2639553 - Модуляция активации макрофагов

Модуляция активации макрофагов

Иллюстрации

Показать все

Изобретение касается способа увеличения пула М1 макрофагов у пациента, страдающего от состояний, ассоциированных с нежелательной М2 активацией. Представленный способ включает этап введения указанному пациенту эффективного количества антитела, способного связываться с CSF-1R, где указанное антитело представляет собой антитело, которое связывается по крайней мере с одним эпитопом, расположенным между положениям аминокислот от 20 до 39 ID NO: 23. Изобретение может быть использовано при стимуляции иммунного ответа М1-типа (М1 поляризация макрофагов). 10 з.п. ф-лы, 8 ил.

Реферат

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Изобретение в общем случае является направленным на стимуляцию иммунного ответа M1-типа (M1 поляризация макрофагов) путем введения соединения, модулирующего активацию макрофагов, которая также называется поляризацией макрофагов. Изобретение является направленным на применение антитела, способного связываться с CSF-1R, путем модулирования активации/поляризации макрофагов. Изобретение также является направленным на способы для оценки зависимой от дозы эффективности антитела, способного связываться с CSF-1R, у пациента путем оценки in vivo или in vitro поляризации макрофагов. Изобретение также дополнительно является направленным на сопутствующий периоду после лечения анализ для оценки эффекта антитела, способного связываться с CSF-1R, у субъекта, которого подвергают лечению.

Во время воспаления циркулирующие моноциты привлекаются в сайты воспаления, где они приобретают тип макрофагов, который предписывается присутствием специфических цитокинов и факторов роста. Зрелые макрофаги подразделяются на две популяции, M1-поляризованные или "классически активированные" и M2-поляризованные или "альтернативно активированные". Макрофаги представляют собой важные инфильтрирующие опухоль клетки, а также играют ключевую роль в росте опухоли и метастазах. В большинстве солидных опухолей наличие макрофагов является предпочтительным для роста опухоли и метастазов. Последние исследования свидетельствуют о том, что ассоциированные с опухолью макрофаги (TAMs) демонстрируют M2 фенотип. Эти ассоциированные с опухолью макрофаги (ТАМ) вырабатывают интерлейкин IL-10 и трансформирующий фактор роста (TGF) β для супрессии общих противоопухолевых иммунных ответов. Кроме того, ТАМ способствуют опухолевому нео-ангиогенезу путем секреции проангиогенных факторов и устанавливают инвазивную микросреду для того, чтобы способствовать опухолевым метастазам и диссеминации. По этим причинам селективное истощение M2 ТАМ стало считаться новым подходом к противораковой терапии (Sica и др., 2006, European Journal of Cancer, 42, 717-727).

Макрофаги участвуют в иммунных ответах на опухоли поляризованным образом. M1 дифференциация запускается с помощью GM-CSF и дополнительно стимулируется с помощью интеферона-γ (IFN-γ), бактериального липополисахарида (LPS), или фактора некроза опухоли α (TNFα), а также опосредуется несколькими путями сигнальной трансдукции, которые вовлекают переносчик сигнала и активатор транскрипции (STAT), ядерный фактор энхансера каппа легкой цепи активированных В клеток (NFĸB) и активированные митогеном протеинкиназы (MAPK). Эти события способствуют продукции агентов, таких, как виды реактивного кислорода и оксид азота (NO), а также стимулируют последующие иммунные ответы путем усиления способности презентации антигена индукции Th1 иммунитета с помощью продукции цитокинов, таких, как IL12. В противовес этому, активация M2 макрофагов используется для описания макрофагов, активированных с помощью путей, которые отличаются от M1 активации, включая IL4/IL13-стимулированные макрофаги, индуцированные IL10 макрофаги, а также запускаемые иммунным комплексом макрофаги. Среди множества молекулярных отличий между M1 и M2 видами активации соотношение продукции IL12 и IL10 является критическим для различения M1 и M2 макрофагов. Примечательным является то, что ТАМ имеют множество свойств M2 макрофагов.

ТАМ демонстрируют M2 профиль, который характеризуется не только IL-12^низкийIL-10^{высокий} фенотипом, но также опосредованной FcR способностью к фаголизису, ассоциированной с регуляторными функциями (Schmieder и др. 2012, Semin Cancer Biol., 22, 289-297). Фагоцитарный рецептор гемоглобина (CD163), который экспрессируется ТАМ, был идентифицирован в качестве маркера M2-поляризованных макрофагов (Ambarus и др. 2012, 375, 196-206). ТАМ могут представлять наиболее многочисленную популяцию иммуносупрессивных клеток в опухолевой микросреде, пополненной CSF-1 и CCL-2 (MCP-1) (Sica и др. 2006, Eur J Cancer., 42, 717-727).

Подобно этому, альтернативно активированные M2 макрофаги были втянуты в некоторые патологии, наиболее известные из которых представляют собой аллергию и астму (Duffield, 2003, Clin. Sci. 104, 27; Gordon, 2003, Nat. Rev. Immunol., 3, 23; Dagupta и Keegan, J. Innate Immun., 2012, 4, 478).

Изобретателями было показано, что некоторые моноклональные антитела являются способными переключать M2 макрофаги на M1 макрофаги (то есть, индуцировать дифференциацию M1 макрофагов в большей мере, чем M2 макрофагов). Они показали, что указанные моноклональные антитела являются способными к понижающей регуляции поверхностных FcγRI (CD64) и FcγRIII (CD16), понижающей регуляции MCP-1 (хемотаксический белок макрофагов 1, который также называется CCL-2), продукции IL-6, MMP9 и/или IL-10, и к стимуляции продукции IL-12, IL-1, TNF-α. Они также показали, что указанные моноклональные антитела ингибируют дифференциацию макрофагов CD163⁺ M2-типа из человеческих моноцитов и повышают соотношение M1/M2 макрофагов.

Раскрытие изобретения

Изобретение в широком смысле является направленным на способы иммуномодуляции путем модулирования активации макрофагов.

Как используется в данной заявке, термин "какой-либо" используется в смысле того, что он означает "по крайней мере, один", "по крайней мере, первый", "один или более" или "множество" упомянутых соединений или этапов, если контекст ясно не указывает на иное. Например, термин "какая-либо клетка" предусматривает множество клеток, включая их смеси.

Термин "и/или" при использовании в данной заявке предусматривает значение "и", "или" и "все или какая-либо другая комбинация элементов, связанных с указанным термином".

Термин "около" или "приблизительно", как используется в данной заявке, означает в пределах 20%, предпочтительно в пределах 10% и более предпочтительно в пределах 5% от заданного значения или интервала. Термин "приблизительно x" дополнительно включает значение х.

Как используется в данной заявке, термины "включающий" и "включает" являются предназначенными для того, чтобы обозначать, что наборы частей, продуктов, композиций и способов включают упомянутые соединения или этапы, но не исключают других. Например, "композиция, включающая x и y" охватывает любую композицию, которая содержит x и y, несмотря на то что другие соединения могут присутствовать в такой композиции. Кроме того, "способ, который включает этап x", охватывает любой способ, в котором осуществляется x, будь то случай, когда x представляет собой единственный этап в способе или тогда, когда он представляет собой только один из этапов, невзирая на то, сколько других этапов может быть, и невзирая на то, насколько простым или сложным является x по сравнению с ними.

"Существенно состоящий из" тогда, когда используется для определения продуктов, композиций и способов, будет означать исключение других соединений или этапов любой существенной значимости. Таким образом, композиция, существенно состоящая из указанного соединения, не будет исключать микропримеси и фармацевтические приемлемые носители. "Состоящий из" будет означать исключение более, чем микропримесей других соединений или этапов.

В соответствии с первым воплощением настоящее изобретение относится к способу иммуномодуляции путем модулирования активации M2 макрофагов у пациента, страдающего от состояний, ассоциированных с нежелательной поляризацией M2 макрофагов, где указанный способ включает этап введения указанному пациенту эффективного количества антитела, способного связываться с CSF-1R. В частности, изобретение является направленным на такой способ иммуномодуляции, в котором указанный пациент также страдает от состояний, ассоциированных с активностью CSF-1R.

В соответствии с одним специальным воплощением настоящее изобретение относится к применению антитела, способного связываться с человеческим CSF-1R, с помощью модулирования поляризации M2 макрофагов, в частности, у пациента, страдающего от состояний, ассоциированных с нежелательной поляризацией M2 макрофагов. В соответствии с одним специальным воплощением указанный пациент также страдает от состояний, ассоциированных с активностью CSF-1R.

Настоящая заявка относится к "модулированию поляризации/активации макрофагов". Этот термин означает то, что модуляторные антитела в соответствии с изобретением вызывают уменьшение пула активации M2 макрофагов и/или увеличение пула M1 макрофагов, предпочтительно уменьшение пула активации M2 макрофагов и увеличение пула M1 макрофагов. Таким образом, соотношение M1/M2 повышается. Это может быть показано, как раскрывается в данной заявке, с помощью изменений в уровнях факторов, которые являются ассоциированными с M1 и M2 макрофагами. Примеры таких факторов представляют собой мембранные маркеры, такие, как CD64 или CD163, цитокины, такие, как IL6, IL10 или IL12, интерфероны, MCP-1, ММР9, и т.д. Такая "модуляция активации макрофагов" у пациентов может подвергаться оценке, например, путем измерения соотношения IL12/IL10, уровня MCP-1 или IL-6, или соотношения CD163^-/CD163⁺ макрофагов после введения пациенту антитела, способного связываться с CSF-1R, в соответствии с изобретением.

В соответствии с другим воплощением настоящее изобретение относится к способу для увеличения пула M1 макрофагов у пациента, страдающего от состояний, ассоциированных с нежелательной M2 поляризацией, где указанный способ включает этап введения указанному пациенту эффективного количества антитела, способного связываться с CSF-1R. Изобретение, в частности, является направленным на такой способ иммуномодуляции, где указанный пациент также страдает от состояний, ассоциированных с активностью CSF-1R.

В соответствии с особым воплощением указанный способ для увеличения пула M1 макрофагов у пациента, страдающего от состояний, ассоциированных с нежелательной M2 поляризацией, дополнительно уменьшает пул M2 макрофагов.

"Пациент" означает позвоночное животное, такое, как млекопитающее, в частности, человек. Млекопитающие включают, но не ограничены людьми, собаками, котами, лошадьми, коровами и свиньями. В соответствии с настоящим изобретением "пациент" страдает от состояний, ассоциированных с нежелательной M2 активацией, и в соответствии с частным воплощением также страдает от состояний, ассоциированных с активностью CSF-1R.

Изобретение также, в частности, является направленным на один способ для снижения проопухолевых функций макрофагов (то есть, онкогенности) и/или повышения макрофагальной активности опухолевой супрессии у пациента, в частности, у пациента, страдающего от состояний, ассоциированных с нежелательной M2 поляризацией и/или от состояний, ассоциированных с активностью CSF-1R, где указанный способ включает этап введения указанному пациенту эффективного количества антитела, способного связываться с CSF-1R.

В соответствии со специальным воплощением способ в соответствии с изобретением репрессирует, по крайней мере, одну проопухолевую макрофагальную функцию, выбранную из группы, которая состоит из опухолевой инвазии, метастазов, пролиферации опухолевых клеток, опухолевого роста, выживания опухоли, нео-ангиогенеза, супрессии врожденного и приобретенного иммунитета и ремоделирования внеклеточного матрикса.

Таким образом, в соответствии с изобретением "модулирование активации/поляризации макрофагов" может также означать то, что модуляторные антитела в соответствии с изобретением снижают, по крайней мере, одну из проопухолевых функций макрофагов (то есть, онкогенность), выбранную из группы, которая состоит из опухолевой инвазии, метастазов, пролиферации опухолевых клеток, опухолевого роста, выживания опухоли, нео-ангиогенеза, супрессии приобретенного или врожденного иммунитета и ремоделирования внеклеточного матрикса.

В соответствии со специальным воплощением способ в соответствии с изобретением ингибирует продукцию MCP-1, MMP-9 и IL-6 макрофагами, в частности макрофагами человека.

В соответствии со специальным воплощением способ в соответствии с изобретением вызывает подавление в отношении экспрессии поверхностных sFcγRI (CD64) и FcγRIII (CD16) на макрофагах, в частности, человеческих макрофагах.

В соответствии со специальным воплощением способ в соответствии с изобретением способствует продукции IL-12 (в частности, P70 формы IL-12) макрофагами, особенно человеческими макрофагами, и/или выявляет понижающую регуляцию соотношений IL-12/IL-10.

В соответствии со специальным воплощением способ в соответствии с изобретением модулирует состояние активации макрофагов с помощью секретированных факторов.

В соответствии со специальным воплощением способ в соответствии с изобретением снижает, по крайней мере, один из следующих показателей:

- привлечение ТАМ к опухоли;

- по крайней мере, одну из проопухолевых функций макрофагов;

- опухолевый ангиогенез;

- опухолевую инвазию и метастазы;

- опухолевый рост;

- пролиферацию опухолевых клеток

у пациентов, в частности, у пациентов, страдающих от состояний, ассоциированных с нежелательной поляризацией M2 макрофагов. В соответствии со специальным воплощением указанный пациент также страдает от состояний, ассоциированных с активностью CSF-1R.

Изобретение также относится к способам для направления макрофагов в сторону M1-типа (M1 поляризация макрофагов) иммунного ответа и/или в сторону от M2-типа (M2 поляризация макрофагов) иммунного ответа у пациентов, в частности у пациентов, страдающих от состояний, ассоциированных с нежелательной M2 поляризацией макрофагов, или у пациентов, страдающих от состояний, ассоциированных с активностью CSF-1R, где указанный способ включает этап введения указанному пациенту эффективного количества антитела, способного связываться с CSF-1R.

Изобретение также дополнительно относится к способам для направления макрофагов к Th1 иммунному ответу или в сторону от Th2 иммунного ответа у пациентов, в частности у пациентов, страдающих от состояний, ассоциированных с нежелательной M2 поляризацией макрофагов, или у пациентов, страдающих от состояний, ассоциированных с активностью CSF-1R, где указанный способ включает этап введения указанному пациенту эффективного количества антитела, способного связываться с CSF-1R.

Изобретение также является направленным на применение антитела, способного связываться с CSF-1R, путем модулирования поляризации макрофагов. Изобретение также является направленным на применение антитела, способного связываться с CSF-1R, для направления макрофагов к M1-типу (M1 поляризация макрофаг) иммунного ответа. Изобретение также является направленным на применение антитела, способного связываться с CSF-1R, для индукции макрофагов с целью стимуляции ммунного ответа Th1-типа. Изобретение также является направленным на применение композиций, таких, как фармацевтические композиции, которые включают антитело, способное связываться с CSF-1R, с целью модулирования активации макрофагов, для направления макрофагов к M1-типу (M1 поляризация макрофагов) иммунного ответа и/или индукции макрофагов с целью стимуляции иммунного ответа Th1-типа.

Как используется в данной заявке, термин "способный связываться с" относится к реакции связывания, которая является определяющей для присутствия целевого белка в гетерогенной популяции белков и других биологических препаратов. Таким образом, при указанных условиях анализа антитело в соответствии с изобретением предпочтительно связывается, по крайней мере, с частью CSF-1R и предпочтительно не связывается в существенном количестве с другими соединениями, присутствующими в исследуемом образце. Специфическое связывание антитела в соответствии с изобретением и CSF-1R мишени означает, что связывающая аффинность составляет, по крайней мере, 10³ М^-1, и предпочтительно 10⁵ М^-1, 10⁶ М^-1, 10⁷ М^-1, 10⁸ М^-1, 10⁹ М^-1 или 10¹⁰ М^-1.

Как используется в данной заявке, термин "CSF-1R" относится к рецептору CSF1 человека.

Как используется в данной заявке, термин "антитело" или "Ab" используется в самом широком смысле. Таким образом, "антитело" или "Ab" может быть существующим в природе или полученным человеком, таким, как моноклональные антитела (mAbs), которые получают с помощью традиционной гибридомной технологии, рекомбинантной методики, и/или оно может представлять собой их функциональные фрагменты. Антитела в соответствии с настоящим изобретением предпочтительно представляют собой моноклональные антитела (mAb).

Как используется в данной заявке, термин "вариабельный участок" относится к вариабельному участку или домену легкой цепи (VL) или тяжелой цепи (VH), который содержит детерминанты для специфичности узнавания связывания. Вариабельные домены являются вовлеченными в узнавание антигена и образуют сайт связывания антигена. Вариабельный участок как тяжелой, так и легкой цепи, подразделяется на сегменты, включающие четыре каркасных субучастка (FR1, FR2, FR3 и FR4), которые прерываются тремя участками гипервариабельных последовательностей, или участками, определяющими комплементарность (CDR's), как определяется в базе данных Кабат, при этом CDR1 размещается между FR1 и FR2, CDR2 располагается между FR2 и FR3, a CDR3 между FR3 и FR4. Без указания конкретных субучастков таких, как FR1, FR2, FR3 или FR4, каркасный участок, как было предложено другими, представляет собой объединенные FR в пределах вариабельного участка единичной цепи существующего в природе иммуноглобулина. Как используется в данной заявке, FR представляет один из четырех субучастков, a FR представляют два или более из четырех субучастков, которые составляют каркасный участок. Каркасный участок антитела представляет собой объединенные каркасные участки, входящие в состав легкой и тяжелой цепей, и служит для определения местоположения и ориентации CDR. CDR, в первую очередь являются ответственными за формирование сайта связывания антитела, который обеспечивает специфичность и аффинность связывания по отношению к эпитопу антигена. В пределах вариабельных участков H или L цепей, которые обеспечивают участки связывания антигена, существуют меньшие последовательности, получившие название "гипервариабельные" по причине их крайней вариабельности между антителами с различной специфичностью. Такие гипервариабельные участки также называются "участками, определяющими комплементарность" или "CDR" участками. Эти CDR участки отвечают за основную специфичность антитела для определенной структуры антигенной детерминанты. Каждая из вариабельных тяжелых и легких цепей имеет 3 CDR участка, каждый из которых не является связанным с другими (называются L1, L2, L3, H1, H2, H3) для соответствующих легких (L) и тяжелых (H) цепей.

"Совместное введение" означает введение в сочетание друг с другом, вместе, координировано, включая одновременное или последовательное введение двух или более агентов.

"Эффективное количество" в общем случае означает количество, которое обеспечивает желаемый местный или системный эффект, например, эффективное для ослабления нежелательных эффектов воспаления, включая модуляцию активации макрофагов, и т.п. Например, эффективное количество представляет собой количество, достаточное для достижения лечебного или желательного клинического результата. Эффективные количества могут обеспечиваться все и сразу в виде одного введения или в виде частей, которые обеспечивают эффективное количество в случае нескольких введений. Точное определение того, что будет считаться эффективным количеством, может основываться на факторах, индивидуальных по отношению к каждому субъекту, включая его вес, возраст, повреждение и/или заболевание, или травму, которые подвергаются лечению, и промежуток времени, прошедший с тех пор, как возникло повреждение или началось заболевание. Специалист в данной области техники будет в состоянии определить эффективное количество для данного субъекта на основе этих соображений, что является обычным в данной области техники. Как используется в данной заявке, "эффективная доза" означает то же самое, что и "эффективное количество".

В соответствии с другим воплощением настоящее изобретение относится к применению антитела, способного связываться с человеческим CSF-1R для снижения, по крайней мере, одной из проопухолевых функций макрофагов, выбранной из группы, которая состоит из опухолевой инвазии, метастазов, опухолевого роста, выживания опухоли, нео-ангиогенеза, супрессии врожденного или приобретенного иммунитета и ремоделирования матрикса (то есть, онкогенности), и/или повышения активности опухолевой супрессии макрофагов у пациентов, в частности, у пациента, страдающего от состояний, ассоциированных с нежелательной M2 активацией, и в соответствии с частным воплощением также страдающего от состояний, ассоциированных с активностью CSF-1R.

В соответствии с другим воплощением настоящее изобретение относится к применению антитела, способного связываться с человеческим CSF-1R, для ингибирования продукции MCP-1, MMP-9 и IL-6 макрофагами, в частности человеческими макрофагами.

В соответствии с другим воплощением настоящее изобретение относится к применению антитела, способного связываться с человеческим CSF-1R для подавления экспрессии поверхностных FcγRI (CD64) и/или FcγRIII (CD16) на макрофагах, в частности, человеческих макрофагах.

В соответствии с другим воплощением настоящее изобретение относится к применению антитела, способного связываться с человеческим CSF-1R, для стимуляции продукции IL-12 (в частности, формы P70IL-12) макрофагами, в частности, человеческими макрофагами/или повышающей регуляции соотношения IL-12/IL-10.

В соответствии с другим воплощением настоящее изобретение относится к применению антитела, способного связываться с человеческим CSF-1R, путем модулирования состояния активации макрофагов с помощью секретируемых факторов.

В соответствии с другим воплощением настоящее изобретение относится к применению антитела, способного связываться с человеческим CSF-1R, для снижения привлечения ТАМ и/или опухолевого ангиогенеза у пациентов, в частности, у пациента, страдающего от состояний, ассоциированных с нежелательной M2 поляризацией макрофагов, и в соответствии с особым воплощением изобретения также страдающего от состояний, ассоциированных с активностью CSF-1R.

Изобретение также, в частности, является направленным на применение антитела, способного связываться с человеческим CSF-1R, для снижения привлечения ТАМ и/или опухолевой инвазии метастазов у пациентов, в частности у пациента, страдающего от состояний, ассоциированных с нежелательной M2 поляризацией макрофагов, и в соответствии с особым воплощением изобретения также страдающего от состояний, ассоциированных с активностью CSF-1R.

Изобретение также специфически является направленным на применение антитела, способного связываться с человеческим CSF-1R, для снижения привлечения ТАМ и/или опухолевого роста у пациентов, в частности, у пациента, страдающего от состояний, ассоциированных с нежелательной M2 поляризацией макрофагов, и в соответствии с особым воплощением изобретения также страдающего от состояний, ассоциированных с активностью CSF-1R.

В соответствии с другим воплощением настоящее изобретение относится к применению антитела, способного связываться с человеческим CSF-1R, для ориентации макрофагов в направлении иммунного ответа M1-типа (M1 поляризация макрофагов) и/или в направлении от иммунного ответа M2-типа (M2 поляризация макрофагов) у пациентов, в частности, у пациента, страдающего от состояний, ассоциированных с нежелательной M2 поляризацией макрофагов, и в соответствии с особым воплощением также страдающего от состояний, ассоциированных с активностью CSF-1R.

В соответствии с другим воплощением настоящее изобретение относится к применению антитела, способного связываться с человеческим CSF-1R для ориентации макрофагов в направлении Th1 иммунного ответа и/или в направлении от Th2 иммунного ответа у пациентов, в частности, у пациента, страдающего от состояний, ассоциированных с нежелательной M2 поляризацией макрофагов, и в соответствии с особым воплощение также страдающего от состояний, ассоциированных с активностью CSF-1R.

В соответствии с предпочтительными воплощениями указанное антитело, способное связываться с человеческим CSF-1R, представляет собой антитело, которое связывается, по крайней мере, с одним эпитопом, расположенным между положениями аминокислот от 20 до 41 последовательности SEQ ID NO: 23 (то есть, N-терминальная часть человеческого домена D1). В предпочтительном воплощении антитело в соответствии с изобретением связывается с одним эпитопом, расположенным между положениями аминокислот от 20 до 39 последовательности SEQ ID NO: 23 (то есть, N-терминальная часть человеческого домена D1), с аминокислотами Asn72, Ser94-Ala95-Ala96, Lys102, Asp131-Pro132-Val133 и Trp159 последовательности SEQ ID NO: 23.

В другом воплощении антитело в соответствии с изобретением связывается с одним эпитопом, расположенным между положениями аминокислот от 20 до 41 SEQ ID NO: 23 (то есть, N-терминальная часть человеческого домена D1) и не сявзывается с любым другим эпитопом, расположенным между положениями аминокислот от 42 до 90, и/или между положениями аминокислот от 91 до 104, и/или между положениями аминокислот от 105 до 199, и/или между положениями аминокислот от 200 до 298 SEQ ID NO: 23. В соответствии с предпочтительным воплощением антитело настоящего изобретения является способным узнавать минимальный эпитоп, расположенный между положениями аминокислот от 20 до 41 SEQ ID NO: 23 (то есть, N-терминальная часть человеческого домена D1), предпочтительно с эпитопом между положениями аминокислот от 20 до 39 SEQ ID NO: 23.

В предпочтительном воплощении указанное антитело, способное связываться с человеческим CSF-1R, представляет собой антитело, которое не конкурирует с IL-34 лигандом за связывание с рецептором CSF-1R. Термин "не конкурирует с IL-34 лигандом", как используется в данной заявке, относится к отсутствию ингибирования связывания IL34 лиганда с его рецептором CSF-1R.

В предпочтительном воплощении указанное антитело, способное связываться с человеческим CSF-1R, представляет собой антитело, которое частично конкурирует с CSF-1 лигандом за связывание с CSF-1R рецептором. Термин "частично конкурирует с CSF-1 лигандом", как используется в данной заявке, относится к ингибированию связывания CSF-1 лиганда с его рецептором CSF-1R, которое составляет менее, чем 100%, предпочтительно менее чем 50%, и даже более предпочтительно менее чем 20%, и преимущественно менее чем 10%. Этот частичный ингибитор только снижает, но не полностью исключает, связывание лиганда. Такое ингибирование называется частичным ингибированием. В предпочтительном воплощении указанное антитело, способное связываться с CSF-1R, представляет собой антитело, которое является способным частично предотвращать связывание CSF1 с его рецептором CSF-1R, и не является способным к полному ингибированию указанного связывания. В частности, антитела в соответствии с изобретением являются способными снижать связывание CSF-1 с CSF-1R приблизительно на 5-10%.

В соответствии с одним воплощением указанное антитело, способное связываться с человеческим CSF-1R, представляет собой антитело, которое включает:

(i) по крайней мере, один CDR, где указанный CDR включает, по крайней мере, пять смежных аминокислот последовательности, начиная от положения 45 и заканчивая в положении 54 SEQ ID NO: 1, последовательности, начиная от положения 66 и заканчивая в положении 87 SEQ ID NO: 1, или последовательности, начиная от положения 117 и заканчивая в положении 126 SEQ ID NO: 1;

или,

(ii) по крайней мере, один CDR, где указанный CDR включает, по крайней мере, пять смежных аминокислот последовательности, начиная от положения 44 и заканчивая в положении 56 SEQ ID NO: 2, последовательности, начиная от положения 66 и заканчивая в положении 76 SEQ ID NO: 2 или последовательности, начиная от положения 109 и заканчивая в положении 117 SEQ ID NO: 2.

В соответствии с предпочтительным воплощением указанное антитело, способное связываться с CSF-1R, представляет собой антитело, которое специфически связывается с человеческим CSF-1R и включает следующие CDR, включающие, по крайней мере, пять смежных аминокислот:

- последовательности, начиная от положения 45 и заканчивая в положении 54 SEQ ID NO: 1,

- последовательности, начиная от положения 66 и заканчивая в положении 87 о SEQ ID NO: 1,

- последовательности, начиная от положения 117 и заканчивая в положении 126 SEQ ID NO: 1,

- последовательности, начиная от положения 44 и заканчивая в положении 56 SEQ ID NO: 2,

- последовательности, начиная от положения 66 и заканчивая в положении 76 SEQ ID NO: 2

- или последовательности, начиная от положения 109 и заканчивая в положении 117 SEQ ID NO: 2.

- последовательности, начиная от положения 45 и заканчивая в положении 54 SEQ ID NO: 1,

- последовательности, начиная от положения 66 и заканчивая в положении 87 SEQ ID NO: 1,

- последовательности, начиная от положения 117 и заканчивая в положении 126 о SEQ ID NO: 1,

- последовательности, начиная от положения 44 и заканчивая в положении 56 SEQ ID NO: 2,

- последовательности, начиная от положения 66 и заканчивая в положении 76 SEQ ID NO: 2 и

- последовательности, начиная от положения 109 и заканчивая в положении 117 SEQ ID NO: 2.

- последовательности, начиная от положения 45 и заканчивая в положении 54 SEQ ID NO: 1,

- последовательности, начиная от положения 66 и заканчивая в положении 87 SEQ ID NO: 1,

- последовательности, начиная от положения 117 и заканчивая в положении 126 SEQ ID NO: 1,

- последовательности, начиная от положения 44 и заканчивая в положении 56 SEQ ID NO: 2,

- последовательности, начиная от положения 66 и заканчивая в положении 76 SEQ ID NO: 2 и

- последовательности, начиная от положения 109 и заканчивая в положении 117 SEQ ID NO: 2.

В соответствии с предпочтительным воплощением указанное антитело, способное связываться с CSF-1R, представляет собой антитело, которое специфически связывается с человеческим CSF-1R и включает CDR, включающий аминокислотную последовательность, как представлено в последовательностях SEQ ID NO: 5, 6, 7, 8, 9 или 10.

В соответствии с другим воплощением указанное антитело, способное связываться с CSF-1R, представляет собой антитело, которое специфически связывается с человеческим CSF-1, и включает (i) по крайней мере, один CDR, который включает аминокислотную последовательность, как представлено в одной из последовательностей SEQ ID NO: 11, 12 или 13; или (ii) по крайней мере, один CDR, который включает аминокислотную последовательность, как представлено в одной из последовательностей SEQ ID NO: 14, 15 или 16.

В соответствии с другим воплощением указанное антитело, способное связываться с CSF-1R, представляет собой антитело, которое специфически связывается с человеческим CSF-1R и включает (i) по крайней мере, один CDR, который включает аминокислотную последовательность, как представлено в одной из последовательностей SEQ ID NO: 17, 18 или 19; или (ii) по крайней мере, один CDR, который включает аминокислотную последовательность, как представлено в одной из последовательностей SEQ ID NO: 20, 21 или 22.

В соответствии с одним предпочтительным воплощением указанное антитело, способное связываться с CSF-1R, представляет собой антитело, которое специфически связывается с человеческим CSF-1R и включает CDR, включающий аминокислотную последовательность, как представлено в последовательностях SEQ ID NO: 17, 18, 19, 20, 21 или 22.

В соответствии с один предпочтительным воплощением указанное антитело, способное связываться с CSF-1R, представляет собой антитело, которое специфически связывается с человеческим CSF-1R и включает вариабельный участок, где вариабельный участок включает аминокислотную последовательность, как представлено в SEQ ID NO: 3.

В более предпочтительном воплощении указанное антитело, способное связываться с CSF-1R, представляет собой антитело, которое специфически связывается с человеческим CSF-1R и включает вариабельный участок, где вариабельный участок является таким, как представлено в SEQ ID NO: 3.

В другом предпочтительном воплощении указанное антитело, способное связываться с CSF-1R, представляет собой антитело, которое специфически связывается с человеческим CSF-1R, где вариабельный участок включает аминокислотную последовательность, как представлено в SEQ ID NO: 4.

В другом более предпочтительном воплощении указанное антитело, способное связываться с CSF-1R, представляет собой антитело, которое специфически связывается с человеческим CSF-1R и включает вариабельный участок, где вариабельный участок является таким, как представлено в SEQ ID NO: 4.

- вариабельный участок, включающий три CDR, как представлено в SEQ ID NO: 5, 6 и 7, и

- вариабельный участок, включающий три CDR, как представлено в SEQ ID NO: 8, 9 и 10.

- вариабельный участок, включающий три CDR, как представлено в SEQ ID NO: 11, 12 и 13, и

- вариабельный участок, включающий три CDR, как представлено в SEQ ID NO: 14, 15 и 16.

В соответствии с предпочтительным воплощением указанное антитело, способное связываться с CSF-1R, представ

Модуляция активации макрофагов

Патент 2639553