форме и Hib антиген лиофилизирован и предоставлен в отдельной ампуле. Pediarix® и Infanrix penta® от GlaxoSmithKline Biologicals включает комбинированную вакцину, дозированную в отдельной ампуле, которая включает DTaP вместе с Hep В и IPV компонентом. Pentacel® от Sanofi Pasteur представляет собой комбинацию пяти вакцинных компонентов, доставляемых в виде DTaP-IPV в жидкой форме и Hib компонента в высушенной форме. Infanrix hexa® представляет собой шестикомпонентную комбинированную вакцину от GlaxoSmithKline Biologicals, которая защищает от заболеваний, таких как дифтерия, столбняк, коклюш, полиомиелит и инфекций, вызываемых Hep В вирусом и Haemophilus influenzae типа b. Даже в этой комбинации все компоненты, за исключением Hib компонента, присутствуют в жидкой форме, a Hib компонент присутствует в лиофилизированной форме. Таким образом, ни одна из представленных комбинированных вакцин не продается в виде полностью жидких составов и не включает антигены, такие как Hib и Hep вместе с антигенами, обеспечивающими защиту от дифтерии, столбняка, коклюша и полиомиелита, в одной ампуле.

Патент США №6756040 утверждает, что простое смешивание компонентов вакцины приводит к снижению в титрах антител для полисахаридного компонента, вследствие антигенной интерференции. US’040 касается состава вакцины для профилактики инфекций Haemophilus influenzae (Hib) типа b, где существует необходимость того, чтобы Hib b конъюгат был адсорбирован на фосфате алюминия так, чтобы ингибировать снижение анти-полисахаридных антител. Дополнительно, Hib b антиген является лиофилизированным и его смешивают с другими антигенами, присутствующими в жидкой форме, не более чем за один час до введения. Таким образом, в US’040 нет сообщения о комбинированной вакцине, которая присутствует в качестве полностью жидкого состава и включает антигены, обеспечивающие защиту от дифтерии, столбняка, коклюша и инфекций, вызываемых Haemophilus influenzae, вирусом гепатита и полиомиелита.

Патент США №6013264 от SmithKline Beecham Biologicals, касается поливалентной вакцины, включающей HbsAg (Hep В антиген), адсорбированный на фосфате алюминия. Он отстаивает точку зрения, что, когда адсорбированный на гидроксиде алюминия HBsAg используют в комбинированной вакцине, то наблюдается существенное снижение иммунного ответа на HBsAg компонент, приводя к незначительной сероконверсии после вакцинации. Он также утверждает, что существует необходимость избегать применения гидроксида алюминия в качестве адъюванта для адсорбции HBsAg в поливалентной вакцине. Описание утверждает, что Hib b компонент может быть добавлен непосредственно перед приемом к вакцине данного изобретения. Таким образом, в US’264 нет сообщения о комбинированной вакцине, которая присутствует как полностью жидкий состав и включает антигены, обеспечивающие защиту от дифтерии, столбняка, коклюша и инфекций, вызываемых Haemophilus influenzae, вирусами гепатита и полиомиелита. Также вакцина согласно US ’264 имеет специфическое требование, чтобы Hep В антиген был адсорбирован на фосфате алюминия, а не на гидроксиде алюминия.

РСТ заявка WO2007054820 от Novartis Vaccines and Diagnostics касается композиции вакцины, где D и Т антигены, в частности, адсорбированы на гидроксиде алюминия и Hib b и Hep В антигены адсорбированы на фосфате алюминия. Эта заявка, однако, не включает сообщения о получении полностью жидкой стабильной комбинированной вакцины, где D, Т и аР антигены адсорбированы на фосфате алюминия и Hep антиген адсорбирован на гидроксиде алюминия.

РСТ заявка WO 1998000167А1 от Connaught Lab обеспечивает поливалентную иммуногенную композицию для обеспечения защиты у хозяина от болезни, вызываемой инфекцией Bordetella pertussis, Clostridium tetani, Corynebacterium diphtheriae, полиовируса и/или Haemophilus influenzae. Hib b компонент вакцины, согласно описанию, представляет собой лиофилизированный компонент, который необходимо растворить до смешивания с другими компонентами вакцины. Таким образом, в описании нет сообщения, касающегося полностью жидкой комбинированной вакцины, включающей все указанные антигены.

Лиофилизация, также имеющая название сублимационная сушка, представляет собой дорогостоящий способ, который также вызывает значительный стресс на белки. Когда любой компонент вакцины является лиофилизированным на момент введения вакцины, то необходимо смешать лиофилизат с другой жидкостью или жидким компонентом комбинированной вакцины. Это представляет собой дополнительное ограничение для практикующего клинициста и представляет риск того, что это будет проведено некачественно. Затем был предложен шприц с многочисленными отсеками, который будет включать лиофилизированный компонент в одном отсеке и жидкий компонент вакцины в другом. Однако такой шприц, чье содержимое могло быть смешанным на момент введения вакцины, не проявил себя удовлетворительно в отношении снижения стоимостей получения, а также в отношении операций, которые необходимо выполнить практикующему клиницисту.

Следовательно, желательно избегать этапа сублимационной сушки и обеспечить комбинированную вакцину, которая имеет все компоненты, присутствующие вместе и в полностью жидкой форме. Это облегчит введение вакцины, обеспечит соблюдение пациентом режима введения, а также снизит стоимости получения. Таким образом, желательно иметь Hib антиген, добавленный к жидкому компоненту вакцины и, таким образом, иметь полностью жидкую поливалентную вакцину.

РСТ заявка WO2004110480 от Glaxo SmithKline Biologicals касается вакцины, включающей Hib b полисахарид. Заявка утверждает, что простое смешивание компонентов комбинированной вакцины затрудняется фактом того, что не все антигены могут быть эффективно смешаны друг с другом. Она утверждает, что существует интерференция между гидроксидом алюминия DTP вакцины и PRP. Данное изобретение в WO’480 направлено на минимизацию этой интерференции в такой приготовленной для немедленного приема комбинированной вакцине, где PRP предварительно адсорбируют на фосфате алюминия. Данное изобретение дополнительно обеспечивает иммуногенные композиции, вакцины и комбинированные вакцины, включающие PRP, который защищен в некоторой степени от иммунной интерференции. Изобретатели обнаружили, что описанное выше может быть достигнуто путем включения полианионного полимерного вспомогательного вещества в вакцину, включающую PRP.

Однако применение полианионного полимера в составе вакцины может быть нежелательным, поскольку это может увеличивать стоимость составления вакцины. Также, поскольку вакцина в итоге предназначена для применения у людей, она оптимально должна иметь наименьшее количество возможных компонентов. Применение дополнительных ингредиентов означает добавление к составу веществ, на которые организм может реагировать и производить антитела. Такой ответ организма, вступая в контакт с компонентами иммунологического препарата, может быть нежелательным.

Патент США №6333036 от Pasteur Merieux Serums касается композиций вакцины, содержащих капсулярный полисахарид Haemophilus influenzae типа b или высокомолекулярный полирибозилрибитол фосфат (PRP), связанный с анатоксином столбняка, а также адъювант на основе алюминия. Адъюванты на основе алюминия, используемые в данном изобретении, имеют точку нулевого заряда при менее чем приблизительно 7,2. Патент, однако, конкретно не сообщает о получении комбинированной вакцины, включающей антигены, обеспечивающие защиту от дифтерии, столбняка, коклюша и инфекций, вызываемых Haemophilus influenzae и полиовирусами, в полностью жидкой форме, где Hib антиген может не быть, по сути, адсорбированным на каком-либо адъюванте. Этот патент также не сообщает о получении полностью жидкой стабильной комбинированной вакцине, включающей антигены, обеспечивающие защиту от дифтерии, столбняка, коклюша и инфекций, вызываемых Haemophilus influenzae, вирусами гепатита и полиомиелита, где антигены дифтерии, столбняка и коклюша адсорбированы на фосфате алюминия, а антиген гепатита адсорбирован на гидроксиде алюминия.

Европейский патент №1028750 от Sanofi Pasteur MSD, касается поливалентной вакцины, которая обеспечивает защиту от заболеваний, вызываемых Bordetella pertussis, Corynebacterium diphtheriae, Clostridium tetani, полиовирусами, вирусом гепатита В и Haemophilus influenzae. Патент, однако, в частности, не сообщает о получении комбинированной вакцины, включающей антигены, обеспечивающие защиту от дифтерии, столбняка, коклюша и инфекций, вызываемых Haemophilus influenzae, вирусами гепатита и полиомиелита, в полностью жидкой форме, где D, Т и аР антигены адсорбированы на фосфате алюминия, а Hep антиген не адсорбирован на гидроксиде алюминия.

Hexavac® от Aventis Pasteur MSD представляет собой полностью жидкую вакцину, которая обеспечивается для защиты от заболеваний, вызываемых указанными организмами. Однако было временно остановлено применение этой вакцины во всем мире вследствие проблем после выхода на рынок в связи с вариабельностью способа получения компонента гепатита В вакцины, что могло привести к пониженной долговременной защите от гепатита B.

Несмотря на то, что продолжаются исследования по созданию поливалентной вакцины, включающей различные антигены, которая бы обеспечивала защиту от ряда заболеваний, они не направлены на необходимость обеспечения стабильной комбинированной вакцины, включающей антигены, обеспечивающие защиту от дифтерии, столбняка, коклюша и инфекций, вызываемых Haemophilus influenzae и полиовирусами, в полностью жидкой форме, где Hib антиген может не быть, по сути, адсорбирован на каком-либо адъюванте. Также отсутствует раскрытие создания стабильной комбинированной вакцины, включающей антигены, обеспечивающие защиту от дифтерии, столбняка, коклюша и инфекций, вызываемых Haemophilus influenzae, вирусами гепатита и полиомиелита, в полностью жидкой форме, где D, T и aP антигены адсорбированы на фосфате алюминия, a Hep антиген адсорбирован на гидроксиде алюминия. Существуют противоречивые сообщения относительно ответов антител против конкретных антигенов у детей, иммунизированных отдельным и совместным введением комбинированных вакцин и PRP вакцины. Могут существовать различные причины для таких результатов, включая вакцины, которые не являются идентичными по их антигенному содержанию, способ создания анатоксина, использование адъюванта или используемый консервант.

Таким образом, коммерчески доступные в настоящее время комбинированные вакцины могут не включать подходящие составы подходящих антигенов в подходящих иммуногенных формах для достижения необходимых уровней эффективности и иммуногенности у чувствительной человеческой популяции, для нескольких заболеваний в одном введении. Существует необходимость в многокомпонентной вакцине, которая обеспечивает защиту от различных инфекций и находится в жидкой форме, так что обеспечивает простоту введения и комфорт стоимости-эффективности. Было бы желательным обеспечить стабильную и эффективную поливалентную вакцину против заболеваний, вызываемых инфекциями, вызываемыми Corynebacterium diphtheria, Clostridium tetani, Bordetella pertussis, полиовирусами, вирусом гепатита, Haemophilus influenzae и другими. Для такой вакцины, чтобы она была эффективной, необходимо, чтобы соблюдался критерий серопротекции для каждого из антигенов вакцины. Для этого существует необходимость в преодолении препятствий и трудностей, обусловленных антигенной конкуренцией и интерференцией. Данное изобретение преодолевает ограничения известного уровня техники и решает связанные проблемы путем обеспечения состава полностью жидкой комбинированной вакцины, защищающего от нескольких заболеваний.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ДАННОГО ИЗОБРЕТЕНИЯ

Данное изобретение относится к комбинированной вакцине, включающей смесь антигенов для защиты от заболеваний, таких как дифтерия, столбняк, коклюш и инфекций, вызываемых Haemophilus influenzae и полиовирусами. Данное изобретение также относится к включению антигенов для защиты от инфекций, вызываемых вирусом гепатита и другими патогенами, так что введение вакцины может одновременно иммунизировать субъект против более чем одного патогена. Данное изобретение, в частности, касается полностью жидкой стабильной комбинированной вакцины, включающей антигены, как указано выше, и способов ее производства.

Данное изобретение дополнительно касается пятивалентной вакцины, где Hib антиген, по сути, не адсорбируют на каком-либо адъюванте. Данное изобретение также касается полностью жидкой стабильной шестивалентной вакцины, включающей антигены, обеспечивающие защиту от нескольких заболеваний, где антигены дифтерии, столбняка и ацеллюлярного коклюша адсорбируют на фосфате алюминия и антиген гепатита адсорбируют на гидроксиде алюминия.

Данное изобретение дополнительно направлено на комбинированную вакцину, которая включает несколько компонентов вакцины, которые являются подходящими для профилактики, улучшения и лечения множества болезненных состояний, которые соответствуют критерию для серопротекции для каждого из указанных компонентов вакцины.

ДЕТАЛЬНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Данное изобретение направлено на полностью жидкую стабильную комбинированную вакцину, которая включает несколько компонентов вакцины, которые являются подходящими для профилактики, улучшения и лечения множества болезненных состояний, которые соответствуют критерию для серопротекции для каждого из указанных компонентов вакцины.

Преимущества данного изобретения включают поливалентную вакцину, которая может обеспечить защиту от широкого спектра заболеваний и инфекций безопасным и эффективным способом. Вакцина данного изобретения обеспечивает иммуногенность к различным заболеваниям и инфекциям без какой-либо интерференции любого из антигенов, которые присутствуют в вакцине. Таким образом, однократное введение будет обеспечивать иммуногенность против различных заболеваний и инфекций, делая вакцину более удовлетворяющей пациентов. Поскольку однократное введение будет обеспечивать иммунитет против ряда инфекций и заболеваний, стоимость вакцинации будет снижена. Вакцина данного изобретения будет предпочтительной в том смысле, что она будет снижать число визитов в центр вакцинации, а также число введений, которые необходимо осуществить для ряда различных заболеваний и инфекций. Этот аспект данного изобретения будет делать ее более пригодной и предпочтительной особенно для более молодой группы населения, которая нуждается в вакцинации для обеспечения иммунитета к большому числу инфекций и заболеваний. Таким образом, данное изобретение обеспечивает вакцину, которая является более приемлемой.

Определения

Выражение ’полностью жидкая’, как используется в данном документе для описания вакцины данного изобретения, относится к состоянию вакцины, где все компоненты вакцины находятся в жидком состоянии, и нет такого компонента вакцины, который обеспечен в лиофилизированной или любой другой форме, так чтобы его необходимо было смешивать с другими компонентами вакцины до введения ее субъекту.

Выражение ’белок-носитель’, как используется в данном документе, описывает белковый компонент, с которым капсулярный полисахарид (Hib), используемый в вакцине конъюгирован так, чтобы превращать Т-клеточно независимый полисахарид в Т-клеточно зависимый антиген.

Выражение ’адъювант’, как используется в данном документе, описывает неантигенный компонент вакцины, который усиливает иммунный ответ антигенов вакцины путем облегчения контакта между антигеном и иммунной системой путем влияния на тип и качество иммунного ответа, образованного против антигена. Адъювант вызывает пролонгированные иммунные ответы против антигенов, а также может служить для снижения токсичности определенных антигенов или обеспечения растворимости для определенных антигенов.

Выражение ’стабильная’, используемое здесь для описания вакцины данного изобретения, означает, что каждый из антигенов композиции вакцины имеет эффективность/иммуногенность большую, чем та, которая установлена в качестве нормального допустимого предела, после инкубации вакцины при 5±3°C в течение, по меньшей мере, 1, предпочтительно 12 и наиболее предпочтительно 24 месяцев.

Выражение ’по сути’, используемое здесь для описания количества адсорбции или соединения Hib на любой адъювант, в выражении ’Hib, по сути, не адсорбированный на каком-либо адъюванте’, означает, что адсорбция Hib на любом адъюванте является меньше чем 15%, и предпочтительно меньше чем 10%. Hib антиген не подвергается какому-либо из этапов, так чтобы целенаправленно адсорбироваться на любом адъюванте; некоторая адсорбция может иметь место, возможно, вследствие контакта между антигеном и адъювантом и не является целенаправленной.

Выражение ’от приблизительно’, используемое здесь для описания количества каждого из компонентов, присутствующих в вакцине данного изобретения, означает количество указанного компонента вакцины, который присутствует в количествах предпочтительно ±20%, более предпочтительно ±10% и наиболее предпочтительно ±5% установленного количества для этого конкретного компонента.

Выражение ’приблизительно’, как используется в данном документе для описания времени перемешивания компонентов смеси в ходе способа получения вакцины данного изобретения, составляет предпочтительно ±20%, более предпочтительно ±10% и наиболее предпочтительно ±5% установленного значения.

Выражение ’иммунологически активный’, используемое здесь в отношении комбинированной вакцины данного изобретения, означает, что вакцина при введении субъекту способна вызывать антитела против каждого антигена указанной комбинации так, чтобы защитить вакцинируемого пациента от соответствующих заболеваний или инфекций.

Выражение ’соединение или адсорбирование’, используемое здесь в отношении антигенов комбинированной вакцины данного изобретения, относится к любой форме физического связывания между антигеном и адъювантом.

Вакцина данного изобретения

Данное изобретение обеспечивает композицию стабильной комбинированной вакцины, в которой все компоненты вакцины присутствуют вместе в жидкой форме в одной ампуле.

Один аспект данного изобретения обеспечивает полностью жидкую стабильную пятивалентную вакцину, включающую антигены дифтерии (D), столбняка (Т), ацеллюлярного коклюша (aP), Haemophilus influenzae (Hib) и полиовируса (IPV), где Hib, по сути, не адсорбируют на каком-либо адъюванте.

Другой аспект данного изобретения относится к полностью жидкой стабильной шестивалентной вакцине, включающей антигены дифтерии (D), столбняка (Т), ацеллюлярного коклюша (aP), Haemophilus influenzae (Hib) и гепатита (Hep) и полиовируса (IPV), где D, Т и аР антигены адсорбируют на фосфате алюминия и Hep антиген адсорбируют на гидроксиде алюминия.

Данное изобретение дополнительно обеспечивает, что антигены дифтерии (D), столбняка (Т) и ацеллюлярного коклюша (аР) адсорбируют только на фосфате алюминия, а не на гидроксиде алюминия.

Согласно аспекту данного изобретения Hib антиген конъюгирован с белком-носителем, выбранным из группы, включающей анатоксин столбняка (ТТ), анатоксин дифтерии (DT), CRM 197 и наружный белок мембраны Neisseria meningitides или любые их эквиваленты, или любыми другими известными носителями.

Согласно другому аспекту данного изобретения Hib антиген, по сути, не адсорбируют на каком-либо адъюванте.

Согласно другому аспекту данного изобретения Hib антиген в вакцине данного изобретения получают из капсулярного полисахарида Hib b штамма.

Один аспект данного изобретения обеспечивает то, что Hep антиген адсорбируют на гидроксиде алюминия, а не на фосфате алюминия.

Один дополнительный аспект данного изобретения касается Hep антигена, полученного из поверхностного антигена гепатита В (HBsAg); т.е. поверхностного антигена Hep В штамма.

Согласно другому аспекту данного изобретения IPV штаммы представляют собой один или более Salk штаммов, которые могут быть выбраны из группы, включающей: Mahoney тип 1, MEF тип 2 и Saukett тип 3, или один или более Sabin штаммов, выбранных из группы, включающей Sabin типы 1 и 2.

Другой аспект данного изобретения обеспечивает то, что вакцина данного изобретения включает 2- феноксиэтанол в качестве консерванта в составе.

Дополнительно, другой аспект данного изобретения относится к способу производства комбинированных вакцин данного изобретения.

Другой аспект данного изобретения касается композиции комбинированных вакцин данного изобретения, так что каждый из антигенов присутствует в количестве в вакцине так, чтобы обеспечить защитный иммунный ответ против указанного антигена.

Антигены вакцины данного изобретения

Дифтерию вызывает Corynebacterium diphtheriae, грамположительная неспорообразующая аэробная бактерия. Этот организм экспрессирует кодируемый профагом экзотоксин АДФ-рибозилирования (’токсин дифтерии’), который может быть обработан (например, используя формальдегид) для получения анатоксина. Этот анатоксин уже не является токсичным, но все еще остается антигенным и способен стимулировать продукцию специфических антител против токсина после инъекции. Препарат антигена дифтерии, используемый в вакцине данного изобретения, предпочтительно включает анатоксин дифтерии.

Столбняк вызывает Clostridium tetani, грамположительная, спорообразующая бактерия. Этот организм экспрессирует эндопептидазу (’токсин столбняка’), который может быть обработан для получения анатоксина, который уже не является токсичным. Однако он все еще остается антигенным и способен стимулировать продукцию специфических антител против токсина после инъекции. Препарат антигена столбняка, используемый в вакцине данного изобретения, предпочтительно включает анатоксин столбняка.

Коклюш или судорожный кашель вызывает Bordetella pertussis. Антигены ацеллюлярного коклюша (аР) могут быть получены из любого из известных штаммов Bordetella pertussis. Для цели данного изобретения аР антигены могут предпочтительно быть получены из штамма Tohama В. pertussis. Любые приемлемые среды могут быть использованы для выделения, культивирования, пролиферации и ферментации культуры. Для цели данного изобретения предпочтительно может быть использована модифицированная среда Stainer-Scholte. Антигены ацеллюлярного коклюша (aP), используемые в вакцине данного изобретения включают, по меньшей мере, один или более антигенов, выбранных из группы, включающей коклюшный токсин (РТ), филаментный гемагглютинин (FHA), пертактин (PRN или Р69), и FIM (фимбриальные антигены- 1, 2 или 3). Однако согласно предпочтительному варианту осуществления данного изобретения препарат аР антигена, используемый в вакцине данного изобретения, включает PT, FHA и PRN (Р69) антигены.

Haemophilus influenzae представляет собой грамотрицательную коккобактерию, которая вызывает инвазивные переносимые кровью инфекции и менингит. Согласно одному варианту осуществления данного изобретения Hib антиген, который получают из капсулярного полисахарида, может быть конъюгирован или связан с белками-носителями. Белки-носители, используемые для конъюгации Hib антигена, могут быть выбраны из группы, включающей анатоксин столбняка (ТТ), анатоксин дифтерии (DT), CRM 197 и наружный белок мембраны Neisseria meningitides или любые их эквиваленты. Другие подходящие белки-носители включают, но, не ограничиваясь, синтетические пептиды, белки теплового шока, коклюшные белки, цитокины, лимфокины, гормоны, факторы роста, искусственные белки, включающие эпитопы многочисленных CD4+ Т клеток человека от различных полученных из патогенов антигенов, такие как N19, белок D из Н. influenzae, белок PspA поверхности пневмококка, пневмолизин, белки захвата железа, токсин А или В из С. difficile и S. agalactiae белков. Препарат антигена Hib, используемый в вакцине данного изобретения, включает Hib антиген, предпочтительно конъюгированный или связанный с анатоксином столбняка.

Полисахаридный конъюгат может быть получен любой известной методикой связывания. Например, полисахарид может быть связан посредством тиоэфирной связи. Этот способ конъюгации основан на активации полисахарида с помощью 1-циано-4-диметиламинопиридин тетрафторбората (CDAP) для образования сложного эфира цианата. Активированный полисахарид может, таким образом, быть соединен напрямую или посредством спейсерной группы с аминогруппой на белке-носителе. Конъюгаты могут также быть получены с помощью способов прямого восстановительного аминирования. Другой способ включает соединение полисахарида, активированного цианистым бромидом (CNBr), дериватизированного с гидразидом адипиновой кислоты (ADH) с белком-носителем с помощью карбодиимидной конденсации. Любой другой известный способ может быть использован для получения полисахаридного конъюгата, используемого в вакцине данного изобретения.

Согласно варианту осуществления данного изобретения Hib антиген, по сути, не адсорбируют на каком-либо адъюванте; предпочтительно, степень адсорбции Hib антигена с адъювантом составляет не более чем 15%; более предпочтительно, степень адсорбции Hib антигена с адъювантом составляет не более чем 10%.

Согласно другому варианту осуществления данное изобретение касается Hib антигена, который не подвергается целенаправленной или преднамеренной адсорбции на каком-либо адъюванте.

Согласно другому предпочтительному варианту осуществления данного изобретения Hib антиген получают из капсулярного полисахарида Hib b штамма.

Гепатит вызывают различные штаммы гепатита, такие как А, В, С, D, Е, F или G. Вирус гепатита В (HBV) является одним из главных агентов, которые вызывают вирусный гепатит. Вирион HBV состоит из внутреннего ядра, окруженного внешней белковой оболочкой или капсидом. Главный компонент капсида представляет собой белок, известный как HBV поверхностный антиген или, чаще, ’HBsAg’. Когда этот антиген вводят вакцинируемому пациенту, он стимулирует продукцию анти-HBsAg антител, которые защищают от HBV инфекции. Согласно одному предпочтительному аспекту данного изобретения препарат антигена гепатита (Hep), используемый в вакцине данного изобретения, включает Hep антигены, полученные из поверхностного антигена штамма гепатита В (HBsAg).

Для производства вакцины HBsAg может быть получен либо очищением антигена в крупнодисперсной форме из плазмы носителей хронического гепатита В, так как большие количества HBsAg синтезируются в печени и высвобождаются в кровоток в ходе HBV инфекции, либо экспрессией белка рекомбинантными ДНК способами. HBsAg для применения в вакцине данного изобретения может быть получен любым способом.

Полиомиелит вызывают вирусы полиомиелита. Вакцина данного изобретения может включать Sabin (Sabin 1 и/или Sabin 2) или Salk штаммы полиовируса. Согласно одному предпочтительному варианту осуществления данного изобретения вакцина данного изобретения включает Salk штаммы. Существует 3 типа Salk штаммов, которые могут вызывать полиомиелит. Три типа являются сходными и вызывают идентичные симптомы, но они антигенно очень отличаются, и инфицирование одним типом не защищает от инфицирования другими. Salk полиовирус включает 3 штамма - тип 1 (например, Mahoney штамм), тип 2 полиовируса (например, MEF-I штамм) и тип 3 полиовируса (например, Saukett штамм). Согласно предпочтительному варианту осуществления данного изобретения вакцина данного изобретения может включать один или более из указанных Salk штаммов.

Полиовирусы могут быть выращены в клеточной культуре. Клеточная линия Vero, которая представляет собой стабильную клеточную линию, полученную из почки обезьяны, может быть использована для выращивания полиовирусов. После выращивания вирионы могут быть очищены, используя уже известные методики. Может быть проведена инактивация вирусов. Количества полиовируса типично выражают в 'DU' единице ("D-антигенная единица"). Препарат антигена IPV, используемый в получении вакцины данного изобретения, предпочтительно получают так, чтобы он содержал один или более штаммов, которые используются в производстве вакцины. Этот нерасфасованный препарат затем используют для составления вакцины данного изобретения.

Неантигенные компоненты