Гуманизированное тау-антитело

Гуманизированное тау-антитело

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Настоящее изобретение относится к способам и композициям для терапевтического и диагностического применения в лечении заболеваний и расстройств, которые вызваны нейрофибриллярными клубками или связаны с ними. В частности, настоящее изобретение относится к гуманизированным антителам, которые специфически распознают и связываются с фосфорилированными патологическими конформерами белка тау, а также к способам и композициям, содержащим указанные антитела, для терапевтического и диагностического применения в лечении таупатий, в том числе болезни Альцгеймера (AD).

Нейрофибриллярные клубки и нейропильные нити (NT) являются основными нейропатологическими признаками болезни Альцгеймера (AD). Они состоят из ассоциированного с микротрубочками белка тау, который претерпел посттрансляционные модификации, в том числе фосфорилирование, дезамидирование и изомеризацию аспарагинильных или аспартильных остатков. Они образуются посредством агрегации гиперфосфорилированного белка тау и его конформеров. Данная патология AD является общей для многих нейродегенеративных таупатий, в частности, для указанных типов лобно-височной деменции (FTD).

Белок тау представляет собой легкорастворимый, "нативно несвернутый" белок, который сильно связывается с микротрубочками (MT) с целью улучшения их сборки и стабильности. MT имеют большое значение для целостности цитоскелета нейронов и, тем самым - для надлежащего формирования и функционирования нейронных цепей, а значит и для обучения и памяти. Связывание тау с MT контролируют динамическим фосфорилированием и дефосфорилированием, что продемонстрировано в основном in vitro и в не-нейрональных клетках. В связи с большим количеством возможных участков фосфорилирования (>80) точный вклад каждого и идентичность ответственных киназ остаются в значительной степени неопределенными in vivo.

В головном мозге больных AD тау-патология развивается позже и, следовательно, возможно, в ответ на амилоидную патологию, которая определяет суть амилоидной каскадной гипотезы. Она основана на и определена посредством исследований пациентов с AD и синдромом Дауна, а также подтверждена посредством исследований на трансгенных мышах с комбинированной амилоидной и тау-патологией (Lewis с соавторами, 2001; Oddo с соавторами, 2004; Ribe с соавторами, 2005; Muyllaert с соавторами, 2006; 2008; Terwel с соавторами, 2008).

Точный временной паттерн обеих патологий у пациентов-людей с AD, а также механизмы, которые связывают амилоидную патологию с тау-патологией, остаются в значительной степени неизвестными, но предложены к включению активации нейрональных сигнальных путей, которые действуют на GSK3 и cdk5 или с помощью них в качестве основных "тау-киназ" (рассмотрены в публикации Muyllaert с соавторами, 2006, 2008).

Гипотеза о том, что таупатия является не безвредным побочным эффектом, а основным патологическим исполнителем в случае AD, основана на серьезных генетических, патологических и экспериментальных наблюдениях, которые полностью подтверждают друг друга:

- в семейных случаях AD с ранним началом, которые вызваны мутациями белка-предшественника амилоида (АРР) или пресенилина, обязательной патогенной причиной является накопление амилоида, но в любом случае данная патология включает коллатеральную таупатию, идентичную той, которая наблюдается в спорадических случаях AD с поздним началом;

- тяжесть когнитивной дисфункции и деменции коррелирует с таупатией, а не с амилоидной патологией, наиболее недавними примерами которой являются несколько фаз 1 и 2 клинических исследований, которые включают PIB-PET визуализацию амилоида и определяют многие "ложные результаты": когнитивно нормальные индивидуумы с высокой мозговой амилоидной нагрузкой;

- при семейной FTD таупатия провоцируется мутантным тау и непосредственно вызывает нейродегенерацию, без амилоидной патологии;

- в экспериментальных моделях мыши когнитивные расстройства, вызванные амилоидной патологией, почти полностью устранены в связи с отсутствием белка тау (Roberson с соавторами, 2007).

Совокупные аргументы поддерживают гипотезу о том, что белок тау является основным игроком в когнитивной смерти в случае AD и связанных с ней нейродегенеративных таупатий.

Значимое новое лечение AD представляет собой пассивную иммунотерапию с применением определенных mAb, чтобы очистить амилоидные пептиды и их агрегаты, которые считаются нейротоксичными или синаптотоксичными.

Предполагается, что направленная на тау-патологию иммунотерапия, как предложено в данном описании, противодействует патологическим конформерам белка тау, которые, как известно, вызывают или гипотетически вызывают синаптическую дисфункцию и нейродегенерацию. Предположительно обусловленные амилоидной патологией и внутринейрональные агрегаты гиперфосфорилированного белка тау действуют синергетически в когнитивном и дегенеративном каскаде патологических событий, которые ведут от умеренного когнитивного нарушения (MCI) к тяжелой деменции AD. В связи с этим комбинация направленного на тау лекарственного средства с направленным на амилоид (или любой другой) лекарственным средством будет представлять собой предпочтительное и, по сути, более эффективное лечение AD, в отличие от текущей монотерапии.

Другие терапевтические подходы, которые направлены на белок тау, являются немногочисленными и в основном включают:

- ингибиторы киназ, которые якобы увеличивают фосфорилирование тау до патологических уровней

- соединения, которые блокируют цитоплазматическую агрегацию гиперфосфорилированного белка тау.

Эти подходы имеют различные недостатки в специфичности и эффективности, эта проблема является общей для попыток модифицировать метаболизм АРР и амилоида, при этом подчеркивая важность постоянного поиска дополнительных вариантов лечения, в том числе иммунотерапии, направленной против тау.

Практически никаких усилий не было затрачено для того, чтобы определить - не говоря уже о направленности - патологические конформеры белка тау in vivo. Оказалось, что на фазе II клинического испытания Аβ42 патология клубков не была ни хорошо рассмотрена, ни тщательно проанализирована (Nicoll с соавторами, 2003; Masliah с соавторами, 2005). С другой стороны экспериментальная направленная на амилоид иммунотерапия в доклинической модели мыши с комбинированной AD-подобной патологией также продемонстрировала воздействие на тау-патологию, несмотря на то, что агрегаты тау сохранились (Oddo с соавторами, 2004).

Некоторые сомнения были отброшены в вопросе о целесообразности подхода к внутриклеточному белку тау посредством иммунотерапии. Им противопоставили самое последнее экспериментальное исследование в модели таупатий мыши (Asuni с соавторами, 2007). Они продемонстрировали снижение в патологии клубков и функциональные улучшения посредством вакцинации фосфопептидом, полученным из белка тау. Эти данные подтверждают предыдущие отчеты иммунотерапии, направленной на α-синуклеин, в моделях болезни Паркинсона (PD) и болезни телец Леви (Masliah с соавторами, 2005, 2011) и супероксиддисмутазы в модели бокового амиотрофического склероза (ALS) (Urushitiani с соавторами, 2007). Данные заболевания представляют собой примеры, в которых внутриклеточные белки приводят к синаптическим дефектам и нейродегенерации за счет механизмов, которые еще не полностью поняты. С другой стороны оказывается, что полноразмерный рекомбинантный белок тау, полученный в бактерии и выделенный из нее, не подходит в качестве вакцины, несмотря на то, что используемые адъюванты, то есть полный адъювант Фрейнда и коклюшный токсин, могут внести свой вклад в отрицательный результат данного исследования (Rosenmann с соавторами, 2006).

Эпитоп тау, который требует фосфорилирования Ser-409 (pS409), был использован в качестве маркера для участка фосфорилирования тау, который появляется на начальной стадии AD (Jicha с соавторами, 1999). Данное фосфорилирование является зависимым от протеинкиназы А (РКА) и предшествует или совпадает с начальными стадиями формирования парного спирального филамента (PHF), и с последующим распространением нейрофибриллярной патологии в пораженных нейронах в случаях AD на начальной стадии. В исследованиях механизма действия было также продемонстрировано, что pS409 является непосредственной детерминантой для олигомеризации тау, процесса, участвующего в сборке PHF и нейрофибриллярных клубков (Vanhelmont с соавторами, 2010; Alonso с соавторами, 2008). Кроме того, pS409 снизило способность тау связываться с микротрубочками (МТ), даже если он не является частью МТ-связывающего домена тау, демонстрируя, что фосфорилирование S409 также негативно влияет на взаимодействие микротрубочек с тау (Vandebroek с соавторами, 2006). Было продемонстрировано, что липосомальная вакцина, содержащая антигенный пептид тау 401-418 [pS404/pS409], индуцирует специфические антитела IgG у мышей C57BL/6 дикого типа и у тау-дефицитных мышей (Международная патентная заявка WO 2010/115843).

Длительная терапия у людей антителами грызунов приведет к антиглобулиновому иммунному ответу, который может быть детектирован почти на 8-12 день после введения и достигает пика почти на 20-30 день. Если такой антиглобулиновый ответ встречается, лечение должно быть прекращено после не более, чем около 10 дней, и повторная итерация лечения в более поздние сроки, как правило, исключается, потому что это приведет к новому и более быстрому началу вторичного антиглобулинового ответа. Несмотря на то, что антитела грызунов обладают общей значительной степенью консервативности последовательности с антителами человека, существует много различий в последовательности между антителами грызуна и человека, которые являются достаточными для того, чтобы антитела грызуна были иммуногенными для людей.

Данная проблема может быть решена посредством получения антител непосредственно в организме людей или посредством создания "человеческих", "гуманизированных" (также известных как "реконструированные" антитела) антител или антител "humaneered". Гуманизированные антитела обладают аминокислотными последовательностями вариабельной области, которая содержит CDR грызуна, сращенные с человеческими или человекоподобными каркасными последовательностями. Так как специфичность гуманизированного антитела обеспечивается за счет CDR, полученных из грызуна, их остатки должны быть использованы, по сути, без изменений, с допущением лишь незначительных модификаций, которые существенно не мешают аффинности и специфичности антитела для его целевого антигена. Каркасные остатки могут быть получены из любого примата или, в частности, из любой вариабельной области человека, или могут представлять собой их комбинацию, а полученная в результате сконструированная вариабельная область будет считаться реконструированной.

Чтобы максимизировать вероятность того, что аффинность будет сохранена в реконструированном антителе, важно сделать правильный выбор каркасной области. Известно, что каркасные последовательности служат для сохранения правильной ориентации CDR в пространстве для взаимодействия с антигеном, и что каркасные остатки даже иногда могут принимать участие в связывании антигена. Для того, чтобы сохранить аффинность антитела относительно его антигена, целесообразно выбирать каркасные последовательности человека, которые являются наиболее схожими с последовательностями каркасов грызуна. К тому же все еще может быть необходимо заменить одну или более аминокислот в каркасной последовательности человека соответствующим остатком в каркасе грызуна, чтобы избежать потерь в аффинности. Такой замене может помочь компьютерное моделирование.

Существует давно сложившаяся неудовлетворенная потребность в пассивных и/или активных иммунотерапиях у пациентов-людей, которые направлены на противодействие патологическим конформерам белков, которые, как известно, вызывают или предположительно вызывают нейродегенеративные расстройства, таким как амилоидные пептиды и их агрегаты в случае AD, а также внутринейрональные агрегаты гиперфосфорилированного белка тау, которые так же характерны для AD, как и амилоид.

Эта неудовлетворенная потребность была удовлетворена в пределах объема настоящего изобретения, которое обеспечивает новые способы и композиции, содержащие высоко специфические и высоко эффективные антитела, в частности, химерные антитела, в том числе их фрагменты, в частности, частично или полностью гуманизированные антитела, в том числе их фрагменты, обладающие способностью специфически распознавать и связываться с конкретными основными патологическими фосфоэпитопами белка тау. В частности, настоящее изобретение относится к специфическим антителам к линейным и конформационным, простым и сложным фосфоэпитопам на поверхности белка тау, в частности, на поверхности агрегированного белка тау, которые, как полагают, отвечают за синапто- и нейротоксичность в таупатиях, в том числе AD.

В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к антителу, в частности, к моноклональному антителу, в частности, к химерному антителу или его фрагменту, или к гуманизированному антителу или его фрагменту, которое распознает и связывается по меньшей мере с одним отдельным участком связывания на поверхности белка тау.

Данное антитело, в частности, моноклональное антитело, в частности, химерные или гуманизированные антитела, в соответствии с настоящим изобретением, как описано в различных вариантах реализации настоящего изобретения, распознает и специфически связывается с фосфоэпитопом на поверхности белка тау или на поверхности его фрагмента у млекопитающего, в частности, у человека, в частности, с фосфоэпитопом на поверхности агрегированного белка тау, в частности, с патологическим конформером белка тау, но не связывается с соответствующим нефосфорилированным эпитопом и/или неродственными эпитопами, причем указанное антитело обладает высокой аффинностью связывания с растворимым и нерастворимым белком тау, и модулирует уровни растворимого и нерастворимого тау, в частности, в головном мозге, в частности, с

(a) константой диссоциации, равной по меньшей мере 100 нМ, в частности, по меньшей мере 80 нМ, в частности, по меньшей мере 70 нМ, в частности, по меньшей мере 50 нМ, в частности, по меньшей мере 10 нМ, в частности, по меньшей мере 8 нМ, в частности, по меньшей мере 5 нМ, в частности, по меньшей мере 2 нМ, в частности, по меньшей мере 1 нМ, в частности, по меньшей мере 500 пМ, в частности, по меньшей мере 400 пМ, в частности, по меньшей мере 300 пМ, в частности, по меньшей мере 200 пМ, в частности, по меньшей мере 100 пМ, в частности, по меньшей мере 50 пМ и/или

(b) константой скорости ассоциации, равной 10⁴ M^-1V^-1 или более, в частности, от 3-5×10⁴ М^-1с^-1 или более, в частности, 10⁵ М^-1с^-1 или более; в частности, 0,5-9×10⁵ M^-1c^-1 или более; в частности, 10⁶ М^-1с^-1 или более, в частности, 1-4×10⁶ М^-1с^-1 или более, в частности, 10⁷ M^-1c^-1 или более.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к антителу, в частности, к моноклональному антителу, в частности, к химерному или гуманизированному антителу, в соответствии с настоящим изобретением, как описано в различных вариантах реализации настоящего изобретения, в которых антитело распознает и специфически связывается с фосфоэпитопом на поверхности белка тау или на поверхности его фрагмента у млекопитающего, в частности, у человека, в частности, с патологическим конформером белка тау, но в одном варианте реализации настоящего изобретения не связывается с соответствующим нефосфорилированным эпитопом и/или неродственными эпитопами, причем указанное антитело обладает высокой аффинностью связывания с константой диссоциации, равной по меньшей мере 100 нМ и константой скорости ассоциации, равной 10⁵ М^-1с^-1 или более, в частности, с константой диссоциации, равной по меньшей мере 80 нМ и константой скорости ассоциации, равной 10⁵ М^-1с^-1 или более, в частности, с константой диссоциации, равной по меньшей мере 70 нМ и константой скорости ассоциации, равной 10⁵ M^-1c^-1 или более, в частности, с константой диссоциации, равной по меньшей мере 10 нМ и константой скорости ассоциации, равной 10⁵ М^-1с^-1 или более, в частности, с константой диссоциации, равной по меньшей мере 200 пМ и константой скорости ассоциации, равной 10⁵ М^-1с^-1 или более, в частности, с константой диссоциации, равной по меньшей мере 100 пМ и константой скорости ассоциации, равной 10⁶ М^-1с^-1 или более.

В различных вариантах реализации настоящего изобретения данное антитело, в частности, моноклональное антитело, в частности, химерное или гуманизированное антитело, в соответствии с настоящим изобретением, как описано в различных вариантах реализации настоящего изобретения, специфически распознает и связывается с фосфоэпитопом на поверхности белка тау у млекопитающего, в частности, у человека, в частности, ассоциированного с микротрубочками белка тау, в частности, агрегированного ассоциированного с микротрубочками и гиперфосфорилированного белка тау, такого, который присутствует в парных спиральных филаментах (PHF), которые являются преобладающими структурами в нейрофибриллярных клубках, нейропильных нитях и дистрофических нейритах, но в одном варианте реализации настоящего изобретения не связывается с соответствующим нефосфорилированным эпитопом и/или неродственными эпитопами.

В конкретном варианте реализации настоящего изобретения белок тау человека представляет собой белок тау человека, как показано в SEQ ID NO: 19.

В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к антителу, в частности, к моноклональному антителу, в частности, к химерному антителу или его функциональному фрагменту, или к гуманизированному антителу или его функциональному фрагменту, в частности, к гуманизированному моноклональному антителу или его функциональному фрагменту, в частности, к антителу в соответствии с любым из предшествующих вариантов реализации настоящего изобретения, в котором антитело распознает и специфически связывается с фосфоэпитопом на поверхности белка тау у млекопитающего, в частности, у человека, как показано в SEQ ID NO: 19, или на поверхности его фрагмента, в частности, с патологическим конформером белка тау, но в одном варианте реализации настоящего изобретения не связывается с соответствующим нефосфорилированным эпитопом и/или неродственными эпитопами, причем указанный эпитоп содержит аминокислотные остатки аа 404-411 белка тау человека, как показано в SEQ ID NO: 19, с необходимым фосфорилированным Серином в положении 409 (pS409).

В конкретном варианте реализации настоящее изобретение относится к антителу, в частности, к моноклональному антителу, в частности, к химерному антителу или его функциональному фрагменту, или к гуманизированному антителу или его функциональному фрагменту, в частности, к гуманизированному моноклональному антителу или его функциональному фрагменту, в частности, к антителу в соответствии с любым из предшествующих вариантов реализации настоящего изобретения, в котором антитело преимущественно распознает и связывается с некоторыми или всеми аминокислотными остатками тау, выбранными из группы, состоящей из Н407, pS409, N410 и V411, но, в частности, с pS409.

В другом конкретном варианте реализации настоящего изобретения указанное антитело или его фрагмент также распознает и связывается с остатком pS404, хотя и в меньшей степени. В частности, связывание с остатком pS404 составляет около 10%, в частности, около 20%, в частности, около 30% связывания с остатком pS409.

В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к антителу, в частности, к моноклональному антителу, в частности, к химерному антителу или его функциональному фрагменту, или к гуманизированному антителу или его функциональному фрагменту, в частности, к гуманизированному моноклональному антителу или его функциональному фрагменту, в частности, к антителу в соответствии с любым из предшествующих вариантов реализации настоящего изобретения, в котором антитело распознает и специфически связывается с фосфоэпитопом на поверхности белка тау у млекопитающего, в частности, у человека, как показано в SEQ ID NO: 19, или на поверхности его фрагмента, в частности, с патологическим конформером белка тау, но в одном варианте реализации настоящего изобретения не связывается с соответствующим нефосфорилированным эпитопом и/или неродственными эпитопами, причем указанный эпитоп содержит аминокислотные остатки аа 405-411 белка тау человека, как показано в SEQ ID NO: 19, содержащей фосфорилированный Серии (Ser) в положении 409 (pS409) и, причем указанное антитело или его функциональный фрагмент предпочтительно распознает и связывается с некоторыми или всеми аминокислотными остатками тау, выбранными из группы, состоящей из Н407, pS409, N410 и V411, но, в частности, с pS409.

В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к химерному антителу или его функциональному фрагменту, или к гуманизированному антителу или его функциональному фрагменту, в частности, к гуманизированному моноклональному антителу или его функциональному фрагменту, в частности, к гуманизированному антителу в соответствии с любым из предшествующих вариантов реализации настоящего изобретения, в котором антитело распознает и специфически связывается с фосфоэпитопом на поверхности белка тау или на поверхности его фрагмента у млекопитающего, в частности, у человека, в частности, с патологическим конформером белка тау, но в одном варианте реализации настоящего изобретения не связывается с соответствующим нефосфорилированным эпитопом и/или неродственными эпитопами, причем указанное связывающее антитело содержит первый домен связывания, в частности, домен связывания Вариабельной Области Тяжелой Цепи (HCVR), который содержит интегрированные последовательно в каркасные области, полученные у человека или приматов, CDR1 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 1, CDR2 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 2, и CDR3 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 3, или с аминокислотной последовательностью по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, в частности, по меньшей мере на 85%, в частности, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, в частности, по меньшей мере на 95%, в частности, по меньшей мере на 96%, в частности, по меньшей мере на 97%, в частности, по меньшей мере на 98%, в частности, по меньшей мере на 99% или 100% идентичной указанным, и/или второй домен связывания, в частности, домен связывания Вариабельной Области Легкой Цепи (LCVR), который содержит интегрированные последовательно в каркасные области, полученные у человека или приматов, CDR1 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 4 или SEQ ID NO: 10, CDR2 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 5, и CDR3 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 6, или с аминокислотной последовательностью по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, в частности, по меньшей мере на 85%, в частности, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, в частности, по меньшей мере на 95%, в частности, по меньшей мере на 96%, в частности, по меньшей мере на 97%, в частности, по меньшей мере на 98%, в частности, по меньшей мере на 99% или 100% идентичной указанным.

Один вариант реализации настоящего изобретения относится к химерному антителу или его функциональному фрагменту, или к гуманизированному антителу или его функциональному фрагменту, в частности, к гуманизированному моноклональному антителу или его функциональному фрагменту, в частности, к гуманизированному антителу в соответствии с любым из предшествующих вариантов реализации настоящего изобретения, в котором антитело распознает и специфически связывается с фосфоэпитопом на поверхности белка тау или на поверхности его фрагмента у млекопитающего, в частности, у человека, в частности, с патологическим конформером белка тау, но в одном варианте реализации настоящего изобретения не связывается с соответствующим нефосфорилированным эпитопом и/или неродственными эпитопами, причем указанное связывающее антитело содержит первый домен связывания, в частности, домен связывания Вариабельной Области Тяжелой Цепи (HCVR), который содержит интегрированные последовательно в каркасные области, полученные у человека или приматов, CDR1 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 1, или с аминокислотной последовательностью по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, в частности, по меньшей мере на 85%, в частности, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, в частности, по меньшей мере на 95%, в частности, по меньшей мере на 96%, в частности, по меньшей мере на 97%, в частности, по меньшей мере на 98%, в частности, по меньшей мере на 99% или 100% идентичной указанной, CDR2 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 2, или с аминокислотной последовательностью по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, в частности, по меньшей мере на 85%, в частности, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, в частности, по меньшей мере на 95%, в частности, по меньшей мере на 96%, в частности, по меньшей мере на 97%, в частности, по меньшей мере на 98%, в частности, по меньшей мере на 99% или 100% идентичной указанной, и CDR3 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 3, или с аминокислотной последовательностью по меньшей мере на 20%, по меньшей мере на 30%, по меньшей мере на 40%, по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, в частности, по меньшей мере на 85%, в частности, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, в частности, по меньшей мере на 95%, в частности, по меньшей мере на 96%, в частности, по меньшей мере на 97%, в частности, по меньшей мере на 98%, в частности, по меньшей мере на 99% или 100% идентичной указанной, и/или второй домен связывания, в частности, домен связывания Вариабельной Области Легкой Цепи (LCVR), который содержит интегрированные последовательно в каркасные области, полученные у человека или приматов, CDR1 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 4 или SEQ ID NO: 10, или с аминокислотной последовательностью по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, в частности, по меньшей мере на 85%, в частности, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, в частности, по меньшей мере на 95%, в частности, по меньшей мере на 96%, в частности, по меньшей мере на 97%, в частности, по меньшей мере на 98%, в частности, по меньшей мере на 99% или 100% идентичной указанным, CDR2 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 5, и CDR3 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 6, или с аминокислотной последовательностью по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, в частности, по меньшей мере на 85%, в частности, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, в частности, по меньшей мере на 95%, в частности, по меньшей мере на 96%, в частности, по меньшей мере на 97%, в частности, по меньшей мере на 98%, в частности, по меньшей мере на 99% или 100% идентичной указанным.

В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к химерному антителу или его функциональному фрагменту, или к гуманизированному антителу или его функциональному фрагменту, в частности, к гуманизированному моноклональному антителу или его функциональному фрагменту, в частности, к гуманизированному антителу в соответствии с любым из предшествующих вариантов реализации настоящего изобретения, в котором антитело распознает и специфически связывается с фосфоэпитопом на поверхности белка тау или на поверхности его фрагмента у млекопитающего, в частности, у человека, в частности, с патологическим конформером белка тау, но в одном варианте реализации настоящего изобретения не связывается с соответствующим нефосфорилированным эпитопом и/или неродственными эпитопами, причем указанное связывающее антитело содержит первый домен связывания, в частности, домен связывания Вариабельной Области Тяжелой Цепи (HCVR), который содержит интегрированные последовательно в каркасные области, полученные у человека или приматов, CDR1 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 1, или с аминокислотной последовательностью по меньшей мере на 81%, в частности, по меньшей мере на 85%, в частности, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, в частности, по меньшей мере на 95%, в частности, по меньшей мере на 96%, в частности, по меньшей мере на 97%, в частности, по меньшей мере на 98%, в частности, по меньшей мере на 99% или 100% идентичной указанной, CDR2 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 2, или с аминокислотной последовательностью по меньшей мере на 71%, по меньшей мере на 75%, по меньшей мере на 8%, в частности, по меньшей мере на 85%, в частности, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, в частности, по меньшей мере на 95%, в частности, по меньшей мере на 96%, в частности, по меньшей мере на 97%, в частности, по меньшей мере на 98%, в частности, по меньшей мере на 99% или 100% идентичной указанной, и CDR3 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 3, или с аминокислотной последовательностью по меньшей мере на 20%, по меньшей мере на 30%, по меньшей мере на 40%, по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, в частности, по меньшей мере на 85%, в частности, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, в частности, по меньшей мере на 95%, в частности, по меньшей мере на 96%, в частности, по меньшей мере на 97%, в частности, по меньшей мере на 98%, в частности, по меньшей мере на 99% или 100% идентичной указанной, и/или второй домен связывания, в частности, домен связывания Вариабельной Области Легкой Цепи (LCVR), который содержит интегрированные последовательно в каркасные области, полученные у человека или приматов, CDR1 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 4 или SEQ ID NO: 10, или с аминокислотной последовательностью по меньшей мере на 82%, в частности, по меньшей мере на 85%, в частности, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, в частности, по меньшей мере на 95%, в частности, по меньшей мере на 96%, в частности, по меньшей мере на 97%, в частности, по меньшей мере на 98%, в частности, по меньшей мере на 99% или 100% идентичной указанным, CDR2 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 5, и CDR3 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 6, или с аминокислотной последовательностью по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 68%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, в частности, по меньшей мере на 85%, в частности, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, в частности, по меньшей мере на 95%, в частности, по меньшей мере на 96%, в частности, по меньшей мере на 97%, в частности, по меньшей мере на 98%, в частности, по меньшей мере на 99% или 100% идентичной указанным.

В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к химерному антителу или его функциональному фрагменту, или к гуманизированному антителу или его функциональному фрагменту, в частности, к гуманизированному моноклональному антителу или его функциональному фрагменту, в частности, к гуманизированному антителу в соответствии с любым из предшествующих вариантов реализации настоящего изобретения, в котором антитело распознает и специфически связывается с фосфоэпитопом на поверхности белка тау или на поверхности его фрагмента у млекопитающего, в частности, у человека, в частности, с патологическим конформером белка тау, но в одном варианте реализации настоящего изобретения не связывается с соответствующим нефосфорилированным эпитопом и/или неродственными эпитопами, причем указанное связывающее антитело содержит первый домен связывания, в частности, домен связывания Вариабельной Области Тяжелой Цепи (HCVR), который содержит интегрированные последовательно в каркасные области, полученные у человека или приматов, CDR1 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 1, или с аминокислотной последовательностью по меньшей мере на 85% идентичной указанной, CDR2 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 2, или с аминокислотной последовательностью по меньшей мере на 75% идентичной указанной, и CDR3 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 3 или с аминокислотной последовательностью по меньшей мере на 20% идентичной указанной, и/или второй домен связывания, в частности, домен связывания Вариабельной Области Легкой Цепи (LCVR), который содержит интегрированные последовательно в каркасные области, полученные у человека или приматов, CDR1 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 4 или SEQ ID NO: 10, или с аминокислотной последовательностью по меньшей мере на 85% идентичной указанным, CDR2 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 5, и CDR3 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 6, или с аминокислотной последовательностью по меньшей мере на 70% идентичной указанным.

В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к химерному антителу или его функциональному фрагменту, или к гуманизированному антителу или его функциональному фрагменту, в частности, к гуманизированному моноклональному антителу или его функциональному фрагменту, в частности, к гуманизированному антителу в соответствии с любым из предшествующих вариантов реализации настоящего изобретения, в котором антитело распознает и специфически связывается с фосфоэпитопом на поверхности белка тау или на поверхности его фрагмента у млекопитающего, в частности, у человека, в частности, с патологическим конформером белка тау, но в одном варианте реализации настоящего изобретения не связывается с соответствующим нефосфорилированным эпитопом и/или неродственными эпитопами, причем указанное связывающее антитело содержит первый домен связывания, в частности, домен связывания Вариабельной Области Тяжелой Цепи (HCVR), который содержит интегрированные последовательно в каркасные области, полученные у человека или приматов, CDR1 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 1, CDR2 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 2, и CDR3 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 3, или с аминокислотной последовательностью по меньшей мере на 90% идентичной указанным, и/или второй домен связывания, в частности, домен связывания Вариабельной Области Легкой Цепи (LCVR), который содержит интегрированные последовательно в каркасные области, полученные у человека или приматов, CDR1 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 4 или SEQ ID NO: 10, CDR2 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 5, и CDR3 с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 6, или с аминокислотной последовательностью по меньшей мере на 90% идентичной указанным.

В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к химерному антителу или его функциональному фрагменту, или к гуманизированному антителу или его функциональному фрагменту, в частности, к гуманизированному моноклональному антителу или его функциональному фрагменту, в частности, к гуманизированному антителу в соответствии с любым из предшествующих вариантов реализации настоящего изобретения, в котором антитело распознает и специфически связывается с фосфоэпитопом на поверхности белка тау или на поверхности его фрагмента у млекопитающего, в частности, у человека, в частности, с патологическим конформером белка