Фосфоспецифичные антитела, распознающие тау

Фосфоспецифичные антитела, распознающие тау

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Данная заявка заявляет приоритет Европейской Патентной Заявки № ЕР 12163319.2, поданной 5 апреля 2012 года, и Международной Патентной заявки № РСТ/ЕР 2011/067604, поданной 7 октября 2011 года, раскрытие каждой из которых, таким образом, включено в полном объеме посредством ссылки.

Настоящее изобретение относится к способам и составам для терапевтического и диагностического применения в лечении заболеваний и расстройств, которые вызваны или связаны с нейрофибриллярными сплетениями. В частности, изобретение относится к антителам, которые специфично распознают и связываются с патологическими фосфорилированными конформерами белка тау, и к способам и составам, содержащим указанные антитела, для терапевтического и диагностического применения в лечении таупатий, в том числе, болезни Альцгеймера (БА).

Нейрофибриллярные сплетения и нейропильные нити (НН) представляют собой основные невропатологические признаки болезни Альцгеймера (БА). Они состоят из связанного с микротрубочками белка тау, который подвергается посттрансляционным модификациям, в том числе, фосфорилированию, дезамидированию и изомеризации, при аспарагинильных или аспартильных остатках. Они образуются в результате агрегации гиперфосфорилированного белка тау и его конформеров. Данная патология объединяет БА со многими нейродегенеративными таупатиями, в особенности, с некоторыми видами фронтотемпоральной деменции (ФТД).

Белок Тау представляет собой легко растворимый, «развернутый от природы» белок, который авидно связывается с микротрубочками (МТ), способствуя их сборке и стабильности. МТ очень важен для цитоскелетной целостности нейронов - и, таким образом, для надлежащего образования и функционирования нейронных цепей, т.е., для обучения и памяти. Связывание тау с МТ контролируется динамическим фосфорилированием и дефосфорилированием, что продемонстрировано, в основном, in vitro и в клетках, не относящихся к нейроналу. За счет большого количества возможных сайтов фосфорилирования (>80), точный вклад каждого из них и идентификация ответственных киназ in vivo остается в значительной степени неопределенным.

В мозге больного БА, патология тау развивается позже, и, вероятно, в ответ на амилоидную патологию, что составляет сущность гипотезы амилоидного каскада. Она основывается на исследованиях с участием больных БА и синдромом Дауна и подтверждается исследованиями на трансгенных мышах с комбинированной амилоидной и тау патологией (Lewis et al., 2001; Oddo et al., 2004; Ribe et al., 2005; Muyllaert et al, 2006; 2008; Terwel et al, 2008).

Точное протекание во времени обеих патологий у пациентов-людей с БА, а также механизмы, которые связывают амилоидную и тау патологии, остаются в значительной степени неясными, но предполагается, что они включают активацию нейронала, путей проведения сигнала, которые воздействуют на или посредством GSK3 и cdk5 как основных «тау-киназ» (см. обзор в Muyllaert et al, 2006, 2008).

Гипотеза о том, что таупатия не является невинным побочным эффектом, а является основным патологическим фактором при БА, основана на очевидных генетических, патологических и экспериментальных наблюдениях, которые полностью подтверждают друг друга:

- в семейных случаях раннего возникновения БА, которые являются результатом мутаций прекурсора амилоидного белка (ПАБ) или пресенилина, облигатной патогенной причиной является аккумуляция амилоида, но неизменно патология включает коллатеральную таупатию, идентичную наблюдаемой в спорадических случаях позднего возникновения БА;

- тяжесть когнитивной дисфункции и деменции коррелирует с таупатией, а не с амилоидной патологией, примером чего явилось несколько недавно проведенных клинических испытаний фазы 1&2, которые включали PIB-PET визуализацию амилоида и идентифицировали множество «ложноположительных» случаев - индивидуумов с нормальной когнитивной функцией и высоким содержанием амилоида в мозге;

- при семейной ФТД, таупатия провоцируется мутантным тау и вызывает нейродегенерацию непосредственно, без амилоидной патологии;

- на экспериментальной мышиной модели когнитивные дефекты, вызванные амилоидной патологией, практически полностью исчезают в отсутствие белка тау (Roberson et al, 2007).

Сочетанные аргументы поддерживают гипотезу о том, что белок тау играет ведущую роль в наследственной передаче когнитивной дисфункции при БА и сопутствующих нейродегенеративных таупатиях.

Новый многообещающий способ лечения БА состоит в пассивной иммунотерапии специфичными антителами (mAb) с целью удаления амилоидных пептидов и их агрегатов, для которых предполагается нейротоксичность или синаптотоксичность.

Предусматривается, что иммунотерапия, нацеленная на патологию тау, как раскрывается в данном описании, будет противодействовать патологическим конформерам белка тау, которые доказанно или постулированно вызывают синаптическую дисфункцию и нейродегенерацию.

Другие терапевтические подходы, нацеленные на белок тау, малочисленны и включают, главным образом:

- ингибиторы киназ, предположительно, увеличивающих фосфорилирование тау до патологических уровней;

- соединения, которые блокируют цитоплазматическую агрегацию гиперфосфорилированного белка тау.

Указанные подходы с точки зрения специфичности и эффективности содержат различные изъяны - проблема, которая объединяет их с попытками модифицировать метаболизм ПАБ и амилоида, и все это подчеркивает важность продолжения поиска дополнительных возможностей лечения, в том числе, иммунотерапии против тау. Действительно, нацеленная на амилоид иммунотерапия продемонстрировала дополнительное влияние на патологию тау на доклинической мышиной модели с сочетанной БА-подобной патологией, хотя агрегаты тау присутствовали (Oddo et al., 2004).

Некоторые сомнения касаются осуществимости иммунотерапевтического подхода к внутриклеточному белку тау. Им противостоят недавние экспериментальные исследования на модели таупатии у мышей (Asuni et al., 2007). Они продемонстрировали уменьшение патологических сплетений и функциональное улучшение в результате вакцинации полученным из белка тау фосфо-пептидом. Эти данные подтверждают предыдущие отчеты относительно иммунотерапии, нацеленной на α-синуклеин на моделях болезни Паркинсона (БП) и деменции с тельцами Леви (Masliah et al., 2005, 2011) и супероксиддисмутазу в модели амиотрофного латерального склероза (АЛС) (Urushitiani et al., 2007). Указаные заболевания представляют собой примеры, в которых внутриклеточные белки приводят к синаптическим дефектам и нейродегенерации по механизмам, пока до конца не ясным.

Существует неудовлетворенная потребность в пассивной и/или активной иммунотерапии, противодействующей патологическим конформерам белка, которые доказанно или предположительно вызывают нейродегенеративные расстройства, такие как амилоидная патология при БА, вызванная, например, внутринейрональными агрегатами гиперфосфорилированного белка тау, которые так же типичны для БА, как и амилоид.

Настоящее изобретение направлено на указанную неудовлетворенную потребность и раскрывает связывающиеся белки, которые распознают и связываются с основными патологическими фосфо-эпитопами белка тау. В частности, в настоящем изобретении раскрываются специфичные антитела против линейных и конформационных, простых и сложных фосфо-эпитопов на белке тау, конкретно на агрегированном белке тау, который считается ответственным за синапто- и нейро-токсичность при таупатиях, включая БА.

Соответственно, настоящее изобретение в одном из вариантов реализации относится к связывающемуся пептиду или белку или его функциональной части, конкретно к антителу, конкретно к моноклональному антителу или его функциональной части, причем связывающийся пептид или белок или антитело распознает и специфично связывается с фосфо-эпитопом на белке Тау млекопитающего, конкретно человека, или на его фрагменте, конкретно с фосфо-эпитопом на агрегированном белке Тау, конкретно с патологическим конформером белка тау, но в одном из вариантов реализации не связывается с соответствующим нефосфорилированным эпитопом и/или неродственными эпитопами, притом, что указанный связывающийся пептид или антитело обладает высокой аффинностью связывания с растворимым, олигомерным и нерастворимым фосфорилированным белком Тау и способен обнаруживать и/или модулировать уровни растворимого, олигомерного и нерастворимого фосфорилированного белка Тау in vivo, конкретно в мозге, конкретно с константой диссоциации по меньшей мере 10 нМ, конкретно по меньшей мере 8 нМ, конкретно по меньшей мере 5 нМ, конкретно по меньшей мере 2 нМ, конкретно по меньшей мере 1 нМ, конкретно по меньшей мере 500 пМ, конкретно по меньшей мере 400 пМ, конкретно по меньшей мере 300 пМ, конкретно по меньшей мере 200 пМ, конкретно по меньшей мере 100 пМ, конкретно по меньшей мере 50 пМ.

В частности, константа диссоциации находится в интервале от 2 нМ до 80 нМ, конкретно от 2 нМ до 40 нМ, конкретно от 2 нМ до 10 нМ.

В определенном аспекте данного описания предложено антитело или его функциональный фрагмент, причем указанное антитело или фрагмент антитела связывается с фосфо-эпитопом, имеющим или содержащим последовательность аминокислот VYKSPVVSGDTSPRHL (SEQ ID NO: 62) (Tay aa 393-408 SEQ ID NO: 67, например, раскрытую в Табл. 1), содержащую фосфорилированный Ser в положениях 396 (pS396) и 404 (pS404).

Во втором варианте настоящее изобретение относится к связывающемуся пептиду или белку или его функциональной части, конкретно к антителу, конкретно моноклональному антителу или его функциональной части, конкретно связывающемуся пептиду или антителу в соответствии с любым из предыдущих вариантов реализации, причем связывающийся пептид или антитело распознает и специфично связывается с фосфо-эпитопом на белке Tay млекопитающего, конкретно человека, или на его фрагменте, конкретно с патологическим конформером белка тау, но в одном из вариантов реализации не связывается с соответствующим нефосфорилированным эпитопом и/или неродственными эпитопами, и при этом, указанный связывающийся пептид или антитело обладает высокой аффинностью связывания с растворимым, олигомерным и нерастворимым фосфорилированным белком Тау и способен обнаруживать и/или модулировать уровни растворимого, олигомерного и нерастворимого фосфорилированного белка Тау in vivo, а также демонстрирует константу скорости ассоциации 10⁴ М^-1 с^-1 или более, конкретно в интервале 3-5×10⁴ М^-1 с^-1 или более, конкретно 10^-5 М^-1 с^-1 или более; конкретно 2-9×10⁵ М^-1 с^-1 или более; конкретно 10⁶ М^-1 c^-1 или более, конкретно 1-4×10⁶ М^-1 с^-1 или более, конкретно 10⁷ М^-1 с^-1 или более.

В частности, константа скорости ассоциации находится в интервале от 1,6×10³ до 5×10⁵, конкретно в интервале от 2,4×10⁴ до 5×10⁵, в интервале от 3×10³ до 5×10⁵.

В третьем варианте реализации настоящее изобретение относится к связывающемуся пептиду или белку или его функциональной части, конкретно к антителу, конкретно моноклональному антителу или его функциональной части, конкретно связывающемуся пептиду или антителу в соответствии с любым из предыдущих вариантов реализации, причем связывающийся пептид или антитело распознает и специфично связывается с фосфо-эпитопом на белке Тау млекопитающего, конкретно человека, или на его фрагменте, конкретно с патологическим конформером белка тау, но в одном из вариантов реализации не связывается с соответствующим нефосфорилированным эпитопом и/или неродственными эпитопами, притом, что указанный связывающийся пептид или антитело обладает высокой аффинностью связывания с растворимым, олигомерным и нерастворимым фосфорилированным белком Тау и способен обнаруживать и/или модулировать уровни растворимого, олигомерного и нерастворимого фосфорилированного белка Тау in vivo, а также обладает высокой аффинностью связывания, с константой диссоциации по меньшей мере 4 нМ и константой скорости ассоциации 10⁵ М^-1 с^-1 или более, конкретно константой диссоциации по меньшей мере 3 нМ и константой скорости ассоциации 10⁶ М^-1 с^-1 или более, конкретно константой диссоциации по меньшей мере 2 нМ и константой скорости ассоциации 10⁴ М^-1 с^-1 или более, конкретно константой диссоциации по меньшей мере 1 нМ и константой скорости ассоциации 10⁵ М^-1 с^-1 или более, конкретно константой диссоциации по меньшей мере 200 пМ и константой скорости ассоциации 10⁵ М^-1 с^-1 или более, конкретно константой диссоциации по меньшей мере на 100 пМ и константой скорости ассоциации 10 М^-1 с^-1 или более.

В частности, константа диссоциации находится в интервале от 2 нМ до 80 нМ, и константа скорости ассоциации находится в интервале от 1,6×10³ до 5×10⁵, конкретно константа диссоциации находится в интервале от 2 нМ до 40 нМ, и константа скорости ассоциации находится в интервале от 2,4×10⁴ до 5×10⁵, конкретно константа диссоциации находится в интервале от 2 нМ до 10 нМ, и константа скорости ассоциации находится в интервале от 3×10³ до 5×10⁵.

Один из вариантов реализации (4) настоящего изобретения относится к связывающемуся пептиду или белку или его функциональной части, конкретно к антителу, конкретно моноклональному антителу или его функциональной части, конкретно связывающемуся пептиду или антителу в соответствии с любым из предыдущих вариантов реализации, причем связывающийся пептид или антитело распознает и специфично связывается с фосфо-эпитопом на белке Тау млекопитающего, конкретно человека, или на его фрагменте, конкретно с патологическим конформером белка тау, но в одном из вариантов реализации не связывается с соответствующим нефосфорилированным эпитопом и/или неродственными эпитопами, притом, что указанный связывающийся пептид или антитело обладает высокой аффинностью связывания с растворимым, олигомерным и нерастворимым фосфорилированным белком Тау и способен обнаруживать и/или модулировать уровни растворимого, олигомерного и нерастворимого фосфорилированного белка Тау in vivo, и при этом, указанный связывающийся пептид или антитело связывается с эпитопом на белке млекопитающего, конкретно на белке Тау человека, как представлено в SEQ ID NO: 67, выбранным из группы, состоящей из Тау аа 393-401, содержащего фосфорилированный Ser в положении 396 (pS396), Tay aa 396-401 содержащего фосфорилированный Ser в положении 396 (pS396), Тау аа 394-400 содержащего фосфорилированный Ser в положении 396 (pS396), Тау аа 402-406 содержащего фосфорилированный Ser в положении 404 (pS404) и Тау аа 393-400 содержащего фосфорилированный Ser в положении 396 (pS396).

Один из вариантов реализации (5) относится к связывающемуся пептиду или антителу в соответствии с любым из предыдущих вариантов реализации, причем указанный пептид связывается с эпитопом на белке млекопитающего, конкретно на белке Тау человека, и конкретно на белке Тау человека, показанном в SEQ ID NO: 67, который содержит Тау аа 393-401, содержащий фосфорилированный Ser в положении 396 (pS396).

Один из вариантов реализации (6) относится к связывающемуся пептиду или антителу в соответствии с любым из предыдущих вариантов реализации, причем указанный пептид связывается с эпитопом на белке млекопитающего, конкретно на белке Тау человека, и конкретно на белке Тау человека, показанном в SEQ ID NO: 67, который содержит Тау аа 396-401, содержащий фосфорилированный Ser в положении 396 (pS396).

Один из вариантов реализации (7) относится к связывающемуся пептиду или антителу в соответствии с любым из предыдущих вариантов реализации, причем указанный пептид связывается с эпитопом на белке млекопитающего, конкретно на белке Тау человека, и конкретно на белке Тау человека, показанном в SEQ ID NO: 67, который содержит Тау аа 394-400, содержащий фосфорилированный Ser в положении 396 (pS396).

Один из вариантов реализации (8) относится к связывающемуся пептиду или антителу в соответствии с любым из предыдущих вариантов реализации, причем указанный пептид связывается с эпитопом на белке млекопитающего, конкретно на белке Тау человека, и конкретно на белке Тау человека, показанном в SEQ ID NO: 67, который содержит Тау аа 402-406, содержащий фосфорилированный Ser в положении 404 (pS404).

Один из вариантов реализации (9) относится к связывающемуся пептиду или антителу в соответствии с любым из предыдущих вариантов реализации, причем указанный пептид связывается с эпитопом на белке млекопитающего, конкретно на белке Тау человека, и конкретно на белке Тау человека, показанном в SEQ ID NO: 67, который содержит Тау аа 393-400, содержащий фосфорилированный Ser в положении 396 (pS396).

Один из вариантов реализации (10) настоящего изобретения относится к связывающемуся пептиду или белку или его функциональной части, конкретно к антителу, конкретно моноклональному антителу или его функциональной части, конкретно связывающемуся пептиду или антителу в соответствии с любым из предыдущих вариантов реализации, причем связывающийся пептид или антитело распознает и специфично связывается с фосфо-эпитопом на белке Тау млекопитающего, конкретно человека, или на его фрагменте, конкретно с патологическим конформером белка тау, но в одном из вариантов реализации не связывается с соответствующим нефосфорилированным эпитопом и/или неродственными эпитопами, притом, что указанный связывающийся пептид или антитело обладает высокой аффинностью связывания с растворимым, олигомерным и нерастворимым фосфорилированным белком Тау и способен обнаруживать и/или модулировать уровни растворимого, олигомерного и нерастворимого фосфорилированного белка Тау in vivo, и при этом, указанный связывающийся пептид или антитело содержит первый домен связывания, содержащий последовательность CDR1 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 73, CDR2 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 74, и CDR3 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 75, или последовательность аминокислот по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, конкретно по меньшей мере на 85%, конкретно по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, конкретно по меньшей мере на 95%, конкретно по меньшей мере на 96%, конкретно по меньшей мере на 97%, конкретно по меньшей мере на 98%, конкретно по меньшей мере на 99% или 100% идентичную ей, и/или второй домен связывания, который содержит последовательность CDR1 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 70, или последовательность аминокислот по меньшей мере на 95%, конкретно 98%, конкретно 99% идентичную ей, CDR2 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 71, или последовательность аминокислот по меньшей мере на 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, или 99% идентичную ей, и CDR3 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 72, или последовательность аминокислот по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, конкретно по меньшей мере на 85%, конкретно по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, конкретно по меньшей мере на 95%, конкретно по меньшей мере на 96%, конкретно по меньшей мере на 97%, конкретно по меньшей мере на 98%, конкретно по меньшей мере на 99% или 100% идентичную ей.

В одном из аспектов данного описания раскрыто антитело или его функциональный фрагмент, причем указанное антитело или его фрагмент распознает и специфично связывается с фосфо-эпитопом на белке Тау млекопитающего или на его фрагменте, и при этом, указанное антитело или его фрагмент содержит:

(а) первый домен связывания, содержащий CDR1, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 73, CDR2, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 74, и CDR3, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 75; и/или

(б) второй домен связывания, который содержит последовательность аминокислот, содержащую CDR1, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 70, CDR2, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 71, и CDR3, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 72.

Один из вариантов реализации (11) настоящего изобретения относится к связывающемуся пептиду или белку или его функциональной части, конкретно к антителу, конкретно моноклональному антителу или его функциональной части, конкретно связывающемуся пептиду или антителу в соответствии с любым из предыдущих вариантов реализации, причем связывающийся пептид или антитело распознает и специфично связывается с фосфо-эпитопом на белке Тау млекопитающего, конкретно человека, или на его фрагменте, конкретно с патологическим конформером белка тау, но в одном из вариантов реализации не связывается с соответствующим нефосфорилированным эпитопом и/или неродственными эпитопами, притом, что указанный связывающийся пептид или антитело обладает высокой аффинностью связывания с растворимым, олигомерным и нерастворимым фосфорилированным белком Тау и способен обнаруживать и/или модулировать уровни растворимого, олигомерного и нерастворимого фосфорилированного белка Тау in vivo, и при этом, указанный связывающийся пептид или антитело содержит первый домен связывания, содержащий последовательность CDR1 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 81, CDR2 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 82, и CDR3 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 83, или последовательность аминокислот по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, конкретно по меньшей мере на 85%, конкретно по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, конкретно по меньшей мере на 95%, конкретно по меньшей мере на 96%, конкретно по меньшей мере на 97%, конкретно по меньшей мере на 98%, конкретно по меньшей мере на 99% или 100% идентичную ей, и/или второй домен связывания, который содержит последовательность CDR1 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 78, CDR2 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 79, и CDR3 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 80, или последовательность аминокислот по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, конкретно по меньшей мере на 85%, конкретно по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, конкретно по меньшей мере на 95%, конкретно по меньшей мере на 96%, конкретно по меньшей мере на 97%, конкретно по меньшей мере на 98%, конкретно по меньшей мере на 99% или 100% идентичную ей.

В одном из аспектов данного описания раскрыто антитело или его функциональный фрагмент, причем указанное антитело или его фрагмент распознает и специфично связывается с фосфо-эпитопом на белке Тау млекопитающего или на его фрагменте, притом, что указанное антитело или его фрагмент содержит:

(а) первый домен связывания, содержащий CDR1, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 81, CDR2, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 82, и CDR3, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 83; и/или

(б) второй домен связывания, который содержит последовательность аминокислот, содержащую CDR1, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 78, CDR2, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 79, и CDR3, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 80.

Один из вариантов реализации (12) настоящего изобретения относится к связывающемуся пептиду или белку или его функциональной части, конкретно к антителу, конкретно моноклональному антителу или его функциональной части, конкретно связывающемуся пептиду или антителу в соответствии с любым из предыдущих вариантов реализации, причем связывающийся пептид или антитело распознает и специфично связывается с фосфо-эпитопом на белке Тау млекопитающего, конкретно человека, или на его фрагменте, конкретно с патологическим конформером белка тау, но в одном из вариантов реализации не связывается с соответствующим нефосфорилированным эпитопом и/или неродственными эпитопами, притом, что указанный связывающийся пептид или антитело обладает высокой аффинностью связывания с растворимым, олигомерным и нерастворимым фосфорилированным белком Тау и способен обнаруживать и/или модулировать уровни растворимого, олигомерного и нерастворимого фосфорилированного белка Тау in vivo, и при этом, указанный связывающийся пептид или антитело содержит первый домен связывания, содержащий последовательность CDR1 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 93, CDR2 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 94, и CDR3 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 95, или последовательность аминокислот по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, конкретно по меньшей мере на 85%, конкретно по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, конкретно по меньшей мере на 95%, конкретно по меньшей мере на 96%, конкретно по меньшей мере на 97%, конкретно по меньшей мере на 98%, конкретно по меньшей мере на 99% или 100% идентичную любому из упомянутых выше CDR, и/или второй домен связывания, содержащий последовательность CDR1 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 12, CDR2 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 90, и CDR3 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 91, или последовательность аминокислот по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, конкретно по меньшей мере на 85%», конкретно по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, конкретно по меньшей мере на 95%, конкретно по меньшей мере на 96%, конкретно по меньшей мере на 97%, конкретно по меньшей мере на 98%, конкретно по меньшей мере на 99% или 100% идентичную любому из упомянутых выше CDR.

В определенном аспекте данного описания раскрыто антитело или его функциональная часть, причем указанное антитело или его фрагмент распознает и специфично связывается с фосфо-эпитопом на белке Тау млекопитающего или на его фрагменте, и при этом, указанное антитело или его фрагмент содержит:

(а) первый домен связывания, содержащий CDR1, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 93, CDR2, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 94, и CDR3, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 95; и/или

(б) второй домен связывания, который содержит последовательность аминокислот, содержащую CDR1, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 12, CDR2, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 90, и CDR3, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 91.

Один из вариантов реализации (13) настоящего изобретения относится к связывающемуся пептиду или белку или его функциональной части, конкретно к антителу, конкретно моноклональному антителу или его функциональной части, конкретно связывающемуся пептиду или антителу в соответствии с любым из предыдущих вариантов реализации, причем связывающийся пептид или антитело распознает и специфично связывается с фосфо-эпитопом на белке Тау млекопитающего, конкретно человека, или на его фрагменте, конкретно с патологическим конформером белка тау, но в одном из вариантов реализации не связывается с соответствующим нефосфорилированным эпитопом и/или неродственными эпитопами, притом, что указанный связывающийся пептид или антитело обладает высокой аффинностью связывания с растворимым, олигомерным и нерастворимым фосфорилированным белком Тау и способен обнаруживать и/или модулировать уровни растворимого, олигомерного и нерастворимого фосфорилированного белка Тау in vivo, и при этом, указанный связывающийся пептид или антитело содержит первый домен связывания, содержащий последовательность CDR1 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 101, CDR2 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 102, и CDR3 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 103, или последовательность аминокислот по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, конкретно по меньшей мере на 85%, конкретно по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, конкретно по меньшей мере на 95%, конкретно по меньшей мере на 96%, конкретно по меньшей мере на 97%, конкретно по меньшей мере на 98%, конкретно по меньшей мере на 99% или 100% идентичную любому из упомянутых выше CDR, и/или второй домен связывания, содержащий последовательность CDR1 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 98, CDR2 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 99, и CDR3 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 100, или последовательность аминокислот по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, конкретно по меньшей мере на 85%, конкретно по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, конкретно по меньшей мере на 95%, конкретно по меньшей мере на 96%, конкретно по меньшей мере на 97%, конкретно по меньшей мере на 98%, конкретно по меньшей мере на 99% или 100% идентичную любому из упомянутых выше CDR.

В одном из аспектов данного описания раскрыто антитело или его функциональный фрагмент, причем указанное антитело или его фрагмент распознает и специфично связывается с фосфо-эпитопом на белке Тау млекопитающего или на его фрагменте, и при этом, указанное антитело или его фрагмент содержит:

(а) первый домен связывания, содержащий CDR1, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 101, CDR2, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 102, и CDR3, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 103; и/или

(б) второй домен связывания, который содержит последовательность аминокислот, содержащую CDR1, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 98, CDR2, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 99, и CDR3, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 100.

Один из вариантов реализации (14) настоящего изобретения относится к связывающемуся пептиду или белку или его функциональной части, конкретно к антителу, конкретно моноклональному антителу или его функциональной части, конкретно связывающемуся пептиду или антителу в соответствии с любым из предыдущих вариантов реализации, причем связывающийся пептид или антитело распознает и специфично связывается с фосфо-эпитопом на белке Тау млекопитающего, конкретно человека, или на его фрагменте, конкретно с патологическим конформером белка тау, но в одном из вариантов реализации не связывается с соответствующим нефосфорилированным эпитопом и/или неродственными эпитопами, притом, что указанный связывающийся пептид или антитело обладает высокой аффинностью связывания с растворимым, олигомерным и нерастворимым фосфорилированным белком Тау и способен обнаруживать и/или модулировать уровни растворимого, олигомерного и нерастворимого фосфорилированного белка Тау in vivo, и при этом, указанный связывающийся пептид или антитело содержит первый домен связывания, содержащий последовательность CDR1 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 106, CDR2 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 107, и CDR3 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 108, или последовательность аминокислот по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, конкретно по меньшей мере на 85%, конкретно по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, конкретно по меньшей мере на 95%, конкретно по меньшей мере на 96%, конкретно по меньшей мере на 97%, конкретно по меньшей мере на 98%, конкретно по меньшей мере на 99% или 100% идентичную любому из упомянутых выше CDR, и/или второй домен связывания, содержащий последовательность CDR1 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 89, CDR2 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 115, и CDR3 с последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 91, или последовательность аминокислот по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, конкретно по меньшей мере на 85%, конкретно по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, конкретно по меньшей мере на 95%, конкретно по меньшей мере на 96%, конкретно по меньшей мере на 97%, конкретно по меньшей мере на 98%, конкретно по меньшей мере на 99% или 100% идентичную любому из упомянутых выше CDR.

В конкретном аспекте данного описания раскрыто антитело или его функциональный фрагмент, причем указанное антитело или его фрагмент распознает и специфично связывается с фосфо-эпитопом на белке Тау млекопитающего или на его фрагменте, притом, что указанное антитело или его фрагмент содержит:

(а) первый домен связывания, содержащий CDR1, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 106, CDR2, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 107, и CDR3, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 108; и/или

(б) второй домен связывания, который содержит последовательность аминокислот, содержащую CDR1, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 89, CDR2, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 115, и CDR3, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 91.

В конкретном варианте реализации первый домен связывания антитела или фрагмента антитела, раскрытого в данном описании, представляет собой вариабельный участок легкой цепи, и второй домен связывания антитела или фрагмента антитела, раскрытого в данном описании, представляет собой вариабельный участок тяжелой цепи.

В другом варианте реализации (15), настоящее изобретение относится к связывающемуся пептиду или белку или его функциональной части, конкретно к антителу, конкретно моноклональному антителу или его функциональной части, конкретно связывающемуся пептиду или антителу в соответствии с любым из предыдущих вариантов реализации, причем связывающийся пептид или антитело распознает и специфично связывается с фосфо-эпитопом на белке Тау млекопитающего, конкретно человека, или на его фрагменте, конкретно с патологическим конформером белка тау, но в одном из вариантов реализации не связывается с соответствующим нефосфорилированным эпитопом и/или неродственными эпитопами, притом, что указанный связывающийся пептид или антитело обладает высокой аффинностью связывания с растворимым, олигомерным и нерастворимым фосфорилированным белком Тау и способен обнаруживать и/или модулировать уровни растворимого, олигомерного и нерастворимого фосфорилированного белка Тау in vivo, и при этом, указанный связывающийся пептид или антитело содержит первый домен связывания, содержащий последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 69, 77, 116/92, 118, 97, 105, или последовательность аминокислот, конкретно по меньшей мере на 85%, конкретно по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, конкретно по меньшей мере на 95%, конкретно по меньшей мере на 96%, конкретно по меньшей мере на 97%, конкретно по меньшей мере на 98%, конкретно по меньшей мере на 99% или 100% идентичную ей, и/или второй домен связывания, который содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 68, 76, 88, 96, 104, или последовательность аминокислот по меньшей мере на 80%, конкретно по меньшей мере на 85%, конкретно по меньшей мере на 86%, конкретно по меньшей мере на 87%, конкретно по меньшей мере на 88%, конкретно по меньшей мере на 89%, конкретно по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, конкретно по меньшей мере на 95%, конкретно по меньшей мере на 96%, конк