Модулирование экспрессии аполипопротеина с-iii (аросiii) у людей с дефицитом липопротеинлипазы (lpld)

Модулирование экспрессии аполипопротеина с-iii (аросiii) у людей с дефицитом липопротеинлипазы (lpld)

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Перечень последовательностей

Настоящая заявка зарегистрирована вместе с перечнем последовательностей в электронном формате. Перечень последовательностей представлен в виде файла под названием BIOL0218WOSEQ_ST25.txt, созданного 28 января 2014 года, размером 16 Кб. Информация о перечне последовательностей в электронном формате в полном объеме включена в настоящий документ посредством ссылки.

Область техники

В настоящем документе представлены способы, соединения и композиции для снижения экспрессии мРНК и белка аполипопротеина С-III (АроCIII), снижения уровня триглицеридов и повышения уровней липопротеина высокой плотности (HDL) или активности HDL у пациентов с дислипидемией Фредриксона I типа. В настоящем документе представлены также соединения и композиции для применения при лечении дислипидемии Фредриксона I типа или родственных заболеваний.

Уровень техники

Липопротеины представляют собой глобулярные мицеллоподобные частицы, которые состоят из неполярного ядра из ацилглицеринов и холестериновых эфиров, окруженного амфифильной оболочкой из белка, фосфолипида и холестерина. Липопротеины классифицируют на пять широких категорий по их функциональным и физическим свойствам: хиломикроны, липопротеины очень низкой плотности (VLDL), липопротеины средней плотности (IDL), липопротеины низкой плотности (LDL) и липопротеины высокой плотности (HDL). Хиломикроны переносят пищевые липиды из кишечника в ткани. VLDL, IDL и LDL переносят триацилглицерины и холестерин печени к тканям. HDL переносят эндогенный холестерин от тканей к печени.

Аполипопротеин С-III (называемый также АРОС3, АРОС-III, АроCIII и АРО С-III) входит в состав HDL и богатых на триглицериды (TG) липопротеинов. Повышенные уровни АроCIII связаны с повышенными уровнями TG и такими заболеваниями как сердечно-сосудистые заболевания, метаболический синдром, ожирение и диабет (Chan et al., Int J Clin Pract, 2008, 62: 799-809; Onat et at., Atherosclerosis, 2003, 168: 81-89; Mendivil et al., Circulation, 2011, 124: 2065-2072; Mauger et al., J. Lipid Res, 2006. 47: 1212-1218; Chan et al., Clin. Chem, 2002. 278-283; Ooi et al., Clin. Sci, 2008. 114: 611-624; Davidsson et al., J. Lipid Res. 2005. 46: 1999-2006; Sacks et al., Circulation, 2000. 102: 1886-1892; Lee et al., Arterioscler Thromb Vase Biol, 2003.23: 853-858). АроCIII замедляет клиренс богатых на TG липопротеинов путем ингибирования липолиза из-за подавления липопротеинлипазы (LPL) и препятствуя связыванию липопротеина с гликозаминогликановой матрицей клеточной поверхности (Shachter, Curr. Opin. Lipidol, 2001, 12, 297-304). Поскольку АроCIII ингибирует LPL, что приводит к снижению липолиза TG, то стало неожиданностью, что ингибирование АроCIII имеет благоприятный эффект у субъектов с дефицитом LPL (LPLD).

LPLD характеризуется неспособностью пораженных болезнью индивидуумов вырабатывать функционально активную LPL. LPL вырабатывается, преимущественно, в скелетной мускулатуре, жировой ткани и сердечной мышце и выполняет множество, ключевых функций, среди которых катаболизм богатых на TG липопротеинов (например, VLDL) и хиломикронов (СМ). Выделение TG из СМ (и VLDL) в нормальном состоянии защищает от избыточного повышения массы СМ и TG после приема пищи. LPL при LPLD является дисфункциональной, и спустя более 12 часов после приема пищи все еще существует и заметна гиперTG и хиломикронемия.

Для классификации у пациентов первичных (генетических) причин дислипидемии, такой как гипертриглицеридемия, используют систему Фредриксона. Тип I по Федриксону (известный также как LPLD или синдром семейной хиломикронемии (FCS)) обычно обусловлен мутациями либо гена LPL, либо кофактора этого гена АроС-II, что приводит к неспособности пораженных болезнью индивидуумов вырабатывать функционально активную LPL (т.е. LPLD). У пациентов присутствуют мутации, которые являются либо гомозиготными (имеющими одинаковые мутации в каждой аллели), или компаунд-гетерозиготными (имеющими разные мутации в каждой аллели) Распространенность этой болезни составляет приблизительно 1 на 1000000 человек общего населения и гораздо больше в Южной Африке и Восточном Квебеке из-за эффекта основателя.

В настоящее время пациенты с болезнью Фредриксона I типа, FCS, LPLD минимально или вовсе не реагируют на лекарства, понижающие TG, такие как статины, фибраты и никотиновая кислота (Tremblay et al., J Clin Lipidol, 2011, 5: 37-44; Brisson et al., Pharmacogenet Genom, 2010, 20: 742-747). Клиническое ведение пациентов с болезнью Фредриксона I типа, FCS, LPLD состоит, главным образом, в существенном снижении содержания жиров во всех продуктах до значения гораздо менее 20% от общего потребления калорий, а также применения TG средней длины цепи, которые абсорбируются в портальной системе и поэтому напрямую не поступают в плазму. Такой пожизненный диетический режим представляет собой существенную сложность для пациентов. Даже если пациенты соблюдают диету и тщательно наблюдаются в клинике по липидным заболеваниям диетологом и группой врачей, уровни TG зачастую не снижаются ниже порога повышенного риска панкреатита. Недавно в Европе был одобрен продукт генной терапии (Glybera^R) для лечения взрослых пациентов с LPLD, страдающих от тяжелых или многократных приступов панкреатита, несмотря на ограничение потребления жиров. Пациентам, проходившим лечение с Glybera^R необходимо введение иммунодепрессивного лекарства до и после лечения Glybera^R. Glybera^R распространяют только через специализированные центры с опытом лечения LPLD и только специально обученными врачами для обеспечения постоянной безопасности лечения (http://www.uniqure.com/products/glybera/).

Соответственно, все еще существует необходимость в обеспечении пациентов дислипидемией Фредриксона I типа, FCS, LPLD, новыми возможностями лечения. Антисмысловая технология развивается как эффективное средство снижения экспрессии определенных генных продуктов, и может быть подтверждена ее уникальная полезность в ряде терапевтических, диагностических и исследовательских применений для модулирования АроCIII. Авторы настоящего изобретения ранее открыли композиции и способ ингибирования АроCIII при помощи антисмысловых соединений, которые описаны в US 20040208856 (патент США 7598227), US 20060264395 (патент США 7750141), WO 2004/093783 и WO 2012/149495, которые включены в настоящий документ посредством ссылки. Антисмысловой олигонуклеотид, нацеленный на АроCIII, был испытан в I фазе клинических испытаний и показал свою безопасность. В настоящее время этот антисмысловой олигонуклеотид, нацеленный на АроCIII, проходит II фазу клинических испытаний для оценки его эффективности при лечении диабета или гипертриглицеридемии.

Сущность изобретения

В некоторых вариантах реализации изобретения предложен способ лечения, предупреждения, замедления или облегчения дислипидемии Фредриксона I типа, FCS. LPLD, включающий введение животному терапевтически эффективного количества соединения, содержащего специфический ингибитор АроCIII. В некоторых вариантах реализации предложен специфический ингибитор АроCIII для применения при лечении, предупреждении, замедлении или облегчении дислипидемии Фредриксона I типа, FCS, LPLD.

В некоторых вариантах реализации изобретения предложен способ снижения уровней триглицеридов у животного с дислипидемией Фредриксона I типа, FCS, LPLD, включающий введение животному терапевтически эффективного количества соединения, содержащего специфический ингибитор АроCIII.

В некоторых вариантах реализации изобретения предложен способ повышения уровней HDL и/или улучшения отношения TG к HDL у животного с дислипидемией Фредриксона I типа, FCS, LPLD, включающий введение животному терапевтически эффективного количества соединения, содержащего специфический ингибитор АроCIII.

В некоторых вариантах реализации изобретения предложен способ предупреждения, замедления или облегчения сердечно-сосудистого и/или метаболического заболевания, расстройства, патологического состояния или его симптома у животного с дислипидемией Фредриксона I типа, FCS, LPLD, включающий введение животному терапевтически эффективного количества соединения, содержащего специфический ингибитор АроCIII.

В некоторых вариантах реализации изобретения предложен способ предупреждения, замедления или облегчения панкреатита или его симптома у животного с дислипидемией Фредриксона I типа, FCS, LPLD, включающий введение животному терапевтически эффективного количества соединения, содержащего специфический ингибитор АроCIII.

В некоторых вариантах реализации изобретения специфический ингибитор АроCIII представляет собой нуклеиновую кислоту, пептид, антитело, малую молекулу или другой агент, способный подавлять экспрессию АроCIII. В некоторых вариантах реализации нуклеиновая кислота представляет собой антисмысловое соединение. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение представляет собой олигонуклеотид, нацеленный на АроCIII. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид представляет собой модифицированный олигонуклеотид, нацеленный на АроCIII. В некоторых вариантах реализации изобретения модифицированный олигонуклеотид имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований последовательности азотистых оснований SEQ ID NO: 3. В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид состоит из последовательности азотистых оснований SEQ ID NO: 3.

В некоторых вариантах реализации изобретения предложен способ снижения уровней триглицеридов у животного с дислипидемией Фредриксона I типа, FCS, LPLD, включающий введение животному терапевтически эффективного количества соединения, содержащего модифицированный олигонуклеотид, имеющий последовательность SEQ ID NO: 3, при этом модифицированный олигонуклеотид содержит: сегмент гэп, состоящий из 10 связанных дезоксинуклеозидов, сегмент 5'-крыла, состоящий из 5 связанных нуклеозидов, и сегмент 3'-крыла, состоящий из 5 связанных нуклеозидов; при этом сегмент гэп находится непосредственно возле и между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла, причем каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит 2'-O-метоксиэтилсахар, причем каждый цитозин представляет собой 5'-метилцитозин, и каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь.

В некоторых вариантах реализации изобретения предложен способ повышения уровней HDL и/или улучшения отношения TG к HDL у животного с дислипидемией Фредриксона I типа, FCS, LPLD, путем введения животному терапевтически эффективного количества соединения, содержащего модифицированный олигонуклеотид, имеющий последовательность SEQ ID NO: 3, причем модифицированный олигонуклеотид содержит: сегмент гэп, состоящий из 10 связанных дезоксинуклеозидов, сегмент 5'-крыла, состоящий из 5 связанных нуклеозидов, и сегмент 3'-крыла, состоящий из 5 связанных нуклеозидов; при этом сегмент гэп находится непосредственно возле и между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла, причем каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит 2'-O-метоксиэтилсахар, причем каждый цитозин представляет собой 5'-метилцитозин, и каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь.

В некоторых вариантах реализации изобретения предложен способ предупреждения, замедления или облегчения сердечно-сосудистого и/или метаболического заболевания, расстройства, патологического состояния или его симптома у животного с дислипидемией Фредриксона I типа, FCS, LPLD, путем введения животному терапевтически эффективного количества соединения, содержащего модифицированный олигонуклеотид, имеющий последовательность SEQ ID NO: 3, при этом модифицированный олигонуклеотид содержит: сегмент гэп, состоящий из 10 связанных дезоксинуклеозидов, сегмент 5'-крыла, состоящий из 5 связанных нуклеозидов и сегмент 3'-крыла, состоящий из 5 связанных нуклеозидов; при этом сегмент гэп находится непосредственно возле и между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла, причем каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит 2'-O-метоксиэтилсахар, причем каждый цитозин представляет собой 5'-метилцитозин, и каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь.

В некоторых вариантах реализации изобретения предложен способ предупреждения, замедления или облегчения панкреатита или его симптома у животного с дислипидемией Фредриксона I типа, FCS, LPLD, путем введения животному терапевтически эффективного количества соединения, содержащего модифицированный олигонуклеотид, имеющий последовательность SEQ ID NO: 3, при этом модифицированный олигонуклеотид содержит: сегмент гэп, состоящий из 10 связанных дезоксинуклеозидов, сегмент 5'-крыла, состоящий из 5 связанных нуклеозидов и сегмент 3'-крыла, состоящий из 5 связанных нуклеозидов; при этом сегмент гэп находится непосредственно возле и между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла, причем каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит 2'-O-метоксиэтилсахар, причем каждый цитозин представляет собой 5'-метилцитозин, и каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь.

В некоторых вариантах реализации изобретения специфический ингибитор АроCIII представляет собой нуклеиновую кислоту, пептид, антитело, малую молекулу или другой агент, способный подавлять экспрессию АроCIII. В некоторых вариантах реализации нуклеиновая кислота представляет собой антисмысловое соединение, нацеленное на АроCIII. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение представляет собой антисмысловой олигонуклеотид. В некоторых вариантах реализации антисмысловой олигонуклеотид представляет собой модифицированный олигонуклеотид. В некоторых вариантах реализации изобретения модифицированный олигонуклеотид имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований ISIS 304801, AGCTTCTTGTCCAGCTTTAT (SEQ ID NO: 3). В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 75%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 100% комплементарен SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 4.

Подробное описание изобретения

Следует понимать, что и представленное выше общее описание, и следующее подробное описание являются лишь иллюстративными и пояснительными, и они не ограничивают настоящее описание. В настоящем документе использование единственного числа включает множественное число, если специально не указано иное. При использовании в настоящем документе, термин «или» означает «и/или», если не указано иное. Кроме того, использование термина «включая», а также других форм, таких как «включает» и «включенный», не является ограничивающим. Также, такие термины как «элемент» или «компонент» охватывают как элементы и компоненты, содержащие одну единицу, так и элементы и компоненты, которые содержат более одной субъединицы, если специально не указано иное.

Названия разделов, используемые в настоящем документе, предназначены лишь для организационных целей, и их не следует толковать как ограничение описанного объекта изобретения. Все документы или части документов, цитируемые в настоящей заявке, включая, но не ограничиваясь ими, патенты, патентные заявки, статьи, книги и монографии, в явной форме включены в настоящий документ посредством ссылки в отношении фрагментов этих документов, рассматриваемых в настоящем документе, а также в полном объеме.

Определения

При отсутствии конкретных определений, номенклатура, используемая в связи с ними, а также в связи с приемами и методиками аналитической химии, синтетической органической химии, а также медицинской и фармацевтической химии, описанная в настоящем документе, является общеизвестной и общепринятой в данной области техники. Для химического синтеза и химического анализа могут быть использованы стандартные методики. Где это допустимо, все патенты, заявки, опубликованные заявки и другие публикации, номера доступа GENBANK и связанная информация о последовательностях, которую можно получить из таких баз данных как Национальный центр биотехнологической информации (NCBI), а также другие данные, упомянутые в тексте настоящего описания, включены в настоящий документ посредством ссылки в отношении фрагментов указанных документов, рассматриваемых в настоящем документе, а также в полном объеме.

Если не указано иное, следующие термины имеют следующие значения:

«2'-O-метоксиэтил» (также 2'-МОЕ, 2'-O(СН₂)₂-ОСН₃ и 2'-O-(2-метоксизтил» относится к О-метоксиэтил-модификации в 2'-положении фуранозного кольца. Сахар с 2'-O-метоксиэтил-модификацией представляет собой модифицированный сахар.

«2'-O-метоксиэтилнуклеотид» обозначает нуклеотид, включающий модифицированный 2'-O-метоксиэтилсахарный фрагмент.

«3'-сайт-мишень» относится к нуклеотиду целевой нуклеиновой кислоты, который комплементарен 3'-основному нуклеотиду конкретного антисмыслового соединения.

«5'-сайт-мишень» относится к нуклеотиду целевой нуклеиновой кислоты, который комплементарен 5'-основному нуклеотиду конкретного антисмыслового соединения.

«5-метилцитозин» обозначает цитозин, модифицированный метильной группой, присоединенной в 5'-положении. 5-метилцитозин представляет собой модифицированное азотистое основание.

«Около» обозначает в пределах ±10% от значения. Например, если указано, что «маркер может быть увеличен на около 50%», то подразумевается, что маркер может быть увеличен на значение в диапазоне 45%-55%.

«Активный фармацевтический агент» обозначает вещество или вещества в фармацевтической композиции, которые обеспечивают благоприятный терапевтический эффект при введении индивидууму. Например, в некоторых вариантах реализации изобретения антисмысловой олигонуклеотид, нацеленный на АроCIII, представляет собой активный фармацевтический агент.

«Активная область мишени» или «область-мишень» означает область, на которую нацелено одно или более активных антисмысловых соединений. «Активные антисмысловые соединения» обозначают антисмысловые соединения, которые снижают уровни целевой нуклеиновой кислоты или уровни белка.

«Введенные одновременно» относится к совместному введению двух агентов любым способом, при котором фармакологическое действие обоих средств проявляется у пациента одновременно. При одновременном введении не требуется, чтобы оба агенты были введены в одной фармацевтической композиции, в одной лекарственной форме или одним способом введения. Действие обоих средств не обязательно должно проявляться одновременно. Их действие должно лишь перекрываться в течение определенного периода времени, и оно не обязательно должно иметь одинаковую протяженность по времени.

«Введение» обозначает предоставление фармацевтического агента индивидууму и включает, но не ограничивается этим, введение медицинским специалистом или самостоятельное введение.

«Агент» обозначает активное вещество, которое может обеспечивать благоприятный терапевтический эффект при введении животному. «Первый агент» обозначает терапевтическое соединение согласно настоящему изобретению. Например, первый агент может быть антисмысловым олигонуклеотидом, нацеленным на АроCIII. «Второй агент» обозначает второе терапевтическое соединение согласно настоящему изобретению (например, второй антисмысловой олигонуклеотид, нацеленный на АроCIII) и/или не-АроCIII терапевтическое соединение.

«Облегчение» относится к снижению по меньшей мере одного показателя, признака или симптома ассоциированного заболевания, расстройства или патологического состояния. Тяжесть показателей может быть определена субъективными или объективными оценками, известными специалистам в данной области.

«Животное» относится к человеку или животному, не являющемуся человеком, включая, но не ограничиваясь ими, мышей, крыс, кроликов, собак, котов, свиней и приматов, не являющихся человеком, включая, но не ограничиваясь ими, обезьян и шимпанзе.

«Антисмысловая активность» обозначает любую обнаруживаемую или измеримую активность, которая относится к гибридизации антисмыслового соединения с его целевой нуклеиновой кислотой. В некоторых вариантах реализации антисмысловая активность представляет собой снижение количества или экспрессии целевой нуклеиновой кислоты или белка, кодируемого такой целевой нуклеиновой кислотой.

«Антисмысловое соединение» обозначает олигомерное соединение, которое способно подвергаться гибридизации с целевой нуклеиновой кислотой путем образования водородных связей. Примеры антисмысловых соединений включают одноцепочечные и двухцепочечные соединения, такие как антисмысловые олигонуклеотиды, миРНК, кшРНК, оцРНК и замещающие соединения.

«Антисмысловое ингибирование» обозначает снижение уровней целевой нуклеиновой кислоты или уровней белка-мишени в присутствии антисмыслового соединения, комплементарного целевой нуклеиновой кислоте, по сравнению с уровнями целевой нуклеиновой кислоты или уровнями белка-мишени в отсутствие антисмыслового соединения.

«Антисмысловой олигонуклеотид» обозначает одноцепочечный олигонуклеотид, имеющий последовательность азотистых оснований, которая допускает гибридизацию с соответствующей областью или сегментом целевой нуклеиновой кислоты. При использовании в настоящем документе термин «антисмысловой олигонуклеотид» включает фармацевтически приемлемые производные соединений, описанных в настоящем документе.

«АроА5», «аполипопротеин А-V» или «АроА-V» обозначает последовательность любой нуклеиновой кислоты или белка, кодирующую АроА5.

«АроСII», «аполипопротеин С-II» или «АроС2» обозначает последовательность любой нуклеиновой кислоты или белка, кодирующую АроСII. Белок АроCII является компонентом хиломикронов и частиц VLDL, и он активирует LPL для гидролиза TG.

«АроCIII», «аполипопротеин С-III» или «АроС3» обозначает последовательность любой нуклеиновой кислоты или белка, кодирующую АроCIII. Например, в некоторых вариантах реализации АроCIII включает последовательность ДНК, кодирующую АроCIII, последовательность РНК, транскрибированную из ДНК, кодирующей АроCIII (включая геномную ДНК, содержащую интроны и экзоны), последовательность мРНК, кодирующую АроCIII, или пептидную последовательность, кодирующую АроCIII.

«Специфический ингибитор АроCIII» относится к любому агенту, способному специфически ингибировать экспрессию мРНК АроCIII и/или экспрессию или активность белка АроCIII на молекулярном уровне. Например, специфические ингибиторы АроCIII включают нуклеиновые кислоты (в том числе антисмысловые соединения), пептиды, антитела, малые молекулы и другие агенты, способные ингибировать экспрессию мРНК АроCIII и/или белка АроCIII. В некоторых вариантах реализации нуклеиновая кислота представляет собой антисмысловое соединение. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение представляет собой олигонуклеотид, нацеленный на АроCIII. В некоторых вариантах реализации изобретения олигонуклеотид, нацеленный на АроCIII, представляет собой модифицированный олигонуклеотид, нацеленный на АроCIII. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид, нацеленный на АроCIII, имеет последовательность, представленную в SEQ ID NO: 3, или другую последовательность, например, описанную в патенте США 7598227, в патенте США 7750141, публикации РСТ WO 2004/093783 или WO 2012/149495, которые включены в настоящий документ посредством ссылки. В некоторых вариантах реализации изобретения за счет специфического модулирования уровня мРНК АроCIII и/или экспрессии белка АроCIII, специфические ингибиторы АроCIII могут влиять на компоненты липогенного пути. Точно так же, в некоторых вариантах реализации специфические ингибиторы АроCIII могут влиять на другие молекулярные процессы у животного.

«мРНК АроCIII» обозначает мРНК, кодирующую белок АроCIII.

«Белок АроCIII» обозначает любую белковую последовательность, кодирующую АроCIII.

«Атеросклероз» обозначает затвердевание артерий, поражающее крупные и средние артерии, и характеризуется наличием жировых отложений. Жировые отложения называют «атеромами» или «бляшками», которые состоят, в основном, из холестерина и других жиров, кальция и рубцовой ткани, и они повреждают выстилку артерий.

«Бициклический сахар» обозначает фуранозное кольцо, модифицированное мостиковым присоединением двух не геминальных кольцевых атомов. Бициклический сахар представляет собой модифицированный сахар.

«Бициклическая нуклеиновая кислота» или «БцНА» относится к нуклеозиду или нуклеотиду, в котором фуранозная часть нуклеозида или нуклеотида содержит мостик, связывающий два атома углерода в фуранозном кольце, образуя, таким образом, бициклическую кольцевую систему.

«Кэп-структура» или «концевой кэп-фрагмент» обозначает химические модификации, которые были внедрены в любой конец антисмыслового соединения.

«Сердечно-сосудистое заболевание» или «сердечно-сосудистое расстройство» относится к группе патологических состояний, связанных с сердцем, кровеносными сосудами или системе кровообращения. Примеры сердечно-сосудистых заболеваний включают, но не ограничиваются ими, аневризму, стенокардию, аритмию, атеросклероз, цереброваскулярное заболевание (инсульт), коронарную болезнь сердца, гипертонию, дислипидемию, гиперлипидемию, гипертриглицеридемию и гиперхолестеринемию.

«Химически отличная область» относится к области антисмыслового соединения, которая каким-либо образом химически отличается от другой области того же антисмыслового соединения. Например, область, имеющая 2'-O-метоксиэтилнуклеотиды является химически отличной от области, имеющей нуклеотиды без 2'-O-метоксиэтил-модификаций.

«Химерное антисмысловое соединение» означает антисмысловое соединение, которое имеет по меньшей мере две химически отличные области.

«Холестерин» представляет собой молекулу стерина, содержащуюся в клеточных мембранах всех животных тканей. В плазме крови животных холестерин транспортируется липопротеинами, содержащими липопротеин очень низкой плотности (VLDL), липопротеин средней плотности (IDL), липопротеин низкой плотности (LDL) и липопротеин высокой плотности (HDL). «Холестерин в плазме» относится к сумме эстерифицированного и/или неэстерифицированного холестерина всех липопротеинов (VDL, IDL, LDL, HDL), содержащегося в плазме или сыворотке.

«Ингибитор абсорбции холестерина» обозначает агент, который подавляет абсорбцию экзогенного холестерина, получаемого с пищей.

«Совместное введение» обозначает введение индивидууму двух или более агентов. Два или более агентов могут быть в одной фармацевтической композиции или могут быть в отдельных фармацевтических композициях. Каждый из двух или более агентов может быть введен таким же или другим способом введения. Совместное введение включает параллельное или последовательное введение.

«Комплементарность» обозначает способность спаривания между азотистыми основаниями первой нуклеиновой кислоты и второй нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах реализации изобретения комплементарность между первой и второй нуклеиновой кислотой может быть между двумя цепочками ДНК, между двумя цепочками РНК или между цепочками ДНК и PHK. B некоторых вариантах реализации некоторые азотистые основания в одной цепочке соответствуют связанному водородной связью комплементарному основанию в другой цепочке. В некоторых вариантах реализации все азотистые основания в одной цепочке соответствуют связанному водородной связью комплементарному основанию в другой цепочке. В некоторых вариантах реализации первая нуклеиновая кислота представляет собой антисмысловое соединение, а вторая нуклеиновая кислота представляет собой целевую нуклеиновую кислоту. В некоторых вариантах реализации антисмысловой олигонуклеотид представляет собой первую нуклеиновую кислоту, а целевая нуклеиновая кислота представляет собой вторую нуклеиновую кислоту.

«Смежные азотистые основания» обозначает азотистые основания, расположенные непосредственно рядом друг с другом.

«Стерически затрудненный этил» или «cEt» относится к бициклическому нуклеозиду, имеющему радикал фуранозного сахара, который содержит метил(метиленокси)(4'-СН(СН₃)-O-2')-мостик между 4' и 2' атомами углерода.

«Перекрестно реагирующее» обозначает олигомерное соединение, которое нацелено на одну последовательность нуклеиновой кислоты, может гибридизоваться с другой последовательностью нуклеиновой кислоты. Например, в некоторых случаях антисмысловой олигонуклеотид, нацеленный на человеческий АроCIII, может перекрестно реагировать с мышиным АроCIII. При этом перекрестное реагирование олигомерного соединения с последовательностью нуклеиновой кислоты, отличной от предназначенной цели, зависит от степени комплементарности соединения с последовательностью нецелевой нуклеиновой кислоты. Чем выше комплементарность между олигомерным соединением и нецелевой нуклеиновой кислотой, тем более вероятно олигомерное соединение будет перекрестно реагировать с этой нуклеиновой кислотой.

«Курс лечения» обозначает способ, который восстанавливает здоровье или представляет собой предписанное лечение болезни.

«Коронарная болезнь сердца (КБС)» означает сужение мелких кровяных сосудов, которые поставляют кровь и кислород в сердце, что зачастую приводит к атеросклерозу.

«Дезоксирибонуклеотид» обозначает нуклеотид, имеющий водород в 2' положении сахарной части нуклеотида. Дезоксирибонуклеотиды могут быть модифицированы любым из множества заместителей.

«Сахарный диабет» или «диабет» представляет собой синдром, характеризующийся нарушенным метаболизмом и патологически высоким содержанием сахара в крови (гипергликемией) из-за недостаточного содержания инсулина или сниженной чувствительности к инсулину. Характерные симптомы представляют собой избыточное выделение мочи (полиурия) из-за высокого содержания глюкозы в крови, избыточную жажду и повышенное потребление жидкости (полидипсия) в попытке компенсировать усиленное мочевыделение, расплывчатое зрение из-за того, что высокое содержание глюкозы в крови влияет на оптические свойства глаз, необъяснимую потерю веса и летаргию.

«Диабетическая дислипидемия» или «диабет 2 типа с дислипидемией» означает состояние, характеризующееся диабетом 2 типа, сниженным содержанием HDL-C, повышенным уровнем триглицеридов и повышенным уровнем мелких плотных частиц LDL.

«Разбавитель» обозначает ингредиент в композиции, которые не обладает фармакологической активностью, но является фармацевтически необходимым или желательным. Например, разбавитель в композиции для инъекций может быть жидкостью, например, солевым раствором.

«Дислипидемия» относится к нарушению метаболизма липидов и/или липопротеинов, включая избыточную выработку или дефицит липидов и/или липопротеинов. Дислипидемия может проявляться в повышении содержания липидов, таких как хиломикрон, холестерин и триглицериды, а также липопротеинов, таких как холестерин липопротеинов низкой плотности (LDL). Пример дислипидемии представляет собой хиломикронемия или гипертриглицеридемия.

«Лекарственная форма» означает форму, в которой представлен фармацевтический агент, например, пилюлю, таблетку или другую лекарственную форму, известную в данной области техники. В некоторых вариантах реализации изобретения лекарственная форма представляет собой ампулу, содержащую лиофилизированный антисмысловой олигонуклеотид. В некоторых вариантах реализации лекарственная форма представляет собой ампулу, содержащую восстановленный антисмысловой олигонуклеотид.

«Доза» обозначает определенное количество фармацевтического агента, обеспечиваемое при разовом введении или в течение определенного периода времени. В некоторых вариантах реализации доза может быть введена одним, двумя или более болюсами, таблетками или инъекциями. Например, в некоторых вариантах реализации в которых желательно подкожное введение, для требуемой дозы необходим объем который трудно ввести за одну инъекцию, поэтому можно использовать две или более инъекций для достижения требуемой дозы. В некоторых вариантах реализации фармацевтический агент вводят инфузией в течение продолжительного периода времени или непрерывно. Дозы могут быть определены как количество фармацевтического агента в час, день, неделю или месяц. Дозы также могут быть указаны в мг/кг или г/кг.

«Эффективное количество» или «терапевтически эффективное количество» обозначает количество активного фармацевтического агента, достаточное для достижения желаемого физиологического результата у индивидуума, нуждающегося в таком агенте. Эффективное количество может варьироваться у различных индивидуумов в зависимости от состояния здоровья и физического состояния индивидуума, подлежащего лечению, таксономической группы индивидуумов, подлежащих лечению, состава композиции, оценки медицинского состояния индивидуума и других релевантных факторов.

«Фибраты» представляют собой агонисты рецептора, активируемого пролифератором пероксисом, α (PPAR-α), которые действуют через факторы транскрипции, регулирующие различные стадии метаболизма липидов и липопротеинов. Взаимодействуя с PPAR-α, фибраты влияют на различные кофакторы и регулируют генную экспрессию. В итоге фибраты эффективно снижают уровень TG в крови натощак, а также постпрандиальный уровень TG и концентрацию ремнантных частиц TRL. Фибраты также обладают слабым эффектом понижения LDL-C и повышения HDL-C. Снижение экспрессии и уровней АроС-III представляет собой закономерный эффект агонистов PPAR-α (Hertz et al. J Biol Chem, 1995, 270(22): 13470-13475). При лечении метаболического синдрома фибратами было описано 36% снижение уровней АроС-III в плазме (Watts et al. Diabetes, 2003, 52: 803-811). Однако фибраты были неэффективными при лечении LPLD субъектов с гипертриглицеридемией.

Систему «Фредриксона» используют для классификации первичных (генетических) причин дислипидемии на несколько подгрупп или типов. Типы дислипидемии, которые могут быть восприимчивы к лечению при помощи соединений, описанных в настоящем документе, включают, но не ограничиваются ими, дислипидемию Фредриксона I типа, FCS, LPLD.

«Болезнь Фредриксона типа I» известна также как «дефицит липопротеинлипазы», «LPLD», «синдром семейной хиломикронемии» или «FCS» и существует в нескольких формах: тип 1а (известный также как синдром Бюргера-Грютца) представляет собой дефицит липопротеинлипазы, обычно из-за недостатка LPL или измененного АроС-II; тип Ib (известный также как дефицит семейного апопротеина СП) представляет собой патологическое состояние, обусловленное недостатком активатора липопротеинлипазы, апопротеина С-II; и тип Ic представляет собой хиломикронемию в результате циркулирующего ингибитора липопротеинлипазы. Тип I представляет собой редко» расстройство, которое обычно встречается в детстве. Оно характеризуется значительным увеличением хиломикронов и чрезвычайно повышенными уровнями TG (которые всегда достигают значений гораздо выше 1000 мг/дл и нередко поднимаются до 10000 мг/дл или более) с эпизодами боли в животе, рецидивирующим острым панкреатитом, сыпной кожной ксантомой и гепатоспленомегалией. У пациентов редко развивается атеросклероз, возможно из-за того, что частицы липопротеина в их плазме слишком крупные для вхождения в артериальную интиму (Nordestgaard et al., J Lipid Res, 1988, 29: 1491-1500; Nordestgaard et al., Arteriosclerosis, 1988, 8: 421-428). Тип I обычно обусловлен мутациями либо гена LPL, либо кофактора этого гена АроС-II, что приводи ! к неспособности пораженных болезнью индивидуумов вырабатывать достаточно функционально активный LPL. Пациенты являются либо гомозиготными для таких мутаций, либо компаунд-гетерозиготными. Болезнь Фредриксона типа I также может быть обусловлена мутациями в GPIHBP1, АРОА5, LMF1 или других генах, что приводит к дисфункциональности LPL. Brunzell, в: Pagon RA, Adam MP, Bird TD, Dolan CR, Fong CT, Stephens K, ред. GeneReviews™ [Интернет]. Сиэтл (штат Вашингтон): Университет Вашингтона, Сиэтл; 1993-2013. 12 окт. 1999 [обновлено 15 дек. 2011]. Кроме того, в некоторых случаях болезнь Фредриксона типа I может быть вызвана наличием ингибиторов LPL (например, анти-LPL антител) в организме индивидуума, что приводит к дисфункциональности LPL. Распространенность болезни Фредриксона типа I составляет приблизительно 1 на 1000000 человек общего населения и гораздо больше в Южной Африке и Восточном Квебеке из-за эффекта основателя. Пациенты минимально или совсем не реагируют на TG-понижающие лекарства (Tremblay et al., J Clin Lipidol, 2011, 5: 37-44; Brisson et al., Pharmacogenet Genom, 2010, 20: 742-747), и поэтому применяют ограничение потребления жиров до 20 гр