Синергетические композиции и способы

Синергетические композиции и способы

Иллюстрации

Показать все

Реферат

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

Эта заявка является частичным продолжением заявки на патент U.S. № 13/081643, поданной 7 апреля 2011 г., раскрытие которой включено в настоящее изобретение в качестве ссылки.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к специфическим каротиноидам, которые в основном обнаруживаются в томатах. Настоящее изобретение более предпочтительно относится к комбинациям специфических каротиноидов и фитостеринов, обычно обнаруживаемых в различных пищевых продуктах, включая томаты. Настоящее изобретение еще более предпочтительно относится к комбинациям этих соединений, применяющимся в фармацевтических композициях и проявляющих синергетические свойства, в особенности применительно к подавлению роста клеток предстательной железы.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Каротиноиды являются группой пигментов, которые характеризуются цветом, находящимся в диапазоне от желтого до красного. Каротиноиды обычно вырабатываются в самых различных растительных материалах и чаще всего связаны с такими растениями, как томаты, морковь и перцы.

Ликопин и его предшественники, фитоен и фитофлуен, обычно содержатся в томатах и ликопин является главной причиной ярко-красного цвета, связанного с томатами. Фитоен является предшественником фитофлуена, ликопина и других каротиноидов и также содержится в больших концентрациях в томатах. Ликопин обычно содержится в плазме организма человека. Известно, что каротиноиды обладают антиоксидантными свойствами и поэтому оказывают разное благоприятное влияние на здоровье, включая снижение потенциальной опасности сердечно-сосудистых заболеваний и раковых заболеваний, а также замедление и/или обращение дегенеративного влияния старения на различные типы физиологической активности человека.

Фитостерины (растительные стерины) являются группой стероидных спиртов, или фитохимическими соединениями, которые в природе содержатся в растениях и являются аналогами холестерина, содержащегося в животных продуктах. Структура с небольшими изменениями сходна со структурой холестерина. Эти изменения включают боковую цепь и включают добавление двойной связи и/или метильной или этильной группы. Самыми распространенными пищевыми фитостеринами являются β-ситостерин, кампестерин и стигмастерин. Западная диета содержит 80 мг β-ситостерина/сутки. Финская диета содержит 140-175 мг/сутки (см. Valsta et al. British Journal of Nutrition (2004), 92, 671-678), тогда как вегетарианская и японская диеты содержат 345 и 400 мг/сутки соответственно. Наилучшими пищевыми источниками фитостеринов являются нерафинированные растительные масла, семена, орехи и бобовые. Обработка растительных масел (такая как рафинирование и дезодорирование) уменьшает содержание фитостерина, но потери различны в зависимости от типа масла. Однако гидрирование рафинированных масел мало влияет на содержание фитостерина.

Растительные стерины и станолы эффективно уменьшают содержание ЛНП (липопротеины низкой плотности) холестерина в сыворотке и атеросклероза (1). Кроме того, остаются необъясненными возможные влияния растительных стеринов и станолов на другие метаболические процессы (2).

Фитостерины не образуются в организме путем эндогенного синтеза и поэтому они поступают только из пищи путем всасывания в кишечнике. Содержание фитостерина в плазме ткани млекопитающего обычно является очень низким, в первую очередь вследствие очень плохого всасывания в кишечнике и более быстрого выведения из печени по сравнению с холестерином (3). Хотя всасывание растительных стеринов и станолов (0,02-3,5%) мало по сравнению с холестерином (35-70%), небольшие количества обнаруживаются в крови и они могут повлиять на некоторые физиологические функции. Всасывание фитостерина в кишечнике является селективным; у животных кампестерин всасывается лучше, чем β-ситостерин, тогда как стигмастерин всасывается лишь в минимальной степени. При нормальных условиях в сыворотке человека обнаруживается только 0,3-1,7 мг/дл фитостеринов, несмотря на поступление с пищей, составляющее 160-360 мг/сутки. Полные концентрации растительного стерина в плазме здоровых взрослых составляют от 7 мкмоль/л до 24 мкмоль/л, что составляет менее 1% от полной концентрации стерина в плазме (4). Другие исследователи сообщали, что β-ситостерин и кампестерин являются единственными двумя фитостеринами, обнаруживаемыми в крови (1,5).

Фитостеринами, содержащимися в олеосмоле томатов в наибольшем количестве, являются β-ситостерин, кампестерин и стигмастерин, как это показано ниже в таблице 1, где значения определяли по методике, приведенной в примере 2 в настоящем изобретении.

Таблица 1Содержания фитостеринов в олеосмоле томатов
Всего фитостеринов (мг/100 г)	650-1100
Кампестерин (мг/100 г)	150-220
Стигмастерин, (мг/100 г)	250-480
β-Ситостерин, (мг/100 г)	250-400

Воспалительный процесс, который образует важную часть неспецифической иммунной системы, характеризуется сложным набором химических и клеточных изменений, которые важны для защиты хозяина от микробных агентов и других потенциально вредных факторов окружающей среды. Макрофаги играют важную роль в защите хозяина от вредных веществ и участвуют в различных патологических процессах, включая аутоиммунные заболевания, инфекции и воспалительные нарушения. Воспалительные стимулы, такие как ЛПС и IFN-γ, активируют макрофаги с образованием множества провоспалительных цитокинов, таких как TNF-α и IL-1β, а также других воспалительных медиаторов, включая PGE₂ и оксид азота (NO), которые синтезируются циклооксигеназой-2 (COX-2) и индуцируемой синтазой оксида азота (iNOS) соответственно. Все они важны для защиты хозяина, однако их увеличенное высвобождение может стимулировать возникновение воспалительного состояния и вызвать связанное со стрессом окислительное повреждение клеток. Во многих случаях воспаление может быть инициировано некстати, и/или может протекать в такой степени, которая становится вредной для хозяина. В таких случаях может потребоваться подавление или предупреждение развития одного или большего количества аспектов воспалительного процесса, в особенности в случае неинфекционных воспалительных заболеваний.

Показано, что в развитии и регулировании воспалительного процесса участвует очень большое количество различных химических медиаторов. Недавние исследования, проведенные в целом ряде разных лабораторий, установили, что оксид азота (NO) является важным модулятором различных острых и хронических воспалительных нарушений, включая различные типы артрита, желудочно-кишечные заболевания, воспалительные патологические состояния центральной нервной системы и некоторые формы астмы. В результате было предположено, что ингибирование продуцирования NO может обеспечить полезный терапевтический механизм для лечения и/или ведения этих воспалительных нарушений. Кроме того, также показано, что ингибирование синтеза NO полезно для некоторых патологических состояний, которые по природе в основном не являются воспалительными. Так, например, установлено, что ингибирование синтеза NO уменьшает поступление глюкозы в ткани конечностей при физической нагрузке у индивидуумов, страдающих диабетом типа 2.

Также показано, что некоторые другие соединения, включая целый ряд натуральных продуктов, ингибируют продуцирование NO. Последняя группа включает такие соединения, как лютеин [Rafi M.M. et al Mol Nutr Food Res. 2007 Mar; 51(3):333-40; Choi, J.S. Nutrition. 2006 Jun; 22(6):668-71] и ликопин [Rafi, M.M. et al. J Food Sci. 2007 Jan; 72(l):S069-74]. Однако показано, что эффективность и активность многих натуральных продуктов - ингибиторов NO не особенно высока. Поэтому необходимы улучшенные композиций природного происхождения, ингибирующие продуцирование NO.

Другим очень важным воспалительным медиатором является фактор некроза опухоли-альфа (TNF-α), который представляет собой цитокин, продуцируемый клетками разных типов, включая макрофаги, нейтрофилы и лимфоциты. TNF-α играет ключевую роль на ранней стадии воспалительного процесса и обеспечивает стимулирование продуцирования и активацию широкого диапазона провоспалительных генов. Таким образом, вследствие его ключевой провоспалительной роли, ясно, что TNF-α является потенциально важной терапевтической мишенью для противовоспалительных средств.

Неконтролируемое продуцирование реакционноспособных кислородсодержащих частиц (РКЧ) и метаболитов арахидоновой кислоты (АК) способствует патогенезу сердечно-сосудистого заболевания и рака. Воспалительные клетки, инфильтрованные в атеросклеротические бляшки или опухоль, являются главным источником РКЧ и эйкозаноидов. Поэтому исследовали влияние бета-ситостерина, фитостерина из оливкового масла, на содержание РКЧ, таких как супероксидный анион (O₂(^-)), пероксид водорода (H₂O₂) и оксид азота (*NO) (6). Также исследовали высвобождение АК и продуцирование эйкозаноидов макрофагами (клетки RAW 264.7), стимулированными сложными эфирами форбола (PMA). Показано, что бета-ситостерин уменьшает продуцирование O₂(^-) и (H₂O₂), индуцированное с помощью PMA, и усиливает его влияние через 3-6 ч после предварительной инкубации. Бета-ситостерин также уменьшает высвобождение *NO, индуцированное с помощью PMA, что коррелирует с уменьшением содержания индуцируемой синтазы оксида азота (iNOS) (6).

Рак предстательной железы и доброкачественная гиперплазия предстательной железы (ДГП) являются связанными с возрастом патологическими состояниями, которые влияют на физиологию предстательной железы и ухудшают функционирование мочевых путей у мужчин. По мере старения мужчин предстательные железы медленно увеличиваются, что приводит к (a) обструктивным симптомам, примерами которых являются слабые и/или перемежающиеся потоки мочи, ощущение оставшейся мочи в мочевом пузыре после опорожнения, капание или подтекание в конце мочеиспускания и/или (b) симптомам раздражения, примерами которых являются неотложный позыв к мочеиспусканию, увеличенная частота мочеиспускания и энурез. Обструктивные симптомы и симптомы раздражения обычно называют симптомами нижних мочевыводящих путей (СНМП). Современные средства лечения рака предстательной железы, устранения симптомов ДГП и СНМП включают лекарственную терапию и в крайних случаях требуют полостную операцию. Двумя основными классами использующихся лекарственных средств являются альфа-блокаторы и ингибиторы 5-альфа-редуктазы, которые для обеспечения устойчивой эффективности следует принимать пожизненно. При проведении оперативного вмешательства результаты обычно положительные, но существует определенный риск, связанный с такими оперативными вмешательствами.

В публикации патента US 2005/0031557 ("публикация 557") описана пероральная композиция содержащая β-каротин, лютеин и ликопин, и в качестве возможных дополнительных ингредиентов содержащая фитоен и фитофлуен, предназначенная для применения в качестве солнцезащитного средства. В этой публикации не указаны конкретные предпочтительные содержания фитоена или фитофлуена по сравнению с содержанием лютеина или любого из приведенного ниже перечня фитохимических соединений, включающего альфа-каротин, астаксантин, альфа-криптоксантин, бета-криптоксантин, зеаксантин, фитоен, фитофлуен, гамма-каротин и нейроспорин. В публикации 557 не указаны причины включения какого-либо из представителей этого перечня в композицию.

Эпидемиологические и экспериментальные исследования показывают, что пищевые фитостерины могут обеспечить защиту жителей Запада от большинства типов рака, таких как рак толстой кишки, молочной железы и предстательной железы. Возможные механизмы, с помощью которых фитостерины обеспечивают эту защиту, могут включать воздействие фитостеринов на структуру мембран, функцию опухоли и ткань хозяина, пути передачи сигналов, которые регулируют рост опухоли и апоптоз (8), и иммунную функцию (9) хозяина. Кроме того, метаболизм холестерина у хозяина, добавление бета-ситостерина, уменьшение содержания холестерина и других липидов в мембране опухолевой клетки (10). Кроме того, в приведенной ниже таблице 2 приведены результаты некоторых исследований in vitro влияния фитостеринов на линии раковых клеток человека:

Таблица 2Исследования in vitro различных линий раковых клеток
Линия клеток	Ткань	Фитостерин	Концентрация (мкМ)	Параметр	Литература
HT-29	рак прямой кишки человека	β-ситостерин	16	подавление роста	(10)
LNCaP	рак предстательной железы человека	β-ситостерин	16	подавление роста; уменьшение содержания простатоспецифичного антигена	(11)
MDA-MB-231	рак молочной железы человека	β-ситостеринкампестерин холестерин	161616	подавление ростарост = не изменилсярост = не изменился	(12)
MCF-7	рак молочной железы человека	β-ситостерин	от 0,001 до 150	рост усилился	(13)

Проведены дополнительные исследования для выявления возможных механизмов, по которым два распространенных фитохимических соединения, ресвератрол и бета-ситостерин, подавляют рост рака предстательной железы человека (14). При этих исследованиях к клеткам рака предстательной железы человека (клетки PC-3) добавляли 50 мкМ ресвератрола или 16 мкМ бета-ситостерина, по отдельности или в комбинации, в течение до 5 дней (14). Комбинация этих двух соединений приводила к более значительному подавлению роста, чем любое соединение по отдельности. На основании этих данных сделан вывод о том, что эти фитохимические соединения могут вызвать подавление роста опухоли путем стимулирования апоптоза и остановки развития клеток на разных фазах клеточного цикла и что механизм может включать изменения продуцирования РКЧ и простагландина (14).

Другие публикации также показывают, что комбинация фитостеринов и омега-3 жирных кислот (n-3) дополнительно уменьшает факторы риска сердечно-сосудистых заболеваний (15).

Сообщают, что растительные стерины и станолы уменьшают в плазме концентрации содержащих углеводородные цепи каротиноидов, но не оксигенированных каротиноидов и токоферолов (3,16). В одном сообщении способность сложных эфиров растительного стерина (СРС) в приправе к салату изменять содержание липидов и каротиноидов в плазме определили у 26 мужчин и 27 женщин, которые потребляли сохраняющую массу тела низкокалорийные диеты (17). Установлено, что потребление 3,6 г СРС приводило к уменьшению содержания ЛНП холестерина (9,7%) и триглицеридов (7,3%), но не меняло содержания ЛВП (липопротеины высокой плотности) холестерина. При потреблении СРС полное содержание каротиноидов в плазме уменьшалось на 9,6%. Точнее, значительно уменьшалось содержание бета-каротина, альфа-каротина и бета-криптоксантина. Содержание каротиноидов в плазме при всех диетах находилось в нормальных диапазонах. Данные другого исследования показывают, что свободные растительные стерины и СРС уменьшают биологическую доступность бета-каротина примерно на 50% и альфа-токоферола примерно на 20% (18).

Несмотря на описанные исследования, сохраняется необходимость в фармацевтических композициях, содержащих каротиноиды, например, ликопин, предназначенных для применения в терапии.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В соответствии с настоящим изобретением открыта фармацевтическая композиция, предназначенная для перорального введения, содержащая терапевтически эффективное количество синергетической комбинации по меньшей мере одного каротиноида, предпочтительно ликопина, бета-каротина, лютеина или астаксантина и наиболее предпочтительно ликопина, и по меньшей мере одного фитостерина, в которой отношение количества каротиноида, такого как ликопин, к количеству по меньшей мере одного фитостерина в фармацевтической композиции максимально составляет примерно 5:1. Предпочтительно, если эта композиция дополнительно включает фитоен, фитофлуен и токоферолы. В предпочтительном варианте осуществления отношение количества ликопина к количеству по меньшей мере одного фитостерина составляет примерно от 0,9:1 до 4,7:1. Предпочтительно, если отношение количества ликопина к количеству по меньшей мере одного фитостерина составляет менее примерно 4,0:1, более предпочтительно менее примерно 3,5:1 и наиболее предпочтительно менее примерно 3:1.

В соответствии с одним вариантом осуществления фармацевтической композиции, предлагаемой в настоящем изобретении, композиция содержит ликопин в количестве, составляющем от примерно 2 до 10 масс.% в комбинации по меньшей мере с одним фитостерином в количестве, составляющем от 1 до 5 масс.%.

В соответствии с другим вариантом осуществления фармацевтической композиции, предлагаемой в настоящем изобретении, ликопин содержится в олеосмоле томатов в количестве, составляющем примерно 6-15 масс.%, и по меньшей мере один фитостерин содержится в количестве, составляющем не менее примерно 1 масс.%. Предпочтительно, если фармацевтическая композиция содержит от примерно 1,0 до 5 масс.% и предпочтительно от примерно 1,5 до 3 масс.% комбинации фитоена и/или фитофлуена. Предпочтительно, если фармацевтическая композиция представляет собой экстракт томатов (олеосмолу). В предпочтительном варианте осуществления по меньшей мере один фитостерин представляет собой бета-ситостерин, кампестерин, бета-октастерин, стигмастерин и их смеси. Предпочтительно, если по меньшей мере один фитостерин представляет собой смесь этих фитостеринов.

В соответствии с другим вариантом осуществления настоящего изобретения открыта фармацевтическая композиция, предназначенная для перорального введения, содержащая терапевтически эффективное количество синергетической комбинации ликопина и по меньшей мере одного фитостерина, где отношение количества ликопина к количеству по меньшей мере одного фитостерина в фармацевтической композиции максимально составляет примерно 5:1 и где комбинация приводит к синергетическому подавлению роста клеток предстательной железы. В предпочтительном варианте осуществления отношение количества ликопина к количеству по меньшей мере одного фитостерина составляет примерно от 0,9:1 до 4,7:1. Предпочтительно, если отношение количества ликопина к количеству по меньшей мере одного фитостерина составляет менее примерно 4,0:1, более предпочтительно менее примерно 3,5:1 и наиболее предпочтительно менее примерно 3:1.

В соответствии с одним вариантом осуществления фармацевтической композиции, предлагаемой в настоящем изобретении, композиция содержит ликопин в количестве, составляющем от примерно 2 до 10 масс.% в комбинации по меньшей мере с одним фитостерином в количестве, составляющем от 1 до 5 масс.%.

В соответствии с другим вариантом осуществления фармацевтической композиции, предлагаемой в настоящем изобретении, ликопин содержится в олеосмоле томатов в количестве, составляющем примерно 6-15 масс.%, и по меньшей мере один фитостерин содержится в количестве, составляющем не менее примерно 1 масс.%. Предпочтительно, если фармацевтическая композиция содержит от примерно 1,0 до 5 масс.% и предпочтительно от примерно 1,5 до 3 масс.% комбинации фитоена и фитофлуена. Предпочтительно, если фармацевтическая композиция представляет собой экстракт томатов (олеосмолу). В предпочтительном варианте осуществления по меньшей мере один фитостерин представляет собой бета-ситостерин, кампестерин, бета-октастерин, стигмастерин и их смеси. Предпочтительно, если по меньшей мере один фитостерин представляет собой смесь этих фитостеринов.

В соответствии с другим вариантом осуществления настоящего изобретения открыта фармацевтическая композиция, предназначенная для перорального введения, содержащая терапевтически эффективное количество олеосмолы томатов, содержащей ликопин в количестве, составляющем от примерно 6 до 15 масс.%, фитоен и/или фитофлуен в количестве, составляющем от примерно 1,0 до 5,0 масс.%, токоферолы в количестве, составляющем от примерно 1,5 до 4,0 масс.%, бета-каротин в количестве, составляющем от примерно 0,2 до 1,0 масс.%, обладающей полным содержанием жирных кислот, составляющим от примерно 50 до 90 масс.%, содержащей и по меньшей мере один фитостерин в количестве, таком что отношение количества ликопина к количеству по меньшей мере одного фитостерина составляет менее примерно 5:1. В предпочтительном варианте осуществления отношение количества ликопина к количеству по меньшей мере одного фитостерина приводит к синергетическому подавлению роста клеток предстательной железы. Предпочтительно, если отношение количества ликопина к количеству по меньшей мере одного фитостерина составляет примерно от 0,9:1 до 4,7:1, более предпочтительно менее примерно 4:1, более предпочтительно менее примерно 3:1, и в предпочтительном варианте осуществления от примерно 0,05:1 до 2,1:1. В предпочтительном варианте осуществления по меньшей мере один фитостерин представляет собой бета-ситостерин, кампестерин, бета-октастерин, стигмастерин и их смеси.

В соответствии с одним вариантом осуществления фармацевтической композиции, предлагаемой в настоящем изобретении, концентрация по меньшей мере одного фитостерина в фармацевтической композиции составляет примерно от 2,0 до 50 масс.%.

В соответствии с другим вариантом осуществления фармацевтической композиции, предлагаемой в настоящем изобретении, композиция дополнительно содержит гамма-каротин, дельта-каротин и витамин E.

В соответствии с другим вариантом осуществления фармацевтической композиции, предлагаемой в настоящем изобретении, отношение количества ликопина к количеству по меньшей мере одного фитостерина составляет примерно от 0,1:1 до 3:1.

В соответствии с настоящим изобретением предложен способ получения фармацевтической композиции, предназначенной для перорального введения, включающей получение экстракта томатов, содержащего олеосмолу, содержащую ликопин в количестве, составляющем от примерно 6 до 15 масс.%, фосфолипиды в количестве, составляющем не менее примерно 0,01 масс.%, смесь моно- и диглицеридов в количестве, составляющем от примерно 2 до 6 масс.%, и по меньшей мере один фитостерин в количестве, составляющем от примерно 1 до 1,5 масс.%, в которой отношение количества ликопина к количеству по меньшей мере одного фосфолипида составляет примерно 2:1, и добавление достаточного дополнительного количества по меньшей мере одного фитостерина, так чтобы уменьшить отношение количества ликопина к количеству по меньшей мере одного фитостерина до составляющего менее примерно 3:1 и предпочтительно от примерно 0,1 до 3:1, так чтобы обеспечить синергетическое подавление роста клеток предстательной железы.

В соответствии с другим вариантом осуществления настоящего изобретения компоненты ликопин и фитостерин фармацевтических композиций, предлагаемых в настоящем изобретении, предпочтительно являются природными и предпочтительно экстрагированы из мякоти томатов. Мякоть томатов предпочтительно экстрагируют с получением олеосмолы, которую можно превратить в композиции, предлагаемые в настоящем изобретении, например, путем включения в нее дополнительных количеств фитостеринов, и затем можно переработать в зернышки или сухой порошкообразный материал. В различных вариантах осуществления эти композиции предпочтительно капсулируют в капсулы из мягкого геля или, альтернативно, в капсулы с "твердой оболочкой", или необязательно, превращают в таблетки, или, если это желательно, в пакеты-саше и т.п.

Поэтому, в соответствии с одним вариантом осуществления настоящего изобретения можно получить олеосмолу томатов, которая в отличие от известных олеосмол томатов, как это показано в таблице 1, теперь содержит следующие количества фитостеринов (и в этом случае значения определяли по методике, приведенной в примере 2 в настоящем изобретении):

Таблица 3Содержания фитостеринов в олеосмолах томатов, предлагаемых в настоящем изобретении
Всего фитостеринов (мг/100 г)	1600-6300
Кампестерин (мг/100 г)	300-1300
Стигмастерин (мг/100 г)	500-1700
β-Ситостерин (мг/100 г)	300-1200

В соответствии с другим вариантом осуществления настоящего изобретения олеосмолы томатов, представляющие собой композиции, предлагаемые в настоящем изобретении, в дополнение к ликопину и фитостеринам могут содержать компоненты фитоен и фитофлуен, а также один или большее количество из следующих: бета-каротин, гамма-каротин и дельта-каротин, токоферолы и фосфолипиды.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

Объект настоящего изобретения станет лучше понятным после рассмотрения приведенного ниже подробного описания, в котором используются чертежи, на которых представлено следующее:

На Фиг.1A приведено графическое представление подавления роста клеток, основанное на выраженной в процентах степени уничтожения клеток LNCaP в результате обработки β-ситостерином (-o-) и комбинацией β-ситостерина с 0,4 мкМ ликопина (-•-);

На Фиг.1B приведено графическое представление подавления роста клеток, основанное на выраженной в процентах степени уничтожения клеток LNCaP в результате обработки β-кампестерином и комбинацией β-кампестерин (-o-) с 0,4 мкМ ликопина (-•-);

На Фиг.1С приведено графическое представление подавления роста клеток, основанное на выраженной в процентах степени уничтожения клеток LNCaP в результате обработки β-октостерином (-o-) и комбинацией β-октостерина с 0,4 мкМ ликопина (-•-);

На Фиг.1D приведено графическое представление подавления роста клеток, основанное на выраженной в процентах степени уничтожения клеток LNCaP в результате обработки β-стигмастерином (-o-) и комбинацией β-стигмастерина с 0,4 мкМ ликопина (-•-);

На Фиг.1E приведено графическое представление подавления роста клеток, основанное на выраженной в процентах степени уничтожения клеток LNCaP в результате обработки ликопином при различных концентрациях;

На Фиг.2 приведено графическое представление синергетического подавления пролиферации клеток андроген-зависимого рака предстательной железы человека in vitro в присутствии комбинации ликопина и фитостерина кампестерина. В этих экспериментах клетки LNCaP повторно инкубировали в течение 24 ч в 0,5% сыворотке и затем рост (количественно определяли путем измерения степени включения тимидина) стимулировали с помощью 1 нМ ДГТ (дигидротестостерон). Стимулированные клетки в течение 3 дней обрабатывали использующимися в указанных концентрациях фитостерином (0,4 мкМ) по отдельности, ликопином по отдельности (0,4 мкМ) или комбинацией фитостерина и ликопина. Представленные данные являются средними значениями ± СП (стандартная погрешность) 2-3 независимых экспериментов, проведенных по 4 раза;

На Фиг.3А приведено графическое представление выраженного в процентах ингибирования продуцирования NO для продукта Lyc-O-Mato®, обладающего отношением ликопин/фитостерин, равным более 5,5;

На Фиг.3В приведено графическое представление выраженного в процентах ингибирования продуцирования NO для смеси Lyc-O-Mato® и фитостерина, обладающей отношениями ликопин/фитостерин, равными от 3,6 до 3,68;

На Фиг.3C приведено графическое представление выраженного в процентах ингибирования продуцирования NO для смеси Lyc-O-Mato® и фитостерина, обладающей отношениями ликопин/фитостерин, равными от 1,17 до 1,58;

На Фиг.4A приведено графическое представление выраженного в процентах ингибирования продуцирования TNF-α для продукта Lyc-O-Mato®, обладающего отношением ликопин/фитостерин, равным более 5,5;

На Фиг.4B приведено графическое представление выраженного в процентах ингибирования продуцирования TNF-α для смеси Lyc-O-Mato® и фитостерина, обладающей отношениями ликопин/фитостерин, равными от 3,6 и 3,68;

На Фиг.4C приведено графическое представление выраженного в процентах ингибирования продуцирования TNF-α для смеси Lyc-O-Mato® и фитостерина, обладающей отношениями ликопин/фитостерин, равными от 1,17 до 1,58;

На Фиг.5A приведено графическое представление выраженного в процентах ингибирования продуцирования NO для фитостеринов по отдельности;

На Фиг.5B приведено графическое представление выраженного в процентах ингибирования продуцирования NO для смеси Lyc-O-Mato® и фитостерина, обладающей различными отношениями ликопин/фитостерины;

На Фиг.6A приведено графическое представление выраженного в процентах ингибирования продуцирования TNF-α для фитостеринов по отдельности; и

На Фиг.6B приведено графическое представление выраженного в процентах ингибирования продуцирования TNF-α для смеси Lyc-O-Mato® и фитостерина, обладающей различными отношениями ликопин/фитостерин.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Хотя описание заканчивается формулой изобретения, подробно описывающей и ясно заявляющей настоящее изобретение, предполагается, что настоящее изобретение будет лучше понято с помощью приведенного ниже описания.

Термины, такие как "примерно", "обычно", "в основном" и т.п., предназначены для модификации термина или значения, так чтобы он не являлся абсолютным, а не включал предшествующий уровень техники. Такие термины будут определяться в соответствии с обстоятельствами и термины, которые ими модифицируются, являются терминами, понятными специалистам в данной области техники. Это включает, по меньшей мере степень, экспериментальной погрешности, технической погрешности и инструментальной погрешности для данной методики, использующейся для измерения величины.

Все выраженные в процентах, частях значения и отношения при использовании в настоящем изобретении являются массовыми в пересчете на массу всей композиции, если не указано иное. Все такие массы, если они относятся к перечисленным ингредиентам, основаны на содержании активного вещества и поэтому не включают растворители или побочные продукты, которые могут содержаться в имеющихся в продаже материалах, если не указано иное. Все измерения проводятся при 25°C и нормальном давлении, если не указано иное. Все температуры приведены в градусах Цельсия, если не указано иное.

Числовые диапазоны при использовании в настоящем изобретении включают каждое число и подгруппы чисел, находящихся в этом диапазоне, независимо от того, указано ли это специально. Кроме того, эти числовые диапазоны следует понимать, как обеспечивающие поддержку утверждения, относящегося к любому числу или подгруппе чисел, находящихся в этом диапазоне. Например, раскрытие вида от 1 до 10 следует понимать, как включающие диапазон от 2 до 8, от 3 до 7, 5, 6, от 1 до 9, от 3,6 до 4,6, от 3,5 до 9,9 и т.п. Все диапазоны, указанные в настоящем изобретении, включают конечные значения, включая те, которые указывают диапазон "между" двумя значениями.

Все указания на характеристики или ограничения в единственном числе, приведенные в настоящем изобретении, включают соответствующие характеристики или ограничения во множественном числе и наоборот, если не указано иное или ясно не подразумевается иное в контексте, в котором приведено указание. Таким образом, если не указано иное, то при использовании в настоящем изобретении термин в единственном числе включает термин во множественном числе, например, "фитостерин" может означать более чем один фитостерин.

Все комбинации стадий способа или процесса при использовании в настоящем изобретении можно проводить в любом порядке, если не указано иное или ясно не подразумевается иное в контексте, в котором приведена указанная комбинация.

Фармацевтические композиции и соответствующие способы, предлагаемые в настоящем изобретении, могут включать, состоять из или состоять в основном из существенных элементов и ограничений описанного изобретения, а также включать дополнительные или необязательные ингредиенты, компоненты или ограничения, описанные или иным образом использующиеся в настоящем изобретении. При использовании в настоящем изобретении "включающие" означает указанные элементы или их эквивалент в структуре или функции с добавлением любого другого элемента или элементов, которые не указаны. Термины "содержащий" и "включающий" также следует понимать, как допускающие изменения, если из контекста не следует иное.

Настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим каротины, такие как ликопин, взятые из самых различных источников, включая синтетические или другие натуральные источники, такие как взятые из томатов, полученные путем ферментации или из водорослей или грибов, и один или большее количество фитостеринов, предназначенным для терапевтического применения. Как предполагается в настоящем изобретении, ликопин и его предшественники фитоен и фитофлуен могут находиться в олеосмоле, полученной из плодов томатов. Подходящие плоды томатов производятся не подвергнутыми генетическим изменениям или измененными с помощью генной инженерии растениями и предпочтительно обладают большими концентрациями ликопина, и как отмечено выше, также содержат фитостерины. Однако содержание фитостеринов в этих известных композициях является низким и приводит к отношениям количество ликопина и фитостерина, составляющим примерно 5:1 и более. Поэтому для получения композиций, предлагаемых в настоящем изобретении, из этих олеосмол томатов, необходимо дополнительно добавить фитостерин (фитостерины) для уменьшения отношения количества ликопина к количеству фитостерина. Когда после этого получают композиции, предлагаемые в настоящем изобретении, их предпочтительно помещают в капсулу из мягкого геля и они могут дополнительно содержать пищевое масло, примерами которого являются соевое масло, тыквенное масло, виноградное масло и т.п. В объем настоящего изобретения входят дополнительные подходящие методики доставки и они известны специалисту в данной области техники.

Показано, что композиции, предлагаемые в настоящем изобретении, обладают существенными благоприятными терапевтическими воздействиями. Данные, приведенные в настоящем изобретении, изначально показали наличие важного, неожиданного и синергетического воздействия применительно к подавлению роста клеток предстательной железы. Таким образом, их использование для лечения рака является довольно важным применением. Кроме того, также показано, что эти композиции оказывают неожиданное и синергетическое влияние на ослабление воспалительных патологических состояний. Это, разумеется, расширяет всю область возможного применения композиций. Кроме того, эти композиции также применимы для лечения различных сердечно-сосудистых патологических состояний, например, для окисления ЛНП холестерина и т.п.

Хотя наиболее предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения включает ликопин в качестве каротина вместе с фитостерином, заявители установили, что можно использовать и другие каротины, в особенности те, которые обладают структурой, сходной со структурой ликопина. Таким образом, в дополнение к ликопину они включают, бета-каротин, лютеин и астаксантин. Таким образом, заявители установили, что эти дополнительные каротины обладают сходными синергетическими воздействиями, такими как противовоспалительные воздействия, рассмотренные выше. Таким образом, хотя в оставшейся части настоящего раскрытия особое значение придано ликопину, следует понимать, ч