Фармацевтическая композиция для лечения и/или предотвращения рака желчного пузыря

Фармацевтическая композиция для лечения и/или предотвращения рака желчного пузыря

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Область техники

[0001] Настоящее изобретение относится к медицинскому использованию антитела против белка CAPRIN-1 или его фрагмента, например, в качестве средства для лечения и/или предотвращения рака желчного пузыря.

Уровень техники

[0002] В последнее время в мире появились различные антительные лекарственные средства для лечения рака посредством нацеленного воздействия на белки антигенов на клетках рака. Антительные лекарственные средства показывают определенные положительные эффекты в качестве терапевтических средств со специфичностью к видам рака и получили внимание. Однако большинство белков антигенов-мишеней также экспрессируют нормальные клетки, и введение такого антитела ослабляет не только клетки рака, но также нормальные клетки, экспрессирующие антиген, что ведет к проблеме их побочных эффектов. Соответственно, если идентифицируют антиген рака, в частности, экспрессируемый на клеточной поверхности рака, и в качестве фармацевтического средства можно использовать антитело, нацеленное на антиген, можно ожидать лечение антительным лекарственным средством с меньшими побочными эффектами.

[0003] Специалистам в данной области известно в качестве общего технического знания, что рак желчного пузыря, среди различных видов рака, очень сложно обнаружить на ранней стадии по причине отсутствия симптомов и ранних симптомов; рак желчного пузыря, не подлежащий радикальному лечению, такой как метастазы в лимфатических узлах, метастазы в печени, метастазы в легких, метастазы в костях или перитонеальные метастазы очень сложно лечить, что ведет к коэффициенту выживаемости в течение пяти лет почти 0% для пациентов с раком желчного пузыря, не поддающимся хирургическому вмешательству; и рак желчного пузыря очень сложно лечить, а эффективная терапия для рака не разработана.

[0004] Ассоциированный с цитоплазмой и пролиферацией белок 1 (CAPRIN-1) известен как внутриклеточный белок, который экспрессируют при активации нормальные клетки в фазе покоя или при возникновении клеточного деления и который участвует в контроле транспортировки и трансляции мРНК через формирование внутриклеточных стрессовых гранул с РНК в клетках. Обнаружено, что экспрессия CAPRIN-1, в частности, происходит на поверхности клеток рака, таких как клетки рака молочной железы, и CAPRIN-1 изучали в качестве мишени антительных лекарственных средств для терапии рака (патентная литература 1). Однако в патентной литературе 1 не отмечена экспрессия белка CAPRIN-1 на клетках рака желчного пузыря и не описано или не сделано предположения о том, что белок CAPRIN-1 может представлять собой белок антигена рака желчного пузыря.

Список цитируемой литературы

Патентная литература

[0005] Патентная литература 1: WO 2010/016526.

Сущность изобретения

Техническая проблема

[0006] Цель настоящего изобретения состоит в том, чтобы идентифицировать белок антигена рака, экспрессия которого происходит на поверхности клеток рака желчного пузыря, и предоставить использование антитела, нацеленного на белок, в качестве средства для лечения и/или предотвращения рака желчного пузыря.

Решение проблемы

[0007] Авторы настоящего изобретения проводили тщательные исследования и, как результат, обнаружили, что часть белка CAPRIN-1 экспрессирует клеточная поверхность клеток рака желчного пузыря, а также обнаружили, что антитело против белка CAPRIN-1 ослабляет клетки рака желчного пузыря, которые экспрессируют белок CAPRIN-1, и выполнили настоящее изобретение.

[0008] Соответственно, настоящее изобретение имеет следующие характеристики.

[0009] Настоящее изобретение предусматривает фармацевтическую композицию для лечения и/или предотвращения рака желчного пузыря, которая содержит, в качестве активного ингредиента, антитело или его фрагмент, которое имеет иммунологическую реактивность с белком CAPRIN-1, который содержит аминокислотную последовательность, приведенную в любой из последовательностей с четными номерами от SEQ ID NO: с 2 до 30, или аминокислотную последовательность, которая имеет идентичность последовательностей 80% или больше, предпочтительно 85% или больше, более предпочтительно 90% или больше и наиболее предпочтительно 95% или больше с аминокислотной последовательностью или фрагментом белка CAPRIN-1, содержащим по меньшей мере семь последовательных аминокислотных остатков аминокислотной последовательности белка.

[0010] В другом варианте осуществления антитело, описанное выше, представляет собой моноклональное антитело или поликлональное антитело.

[0011] В другом варианте осуществления антитело представляет собой антитело человека, гуманизированное антитело, химерное антитело, одноцепочечное антитело или полиспецифическое антитело.

[0012] В другом варианте осуществления антитело представляет собой антитело, которое имеет иммунологическую реактивность с пептидом, который содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 271, SEQ ID NO: 273, SEQ ID NO: 266, SEQ ID NO: 270, SEQ ID NO: 272 или SEQ ID NO: 269, или аминокислотную последовательность, которая имеет идентичность последовательностей 80% или больше, предпочтительно 85% или больше, более предпочтительно 90% или больше и наиболее предпочтительно 95% или больше с аминокислотной последовательностью или фрагментом пептида.

[0013] В другом варианте осуществления антитело представляет собой любое одно из следующих антител с (a) до (ao), которое имеет иммунологическую реактивность с белком CAPRIN-1, или фармацевтическую композицию для лечения и/или предотвращения рака желчного пузыря, которая содержит антитело в качестве активного ингредиента.

[0014] (a) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 37, 38 и 39, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 41, 42 и 43, соответственно.

[0015] (b) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 47, 48 и 49, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 51, 52 и 53, соответственно.

[0016] (c) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 57, 58 и 59, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 61, 62 и 63, соответственно.

[0017] (d) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 67, 68 и 69, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 71, 72 и 73, соответственно.

[0018] (e) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 77, 78 и 79, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 81, 82 и 83, соответственно.

[0019] (f) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 87, 88 и 89, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 91, 92 и 93, соответственно.

[0020] (g) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 97, 98 и 99, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 101, 102 и 103, соответственно.

[0021] (h) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 107, 108 и 109, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 111, 112 и 113, соответственно.

[0022] (i) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 117, 118 и 119, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 121, 122 и 123, соответственно.

[0023] (j) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 127, 128 и 129, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 121, 122 и 123, соответственно.

[0024] (k) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 132, 133 и 134, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 136, 137 и 138, соответственно.

[0025] (l) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 142, 143 и 144, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 146, 147 и 148, соответственно.

[0026] (m) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 142, 143 и 144, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 152, 153 и 154, соответственно.

[0027] (n) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 157, 158 и 159, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 161, 162 и 163, соответственно.

[0028] (o) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 167, 168 и 169, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 171, 172 и 173, соответственно.

[0029] (p) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 167, 168 и 169, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 177, 178 и 179, соответственно.

[0030] (q) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 167, 168 и 169, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 182, 183 и 184, соответственно.

[0031] (r) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 167, 168 и 169, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 187, 188 и 189, соответственно.

[0032] (s) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 167, 168 и 169, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 192, 193 и 194, соответственно.

[0033] (t) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 197, 198 и 199, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 201, 202 и 203, соответственно.

[0034] (u) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 207, 208 и 209, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 211, 212 и 213, соответственно.

[0035] (v) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 217, 218 и 219, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 221, 222 и 223, соответственно.

[0036] (w) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 227, 228 и 229, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 231, 232 и 233, соответственно.

[0037] (x) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 237, 238 и 239, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 241, 242 и 243, соответственно.

[0038] (y) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 247, 248 и 249, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 251, 252 и 253, соответственно.

[0039] (z) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 276, 277 и 278, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 280, 281 и 282, соответственно.

[0040] (aa) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 276, 277 и 278, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 286, 287 и 288, соответственно.

[0041] (ab) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 291, 292 и 293, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 295, 296 и 297, соответственно.

[0042] (ac) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 301, 302 и 303, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 305, 306 и 307, соответственно.

[0043] (ad) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 311, 312 и 313, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 315, 316 и 317, соответственно.

[0044] (ae) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 321, 322 и 323, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 325, 326 и 327, соответственно.

[0045] (af) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 331, 332 и 333, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 335, 336 и 337, соответственно.

[0046] (ag) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 341, 342 и 343, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 345, 346 и 347, соответственно.

[0047] (ah) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 351, 352 и 353, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 354, 355 и 356, соответственно.

[0048] (ai) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 351, 352 и 357, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 354, 355 и 356, соответственно.

[0049] (aj) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 373, 374 и 375, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 377, 378 и 379, соответственно.

[0050] (ak) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 383, 384 и 385, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 387, 388 и 389, соответственно.

[0051] (al) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 393, 394 и 395, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 387, 388 и 389, соответственно.

[0052] (am) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 398, 399 и 400, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 402, 403 и 404, соответственно.

[0053] (an) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 408, 409 и 410, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 412, 413 и 414, соответственно.

[0054] (ao) Антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 418, 419 и 420, соответственно, и вариабельный домен легкой цепи, который содержит определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3), состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 422, 423, и 424, соответственно.

[0055] В другом варианте осуществления антитело или его фрагмент по настоящему изобретению конъюгируют с противоопухолевым средством.

[0056] Настоящее изобретение дополнительно предусматривает комбинированное фармацевтическое средство, которое содержит комбинацию фармацевтической композиции по настоящему изобретению и фармацевтической композиции, которая содержит противоопухолевое средство.

[0057] Настоящее изобретение дополнительно предусматривает способ лечения и/или предотвращения рака желчного пузыря, который включает введение фармацевтической композиции или комбинированного фармацевтического средства по настоящему изобретению субъекту.

[0058] Данное описание охватывает содержание описания и/или рисунки из японской патентной заявки № 2012-080780, на основе которой в настоящей заявке испрашивают приоритет.

Полезные эффекты изобретения

[0059] Антитело против белка CAPRIN-1, используемое в настоящем изобретении (далее в настоящем документе часто обозначаемое как «антитело против CAPRIN-1»), ослабляет клетки рака желчного пузыря. Соответственно, антитело против белка CAPRIN-1 можно использовать для лечения и предотвращения рака желчного пузыря.

Описание вариантов осуществления

[0060] Противоопухолевую активность антитела, используемого в настоящем изобретении, против полипептида, состоящего из аминокислотной последовательности, приведенной в любой из последовательностей с четными номерами с SEQ ID NO: с 2 до 30, можно оценивать посредством исследования супрессии опухолевого роста in vivo в животном-опухоленосителе или исследования того, как описано ниже, наблюдают ли цитотоксичность посредством клеток иммунной системы или комплемента в опухолевых клетках, экспрессирующих полипептид in vitro.

[0061] Нуклеотидные последовательности полинуклеотидов, кодирующих белки, состоящие из аминокислотных последовательностей, приведенных в последовательностях с четными номерами от SEQ ID NO: с 2 до 30 (т.е. SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28 и 30), изложены в последовательностях с нечетными номерами от SEQ ID NO: с 1 до 29 (т.е. SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27 и 29).

[0062] Аминокислотные последовательности, приведенные в SEQ ID NO: 6, 8, 10, 12 и 14 в списке последовательностей, представляют собой аминокислотные последовательности белка CAPRIN-1, выделенные в качестве полипептидов, которые связываются с антителом, в частности, присутствующим в сыворотке, получаемой от собак-опухоленосителей с помощью способа SEREX, используя библиотеку кДНК, полученную из ткани семенника собаки, и сыворотку собак с раком молочной железы; аминокислотные последовательности, приведенные в SEQ ID NO: 2 и 4, представляют собой аминокислотные последовательности, выделенные в качестве гомологичных факторов человека (гомологов или ортологов) полипептидов; аминокислотная последовательность, приведенная в SEQ ID NO: 16, представляет собой аминокислотную последовательность, выделенную в качестве его гомологичного фактора коровы; аминокислотная последовательность, приведенная в SEQ ID NO: 18, представляет собой аминокислотную последовательность, выделенную в качестве его гомологичного фактора лошади; аминокислотные последовательности, приведенные в SEQ ID NO: с 20 до 28, представляют собой аминокислотные последовательности, выделенные в качестве его гомологичных факторов мыши; и аминокислотная последовательность, приведенная в SEQ ID NO: 30, представляет собой аминокислотную последовательность, выделенную в качестве его гомологичного фактора курицы (см. пример 1, описанный ниже). Известно, что экспрессия белка CAPRIN-1 происходит при активации нормальных клеток в фазе покоя или при возникновении клеточного деления.

[0063] Исследование выявило, что клеточная поверхность клеток рака желчного пузыря экспрессирует белок CAPRIN-1. В настоящем изобретении предпочтительно используют антитело, которое связывается с частью белка CAPRIN-1, экспрессированной на клеточной поверхности клеток рака желчного пузыря. Примеры фрагментарного пептида (фрагмента) белка CAPRIN-1, экспрессируемого на клеточной поверхности клеток рака желчного пузыря, включают пептиды, которые содержат по меньшей мере семь последовательных аминокислотных остатков в области положении аминокислотных остатков с (aa) 233 до (aa) 343, положений аминокислотных остатков с (aa) 512 до C-конца или положений аминокислотных остатков с (aa) 50 до (aa) 98 аминокислотных последовательностей, приведенных в последовательностях с четными номерами SEQ ID NO: с 2 до 30, за исключением SEQ ID NO: 6 и 18, в списке последовательностей. В частности, например, фрагментарный пептид (фрагмент) представляет собой пептид, который содержит по меньшей мере семь последовательных аминокислотных остатков в аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 429, SEQ ID NO: 428, SEQ ID NO: 273 (в аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 273, область аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 274 или SEQ ID NO: 275, является предпочтительной), SEQ ID NO: 266 (в аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 266, область аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 267 или SEQ ID NO: 268, является предпочтительной), SEQ ID NO: 270, SEQ ID NO: 272, SEQ ID NO: 269, SEQ ID NO: 430, SEQ ID NO: 431 или SEQ ID NO: 432, или в аминокислотной последовательности, которая имеет идентичность последовательностей 80% или больше, предпочтительно 85% или больше, более предпочтительно 90% или больше и наиболее предпочтительно 95% или больше, такую как 96% или больше, 97% или больше, 98% или больше или 99% или больше с аминокислотной последовательностью, указанной выше. Примеры антитела, используемого в настоящем изобретении, включают все антитела, которые связываются с каким-либо из этих пептидов и проявляют противоопухолевую активность.

[0064] Антитело против белка CAPRIN-1, используемое в настоящем изобретении, может относиться к любому типу антител, который проявляет противоопухолевую активность, и их примеры включают моноклональные антитела; поликлональные антитела; рекомбинантные антитела, такие как синтетические антитела, полиспецифические антитела (например, диатела и триатела), гуманизированные антитела, химерные антитела и одноцепочечные антитела (scFv); антитела человека; и фрагменты этих антител, такие как Fab, F(ab')₂ и Fv. Эти антитела и их фрагменты могут получать специалисты в данной области посредством известного способа. В настоящем изобретении, антитело, способное специфически связываться с белком CAPRIN-1, является желательным, и предпочтительно представляет собой моноклональное антитело. Однако антитело может представлять собой поликлональное антитело, которое является гомогенным и которое можно стабильно получать. Когда субъектом является человек, антитело человека или гуманизированное антитело является желательным для ингибирования или супрессии реакции отторжения.

[0065] Здесь термин «специфически связывается с белком CAPRIN-1» относится к специфичному связыванию с белком CAPRIN-1 и по существу не связыванию других белков.

[0066] Противоопухолевую активность антитела, которое можно использовать в настоящем изобретении, можно оценивать, как описано ниже, посредством исследования супрессии опухолевого роста in vivo у животного-опухоленосителя или исследования того, наблюдают ли или нет цитотоксичность посредством клеток иммунной системы или комплемента на опухолевых клетках, экспрессирующих полипептид in vitro.

[0067] Субъект в качестве объекта лечения и/или предотвращения рака желчного пузыря в настоящем изобретении представляет собой млекопитающее, такое как человек, комнатное животное, домашнее животное или животное для использования в соревнованиях; и предпочтительно является человеком.

[0068] Далее описаны получение антигена, получение антитела и фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением.

[0069] Получение антигена для получения антитела

Белок или его фрагмент, подлежащий использованию в качестве сенсибилизирующего антигена для получения антитела против белка CAPRIN-1, используемого в настоящем изобретении, можно извлекать из животных любого вида, таких как человек, собака, корова, лошадь, мышь, крыса или курица, и предпочтительно выбор делают с учетом совместимости с родительскими клетками, используемыми для слияния клеток. В целом, белок предпочтительно представляет собой белок, полученный от млекопитающего, в частности, человека. Например, когда белок CAPRIN-1 представляет собой белок CAPRIN-1 человека, можно использовать белок CAPRIN-1 человека, его фрагментарный пептид или клетки, экспрессирующие белок CAPRIN-1 человека.

[0070] Нуклеотидные последовательности и аминокислотные последовательности белка CAPRIN-1 человека и их гомолог можно получать, например, посредством осуществления доступа к GenBank (NCBI, USA) и использования такого алгоритма, как BLAST или FASTA (Karlin and Altschul, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90: 5873-5877, 1993; Altschul et al., Nucleic Acids Res., 25: 3389-3402, 1997).

[0071] В настоящем изобретении целью является нуклеиновая кислота или белок, состоящий из последовательности, которая имеет идентичность последовательностей от 70% до 100%, предпочтительно от 80% до 100%, более предпочтительно от 90% до 100% и наиболее предпочтительно от 95% до 100%, например, от 97% до 100%, от 98% до 100%, от 99% до 100% или от 99,5% до 100%, с нуклеотидной последовательность или аминокислотной последовательностью ORF или зрелой части гена CAPRIN-1 человека, когда ее нуклеотидная последовательность и аминокислотная последовательность основаны на последовательностях, приведенных в SEQ ID NO: 1 или 3 и SEQ ID NO: 2 или 4, соответственно. Здесь термин «% идентичности последовательностей» между двумя аминокислотными (или нуклеотидными) последовательностями относится к процентной доле (%) числа аминокислот (или нуклеотидов) в одной последовательности, совпадающих с таковыми в другой последовательности от общего числа, когда две последовательности выравнивают (выровнены) с максимальной степенью сходства или совпадения посредством введения или не введения пропуска.

[0072] Фрагмент белка CAPRIN-1 имеет длину от аминокислотной длины эпитопа (антигенной детерминанты), который представляет собой минимальную единицу, распознаваемую антителом, до аминокислотной длины, которая короче общей длины белка. Эпитоп относится к полипептидному фрагменту, который обладает антигенностью или иммуногенностью у млекопитающих, предпочтительно у человека, и его минимальная единица состоит приблизительно из от 7 до 12 аминокислот, например, от 8 до 11 аминокислот. Примеры эпитопа включают аминокислотные последовательности, приведенные в SEQ ID NO: 273, SEQ ID NO: 266, SEQ ID NO: 270, SEQ ID NO: 272 и SEQ ID NO: 269; и аминокислотную последовательность, которая имеет идентичность последовательностей 80% или больше, предпочтительно 85% или больше, более предпочтительно 90% или больше и наиболее предпочтительно 95% или больше с любой из аминокислотных последовательностей.

[0073] Полипептид, который содержит белок CAPRIN-1 человека или его фрагментарный пептид, можно синтезировать, например, в соответствии со способом химического синтеза, таким как способ с флуоренилметилоксикарбонилом (Fmoc) или с трет-бутилоксикарбонилом (tBoc) (Seikagaku Jikken Koza (Course of Biochemical Experiments) 1, Tanpakushitsu no Kagaku (Protein Chemistry) IV, Kagaku shushoku to peputido gosei (Chemical modification and peptide synthesis), под редакцией the Japanese Biochemical Society, Tokyo Kagaku Dojin (Japan), 1981). Альтернативно, пептид можно синтезировать посредством обычного способа с использованием различных коммерчески доступных пептидных синтезаторов. Кроме того, целевой пептид можно получать посредством получения ДНК, которая кодирует полипептид, посредством известной процедуры генетической инженерии (например, Sambrook, et al., Molecular Cloning, 2nd edition, Current Protocols in Molecular Biology (1989), Cold Spring Harbor Laboratory Press; Ausubel, et al., Short Protocols in Molecular Biology, 3rd edition, A compendium of Methods from Current Protocols in Molecular Biology (1995), John Wiley & Sons), встраивания ДНК в экспрессирующий вектор и введения его в клетку-хозяина, и предоставления клетке-хозяину возможности продуцировать пептид.

[0074] ДНК, которая кодирует полипептид, можно легко получать посредством известной процедуры генетической инженерии или посредством обычного способа с использованием коммерчески доступного пептидного синтезатора. Например, ДНК, содержащую нуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, можно получать посредством ПЦР с использованием пары праймеров, разработанных так, что нуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, можно амплифицировать с использованием хромосомы человека или библиотеки кДНК в качестве матрицы. Условия реакции для ПЦР можно определять надлежащим образом, и их неограничивающие примеры включают условия, в которых используют ПЦР буфер, со