Активация прокаспазы-3 с помощью комбинированной терапии

Активация прокаспазы-3 с помощью комбинированной терапии

Иллюстрации

Показать все

Реферат

РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

В соответствии с параграфом 119(e) Кодекса законов США 35, эта заявка притязает на приоритет в отношении Предварительной патентной заявки США №61/607,098, поданной 6 марта 2012 года, которая включена в этот документ посредством ссылки.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Апоптоз, или запрограммированная смерть клеток, играет центральную роль в развитии и гомеостазе всех многоклеточных организмов. Частым отличительным признаком рака является устойчивость к естественным апоптотическим сигналам. В зависимости от типа рака, эта устойчивость типично вызвана повышением или понижением количества и/или активности ключевых белков в апоптотическом каскаде или мутациями в генах, кодирующих эти белки. Подобные изменения возникают как во внутреннем пути регуляции апоптоза, связанном с митохондриями и каспазой-9, так и во внешнем пути регуляции апоптоза, включающем в себя действие "рецепторов смерти" и каспазы-8. Например, в раковых клетках наблюдалось изменение нормальных уровней белков, например, р53, Bim, Вах, Apaf-1, FLIP и многих других. Эти изменения могут приводить к нарушениям в апоптотическом каскаде, в результате которых исходные проапоптотические сигналы не передаются должным образом по каскаду и не приводят к активации исполнительных каспаз, каспазы-3 и каспазы-7.

Поскольку большинство путей регуляции апоптоза в итоге включают в себя в итоге активацию прокаспазы-3, генетические аномалии в их ранее действующих компонентах по существу являются «разрывами» апоптотических сигнальных цепей, и в результате подобные клетки пролиферируют аномально. С учетом центральной роли апоптоза в развитии рака, были предприняты усилия по разработке терапевтических средств, воздействующих на конкретные белки в апоптотическом каскаде. Например, пептидные или небольшие молекулярные биндеры, связывающиеся с членами апоптотического каскада, например, с р53 и белками в семействе Bcl или с семейством белков-ингибиторов апоптоза (IAP), обладают проапоптотической активностью, как и соединения, способствующие олигомеризации Apaf-1. При этом, однако, поскольку подобные соединения воздействуют на ранние (или на средние и высокие) позиции апоптотического каскада, формы рака с мутациями, воздействующими на белки, находящиеся ближе к концу каскада, чем его вышеупомянутые члены, могут по-прежнему быть устойчивыми к возможным положительным эффектам этих соединений.

Было бы желательно в терапевтических целях выявить небольшие молекулы, которые напрямую активируют проапоптотический белок, радикально задний по ходу в апоптотическом каскаде. Этот подход мог бы затрагивать относительно низкое положение в каскаде, что позволило бы убивать даже те клетки, которые имеют мутации, затрагивающие передние по ходу элементы апоптотического механизма. Более того, подобные терапевтические стратегии имели бы более высокую вероятность успеха, если бы этот проапоптотический белок присутствовал в раковых клетках в повышенных количествах, и/или если бы его активность в них была повышена. Таким образом, идентичность небольших молекул, способных воздействовать на передний по ходу белок-эффектор апоптоза, прокаспазу-3, оказало бы существенную помощь современной противораковой терапии.

Конверсия или активация прокаспазы-3 с образованием каспазы-3 приводит к образованию активной формы каспазы «убийцы», в дальнейшем катализирующей гидролиз многочисленных белковых субстратов. Активная каспаза-3 является гомодимером гетеродимеров и образуется в результате протеолиза прокаспазы-3. Эта протеолитическая активация in vivo типично происходит под действием каспазы-8 или каспазы-9. Для того, чтобы предотвратить преждевременную активацию зимогена (профермента), прокаспаза-3 содержит "предохранительную защелку" из 12 аминокислотных остатков, которая блокирует доступ к сайту протеолиза ETD (аминокислотной последовательности Ile-Glu-Thr-Asp). Эта "предохранительная защелка" дает возможность прокаспазе-3 противостоять автокаталитической активации и протеолизу под действием каспазы-9. Мутагенные исследования показывают, что три последовательных остатка аспарагиновой кислоты, по-видимому, являются критическими компонентами этой "предохранительной защелки". Положение "предохранительной защелки" чувствительно к pH, поэтому, как считается, после закисления внутриклеточной среды (которое возникает во время апоптоза) "предохранительная защелка" открывает доступ к сайту протеолиза, и активная каспаза-3 может образовываться либо под действием каспазы-9, либо с помощью механизма самоактивации.

В определенных типах рака уровни прокаспазы-3 повышены по сравнению с нормальными тканями. Исследование первичных изолятов от 20 пациентов с раком толстой кишки показало, что в среднем количество прокаспазы-3 в подобных изолятах было повышено в шесть раз по сравнению с соседними нераковыми тканями. Кроме того, уровень прокаспазы-3 повышен в некоторых нейробластомах, лимфомах и некоторых видах рака печени. Кроме того, была проведена систематическая оценка уровней прокаспазы-3 в панели из 60 клеточных линий, используемой при скрининге на рак в Экспериментальной Терапевтической Программе Национального института рака США (NCI), которая показала, что некоторые виды рака легких, рака почек, рака молочных желез и меланом демонстрируют значительно повышенные уровни экспрессии прокаспазы-3.

Вследствие роли активной каспазы-3 в осуществлении апоптоза, относительно высоких уровней прокаспазы-3 в некоторых типах раковых клеток и интригующего механизма подавления ее самоактивации с помощью "предохранительной защелки", небольшие молекулы, которые напрямую модифицируют прокаспазу-3, могут найти самое широкое применение в таргетной противораковой терапии.

Комбинированная терапия стала стандартным подходом при лечении раковых пациентов. Целью режимов применения лекарственных коктейлей при проведении комбинированной терапии является достижение синергического или аддитивного эффекта между используемыми химиотерапевтическими средствами, что должно способствовать сокращению длительности лечения, снижению их токсичности и повышению выживаемости пациентов. Лекарственные средства, воздействующие на один определенный биохимический путь, являются особенно подходящими кандидатами для возникновения синергии или потенциации, поскольку их действие может имитировать «синтетические летальные» генетические комбинации. Например, ингибиторы полимеразы-1 поли(АДФ-рибозы) (PARP-1), фермента, способствующего исправлению повреждений ДНК, потенциально способны давать синергический эффект при их использовании в комбинации со средствами, повреждающими ДНК, как это было показано на клеточных культурах, на животных моделях и в клинических испытаниях на людях. Однако при лечении многих форм рака по-прежнему существует потребность в более эффективных способах лечения, и новые синергические комбинации противораковых лекарственных средств помогут в достижении этой цели. Соответственно, существует потребность в выявлении новых цитотоксических средств, которые эффективно убивают раковые клетки и в то же время защищают нормальные ткани пациента от нежелательного токсического действия цитотоксического средства.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В широком смысле это изобретение описывает соединения, композиции и способы терапевтического лечения. В способах осуществления изобретение применимо для лечения различных раковых заболеваний и различных типов раковых клеток, в частности, рака молочной железы, лимфом, рака надпочечников, рака почек, меланом, лейкемий, нейробластом, рака легких, опухолей мозга и других известных науке. В настоящем изобретении описываются, в числе прочего, композиции и способы, включающие использование небольших молекул, способных индуцировать смерть клеток. В некоторых способах осуществления эти композиции и способы включают в себя использование соединений, способных прямо или опосредованно взаимодействовать с членами путей регуляции запрограммированной смерти клеток, например, прокаспазой-3. В некоторых способах осуществления эти композиции и способы обладают пониженной нейротоксичностью по сравнению с другими соединениями, которые прямо или опосредованно взаимодействуют с членами путей регуляции запрограммированной смерти клеток, например, с прокаспазой-3.

Комбинированная противораковая терапия может состоять из лекарственных средств, воздействующих на различные биохимические пути или на различные мишени в пределах одного пути, имитируя синтетические летальные генетические комбинации. Было показано, что комбинация активатора прокаспазы-3 РАС-1 и второго активного средства демонстрирует значительный синергический эффект в отношении индукции апоптотической смерти раковых клеток, часто в степени, значительно превосходящей простое аддитивное действие. Комбинация РАС-1 и второго активного средства может быть использована для эффективного снижения опухолевой нагрузки в опухолевых моделях, в которых эти соединения сами по себе дают лишь минимальный эффект или вообще не дают эффекта. Эти данные свидетельствуют об эффективности комбинации РАС-1 и второго средства в лечении рака, и, в более широком смысле, демонстрируют, что эта комбинация может обладать синергическими свойствами и может обеспечивать значительно более благоприятные результаты лечения.

Соответственно, в настоящем изобретении предложено использовать композицию, включающую в себя (а) соединение РАС-1:

(b) второе активное средство; и (с) фармацевтически приемлемый разбавитель, наполнитель или носитель. Второе активное средство может быть, например, этопозидом, бортезомибом, ставроспорином, доксорубицином, тамоксифеном, цисплатином, карбоплатином, паклитакселом или другим химиотерапевтическим средством или иным активным средством, упомянутым в настоящем изобретении. Носитель может включать в себя воду и вспомогательные компоненты для улучшения доставки активных компонентов, например, буфер, сахар, солюбилизирующие средства, например, циклодекстрин или их различные комбинации. В одном из способов осуществления этого изобретения циклодекстрин является 2-гидроксипропил-β-циклодекстрином.

Концентрация соединения РАС-1 может составлять от приблизительно 0,2 мкМ до приблизительно 5 мМ или от приблизительно 2 мкМ до приблизительно 50 мкМ, обычно приблизительно 2,5 мкМ, около 5 мкМ, приблизительно 7,5 мкМ, около 10 мкМ, приблизительно 12,5 мкМ, приблизительно 15 мкМ, приблизительно 20 мкМ, приблизительно 25 мкМ, приблизительно 30 мкМ, приблизительно 40 мкМ или приблизительно 50 мкМ или диапазоном между любыми из вышеупомянутых значений. Концентрация второго активного средства может быть от приблизительно 1 нМ до приблизительно 1 мМ или от приблизительно 25 нМ до приблизительно 1 мМ, обычно приблизительно 1 нМ, приблизительно 2 нМ, приблизительно 3 нМ, приблизительно 5 нМ, приблизительно 10 нМ, приблизительно 25 нМ, приблизительно 50 нМ, приблизительно 100 нМ, приблизительно 250 нМ, приблизительно 500 нМ, приблизительно 750 нМ, приблизительно 900 нМ, приблизительно 1 мкМ, приблизительно 2,5 мкМ, приблизительно 5 мкМ, приблизительно 7,5 мкМ, приблизительно 10 мкМ, приблизительно 12,5 мкМ, приблизительно 15 мкМ, приблизительно 20 мкМ, приблизительно 25 мкМ, приблизительно 30 мкМ, приблизительно 40 мкМ, приблизительно 50 мкМ, приблизительно 75 мкМ, приблизительно 100 мкМ, приблизительно 125 мкМ, приблизительно 150 мкМ, приблизительно 200 мкМ, приблизительно 250 мкМ, приблизительно 300 мкМ, приблизительно 500 мкМ, приблизительно 750 мкМ или приблизительно 1 мМ или диапазоном между любыми из вышеупомянутых значений.

В одном из способов осуществления настоящего изобретения второе активное средство может являться этопозидом, и концентрация этопозида может составлять от приблизительно 0,2 мкМ до приблизительно 50 мкМ.

В другом способе осуществления второе активное средство может являться бортезомибом, и концентрация бортезомиба может составлять от приблизительно 50 нМ до приблизительно 20 мкМ.

В другом способе осуществления второе активное средство может являться ставроспорином, и концентрация ставроспорина может составлять от приблизительно 25 нМ до приблизительно 200 нМ.

В другом способе осуществления второе активное средство может являться доксорубицином, и концентрация доксорубицина может составлять от приблизительно 50 нМ до приблизительно 5 мкМ.

В другом способе осуществления второе активное средство может являться тамоксифеном, и концентрация тамоксифена может составлять от приблизительно 5 мкМ до приблизительно 50 мкМ.

В другом способе осуществления второе активное средство может являться цисплатином, и концентрация цисплатина может составлять от приблизительно 5 мкМ до приблизительно 150 мкМ.

В другом способе осуществления второе активное средство может являться карбоплатином, и концентрация карбоплатина может составлять от приблизительно 5 мкМ до приблизительно 150 мкМ.

В другом способе осуществления второе активное средство может являться паклитакселом, и концентрация паклитаксела может составлять от приблизительно 0,5 нМ до приблизительно 15 нМ.

В настоящем изобретении также предложен способ подавления роста и/или пролиферации раковых клеток, включающий в себя воздействие на раковые клетки эффективным количеством композиции, описанной в настоящем изобретении, причем это воздействие приводит к подавлению роста и/или пролиферации раковых клеток. В некоторых способах осуществления настоящего изобретения эти раковые клетки могут являться клетками лимфомы, клетками остеосаркомы, клетками рака молочных желез или клетками рака яичников. В других способах осуществления настоящего изобретения эти раковые клетки являются клетками другого типа, описанными ниже.

Кроме того, в настоящем изобретении также предложен способ индукции апоптоза в раковых клетках, включающий в себя воздействие на раковые клетки эффективным количеством соединения РАС-1:

и эффективным количеством второго активного средства, отличающийся тем, что это приводит к индукции апоптоза в раковых клетках. В некоторых способах осуществления настоящего изобретения вторым активным средством является этопозид, бортезомиб, ставроспорин, доксирубицин, тамоксифен, цисплатин, карбоплатин или паклитаксел. В других способах осуществления второе активное средство является активным средством, указанным ниже. Воздействие может осуществляться in vitro или in vivo. Воздействие на раковые клетки РАС-1 и вторым активным средством может осуществляться одновременно. С другой стороны, воздействие на раковую клетку РАС-1 может осуществляться до воздействия на нее вторым активным средством, или воздействие на раковую клетку РАС-1 может осуществляться после воздействия на нее вторым активным средством.

В настоящем изобретении также предложен способ лечения рака у пациента, которому необходимо такое лечение. Этот способ включает в себя введение пациенту, одновременное или последовательное, терапевтически эффективного количества соединения РАС-1:

и эффективного количества второго активного средства и отличается тем, что это приводит к лечению рака. В некоторых способах осуществления настоящего изобретения вторым активным средством является этопозид, бортезомиб, ставроспорин, доксирубицин, тамоксифен, цисплатин, карбоплатин или паклитаксел. В других способах осуществления второе активное средство является активным средством, указанным ниже. Введение РАС-1 и второго активного средства может осуществляться одновременно. С другой стороны, введение РАС-1 может осуществляться до введения второго активного средства, или введение РАС-1 может осуществляться после введения второго активного средства. Рак может являться, например, лимфомой, остеосаркомой, раком молочной железы, раком яичников или другим типом рака, указанным в настоящем документе.

Таким образом, изобретение позволяет использовать описанные в нем композиции в медикаментозной терапии. Эта терапия может быть направлена на лечение рака, например, лимфомы, рака молочной железы, рака легких, рака поджелудочной железы, рака простаты, рака толстой кишки и других типов рака, содержащихся в настоящем изобретении. Это изобретение также позволяет использовать описанную в нем композицию для производства медикаментов для лечения заболеваний у млекопитающих, например, рака у людей. Таким образом, это изобретение позволяет использовать описанные в нем соединения для производства медикаментов, которые могут быть полезными при лечении рака у млекопитающих, в частности, у людей. Эти медикаменты могут включать в себя фармацевтически приемлемые разбавители, наполнители и/или носители.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

Приведенные ниже чертежи являются частью описания изобретения; они включены для того, чтобы дополнительно продемонстрировать определенные способы осуществления или различные аспекты настоящего изобретения. В некоторых случаях способы осуществления изобретения могут быть наилучшим образом поняты после изучения прилагающихся чертежей в сочетании с их полным описанием, представленным в этом документе. Описания и прилагаемые чертежи могут подчеркивать определенный конкретный пример или определенные аспекты настоящего изобретения. Однако специалист в данной области поймет, что частично такой пример или такие аспекты могут использоваться в комбинации с другими примерами или аспектами настоящего изобретения.

Фиг. 1. Химические структуры структурно разнообразных химиотерапевтических средств: РАС-1, SPAC-1, этопозида, доксорубицина, бортезомиба, ставроспорина и тамоксифена.

Фиг. 2. Влияние РАС-1 в сочетании с этопозидом на смерть клеток линии U-937 (лимфомы). Пунктирные линии представляют уровни, соответствующие чисто аддитивному действию. Подписи соответствуют столбцам на столбчатой диаграмме следующим образом: левый столбец = 0 мкМ этопозида; средний столбец = 2,5 мкМ этопозида; правый столбец = 5 мкМ этопозида.

Фиг. 3. Влияние РАС-1 в сочетании с Велкейдом^® (бортезомибом) на смерть клеток линии U-937 (лимфомы). При действии 0 нМ бортезомиба в сочетании с 0 мкМ РАС-1 смерти клеток не наблюдалось. Смерть клеток измерялась после нахождения в течение 6 часов в растворе бортезомиба. Пунктирные линии представляют ожидаемые уровни, соответствующие чисто аддитивному действию; таким образом, эта комбинация демонстрирует синергическое действие в терапевтически значимых концентрациях.

Фиг. 4. Влияние РАС-1 в сочетании со ставроспорином на смерть клеток линии U-937 (лимфомы). При действии 0 нМ бортезомиба в сочетании с 0-15 мкМ РАС-1 смерти клеток практически не наблюдалось. Смерть клеток измерялась после нахождения в течение 8 часов в растворе ставроспорина. Пунктирные линии представляют ожидаемые уровни, соответствующие чисто аддитивному действию; таким образом, эта комбинация демонстрирует синергическое действие в терапевтически значимых концентрациях.

Фиг. 5. РАС-1 оказывает синергическое действие в сочетании с доксорубицином при убийстве остеосаркомных клеток линии 143 В (человеческой остеосаркомы). Подписи соответствуют столбцам на столбчатой диаграмме - верхняя подпись соответствует самому левому столбцу, а остальные подписи соответствуют оставшимся столбцам, причем порядок их расположения сверху вниз соответствует расположению столбцов слева направо. При действии 0 нМ доксорубицина в сочетании с 0 мкМ РАС-1 смерти клеток не наблюдалось. Пунктирные линии представляют ожидаемые уровни, соответствующие чисто аддитивному действию; таким образом, эта комбинация демонстрирует синергическое действие в терапевтически значимых концентрациях.

Фиг. 6. РАС-1 потенцирует действие тамоксифена в клетках линии ВТ20 (трижды негативного рака молочных желез), оценивавшееся через 36 ч при различных концентрациях РАС-1 и тамоксифена.

Фиг. 7. Комбинация РАС-1 и тамоксифена оказывает синергическое действие при убийстве клеток линии ВТ20 (трижды негативного рака молочной железы), оценивавшееся через 24 ч при различных концентрациях РАС-1 и тамоксифена. Подписи соответствуют столбцам на столбчатой диаграмме - верхняя подпись соответствует самому левому столбцу, а остальные подписи соответствуют оставшимся столбцам, причем порядок их расположения сверху вниз соответствует расположению столбцов слева направо.

Фиг. 8. Комбинация РАС-1 и тамоксифена оказывает синергическое действие при убийстве клеток линии MDA MB 436 (трижды негативного рака молочной железы), оценивавшееся через 24 ч при различных концентрациях РАС-1 и тамоксифена. Подписи соответствуют столбцам на столбчатой диаграмме - верхняя подпись соответствует самому левому столбцу, а остальные подписи соответствуют оставшимся столбцам, причем порядок их расположения сверху вниз соответствует расположению столбцов слева направо.

Фиг. 9. Комбинация РАС-1 и цисплатина оказывает синергическое действие при убийстве клеток линии IGROV-1 (карциномы яичников), оценивавшееся через 40 ч при различных концентрациях РАС-1 и цисплатина с помощью окрашивания Аннексином V/йодидом пропидия. Подписи соответствуют столбцам на столбчатой диаграмме - верхняя подпись соответствует самому левому столбцу (отсутствует для 0 мкМ цисплатина), а остальные подписи соответствуют оставшимся столбцам, причем порядок их расположения сверху вниз соответствует расположению столбцов слева направо.

Фиг. 10. Комбинация РАС-1 и паклитаксела оказывает синергическое действие при убийстве клеток линии IGROV-1 (карциномы яичников), оценивавшееся через 40 ч при различных концентрациях РАС-1 и паклитаксела с помощью окрашивания Аннексином V/йодидом пропидия. Подписи соответствуют столбцам на столбчатой диаграмме - верхняя подпись соответствует самому левому столбцу (отсутствует для 0 мкМ паклитаксела), а остальные подписи соответствуют оставшимся столбцам, причем порядок их расположения сверху вниз соответствует расположению столбцов слева направо.

Фиг. 11. РАС-1 оказывает синергическое действие в сочетании с карбоплатином при индукции смерти клеток линии HOS (человеческой остеосаркомы) в культуре. Клетки обрабатывались одновременно обоими соединениями в течение 8 ч, после чего среда заменялась, и колониям давали расти в течение 7 дней.

Фиг. 12. РАС-1 оказывает синергическое действие в сочетании с карбоплатином при индукции смерти клеток линии 143В (человеческой остеосаркомы) в культуре. Клетки обрабатывались одновременно обоими соединениями в течение 8 ч, после чего среда заменялась, и колониям давали расти в течение 7 дней.

ПОЛНОЕ ОПИСАНИЕ

В качестве дополнительного введения были открыты соединения, способные активировать фермент, который часто сверхэкспрессируется или просто присутствует в повышенных количествах в его неактивной форме в раковых клетках. Эти соединения способны индуцировать запрограммированную смерть клеток (апоптоз) в раковых клетках, включая те из них, в которых имеются повышенные уровни прокаспазы-3 или ее повышенная активность. Многие типы рака устойчивы к стандартной химиотерапии. Комбинированная терапия, описанная в настоящем изобретении, основана на активации прокаспазы-3 под действием РАС-1, которая дает синергический эффект в сочетании с химиотерапевтическими свойствами второго активного средства для обеспечения эффективности лечения в условиях, когда одно из активных соединений в одиночку было бы менее эффективно или совершенно неэффективно. Эти соединения могут также успешно применяться в таргетной противораковой терапии, где они могут обеспечивать преимущества в виде селективного убийства раковых клеток при сравнительно слабых отрицательных побочных воздействиях на нераковые клетки с более низкими уровнями прокаспазы-3. Эти отрицательные побочные действия могут включать в себя токсичность, в частности, нейротоксичность.

Комбинация соединений, композиций и способов, описанных в настоящем изобретении, может оказывать свое действие путем модуляции апоптоза или запрограммированной смерти клеток и иных химиотерапевтических механизмов для обеспечения эффективности при раковых клеток. В одном из способов осуществления настоящего изобретения модуляция апоптоза осуществляется с помощью индукции или активации апоптоза. В различных способах осуществления настоящего изобретения введение соединений может быть одновременным или, вместо этого, последовательным.

Таким образом, в настоящем изобретении предложены способы потенциации действия активного средства РАС-1, например, для лечения лимфом, остеосарком или рака молочных желез. Во время апоптоза зимогенная форма прокаспазы-3 активируется с помощью протеолиза с образованием каспазы-3, и эта активная каспаза-3 затем расщепляет большое количество клеточных субстратов, осуществляя программу апоптоза. Поскольку уровни белка прокаспазы-3 повышены в опухолях различных гистологических типов, прямая активация прокаспазы-3 с помощью лекарственных средств может быть высокоэффективной стратегией селективного противоракового лечения.

Некоторые соединения могут усиливать активность прокаспазы-3 и ее способность к самоактивации и индуцировать апоптоз в раковых клетках. РАС-1 (активирующее прокаспазу соединение-1, см. Фиг. 1) повышает активность прокаспазы-3 за счет образования хелатных комплексов с ионами цинка, обладающими ингибирующими свойствами, индуцирует апоптоз в раковых клетках в культуре и обладает эффективностью в многочисленных мышиных моделях опухолей. Было выявлено, что новые комбинации РАС-1 и нескольких других терапевтических средств характеризуются синергической эффективностью при лечении раковых клеток, в особенности лимфомных клеток, остеосаркомных клеток и клеток рака молочной железы, как это описано в настоящем изобретении. Поскольку РАС-1 действует на позднем этапе апоптотического каскада, оно обладает уникальной способностью оказывать синергическое действие в сочетании с широким спектром химиотерапевтических активных средств, как это описано ниже.

Определения

При использовании в настоящем документе перечисленные ниже термины имеют указанные далее значения. Все прочие термины и фразы, используемые в данном описании, имеют свои обычные значения, понятные специалистам в данной области. Эти обычные значения можно найти в технических словарях, например, в Hawley's Condensed Chemical Dictionary 14th Edition, by R.J. Lewis, John Wiley & Sons, New York, N.Y., 2001 (Кратком химическом словаре Хоули, 14-я редакция, под редакцией Р.Дж. Льюиса, издательство "Джон Уайли и сыновья", Нью-Йорк, штат Нью-Йорк, 2001).

Ссылки в описании на "один из способов осуществления", "способ осуществления" и т.д. указывают, что описанный способ осуществления может включать в себя определенный аспект, особенность, структуру, группу или характеристику, однако не обязательно, что каждый из способов осуществления обязательно должен включать в себя этот аспект, особенность, структуру, группу или характеристику. Более того, подобные фразы могут ссылаться на тот же способ осуществления, который упоминается в других частях настоящего описания, однако это не обязательно так. Кроме того, когда определенный аспект, особенность, структура, группа или характеристика описывается в связи с каким-либо способом осуществления, специалист в данной области должен быть способны отразить или связать этот аспект, особенность, структуру, группу или характеристику с другими способами осуществления, независимо от того, описаны ли они явно или нет.

Существительные в единственном числе также включают в себя соответствующие существительные во множественном числе, и наоборот, за исключением случаев, когда из контекста четко следует обратное. Таким образом, термин "соединение" может также подразумевать множество подобных соединений, т.е. под соединением X может подразумеваться множество соединений типа X. Необходимо дополнительно отметить, что элементы формулы изобретения могут быть сформулированы таким образом, чтобы исключить любые вариантные элементы. Таким образом, это утверждение предназначено для того, чтобы служить в качестве антецедентного основания для использования исключительной терминологии, например, "исключительно", "только" и т.п., в связи с перечислением элементов формулы изобретения или использованием "отрицательных" ограничений.

Термин "и/или" означает любой из далее перечисленных вариантов, любую их комбинацию или их всех. Фраза "один или более" легко понятна для специалистов в данной области, в особенности в контексте ее использования. Например, "одна или более замещающая группа на фенильном кольце" может подразумевать от одной до пяти замещающих групп или, например, от одной до четырех, если две его связи уже участвуют в образовании основных структурных связей.

Термины "около" и "приблизительно" могут означать вариацию ±5%, ±10%, ±20% или ±25% относительно указанного далее значения. Например, "около 50%" в некоторых способах осуществления настоящего изобретения может означать вариацию от 45% до 55%. Для целочисленных диапазонов термины "около" и "приблизительно" могут означать вариацию их границ в большую или меньшую сторону на одну или две единицы относительно их указанных значений. Если в данном описании не оговорено иное, в данном документе термины "около" и "приблизительно" могут подразумевать значения, например, весовых процентов, примыкающие к указанным диапазонам, эквивалентные им в контексте функциональности индивидуальных ингредиентов, композиции или способа осуществления.

Опытным специалистам будет понятно, что все числа, включая те, что выражают количества ингредиентов, свойства (например, молекулярную массу), условия реакции и т.д., являются приближенными значениями, и подразумевается, что во всех случаях они необязательно дополнены терминами "около" и "приблизительно". Эти значения могут варьироваться в зависимости от того, каких необходимых свойств пытаются достичь специалисты в данной области при использовании сведений из описания данного изобретения. Также подразумевается, что подобным значениям заведомо присуща изменчивость, автоматически возникающая на основе стандартных отклонений при проведении соответствующих тестовых измерений.

Как будет понятно специалистам в этой области, во всех случаях, особенно в случае предоставления письменного описания, все диапазоны, указанные в настоящем изобретении, также включают в себя любые их возможные поддиапазоны и их комбинации, а также индивидуальные значения, составляющие эти диапазоны, в особенности целочисленные значения. Указанный диапазон (например, весовых процентов или углеводородных групп) включает в себя каждое конкретное значение, целое число, десятичную дробь или член в пределах этого диапазона. Можно легко понять, что любой указанный диапазон в достаточной мере описывает его содержимое, и этот диапазон может быть разбит, по меньшей мере, на равные половины, трети, четверти, пятые доли или десятые доли. В качестве примера, не имеющего ограничительного характера, каждый диапазон, обсуждаемый в настоящем изобретении, может быть легко подразделен на его нижнюю треть, среднюю треть и верхнюю треть, и т.д. Как будет понятно специалистам в этой области науки, все термины, подобные "вплоть до", "по меньшей мере", "больше чем", "меньше чем", "более чем", "или более" и т.п., включают в себя указанные числа, и подобные термины обозначают диапазоны, которые в дальнейшем могут подразделяться на поддиапазоны, как это было обсуждено выше. Аналогичным образом, все соотношения, указанные в настоящем изобретении, также включают с себя все прочие соотношения, попадающие в пределы исходного более широкого соотношения.

Соответственно, конкретные значения, указываемые для радикалов, заместителей и диапазонов, приводятся исключительно в иллюстративных целях, и они не исключают другие определенные значения или иные значения в пределах указанных диапазонов для радикалов и заместителей.

Специалисты в этой области также смогут легко понять, что когда члены сгруппированы вместе неким общим образом, например, в форме группы Маркуша, то изобретение включает в себя не только всю указанную группу в целом, но и каждый член этой группы по отдельности, а также все возможные подгруппы основной группы. Кроме того, во всех отношениях, это изобретение включает в себя не только основную группу, но и основную группу за вычетом одного или нескольких ее членов. Таким образом, это изобретение предусматривает возможность явного исключения одного или нескольких членов из упомянутой в нем группы. Соответственно, оговорки могут применяться к любым из описанных категорий или способов осуществления таким образом, что любой один или любые несколько указанных элементов, видов или способов осуществления могут быть исключены из подобных категорий или воплощений, например, как при использовании в случае явного отрицательного ограничения.

Термин "воздействие/применение" означает соприкосновение или приведение в непосредственную близость или просто сближение, в том числе на клеточном или на молекулярном уровне, например, для достижения физиологической реакции, химической реакции или физического изменения, например, в растворе, в реакционной смеси, in vitro или in vivo.

Термин "одновременно" означает (1) единовременно, или (2) в различное время в рамках единого общего курса лечения.

Термин "последовательно" означает применение одного активного средства, используемого в способе, после которого следует применение другого активного средства. После применения одного активного средства следующее активное средство может быть применено непосредственно сразу после первого, или следующее активное средство может быть применено по истечении эффективного периода времени после применения первого активного средства; под "эффективным периодом времени" в данном случае понимается количество времени, отводимое на получение максимальной пользы от применения первого активного средства.

Термин "эффективное количество" означает количество, эффективное при лечении заболевания, нарушения и/или состояния или для достижения указанного эффекта, например, активации или ингибирования. Например, эффективным количеством может быть количество, эффективно снижающее прогрессию или степень тяжести состояния или симптомов, подвергающихся лечению. Определение терапевтически эффективного количества находится вполне в пределах способностей квалифицированных специалистов. Предполагается, что термин "эффективное количество" включает в себя количество соединения, описанного в настоящем изобретении, или количество комбинации соединений, описанной в настоящем изобретении, которое, например, эффективно при лечении или предотвращении заболевания или нарушения или при лечении симптомов заболевания или нарушения у пациента. Таким образом, "эффективное количество" обычно означает количество, обеспечивающее достижение желаемого эффекта. В одном из способов осуществления настоящего изобретения под эффективным количеством понимается количество активного средства, описанного в настоящем изобретении, которое эффективно, поодиночке или в комбинации с фармацевтическим носителем, после одно- или многодозового воздействия на клетки или организм, например, пациента, в подавлении роста и/или пролиферации, в том числе убийстве, или предотвращении роста гиперпролиферативных клеток. Подобное ингибирование роста или убийство может приводить к увеличению длительности выживания организма, например, пациента, сверх срока, ожидаемого в отсутствие подобного лечения, или к любому улучшению прогноза для него по сравнению с отсутствием подобного лечения.

Термины "лечить" и "лечение" включают в себя (i) предотвращение возникновения заболевания, патологического или медицинского состояния (т.е. профилактика); (ii) подавление заболевания, патологического или медицинского состояния или остановка его развития; (iii) ослабление или полное излечение заболевания, патологического или медицинского состояния; и/или (iv) ослабление