Ацил-гидразоновые и оксадиазоловые соединения, фармацевтические композиции, содержащие их, и их применение

Ацил-гидразоновые и оксадиазоловые соединения, фармацевтические композиции, содержащие их, и их применение

Иллюстрации

Показать все

Реферат

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Настоящее изобретение относится к ацил-гидразонам, полученным из 3,4,5-триметоксифенил-гидразида, для лечения заболеваний, связанных с клеточной пролиферацией (таких как лейкозы, опухоли, воспаление и другие пролиферативные заболевания). Более конкретно, настоящее изобретение относится к соединениям, обладающим ингибирующей активностью против тубулина, которые благодаря этому могут быть пригодны при лечении острого лимфобластного лейкоза (ALL). Настоящее изобретение дополнительно относится к получению новых ацил-гидразонов и оксадиазолов из 3,4,5-триметоксифенил-гидразида.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Рак представляет собой заболевание, характеризующееся пролиферацией и неконтролируемым распространением в организме патологических форм человеческих клеток. Неопластические клетки отличаются от нормальных клеток высокой инвазивной способностью, которой они обладают, снижением их функции, снижением дифференцировки и способностью к метастазированию по причине низкой адгезии между ними (Rang, H.P.; Dale, M.M.; Ritter, J.M; Moore, P.K. Farmacologia. 5 изд. Rio de Janeiro: Elsevier, 2004. 703 c.). В 2009 году количество новых случаев заболевания раком молочной железы, по оценкам, составило в Бразилии 49000, раком предстательной железы - 47000, раком легких - 27000, раком ободочной и прямой кишки - 25000, раком желудка - 23000 и раком шейки матки - 19000 в 2009 году (INCA, Instituto Nacional do Cáncer [Национальный институт онкологии]. Информация доступна на сайте: <http://www.inca.gov.br/estimativa/2006/index.asp?link=mapa.asp&ID=8> Доступ получен: 23 февраля 2011 г.), и он представляет собой вторую основную причину гибели в этой стране.

Лейкоз представляет собой один из нескольких типов рака и возникает за счет неопластической пролиферации лимфоидных или миелоидных гематопоэтических клеток в результате мутации одной стволовой клетки, потомство которой образует клон лейкозных клеток. Возникают многочисленные генетические изменения для злокачественного преобразования, в том числе неприемлемая экспрессия онкогенов и снижение функции генов-онкосупрессоров (Bain В.J. Diagnystico em leucemias. Rio de Janeiro: Elsevier, 2003, Cap. 1, 01-56), которые могут быть связаны с генетическими факторами или рисками (такими как курение, воздействие радиации или химических веществ, таких как бензол) (INCA, Instituto Nacional do Cancer [Национальный институт онкологии] - Leucemia - prеvеncao genŭtica, outros fatores de risco [Лейкоз - предупреждение, генетические и другие факторы риска], информация доступна на сайте: <http://www2inca.gov.br/wps/wcm/connect/tiposdecancer/site/home/leucemia/prevencao_genetica_outros_fatores_de_risco>. Доступ получен: 23 февраля 2011 г.; и IARC (Международное агентство онкологических исследований). World Cancer Report 2008. Информация доступна на сайте: <http://www.iarc.fr/en/publications/pdfs-online/wcr/2008/index.php> и <http://www.iarc.fr/en/publications/pdfs-online/wcr/2008/wcr_2008.pdf>. Доступ получен: 23 февраля 2011 г.). Лейкозы дополнительно подразделяют по быстроте прогрессирования и нарастания тяжести заболевания, и они могут быть острыми или хроническими. Острые лейкозы характеризуются нарушением созревания клеток, что приводит к дисбалансу между пролиферацией и созреванием; поскольку лейкозный клон клеток продолжает разрастаться, не достигая стадии созревании и гибели, это приводит к непрерывной экспансии лейкозного клона и превалированию незрелых клеток (INCA 2009b, Bain, В.J. Diagnystico em leucemias. Rio de Janeiro: Elsevier, 2003, Cap. 1, 01-56).

Острый лимфобластный лейкоз (ALL) обусловлен неконтролируемой пролиферацией незрелых лимфоидных клеток-предшественников в костном мозге, приводя к очень быстрому накоплению неопластических клеток Plasschaert, S.; Van Der Kolk, D.; De Bont, E.; Vellenga, E.; Kamps, W.; De Vries, E. Breast Cancer Resistance Protein (BCRP) in Acute Leukemia. Leukemia & Lymphoma, 2004, 45, 649-654). На его долю приходится 80% случаев острого лейкоза в детстве (Laks, D.; Longhi, F., Bernardes, W.M.; Ramos, G.P.C. J Pediatr, 2003, 79, 149-158) и 50% всех гематопоэтических злокачественных заболеваний (Downing, James R.; Shannon, Kevin M. Acute leukemia: A pediatric perspective. Cancer Cell, 2002, 2, 437-445). У взрослых ALL возникает относительно редко, насчитывая 2-3% гематопоэтических злокачественных заболеваний (Downing, James R.; Shannon, Kevin M. Acute leukemia: A pediatric perspective. Cancer Cell, 2002, 2, 437-445); однако в этом случае прогноз гораздо хуже, чем для детей, поскольку этот лейкоз поражает мультипотентные стволовые клетки, что приводит к гораздо более агрессивному лейкозу (Greaves, M.F. Stem cell origins of leukaemia and curability. British Journal of Cancer, 1993, 67, 413-423).

Выполнено достаточное количество исследований применения соединений из природных источников в качестве химиотерапии. Пример представляет собой антинеопластический паклитаксел (Taxol™), один из наиболее важных когда-либо открытых противоопухолевых природных продуктов, впервые описанный в 1971 г. (Wani, M.С.; Taylor, H.L.; Wall, M.Ε.; Coggon, P.; McPhail, A.T. Plant antitumor agents. VI. Isolation and structure of taxol, a novel antileukemic and antitumor agent from Taxus brevifolia. Journal of the American Chemical Society, 1971, 93, 2325-2327), и который был одобрен FDA для клинического применения лишь спустя долгое время (в 1992 г.). Другой пример представляет собой винкристин, алкалоид, используемый в терапии острого лейкоза и других типов опухолей, который действует таким же образом, что и паклитаксел, связываясь с тубулином, вмешиваясь в образование (полимеризацию) или реорганизацию (деполимеризацию) микротрубочек (Goodman е Gilman. As bases farmacolygicas da terapkutica, 10^е изд., под ред. Мс Graw Hill. 2006).

Наиболее широко распространенные химиотерапевтические агенты в современной терапии лейкоза включают даунорубицин, доксорубицин, дексаметазон, винкристин, метотрексат и меркаптопурин (Plasschaert, S.; Van Der Kolk, D.; De Bont, E.; Vellenga, E.; Kamps, W.; De Vries, E. Breast Cancer Resistance Protein (BCRP) in Acute Leukemia. Leukemia & Lymphoma, 2004, 45, 649-654). Эти лекарства обеспечивают терапевтическое преимущество, но и значительную токсичность для организма и нормальных клеток из-за их роли в инициации апоптоза и ингибировании клеточной пролиферации (Herr, I.; Debatin, К.М. Cellular stress response and apoptosis in cancer therapy. Blood 2001, 98, 2603-2614; и Leszczyniecka, M.; Roberts, T.; Dent, P.; Grant, S.; Fisher, P.B. Differentiation therapy of human cancer: basic science and clinical applications. Pharmacology & Therapeutics, 2001, 90, 105-156). Антинеопластические агенты также взаимодействуют с нормальными тканями, которые имеют быстро делящиеся клетки, что может вызывать множество нежелательных эффектов, таких как снижение выработки защитных клеток в организме, слабое заживление ран, алопеция, повреждение желудочно-кишечного эпителия, бесплодие и тератогенность (Rang, H.P.; Dale, M.M.; Ritter, J.M; Moore, P.K. Farmacologia. 5 изд. Rio de Janeiro: Elsevier, 2004. 703 с.).

Несмотря на недавние достижения в изучении рака, в 2008 году в Бразилии зарегистрировано 5686 смертей от лейкоза, а прогноз на 2010 год составил 9580 новых случаев этого заболевания (INCA, Instituto Nacional do Cancer [Национальный институт онкологии]. Информация доступна на сайте: <http://www.inca.gov.br/estimativa/2006/index.asp?link=mapa.asp&ID=8> Доступ получен: 23 февраля 2011 г.), что непрерывно стимулирует поиск новых лекарств для лечения лейкоза и других опухолей.

В недавно выполненном исследовании ученый Wang и его коллеги (Wang, Ζ.; Lu, Y.; Seibel, W.; Miller, D.D.; Li, W. Identifying Novel Molecular Structures for Advanced Melanoma by Ligand-Based Virtual Screening. Journal of Chemical Information and Modeling, 2009, 49, 1420-1427) исследовали новые противоопухолевые соединения на основе структуры соединения LY-1-100, которое обладает подтвержденным механизмом действия и аффинностью к микротрубочкам (колхицин-связывающий сайт), но низкой селективностью.

Структуры выбрали с помощью виртуального отбора на основе лигандов, получив 14 новых молекул с высокой структурной схожестью с исходным соединением (LY-1-100). Теоретические результаты, полученные исследователями, выявили, что триметоксилированное кольцо соединения LY-1-100 должно быть сохранено для обеспечения противоопухолевой активности, а триазольное кольцо, по-видимому, не является важным и может быть заменено структурой N-метилен-гидразина, что дает структуру ацил-гидразонов. Хотя результаты испытания этих соединений в клетках мышей B16F1 и А375 (in vitro) не показали улучшения эффективности и селективности от исходного соединения, эти результаты были очень многообещающими и указали некоторые основные структурные компоненты для анти-меланомной активности (Wang, Ζ.; Lu, Y.; Seibel, W.; Miller, D.D.; Li, W. Identifying Novel Molecular Structures for Advanced Melanoma by Ligand-Based Virtual Screening. Journal of Chemical Information and Modeling, 2009, 49, 1420-1427).

В этом отношении ацил-гидразоны представляют собой интересный класс соединений с противоопухолевой активностью. Поэтому настоящее изобретение относится к получению ацил-гидразонов, особенно полученных из 3,4,5-триметоксифенил-гидразида, для лечения заболеваний, связанных с клеточной пролиферацией (таких как лейкозы, опухоли, воспаление и другие пролиферативные заболевания).

В патентной заявке PI 0112674-1 (н-[5-[[[5-алкил-2-оксазолил]метил]тио]-2-тиазолил]карбоксамидные ингибиторы циклин-зависимых киназ) описаны соединения и их энантиоморфы, диастереомеры, сольваты и фармацевтически приемлемые соли в качестве ингибиторов протеинкиназ, приходных для лечения пролиферативных заболеваний, таких как рак, воспаление и артрит. Синтезированные соединения также могут быть пригодны для лечения болезни Альцгеймера, алопеции в результате химиотерапии и сердечно-сосудистых заболеваний. Соединения, описанные в заявке PI 0112674-1, представляют собой более сложные структуры, чем соединения, представленные в рамках настоящего изобретения.

Соединения упоминаемой публикации патентной заявки № U.S. 20040138272 (производные 1,4-замещенного циклогексана) могут быть применимы для предупреждения клеточной пролиферации при злокачественных заболеваниях за счет ингибирования киназ Rho, применимы для восстановления центральной и периферической нервной системы за счет инициации роста и регенерации аксонов. Механизм действия соединений в публикации U.S. 20040138272 отличается от механизма, предложенного для структур настоящего изобретения.

Ингибиторы циклинзависимых киназ (cdk), пригодные для модулирования прогрессирования клеточного цикла, предложены в патентной заявке PI 0418095-0 (ингибитор циклинзависимых киназ, композиции и способы, относящиеся к ним). Такие соединения применимы для лечения пациентов с расстройствами, связанными с избыточной клеточной пролиферацией. Соединения, описанные в PI 0418095-0, представляют собой ацил-гидразоны, отличные от соединений, предложенных в рамках настоящего изобретения, с более сложным способом синтеза.

В патентной заявке PI 0508364-8 (производные 4-бензимидазол-2-ил-пиридазин-3-она) описаны соединения и их физиологически переносимые соли, которые обладают активностью в качестве ингибиторов киназ, в частности, киназы CDK2 (циклинзависимой киназы 2). Соединения PI 0508364-8 отличаются от соединений, предложенных в рамках настоящего изобретения, с более сложным синтезом.

В публикации заявки на патент США № U.S. 20070066610 (ацил-гидразоны как модуляторы киназы) описаны ацил-гидразоны как ингибиторы тирозинкиназ, включая c-Met, рецептор тирозинкиназы, который регулирует клеточную пролиферацию, морфогенез и подвижность. Ацил-гидразоны, описанные в U.S. 20070066610, отличаются от соединений, описанных в рамках настоящего изобретения, с более сложным синтезом. Кроме того, цель действия описанных соединений отличается от предложенных в настоящем документе.

Опубликованная заявка на патент США 20080194562 (производные пиразола для ингибирования Cdk и Gsk) относится к синтезу пиразольных соединений, которые ингибируют или модулируют активность циклин-зависимых киназ (CDK) и киназной гликоген-синтазы (GSK), а также к их применению при лечении или профилактике заболеваний или состояний, опосредованных киназой. Описаны также фармацевтические составы, содержащие соединения и химические промежуточные вещества. Соединения документа U.S. 20080194562 отличаются от предложенных в рамках настоящего изобретения.

Ацил-гидразоны также описаны в литературе по их выраженному инсектицидному действию и способности стимулировать рост растений (Robinson, В. Fischer indole synthesis. Chem. Rev., 1963, 4, 373-401); по применению при лечении туберкулеза (Vigorita, M.G.; Ottana, R.; Zappala, C; Maccari, R.; Pizzimenti, F.C; Gabbrielli, G. Halogenated isoniazid derivatives as possible antimycobacterial and anti-HIV agents - III. Farmaco, 1994, 49, 775-781); a также в качестве бактериологических и бактериостатических агентов (Samus, N.M.; Tsapkov, V.I.; Kuracheva, S.Α.; Burdenko, T.A. Synthesis and antimicrobial activity of coordination compounds of 3d-elements with some hydrazones derived by using 5-nitro-2-furaldehyde. Khimiko-Farmatsevticheskii Zhurnal, 1994, 28, 41-44).

Учитывая все вышесказанное, было выполнено исследование ацил-гидразонов и их оксадиазоловых производных, полученных с помощью неклассической стратегии биоизостеризма замыкания кольца, с целью разработки новых химиотерапевтических агентов. Оксадиазолы представляют собой важный класс гетероциклических соединений с широким рядом биологической активности, такой как противовирусная, антинеопластическая, фунгицидная активность и ингибирование тирозиназы и катепсина K (Kumar, D.; Sundaree, S.; Johnson, E.O.; Shah, K. An efficient synthesis and biological study of novel indolyl-1,3,4-oxadiazoles as potent anticancer agents. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2009, 19, 4492-4494). Кроме того, они представляют собой известные биоизостеры амидов и сложных эфиров, которые могут значительно способствовать увеличению фармакологической активности, участвуя в водородных связях как рецепторы (Guimaraes, С.R.W.; Boger, D.L; Jorgensen, W.L. Elucidation of Fatty Acid Amide Hydrolase Inhibition by Potent α-Ketoheterocycle Derivatives from Monte Carlo Simulations. Journal of the American Chemical Society, 2005, 127, 17377-17384).

Таким образом, определенные ацил-гидразоны и их аналоги, полученные по способам настоящего изобретения, подробно описанным ниже, а также их применение при лечении лейкоза, опухолей и других пролиферативных заболеваний, таких как воспаление, представляют собой значительный экономический и социальный интерес.

ЦЕЛИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Цель настоящего изобретения заключается в получении синтетических соединений, производных 3,4,5-триметоксифенил-гидразида (гидразонов и оксадиазолов), и всех аналогов, и тому подобных, с помощью простого синтетического способа, а также в применении этих соединений для лечения заболеваний, связанных с клеточной пролиферацией (таких как лейкозы, в частности, острый лимфобластный лейкоз - ALL, опухоли, воспаление и другие пролиферативные заболевания). В настоящем изобретении описаны также способы определения биологической активности этих соединений.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к классу ацил-гидразонов, в частности тех, которые получены из 3,4,5-триметоксифенил-гидразида, а также к аналогичным соединениям оксадиазола и к другим похожим и родственным соединениям, и к фармацевтическому применению всех этих соединений при лечении различных заболеваний, связанных с клеточной пролиферацией, таких как лейкоз, включая острый лимфобластный лейкоз (ALL), опухоли и воспаление. В настоящем изобретении описаны также способы, используемые для определения биологической активности всех этих соединений.

Были получены ацил-гидразоны с такой же активностью, что и соединения, используемые в качестве стандарта в указанных экспериментах (колхицин). Более высокая селективность соединений, описанных в настоящем документе, представляет собой важную характеристику, связанную с меньшим количеством побочных эффектов, чем у лекарств, используемых в настоящее время в клинической практике. Синтезированные ацил-гидразоны, более конкретно соединения 02 и 07, демонстрируют значительную противолейкозную активность, что свидетельствует о потенциальном применении 02 и 07 в качестве прототипов лекарств или лекарств для лечения лейкозов, в частности острого лимфобластного лейкоза (ALL), опухолей и других пролиферативных заболеваний, таких как воспаление.

Определение механизма действия большинства активных соединений было выполнено с помощью ДНК-микрочипов и последующих испытаний, указанных для чипа, в дополнение к исследованиям селективности в лимфоцитах здорового человека.

ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

Фигура 1 иллюстрирует (А) обзор насыщения генного набора, обозначенного как «REACTOME POST CHAPERONIN TUBULIN FOLDING PATHWAY», показывающий насыщение в контрольных образцах HL-60 по сравнению с образцами, обработанными соединением 07 (р=0,002, FDR q-значение = 0,168), и (В) значения экспрессии 16 генов, которые представляют собой часть набора генов в (А), представленные синими квадратами (более низкая экспрессия) и красными квадратами (более высокая экспрессия).

Фигура 2 иллюстрирует, что Соединение 07 вызывает остановку клеточного цикла в клетках G2/M. Клетки Jurkat, обработанных в течение 18 часов 125 нМ раствором соединения 07 или ДМСО, подвергали анализу клеточного цикла после окрашивания йодидом пропидия и анализу проточной цитометрии.

Фигура 3 иллюстрирует результаты вестерн-блоттинга для различных белковых экстрактов, регулирующих клеточный цикл, полученных из клеток Jurkat, обработанных 125 нМ раствором соединения 07 (F8) или носителем (ДМСО).

Фигура 4 иллюстрирует, что соединение 07 представляет собой мощный инициатор апоптоза клеток Jurkat. В целом, эти результаты позволяют предположить, что соединение 07 ускоряет остановку клеточного цикла и апоптоз, в основном за счет Chk2 и Rb. Клетки Jurkat, обработанные в течение 18 часов 125 нМ раствором соединения 07 или ДМСО, дважды окрашивали аннексином V/йодидом пропидия и анализировали проточной цитометрией.

Фигура 5 иллюстрирует влияние соединения 07 на человеческие лимфоциты (WBC) и лейкозные клетки Jurkat и HEK через 48 часов. Пролиферацию нормальных лимфоцитов стимулировали фитогемагглютинином. Показан процент выживших клеток, обработанных соединением 07, по отношению к вышившим клеткам, обработанным носителем (ДМСО).

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение включает получение и механизм действия синтетических ацил-гидразонов и их аналогов, а также родственных соединений, которые могут быть применимы при лечении лейкозов, в частности острого лимфобластного лейкоза (ALL), опухолей и других пролиферативных расстройств, таких как воспаление.

В соответствии с одним из аспектов настоящего изобретения описана структура соединения (I):

где кольцо В представляет собой:

Следующая группа соединений по настоящему изобретению включает соединения, имеющие структуру II:

где кольцо В представляет собой:

Дополнительно описаны также синтетические аналоги оксадиазола, в соответствии со структурой III:

где Кольцо В представляет собой:

Новые ацил-гидразоны настоящего изобретения были получены по реакции конденсации между 3,4,5-триметоксифенил-гидразидом и различными альдегидами, с использованием этанола в качестве растворителя при дефлегмации, в соответствии с реакцией:

где Кольцо В представляет собой:

В Таблице 1 показаны выходы, полученные при синтезе, а также экспериментальные температуры плавления новых 3,4,5-триметоксифенил-гидразонов.

Структура соединения 02 была ранее опубликована в качестве промежуточного продукта реакции при получении оксадиазола (Mazzone, G.; Bonina, F.; Formica, F. Some aroylhydrazones of halobenzaldehydes and halo-substituted 2,5-diaryl-1,3,4-oxadiazoles. Farmaco, Edizione Scientifica, 1978, 33(12), 963-71), а соединение 07 ранее исследовали в качестве ингибитора МАО (моноамин-оксидазы) (Mazzone, G.; Arrigo Reina, R. 3,4,5-Trimethoxybenzoyl hydrazides and their anti-MAO [monoamine oxidase] activity. Bollettino delle Sedute della Accademia Gioenia di Scienze Naturali in Catania, 1971, 70(8), 689-702). Исследовательской группой авторов настоящего изобретения ранее была также опубликована химическая характеристика обоих соединений (02 и 07) в исследовании, в котором была выполнена оценка активности этих и других соединений в качестве ингибиторов крузаина из Trypanosoma cruzi, однако соединения 02 и 07 не демонстрируют ингибирующую активность в отношении этого белка (Borchhardt, Deise M.; Mascarello, Alessandra; Chiaradia, Louise Domeneghini; Nunes, Ricardo J.; Oliva, Glaucius; Yunes, Rosendo Α.; Andricopulo, Adriano D. Biochemical evaluation of a series of synthetic chalcone and hydrazide derivatives as novel inhibitors of cruzain from Trypanosoma cruzi. Journal of the Brazilian Chemical Society, 2010, 27(1), 142-150). Однако применение соединений 02 и 07 для лечения лейкоза ранее не было описано в данной области техники, и оно входит в рамки настоящего изобретения.

Дополнительные ацил-гидразоны (полученные для содействия обсуждению биологических испытаний) были синтезированы по реакции между гидразином и различными фенил-альдегидами, по такому же способу, как описан выше для получения гидразидов, в соответствии со следующей реакцией:

Были также получены новые синтетически оксадиазоловые аналоги 3,4,5-триметоксифенил-гидразонов, по их реакции с уксусным ангидридом, в соответствии со следующей реакцией:

В Таблице 2 показаны выходы, полученные при синтезе, а также экспериментальные температуры плавления оксадиазолов.

В настоящем изобретении описано также определение механизма действия синтезированных ацил-гидразонов и их аналогов, а также похожих соединений, содержащих оксадиазол. Настоящее изобретение относится также к применению всех таких соединений в качестве прототипа лекарств или лекарств для лечения лейкозов, в частности острого лимфобластного лейкоза (ALL), опухолей и других заболеваний, связанных с клеточной пролиферацией, таких как воспаление.

Ацил-гидразоны, описанные в настоящем документе, селективно действуют на лейкозные клетки с активностью в наномолярном диапазоне, по сравнению с их активностью в лимфоцитах здорового человека, как будет описано ниже в форме примера. В настоящем документ показана значимость биологических результатов, новых для исследуемых соединений.

В другом варианте реализации настоящего изобретения представлены фармацевтические составы, содержащие соединения, описанные выше, в комбинации со вспомогательными веществами, носителями и фармацевтически приемлемыми адъювантами.

При использовании в настоящем документе, применение термина «фармацевтически приемлемый» означает нетоксичное, инертное твердое, жидкое, полутвердое вспомогательное вещество, разбавитель, вспомогательную композицию любого типа или просто стерильную водную среду, такую как солевой раствор. Некоторые примеры материалов, которые могут служить в качестве фармацевтически приемлемых носителей, представляют собой сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза, крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал, целлюлоза и ее производные, такие как натрия карбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы, циклодекстрин, масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, сафлоровое масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло; гликоли, такие как пропиленгликоль, многоатомные спирты, такие как глицерин, сорбит, маннит и полиэтилен; сложные эфиры, такие как этиллаурат, этилолеат; агар; буферные агенты, такие как гидроксид алюминия и гидроксид магния; альгиновая кислота; апирогенная вода; изотонический солевой раствор, раствор Рингера; этиловый спирт и фосфатные буферные растворы, а также другие нетоксичные совместимые вещества, используемые в фармацевтических составах.

В частности, фармацевтические или ветеринарные составы, содержащие соединения настоящего изобретения, могут быть предназначены для введения любым типом введения, особенно парентеральным введением.

В частности, композиции настоящего изобретения могут содержать любой тип вспомогательного вещества, используемого в производстве лекарств в любой из представленных выше фармацевтических форм, такой как абсорбенты, разбавители, связующие вещества, средства для улучшения распадаемости таблеток, смазывающие вещества, глиданты, пластификаторы, агенты для покрытий, агенты, образующие матрицу для контролируемого высвобождения, растворители и со-растворители, увлажняющие агенты, эмульгаторы, поверхностно-активные вещества, загустители, агенты тоничности, смачивающие вещества, отмучивающие агенты, агенты для вытеснения воздуха, подщелачивающие или подкисляющие агенты, консерванты, антиоксиданты, бактерициды, бактериостаты, хелатирующие агенты, красители и подсластители.

Абсорбенты, пригодные для композиций настоящего изобретения, могут представлять собой любое вещество, добавляемое для абсорбирования воды, присутствующей в экстрактах, или для осаждения некоторых летучих соединений, таких как эссенции. Не ограничивающие примеры таких вспомогательных веществ представляют собой фосфат кальция, каолин, карбонат магния, бентонит и тальк.

Композиции настоящего изобретения могут содержать в качестве растворителя любой инертный материал, добавляемый к рецептуре для обеспечения возможности получения таблеток или наполненных капсул с соответствующим объемом и для обеспечения свойств текучести и прессуемости, необходимых для производства, например, но не ограничиваясь этим, лактозу, трехосновной фосфат кальция, крахмал, маннит, сульфат кальция, микрокристаллическую целлюлозу (Microcel, Avicel), двухосновной фосфат кальция (Encompress, Ditab), оксид магния, карбонат магния, тальк, каолин, карбонат кальция, декстрозу, фруктозу, лактозу, аспартам, целлюлозу, мальтозу, маннит, гуаровую камедь, сорбит, крахмал и сахарозу.

Подходящие связывающие вещества для композиций настоящего изобретения могут представлять собой агенты, используемые для ускорения адгезии частиц при гранулировании и прессовании твердых лекарственных форм, и могут также использоваться в композициях настоящего изобретения, например, карбопол, повидон, ксантановая камедь, гуммиарабик, альгиновая кислота, прессуемый сахар, КМЦ-Na, этилцеллюлоза, желатин, метилцеллюлоза, повидон (ПВП), крахмал, прежелатинизированный крахмал и жидкая глюкоза в растворе, дисперсии или порошке.

Дезагреганты или средства для улучшения распадаемости таблеток, пригодные для композиций настоящего изобретения, могут представлять собой любой компонент, используемый для ускорения распадаемости и/или растворения фармацевтической формы в биологических жидкостях, например, альгиновую кислоту, крахмал, альгинат натрия, КМЦ-Na, микрокристаллическую целлюлозу, кроскармеллозу натрия (Ac-Di-sol), натрия крахмалгликолят (Explotab) и кросповидон (Kollidon CL).

Смазывающие вещества, пригодные для композиций настоящего изобретения могут представлять собой, например, стеарат магния, стеарат кальция, стеариновую кислоту, тальк и гидрогенированное растительное масло (например, Lubritab).

Глиданты, пригодные для композиций настоящего изобретения, могут представлять собой, например, коллоидный диоксид кремния (Aerosil 200) и тальк.

Пластификаторы, пригодные для композиций настоящего изобретения, могут быть использованы с полимерами для модификации их температуры фазового перехода и для облегчения коалесценции образованных пленок на гранулах, таблетках или пеллетах. Не ограничивающие примеры таких агентов представляют собой глицерин, триэтилцитрат, дибутилфталат, силикон и ППГ.

Агенты для покрытий, используемые для покрытия композиций настоящего изобретения в форме таблеток, гранул, капсул или пеллет, могут представлять собой, например, ацетат-фталат целлюлозы, этилцеллюлозу, геллановую камедь, мальтодекстрин, метакрилаты, метилцеллюлозу, микрокристаллическую целлюлозу, шеллак, каррагенановую камедь, воски, шеллаки, желатин, производные целлюлозы (метил- или этилцеллюлозу, ацетат-фталат целлюлозы, гидроксипропилметилцеллюлозу, ацетат целлюлозы), сополимеры акриловых и метакриловых эфиров (Eudragit типа L100, RS 30D, RS РМ, S100, среди прочих), поливиниловый спирт (ПВС) и поливинилацетат.

Агенты для образования матрицы для контролируемого высвобождения, которые могут быть использованы в композициях настоящего изобретения для получения пролонгированного и/или контролируемого высвобождения активного вещества, могут представлять собой ГПМЦ, КМЦ-Na, ксантановую камедь, Carbopol, различные типы Eudragit, агар-агар, полиоксиэтиленовые производные (ПОЭ), циклодекстриновые наносферы и наночастицы любой природы.

В композициях настоящего изобретения также могут быть использованы растворители и со-растворители, такие как этанол, кукурузное масло, хлопковое масло, глицерин, изопропиловый спирт, минеральное масло, олеиновая кислота, арахисовое масло, очищенная вода, вода для инъекций, среди прочих.

Увлажняющие агенты, пригодные для композиций настоящего изобретения, могут представлять собой любое вещество, добавляемое для снижения поверхностного натяжения на поверхности раздела жидкости/твердого вещества, например, лаурилсульфат натрия (SLS), докузат натрия и полисорбаты 20, 60, 80 (Tween 20, 60, 80).

Эмульгирующие агенты, пригодные для композиций настоящего изобретения, могут представлять собой, например, глицерил-моностеарат, цетиловый спирт и желатин, а также вспомогательные вещества, такие как КМЦ-Na, МЦ, альгинат и пектин.

Для композиций настоящего изобретения подходят также поверхностно-активные вещества, такие как, например, хлорид бензалкония, ноноксинол 10, октоксинол 9, полисорбат 80 и лаурилсульфат натрия.

Загустители, пригодные для композиций настоящего изобретения, могут представлять собой любое вещество, используемое для увеличения густоты мазей, например, цетиловый спирт, белый воск, желтый воск, стеариловый спирт, парафин, микрокристаллическая целлюлоза и воск цетиловых эфиров.

Агенты тоничности, пригодные для композиций настоящего изобретения, могут представлять собой любое вещество, используемое для получения растворов, имеющих такие же осмотические характеристики, как и биологические жидкости, для их введения окулярным, назальным, парантеральным путем, такие как NaCl (0,9%), маннит (5,07%) и декстроза (5,51%).

Увлажнители, пригодные для композиций настоящего изобретения, могут представлять собой глицерин, пропиленгликоль и сорбит.

Отмучивающие агенты, пригодные для композиций настоящего изобретения, могут представлять собой любую жидкость, используемую в качестве агента для облегчения процесса измельчения частиц лекарства при производстве эмульсий, масляных основ, среди прочего, например, минеральное масло (жидкий петролатум), глицерин, технологический пропиленгликоль, ПЭГ 400, хлопковое масло, касторовое масло и полисорбат 80 (Tween® 80).

Агенты для вытеснения воздуха, пригодные для композиций настоящего изобретения, могут быть использованы для вытеснения воздуха из герметично закрытых емкостей или из жидких композиций для увеличения их стабильности, например, азот (N₂) и диоксид углерода (CO₂).

Подщелачивающие или подкисляющие агенты, такие как лимонная кислота, аммиак, уксусная кислота, карбонат аммония, фумаровая кислота, диэтаноламин, хлороводородная кислота (HCl), моноэтаноламин, винная кислота, гидроксид калия (КОН), борная кислота, гидроксид натрия (NaOH), бикарбонат натрия, борат натрия и триэтаноламин, - также пригодны для композиций настоящего изобретения.

Консерванты, которые могут быть использованы в композициях настоящего изобретения, представляют собой, например, противогрибковые агенты, такие как бензойная кислота, бензоат натрия, бутилпарабен натрия, метилпарабен (Nipagin), пропилпарабен (Nipasol), этилпарабен, пропионат натрия и антибактериальные средства, такие как хлорид бензалкония, хлорид бензетония, бензиловый спирт, цетилпиридиний, хлорбутанол и хлорид фенола.

Антиоксиданты, пригодные для композиций настоящего изобретения, могут быть выбраны из группы, включающей бутилированный гидроксианизол (БГА), бутилированный гидрокситолуол (БГТ), β-токоферол, аскорбиновую кислоту, аскорбил-пальмитат, метабисульфит натрия, этилендиаминтетрауксусную кислоту (ЭДТК), лимонную кислоту, цистеин, глутатион, витамин С, метабисульфит натрия, цистеин и тиосульфат натрия.

Композиции настоящего изобретения могут дополнительно содержать в качестве буферных агентов цитратный буфер, фосфатный буфер и боратный буфер. В качестве красителей, вкусовых добавок и ароматизаторов могут быть использованы, например, ваниль, ментол, коричное масло, анисовое масло и какао. Подсластители могут включать, например, аспартам, декстрозу (глюкозу), маннит, сорбит, сахарин, цикламат натрия, сахар, ацесульфам калия, стевиозид и сукралозу.

Композиции настоящего изобретения могут дополнительно содержать вспомогательные вещества, такие как бактерициды, бактериостаты, антиоксиданты, консерванты, буферы, стабилизаторы, регуляторы pH, регуляторы осмолярности, противопенные агенты и поверхностно-активные вещества, а также остатки агентов инактивации или антигенов фракционирования, компонентов питательной среды и растворителей, обычно используемых в производстве лекарственных средств. Примеры этих типов компонентов представлены в книге «The Handbook of Pharmaceutical Excipients» (RAYMOND С. Rowe, Publisher, The Pharmaceutical Press). Возможны различные способы введения композиций, описанных в настоящем документе. Конкретный выбранный способ зависит от конкретного выбранного активного ингредиента, дозы, необходимой для терапевтической эффективности, и пациента, которому вводят указанную композицию.

В другом варианте реализации настоящего изобретения описано применение соединений и композиций, описанных в настоящем документе, для лечения заболеваний, связанных с клеточной пролиферацией, таких как острый лимфобластный лейкоз (ALL), опухоли и воспаление.

В другом варианте реализации настоящего изобретения представлены способы лечения заболеваний, связанных с клеточной пролиферацией, таких как острый лимфобластный лейкоз (ALL), опухоли и воспаление, с помощью соединений и композиций, описанных в настоящем документе, для лечения заболеваний, связанных с клеточной пролиферацией, таких как острый лимфобластный лейкоз (ALL), опухоли и воспаление.

ПРИМЕРЫ

Далее настоящее изобретение будет описано с помощью иллюстративных примеров.

Пример 1. Общий способ получения 3,4,5-триметоксифенил-гидразонов 01-29

Для синтеза 3,4,5-триметоксифенил-гидразонов 01-29 использовали методику, описанную ученым Troeberg и коллегами (Troeberg, L; Chen, X.; Flaherty, T.M.; Morty, R.Ε.; Cheng, M.; Hua, H.; Springer, С; McKerrow, J.H.; Kenyon, G.L.; Lonsdale-Eccles, J.D.; Coetzer, T.H.T.; Cohen, F.E. Chalcone, acyl hydrazide, and related amides kill cultured Trypanosoma brucei brucei. Molecular Medicine, 2000, 6, 660-669). В 100 мл / 1-горлую реакционную колбу поместили 3,4,5-триметоксифенил-гидразид (2 ммоль), полученный так, как описано в Примере 2, в органическом растворителе: ацетоне, этилацетате, этиловом эфире, этаноле, метаноле (20 мл) и соответствующий альдегид (2 ммоль). Смесь нагревали с дефлегматором в течение от 1 до 10 часов. Затем раствор отфильтровали, а твердое вещество перекристаллизовали в органическом растворителе.

Пример 2. Общий способ получения 3,4,5-триметоксифенил-гидразида, используемого для получения 3,4,5-триметоксифенил-гидразонов 01-29

Для синтеза 3,4,5-триметоксифенил-гидразида, используемого для получения ацил-гидразонов 01-29, использовали уже описанную методику (Chida, A.S.; Vani, P.V.S.N.; Chandrasekharam, M.; Srinivasan, R.; Singh, Α.Κ. Synthesis of 2,3-dimethoxy-5-methyl-1,4-benzoquinone: a key fragment in coenzyme-Q series. Synthetic communications, 31, 657-660, 2001), которую выполнили за две стадии:

Получение сложного эфира: В 1000 мл / 1-горлую реакционную колбу поместили галловую кислоту (50 г, 0,294 моль) с диметилсульфатом (178,1 г, 1,413 моль), безводным карбонатом калия (175,5 г, 1,293 моль) и TBAI (тетрабутиламмония йодид) (1 г) в органическом растворителе, которым может быть этанол, этиловый эфир, этилацетат, ацетон, петролейный эфир (375 мл) и нагревали с дефлегматором в течение от 1 до 12 часов. Полученное твердое вещество отфильтровали и промыли тем же органическим растворителем (3×50 мл). Сложный эфир получили в форме аморфного твердого вещества кремового цвета с выходом 78%; т.пл.: 84°C (лит. т.пл. 82-83°C). ЯМР ¹Н (CDCl₃): 1.60 (s, 3Н, СН₃), 3.92 (s, 9Н, ОСН₃), 7.33 (s, 2Н, Ar).

Получение гидразида: В 1000 мл / 1-горлую реакционную колбу поместили сложный эфир, полученный на первой стадии (48 г, 0,212 моль) с 99% раствором гидразин-гидрата (N₂H₄⋅H₂O) (77,6 г, 1,54 моль) и органическим растворителем, которым может быть этанол, этилацетат, дихлорметан, ацетон, метанол (200 мл). Смесь нагревали с дефлегматором в течение от 1 до 5 часов и выдерживали в течение ночи только при механическом перемешивании при температуре от 0 до 50°C. Полученное твердое вещество отфильтрова