Анти-vegf-антитело и содержащая его фармацевтическая композиция для предупреждения, диагностики или лечения рака или связанного с ангиогенезом заболевания

Анти-vegf-антитело и содержащая его фармацевтическая композиция для предупреждения, диагностики или лечения рака или связанного с ангиогенезом заболевания

Иллюстрации

Показать все

Реферат

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к: новому антителу, которое связывается с фактором роста сосудистого эндотелия (VEGF), имеет высокую аффинность связывания с VEGF и, следовательно, может быть полезным для лечения рака или связанного с ангиогенезом заболевания; и к содержащей его фармацевтической композиции.

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Хорошо известно, что ангиогенез участвует в патогенезе различных заболеваний, которые включают солидные опухоли, пролиферативную ретинопатию или возрастную макулярную дегенерацию (AMD) и т.д., связанные с глазной неоваскуляризацией.

В исследованиях по ангиогенезу был идентифицирован ряд индуцирующих факторов, таких как aFGF, bFGF, TGF-α, TGF-β, HGF, TNF-β, ангиогенин и т.д.. Ингибиторы ангиогенеза могут включать тромбоспондин, 16 кДа N-концевой фрагмент пролактина (Clapp et al., Endocrinology, 133: 1292-1299 (1993)), ангиостатин, эндостатин и т.д.

Индукция или ингибирование ангиогенеза зависят от баланса между индукторами и ингибиторами ангиогенеза (Folkman, J, et al., J. Biol Chem., 267, 10931-10934 (1992)).

Один из индукторов ангиогенеза, фактор роста сосудистого эндотелия (VEGF), участвует в росте и гомеостазе кровеносных и лимфатических сосудов, а также оказывает существенное влияние на нервные клетки. VEGF производится в основном в клетках сосудистого эндотелия, кроветворных и стромальных клетках в условиях гипоксии или в ответ на стимуляцию факторами роста клеток, такими как TGF, интерлейкин и PDGF. VEGF связывается с рецептором VEGF, и каждая изоформа VEGF связывается со специфическим рецептором, что индуцирует образование гомо- или гетеро-конъюгата рецептора для активации каждого сигнального пути (Karsan A., Int J. Mol Med., 5 (5):447-56 (2000)). Сигнальная специфичность рецептора VEGF более детально модулируется корецепторами, такими как нейтрофилин, гепарансульфат, интегрин, кадгерин и т.п. (Zachary I.C., et al., Mol. Biol. Cell., 22 (15):2766-76 (2011)). VEGF, как известно, является важным медиатором связанных с ангиогенезом патологий в опухолях и в глазах. Кроме того, мРНК VEGF сверхэкспрессируется в опухолях у большинства исследуемых субъектов (Berkman et al., J. Clin Invest., 91:153-159 (1993)). Поскольку раковой опухоли для роста требуются новые капилляры в качестве путей для подачи питательных веществ и удаления отходов, раковые и стромальные клетки непрерывно секретируют VEGF, который распределяется по всей ткани и стимулирует миграцию клеток сосудистого эндотелия (Ferrara.N et al., Nat Rev. Cancer, 2:795-803, (2002)). Новообразованные сосуды, появление которых индуцировано раковыми клетками, отличаются незавершенностью по сравнению с обычно образуемыми капиллярами, поскольку они не поддерживаются окружающими клетками. Хотя VEGF связывается с рецепторами VEGFR1, 2 и 3, именно через VEGFR2-рецептор VEGF передает сигнал, ведущий к пролиферации, миграции и проницаемости эндотелиальных клеток (H. Zeng et al., J. Biol Chem, 276:26969-26976 (2001)). Таким образом, путем регулирования ангиогенеза с использованием лекарственных соединений, направленных на VEGF, можно воздействовать на пролиферацию раковых клеток и на заболевания, связанные с ангиогенезом. Из них в качестве лекарственных средств могут использоваться антитела, связывающиеся с VEGF, которые подвергают процессу гуманизации для повышения аффинности связывания с VEGF и снижения иммуногенности антител. Гуманизированные антитела описаны в литературе (Bending, Methods: Comp. Meth. Enzy., 8:83-93 (1995). Нейтрализующие анти-VEGF антитела подавляют рост различных линий опухолевых клеток человека у бестимусных мышей (Kim et al., Nature, 362:841-844 (1993); Warren et al., etc., J. Clin Invest., 95: 1789-1797 (1995); Borgstroem et al., Cancer Res., 56: 4032-4039 (1996); и Melnyk et al., Cancer Res, 56: 921-924 (1996)) и подавляют внутриглазной ангиогенез в модели ишемических сосудистых заболеваний сетчатки (Adamis et al., Arch Ophtalmol., 114:66-71 (1996)). Анти-VEGF-антитело можно локально вводить в глаз в эффективной концентрации для снижения активности VEGF. Такие ишемические заболевания сетчатки могут включать диабетическую ретинопатию или возрастную макулярную дегенерацию.

Анти-VEGF нейтрализующие антитела, разработанные на сегодняшний момент, включают бевацизумаб (Авастин™, Genentech Roche), который был одобрен FDA для лечения колоректального рака в феврале 2004 года. Показания к применению бевацизумаба были расширены до лечения в общей сложности шести типов прогрессирующих опухолей, включая метастатический колоректальный рак и прогрессирующий рак яичников. Кроме того, заявка на получение регистрационного удостоверения для Афлиберцепта (Bayer Health Care), разработанного для связывания VEGF, был утверждена FDA в 2011 году для лечения макулярной дегенерации. Однако в 2011 году FDA отозвал показания к применению Авастина™, связанные с раком молочных желез, из-за его неспособности показать достоверное увеличение общей выживаемости у больных раком молочных желез по сравнению с плацебо. Последующие данные, указывающие на то, что Авастин™ повышает риск сердечной недостаточности у больных раком молочных желез, позволяют предположить, что существует необходимость улучшить ранее разработанные анти-VEGF нейтрализующие антитела и определить их точное действие на доклинической стадии. Поскольку Авастин™ не связывается с мышиным VEGF, трудно точно определить его действие на доклинических моделях с использованием мышей. Таким образом, задачей настоящего изобретения является разработка антитела, которое связывается с VEGF как мыши, так и человека, посредством чего достигается достоверность результатов в доклинических моделях; и повышение аффинности связывания антитела с VEGF, посредством чего усиливается противоопухолевый эффект.

Посредством биопэннинга и увеличения аффинности авторы настоящего изобретения разработали антитело, содержащее новую определяющую комплементарность область (CDR), которая не была известна ранее, и которая за счет своего специфичного связывания с VEGF позволяет лечение опухолевых и различных внутриглазных неоваскулярных заболеваний.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Таким образом, целью настоящего изобретения является создание антитела, которое специфично связывается с VEGF.

Еще одной целью настоящего изобретения является создание фармацевтической композиции, содержащей указанное антитело.

Для достижения цели настоящего изобретения, указанной выше, предложено антитело, которое связывается с фактором роста сосудистого эндотелия (VEGF), причем антитело содержит:

1) вариабельную область легкой цепи, содержащую определяющую комплементарность область (CDR1)1, CDR2 и CDR3, причем CDR2 представлена аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; а CDR3 представлена аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и

2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3, причем CDR3 представлена аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Для достижения другой цели настоящего изобретения, описанной выше, предложена фармацевтическая композиция, содержащая указанные антитела, для предупреждения, диагностики или лечения рака или заболевания, связанного с ангиогенезом, вызванным сверхэкспрессией VEGF.

Антитело по настоящему изобретению показывает замечательную способность к связыванию VEGF человека и мыши, подавляет пролиферацию и проницаемость эндотелиальных клеток пупочной вены человека (HUVEC) и ингибирует рост опухоли, и, таким образом, оно может быть полезно в качестве антитела для предупреждения, диагностики или лечения рака или заболевания, связанного с ангиогенезом.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

Указанные выше и другие цели и признаки настоящего изобретения станут очевидными из последующего описания изобретения при рассмотрении в сочетании с прилагаемыми чертежами.

На фиг.1 показаны сенсограммы ассоциации и диссоциации клона HF2-11 с VEGF.

Фиг.2 представляет собой график, на котором показано ингибирование антителами по изобретению связывания VEGF с VEGFR2 без ингибирования связывания VEGF с VEGFR2.

Фиг.3 представляет собой график, на котором показано специфичное связывание антител по изобретению с VEGF-A человека и мыши.

На фиг.4 показаны результаты электрофореза клона HF2-11 в ДСН-ПААГ.

На фиг.5 показаны результаты масс-спектрометрического анализа тяжелой цепи (а) и легкой цепи (b) антитела HF2-4.

На фиг.6 показаны результаты эксклюзионной хроматографии (SEC) клона HF2-8.

На фиг.7 и 8 показаны результаты измерений с помощью ELISA связывающей способности антител по изобретению и Авастина с VEGF человека и мыши.

На фиг.9 показаны результаты испытаний подавляющего действия антител по изобретению и Авастина на пролиферацию эндотелиальных клеток пупочной вены человека (HUVEC).

На фиг.10 показаны результаты испытаний подавляющего действия антител по изобретению (а) и Авастина (b) на проницаемость HUVEC.

На фиг.11 показаны результаты испытаний подавляющего действия антител по изобретению на миграцию HUVEC.

На фиг.12 показано ингибирующее действие антител по изобретению на рост опухоли в животной модели с имплантированными клетками НТ29.

На фиг.13 показано подавляющее действие антител по изобретению на хориоидальный ангиогенез.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В настоящем изобретении предложено антитело, которое связывается с VEGF (далее указывается как «анти-VEGF антитело»), причем антитело содержит: 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3, причем CDR2 представлена аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1, а CDR3 представлена аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3, причем CDR3 представлена аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Список аминокислотных последовательностей CDR1, CDR2 и CDR3 (далее указаны как LCDR1, LCDR2 и LCDR3, соответственно) вариабельных областей легких цепей и CDR1, CDR2 и CDR3 (далее указаны как HCDR1, HCDR2 и HCDR3, соответственно) вариабельных областей тяжелых цепей антител по изобретению приведен в таблице 1 ниже.

[Таблица 1]Аминокислотные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельных областей легких и тяжелых цепей
Клоны	LCDR1	LCDR2 (SEQ:1)	LCDR3 (SEQ:2)	HCDR1	HCDR2	HCDR3 (SEQ:3)
F	SGGSNSAYGYG(SEQ:4)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	GFTFSSHGMQ(SEQ: 15)	GISSDGSWTGYGAAVKG(SEQ:35)	DFSTGYGADSIDA
HF2-1	SGGSDSAYGYG(SEQ:5)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	NFVFRSHGMQ(SEQ:16)	GISSDGSWTGYGAAVEG(SEQ:36)	DFSTGYGADSIDA
HF2-2	SGGSDSAYGYG(SEQ:5)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	RFNMRSHGMQ(SEQ:17)	GISSDGSWERVGAAVEG(SEQ:37)	DFSTGYGADSIDA
HF2-3	SGGSDSAYGYG(SEQ:5)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	HFNMRSHGMQ(SEQ:18)	GISSDGSWFRVAAAVEG(SEQ:38)	DFSTGYGADSIDA
HF2-4	SGGSDSAYGYG(SEQ:5)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	GWSMRSHGMQ(SEQ:19)	GISSDGSWRRHSAAVEG(SEQ:39)	DFSTGYGADSIDA
HF2-5	SGGSDSAYGYG(SEQ:5)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	GFMIRSHGMQ(SEQ:20)	GISSDGSWARHSAAVEG(SEQ:40)	DFSTGYGADSIDA
HF2-6	SGGSMEPLGYG(SEQ:6)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	RFLLRSHGMQ(SEQ:21)	GISSDGSWFRVAAAVEG(SEQ:38)	DFSTGYGADSIDA
HF2-7	SGGSMEPLGYG(SEQ:6)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	QFWIRSHGMQ(SEQ:22)	GISSDGSWFRVAAAVEG(SEQ:38)	DFSTGYGADSIDA
HF2-8	SGGSTYSLGYG(SEQ:7)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	GFHIRSHGMQ(SEQ:23)	GISSDGSWLKLSAAVEG(SEQ:41)	DFSTGYGADSIDA
HF2-9	SGGSMEPLGYG(SEQ:6)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	MFRIRSHGMQ(SEQ:24)	GISSDGSWFRVAAAVEG(SEQ:38)	DFSTGYGADSIDA
HF2-10	SGGSMEPLGYG(SEQ:6)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	FQYFRSHGMQ(SEQ:25)	GISSDGSWFRVAAAVEG(SEQ:38)	DFSTGYGADSIDA
HF2-11	SGGSSEPLGYG(SEQ:8)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	GFLIRSHGMQ(SEQ:26)	GISSDGSWVKVAAAVEG(SEQ:42)	DFSTGYGADSIDA
HF2-12	SGGSMEPLGYG(SEQ:6)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	YSEVRSHGMQ(SEQ:27)	GISSDGSWFRVAAAVEG(SEQ:38)	DFSTGYGADSIDA
HF2-13	SGGSDLLLGYG(SEQ:9)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	GFLVRSHGMQ(SEQ:28)	GISSDGSWQRVNAAVEG(SEQ:43)	DFSTGYGADSIDA
HF2-14	SGGSDSAYGYG(SEQ:5)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	HSSIRSHGMQ(SEQ:29)	GISSDGSWLRQDAAVEG(SEQ:44)	DFSTGYGADSIDA
HF2-15	SGGSQESLGYG(SEQ:10)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	GFVVRSHGMQ(SEQ:30)	GISSDGSWKATAAAVEG(SEQ:45)	DFSTGYGADSIDA
HF2-16	SGGSIEPLGYG(SEQ:11)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	GFRIRSHGMQ(SEQ:31)	GISSDGSWVKVAAAVEG(SEQ:42)	DFSTGYGADSIDA
HF2-17	SGGSIEPLGYG(SEQ:11)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	GFMIRSHGMQ(SEQ:20)	GISSDGSWRRHSAAVEG(SEQ:39)	DFSTGYGADSIDA
HF2-18	SGGSIEPLGYG(SEQ:11)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	YWAFRSHGMQ(SEQ:32)	GISSDGSWFSSAAAVEG(SEQ:46)	DFSTGYGADSIDA
HF2-19	SGGSDSAYGYG(SEQ:5)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	GFSTRSHGMQ(SEQ:33)	GISSDGSWKATAAAVEG(SEQ:45)	DFSTGYGADSIDA
HF2-20	SGGSDSAYGYG(SEQ:5)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	YMEYRSHGMQ(SEQ:34)	GISSDGSWSRVDAAVEG(SEQ:47)	DFSTGYGADSIDA
HF2-21	SGGSMEPLGYG(SEQ:6)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	FQYFRSHGMQ(SEQ:25)	GISSDGSWYRVQAAVEG(SEQ:48)	DFSTGYGADSIDA
HF2-22	SGGSTAGVGYG(SEQ:12)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	GFRIRSHGMQ(SEQ:31)	GISSDGSWFRVAAAVEG(SEQ:38)	DFSTGYGADSIDA
HF2-23	SGGSDLLLGYG(SEQ:9)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	GFRIRSHGMQ(SEQ:31)	GISSDGSWFSSAAAVEG(SEQ:46)	DFSTGYGADSIDA
HF2-24	SGGSQESLGYG(SEQ:10)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	RFNMRSHGMQ(SEQ:17)	GISSDGSWVKVAAAVEG(SEQ:42)	DFSTGYGADSIDA
HF2-25	SGGSNFPMGYG(SEQ:13)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	YMEYRSHGMQ(SEQ:34)	GISSDGSWFRMNAAVEG(SEQ:49)	DFSTGYGADSIDA
HF2-26	TAPADSAYGYG(SEQ:14)	WDDKRPS	GAWEYSGGVGI	RFNMRSHGMQ(SEQ:17)	GISSDGSWIRVQAAVEG(SEQ:50)	DFSTGYGADSIDA

Антитело, которое связывается с VEGF по настоящему изобретению, может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO 4-14; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO 15-34; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO 35-50; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 4; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 15; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 35; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 5; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 16; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 36; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 5; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 17; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 37; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 5; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 18; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 38; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 5; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 19; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 39; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 5; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 20; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 40; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 6; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 21; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 38; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 6; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 22; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 38; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 7; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 23; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 41; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 6; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 24; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 38; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 6; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 25; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 38; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 8; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 26; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 42; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 6; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 27; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 38; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 9; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 28; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 43; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 5; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 29; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 44; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 10; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 30; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 45; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 11; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 31; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 42; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 11; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 20; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 39; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 11; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 32; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 46; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 5; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 33; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 45; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 5; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 34; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 47; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 6; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 25; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 48; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 12; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 31; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 38; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 9; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 31; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 46; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 10; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 17; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 42; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 13; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 34; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 49; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 14; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 17; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 50; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.

Антитело, которое связывается с VEGF по настоящему изобретению, может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, представленную аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO 54-65; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, представленную аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO 78-104 (см. таблицу 2).

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать 1) вариабельную область легкой цепи, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 54; и 2) вариабельную область тяжелой цепи, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 78.

Анти-VEGF антитело по одному варианту осуществления настоящего изобретения может с