Человеческие анти-il-6 антитела с пролонгированным периодом выведения in vivo и их применение при лечении онкологических, аутоиммунных заболеваний и воспалительных заболеваний

Человеческие анти-il-6 антитела с пролонгированным периодом выведения in vivo и их применение при лечении онкологических, аутоиммунных заболеваний и воспалительных заболеваний

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Заявление о приоритете

[0001] В данной заявке заявлен приоритет заявки США, серийный номер 61/148,106, поданной 29 января 2009 г., и заявки США, серийный номер 61/184,182, поданной 4 июня 2009 г., обе из которых включены в данную заявку полностью путем ссылок для всех целей.

Область техники

[0002] Данное изобретение относится к молекулам анти-IL-6 антител, ингибирующих биологические эффекты IL-6 и имеющих пролонгированный период полувыведения in vivo. Анти-IL-6 антитела являются полезными для лечения расстройств, связанных с IL-6, включая воспалительные расстройства, аутоиммунные расстройства, опухоли и депрессию.

Уровень техники

[0003] Интерлейкин 6 (IL-6) является 26 kDa плейотропным про-воспалительным цитокином, который вырабатывают многие клеточные типы, включая стимулированные фибробласты, моноциты и эндотелиальные клетки, образующие основной источник IL-6 in vivo. Клетки, такие, как Т клетки, В клетки, макрофаги, кератиноциты, остеобласты и несколько других типов, могут продуцировать IL-6 при стимуляции. IL-6 также экспрессируется из опухолевых клеточных линий и опухолевых клеток, например, клеток саркомы легких, рака простаты, миеломы, гипернефромы и сердечной миксомы (Kishimoto, Т., (1989) Blood 74:1-10; Smith Р.С. et al. (2001) Cytokine and Growth factor Reviews 12:33-40). В невоспалительных условиях IL-6 выделяется из адипозных тканей (Wallenius et al., (2002) Nat. Med. 8:75).

[0004] Для начала клеточных сигналов, IL-6 связывается с трансмембранным рецептором с низкой аффинностью, IL-6 рецептор альфа (который также имеет название IL-6Rα, IL-6Ra, IL-6R, gp80 или CD126) с образованием комплекса "IL-6:IL-6Ra". Данный комплекс связывается с рецептором сигналов gp130; IL-6Rα и gp130, которые вместе образуют сайт связывания IL-6 высокой аффинности, и приводят к образованию гексамера, составленного из двух копий каждого из IL-6, IL-6Ra и gp130 (Somers, W., et al. (1997) 1,9 EMBO J. 16:989-997). Трансмембранные и цитоплазмовые домены IL-6Ra не нужны для передачи сигналов, поскольку IL-6Ra также существует в виде растворимой выделенной формы (sIL-6R или sIL-6Ra). Растворимый рецептор вырабатывается либо путем дифференциального сплайсинга IL-6Ra сигнала, либо путем протеолитического слущивания. SIL-6R способен к формированию комплекса лиганд-рецепторов с IL-6, "IL-6: sIL-6Ra". Данный комплекс может связывать gp130 на клетках и, таким образом, начинать клеточную сигнализацию в gp130 позитивных клетках, даже если такие клетки не экспрессируют IL-6Ra. Таким образом, sIL-6R имеет потенциал к расширению спектра клеточного ответа на IL-6, и, как полагают, играет важную роль в IL-6-опосредованном воспалении (Jones, S. A et al. (2001) FASEB J. 15:43-58).

[0005] Была установлена кристаллическая структура человеческого IL-6 лиганда (Somers, W., et al. (1997) 1,9 EMBO J. 16:989-997). Кристаллическая структура внеклеточного домена человеческого IL-6Ra (Varghese et al. (2002) PNAS USA 99:15959-15964), и гексамерная структура IL-6/IL-6R/gp130 комплекса (Boulanger et al. (2003) Science 300:2101-2104), также была решена. Данные структуры в сочетании с исследованиями мутагенности идентифицировали три сайта на поверхности IL-6, которые участвуют в функциональной активности IL-6 в комплексе с различными компонентами рецепторов. Остатки сайта 1 участвуют во взаимодействии между IL-6 и IL-6Ra. Остатки сайта 2 участвуют во взаимодействии между IL-6 и gp130 домен связывания цитокинов. Остатки сайта 3 IL-6 участвуют во взаимодействии Ig-подобного домена второго gp130 в гексамерном комплексе. Четвертый сайт IL-6 был идентифицирован таким, в котором IL-6 взаимодействует со второй молекулой IL-6 в гексамерном IL-6/IL-6R/gp130 комплексе (Menziani et al. (1997) Proteins: Structure Function and Genetics 29, 528).

[0006] Был выделен ряд анти-IL-6 лигандных моноклональных антител. Были выполнены исследования картирования, которые показали, что они связываются в различных сайтах, как описано выше, на поверхности человеческого IL-6 (Brakenhoff et al. (1990) J. Immunol. 145:561-568; Wijdenes et al. (1991) Mol Immunol. 28:1183-1191; Brakenhoff et al. (1994) JBC 269:86; Kalai et al. (1996) Eur J Biochem 238 714-723; Kalai et al. (1997) Blood 89:1319-1333).

[0007] Повышенное IL-6 было задействовано в качестве основного цитокина для многих симптомов заболеваний. Уровни IL-6 в крови были показаны как повышенные в таких заболеваниях, как ревматоидный артрит, болезнь Кастлемана, ювенильный идиопатический артрит и болезнь Хрона (Nishimoto N, and Kishimoto Т. (2004) Curr Op in Pharmacology 4:386-391). Из-за этого IL-6 было задействовано в стимулировании патологии таких воспалительных показаний. Дополнительно, множество типов опухолей, как было показано, стимулируются IL-6, включая меланому, почечно-клеточный рак, саркому Капоши, карциному яичников, лимфому, лейкемию, множественную миелому и карциному простаты (Keller Е.Т. et al. (1996) Front Biosci. 1:340-57). Про повышенные уровни в крови IL-6 сообщали для нескольких видов рака. При некоторых признаках рака повышенные уровни IL-6 использовали в качестве прогностических индикаторов заболевания.

[0008] Ввиду особой роли IL-6 при заболевании, было разработано множество мышиных, химерных, гуманизированных и человеческих античеловеческих IL-6 моноклональных антител в качестве потенциальных терапий (например, US 5856135, WO 2004/020633, US 20060257407 A1, US 7291721). Химерное человеческо-мышиное анти-IL-6 антитело cCLB8 (известное, как CNTO 328) использовали для лечения пациентов с множественной миеломой (van Zaanen et al. (1998) Brit. Journal. Haematology 102:783), где стабилизация заболевания наблюдалась у большинства пациентов.

[0009] Положительное влияние ингибирования IL-6 сигналов при раковых и воспалительных заболеваниях было дополнительно описано путем применения гуманизированного анти-IL-6Ra антитела Тоцилизумаб (также известного как hПМ-1, MRA и Актемра). Это гуманизированная версия мышиного анти-IL6Ra антитела ПМ-1. Лечение пациентов данным антителом доказало эффективность для ряда заболевания, включая ревматоидный артрит, ювенильный идиопатический артрит, болезнь Хрона, миелопролиферативное расстройство, болезнь Кастлемана и системную красную волчанку (СКВ) (Mihara et al. (2005) Expert Opinion on Biological Therapy. 5:683-90).

[0010] Критическим вопросом при лечении, основанном на антителах, является персистенция иммуноглобулинов в кровообращении. Скорость иммуноглобулинового клиренса непосредственно влияет на количество и частоту дозировки иммуноглобулина. Повышенная дозировка и частота дозировок могут приводить к неблагоприятным эффектам для пациентов и также повышать медицинские затраты. Ввиду фармацевтической важности терапий, основанных на анти-IL-6 антителе, существует необходимость в разработке модифицированного высокоаффинного человеческого анти-IL-6 антитела, имеющего увеличенный период полувыведения in vivo.

Сущность изобретения

[0011] Данное изобретение относится к высокоаффинным человеческим анти-IL-6 антителам, которые специфично связывают человеческое IL-6 и имеют пролонгированный период полувыведения in vivo. В одном варианте исполнения, период полувыведения in vivo анти-IL-6 антитела, описанного в данной заявке, составляет от 10 дней до 40 дней. В конкретном варианте исполнения, период полувыведения in vivo анти-IL-6 антитела, описанного в данной заявке, составляет от 25 дней до 35 дней. В одном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело, описанное в данной заявке, содержит VH и/или VL домен анти-IL-6 антитела, описанные в публикации РСТ № WO 2008/065378. В одном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит человеческий IgG константный домен, имеющий одно или более аминокислотных замещений относительно человеческого IgG константный домен дикого типа. В конкретном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит человеческий IgG константный домен, содержащий M252Y, S254T и Т256Е аминокислотные замещения, где аминокислотные остатки пронумерованы в соответствии с индексом ЕС, как в Kabat. В другом варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:9 и последовательность легкой цепи SEQ ID NO:10.

[0012] Данное изобретение дополнительно относится к нуклеиновым кислотам, кодирующим человеческое анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения, векторам, содержащим нуклеиновые кислоты, клеткам, содержащим данные векторы, и способам получения человеческого анти-IL-6 антитела, имеющего пролонгированный период полувыведения.

[0013] В дополнительных аспектах данного изобретения представлена выделенная нуклеиновая кислота, содержащая последовательность, кодирующая человеческое анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения в соответствии с данным изобретением, и способы получения человеческого анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения, включающее экспрессирование указанной нуклеиновой кислоты в условиях для получения указанного человеческого анти-IL-6 антитела, и его восстановление.

[0014] В дополнительном аспекте представлена клетка-хозяина содержащая или трансформированная нуклеиновой кислотой в соответствии с данным изобретением.

[0015] Дополнительные аспекты данного изобретения обеспечивают композиции, содержащие анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением, и их применение в способах связывания, ингибирования и/или нейтрализации IL-6, включая способы лечения человеческого или животного организма при помощи терапии. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является стерильной жидкой композицией. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум 100 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В другом варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является лиофилизованной композицией. В дополнительном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением представляет собой фармацевтическую композицию.

[0016] Антитела в соответствии с этим изобретением могут быть использованы в способе лечения или диагностики, таком, как способ лечения (что может включать профилактическое лечение) заболевания или расстройства человеческого или животного организма (например, у человеческого пациента), который включает введение указанному пациенту эффективное количество связывающего агента в соответствии с этим изобретением. Состояния, которые можно вылечить в соответствии с данным изобретением включают любые состояния, в которых задействовано IL-6, как подробно описано по всей данной заявке.

[0017] Данное изобретение также включает способы нейтрализации IL-6 активности в сыворотке человеческого пациента, который нуждается в этом, включающие введение человеческому пациенту эффективное количество анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. Данное изобретение дополнительно включает способы профилактики, контроля, лечения или облегчения воспалительного заболевания или расстройства, аутоиммунного заболевания или расстройства, пролиферативного заболевания, заболевания или расстройства, связанного с аберрантной экспрессией и/или активностью IL-6, заболевания или расстройства, связанного с аберрантной экспрессией и/или активностью IL-6 рецептора, или одним и более его симптомами, где указанные способы включают введение субъекту, который нуждается в этом, профилактически или терапевтически эффективного количества анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением.

[0018] Один аспект в соответствии с данным изобретением относится к выделенному модифицированному антителу, которое специфично связывается с IL-6, где модифицированное антитело содержит вариабельный домен и человеческий IgG константный домен, имеющий одно или более аминокислотных замещений относительно человеческого константного домена IgG дикого типа, где антитело имеет пролонгированный период полувыведения по сравнению с периодом полувыведения родительского антитела, содержащего указанный вариабельный домен и человеческий IgG константный домен дикого типа. В одном варианте исполнения данного аспекта в соответствии с данным изобретением, период полувыведения модифицированного антитела как минимум в 2 раза, как минимум 3 раза, как минимум 4 раза, как минимум 5 раз, как минимум 10 раз или как минимум 20 раз длиннее, чем период полувыведения антитела дикого типа. В другом варианте исполнения, период полувыведения модифицированного антитела в 2 раза, 3 раза, 4 раза, 5 раз, 10 раз или 20 раз длиннее, чем период полувыведения антитела дикого типа. В дополнительном варианте исполнения, период полувыведения модифицированного антитела от 2 раз до 3 раз, от 2 раз до 5 раз, от 2 раз до 10 раз, от 3 раз до 5 раз, или от 3 раз до 10 раз длиннее, чем период полувыведения антитела дикого типа. В еще одном варианте исполнения, период полувыведения модифицированного антитела составляет как минимум 10 дней, как минимум 15 дней, как минимум 20 дней, как минимум 25 дней, как минимум 26 дней, как минимум 27 дней, как минимум 28 дней, как минимум 29 дней, как минимум 30 дней, как минимум 35 дней, как минимум 40 дней, как минимум 45 дней или как минимум 50 дней. В еще одном дополнительном варианте исполнения, период полувыведения модифицированного антитела составляет 10 дней, 15 дней, 20 дней, 25 дней, 26 дней, 27 дней, 28 дней, 29 дней, 30 дней, 35 дней, 40 дней, 45 дней или 50 дней. В еще одном дополнительном варианте исполнения, период полувыведения модифицированного антитела составляет от 10 дней до 20 дней, от 10 дней до 30 дней, от 10 дней до 40 дней, от 10 дней до 50 дней, от 20 дней до 30 дней, от 20 дней до 40 дней, от 20 дней до 50 дней, от 25 дней до 30 дней, от 25 дней до 40 дней, от 25 дней до 50 дней, от 30 дней до 40 дней, от 30 дней до 50 дней или от 40 дней до 50 дней. В еще одном варианте исполнения, период полувыведения модифицированного антитела представляет собой период полувыведения, измеренный у млекопитающего. В другом варианте исполнения, период полувыведения модифицированного антитела представляет собой период полувыведения, измеренный у нечеловеческого примата. В дополнительном варианте исполнения, модифицированное антитело представляет собой период полувыведения, измеренный у человеческого субъекта.

[0019] Другой аспект, в соответствии с данным изобретением, относится к выделенному модифицированному антителу, которое специфично связывается с IL-6, где модифицированное антитело содержит человеческий IgG константный домен, имеющий одно или более аминокислотных замещений относительно человеческого константного домена IgG дикого типа, где антитело имеет уменьшенную скорость клиренса по сравнению со скоростью клиренса антитела дикого типа, содержащего человеческий IgG константный домен дикого типа. В одном варианте исполнения данного аспекта в соответствии с данным изобретением, скорость клиренса модифицированного антитела в как минимум 2 раза, как минимум 3 раза, как минимум 4 раза, как минимум 5 раз, как минимум 10 раз или как минимум 20 раз ниже, чем скорость клиренса антитела дикого типа. В другом варианте исполнения, скорость клиренса модифицированного антитела в 2 раза, 3 раза, 4 раза, 5 раз, 10 раз или 20 раз ниже, чем скорость клиренса антитела дикого типа. В еще одном дополнительном варианте исполнения, скорость клиренса модифицированного антитела в от 2 раз до 3 раз, от 2 раз до 5 раз, от 2 раз до 10 раз, от 3 раз до 5 раз, или от 3 раз до 10 раз ниже, чем скорость клиренса антитела дикого типа. В другом варианте исполнения, скорость клиренса модифицированного антитела составляет не более чем 1 мл/кг/день, не более чем 2 мл/кг/день, не более чем 3 мл/кг/день, не более чем 4 мл/кг/день, не более чем 5 мл/кг/день, не более чем 7 мл/кг/день, не более чем 10 мл/кг/день, не более чем 15 мл/кг/день или не более чем 20 мл/кг/день. В дополнительном варианте исполнения, скорость клиренса модифицированного антитела составляет 1 мл/кг/день, 2 мл/кг/день, 3 мл/кг/день, 4 мл/кг/день, 5 мл/кг/день, 7 мл/кг/день, 10 мл/кг/день, 15 мл/кг/день или 20 мл/кг/день. В еще одном варианте исполнения, скорость клиренса модифицированного антитела составляет от 1 мл/кг/день до 2 мл/кг/день, от 1 мл/кг/день до 3 мл/кг/день, от 1 мл/кг/день до 5 мл/кг/день, от 1 мл/кг/день до 10 мл/кг/день, от 1 мл/кг/день до 15 мл/кг/день, от 2 мл/кг/день до 5 мл/кг/день, от 2 мл/кг/день до 10 мл/кг/день, от 3 мл/кг/день до 5 мл/кг/день, от 3 мл/кг/день до 10 мл/кг/день или от 5 мл/кг/день до 10 мл/кг/день. В еще одном варианте исполнения, скорость клиренса модифицированного антитела представляет собой скорость клиренса, измеренную у млекопитающего. В другом варианте исполнения, скорость клиренса модифицированного антитела представляет собой скорость клиренса, измеренную у нечеловеческого примата. В дополнительном варианте исполнения, скорость клиренса модифицированного антитела представляет собой скорость клиренса, измеренную у человеческого субъекта. В еще одном варианте исполнения, аминокислотные замещения выбирают из группы, состоящей из: M252Y, M252F, M252W, М252Т, S254T, T256S, T256R, T256Q, Т256Е, T256D, Т256Т, L309P, Q311S, H433R, Н433К, H433S, H433I, Н433Р, H433Q, N434H, N434F, N434Y и N436H, где аминокислотные остатки пронумерованы в соответствии с индексом ЕС, как в Kabat. В другом варианте исполнения, как минимум одно из аминокислотных замещений выбирают из группы, состоящей из M252Y, S254T, Т256Е, Н433К, N434F и N436H, где аминокислотные остатки пронумерованы в соответствии с индексом ЕС, как в Kabat. В еще одном варианте исполнения, модифицированный IgG константный домен содержит M252Y, S254T и Т256Е аминокислотные замещения, где аминокислотные остатки пронумерованы в соответствии с индексом ЕС, как в Kabat. В еще одном варианте исполнения, модифицированный IgG константный домен имеет более высокую аффинность по отношению к FcRn, чем IgG константный домен дикого типа. В дополнительном варианте исполнения, человеческий IgG константный домен является человеческим IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4 константным доменом. В еще одном дополнительном варианте исполнения, IgG является IgG1.

[0020] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к модифицированным антителам, описанным выше, где вариабельный домен содержит: VH CDR1, имеющий аминокислотную последовательность, идентичную или содержащую 1, 2, или 3 замещений аминокислотных остатков относительно SEQ ID NO: 1; VH CDR2, имеющий аминокислотную последовательность, идентичную или содержащую 1, 2, или 3 замещений аминокислотных остатков относительно SEQ ID NO: 2; VH CDR3, имеющий аминокислотную последовательность, идентичную или содержащую 1, 2, или 3 замещений аминокислотных остатков относительно SEQ ID NO: 3; VL CDR1, имеющий аминокислотную последовательность, идентичную или содержащую 1, 2, или 3 замещений аминокислотных остатков относительно SEQ ID NO: 4; VL CDR2, имеющий аминокислотную последовательность, идентичную или содержащую 1, 2, или 3 замещений аминокислотных остатков относительно SEQ ID NO: 5; и VL CDR3, имеющий аминокислотную последовательность, идентичную или содержащую 1, 2, или 3 замещений аминокислотных остатков относительно SEQ ID NO: 6. В одном варианте исполнения, модифицированное антитело в соответствии с любым из пунктов формулы 1-26, где вариабельный домен содержит: VH CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1; VH CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2; VH CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3; VL CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4; VL CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; и VL CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6. В другом варианте исполнения, вариабельный домен содержит VH домен, содержащий три CDRs, и VL домен, содержащий три CDRs; где три CDRs VH домена содержат: VH CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1; VH CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2; и VH CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3. В дополнительном варианте исполнения, вариабельный домен содержит VH домен, содержащий три CDRs и VL домен, содержащий три CDRs, где три CDRs VL домена содержат: VL CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4; VL CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; и VL CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6. В еще одном варианте исполнения вариабельный домен содержит VH домен, содержащий аминокислотную последовательность, идентичную SEQ ID NO: 7 или содержащий 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, или 10 замещений аминокислотных остатков относительно SEQ ID NO: 7, и содержит VL домен, содержащий аминокислотную последовательность, идентичную SEQ ID NO:8 или содержащий 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, или 10 замещений аминокислотных остатков относительно SEQ ID NO:8. В другом варианте исполнения, вариабельный домен содержит VH домен SEQ ID NO:7 и VL домен SEQ ID NO:8.

[0021] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к нуклеиновой кислоте, кодирующей аминокислотную последовательность, кодирующую указанные выше антитела. В одном варианте исполнения, нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:11-14.

[0022] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к вектору, содержащему указанные выше нуклеиновые кислоты

[0023] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к выделенной клетке, содержащей указанные выше векторы.

[0024] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к выделенной клетке, экспрессирующей указанные выше модифицированные антитела.

[0025] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к способу получения модифицированного антитела, включающему культивирование указанной выше выделенной клетки в условиях, достаточных для выработки антитела и восстановления антитела из культуры.

[0026] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к фармацевтической композиции, содержащей указанные выше модифицированные антитела.

[0027] Другой аспект в соответствии с данным изобретением, относится к способу нейтрализации как минимум 90% свободного IL-6 в сыворотке человека, который нуждается в этом, включающему введение эффективного количества указанного выше модифицированного антитела.

[0028] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к способу ингибирования как минимум 90% IL-6 опосредованной сигнализации в сыворотке человека, который нуждается в этом, включающему введение человеку эффективного количества указанного выше модифицированного антитела.

[0029] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к способу нейтрализации как минимум 90% свободного IL-6 в синовиальной жидкости человека, который нуждается в этом, включающему введение человеку эффективного количества модифицированного антитела.

[0030] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к способу ингибирования как минимум 90% IL-6 опосредованной сигнализации в синовиальной жидкости человека, который нуждается в этом, включающему введение человеку эффективного количества указанного выше антитела.

[0031] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к способу уменьшения роста синовиальных клеток у человека, включающему введение человеку, который нуждается в этом, терапевтически эффективного количества указанного выше антитела.

[0032] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к способу уменьшения синовиального воспаления у человека, включающему введение человеку, который нуждается в этом, терапевтически эффективного количества указанного выше антитела.

[0033] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к способу лечения аутоиммунного заболевания или расстройства у человека, включающему введение человеку, который нуждается в этом, терапевтически эффективного количества указанного выше антитела.

[0034] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к способу лечения злокачественности у человека, включающему введение человеку, который нуждается в этом, терапевтически эффективного количества указанного выше антитела.

[0035] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к способу лечения воспалительного заболевания или расстройства у человека, включающему введение человеку, который нуждается в этом, терапевтически эффективного количества указанного выше антитела.

[0036] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к способу лечения системной красной волчанки, ревматоидного артрита или воспалительного заболевания кишечника у человека, включающему введение человеку, который нуждается в этом, терапевтически эффективного количества указанного выше антитела. В одном варианте исполнения, согласно способу по любому из пунктов формулы 40-49, терапевтически эффективное количество содержит разовую или фракционированную дозу приблизительно 0,1-5 мг/кг, приблизительно 0,1-2 мг/кг, приблизительно 0,1-1 мг/кг, приблизительно 0,3-2 мг/кг, приблизительно 0,3-1 мг/кг, приблизительно 0,5-2 мг/кг, или приблизительно 0,5-1 мг/кг модифицированного антитела. В другом варианте исполнения, терапевтически эффективное количество содержит разовую или фракционированную дозу приблизительно 20-500 мг, приблизительно 20-200 мг, приблизительно 20-100 мг, приблизительно 50-500 мг, приблизительно 50-200 мг, или приблизительно 50-100 мг модифицированного антитела. В еще одном варианте исполнения, терапевтически эффективное количество модифицированного антитела вводят один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в три недели, один раз в четыре недели, один раз в восемь недель или один раз в двенадцать недель. В еще одном дополнительном варианте исполнения, терапевтически эффективное количество модифицированного антитела вводят внутривенно или подкожно. В другом варианте исполнения, пациенту вводят разовую дозу нагрузки модифицированного антитела перед введением как минимум одной поддерживающей дозы модифицированного антитела. В еще одном дополнительном варианте исполнения доза нагрузки содержит разовую или фракционированную дозу приблизительно 0,1-5 мг/кг, приблизительно 0,1-2 мг/кг, приблизительно 0,1-1 мг/кг, приблизительно 0,3-2 мг/кг, приблизительно 0,3-1 мг/кг, приблизительно 0,5-2 мг/кг, или приблизительно 0,5-1 мг/кг модифицированного антитела. В еще одном дополнительном варианте исполнения доза нагрузки содержит разовую или фракционированную дозу приблизительно 20-500 мг, приблизительно 20-200 мг, приблизительно 20-100 мг, приблизительно 50-500 мг, приблизительно 50-200 мг, или приблизительно 50-100 мг модифицированного антитела. В еще одном варианте исполнения, поддерживающая доза содержит разовую или фракционированную дозу приблизительно 0,1-5 мг/кг, приблизительно 0,1-2 мг/кг, приблизительно 0,1-1 мг/кг, приблизительно 0,3-2 мг/кг, приблизительно 0,3-1 мг/кг, приблизительно 0,5-2 мг/кг, или приблизительно 0,5-1 мг/кг модифицированного антитела. В еще одном варианте исполнения, поддерживающая доза содержит разовую или фракционированную дозу приблизительно 20-500 мг, приблизительно 20-200 мг, приблизительно 20-100 мг, приблизительно 50-500 мг, приблизительно 50-200 мг, или приблизительно 50-100 мг модифицированного антитела. В другом варианте исполнения, поддерживающую дозу вводят через одну неделю, две недели, три недели, четыре недели, 8 недель, или двенадцать недель после введения дозы нагрузки. В еще одном варианте исполнения, пациенту вводят как минимум две поддерживающие дозы, и поддерживающие дозы вводят один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в три недели, один раз в четыре недели, один раз в восемь недель или один раз в двенадцать недель. В еще одном варианте исполнения, дозу нагрузки модифицированного антитела вводят внутривенно или подкожно. В другом варианте исполнения поддерживающую дозу вводят внутривенно или подкожно. В дополнительном варианте исполнения, терапевтически эффективное количество модифицированного антитела вводят в сочетании со вторым терапевтическим агентом.

[0037] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к стерильной стабильной водной композиции, содержащей указанные выше антитела. В одном варианте исполнения данного аспекта в соответствии с данным изобретением, антитело не подвергают лиофилизации. В другом варианте исполнения, антитело подвергают лиофилизации. В другом варианте исполнения, концентрация указанного модифицированного антитела составляет как минимум приблизительно 5 мг/мл, как минимум приблизительно 10 мг/мл, как минимум приблизительно 15 мг/мл, как минимум приблизительно 20 мг/мл, как минимум приблизительно 50 мг/мл, как минимум приблизительно 100 мг/мл, как минимум приблизительно 120 мг/мл, как минимум приблизительно 150 мг/мл, как минимум приблизительно 160 мг/мл, как минимум приблизительно 180 мг/мл, как минимум приблизительно 200 мг/мл, как минимум приблизительно 250 мг/мл, или как минимум приблизительно 300 мг/мл. В дополнительном варианте исполнения, композиция дополнительно содержит как минимум приблизительно один буферный компонент. В другом варианте исполнения, композиция дополнительно содержит как минимум один эксципиент. В еще одном варианте исполнения, буферный компонент выбирают из группы, состоящей из гистидина, цитрата, фосфата, глицина, ацетата. В еще одном варианте исполнения, буферный компонент имеет концентрацию от приблизительно 1 мМ до приблизительно 200 мМ, от приблизительно 1 мМ до приблизительно 50 мМ, или от приблизительно 5 мМ до приблизительно 20 мМ. В еще одном варианте исполнения, буферный компонент имеет концентрацию приблизительно 10 мМ, приблизительно 15 мМ, приблизительно 20 мМ или приблизительно 25 мМ. В дополнительном варианте исполнения, эксципиент является сахаридом. В еще одном варианте исполнения, сахарид является дисахаридом. В еще одном варианте исполнения, дисахаридом является треталоза или сукроза. В дополнительном варианте исполнения, дисахарид имеет концентрацию от приблизительно 1% до приблизительно 40%, от приблизительно 2% до приблизительно 20%, или от приблизительно 2% до приблизительно 10%. В еще одном дополнительном варианте исполнения, дисахарид имеет концентрацию, составляющую приблизительно 2%, приблизительно 4% или приблизительно 8%. В еще одном варианте исполнения, эксципиент является солью. В еще одном варианте исполнения, соль представляет собой хлорид натрия. В дополнительном варианте исполнения, хлорид натрия имеет концентрацию от приблизительно 50 мМ до приблизительно 200 мМ. В другом варианте исполнения, хлорид натрия имеет концентрацию, составляющую приблизительно 70 мМ, приблизительно 75 мМ, приблизительно 80 мМ, приблизительно 100 мМ, приблизительно 120 мМ, или приблизительно 150 мМ. В дополнительном варианте исполнения, эксципиент представляет собой поверхностно-активное вещество. В дополнительном варианте исполнения, поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат. В еще одном дополнительном варианте исполнения, полисорбат является полисорбатом 20 или полисорбатом 80. В еще одном варианте исполнения, поверхностно-активное вещество имеет концентрацию от приблизительно 0,001% до приблизительно 2%. В другом варианте исполнения, поверхностно-активное вещество имеет концентрацию, составляющую приблизительно 0,01%, приблизительно 0,02%, приблизительно 0,04% или приблизительно 0,08%. В еще одном дополнительном варианте исполнения, эксципиент является аминокислотой. В еще одном варианте исполнения, аминокислоту выбирают из группы, состоящей из глицина, гистидина или аргинина. В еще одном варианте исполнения аминокислота имеет концентрацию, составляющую от приблизительно 10 мМ до приблизительно 400 мМ. В еще одном варианте исполнения, аминокислота имеет концентрацию, составляющую приблизительно 25 мМ, приблизительно 50 мМ, приблизительно 100 мМ, приблизительно 150 мМ, приблизительно 200 мМ, приблизительно 250 мМ, приблизительно 300 мМ, приблизительно 350 мМ, или приблизительно 400 мМ. В еще одном варианте исполнения, композиция имеет значение рН от приблизительно 5,5 до приблизительно 6,5. В еще одном варианте исполнения, указанная композиция имеет значение рН приблизительно 6,0. В еще одном варианте исполнения композиция является изотонической. В другом варианте исполнения композиция является стабильной при хранении при 40°C в течение как минимум приблизительно 4 недель. В еще одном варианте исполнения, композиция является стабильной при хранении при 5°C в течение как минимум приблизительно 3 месяцев. В другом варианте исполнения композиция является стабильной при хранении при 5°C в течение как минимум приблизительно 12 месяцев. В еще одном варианте исполнения, антитело теряет не более чем 20% его IL-6 активности связывания во время хранения указанной композиции при 40°C в течение как минимум приблизительно 4 недель. В еще одном варианте исполнения, антитело теряет не более чем 20% его IL-6 активности связывания во время хранения указанной композиции при 5°C в течение как минимум приблизительно 3 месяцев. В еще одном варианте исполнения, антитело теряет не более чем 20% его IL-6 активности связывания во время хранения указанной композиции при 5°C в течение как минимум приблизительно 12 месяцев. В еще одном варианте исполнения, антитело теряет не более чем 10% его IL-6 активности связывания во время хранения указанной композиции при 40°C в течение как минимум приблизительно 4 недель. В другом варианте исполнения, композиция в соответствии с любым из пунктов формулы 64-93, где указанное антитело теряет не более чем 10% его IL-6 активности связывания во время хранения указанной композиции при 5°C в течение как минимум приблизительно 3 месяцев. В другом варианте исполнения, антитело теряет не более чем 10% его IL-6 активности связывания во время хранения указанной композиции при 5°C в течение как минимум приблизительно 12 месяцев. В другом варианте исполнения, антитело теряет не более чем 5% его IL-6 активности связывания во время хранения указанной композиции при 40°C в течение как минимум приблизительно 4 недель. В другом варианте исполнения, антитело теряет не более чем 5% его IL-6 активности связывания во время хранения указанной композиции при 5°C в течение как минимум приблизительно 3 месяцев. В другом варианте исполнения, антитело теряет не более чем 5% его IL-6 активности связывания во время хранения указанной композиции при 5°C в течение как минимум приблизительно 12 месяцев. В другом варианте исполнения, антитело является чувствительным к агрегации, или фрагментации. В другом варианте исполнения, менее чем приблизительно 2% указанного антитела образует агрегат при хранении при 40°C в течение как минимум приблизительно 4 недель, как определено при помощи ВЭЭХ (высокоэффективной эксклюзионной хроматографии). В другом варианте исполнения, менее чем приблизительно 2% указанного антитела образует агрегат при хранении при 5°C в течение как минимум приблизительно 3 месяцев, как определено при помощи ВЭЭХ. В другом варианте исполнения, менее чем приблизительно 2% указанного антитела образует агрегат при хранении при 5°C в течение как минимум приблизительно 12 месяца, как определено при помощи ВЭЭХ. В другом варианте исполнения, менее чем приблизительно 5% указанного антитела фрагментируется при хранении при 40°C в течение как минимум приблизительно 4 недель, как определено при помощи ЭХ (эксклюзионной хроматографии). В другом варианте исполнения, менее чем приблизительно 5% указанного антитела фрагментируется при хранении при 5°C в течение как минимум приблизительно 3 месяцев, как определено при помощи ЭХ. В другом варианте исполнения, менее чем приблизительно 5% указанного антитела фрагментируется при хранении при 5°C в течение как минимум приблизительно 12 месяцев, как определено при помощи ЭХ. В другом варианте исполнения, композиция является инъекционной композицией. В другом варианте исполнения, композиция приемлема для внутривенного, подкожного, или внутримышечного введения. В другом варианте исполнения, композиция приемлема для аэрозольного введения.

[0038] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к фармацевтической стандартной лекарственной форме, приемлемой для парентерального введения человеку, которая содержит любые композиции указанного выше антитела в приемлемом контейнере. В одном варианте исполнения, композицию антитела вводят внутривенно, подкожно, или внутримышечно.

[0039] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к фармацевтической стандартной лекарственной форме, приемлемой для аэрозольного введения человеку, которая содержит любые композиции указанного выше антитела. В одном варианте исполнения данного аспекта в соответствии с данным изобретением, композицию антитела вводят интраназально.

[0040] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к герметичному контейнеру, содержащему любые указанные выше композиции.

[0041] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к предварительно наполненному шприцу, содержащему любые указанные выше композиции.

[0042] Другой аспект в соот