Клеточно-реактивные аналоги компстатина, аналоги компстатина длительного действия или аналоги компстатина нацеленного действия и их применение

Клеточно-реактивные аналоги компстатина, аналоги компстатина длительного действия или аналоги компстатина нацеленного действия и их применение

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Перекрестные ссылки на родственные заявки

[0001] Настоящая заявка испрашивает приоритет согласно предварительной заявке на патент США № 61/484836, поданной 11 мая 2011 г., содержание которой полностью включено в настоящую заявку посредством ссылки.

Перечень последовательностей

[0001.1] Настоящая заявка включает Перечень последовательностей, поданный электронно в формате ASCII и включенный в настоящую заявку во всей полноте посредством ссылки. Указанная копия в формате ASCII, созданная 15 января -2014, названа 2008575-0035 SL. txt и ее размер составляет 356444 байта.

Уровень техники

[0002] Система комплемента представляет собой состоящую более чем из 30 белков плазмы и клеточно-связанных белков систему, играющую важную роль как во врожденном, так и в приобретенном иммунитете. Белки системы комплемента функционируют в виде серий ферментативных каскадов за счет разнообразных белковых взаимодействий и процессов расщепления. Активация комплемента происходит тремя основными путями: через антителозависимый классический путь, альтернативный путь и манноза-связывающий лектиновый (MBL) путь. Ненадлежащая или избыточная активация комплемента является основной причиной или фактором, способствующим развитию ряда серьезных заболеваний и состояний, и на протяжении последних нескольких десятилетий на изучение различных ингибиторов комплемента для применения в качестве терапевтических агентов были направлены значительные усилия. Тем не менее, по-прежнему имеется потребность в инновационных подходах к ингибированию активации комплемента для различных терапевтических целей.

Краткое описание изобретения

[0003] Согласно некоторым аспектам в настоящем изобретении предложены клеточно-реактивные аналоги компстатина. Например, в настоящем изобретении предложены клеточно-реактивные аналоги компстатина, композиции, содержащие клеточно-реактивные аналоги компстатина, и способы получения, идентификации, описания и/или применения клеточно-реактивных аналогов компстатина. Согласно некоторым аспектам в настоящем изобретении предложена физиологически приемлемая композиция, содержащая клеточно-реактивный аналог компстатина. Согласно некоторым аспектам в настоящем изобретении предложена композиция фармацевтического класса, содержащая клеточно-реактивный аналог компстатина.

[0004] Согласно некоторым аспектам в настоящем изобретении предложены аналоги компстатина длительного действия. Например, в настоящем изобретении предложены аналоги компстатина длительного действия, композиции, содержащие аналоги компстатина длительного действия, и способы получения, идентификации, описания и/или применения аналогов компстатина длительного действия. Согласно некоторым аспектам в настоящем изобретении предложена физиологически приемлемая композиция, содержащая аналог компстатина длительного действия. Согласно некоторым аспектам в настоящем изобретении предложена композиция фармацевтического класса, содержащая аналог компстатина длительного действия.

[0005] Согласно некоторым аспектам в настоящем изобретении предложены аналоги компстатина нацеленного действия. Например, в настоящем изобретении предложены аналоги компстатина нацеленного действия, композиции, содержащие аналоги компстатина нацеленного действия, и способы получения, идентификации, описания и/или применения аналогов компстатина нацеленного действия. Согласно некоторым аспектам в настоящем изобретении предложена физиологически приемлемая композиция, содержащая аналог компстатина нацеленного действия. Согласно некоторым аспектам в настоящем изобретении предложена композиция фармацевтического класса, содержащая аналог компстатина нацеленного действия.

[0006] В настоящем изобретении также предложены способы защиты клетки от комплемент-опосредованного повреждения. Согласно некоторым вариантам реализации указанные способы включают приведение указанной клетки в контакт с клеточно-реактивным аналогом компстатина. Указанная клетка может относиться к любому типу клеток согласно различным вариантам реализации. Например, согласно некоторым вариантам реализации указанная клетка представляет собой клетку крови. Согласно некоторым вариантам реализации указанная клетка крови представляет собой красную клетку крови (RBC/кКК), также называемую эритроцитом. Согласно некоторым вариантам реализации в указанной клетке наблюдается аномально низкий уровень экспрессии, поверхностной плотности и/или активности одного или более регуляторного белка комплемента. Например, указанная клетка может содержать мутацию в гене, кодирующем такой белок, отличающуюся тем, что указанная мутация приводит к снижению или отсутствию экспрессии и/или снижению активности кодируемого белка. Указанная клетка может относиться к любому типу клеток животных или любых видов согласно различным вариантам реализации. Например, указанная клетка может представлять собой клетку млекопитающего, например, примата (человека или не являющегося человеком примата), грызуна (например, мыши, крысы, кролика), копытного (например, свиньи, овцы, коровы), собачьих или кошачьих. Согласно многим вариантам реализации указанная защита представляет собой защиту от комплемента приматов, например, комплемента человека. Согласно некоторым вариантам реализации контакт с указанной клеткой происходит ex vivo (вне организма субъекта). Согласно некоторым вариантам реализации контакт с указанной клеткой происходит in vivo (у субъекта, например, у человека). Согласно некоторым вариантам реализации указанная клетка предназначена для трансплантации субъекту или была трансплантирована субъекту. Согласно некоторым аспектам в настоящем изобретении предложена выделенная клетка, к которой ковалентно присоединен аналог компстатина. Согласно некоторым аспектам в настоящем изобретении предложен(а) выделенная(ый) ткань или орган, по меньшей мере к некоторым из клеток которой(ого) присоединен аналог компстатина.

[0007] В настоящем изобретении предложены способы лечения субъекта, нуждающегося в лечении комплемент-опосредованного расстройства. Согласно некоторым вариантам реализации указанный способ включает введение клеточно-реактивного аналога компстатина указанному субъекту. Согласно некоторым вариантам реализации указанный способ включает введение аналога компстатина длительного действия указанному субъекту. Согласно некоторым вариантам реализации аналог компстатина длительного действия представляет собой клеточно-реактивный аналог компстатина. Согласно некоторым вариантам реализации указанное комплемент-опосредованное расстройство представляет собой пароксизмальную ночную гемоглобинурию (ПНГ), атипичный гемолитико-уремический синдром (аГУС) или другое расстройство, связанное с комплемент-опосредованным гемолизом. Согласно некоторым вариантам реализации указанное расстройство представляет собой ишемическое/реперфузионное (И/Р) повреждение (например, в результате инфаркта миокарда, тромбоэмболического инсульта или хирургического вмешательства). Согласно некоторым вариантам реализации указанное расстройство представляет собой травму. Согласно некоторым вариантам реализации указанное расстройство представляет собой отторжение трансплантата.

[0008] Все статьи, издания, патентные заявки, патенты, другие публикации, веб-сайты и базы данных, упоминаемые в настоящей заявке, включены в нее посредством ссылок. В случае противоречия между настоящим описанием и любой из включенных ссылок настоящее описание (включая любые поправки к нему) будет иметь решающее значение. Если не указано иное, в настоящей заявке используются принятые в соответствующих областях техники значения терминов и сокращения.

Краткое описание чертежей

[0009] На Фиг. 1 представлен график, отражающий процент подавляющей активацию комплемента активности аналога компстатина CA28 (SEQ ID NO: 28) и трех аналогов компстатина длительного действия (CA28-1, CA28-2, CA28-3) как функции от концентрации пептида (мкМ). Подавление активации комплемента исследовали in vitro с применением анализа подавления классического пути комплемента. На графике представлены значения, полученные усреднением результатов двух серий измерений. CA28 (круги; красный цвет), CA28-1 (кресты (х); голубой цвет); CA28-2 (треугольники, зеленый цвет), CA28-3 (квадраты (фиолетовый цвет).

[0010] На Фиг. 2 представлен график, отражающий процент подавляющей активацию комплемента активности CA28 и аналогов компстатина длительного действия CA28-2 и CA28-3 как функции от концентрации соединения (мкМ). CA28 (квадраты, светло-серый), CA28-2 (ромбы, черный цвет), CA28-3 (круги, темно-серый цвет). CA28-3 представляет собой соединение, которое содержит несколько пептидных фрагментов. Хотя активность, приходящаяся на пептидный фрагмент, меньше активности отдельной молекулы CA28, общая активность CA28-3 в пересчете на моли выше активности CA28.

[0011] На Фиг. 3 представлен график концентраций CA28 и аналогов компстатина длительного действия CA28-2 и CA28-3 в плазме от времени у яванских макаков после одной внутривенной инъекции. CA28 вводили в количестве 200 мг/кг. Каждый из CA28-2 и CA28-3 вводили в количестве 50 мг/кг. При расчете доз для указанных экспериментов предполагалось, что вводимые вещества CA28-2 и CA28-3 содержат 80% активного соединения в пересчете на сухую массу. Однако при анализе образцов стандартная кривая подразумевала 100% активного соединения в пересчете на сухую массу, примерно на 30%. Таким образом, значения Cmax выше реальных Cmax. CA28 (квадраты, светло-серый), CA28-2 (треугольники, черный), CA28-3 (круги, темно-серый).

[0012] На Фиг. 4 представлен график, отражающий процент подавляющей активацию комплемента активности CA28 и аналогов компстатина длительного действия CA28-4 как функции от концентрации соединения (мкМ). Подавление активации комплемента исследовали in vitro с применением анализа подавления классического пути комплемента. На графике представлены значения, полученные усреднением результатов четырех серий измерений CA28-4. CA28 (квадраты, светло-серый цвет), CA28-4 (кресты, черный цвет).

[0013] На Фиг. 5 приведен график, отражающий зависимость концентраций от времени для CA28 и аналогов компстатина длительного действия CA28-2, CA28-3 и CA28-4 у яванских макаков после одной внутривенной инъекции. CA28 вводили в количестве 200 мг/кг. Каждый из CA28-2, CA28-3 и CA28-4 вводили в количестве 50 мг/кг. При расчете доз для указанных экспериментов предполагалось, что вводимые вещества CA28-2 и CA28-3 содержат 80% активного соединения в пересчете на сухую массу. Однако при анализе образцов стандартная кривая подразумевала 100% активного соединения в пересчете на сухую массу. Таким образом, значения Сmax превосходят значения Cmax, которые были бы получены при введении указанных соединений в означенных дозах в пересчете на сухую массу, примерно на 30%. CA28 (квадраты, светло-серый), CA28-2 (треугольники, черный), CA28-3 (круги, темно-серый), CA28-4 (перевернутые треугольники, черный).

Подробное описание некоторых вариантов реализации изобретения

[0014] I. Определения

[0015] Термины «приблизительно» или «примерно» в отношении числа обычно включают числа, попадающие в диапазон ±10%, согласно некоторым вариантам реализации ±5%, согласно некоторым вариантам реализации ±1%, согласно некоторым вариантам реализации ±0,5% от числа, если не указано или иным образом очевидно из контекста иное (за исключением случаев, когда такое число недопустимым образом превышает 100% от возможного значения).

[0016] «Компонент комплемента» или «белок комплемента» представляет собой белок, вовлеченный в активацию системы комплемента или принимающий участие в одной или более комплемент-опосредованной активности. Компоненты классического пути комплемента включают, например, C1q, C1r, C1s, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8, C9 и C5b-9-комплекс, также называемый мембраноатакующим комплексом (МАК), и активные фрагменты или продукты ферментативного расщепления каких-либо из вышеперечисленных компонентов (например, C3a, C3b, C4a, C4b, C5a и т.п.). Компоненты альтернативного пути включают, например, факторы B, D и пропердин. Компоненты лектинового пути включают, например, MBL2, MASP-1 и MASP-2. Компоненты комплемента также включают клеточно-связанные рецепторы растворимых компонентов комплемента, отличающиеся тем, что указанный рецептор опосредует одну или более биологическую активность такого растворимого компонента комплемента после связывания указанного растворимого компонента комплемента. Такие рецепторы включают, например, рецептор C5a (C5aR), рецептор C3a (C3aR), рецептор комплемента 1 (CR1), рецептор комплемента 2 (CR2), рецептор комплемента 3 (CR3, также известный как CD45) и т.п. Следует иметь в виду, что термин «компонент комплемента» не подразумевает включение таких молекул и молекулярных структур, которые служат в качестве «триггеров» для активации комплемента, например, комплексов антиген-антитело, чужеродных структур, обнаруживаемых на поверхностях микроорганизмов или искусственных поверхностях, и т.п.

[0017] «Комплемент-опосредованное расстройство» представляет собой любое расстройство, для которого, согласно имеющимся данным или предположениям, по меньшей мере у некоторых субъектов, страдающих от указанного расстройства, активация комплемента является способствующим и/или по меньшей мере отчасти причинным фактором; например, расстройства, при которых активация комплемента приводит к повреждению тканей. Неограничивающие примеры комплемент-опосредованных расстройств включают, не ограничиваясь перечисленными, (i) различные расстройства, характеризующиеся гемолизом или гемолитической анемией, такие как атипичный гемолитико-уремический синдром, болезнь холодовых агглютининов, пароксизмальная ночная гемоглобинурия, трансфузионные реакции; (ii) отторжение трансплантата (например, сверхострое или острое отторжение трансплантата) или дисфункция трансплантата; (iii) расстройства, включающие ишемическое/реперфузионное повреждение, такие как травма, хирургическое вмешательство (например, реконструкция при аневризме), инфаркт миокарда, ишемический инсульт; (iv) расстройства дыхательной системы, такие как астма и хроническое обструктивное заболевание легких (ХОБЛ); (v) артрит, например, ревматоидный артрит; (vi) глазные расстройства, такие как возрастная макулярная дегенерация (ВМД), диабетическая ретинопатия, глаукома и увеит. Термин «расстройство» в настоящей заявке применяют взаимозаменяемо с терминами «заболевание», «состояние» и аналогичными терминами, для обозначения любого нарушения здоровья или состояния анормального функционирования организма, например, любого состояния, при котором показана организация медицинского ухода и/или хирургического вмешательства, или в связи с которым субъект обращается за надлежащей медицинской и/или хирургической помощью. Следует также понимать, что конкретные расстройства перечислены в конкретных категориях для удобства и это не подразумевает ограничения настоящего изобретения. Следует понимать, что определенные расстройства могут быть перечислены в нескольких подходящих категориях.

[0018] «Регуляторный белок комплемента» представляет собой белок, вовлеченный в регуляцию активности комплемента. Регуляторный белок комплемента может понижающе регулировать активность комплемента, например, подавляя активацию комплемента или инактивируя или ускоряя разрушение одного или более активированного белка комплемента. Примеры регуляторных белков комплемента включают ингибитор C1, связывающий C4 белок, кластерин, витронектин, CFH, фактор I и клеточно-связанные белки CD46, CD55, CD59, CR1, CR2 и CR3.

[0019] «Связанный» в настоящей заявке в отношении двух или более фрагментов означает, что указанные фрагменты физически связаны или соединены друг с другом с образованием достаточно стабильной молекулярной структуры, так что указанные фрагменты остаются связанными в условиях, при которых образуется указанная связь, и, предпочтительно, в условиях, при которых применяют указанную новую молекулярную структуру, например, в физиологических условиях. Согласно определенным предпочтительным вариантам реализации настоящего изобретения указанная связь представляет собой ковалентную связь. Согласно другим вариантам реализации указанная связь является нековалентной. Фрагменты могут быть связаны либо прямо, либо непрямо. Если два фрагмента прямо связаны, они либо ковалентно связаны друг с другом, либо находятся на достаточно близком расстоянии, так что их связь поддерживается за счет межмолекулярных сил между указанными двумя фрагментами. Если два фрагмента связаны непрямо, каждый из них связан либо ковалентно, либо нековалентно с третьим фрагментом, за счет которого поддерживается связь между указанными двумя фрагментами. В целом, если говорится, что два фрагмента связаны «соединяющим фрагментом» или «соединяющей частью», связь между указанными двумя связанными фрагментами является непрямой, и, как правило, каждый из связанных фрагментов ковалентно связан с соединяющим фрагментом. Два фрагмента могут быть связаны с помощью «линкера». Линкер может представлять собой любой подходящий фрагмент, который вступает в реакцию с указанными соединениями, связывая их за разумный период времени, в условиях, соответствующих стабильности указанных соединений (участки которых могут быть защищены в надлежащих случаях, в зависимости от условий), в достаточном количестве, с удовлетворительным выходом. Как правило, линкер содержит по меньшей мере две функциональные группы, одна из которых вступает в реакцию с первым соединением, а другая вступает в реакцию с вторым соединением. Следует иметь в виду, что после того, как линкер прореагировал со связываемыми соединениями, термин «линкер» может относиться к части полученной структуры, которая происходит из указанного линкера, или, по меньшей мере, к части, которая не включает прореагировавшие функциональные группы. Соединяющий фрагмент может содержать часть, не участвующую в образовании связи с соединяемыми соединениями, основное назначение которой может состоять в пространственном разделении указанных соединений. Такая часть может называться «спейсером».

[0020] «Полипептид» в настоящей заявке относится к аминокислотному полимеру, необязательно включающему один или более аналог аминокислоты. Белок представляет собой молекулу, состоящую из одного или более полипептида. Пептид представляет собой относительно короткий полипептид, длина которого, как правило, составляет примерно от 2 до 60 аминокислот, например, от 8 до 40 аминокислот. Термины «белок», «полипептид» и «пептид» могут применяться взаимозаменяемо. Полипептиды в настоящей заявке могут включать аминокислоты, такие как встречающиеся в белках в природе, аминокислоты, не встречающиеся в белках в природе и/или аналоги аминокислот, которые не являются аминокислотами. В настоящей заявке «аналог» аминокислоты может представлять собой другую аминокислоту, структурно сходную с указанной аминокислотой, или соединение, не являющееся аминокислотой, структурно сходное с указанной аминокислотой. Существует значительное число известных в данной области техники аналогов 20 аминокислот, обычно обнаруживаемых в белках («стандартных» аминокислот). Одна или более из аминокислот полипептида может быть модифицирована, например, добавлением химического соединения, такого как углеводная группа, фосфатная группа, фарнезильная группа, изофарнезильная группа, жирнокислотная группа, линкер для конъюгирования, функционализирования или другой модификации, и т.п. Определенные подходящие неограничивающие аналоги и модификации описаны в WO 2004026328 и/или ниже. Указанный полипептид может быть ацетилирован, например, на N-конце и/или амидирован, например, на C-конце.

[0021] Термин «реактивные функциональные группы» в настоящей заявке относится к группам, включающим, не ограничиваясь перечисленными, олефины, ацетилены, спирты, фенолы, простые эфиры, оксиды, галиды, альдегиды, кетоны, карбоновые кислоты, сложные эфиры, амиды, цианаты, изоцианаты, тиоцианаты, изотиоцианаты, амины, гидразины, гидразоны, гидразиды, диазогруппы, диазоний, нитрогруппы, нитрилы, меркаптаны, сульфиды, дисульфиды, сульфоксиды, сульфоны, сульфоновые кислоты, сульфиновые кислоты, ацетали, кетали, ангидриды, сульфаты, изонитрилы сульфеновой кислоты, амидины, имиды, имидаты, нитроны, гидроксиламины, оксимы, гидроксамовые кислоты, тиогидроксамовые кислоты, аллены, ортоэфиры, сульфиты, енамины, инамины, мочевины, псевдомочевины, семикарбазиды, карбодиимиды, карбаматы, имины, азиды, азосоединения, азоксисоединения и нитрозосоединения, сложные эфиры н-гидроксисукцинимида, малеимиды, сульфгидрилы и т.п. Способы получения каждой из указанных функциональных групп общеизвестны в данной области техники, и их применение или модификация для конкретной цели находится в пределах компетенции специалиста в данной области техники (см., например, Sandler and Karo, eds. ORGANIC FUNCTIONAL GROUP PREPARATIONS, Academic Press, San Diego, 1989, и Hermanson, G., Bioconjugate Techniques, 2^nd ed., Academic Press, San Diego, 2008).

[0022] «Специфическое связывание» обычно относится к физической связи между целевым полипептидом (или, в более общем случае, целевой молекулой) и связывающей молекулой, такой как антитело или лиганд. Связывание, как правило, зависит от наличия конкретной структурной особенности мишени, такой как антигенная детерминанта, эпитоп, связывающий карман или углубление, распознаваемой связывающей молекулой. Например, если антитело специфично в отношении эпитопа А, присутствие полипептида, содержащего эпитоп А, или присутствие свободного немеченого А в реакции, включающей и свободный меченый А, и связывающую молекулу, присоединяющуюся к нему, снизит количество меченого А, который связывается с указанной связывающей молекулой. Следует понимать, что специфичность не обязательно должна быть абсолютной, и обычно относится к контексту, в котором происходит связывание. Например, в данной области техники общеизвестно, что многие антитела перекрестно реагируют с другими эпитопами, помимо имеющихся в целевой молекуле. Такая перекрестная реакционная способность может быть приемлемой, это зависит от предполагаемого применения антитела. Специалист в данной области техники сможет отобрать антитела или лиганды с достаточной степенью специфичности, подходящие для любого конкретного применения (например, для обнаружения целевой молекулы, для терапевтических целей и т.п.). Следует также понимать, что специфичность может оцениваться в контексте дополнительных факторов, таких как аффинность связывающей молекулы в отношении мишени относительно аффинности указанной связывающей молекулы в отношении других мишеней, например, конкурентных. Если связывающая молекула проявляет высокую аффинность в отношении целевой молекулы, которую необходимо обнаруживать с ее помощью, и низкую аффинность в отношении нецелевых молекул, указанное антитело, вероятно, является приемлемым реагентом. После того как специфичность связывающей молекулы в одном или более контексте установлена, она может применяться в других, предпочтительно сходных, контекстах без необходимости повторных проверок ее специфичности. Согласно некоторым вариантам реализации аффинность (по оценке равновесной константы диссоциации, Kd) двух молекул, демонстрирующих специфическое связывание, составляет 10^-3 M или менее, например, 10^-4 M или менее, например, 10^-5 M или менее, например, 10^-6 М или менее, 10^-7 М или менее, 10^-8 M или менее, или 10^-9 M или менее в протестированных условиях, например, в физиологических условиях.

[0023] «Субъект», лечение которого проводят в соответствии с настоящим изобретением, как правило, представляет собой человека, не являющегося человеком примата или низшее животное (например, мышь или крысу), у которого экспрессируется или присутствует по меньшей мере какой-либо компонент комплемента C3 примата (например, человека) и, необязательно, один или более дополнительный компонент комплемента примата. Согласно некоторым вариантам реализации указанный субъект является особью мужского пола. Согласно некоторым вариантам реализации указанный субъект является особью женского пола. Согласно некоторым вариантам реализации указанный субъект является взрослым, например, человеком в возрасте по меньшей мере 18 лет, например, от 18 до 100 лет.

[0024] «Лечение» в настоящей заявке в отношении лечения субъекта относится к обеспечению лечения, т.е. обеспечению любого типа организации медицинского ухода или хирургического лечения субъекта. Указанное лечение может предоставляться для того, чтобы обратить, облегчить, подавить прогрессирование, предотвратить или снизить вероятность наступления заболевания, или для того, чтобы обратить, облегчить, подавлять или предотвратить прогрессирование, предотвратить или снизить вероятность появления одного или более симптома или проявления заболевания. «Предотвращать» относится к предотвращению наступления заболевания, появления симптома или проявления заболевания в течение по меньшей мере некоторого периода времени по меньшей мере у некоторых индивидуумов. Лечение может включать введение соединения или композиции указанному субъекту после развития одного или более симптома или проявления, свидетельствующего о заболевании, например, для того, чтобы обратить, облегчить, снизить тяжесть и/или подавить или предотвратить прогрессирование указанного заболевания и/или обратить, облегчить, снизить тяжесть и/или подавить один или более симптом или проявление указанного заболевания. Соединение или композиция может вводиться субъекту, у которого развилось заболевание или имеется повышенный риск развития указанного заболевания по сравнению с представителем общей популяции. Соединение или композиция может вводиться субъекту, у которого развилось заболевание и имеется повышенный риск развития одного или более конкретного симптома, проявления указанного заболевания или обострения указанного заболевания по сравнению с другими индивидуумами, у которых диагностировано указанное заболевание, либо по сравнению с типичным или средним риском возникновения такого симптома, проявления или обострения у указанного субъекта. Например, на указанного субъекта мог воздействовать «триггер», который обуславливает возникновение повышенного риска (в частности, временно повышенного риска) развития обострения у указанного субъекта. Соединение или композиция может вводиться профилактически, т.е. до развития какого-либо симптома или проявления указанного заболевания. Как правило, в этом случае у субъекта имеется риск развития указанного заболевания, например, относительно представителя общей популяции, необязательно имеющего совпадающие возраст, пол и/или другой(ие) демографический(ие) показатель(и).

[0025] В настоящей заявке термин «алифатический» обозначает фрагмент углеводорода, который может представлять собой прямую цепь (т.е. быть неразветвленным), быть разветвленным или циклическим (в том числе конденсированным, мостиковым и спиро-конденсированным полициклическим) и может быть полностью насыщенным, либо содержать одну или более единицу ненасыщенности, но не является ароматическим. Если не указано иное, алифатические группы содержат 1-30 атомов углерода. Согласно некоторым вариантам реализации алифатические группы содержат 1-10 атомов углерода. Согласно другим вариантам реализации алифатические группы содержат 1-8 атомов углерода. Согласно другим вариантам реализации алифатические группы содержат 1-6 атомов углерода, и согласно дальнейшим вариантам реализации алифатические группы содержат 1-4 атома углерода. Подходящие алифатические группы включают, но не ограничены перечисленными, линейные или разветвленные, алкильные, алкенильные и алкинильные группы, и их гибриды, такие как (циклоалкил)алкил, (циклоалкенил)алкил или (циклоалкил)алкенил.

[0026] В настоящей заявке, «алкил» относится к насыщенному неразветвленному, разветвленному или циклическому углеводороду, содержащему примерно от 1 до примерно 22 атомов углерода (и всем комбинациям и субкомбинациям диапазонов и конкретных количеств атомов углерода в них), согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения - предпочтительно примерно от 1 до примерно 12, или примерно от 1 до примерно 7 атомов углерода. Алкильные группы включают, но не ограничены перечисленными, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, т-бутил, н-пентил, циклопентил, изопентил, неопентил, н-гексил, изогексил, циклогексил, циклооктил, адамантил, 3-метилпентил, 2,2-диметилбутил, и 2,3-диметилбутил.

[0027] В настоящей заявке «галоген» относится к F, Cl, Br или I.

[0028] В настоящей заявке «алканоил» относится к необязательно замещенному прямому или разветвленному алифатическому ациклическому остатку, содержащему примерно 1-10 атомов углерода (и все комбинации и субкомбинации диапазонов, а также конкретное число атомов углерода), например, примерно от 1 до 7 атомов углерода, который, как подразумевается, присоединен к концевой C=O руппе одинарной связью (и может также называться «ацильной группой»). Алканоильные группы включают, но не ограничены перечисленными, формил, ацетил, пропионил, бутирил, изобутирил, пентаноил, изопентаноил, 2-метил-бутирил, 2,2-диметоксипропионил, гексаноил, гептаноил, октаноил и т.п.; для целей настоящего изобретения формильную группу считают алканоильной группой. «Низший алканоил» относится к необязательно замещенному прямому или разветвленному алифатическому ациклическому остатку, содержащему примерно от 1 до примерно 5 атомов углерода (и все комбинации и субкомбинации диапазонов, а также конкретное число атомов углерода). Такие группы включают, но не ограничены перечисленными, формил, ацетил, пропионил, бутирил, изобутирил, пентаноил, изопентаноил и т.п.

[0029] В настоящей заявке «арил» относится к необязательно замещенной, моно- или бициклической ароматической кольцевой системе, содержащей от примерно 5 до примерно 14 атомов углерода (и все комбинации и субкомбинации диапазонов и конкретных количеств атомов углерода в них), предпочтительно от примерно 6 до примерно 10 атомов углерода. Неограничивающие примеры включают, например, фенил и нафтил.

[0030] В настоящей заявке «аралкил» относится к алкильным радикалам, несущим арильный заместитель и содержащим от примерно 6 до примерно 22 атомов углерода (и все комбинации и субкомбинации диапазонов, а также конкретное число атомов углерода), согласно определенным вариантам реализации - предпочтительно примерно от 6 до примерно 12 атомов углерода. Аралкильные группы необязательно могут быть замещенными. Неограничивающие примеры включают, например, бензил, нафтилметил, дифенилметил, трифенилметил, фенил этил и дифенилэтил.

[0031] В настоящей заявке термины «алкокси» и «алкоксил» относятся к необязательно замещенной группе алкил-O-, где алкил соответствует приведенному выше определению. Типовые алкоксигруппы и алкоксильные группы включают метокси, этокси, н-пропокси, и-пропокси, н-бутокси и гептокси.

[0032] В настоящей заявке «карбокси» относится к группе -C(=O)OH.

[0033] В настоящей заявке «алкоксикарбонил» относится к -C(=O)O-алкильной группе, где алкил соответствует приведенному выше определению.

[0034] В настоящей заявке «ароил» относится к -C(=O)-арильной группе, где арил соответствует приведенному выше определению. Типовые ароильные группы включают бензоил и нафтоил.

[0035] Термин «циклическая кольцевая система» относится к ароматической или неароматической частично ненасыщенной или полностью насыщенной 3-10-членной кольцевой системе, которая включает одиночные кольца с 3-8 атомами, и би- и три-циклические кольцевые системы, которые могут включать ароматические 5- или 6-членные арильные или ароматические гетероциклические группы, конденсированные с неароматическим кольцом. Указанные гетероциклические кольца включают содержащие от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, состоящей из кислорода, серы и азота. Согласно определенным вариантам реализации термин «гетероциклический» относится к неароматическому 5-, 6- или 7-членному кольцу или полициклической группе, в которой по меньшей мере один кольцевой атом представляет собой гетероатом, выбранный из группы, состоящей из O, S и N, включая, но не ограничиваясь перечисленными, би- или трициклическую группу, содержащую конденсированные шестичленные кольца с одним-тремя гетероатомами, независимо выбранными из группы, состоящей из кислорода, серы и азота. Согласно некоторым вариантам реализации «циклическая кольцевая система» относится к циклоалкильной группе, которая согласно настоящей заявке относится к группам с 3-10, например, 4-7 атомами углерода. Циклоалкилы включают, но не ограничены перечисленными, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и т.п., которые являются необязательно замещенными. Согласно некоторым вариантам реализации «циклическая кольцевая система» относится к циклоалкенильному или циклоалкинильному фрагменту, который является необязательно замещенным.

[0036] Как правило, замещенные химические фрагменты содержат один или более заместитель, замещающий водород. Типовые заместители включают, например, галоген, алкил, циклоалкил, аралкил, арил, сульфгидрил, гидроксил (-OH), алкоксил, циано (-CN), карбоксил (-COOH), -C(=O)O-алкил, аминокарбонил (-C(=O)NH₂), -N-замещенный аминокарбонил (-C(=O)NHR''), CF₃, CF₂CF₃ и т.п. Применительно к вышеперечисленным заместителям каждый фрагмент R'' может независимо представлять собой, например, любой из H, алкила, циклоалкила, арила или аралкила.

[0037] В настоящей заявке «L-аминокислота» относится к любой из встречающихся в природе левовращающих альфа-аминокислот, обычно присутствующих в белках или сложных алкильных эфирах указанных альфа-аминокислот. Термин «D-аминокислота» относится к правовращающим альфа-аминокислотам. Если не указано иное, все упоминаемые в настоящей заявке аминокислоты представляют собой L-аминокислоты.

[0038] В настоящей заявке «ароматическая аминокислота» представляет собой аминокислоту, содержащую по меньшей мере одно ароматическое кольцо, например, арильную группу.

[0039] В настоящей заявке «ароматический аналог аминокислоты» представляет собой аналог аминокислоты, содержащий по меньшей мере одно ароматическое кольцо, например, арильную группу.

[0040] II. Краткое описание

[0041] В настоящем изобретении предложены клеточно-реактивные аналоги компстатина и имеющие к ним отношение способы, например, способы их применения. Клеточно-реактивные аналоги компстатина представляют собой соединения, включающие фрагмент аналога компстатина и клеточно-реактивную функциональную группу, способную вступать в реакцию с функциональной группой, экспонируемой на поверхности клетки, например, в физиологических условиях, с образованием ковалентной связи. Указанный клеточно-реактивный аналог компстатина, соответственно, ковалентно присоединяется к указанной клетке. Без связи с какой-либо конкретной теорией соединенный с клеткой аналог компстатина защищает указанную клетку от комплемент-опосредованного повреждения за счет, например, связывания с C3 (который может находиться в форме C3(H₂O)) на поверхности клетки и/или поблизости от указанной клетки, подавления расщепления и активации C3 и/или связывания с C3b и подавления его отложения на указанной клетке, либо участия в каскаде активации комплемента. Согласно некоторым аспектам настоящего изобретения выделенные клетки приводят в контакт с клеточно-реактивным аналогом компстатина ex vivo (вне организма). Согласно некоторым аспектам настоящего изобретения указанные клетки присутствуют в выделенной(ом) ткани или органе, например, в ткани или органе для трансплантации субъекту. Согласно некоторым аспектам настоящего изобретения клетки приводят в контакт с клеточно-реактивным аналогом компстатина in vivo, посредством введения указанного клеточно-реактивного аналога компстатина субъекту. Указанный клеточно-реактивный аналог компстатина ковалентно присоединяется к клеткам in vivo. Согласно некоторым аспектам способы согласно настоящему изобретению защищают клетки, ткани и/или органы от разрушительных эффектов активации комплемента на протяжении по меньшей мере двух недель, без н