Композиции кожных наполнителей

Иллюстрации

Показать все

Группа изобретений относится к области косметологии, а именно к композиции кожного наполнителя для лечения морщин на коже, содержащей гиалуроновую кислоту, поперечно-сшитую с диаминным сшивателем, выбираемым из лизина или метилового эфира лизина, и карбодиимидный связывающий агент; к способу получения указанной композиции, согласно которому проводят поперечное сшивание гиалуроновой кислоты с диаминным сшивателем, выбираемым из лизина или метилового эфира лизина, в присутствии карбодиимидного связывающего агента; а также к способу лечения тонких линий на коже, включающему введение данной композиции в дермальную область пациента. Группа изобретений обеспечивает инъецируемую композицию кожного наполнителя, которая не приводит к посинению после введения в область кожи пациента, не является цитотоксичной, имеет хорошие механические свойства и обладает улучшенной биосовместимостью. 3 н. и 8 з.п. ф-лы, 18 пр., 6 табл., 2 ил.

Реферат

РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

[001] В настоящей заявке заявляется приоритет по предварительной заявке на патент США №61/568618, поданной 8 декабря 2011 года, которая частично является продолжением заявки на патент США №13/615193, поданной 13 сентября 2012 года, в которой заявляется приоритет по предварительной заявке на патент США №61/534780, поданной 14 сентября 2011 года, и которая частично является продолжением заявки на патент США с серийным номером №13/593313, поданной 23 августа 2012 года, в которой заявляется приоритет по предварительной заявке на патент США №61/527335, поданной 25 августа 2011 года, и которая частично является продолжением заявки на патент США с серийным номером 13/486754, поданной 1 июня 2012 года, в которой заявляется приоритет по предварительной заявке на патент США №61/493309, поданной 3 июня 2011 года, и полное содержание каждого из этих документов включено в настоящий документ посредством специальной ссылки.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

[002] Настоящее изобретение относится, в основном, к композициям кожных наполнителей, например, но не ограничиваясь этим, к композициям кожных наполнителей, которые эффективны для лечения мелких морщин на коже.

[003] Старение кожи представляет собой прогрессирующее явление, возникающее с течением времени и которое может усиливаться под действием факторов образа жизни, таких как употребление алкоголя, курение табака и воздействие солнечного света. Старение кожи лица может характеризоваться атрофией, провисанием и ожирением. Атрофия относится к масштабному снижению толщины кожной ткани. Слабость подкожных тканей приводит к избытку кожи и опущению и приводит к возникновению впалых щек и век глаз. Ожирение относится к увеличению избыточного веса за счет припухлости нижней части лица и шеи. Эти изменения обычно сопровождаются сухостью, снижением эластичности и грубой текстурой.

[004] Гиалуроновая кислота (ГК), известная также как гиалуронан, представляет собой несульфатированный гликозаминогликан, который широко распространен в организме человека в соединительной, эпителиальной и нервной тканях. Гиалуроновая кислота распространена в различных слоях кожи, где она выполняет множество функций, таких как, например, обеспечение хорошего увлажнения, содействие организации внеклеточного матрикса, действие в качестве наполняющего материала; а также участвует в механизмах восстановления ткани. Однако с возрастом снижается количество гиалуроновой кислоты, коллагена, эластина и других матриксных полимеров, присутствующих в коже. Например, многократное воздействие ультрафиолетового света, например от солнца, вызывает уменьшение выработки гиалуронана дермальными клетками, а также увеличение скорости его разрушения. Такое уменьшение материалов приводит к различным кожным состояниям, таким как, например, сморщивание, пустотелость, снижение содержание влаги, и другим нежелательным состояниям, которые способствуют возникновению признаков старения. Инъецируемые кожные наполнители успешно используют для лечения старения кожи. Эти наполнители могут заменять потерянные эндогенные матриксные полимеры или усиливать/улучшать функцию существующих матриксных полимеров для лечения этих кожных состояний.

[005] У людей время удержания немодифицированной гиалуроновой кислоты составляет несколько дней, поскольку полимерные цепи легко разрушаются ферментами и свободными радикалами, находящимися в организме. Имеющиеся в продаже кожные наполнители, как правило, получают поперечным сшиванием гидроксильных групп ГК с помощью химических сшивателей. Доступны коммерческие гели кожных наполнителей, которые содержат гиалуроновую кислоту, синтезированную с дивинилсульфоном (DVS), диглицидиловым эфиром 1,4-бутандиола (BDDE) или 1,2,7,8-диэпоксиоктаном (DEO). Эффект мягкости и наращивания ткани, обеспечиваемый кожными наполнителями, можно контролировать изменением плотности поперечного сшивания различными сшивателями.

[006] Для увеличения времени удержания линейные цепи гиалуроновой кислоты обычно сшивают низкомолекулярным сшивателем типа BDDE. Поперечное сшивание выполняют при очень высоком pH (>12) и при температурах около 50°C. Было описано, что константа скорости разложения ГК увеличивается примерно в 100 раз при повышении температуры и pH с 40 до 60°C и с 7 до 11 соответственно. Этот недостаток приводит к необходимости поиска новых сшивателей и химизма поперечного сшивания для ГК, которые обеспечат более мягкие условия.

[007] В настоящем изобретении поперечно-сшитую ГК сшивают связывающим агентом и используют полиаминные сшиватели, которые образуют амидные связи с карбоксильными функциональными группами цепей ГК. В настоящем изобретении сшивание может быть выполнено при низких значениях pH, например, при pH от 4 до 7 и при температурах между 20 и 37°C, в таких условиях разрушение ГК минимально.

[008] В публикации Bioconjugate Chemistry, 2010, 21, 240-247: Joem Y., et al., Effect of cross-linking reagents for hyaluronic acid hydrogel dermal fillers on tissue augmentation and regeneration, описано применение HMDA для получения поперечно-сшитого ГК кожного наполнителя для наращивания ткани. Полное содержание этой публикации включено в настоящий документ посредством специальной ссылки.

[009] Феномен Тиндаля представляет собой неблагоприятное явление, возникающее у некоторых пациентов, которым вводят кожные наполнители на основе гиалуроновой кислоты (ГК). Феномен Тиндаля характеризуется появлением посинения участков кожи, в которые инъецировали кожный наполнитель, что представляет собой видимую гиалуроновую кислоту, наблюдаемую через прозрачный эпидермис. Клинические отчеты позволяют предположить, что способ введения наполнителя и свойства кожи могут влиять на проявление этого неблагоприятного явления. Наполнители с высокой густотой и упругостью успешно используются для коррекции областей лица, таких как носогубные складки, щеки и подбородок, без какого-либо опасения изменения цвета лица, поскольку эти материалы инъецируют в средние и глубокие слои кожи. Однако при использовании этих наполняющих материалов для коррекции поверхностных, мелких морщин, например слезной борозды, межбровных морщин, морщин в уголках глаз, линий улыбки или лба, или при ошибочном использовании слишком поверхностно в верхних слоях кожи, зачастую наблюдается посинение кожи. Это явление, которое предположительно является результатом феномена Тиндаля, оставляет полупостоянное изменение цвета участков нанесения, и иногда исчезает только после введения гиалуронидазы для разложения материала наполнителя. Следовательно, феномен Тиндаля более распространен у пациентов, проходивших лечение поверхностных мелких морщин. Продолжительное проявление феномена Тиндала, как правило, в течение нескольких месяцев, пока гель сохраняется в коже, является причиной большинства жалоб пациентов.

[0010] Гели кожных наполнителей на основе ГК были специально созданы для лечения «мелких» морщин, находящихся вокруг слезной борозды, на лбу, в уголках глаз, межбровных морщин и так далее. Многие демонстрируют феномен Тиндаля при слишком поверхностной инъекции. Хотя эти гели созданы так, что они обладают низким модулем упругости за счет легкого поперечного сшивания линейных цепей ГК небольшим количеством BDDE и уменьшения конечной концентрации ГК в геле, большинство из имеющихся в продаже гелей для мелких морщин все еще демонстрируют феномен Тиндаля при поверхностном инъецировании, и, к сожалению, in vivo продолжительность действия этих гелей крайне ограничена.

[0011] Все еще существует необходимость в лучших кожных наполнителях для лечения и улучшения внешнего вида стареющей кожи.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ

[0012] В настоящем изобретении описаны композиции кожных наполнителей и способы составления композиций для получения кожных наполнителей на основе ГК с использованием нового химизма поперечного сшивания. Было обнаружено, что действие многих из описанных здесь наполняющих гелей настоящего изобретения длится in vivo существенно дольше, чем у существующих имеющихся в продаже гелей. В некоторых аспектах настоящего изобретения композиции могут быть введены в сосочковый слой дермы без посинения кожи или по меньшей мере без значительного или заметного посинения. В некоторых аспектах настоящего изобретения композиции кожного наполнителя являются оптически прозрачными и могут быть использованы для улучшения внешнего вида кожи, например для добавления объема, полноты и уменьшения морщин и тонких линий, не вызывая посинения, известного как «феномен Тиндаля», который в некоторых случаях связан с обычными оптически прозрачными кожными наполнителями.

[0013] В одном аспекте настоящего изобретения представлены терапевтические композиции кожных наполнителей длительного действия, которые, в основном, содержат биосовместимый полимер, например компонент гиалуроновой кислоты, поперечно сшитый с диаминным или полиаминным сшивателем.

[0014] В другом аспекте такие композиции являются, в основном, оптически прозрачными и демонстрируют уменьшенное или отсутствие видимого посинения при введении в участок кожи пациента.

[0015] Представлены также способы получения инъецируемых композиций кожного наполнителя. В одном из вариантов реализации указанный способ включает стадии поперечного сшивания гиалуроновой кислоты (ГК) с полиаминным сшивателем с помощью карбодиимидного связывающего агента.

[0016] В одном аспекте указанный сшиватель состоит по меньшей мере из трех и максимально из восьми ПЭГ цепей, расходящихся из центральной точки, и каждая цепь содержит концевую аминогруппу.

[0017] Сшиватель может содержать ПЭГ цепи, например ПЭГ цепи, имеющие по меньшей мере одно этиленгликольное звено и не более 55 этиленгликольных звеньев.

[0018] В одном аспекте сшиватель представляет собой метиловый эфир лизина.

[0019] В другом аспекте сшиватель представляет собой 3-[3-(3-амино-пропокси)-2,2-бис(3-амино-пропоксиметил)-пропокси]-пропиламин (4 АА) и содержится в концентрации от около 10 до около 50 мкМ.

[0020] В одном аспекте ГК поперечно связана вместе с карбодиимидным связывающим агентом, например с водорастворимым связывающим агентом, например с водорастворимым карбодиимидом.

[0021] В другом варианте реализации связывающий агент представляет собой 1-этил-3-[3-диметиламинопропил]карбодиимида гидрохлорид (EDC) и содержится в концентрации от около 20 до 100 мкМ.

[0022] Связывающий агент может быть использован в сочетании с водорастворимым активирующим агентом, например N-гидроксисукцинимидом (NHS) или N-гидроксисульфосукцинимидом (сульфоNHS), содержащимся в концентрации от около 5 до около 25 мкМ.

[0023] В одном из вариантов реализации полимер представляет собой полисахарид, например гиалуроновую кислоту. Гиалуроновая кислота включает поперечно-сшивающий компонент и может дополнительно включать несшивающий компонент. Добавка может включать витамин, например витамин C, например стабилизированную форму витамина С, или производное витамина C, например 2-глюкозид L-аскорбиновой кислоты (AA2G), аскорбил-3-аминопропилфосфат (Vitagen) или натрия аскорбилфосфат (АА2Р).

[0024] В одном аспекте настоящего изобретения добавка представляет собой производное витамина, которое ковалентно сопряжено с полимером посредством подходящего способа реакции, например этерификации, амидирования или эстерификации.

[0025] Композиция может быть, в основном, оптически прозрачной. Композиции, как правило, имеют значение G' от около 20 до около 150 Па, например не более чем около 150 Па и, например, не менее чем около 20 Па.

[0026] В другом аспекте настоящего изобретения представлены способы лечения мелких морщин на коже пациента. В одном из вариантов реализации указанный способ включает стадии введения в кожу пациента композиции, содержащей компонент гиалуроновой кислоты, поперечно сшитый с диаминным или полиаминным сшивателем; и карбодиимидный связывающий агент. Указанная композиция может быть, в основном, оптически прозрачной и демонстрировать уменьшенное или незаметное посинение при введении в участок кожи пациента.

[0027] В другом аспекте настоящего изобретения представлены способы улучшения эстетического внешнего вида лица, которые, как правило, включают стадии введения в участок кожи пациента практически оптически прозрачной композиции кожного наполнителя, которая демонстрирует отсутствие или незначительный феномен Тиндаля. Указанная композиция может быть получена с помощью стадий поперечного сшивания гиалуроновой кислоты (ГК) с диаминным или полиаминным сшивателем в присутствии карбодиимидного связывающего агента.

[0028] В другом аспекте настоящего изобретения представлены способы уменьшения видимости тонких линий в тонких участках кожи пациента, при этом указанный способ, в основном, включает введение пациенту композиции кожного наполнителе на глубину не более чем около 1 мм практически оптически прозрачной композиции кожного наполнителя на основе гиалуроновой кислоты, содержащей компонент гиалуроновой кислоты, поперечно сшитый с диаминным или полиаминным сшивателем.

[0029] В некоторых вариантах реализации композицию вводят инъекциями поверхностно, то есть на глубину не более чем около 0,8 мм, не более чем около 0,6 мм или не более чем около 0,4 мм.

[0030] В другом аспекте настоящего изобретения представлена композиция кожного наполнителя, которая, в основном, содержит компонент гиалуроновой кислоты, поперечно-сшитый с диаминным или полиаминным сшивателем в присутствии карбодиимидного связывающего агента. Указанная композиция может иметь концентрацию гиалуроновой кислоты от около 14 до около 30 мг/мл. Гиалуроновая кислота может быть низкомолекулярной гиалуроновой кислотой, например гиалуроновой кислотой, имеющей среднюю молекулярную массу менее чем около 100 КДа, менее чем около 800 КДа, менее чем около 600 КДа или менее чем около 400 КДа. Эти композиции могут быть особенно полезны и эффективны при лечении складок и морщин, включая мелкие морщины или поверхностные линии на коже, например даже на очень тонкой коже, например на коже, имеющей толщину не более чем около 1 мм. В некоторых вариантах реализации композиции настоящего изобретения имеют продолжительность действия по меньшей мере 3 месяца, по меньшей мере 6 месяцев или до одного года после их введения в кожу.

[0031] Эти и другие аспекты и преимущества настоящего изобретения легче понятны и оценены со ссылкой на следующие чертежи и подробное описание.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

[0032] Фигура 1 иллюстрирует изображения кожи млекопитающего, которому инъецировали композицию в соответствии с одним из аспектов настоящего изобретения и два промышленных кожных наполнителя.

[0033] Фигура 2 иллюстрирует диаграмму, показывающую продолжительность действия in vivo композиций в соответствии с одним из аспектов настоящего изобретения, по сравнению с промышленным кожным наполнителем.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

[0034] Гиалуроновая кислота (ГК) представляет собой природный глюкозамингликан, используемый для составления композиции кожных наполнителей, которые используются, в основном, для уменьшения морщин и придания объема лицу. У людей время удерживания немодифицированной гиалуроновой кислоты составляет несколько дней, поскольку полимерные цепи легко разрушаются ферментами и свободными радикалами, находящимися в организме. Для улучшения времени удерживания линейные цепи гиалуроновой кислоты обычно сшивают с низкомолекулярным сшивателем типа BDDE.

[0035] Настоящее изобретение относится отчасти к кожным наполнителям, содержащим поперечно-сшитую ГК с небольшими диаминными и полиаминными сшивателями, которые образуют амидные связи с карбоксильными функциональными группами ГК цепей. В идеальных условиях EDC активирует группы карбоновой кислоты в ГК, а активированные группы карбоновой кислоты затем взаимодействуют с аминами. В одном из аспектов поперечное сшивание выполняют при pH от около 4 до около 7 и при температурах от около 20 до около 37°C. Было обнаружено, что в этих условиях разрушение ГК минимально.

[0036] Для поперечного сшивания ГК для различных применений использовали линейные диаминные сшиватели типа гексаметилендиамина (HMDA), лизин, метиловый эфир лизина. Проблема с поперечным сшиванием ГК за счет химизма EDC заключается в конкурентном образовании сложноэфирных связей между группами карбоновой кислоты и гидроксильными группами ГК даже в присутствии этих полиаминов.

[0037] Сложноэфирные связи очень подвижны и легко гидролизуются при высоких температурах. Гидрогели ГК, полученные сложноэфирным сшиванием, обычно не прочные и не могут быть стерилизованы влажным паром.

[0038] Проблема заключалась в минимизации образования сложноэфирных связей при поперечном, опосредованном EDC сшивании ГК с помощью аминов. В одном подходе использовали высокое исходное соотношение NH2:HA, а также перед добавлением EDC к гидратированной ГК добавляли амин. Видимо, это увеличивает количество образованных амидных связей относительно количества сложноэфирных связей. Предполагается, что, поскольку аминогруппы являются лучшими нуклеофилами, чем гидроксильные группы, то, предположительно, может быть образовано большее количество амидных связей. Другой подход заключается в выполнении поперечного связывания при высоком pH для минимизации образования сложноэфирных связей, поскольку эти связи менее стабильны при более высоких pH. Один из способов заключается в использовании очень низкой концентрации ГК в реакции, например от около 1 до около масс. 5%. При таких низких концентрациях цепи ГК находятся далеко друг от друга, минимизируя возможность близкого контакта гидроксильных и активированных карбоксильных групп для возникновения реакции. Успех этих способов для улучшения стабильности геля был лишь ограниченным. Более того, некоторые из этих способов обусловливают появление других проблем. Например, эффективность EDC значительно уменьшается при высоком pH, поэтому поперечное сшивание ГК при высоком pH сильно снижает сшивающую структурную прочность геля, и, хотя сшивание при очень низкой концентрации ГК должно снижать образование сложноэфирных связей, оно усиливает неэффективное сшивание диаминов, что приводит к получению гелей с слишком большим количеством подвешенных аминогрупп.

[0039] В соответствии с одним из вариантов реализации настоящего изобретения представлены способы составления композиций для получения стабильных гидрогелей на основе ГК с химизмом EDC. Вместо использования линейных низкомолекулярных веществ, имеющих на концах аминогруппы, в качестве сшивателя используют «4-лучевой ПЭГ амин», 3-[3-(3-amino propoxy)-2,2-бис(3-амино-пропоксиметил)-пропокси]-пропиламин или 4 АА (см. ниже).

[0040] В отличие от диаминов, имеющих лишь две аминные функциональности, 4 АА имеет четыре аминные функциональные группы, которые все могут быть использованы в поперечном сшивании. В отличие от диаминов, когда молекула диамина в лучшем случае может сшивать максимум две цепи ГК, одна молекула 4 АА может сшивать максимум 4 цепи ГК. Было обнаружено, что использование 4 АА обладает более высокой сшивающей эффективностью, что приводит к образованию прочных гидрогелей, которые легко стерилизуются влажным паром без опасения структурного повреждения геля.

[0041] В настоящем документе представлены также способы получения ГК гидрогелей, поперечносшитых с HMDA, и способы получения ГК-лизиновых гидрогелей с помощью метилового эфира лизина в качестве сшивателя. Эти гели биосовместимы и могут быть легко выдавлены через шприц и иглу для минимально-инвазивной имплантации.

[0042] В одном аспекте настоящего изобретения представлены композиции кожных наполнителей для уменьшения видимости тонких линий или поверхностных морщин на лице.

[0043] Указанная композиция, как правило, содержит биосовместимый полимер, например полисахарид, такой как гиалуроновая кислота, поперечно-сшитый с диаминным или полиаминным сшивателем. Указанная композиция является практически оптически прозрачной и демонстрирует уменьшенное или отсутствие видимого посинения при введении в участок кожи пациента.

[0044] Полимер может быть выбран из группы полимеров, состоящей из белков, пептидов и полипептидов, полилизина, коллагенов, про-коллагенов, эластинов и ламининов.

[0045] Полимер может быть выбран из группы полимеров, состоящей из синтетических полимеров с гидроксильными, аминными и карбоксильными функциональными группами: поли(виниловый спирт), полиэтиленгликоль, поливиниламин, полиаллиламин, дезацетилированный полиакриламид, полиакриловая кислота и полиметакриловая кислота. Полимер может быть выбран из группы полимеров, состоящей из ветвистых или разветвленных полимеров, включая ветвистые полиолы и ветвистые полиамины. Полимер может быть выбран из группы полимеров, состоящей из твердых тел с гидроксильными, аминными и карбоксильными функциональными группами.

[0046] Полимер может быть полисахаридом, например выбранным из группы полисахаридов, включая крахмал и его производные; декстран и его производные, целлюлозу и ее производные; хитин и хитозан, а также альгинат и его производные.

[0047] В иллюстративном варианте реализации настоящего изобретения полимер представляет собой гликозаминогликан. Композиция гидрогеля, описанная в настоящем документе, может дополнительно содержать два или более различных гликозаминогликановых полимеров. При использовании в настоящем документе термин «гликозаминогликан» является синонимом «ГАГ» и «мукополисахарида» и относится к длинным неразветвленным полисахаридам, состоящим из повторяющихся дисахаридных звеньев. Повторяющееся звено состоит из гексозы (шестиатомного сахара) и гексуроновой кислоты, связанной с гексозамином (шестиатомным сахаром, содержащим азот), и ее фармацевтически приемлемых солей. Члены семейства ГАГ могут варьироваться по типу звеньев гексозамина, гексзоы или гексуроновой кислоты, которые они содержат, такие как, например, глюкуроновая кислота, идуроновая кислота, галактоза, галактозамин, глюкозамин), и также могут варьироваться по геометрии гликозидной связи. Любой гликозаминогликановый полимер пригоден в композициях гидрогеля, описанных в настоящем документе, при условии, что указанный гликозаминогликановый полимер улучшает состояние кожи. Неограничивающие примеры гликозаминогликаны включают хондроитина сульфат, дерматана сульфат, кератана сульфат, гиалуронан. Неограничивающие примеры приемлемой соли гликозаминогликанов включают натриевые соли, калиевые соли, магниевые соли, кальциевые соли и их комбинации. Гликозаминогликан и его результирующие полимеры, пригодные в композициях гидрогеля и способах, описанных в настоящем документе, описаны, например, в публикациях Piron and Tholin, Polysaccharide Crosslinking, Hydrogel Preparation, Resulting Polysaccharides(s) and Hydrogel(s), uses Thereof, публикация патента США 2003/0148995; Lebreton, Cross-Linking of Low and High Molecular Weight Polysaccharides Preparation of Injectable Monophase Hydrogels; Lebreton, Viscoelastic Solutions Containing Sodium Hyaluronate and Hydroxypropyl Methyl Cellulose, Preparation and Uses, публикация патента США 2008/0089918; Lebreton, Hyaluronic Acid-Based Gels Including Lidocaine, публикация патента США 2010/0028438; и Polysaccharides and Hydrogels thus Obtained, публикация патента США 2006/0194758; а также Di Napoli, Composition and Method for Intradermal Soft Tissue Augmentation, публикация Международного патента WO 2004/073759, каждая из которых включена в настоящий документ посредством ссылки в полном объеме. ГАГ, применимые в композициях гидрогеля и способах, описанных в настоящем документе, доступны в продаже, такие как, например, кожные наполнители на основе гиалуронана JUVEDERM®, JUVEDERM® 30, JUVEDERM® Ultra, JUVEDERM® Ultra Plus, JUVEDERM® Ultra XC и JUVEDERM® Ultra Plus XC (Allergan Inc, Ирвин, штат Калифорния). В Таблице 1 представлены иллюстративные ГАГ.

[0048] В аспектах настоящего описания представлена, помимо прочего, композиция гидрогеля, содержащая гиалуронановый полимер. При использовании в настоящем документе термин «полимер гиалуроновой кислоты» является синонимом «ГК полимера», «полимера гиалуроновой кислоты» и «гиалуронатного полимера» и относится к анионному не сульфатированному гликозаминогликановому полимеру, содержащему дисахаридные звенья, которые сами содержат D-глюкуроновую кислоту и D-N-ацетилглюкозаминные мономеры, связанные вместе чередующимися β-1,4 и β-1,3 гликозидными связями, а также их фармацевтически приемлемые соли. Гиалуронановые полимеры могут быть выделены из животных и неживотных источников. Полимеры гиалуронана могут варьироваться по размеру от около 5000 до около 20000000 Да. Любой гиалуронановый полимер применим в композициях, описанных в настоящем документе, при условии, что указанный гиалуронан улучшает состояние кожи. Неограничивающие примеры фармацевтически приемлемых солей гиалуронана включают гиалуронан натрия, гиалуронан калия, гиалуронан магния, гиалуронан кальция и их комбинации.

[0049] В аспектах настоящего описания представлена, помимо прочего, композиция гидрогеля, содержащая поперечно-сшитый гликозаминогликановый полимер. При использовании в настоящем документе термин «поперечно-сшитый» относится к внутримолекулярным связям, соединяющим отдельным молекулы полимеры или мономерные звенья в более стабильную структуру типа геля. Поэтому поперечно-связанный гликозаминогликановый полимер имеет по меньшей мере одну межмолекулярную связь, соединяющую по меньшей мере одну отдельную полимерную молекулу с другой. Сшивание гликозаминогликановых полимеров обычно приводит к образованию гидрогеля. Такие гидрогели обладают высокой вязкостью и требуют существенных усилий для их выдавливания через тонкую иглу.

[0050] Гликозаминогликановые полимеры, описанные в настоящем документе, могут быть сшиты с помощью диальдегидных и дисульфидных сшивающих агентов, включая, без ограничения, полифункциональные поперечно-сшивающие агенты на основе ПЭГ, дивинилсульфоны, диглицидиловые эфиры и бис-эпоксиды, бискарбодиимид. Неограничивающие примеры гиалуронановые поперечно-сшивающих агентов включают полифункциональные поперечно-сшивающие агенты на основе ПЭГ, такие как тетраглицидиловый эфир пентаэритрита (PETGE), дивинилсульфон (DVS), диглицидиловый эфир 1,4-бутандиола (BDDE), 1,2-бис(2,3-эпоксипропокси)этилен (EGDGE), 1,2,7,8-диэпоксиоктан (DEO), (фениленбис-(этил)-карбодиимид и 1,6-гексаметиленбис(этилкарбодиимид), адипиновый дигидразид (ADH), бис(сульфосукцинимидил)суберат (BS) гексаметилендиамин (HMD А), 1-(2,3-эпоксипропил)-2,3-эпоксициклогексан, лизин, метиловый эфир лизина или их комбинации.

[0051] В других аспектах настоящего изобретения сшивающий агент представляет собой диаминный или полиаминный сшиватель. В другом аспекте сшиватель состоит по меньшей мере из трех и максимально из восьми ПЭГ цепей, исходящих из центральной точки, каждая цепь имеет концевую аминогруппу. Сшиватель может содержать ПЭГ цепи, имеющие по меньшей мере одно этиленгликольное звено и не более чем 55 этиленгликольных звеньев.

[0052] Другие применимые поперечно-сшивающие агенты описаны в публикациях Stroumpoulis and Tezel, Tunably Crosslinked Polysaccharide Compositions, заявка на патент США 12/910466, поданная 22 октября 2010 года, которая включена в настоящий документ посредством ссылки в полном объеме. Неограничивающие примеры способов поперечного сшивания гликозаминогликановых полимеров описаны, например, в публикации, гликозаминогликановые полимеры, применимые в композициях и способах, описанных в настоящем документе, описаны, например, в публикации Piron and Tholin, Polysaccharide Crosslinking, Hydrogel Preparation, Resulting Polysaccharides(s) and Hydrogel(s), uses Thereof, публикация патента США 2003/0148995; Lebreton, Cross-Linking of Low and High Molecular Weight Polysaccharides Preparation of Injectable Monophase Hydrogels; Lebreton, Viscoelastic Solutions Containing Sodium Hyaluronate and Hydroxypropyl Methyl Cellulose, Preparation and Uses, публикация патента США 2008/0089918; Lebreton, Hyaluronic Acid-Based Gels Including Lidocaine, публикация патента США 2010/0028438; и Polysaccharides and Hydrogels thus Obtained, публикация патента США 2006/0194758; а также Di Napoli, Composition and Method for Intradermal Soft Tissue Augmentation, публикация Международного патента WO 2004/073759, каждая из которых включена в настоящий документ посредством ссылки в полном объеме.

[0053] В аспектах настоящего описания представлена, помимо прочего, композиция гидрогеля, содержащая поперечно-сшитый гликозаминогликановый полимер, имеющий определенную степень сшивания. При использовании в настоящем документе термин «степень поперечного сшивания» относится к проценту мономерных звеньев гликозаминогликанового полимера, таких как, например, дисахаридные мономерные звенья гиалуронана, которые связаны с поперечно-связывающим агентом. Степень сшивания выражают как процентное массовое отношение сшивающего агента к гликозаминогликану. Степень сшивания в некоторых преимущественных вариантах реализации настоящего изобретения составляет от около 3 до около 12%, например, от около 5 до около 10%. Сшивающий агент содержится в композиции в концентрации от около 1 до около 100 мкМ, например от около 10 до около 50 мкМ.

[0054] В одном из вариантов реализации композиция гидрогеля содержит поперечно-связанный гликозаминогликановый полимер, например сшитую гиалуроновую кислоту, при этом поперечно-сшитый гликозаминогликановый полимер содержится в композиции в концентрации, например, от около 10 до около 40 мг/мл, например от около 18 до около 30 мг/мл. В некоторых вариантах реализации указанные композиции имеют общую концентрацию гиалуроновой кислоты около 22 мг/мл, около 23 мг/мл, около 24 мг/мл или около 25 мг/мл.

[0055] В аспектах настоящего описания представлена, помимо прочего, композиция гидрогеля, содержащая гиалуронановые полимеры с низкой молекулярной массой, гиалуронановые полимеры с высокой молекулярной массой или гиалуронановые полимеры с низкой и высокой молекулярной массой.

[0056] При использовании в настоящем документе термин «высокая молекулярная масса» в отношении «гиалуронана» относится к гиалуронановым полимерам, имеющим среднюю молекулярную массу 100000 Да или более. Неограничивающие примеры гиалуронановых полимеров с высокой молекулярной массой включают гиалуронановые полимеры с массой около 1500000 Да, около 2000000 Да, около 2500000 Да, около 3000000 Да, около 3500500 Да, около 4000000 Да, около 4500000 Да и около 500000 Да. При использовании в настоящем документе термин «низкую молекулярную массу» в отношении «гиалуронана» относится к гиалуронановым полимерам, имеющим среднюю молекулярную массу менее 1000000 Да. Неограничивающие примеры гиалуронановых полимеров с низкой молекулярной массой включают гиалуроновые полимеры с массой около 200000 Да, около 300000 Да, около 400000 Да, около 500000 Да, около 600000 Да, около 700000 Да, около 800000 Да и около 900000 Да.

[0057] В одном из вариантов реализации композиция содержит поперечно-сшитые гиалуронановые полимеры с низкой молекулярной массой. В аспектах этого варианта реализации композиция содержит поперечно-сшитые гиалуронановые полимеры, имеющие среднюю молекулярную массу, например, около 100000 Да, около 200000 Да, около 300000 Да, около 400000 Да, около 500000 Да, около 600000 Да, около 700000 Да, около 800000 Да или около 900000 Да. В других аспектах этого варианта реализации композиция содержит поперечно-сшитые гиалуронановые полимеры, имеющие среднюю молекулярную массу, например, не более 100000 Да, не более 200000 Да, не более 300000 Да, не более 400000 Да, не более 500000 Да, не более 600000 Да, не более 700000 Да, не более 800000 Да, не более 900000 Да или не более 950000 Да. В других аспектах этого варианта реализации композиция содержит поперечно-сшитые гиалуронановые полимеры, имеющие среднюю молекулярную массу, например, от около 100000 до около 500000 Да, от около 200000 до около 500000 Да, от около 300000 до около 500000 Да, от около 400000 до около 500000 Да, от около 500000 до около 950000 Да, от около 600 до около 950000 Да, от около 700000 до около 950000 Да, от около 800000 до около 950000 Да, от около 300000 до около 600000 Да, от около 300000 до около 70000 Да, от около 300000 до около 800000 Да или от около 400000 до около 700000 Да.

[0058] В другом варианте реализации композиция содержит поперечно-сшитые гиалуронановые полимеры с высокой молекулярной массой. В аспектах этого варианта реализации композиция содержит поперечно-сшитые гиалуронановые полимеры, имеющие среднюю молекулярную массу, например, около 1000000 Да, около 1500000 Да, около 2000000 Да, около 2500000 Да, около 3000000 Да, около 3500000 Да, около 4000000 Да, около 4500000 Да или около 50000000 Да. В других аспектах этого варианта реализации композиция содержит поперечно-сшитые гиалурнонановые полимеры, имеющие среднюю молекулярную массу, например, по меньшей мере 1000000 Да, по меньшей мере 150000 Да, по меньшей мере 200000 Да, по меньшей мере 2500000 Да, по меньшей мере 3000000 Да, по меньшей мере 350000 Да, по меньшей мере 4000000 Да, по меньшей мере 450000 Да или по меньшей мере 5000000. В других аспектах этого варианта реализации композиция содержит поперечно-сшитые гиалуронановые полимеры, имеющие среднюю молекулярную массу, например, от около 1000000 до около 500000 Да, от около 1500000 до около 5000000 Да, от около 2000000 до около 5000000 Да, от около 2500000 до около 5000000 Да, от около 2000000 до около 3000000 Да, от около 2500000 до около 3000000 Да.

[0059] В другом варианте реализации композиция содержит поперечно-сшитые гиалуронановые полимеры, при этом указанные поперечно-сшитые гиалуронановые полимеры содержат комбинацию гиалуронановых полимеров с высокой молекулярной массой и гиалуронановых полимеров с низкой молекулярной массой, в различных соотношениях. В аспектах этого вариантах реализации композиция содержит поперечно-сшитые гиалуронановые полимеры, в которых указанные поперечно-сшитые гиалуронановые полимеры содержат комбинацию гиалуронановых полимеров с высокой молекулярной массой и гиалуронановых полимеров с низкой молекулярной массой в соотношении около 20:1, около 15:1, около 10:1, около 5:1, около 1:1, около 1:5 около 1:10, около 1:15 или около 1:20.

[0060] В аспектах настоящего описания представлена, помимо прочего, композиция гидрогеля, содержащая несшитый гликозаминогликановый полимер. При использовании в настоящем документе термин «несшитый» относится к отсутствию межмолекулярных связей, соединяющих отдельные гликозаминогликановые полимерные молекулы или мономерные цепи. Поэтому несшитый гликозаминогликановый полимер не связан с каким-либо другим гликозаминогликановым полимером межмолекулярной связью. В аспектах этого варианта реализации композиция содержит несшитый полимер хондрдоитина сульфата, несшитый полимер дерматана сульфата, несшитый полимер кератана сульфата, несшитый полимер гепарана, несшитый полимер гепарана сульфата или несшитый полимер гиалуронана. Несшитые гликозаминогликановые полимеры являются водорастворимыми и зачастую смешиваются с композицией гидрогеля на основе гликозаминогликанового полимера в качестве смазывающего вещества для облегчения выдавливания композиции через тонкую иглу.

[0061] В одном из вариантов реализации композиция содержит несшитый гликозаминогликановый полимер, при этом указанный несшитый гликозаминогликановый полимер содержится в концентрации, например, около 2 мг/г, около 3 мг/г, около 4 мг/г, около 5 мг/г, около 6 мг/г, около 7 мг/г, около 8 мг/г, около 9 мг/г, около 10 мг/г, около 11 мг/г, около 12 мг/г, около 13 мг/г, около 13,5 мг/г, около 14 мг/г, около 15 мг/г, около 16 мг/г, около 17 мг/г, около 18 мг/г, около 19 мг/г, около 20 мг/г, около 40 мг/г или около 60 мг/г. В других аспектах этого варианта реализации композиция содержит несшитый гликозаминогликан, где указанный несшитый гликозаминогликан содержится в концентрации, например, по меньшей мере 1 мг/г, по меньшей мере 2 мг/г, по меньшей мере 3 мг/г, по меньшей мере 4 мг/г, по меньшей мере 5 мг/г, по меньшей мере 10 мг/г, по меньшей мере 15 мг/г, по меньшей мере 20 мг/г, по меньшей мере 25 мг/г, по меньшей мере 35 мг/г или по меньшей мере 40 мг/г. В других аспектах этого вариантах реализации композиция содержит несшитый гликозаминогликан, при этом указанный гликозаминогликан содержится в концентрации, например, не более 1 мг/г, не более 2 мг/кг, не более 3 мг/кг, не более 4 мг/г, не более 10 мг/г, не более 15 мг/г, не более 20 мг/г или не более 25 мг/г. В других аспектах этого варианта реализации композиция содержит несшитый гликозаминогликан, при этом указанный несшитый гликозаминогликан содержится в концентрации, например, от около 1 до около 60 мг/г, от около 10 до около 40 мг/г, от около 7,5 до около 19,5 мг/г, от около 8,5 до около 18,5 мг/г, от около 9,5 до около 17,5 мг/г, от около 10,5 до около 16,5 мг/г, от около 11,5 до около 15,5 мг/г или от около 12,5 до около 14,5 м