Способы и композиции, которые обеспечивают модуляцию иммунных ответов, связанных с введением биофармацевтического лекарственного средства

Способы и композиции, которые обеспечивают модуляцию иммунных ответов, связанных с введением биофармацевтического лекарственного средства

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к способам и композициям, которые обеспечивают модуляцию иммунных ответов, связанных с введением биофармацевтического лекарственного средства.

Предшествующий уровень техники

Вследствие многочисленных причин, таких как размер молекулы, многие современные лекарственные средства, такие как биофармацевтические препараты, являются непригодными для перорального введения. Вместо этого, они должны вводиться инвазивно либо во внесосудистое пространство, например, подкожно (п.к.), внутримышечно (в.м.), либо непосредственно в сосудистую систему, например, внутривенно (в.в.). Из данных вариантов, подкожный путь введения обычно является наиболее предпочтительным. Одна из главных причин этого заключается в том, что это дает возможность самостоятельного введения лекарственного средства пациентами, что особенно актуально в случае хронической терапии. Кроме того, данный путь является менее инвазивным по сравнению с внутривенным введением и, соответственно, связанные с ним риски, как правило, ниже, как например, в случае непреднамеренного введения в недостаточных санитарно-гигиенических условиях. Подкожное введение является удобным несмотря на то, что частичная резорбция из подкожного пространства и низкая биодоступность, как правило, требуют увеличения дозы, которое приводит к увеличению затрат на лечение.

В дополнение к функциям регуляции и чувствительности, главной функцией кожи является защита. Она действует как барьер против механических нагрузок, но также и как первая линия защиты индивидуума от микроорганизмов, что доказано увеличением риска инфекции/воспаления в случае поврежденной кожи. Поскольку исключительно механической функции может быть недостаточно, дополнительными механизмами химической защиты против патогенных микроорганизмов служат рН и, на некоторых участках, протеазы. Одним из важных, высокоэффективных механизмов защиты является усиленный контроль за тканью со стороны иммунной системы. В то время как физиологически является желательным обнаружение патогенов, распознавание биофармацевтических препаратов иммунной системой аналогично патогенным микроорганизмам в большинстве случаев является нежелательной. Таким образом, усиление иммунного контроля обосновывает второй ключевой недостаток подкожного введения биофармацевтических препаратов, а именно - нежелательную иммуногенность, в дополнение к увеличению затрат, являющихся не только результатом применения большего количества препарата, но и затраты больших усилий для производства и разработки продукции данного класса. Такая нежелательная иммуногенность может привести к многочисленным последствиям. Это может привести к снижению эффективности, повышенному клиренсу из кровотока или служить спусковым механизмом для потенциально угрожающих жизни анафилактических реакций. Поскольку снижение эффективности может быть замечено после длительного периода, это может также означать лишние затраты для системы здравоохранения в связи с высокой ценой продукции данного класса. С точки зрения пациента, как стороны, заинтересованной в получении медицинской помощи, ограниченная биодоступность в сочетании с рисками, такими как иммуногенность, представляют серьезную проблему.

Поскольку факторы риска возникновения иммуногенности, связанные с пациентом, такие как генетическая предрасположенность, являются недостаточно понятными и, соответственно, трудно контролируемыми, контроль и оптимизация факторов риска, связанных с продуктом, являются единственной возможностью для пациентов в полной мере воспользоваться всеми преимуществами современных методов лечения, таких как биологические препараты, в особенности потому, что они назначаются только в случае, когда всех другие способы терапии были неудачны, также и вследствие их высокой стоимости.

Желательная модуляция в данном контексте в большинстве случаев может означать нацеленность на снижение иммуногенности, поскольку в большинстве случаев лекарственные средства, потенциально распознаваемые иммунной системой, включая последующее образование против них антител, являются полностью эффективными и безопасными только тогда, когда такой иммунный ответ отсутствует. С другой стороны, существуют методы лечения, которые специально направлены на вызов соответствующего иммунного ответа для устранения или инактивации намеченной мишени. Соответствующей мишенью может быть чужеродный белок, который должен быть распознан/нейтрализован.

Во всех этих случаях может быть желательным дальнейшее увеличение намеченного иммунного ответа на препарат, и в таких случаях может оказаться полезным наличие лимонной кислоты в растворе для введения или на предшествующих стадиях производства.

Композиции существующего уровня техники, например, Humira®, используемая как композиция против ФНО-альфа (против-ФНОα) антител адалимубаб, включающие в себя кроме того фосфат, а также лимонную кислоту в качестве буферного вещества, отвечают требованиям по переносимости введения, стабильности биофармацевтического лекарственного препарата и сроку годности.

Однако указанные лекарственные формы имеют ряд существенных недостатков. Один из недостатков состоит в том, что многие биофармацевтические препараты при подкожном введении вызывают нежелательную иммуногенность, как описано выше. Иные белковые примеси, вследствие их антигенных свойств, которые трудно обнаружить аналитически, также могут вызвать иммунологические ответы в организме человека. Более того, белки животного происхождения могут вызвать иммунологические ответы в организме человека из-за своих видоспецифических свойств в целом. Даже если риск таких ответов при современном уровне техники методов производства достаточно низок, он может накапливаться с течением времени, в частности, при хроническом повторном применении таких лекарственных средств.

Этого, в частности, следует опасаться в случае подкожного применения, поскольку выведение и распространение посредством кровотока намного медленнее в сравнении с внутривенным применением. Подходящая композиция, следовательно, будет способствовать снижению иммуногенности, вызванной лекарственным средством, обеспечивая экономически более эффективное лекарственное средство, или увеличению иммуногенности, вызванной лекарственным средством в случае, если данная реакция предполагается в качестве профилактического или терапевтического вмешательства.

Проблемой, лежащей в основе настоящего изобретения, является предоставление композиции для биофармацевтических лекарственных средств, которая не обнаруживает вышеописанных недостатков до сих пор известных композиций, нацеленной на низкую иммуногенность или приводящей к повышенной иммунной реакции, если это желательно. Она, в частности, должна быть пригодна для самостоятельного применения пациентами или обученным медицинским персоналом и должна характеризоваться возможностью уменьшать или увеличивать иммуногенность в зависимости от медицинской ситуации и/или в то же время избегать нежелательного раздражения кожи и/или боли в месте инъекции, часто встречающихся при самостоятельном или ином применении препарата путем инъекции.

Таким образом, необходимо предоставить подходящие фармацевтические композиции для парентерального, в частности, подкожного введения/инъекции.

Эта проблема решается посредством вариантов осуществления, описанных в формуле настоящего изобретения. Способ настоящего изобретения дает преимущества в подготовке композиций для уменьшения или увеличения иммуногенности биофармацевтических лекарственных средств, описанных в настоящем описании. Изобретение основано на неожиданном наблюдении, что иммунный ответ может модулироваться посредством выбора походящей композиции, содержащей гександиовую кислоту и/или подходящий уровень лимонной кислоты. Это может быть особенно желательно для лекарственных средств, потенциально распознаваемых иммунной системой. Это делает композиции настоящего изобретения подходящими и преимущественными для применения в готовых к использованию шприцах и комплектах, предоставляемых, например, для домашнего использования.

Краткое содержание сущности изобретения

Прежде подробного описания изобретения, следует понимать, что настоящее изобретение не ограничивается конкретными составными частями описанных устройств или стадий производства описанного способа, поскольку такие устройства и способы могут различаться. Следует также понимать, что терминология используется в настоящем документе с целью описания только конкретных вариантов осуществления и не ограничивается этим. Следует отметить, что, как используется в описании и прилагаемой формуле изобретения, формы единственного числа включают ссылки в единственном и/или множественном числе, если контекст явно не предписывает иное. Более того, следует понимать, что в случае, если даны диапазоны параметров, которые разделены числовыми значениями, диапазоны подразумевают включение данных граничных значений.

В первом аспекте, изобретение предоставляет способ получения фармацевтической композиции, содержащей биофармацевтическое лекарственное средство, причем способ обеспечивает модуляцию иммунных ответов, связанных с ее введением. Указанный способ включает в себя стадии:

(i) предоставление буфера, содержащего

гександиовую кислоту или, по меньшей мере, одну ее соль и/или

лимонную кислоту или, по меньшей мере, одну ее соль

(ii) контактирование данного буфера с биофармацевтическим лекарственным средством

(iii) необязательно лиофилизацию композиции и

(iv) получение композиции или суспензии (ii) и/или лиофилизированной композиции (iii).

Гександиовая кислота представляет собой соединение карбоновой кислоты, которое также называют адипиновой кислотой, 1,4-бутандикарбоновой кислотой, 1,6-гександиовой кислотой, ацифлоктином, ацинеттеном, адипиновой кислотой, октафторгександиовой кислотой или расплавленной адипиновой кислотой. Адипиновая кислота имеет молекулярную формулу C₆H₁₀O₄ и молекулярную массу 146,1 г/моль. Термины "адипиновая кислота" и "гександиовая кислота" используются взаимозаменяемо в данном документе.

В соответствии с еще одним аспектом изобретения, предоставлен способ применения гександиовой кислоты или, по меньшей мере, одной ее соли, и/или лимонной кислоты или, по меньшей мере, одной ее соли, причем способ позволяет модулировать иммуногенность фармацевтической композиции, содержащейбиофармацевтическое лекарственное средство.

В соответствии с еще одним аспектом изобретения, предоставлена фармацевтическая композиция, которая обеспечивает модуляцию иммунных ответов, относящихся к ее введению. Указанная лекарственная форма содержит биофармацевтическое лекарственное средство и

гександиовую кислоту или, по меньшей мере, одну ее соль, и/или

лимонную кислоту или, по меньшей мере, одну ее соль,

или композиция является получаемой посредством обсужденного выше способа.

В соответствии с настоящим изобретением, термин "фармацевтическая композиция" относится к любой композиции, которая является подходящей для введения пациенту и включает в себя лекарственное средство, которое проявляет терапевтический и/или диагностический эффект. Такая "фармацевтическая композиция" предпочтительно является композицией для доставки лекарственного средства.

В соответствии с еще одним аспектом изобретения, предоставлен способ модулирования иммунных ответов, относящихся к введению фармацевтической композиции. Указанный способ включает в себя стадии адаптации в буфере, содержащемся в указанной лекарственной форме, концентрирования

гександиовой кислоты или, по меньшей мере, одной ее соли, и/или

лимонной кислоты или, по меньшей мере, одной ее соли.

Как использовано в настоящем документе, термин "иммуногенность" и/или "иммуногенный" и/или "степень иммуногенности" должен быть понят в показателях потенциала молекулы, введенной субъекту посредством инъекции, быть распознанной иммунной системой, включая последующие реакции, ожидаемые или неожидаемые, такие как образование антител против молекулы, т.е. быть причиной/вызывать ответ, влияющий на иммунную систему субъекта.

Как использовано в настоящем документе, термин "модуляция иммунных реакций" следует понимать как увеличение или уменьшение иммуногенности, связанной с введением данной композиции. Хотя во многих случаях, снижение иммуногенности может быть желательным для того, чтобы повысить уступчивость пациентов и снизить вредные побочные эффекты, увеличение иммуногенности может быть желательным в других случаях.

Термин "пониженная иммуногенность", используемый в настоящем документе, относится к композиции, выполненной с включением в себя, по меньшей мере, одной биофармацевтической молекулы, которая при введении пациенту, например, подкожно, будет причиной/вызовет иммунный ответ, который не является существенно сильнее иммунного ответа, индуцированного посредством исходной молекулы, обозначенной, как по существу, не являющейся иммуногенной.

Как использовано в настоящем документе, термин "биофармацевтическое лекарственное средство" будет включать любую терапевтическую или диагностическую молекулу, полученную из биологического или биотехнологического источника или химически синтезированную как эквивалент продукции указанного источника, например, белок, пептид, нуклеиновую кислоту, иммуноглобулин, полисахарид, клеточный продукт, растительный экстракт, экстракт животного происхождения, рекомбинантный белок или их комбинации. Обычно биофармацевтическое лекарственное средство представляет собой активный ингредиент биофармацевтического препарата. Термины "лекарственное средство" и "соединение" используются взаимозаменяемо в данном документе и предназначены для обозначения агента(агентов) и/или медикамента(медикаментов), применяемых для диагностики, профилактики или лечения симптомов заболевания, физического или психического состояния, травмы или инфекции.

Термин "биодоступность" относится к степени или величине, в которых лекарственное средство или другое вещество поглощается или становится доступным на участке физиологической активности после введения. Биодоступность макромолекулы может быть проанализирована in vivo посредством фармакокинетических способов, известных в данной области техники.

Подходящие анализы для оценки иммуногенности хорошо известны в технике и включают качественные и полуколичественные реакции связывания, нейтрализации, и подтверждающие анализы (иммуно-, а также иммунохроматографические тесты) для измерения антител к лекарственному средству (ADA). Дальнейшие анализы включают в себя качественные анализы на определение общего количества антител (скрининг и титр), подтверждающего анализа (специфического) посредством применения ИФА, ЭХЛ, РИА и разновидности проточной цитометрии (в том числе кислотной диссоциации "AD" и твердофазной экстракции "SPEAD" и "BEAD" анализы повышенной толерантности к лекарственному средству). Аналитические тесты на клеточной основе для обнаружения нейтрализующих антител и анализа токсикокинетики для анализа крупных молекул также хорошо известны в технике.

Термины "субъект" или "человек", или "животное", или "пациент", или "млекопитающее" означают любой субъект, в частности, млекопитающее, для которого желательны диагноз, прогноз, профилактика или терапия. К "млекопитающим", для назначения лечения, относится к любое животное, классифицируемое как млекопитающее, включая, но не ограничиваясь этим, человека, домашних и сельскохозяйственных животных, а также содержащихся в зоопарке, спортивных или домашних животных, таких как собаки, лошади, кошки, коровы и тому подобное. Предпочтительно млекопитающее представляет собой человека.

В процессе экспериментов, проводимых в пределах объема настоящего изобретения, были обнаружены благоприятные свойства композиции, забуференной гександиовой кислотой, включающие в себя неожиданно хорошую переносимость/совместимость у кроликов после подкожной инъекции и пониженный клиренс в сравнении с доступными для приобретения препаратами и эталонными композициями после одной недели дозирования. Таким образом, как показано в примерах 1 и 2, возможно оказывать воздействие на иммуногенность путем выбора соответствующей концентрации гександиовой кислоты в композиции или применяемом растворе. Это может быть особенно желательно для лекарственных средств, потенциально распознаваемых иммунной системой.

На иммуногенность фармацевтических композиций, содержащих биофармацевтические лекарственные средства, влияют многие факторы, включая структурные особенности (изменение последовательности и гликозилирование), условия хранения (денатурация или агрегация, вызванные окислением), загрязняющие вещества или примеси в препарате, доза и длительность лечения, а также путь введения, подходящая композиция и генетические особенности пациентов. Клинические проявления были изложены в предыдущем разделе.

Как описано детально в экспериментальной части, изобретатели неожиданно обнаружили, что композиция, включающая в себя гександиовую кислоту, характеризуется сниженным иммунным ответом при подкожной инъекции у кроликов, сравнимым с инъекцией композиции, содержащей лимонную кислоту. В то же время, изобретатели неожиданно обнаружили, что композиция, которая имеет пониженное содержание или по существу не содержит лимонной кислоты или ее соли, характеризуется сниженным иммунным ответом при подкожной инъекции у кроликов. Последнее особенно поразительно, потому что, как правило, малые молекулы, подобные органическим кислотам, не вызывают иммунного ответа. Вне связи с теорией, авторы изобретения утверждают, что лимонная кислота или ее соли могут быть иммуногенными как таковые, или играют роль в развитии иммунного ответа.

Таким образом, разумно ожидать, что составление фармацевтического лекарственного средства в буфере гександиовой кислоты будет вызывать меньшее раздражение или иммунный ответ по сравнению, например, с буферами лимонной кислоты. В то же время разумно ожидать, что составление фармацевтического лекарственного средства в буфере, который имеет пониженное содержание или по существу не содержит лимонной кислоты или ее солей, будет вызывать меньшее раздражение или иммунный ответ по сравнению с, например, буферами лимонной кислоты. Настоящее изобретение впервые раскрывает данные удивительные наблюдения, которые, примененные соответственным образом, позволяют оказать воздействие, уменьшить, минимизировать и/или модулировать иммуногенность лекарственных средств, распознаваемых иммунной системой в композиции, не влияя на биодоступность.

Далее, является разумным ожидать, что при составлении биофармацевтического лекарственного средства в буфере, включающем в себя достаточно высокую концентрацию лимонной кислоты, желаемый иммунный ответ может быть значительно увеличен.

Способы и композиции настоящего изобретения могут изменяться, как известно специалистам в данной области, но, как правило, будут следовать методике, описанной далее. Во-первых, очищенное биофармацевтическое лекарственное средство, такое как антитело или белок, получают в желательной концентрации в растворителе, таком как вода, предпочтительно дополняют подходящим буфером, таким как NaCl, Твин-80 или другие буферные средства, хорошо известные в данной области техники, при значениях pH от 5 до 8, при которых биофармацевтическое лекарственное средство является стабильным. Фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением содержит биофармацевтическое лекарственное средство в количестве, которое является эффективным для достижения терапевтического эффекта.

На второй стадии указанное биофармацевтическое лекарственное средство растворяют в буфере, содержащем, по меньшей мере, гександиовую кислоту или, по меньшей мере, одну ее соль в подходящей концентрации, как описано в деталях ниже, чтобы обеспечить создание композиции или суспензии биофармацевтического лекарственного средства. При получении жидкой композиции в соответствии с настоящим изобретением, буферное вещество предпочтительно предоставляется в форме его свободной кислоты. Желательный pH раствора корректировали добавлением оснований, как, например, гидроксидов щелочных металлов, гидроксидов редкоземельных металлов или гидроксида аммония. С этой целью является предпочтительным использовать гидроксид натрия.

Обычно композиция для биофармацевтического лекарственного средства включает один или более буфер(ов), изотонизирующее вещество(вещества) и воду для инъекций в качестве растворителя. Дополнительно, к нему часто добавляются стабилизаторы, как например криопротекторы. Кроме того, могут быть добавлены одно или более веществ, образующих хелатные соединения с металлами и тенсид(тенсиды). Некоторые вещества могут иметь двойную роль, например, некоторые сахара или сахарные спирты могут служить в качестве криопротектора и изотонизирующего вещества.

Как будет понятно специалисту в данной области, чтобы получить композицию в подходящих количествах, могут быть добавлены одна или более других подходящих кислот. Особенно предпочтительными являются моно- или дикарбоновые кислоты, или их соли, где, по меньшей мере, одна выбрана из группы, состоящей из:

уксусной кислоты или ацетата

глутаминовой кислоты или глутамата

яблочной кислоты или малата

лимонной кислоты и/или цитрата

фосфорной кислоты и/или фосфата

винной кислоты или гидротартрата, и/или

янтарной кислоты или сукцината.

В соответствии с настоящим изобретением, специалисты в данной области техники поймут, что термин "подходящая кислота(ы)" относится к кислоте(ам), которые не являются иммуногенными в "подходящем количестве", т.е. при конечной концентрации полученной композиции. Таким образом, определенные кислота(кислоты), известные как распознаваемые иммунной системой, т.е. являющиеся иммуногенными и/или индуцирующими иммунный ответ субъекта/пациента, не рассматриваются как пригодные для получения композиция для снижения иммуногенности в соответствии с настоящим изобретением.

Дополнительные добавки, такие как стабилизаторы, поверхностно-активные вещества, изотонизирующие вещества, металло-ионные хелаторы и др. могут быть добавлены в композицию и/или суспензию, причем данные добавки являются подходящими для требуемого применения, хорошо известно специалисту в данной области техники. Как используется в настоящем документе, термин "стабилизатор" относится к веществу, которое помогает поддерживать структурную целостность биофармацевтического лекарственного средства, особенно во время замораживания и/или лиофилизации, и/или хранения. Такие вещества в контексте настоящего изобретения также называют "криопротектор" или "лиопротектор".

В качестве необязательной стадии в способе настоящего изобретения, полученная композиция и/или суспензия может быть лиофилизирована с помощью стандартных методик, которые хорошо известны квалифицированным специалистам. В предпочтительном варианте изобретения, указанная композиция находится в форме, выбранной из группы, состоящей из

а) водной формы

b) лиофилизированной формы и/или

с) суспензии.

В водной форме указанная композиция может быть готова к введению, а в лиофилизированной форме указанная композиция может быть переведена в жидкую форму перед введением, например, посредством добавления воды для инъекций, которая может содержать или не содержать консерванты, такие как бензиловый спирт, антиоксиданты, такие как витамин А, витамин Е, витамин C, ретинилпальмитат и селен, аминокислоты цистеин и метионин, лимонная кислота и цитрат натрия, синтетические консерванты, такие как парабены, метилпарабен и пропилпарабен.

Наконец, полученная композиция, суспензия и/или лиофилизированная композиция может быть обработана, например, посредством добавления консервантов для длительного хранения или залита в подходящую емкость для желательного введения. Следовательно, композиция, полученная посредством способа настоящего изобретения, является пригодной для парентерального введения терапевтического и/или диагностического лекарственного средства. Парентеральное введение может быть внутримышечным или подкожным, где подкожное применение является особенно предпочтительным.

В частности, композиция настоящего изобретения является желательной для пероральной доставки, за исключением пероральной доставки ротавирусов, а также непероральных путей доставки, таких как, но не ограничиваясь ими, парентеральное введение, местное введение, ингаляционное введение.

Таким образом, в предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции и/или способу, как отмечалось выше, и подробно описано ниже, где композиция находится в непероральной дозированной форме, т.е. не предназначена для перорального введения.

Предпочтительно, гександиовая кислота применяется только в качестве карбоновой кислоты или соли, или даже в качестве только основного буфера в композиции в соответствии с настоящим изобретением.

Особенно предпочтительно, композиция может по существу не содержать, по меньшей мере, одного дополнительного буферного соединения выбранного из группы, состоящей из:

уксусной кислоты или ацетата

глутаминовой кислоты или глутамата

яблочной кислоты или малата

фосфорной кислоты и/или фосфата

винной кислоты или гидротартрата и/или

янтарной кислоты или сукцината

или любого другого подходящего соединения, для которого известно индуцирование или увеличение иммуногенности после введения субъекту.

Соответственно предпочтительному варианту осуществления предоставлено, что способ или композиция настоящего изобретения приводят к снижению иммунных ответов, относящихся к ее введению. В предпочтительном варианте осуществления это может быть достигнуто, в частности, таким образом, что композиция имеет пониженное содержание или по существу не содержит лимонной кислоты или ее соли. Предпочтительно, вместо нее композиция содержит гександиовую кислоту.

Термин "пониженное содержание лимонной кислоты", используемый здесь, означает, что композиция предпочтительно не содержит более чем 0,01, 0,05, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,0, 1,2 или 1,3 мМ лимонной кислоты или ее соли.

Данный диапазон концентраций может также охватывать совокупные концентрации лимонной кислоты и ее соли, например, цитрата натрия. В случае, когда лимонная кислота предоставлена в качестве гидрата (например, моногидрата), соответствующие концентрации должны быть соответственно изменены.

Термин "по существу не содержит лимонной кислоты", используемый здесь, означает, что лимонная кислота или ее соли не добавляются в состав намеренно. Общее количество лимонной кислоты или ее соли как продукта непреднамеренного загрязнения поэтому ниже 0,05%, предпочтительно ниже 0,01%. Наиболее предпочтительной является композиция, в которой отсутствуют лимонная кислота или ее соли в количествах, которые могут быть обнаружены с помощью стандартных аналитических методов, используемых в фармацевтической технологии.

Является особенно предпочтительным, что гександиовая кислота присутствует в композиции в соответствии с настоящим изобретением в концентрации между ≥1 и ≤100 мМ, предпочтительно между ≥2 и ≤50 мМ, и даже более предпочтительно между ≥5 и ≤25 мМ, наиболее предпочтительно 23 мМ. Следует понимать, что каждое числовое значение в диапазоне от 1 мМ до 100 мМ может быть использовано в соответствии с настоящим изобретением и зависит от предполагаемого применения композиции и пациента, получающего лечение.

Кроме того, предпочтительно, чтобы в дополнение к гександиовой кислоте, фармацевтическая композиция могла также содержать фосфаты, предпочтительно фосфат натрия (в настоящем документе также называемый "NaP"). Термин "фосфат натрия" следует понимать как охватывающий дигидрофосфат натрия и гидрофосфат динатрия, и все вероятные их соли и/или гидраты.

Соответственно другому предпочтительному варианту осуществления предоставлено, что способ или композиция в соответствии с настоящим изобретением приводят к увеличению иммунных ответов, относящихся к ее введению. В предпочтительном варианте осуществления это может быть достигнуто, в частности, таким образом, что композиция содержит лимонную кислоту или ее соли.

Предпочтительно, это означает, что лимонная кислота или ее соли были намеренно добавлены в состав, хотя этот вариант также охватывает те композиции, где лимонная кислота присутствует без преднамеренного добавления.

Предпочтительно, чтобы композиция содержала бы больше, чем 1,30, 1,40, 1,50, 1,60, 1,70, 1,80, 1,90, 2,00, 2,10, 2,20, 2,30, 2,40, 2,50, 2,60, 2,70, 2,80, 2,90, 3,00, 3,10, 3,20, 3,30, 3,40, 3,50, 3,60, 3,70, 3,80, 3,90, 4,00, 4,10, 4,20, 4,30, 4,40, 4,50, 4,60, 4,70, 4,80, 4,90, 5,00, 5,10, 5,20, 5,30, 5,40, 5,50, 5,60, 5,70, 5,80, 5,90, 6,00, 6,10, 6,20, 6,30, 6,40, 6,50, 6,60, 6,70, 6,80, 6,90, 7,00, 7,10, 7,20, 7,30, 7,40, 7,50, 7,60, 7,70, 7,80, 7,90, 8,00, 8,10, 8,20, 8,30, 8,40, 8,50, 8,60, 8,70, 8,80, 8,90, 9,00, 9,10, 9,20, 9,30, 9,40, 9,50, 9,60, 9,70, 9,80, 9,90 или 10,00 мМ лимонной кислоты или ее соли.

Данный диапазон концентраций может также охватывать совокупные концентрации лимонной кислоты и ее соли, например, цитрата натрия. В случае, когда лимонная кислота предоставлена в качестве гидрата (например, моногидрата), соответствующие концентрации должны быть изменены соответственно.

Указанная водная форма фармацевтической композиции имеет рН, предпочтительно, между ≥3 и ≤9, предпочтительно между ≥4 и ≤8, более предпочтительно между ≥5 и ≤7.

В еще одном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения композиция дополнительно включает в себя, по меньшей мере, один стабилизатор, выбранный из группы, состоящей из аминокислоты, сахарного полиола, дисахарида и/или полисахарида.

Предпочтительно, указанный дисахарид представляет собой, по меньшей мере, одно вещество, выбранное из группы, состоящей из сахарозы, трегалозы, мальтозы и/или лактозы.

Также предпочтительно, указанный сахарный полиол представляет собой, по меньшей мере, одно вещество, выбранное из группы, включающей маннит и/или сорбит. Маннит является особенно предпочтительным среди этих сахарных полиолов. Предпочтительно, он используется в качестве единственного сахарного полиола или даже единственного стабилизатора в фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением.

Является особенно предпочтительным, что указанный стабилизатор присутствует в водной форме фармацевтической композиции в концентрации между ≥1 мМ и ≤300 мМ, предпочтительно между ≥2 мМ и ≤200 мМ, и более предпочтительно между ≥5 мМ и ≤150 мМ.

В еще одном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения, указанная композиция дополнительно включает в себя, по меньшей мере, одно вещество, выбранное из группы, состоящей из:

поверхностно-активного вещества

изотонизирующего вещества и/или

металло-ионного хелатора.

Указанное поверхностно-активное веществ изменяет смачиваемость компонентов и поддерживает их растворимость. Это особенно важно, поскольку биофармацевтические лекарственные средства часто составляются при высоких концентрациях (например, > 100 мг в 1-10 мл).

Подходящими поверхностно-активными веществами, являются, например, лецитин и другие неионные тенсиды, как полисорбаты (“Tween”) или полоксамеры. Особенно предпочтительными являются вещества полисорбат 80 (“Tween-80”) или полоксамер 188.

Указанное изотонизирующее вещество служит для удержания осмотического давления композиции в соответствии с настоящим изобретением при физиологически допустимом значении, например, осмолярности крови.

Изотонизирующее вещество представляет собой физиологически приемлемое соединение и конкретно не ограничивается. Типичные примеры изотонизирующего вещества представляют собой, например, неорганические соли, такие как хлорид натрия, хлорид калия или хлорид кальция и тому подобное. Они могут использоваться отдельно или в смеси друг с другом.

Указанный металло-ионный хелатор служит для образования комплекса тяжелых металлов, которые в противном случае могут инактивировать биофармацевтическое лекарственное средство, включенное в композицию в соответствии с настоящим изобретением. Предпочтительно указанный металло-ионный хелатор представляет собой ЭДТА и/или ЭГTA.

Хотя появляется все больше доказательств того, что высокие количества лимонной кислоты могут оказать влияние на иммуногенность при подкожном введении, причем иммуногенность, вероятно, индуцирует и/или увеличивает клиренс фармацевтического лекарственного средства, содержащегося в композиции, забуференной лимонной кислотой, является желательным избегать нежелательного клиренса фармацевтических лекарственных средств, которые должны присутствовать в активной форме в организме.

Как описано в Примере 2, а также на Фиг. 3 и в Таблице 4, применение композиции, забуференной адипиновой кислотой, содержащей адалимумаб без лимонной кислоты, проявляет на удивление низкий иммунный ответ при подкожном введении. В результате композиция, забуференная адипиновой кислотой, приводит к очень низкому уровню иммунного ответа и, таким образом, делает данную композицию превосходной для подкожных инъекций.

Таким образом, в еще одном предпочтительном варианте осуществления указанная композиция представляет собой композицию, подходящую для парентерального введения, предпочтительно для внутримышечного и/или подкожного введения. Является особенно предпочтительным, что композиция разработана для подкожного введения.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения, указанная композиция является подходящей для поддержания структурной целостности биофармацевтического лекарственного средства, заключенного в ней, с точки зрения агрегации, защитного потенциала и стабильности (например, термодинамической устойчивости).

В следующей таблице показаны композиции, содержащие химерные, гуманизированные или человеческие антитела (формата IgG), которые показывают превосходное агрегационное поведение под контролем буферов, содержащим фосфатную/цитратную систему, как, например, раскрытые в WO2012/089778, представленной правопреемником, содержание которой включено в настоящий документ посредством ссылки.

Соединение	Молекулярная масса	[мг/мл]	Пример концентрации (мМ)	Пример коцентрации (мг/мл)
Химерный, гуманизированный или человеческий IgG		5-100,00		50 мг/мл
NaCl	58,4	5,0-7,0	105,00	6,132
Маннит	182	10,0-14,0	66,00	12,012
Адипиновая кислота	146,14	1,5-4,0	23,00	3,36122
Лимонная кислота	192,124	0-9,6	1,30	0,2497612
Tween 80	1,310	0,5-1,5	0,80	1,048
NaOH(для регуляции pH)	q.s.
pH	5,20

Аналитические методы для измерения стабильности белка доступны в данной области техники и рассматриваются, например, в Peptide and Protein Drug Delivery, 247-301 (Vincent Lee ed., New York, N.Y., 1991) и Jones, 1993 Adv. Drug Delivery Rev. 10: 29-90. Стабильность может быть измерена при выбранной темпе